CETis 62

PRACTICA No 5 IDENTIFICACION DE LIPIDOS

EQUIPO # 6

INTEGRANTES:

GUTIERREZ PRIETO NATALI

LOPEZ VILLAFAÑA MICHEL VANESA

MACIAS MORENO ANA ISABEL

ZAVALA LAGUNA ANDREA

ZAVALA QUIROZ GUADALUPE ROBERTO

LABORATORIO CLINICO

GRADO 6 GRUPO “E”

INTRODUCCIÓN

Los lípidos, junto con las proteínas y carbohidratos, constituyen los principales componentes estructurales de los alimentos.

Los lípidos se definen como un grupo heterogéneo de compuestos que son insolubles en agua pero solubles en disolventes orgánicos tales como éter, cloroformo, benceno o acetona. Todos los lípidos contienen carbón, hidrógeno y oxígeno, y algunos también contienen fósforo y nitrógeno. Los lípidos comprenden un grupo de sustancias que tienen propiedades comunes y similitudes en la composición, sin embargo algunos, tales como los triacilgliceroles son muy hidrofóbicos. Otros, tales como los di y monoacilgliceroles tienen movilidad hidrofóbica e hidrofílica en su molécula por lo que pueden ser solubles en disolventes relativamente polares.

La presencia de lípidos se puede poner de manifiesto porque se tiñen específicamente con el colorante Sudán III, adquiriendo una coloración rojiza característica que no desaparece tras el lavado con agua.

FUNDAMENTO

Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoleculas, compuestas principalmente por carbono e hidrogeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fosforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal ser insolubles en agua y en disolventes orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son un tipo de lípidos, aunque el más conocido.

Los lípidos forman un grupo de sustancias de estructura química muy heterogenea , siendo la clasificación más aceptada la siguiente:

Lípidos saponificables: Los lípidos saponificables son los lípidos que contienen ácidos grasos en su molécula y producen reacciones químicas de saponificación. A su vez los lípidos saponificables se dividen en:

Lípidos simples: son aquellos lípidos que solo contienen hidrogeno y oxígeno. Estos lípidos simples se subdividen a su vez en: Acilgliceridos o grasas (cuando los acilgliceridos son sólidos se les llama grasas y cuando son líquidos a temperatura ambiente se llaman aceites) y Céridos o ceras.

Lípidos complejos: Son los lípidos que además de contener en una molécula carbono, hidrogeno y oxígeno, también contienen otros elementos como nitrógeno, fosforo, azufre u otra biomolecula como un glúcido. A los lípidos complejos también se les llama lípidos de membrana pues son las principales moléculas que forman las membranas celulares. Fosfolípidos y Glicolipidos.

Lípidos insaponificables: Son los lípidos que no poseen ácidos grasos en su estructura y no producen reacciones de saponificación. Entre los lípidos insaponificables encontramos a: Terpenos, Esteroides y Prostaglandinas.

MATERIAL5 tubos de ensayo 5 pipetas de 1ml

1 baño maria

REACTIVOS

Alcohol etílico Benceno

Cloroformo

Tetracloruro de Carbono

Grasas y aceites

Aceite de oliva Mantequilla

Aceite de almendras Manteca

Aceite rancio

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO

La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma de cristales en una de las fracciones.

MATERIAL

2 vasos de precipitado 1 embudo

1 matraz con tapón 1 papel filtro

REACTIVOS

Alcohol metílico éter – etanol (3.1)

ACIDEZ

El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. La acidez de una sustancia se puede determinar por métodos volumétricos. Ésta Cuando un ácido y una base reaccionan, se produce una reacción; reacción que se puede observar con un indicador. Un ejemplo de indicador, y el más común, es la fenolftaleína (C20 H14 O4), que vira (cambia) de color a rosa cuando se encuentra presente una reacción ácido-base.

