Download - Dosificación de lipidos
UNIVERSIDAD DE CUENCA
FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
PRIMER CICLO – GRUPO Nº 7
BIOQUIMICA- PRACTICADOSIFICACIÓN DE LÍPIDOS TOTALES, COLESTEROL,
TRIGLICÉRIDOS Y LIPOPROTEÍNAS
Doménica OrtegaChristian Ochoa
OBJETIVOS
Conocer el metabolismo de los lípidos y su camino en el organismo.
Identificar lipoproteínas beneficiosas y perjudiciales para el organismo.
Conocer las alteraciones que se presentan en el metabolismo de los lípidos.
Aprender sobre la aterosclerosis, y las dislipidemias.
LOS LÍPIDOSBiomoléculas
Orgánicas
CHO
Hidrófobos
LIPIDOS TRIGLICÉRIDOS
-COLESTEROL-COLESTERIL
-ÉSTERES-FOSFOLÍPIDOS
-ÁCIDOS GRASOS NO
ESTERIFICDOS.
90%
10%
DIGESTIÓN Y ABSORCIÓN DE
LÍPIDOS
Su digestión empieza en el
estómago:
- Lipasa lingual
- Lipasa gástrica
20-30% de triglicéridos (TAG) a
monoglicéridos y ácidos
grasos.
Intestino delgado
- Ácidos biliares (emulsión)
- Lipasa pancreática
Absorbidos por enterocitos (micelas)
Todos los AG de cadena larga absorbidos su vuelven TAG antes de pasar al s. linfático como quilomicrones
99% lípidos
1% proteínas
AG de cadena corta viajan en plasma unidos a albúmina
Lipoproteinlipasa (LPL) metaboliza quilomicrones hidrolizando los TAG, liberando ácidos grasos: - lípidos tisulares - se oxidan como combustible
Los remanentes de quilomicrones van a ser reciclados en el hígado, para formar las VLDL.
LIPOPROTEÍNAS
En el hígado son sintetizadas las VLDL, que transportan TAG
desde este órgano hacia los tejidos extrahepáticos, donde
son hidrolizados por la LPL, originando las IDL, las cuales
regresan al hígado donde la enzima triglicérido lipasa
hepática las transforma en LDL.
Las LDL son ricas en colesterol y circulan mucho más
tiempo en el plasma, hacia los tejidos periféricos (de ahí su
potencial aterogénico).
Las HDL transportan colesterol en sentido inverso: desde los tejidos periféricos hasta el hígado; único órgano capaz de excretarlo por la vía biliar.
Colesterol
Es un esterol (lípido) que se encuentra en los tejidos corporales y en el plasma sanguíneo de los vertebrados.
- No se puede metabolizar por lo que se elimina a través de la bilis
- 98% se reabsorbe en íleon terminal- 2% se excreta en las heces
DOSIFICACIÓN DE
TRIGLICÉRIDOS
REACTIVOS
• 1 muestra de suero (desconocido)
• Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo)
MATERIALES• 3 tubos de ensayo• 1 gradilla• 1 pinza de madera• 3 cubetas para
espectrofotómetro• 1 pipeta
automática de 10 ul• 2 puntas blancas• 1 pipeta de 1 ml• 1 pera de caucho
EQUIPOS
• Espectrofotómetro
• Termostato
DOSIFICACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS
TRIGLICÉRIDOS
LPL GLICEROL
AC. GRASOS
GLICEROL ATPGlicerol Kinasa ADP
GLICEROL 1-P
GLICEROL 1-P
O2
GPOH2O2
DIHIDROXIACETONAFOSFATO
2 H2O2 4-AFPOD QUINONIMINA
ROJA
1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos
A= Blanco B=Estándar C= Desconocido
2. Tomar 10 ul de estándar y colocar en el tubo B.
3. Cambiar de punta; tomar 10 ul de desconocido y colocar en el tubo C.
4. Colocar 1 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
PROCEDIMIENTO
5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 5 min.
7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas.
INTERPRETACIÓN
Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres:
0,310 Absorbancia (Conocido).
0,243 Absorbancia (Desconocido).
200 mg/dl Constante.
