UNIVERSIDAD DE CUENCA

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7

BIOQUIMICA- PRACTICADOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS TOTALES, COLESTEROL,

TRIGLICÉRIDOS Y LIPOPROTEÍNAS

Doménica OrtegaChristian Ochoa

OBJETIVOS

Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino en el organismo.

Identificar lipoproteínas beneficiosas y perjudiciales para el organismo.

Conocer las alteraciones que se presentan en el metabolismo de los lípidos.

Aprender sobre la aterosclerosis, y las dislipidemias.

LOS LÍPIDOSBiomoléculas

Orgánicas

CHO

Hidrófobos

LIPIDOS TRIGLICÉRIDOS

-COLESTEROL-COLESTERIL

-ÉSTERES-FOSFOLÍPIDOS

-ÁCIDOS GRASOS NO

ESTERIFICDOS.

90%

10%

DIGESTIÓN Y ABSORCIÓN DE

LÍPIDOS

Su digestión empieza en el

estómago:

- Lipasa lingual

- Lipasa gástrica

20-30% de triglicéridos (TAG) a

monoglicéridos y ácidos

grasos.

Intestino delgado

- Ácidos biliares (emulsión)

- Lipasa pancreática

Absorbidos por enterocitos (micelas)

Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones

99% lípidos

1% proteínas

AG de cadena corta viajan en plasma unidos a albúmina

Lipoproteinlipasa (LPL) metaboliza quilomicrones hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: - lípidos tisulares - se oxidan como combustible

Los remanentes de quilomicrones van a ser reciclados en el hígado, para formar las VLDL.

LIPOPROTEÍNAS

En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG

desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde

son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales

regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa

hepática las transforma en LDL.

Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más

tiempo en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su

potencial aterogénico).

Las HDL transportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la vía biliar.

Colesterol

Es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados.

- No se puede metabolizar por lo que se elimina a través de la bilis

- 98% se reabsorbe en íleon terminal- 2% se excreta en las heces

DOSIFICACIÓN DE

TRIGLICÉRIDOS

REACTIVOS

• 1 muestra de suero (desconocido)

• Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo)

MATERIALES• 3 tubos de ensayo• 1 gradilla• 1 pinza de madera• 3 cubetas para

espectrofotómetro• 1 pipeta

automática de 10 ul• 2 puntas blancas• 1 pipeta de 1 ml• 1 pera de caucho

EQUIPOS

• Espectrofotómetro

• Termostato

DOSIFICACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS

TRIGLICÉRIDOS

LPL GLICEROL

AC. GRASOS

GLICEROL ATPGlicerol Kinasa ADP

GLICEROL 1-P

GLICEROL 1-P

O2

GPOH2O2

DIHIDROXIACETONAFOSFATO

2 H2O2 4-AFPOD QUINONIMINA

ROJA

1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos

A= Blanco B=Estándar C= Desconocido

2. Tomar 10 ul de estándar y colocar en el tubo B.

3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de desconocido y colocar en el tubo C.

4. Colocar 1 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)

PROCEDIMIENTO

5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 5 min.

7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.

6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas.

INTERPRETACIÓN

Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres:

0,310 Absorbancia (Conocido).

0,243 Absorbancia (Desconocido).

200 mg/dl Constante.

TENEMOS:

200 mg/dl 0,310

X 0,243

0,243×200𝑚𝑔𝑑𝑙

0,310=156,77𝑚𝑔 /𝑑𝑙

CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl

VALORES NORMALES

• <1,5 g/l • 44 – 158 mg/dl• 0,50-1,67 mmol/l

Deseable

• 1,55 – 1,99 g/lModerada mente elevado

• 2,0 – 4,99 g/lElevado

• >5,0 g/lMuy elevado

DOSIFICACIÓN DE

COLESTEROL

REACTIVOS

• 1 muestra de suero (desconocido)

• Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo)

MATERIALES• 3 tubos de ensayo• 1 gradilla• 1 pinza de madera• 3 cubetas para

espectrofotómetro• 1 pipeta

automática de 20 ul• 2 puntas amarillas• 1 pipeta de 2 ml• 1 pera de caucho

EQUIPOS

• Espectrofotómetro

• Termostato

DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL

Esteres de colesterol

LipasaColesterol

AC. GRASOS

Colesterol O2

CHOD

H2O2Colesten

3-ona

Fenol4-AF

PODQuinona

ColoreadaH2O2H2O

1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos

A= Blanco B=Estándar C= Desconocido

2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en el tubo B.

3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de desconocido y colocar en el tubo C.

4. Colocar 2 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)

PROCEDIMIENTO

5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 15 min.

7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.

6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas.

INTERPRETACIÓN

Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres:

VALORES NORMALES

• <2,0 g/l • 44 – 158 mg/dl• 0,50-1,67 mmol/l

Deseable

• 2,0 – 2,39 g/lModerada mente alto

• >2,4 g/lElevado

DISLIPIDEMIATIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO

Hipercolesterolemia familiar

Defecto en la codificación de los receptores para las LDL

Hipercolesterolemia o hiperlipemia mixta

Hipercolesterolemia familiar combinada

Defecto en la secreción hepática de las VLDL

Perfil cambiante (hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y mixto)

Disbetalipoproteinemia familiar

Alteración de la ApoE que impide la metabolización de VLDL y quilomicrones

Hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia

Hipercolesterolemia poligénica

Interacciones de numerosos genes – ambiente (p.ej: alimentación)

Colesterol moderadamente elevado

Hipertrigliceridemia familiar

Mayor secreción de triglicéridos (más VLDL y de mayor tamaño). Defectos en la LPL

Aumento de las VLDLDisminución de las HDL y LDL

Sitosterolemia o fitosterolemia

Defectos en ABC G5/G8

Aumento de la absorción de sitosteroles y colesterol dietético. Altos niveles de esteroles (de origen vegetal y animal) en el plasma.

PERFIL LIPÍDICOColesterol total

(mg/dL)Deseable

< 200Límite alto200 – 239

Elevado > 240

LDL (mg/dL)

Óptimo < 100

Cercano a lo óptimo 100 – 129

Límite alto130 – 159

Elevado*160 – 189

Muy elevado*

> 190

Triglicéridos (mg/dL)

Normal< 150

Límite alto

150 – 199

Elevado200 – 499

Muy elevado> 500

HDL (mg/dL)

Bajo*< 40

Elevado> 60

ATEROSCLEROSIS

Enfermedad de arterias

Clínicamente puede causar infarto agudo del miocardio, accidente cerebro vascular o enfermedad perférica.

Se da el depósito de placas de ateroma, a nivel de la pared vascular, provocando el estrechamiento u occlusion completa de la luz arterial.

GRACIAS