MATERIALES

2 matraz Erlenmeyer 250 ml KOH 0.5 N 1 pinzas para bureta

1 soporte universal 1 bureta

REACTIVOS

Fenolftaleina

RANCIDEZ

El grado de deterioro que produzca el enranciamiento dependerá del tipo de grasa o aceite; en función de su composición en ácidos grasos, los más susceptibles al enranciamiento oxidativo, por su mayor contenido en insaturaciones glosario, son los aceites marinos seguidos de los vegetales y, por último, las grasas animales. Industrialmente, para aumentar la vida media de los aceites ricos en ácidos grasos poliinsaturados y su estabilidad al emplearlos en frituras, muchos aceites comerciales se someten a hidrogenación parcial que convertirá muchos de los dobles enlaces cisglosario de los ácidos grasos en enlaces sencillos, lo que hace aumentar la temperatura de fusión de los aceites que pasarán a ser casi sólidos a temperatura ambiente (como ocurre con la margarina).

MATERIALES

2 tubos de ensayo 1 baño maria

1 bureta 2 matraz Erlenmeyer

1 soporte universal 1 pinzas para bureta

REACTIVOS

HCl 5N Potasa alcoholica

Fenolftaleina

SAPONIFICACION

Este proceso químico es utilizado como un parámetro de medición de la composición y calidad de los ácidos grasos presentes en los aceites y grasas de origen animal o vegetal, denominándose este análisis como Índice de saponificación; el cual es un método de medida para calcular el peso molecular promedio de todos los ácidos grasos presentes. Igualmente este parámetro es utilizado para determinar el porcentaje de materias insaponificables en los cuerpos grasos.

MATERIALES

3 matraces 1 baño maria

1 bureta

REACTIVOS

HCl 5N Potasa alcoholica

Fenolftaleina

COLORACIÓN

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III. Ésto es debido a que el Sudán III es un colorante lipofilo (soluble en grasas). Por esa afinidad a los ácidos grasos hace que la mezcla de éstos con el colorante se ponga de color rojo, mezclándose totalmente y convirtiéndose en un colorante específico utilizado para revelar la presencia de grasas.

MATERIALES

1 gradilla 10 tubos de ensayo

5 pipetas

REACTIVOS

Colorante Sudan III en solución Tinta roja

SOLUBILIDAD.

TÉCNICA

Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa.

Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo)

Evítese inflamación de los solventes.

Hágase en frío y caliente.

Para el registro de las observaciones se sugiere una tabla como la que se muestra a continuación:

REULTADOS:

Tipo de grasa

Alcohol etílico

Cloroformo Tetracloruro de carbono

Benceno

Aceite de oliva.

Insoluble. Soluble. Soluble. Soluble.

Aceite de almendras.

Insoluble. Soluble. Soluble. Soluble.

Aceite rancio.

Insoluble. Soluble. Soluble. Soluble.

Mantequilla(margarina).

Insoluble. Soluble. Soluble. Soluble.

Manteca. Insoluble. Soluble. Insoluble. Soluble.

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO.

TÉCNICA

Separar con mucho cuidado la yema de la clara.

Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado.

Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.

Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.

Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).

Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.

RESULTADOS:

¿Qué es el residuo insoluble?

COLESTEROL.

ACIDEZ.

El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:

I.A= n x 28 P

Donde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación P = peso de la muestra

TÉCNICA1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).

2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización.

2.- Calcular el índice de acidez.

RESULTADOS:

RANCIDEZ.

TÉCNICAColocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro 5ml de aceite rancio.

A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.

Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.

Los valores normales son:Aceite rancio: pH = 6.7 Aceite de Olivo (Oleico): pH = 6.1

RESULTADOS:

Aceite rancio: 6.4Aceite de olivo:6

SAPONIFICACIÓN.

TÉCNICAEn dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite. Añadir 25ml de solución de potasa alcohólica.

Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actué como refrigerante.Calentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que halla sido totalmente saponificada (apariencia de clara uniforme).

También utilizar un blanco el aceite problema, usar 25ml de potasa alcohólica y calentar no usar aceite.

Enfriar los matraces y titular usando una solución estándar (HCl 5N). Usar 3 gotas de fenolftaleína hasta cambio de color y después agregar dos más.

RESULTADOS:

COLORACIÓN.

TÉCNICALos lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

TECNICA1. Disponer en una gradilla con tubos de ensayo colocando en ambos

2ml de diferentes aceites.

2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán

III.

3. A los otros tubos añadir 4-5 gotas de tinta roja.

4. Agitar ambos tubos y dejar reposar5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene

que aparecer teñido, mientras que en el tubo con tinta, esta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.