TENEMOS:
200 mg/dl 0,310
X 0,243
0,243×200𝑚𝑔𝑑𝑙
0,310=156,77𝑚𝑔 /𝑑𝑙
CONCENTRACIÓN DEL DESCONOCIDO: 156,77 mg/dl
VALORES NORMALES
• <1,5 g/l • 44 – 158 mg/dl• 0,50-1,67 mmol/l
Deseable
• 1,55 – 1,99 g/lModerada mente elevado
• 2,0 – 4,99 g/lElevado
• >5,0 g/lMuy elevado
DOSIFICACIÓN DE
COLESTEROL
REACTIVOS
• 1 muestra de suero (desconocido)
• Kit de dosificación (estándar y reactivo de trabajo)
MATERIALES• 3 tubos de ensayo• 1 gradilla• 1 pinza de madera• 3 cubetas para
espectrofotómetro• 1 pipeta
automática de 20 ul• 2 puntas amarillas• 1 pipeta de 2 ml• 1 pera de caucho
EQUIPOS
• Espectrofotómetro
• Termostato
DOSIFICACIÓN DE COLESTEROL
Esteres de colesterol
LipasaColesterol
AC. GRASOS
Colesterol O2
CHOD
H2O2Colesten
3-ona
Fenol4-AF
PODQuinona
ColoreadaH2O2H2O
1. Colocar los tubos de ensayo en la gradilla y rotularlos
A= Blanco B=Estándar C= Desconocido
2. Tomar 20 ul de estándar y colocar en el tubo B.
3. Cambiar de punta; tomar 20 ul de desconocido y colocar en el tubo C.
4. Colocar 2 ml de reactivo e color en cada tubo (A, B,C)
PROCEDIMIENTO
5. Incubar en el termostato los tres tubos a 37º C, durante 15 min.
7. Leer en el espectrofotómetro a 505 nm.
6. Trasvasar el contenido de los tubos en cubetas para espectrofotómetro, y rotularlas.
INTERPRETACIÓN
Para conocer la concentración de triglicéridos en el suero desconocido, aplicamos una regla de tres:
VALORES NORMALES
• <2,0 g/l • 44 – 158 mg/dl• 0,50-1,67 mmol/l
Deseable
• 2,0 – 2,39 g/lModerada mente alto
• >2,4 g/lElevado
DISLIPIDEMIATIPO ANOMALÍA PERFIL LIPÍDICO
Hipercolesterolemia familiar
Defecto en la codificación de los receptores para las LDL
Hipercolesterolemia o hiperlipemia mixta
Hipercolesterolemia familiar combinada
Defecto en la secreción hepática de las VLDL
Perfil cambiante (hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia y mixto)
Disbetalipoproteinemia familiar
Alteración de la ApoE que impide la metabolización de VLDL y quilomicrones
Hipercolesterolemia e hipertrigliceridemia
Hipercolesterolemia poligénica
Interacciones de numerosos genes – ambiente (p.ej: alimentación)
Colesterol moderadamente elevado
Hipertrigliceridemia familiar
Mayor secreción de triglicéridos (más VLDL y de mayor tamaño). Defectos en la LPL
Aumento de las VLDLDisminución de las HDL y LDL
Sitosterolemia o fitosterolemia
Defectos en ABC G5/G8
Aumento de la absorción de sitosteroles y colesterol dietético. Altos niveles de esteroles (de origen vegetal y animal) en el plasma.
PERFIL LIPÍDICOColesterol total
(mg/dL)Deseable
< 200Límite alto200 – 239
Elevado > 240
LDL (mg/dL)
Óptimo < 100
Cercano a lo óptimo 100 – 129
Límite alto130 – 159
Elevado*160 – 189
Muy elevado*
> 190
Triglicéridos (mg/dL)
Normal< 150
Límite alto
150 – 199
Elevado200 – 499
Muy elevado> 500
HDL (mg/dL)
Bajo*< 40
Elevado> 60
ATEROSCLEROSIS
Enfermedad de arterias
Clínicamente puede causar infarto agudo del miocardio, accidente cerebro vascular o enfermedad perférica.
Se da el depósito de placas de ateroma, a nivel de la pared vascular, provocando el estrechamiento u occlusion completa de la luz arterial.
GRACIAS