UNIVERSIDAD INTERSERRANA DEL ESTADO DE PUEBLA –AHUACATLAN

LIC. BIOTECNOLOGIA

ANALISIS DE AGUA Y ALIMENTOS

VERONICA LEON ARIAS

CLOSTRIDIUM PERFRINGENS

INTRODUCCION.

Clostridium perfringens produce enfermedades en ovinos, caprinos, bovinos y otras especies, la mayoría de las cuales son genéricamente llamadas enterotoxemias.

Este microorganismo puede ser un habitante normal del intestino de la mayoría de las especies animales, incluyendo al ser humano. Por lo tanto, el diagnóstico de las enfermedades producidas por C. perfringens es complejo, ya que con pocas excepciones, el sólo aislamiento de esta bacteria del intestino, no es suficiente para confirmar un diagnóstico de infección por la misma.

PROPIEDADES.

Catalasa negativo.- aerotolerante; crecimiento rápido; fermentación tumultuosa de la lactosa de la leche; crece entre 20 – 50°C (óptimo 43 a 45°C); crece a pH 5.5 – 8.5; no crece en 6.5% NaCl.

Microbiología de los Alimentos Manual de Laboratorio (Ahmed E. Yousef –

Carlstrom)

CARACTERISTICAS DE LA ESPORA.

Grande, oval, central o subterminal; deforma el esporangio; no tiene exosporio D100°c = 0.3 – 18 min

La bacteria que produce la gastroenteritis es C. Perfringens (welchii) tipo A.

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Carlstrom)

ALIMENTOS IMPLICADOS

Se han encontrado esporas de este microorganismo en parte de las muestras de la mayoría de los alimentos crudos analizados, así como en el suelo, en las aguas residuales, y en las heces de los animales. Los alimentos mas corrientemente implicados son las carnes que han sido cocinadas, que se han dejado enfriar lentamente, y después de ello se conservan durante algún tiempo antes de consumirlas. La carne y los productos derivados de la carne de ave explican aproximadamente las tres cuartas partes de lso brotes atribuidos a C. perfringens

Microbiología de los Alimentos (W.C .Frazier – D.C. Westhoff)

ENFERMEDAD

Los síntomas, que suelen aparecer en el plazo de las 8 a 24 horas (promedio de 12horas) siguientes a la ingestión del alimento causante, comprenden dolor abdominal agudo, diarrea y gases; la

fiebre, las nauseas y los vómitos son raros. Durante la esporulación de las células, en el intestino se libera una toxina (enterotoxina) que da lugar a una gran acumulación de liquidos en la luz intestinal. La enterotoxina es relativamente termosensible, inactivándose a 60°C en un tiempo de 10 minutos.

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La enteritis necrótica es una patología entérica producida por el Clostridium perfringens tipo A que, junto con factores predisponentes que lesionan la mucosa origina una necrosis extensiva de la mucosa intestinal del intestino delgado.

La enfermedad está producida por Clostridium perfringens (tipos A y C) como consecuencia de la producción de las toxinas alfa y beta, las que causan necrosis en la mucosa intestinal, afectando a pollos, pavos, patos y aves silvestres. El Clostridium perfringens habita de forma natural en el intestino, proliferando bajo determinadas circunstancias.

El C. perfringens es un germen esporulado de gran tamaño que se encuentra diseminado por la naturaleza y quecrece en condiciones de anaerobiosis. En medio de cultivo agar sangre crece bien y produce doble halo de hemólisis.

EPIDEMIOLOGÍA

La enfermedad se produce cuando el individuo ingiere alimento contaminado con un elevado número de organismos productores de enterotoxinas (100 millones).Los alimentos que pueden estar contaminados son carnes vacuna, suina, pollo, salsas cocinadas y no refrigeradas.

Cuando los alimentos llegan al intestino delgado se produce la esporulación y la liberación de enterotoxinas.

No son comunes los brotes familiares pero si los producidos a través de alimentos preparados comercialmente y destinados a restaurantes o instituciones.