RESULTADOS:

Sudán III Tinta rojaTubo 1 TEÑIDO (MEZCLA) NO TEÑIDO (SEPARACIÓN)Tubo 2 TEÑIDO (MEZCLA) NO TEÑIDO (SEPARACIÓN)Tubo 3 TEÑIDO (MEZCLA) NO TEÑIDO (SEPARACIÓN)Tubo 4 TEÑIDO (MEZCLA) NO TEÑIDO (SEPARACIÓN)Tubo 5 TEÑIDO (MEZCLA) NO TEÑIDO (SEPARACIÓN)SOLUBILIDAD.

Tipo de Grasa en Calor.

Tipo de grasa Alcohol etilico Cloroformo Tetracloruro fe Benceno

carbono

Aceite de olivo Insoluble Soluble Soluble Soluble

Mantequilla Insoluble Soluble Soluble Soluble

Manteca Insoluble Soluble Insoluble Soluble

Aceite de almendras

Insoluble Soluble Soluble Soluble

Aceite rancio Insoluble Soluble Soluble Soluble

Tipo de Grasa en Frio.

Tipo de grasa Alcohol etilico Cloroformo Tetracloruro fe carbono

Benceno

Aceite de olivo Insoluble Soluble Soluble soluble

Mantequilla Soluble Soluble Soluble soluble

Manteca Insoluble Insoluble Insoluble Insoluble

Aceite de almendras

Insoluble Soluble Insoluble soluble

Aceite rancio Insoluble Soluble Soluble soluble

Al realizar la practica de solubilidad nos pudismos dar cuenta al observer que hay una separacion diferente en calor que en frio. Cada reactivo reacciona de una manera diferente y en una temperatura diferente por eso es que aveces hay cambios en nuestra grasa de separacion debido a que cambiamos por completo la temperatura de este.

OBTENCION DE LIPIDOS ATRAVEZ DE LA YEMA DEL HUEVO.

YEMA DE HUEVO

Se formaron unos pequeños cristales en la yama del huevo. Se debe al colesterol ya que este es indispensable para el buen funcionamento del organismo y por lo tanto fue el protegonista en la reaccion de insolubilidad que se presento en esta separacion

ACIDEZ

Tubimos mucho en cuenta al realizar esta practica para poder pesar todas nuestras grasas de igual o proporcionalmente de igual manera.

Sabiendo que la acidez es la cualidad de un ácido. Pueden presentar características tales como sabor agrio, liberación de hidrógeno, o pH menor que 7.

Tomando en cuenta principalmente que se define tomando en cuenta los miligramos de potasio.

Al realizar nuestra titulacion pusimos mucha atencion ya que en este paso debimos tener mucho cuidado principalmente para observar nuestro pH con paciencia pudimos lograr unos resultados exitosos, como la maestro nos habia dicho logrando un color rosa en nuestras grasas (MANTEQUILLA Y ACEITE DE OLIVO)

RANCIDEZ.

Rancidez Observaciones

Valores normales pH

Aceite rancio 6.7

Aceite de Olivo (Oleico) 6.1

Obtubimosnlos siguientes resultados

Aceite rancio pH=6.4

Aceite fde Olivo pH=6

Nuestro valores fueron muy proporcionales a los de referencia no variaron mucho nada mas el de acido rancio con 3 decimas, talvez esto se debio aque no esperamos el tiempo suficiente para observar el pH establemente,tomando en cuenta que no hubo mas factores que alteraran nuestro resultado.

COLORACION

La elaboracion de esta tecnica fue muy importante ya que tubimos que tener mucho en cuenta al agregarle el reactive o la tinta a nuestras grasas ya que si agregabamos gotas de mas esto podria alterar nuestro resultado y estaria erroneo.

Tubimos que observar varias veces la coloracio de nuestras grasas ya que en algunas no se presentaba muy visiblemente el cambio que habia en ellas por lo tanto tubims que agitar en algunas grasas varias veces para poder diferenciar si habia separacion o no en ellas.

OBSERVACIONES.

Al equipo 6 le parecio muy importante la realizacion de esta practica ya que pudimos observar muy bien como se presentaba cada lipido en cada una de nuestras tecnicas realizadas.

Usamos varias grasas liquidas como los aceites: olivo, rancio y de almendras.

Grasas solidas: Manteca y mantequilla.

Pudimos determiner y observar el pH de algunas de ellas. El cambio de color que habia en cada uno de ellos al agregarles reactivos distintos.

Sabemos que los lipidos

Son insolubles en agua Son solubles en disolventes orgánicos, como éter, cloroformo, benceno,

etc. Constituyentes importantes de la alimentación (aceites, manteca, yema de

huevo), representan una importante fuente de energía y de almacenamiento.

CONCLUSIONES.

Los lipidos desempeñan las siguientes funciones.

Función de reserva. Son la principal reserva energética del organismo. Un gramo de grasa produce 9'4 kilocalorías en las reacciones metabólicas de oxidación, mientras que proteínas y glúcidos sólo producen 4'1 kilocaloría/gr.

Función estructural. Forman las bicapas lipídicas de las membranas. Recubren órganos y le dan consistencia, o protegen mecánicamente como el tejido adiposo de piés y manos.

Función biocatalizadora. En este papel los lípidos favorecen o facilitan las reacciones químicas que se producen en los seres vivos. Cumplen esta función las vitaminas lipídicas, las hormonas esteroideas y las prostaglandinas.

Función transportadora. El tranporte de lípidos desde el intestino hasta su lugar de destino se raliza mediante su emulsión gracias a los ácidos biliares y a los proteolípidos.

La realizacion de estas practica y de sus diferentes tecnicas de trabajar los lipidos (grasas) tubimos que tener mucho cuidado ya que estubimos trabajando con reactivos de alto cuidado. Al igual que mucha precision y mucha organizacion ya que eran varias tecnicas las cuales tenian que realizarse de manera adecuada en el tiempo indicado tomando las normas de seguridad adecuadamente.

Comprobamos las propiedades de ellos como la de el aceite de oliva, de almendras, mantequilla, Manteca. Y aceite rancio.

Lo que mas se le complico al equipo fue al momento de la titulacion ya que era una tecnica completamente nueva y habia que tener mucha precision para la obtencion de un resultado favorable. Apezar de no haber trabajado con ella no tubimos problemas teniendo la paciencia adecuada llegamos a nuestro resultado

Cuestionario

1. ¿Qué son los jabones?Los jabones son sales de ácidos grasos, producidos mediante una reacción química conocida como saponificación. En esta reacción la grasa reacciona con la sosa para producir jabón y glicerina. Cada molécula de jabón tiene una cadena muy larga con muchos átomos de carbono y con una cabeza con un grupo ácido

2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?El proceso de fabricación de los jabones a partir de triacilgliceroles es la saponificación.Otra forma de obtener jabones es la neutralización de ácidos grasos con álcali. Para ello hay que hidrolizar las grasas y aceites empleando alta presión que separa los acido grasos de la glicerina. Después se purifican los ácidos grasos por destilación y ya se pueden neutralizar con el álcali para dar el jabón

3. ¿Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?Porque se utilizan grasas y estas están compuestas por ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón) por lo tanto, en la fase acuosa quedara el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mezclan, y la tinta china se deposita en el fondo.

4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas?Entre las enzimas están la lipasa bucal, lipasa gástrica, lipasa pancreática, esterasa del colesterol.

5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a qué se debe la diferencia entre ambos resultados.

El sudan III es un colorante lipófilo (soluble en grasas). Por esa afinidad a los ácidos grasos hace que la mezcla de estos con el colorante se ponga de color rojo, mezclándose totalmente y convirtiéndose en un colorante especifico utilizado para revelar la presencia de grasas, mientras que la tinta roja termina yendo al fondo con el tiempo se separa.

6. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y con la de bencenos y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?

Es transitoria, pues desparece en reposos por la regulación de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el aguaLa de benceno con el aceite forman una mezcla la cual no se separa al igual que con el agua Las diferencias observadas entre ambas es que el aceite se mezcla con sustancias apolares como el, este sería el caso del benceno, pero no se mezcla con el agua ya que es apolar.

7. Escribe las fórmulas de los lípidos utilizados en la práctica

Bibliografía

Saponificación - Reacción química del jabónhttp://quimica-explicada.blogspot.mx/2010/07/saponificacion-reaccion-quimica-del.html

http://es.slideshare.net/richardordonez940/bioquimica-generalidades-de-los-lipidos