Para confirmar la existencia de una enfermedad de este tipo es necesario recuperar el agente de la muestra clínica y del paciente. Se deben recuperar al menos 100.000 UFC de C. perfringens por gramo de alimento y 1.000.000 de microorganismos por gramo de heces en las primeras 24 horas.

Es posible detectar anticuerpos contra la enterotoxina pero ellos no tienen valor protector.

http://www.bvsops.org.uy/pdf/clostridium.pdf

CONDICIONES NECESARIAS PARA UN BROTE

Para que se presente un brote de infección gastrointestinal por C.perfringens son necesarias las siguientes condiciones:

Que el alimento este contaminado

Que existan condiciones limitadas para que la bacteria se multipliquen

Que el alimento no haya sido refrigerado convenientemente

Que el alimento se consuma sin someterlo de nuevo a calentamiento

Que las baterías esporulen in vitro y elaboren la enterotoxina.

Microbiología de los Alimentos (W.C .Frazier – D.C. Westhoff)

PREVENCION DE LOS BROTES

Los recursos para prevenir los brotes de infección por C.perfringens comprenden:

El apropiado y rápido enfriamiento de las carnes cocidas y de los demás alimentos.

El mantenimiento de los alimentos a temperaturas superiores a los 60°C

El sometimiento de los alimentos sobrantes a nuevo calentamiento

La apropiada higiene del personal.

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TECNICA PARA IDENTIFICACION

Recuento de Clostridium perfringens por filtración (incluidas las esporas)

1. Preparar el equipo de filtración

2. Filtrar 100ml de la muestra de agua problema mediante vacio, de manera que los microorganismos presentes queden retenidos en el filtro de membrana

3. Retirar el filtro de membrana con ayuda de unas pinzas estériles y colocarlo en la superficie de una placa de agar m-CP

4. Incubar en condiciones de anaerobiosis a 44°C durante 24 horas

5. Contar todas las colonias de color rojo o rosa al cabo de 20-30 segundos de exposición a vapores de hidróxido amónico.

Manual Práctico de Microbiología (Carlos Gamazo – Ignacio López – Goñi Ramon Diaz)

PATOGENIA

Existen dentro de la especie cinco tipos llamados A, B, C, D y E.C. perfringens A es el responsable de la mayoría de los procesos infecciosos.

Produce una enterotoxina (polipéptido de 35.000 daltons de peso molecular) que se comporta como un superantígeno promoviendo la liberación de mediadores de inflamación en forma masiva.

La enterotoxina es susceptible a pronasa pero no a tripsina ni quimiotripsina.En el intestino delgado, la enterotoxina se une a un receptor de membrana del ribete en cepillo e induce una alteración de la permeabilidad calcio dependiente resultando en una pérdida de iones y metabolitos. Esta pérdida electrolítica altera la función metabólica intracelular provocando daño morfológico y eventual lisis.

http://www.bvsops.org.uy/pdf/clostridium.pdf

TratamientoEl Clostridium perfringens es sensible a antibióticos como los beta-Iactámicos (pricipalmente penicilina yamoxicilina), tetraciclinas (especialmente doxiciclina y oxitetraciclina), macrólidos (como lincomicina, tilosina,tiamulina o eritromicina), sulfamidas y aminoglicósidos (como la neomicina).También deben aplicarse medidas preventivas como:- Control riguroso de las materias primeras empleadas en la preparación del pienso.- Control de la temperatura y ventilación de la granja.- Control de la humedad de la yacija, evitando altas humedades.- Programas de control de coccidiosis basados en el monitoreo periódico de la yacija.- Programas vacuna les de enfermedades inmunodepresoras, como la de Gumboro, la anemia infecciosaaviar o la enfermedad de Marek.

- Evitar causas de estrés.

BIBLIOGRAFIA

Manual Práctico de Microbiología (Carlos Gamazo – Ignacio López – Goñi Ramon Diaz)

Microbiología de los Alimentos (W.C .Frazier – D.C. Westhoff)

Microbiología de los Alimentos Manual de Laboratorio (Ahmed E. Yousef – Carlstrom)

http://www.veterinaria.org/revistas/redvet

http://www.bvsops.org.uy/pdf/clostridium.pdf