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• Agents✦ froid
✦ dessication/lyophilisation
✦ certains produits chimiques / antibiotiques
• Agents de✦ incinération
✦ T°C élevée
✦ radiations
✦ désinfectants
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diversité des agents anti-microbiens (1)
• Agents
• Agents
• Agents
diversité des agents anti-microbiens (2)
2
1.1. Cinétique de destruction microbienne
1.2. Conditions influençant l’efficacité des
agents anti-microbiens
1. Action anti-microbienne
3
0 1 2 3 4 5 6 7 8
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Log
(sur
viva
nts)
Temps (min)
Log (survivants) en fonction du temps
1.1. Cinétique de destruction microbienne
Réduction d’un facteur 10de la population = .
Temps deréduction décimale
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1.1. Cinétique de destruction microbienne
1.2. Conditions influençant l’efficacité des
agents anti-microbiens
1. Action anti-microbienne
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1.2. Paramètres influençant l’efficacité des AAM (1)
• Influence du✦ de micro-organismes
✦ Nature de la population
✴ .
✴ Faculté à
• Influence de l’✦ (large ou étroit)
✦ des agents physiques
✦ des agents chimiques
✦ d’exposition ou de contact
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• Influence de l’✦ la température
✦ le pH
✦ les matières organiques
1.2. Paramètres influençant l’efficacité des AAM (2)
7 8
2.1. La chaleur
2.2. la filtration
2.3. les radiations
2. Action des agents physiques
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2.1. La chaleur 2.1.1. généralités
• Action de la chaleur dépend :✦ taux d’
✦ forme des cellules : /
✦ temps de contact
• Barème temps/température✦ Plus la température
✦ Plus le temps d’exposition nécessaire à la réduction d’un certain facteur de la population microbienne est
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2.1. La chaleur 2.1.2. stérilisation (1)
• . ✦ par la chaleur
Louis Pasteur1822-1895
✦ par traitement chimique (oxyde d’éthylène)
✦ par traitement ionisant (rayonnements gamma ou UV)
http://fr.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteur
Nicolas Appert1749-1841
http://fr.wikipedia.org/wiki/Nicolas_Appert
Oxyde d’éthylènehttp://fr.wikipedia.org/wiki/Oxyde_d%27éthylène
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2.1. La chaleur 2.1.2. stérilisation (2)
• Par chaleur :✦ Flambage : flamme bleue d’un bec Bunsen
✦ Four Pasteur : four à air chaud et sec
(utilisation : 180°C pendant 90 minutes)
http://www.veterinaire-alzette.com/pages/clinique.aspx?cp=eqste12
2.1. La chaleur 2.1.2. stérilisation (3)
• Par chaleur : principe de l’✦ Stérilisation à la vapeur
✦ Eau portée à l’ébullition sous
✦ Température atteinte supérieure à
http://fr.wikipedia.org/wiki/Autoclave13
2.1. La chaleur 2.1.3. tyndallisation
John Tyndall1820-1893
• . ✦ Stérilisation modérée
✦ Cycles de (destruction des formes végétatives) et de (transformation des formes en formes )
http://fr.wikipedia.org/wiki/John_Tyndall_(physicien) 14
2.1. La chaleur 2.1.4. pasteurisation
• Procédé de des aliments
• Chauffage entre 62 et 88°C
• Réduction significative de la flore et de
• Exemples de barèmes de pasteurisation■ Jus de fruit acide (pH < 4,5) : [65 °C ; 30 min] ; [77 °C ; 1 min] ; [88 °C ; 15 s]■ Bière (pH < 4,5) : [68 °C ; 20 min] ; [75 °C ; 4 min]■ Lait (pH > 4,5) : [63 °C ; 30 min] ; [72 °C ; 15 s]
http://genie-alimentaire.com/spip.php?article13
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2.1. La chaleur 2.1.5. thermisation
• Procédé utilisé sur le lait cru
• 15 secondes à 57 - 68°C
• Destruction de la flore pathogène
• Réduction de la flore lactique
• Nécessité de réensemencer pour fabriquer du fromage
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2.1. La chaleur
2.2. la filtration
2.3. les radiations
2. Action des agents physiques
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2.2. La filtration (1)• Solutions :
✦ solution de protéines, de glucides,...
✦ antibiotiques, médicaments (injectables, sirops,...)
• Passage de la solution à filtrer sur une filtrante✦ micro-organismes sur la membrane
✦ obtention d’un
• Filtration de l’air✦ milieu hospitalier
✦ PSM (Poste de Sécurité Microbiologique)
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2.2. La filtration (2)
http://www.allsciences.com http://www.directindustry.fr/prod/merck-millipore/filtres-seringues-31514-456844.html
19 20
2.1. La chaleur
2.2. la filtration
2.3. les radiations
2. Action des agents physiques
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2.3. LES RADIATIONS
• Radiations UVc (260 nm)✦ Poste de Sécurité Microbiologique (PSM) : air et surface
✦ Traitement de l’eau
• Radiations ionisantes Gamma✦ Source Cobalt 60
✦ Stérilisation à froid : antibiotiques, hormones, objets chirurgicaux,...
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3.1. Désinfection
3.2. Antisepsie
3.3. Antibiothérapie
3. Action des agents chimiques
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3.1. Désinfection
• Opération, au résultat momentané, permettant de tuer des micro-organismes et/ou d’inactiver des virus sur un
• Action
• Phase de détersion ( ) précède la phase de désinfection avec un désinfectant
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3.1. Désinfectants (1)
• Agents anti-microbiens destinés à être utilisés sur des surfaces inertes
• Détruisant 99,999 % des germes ciblés
• doses
• Temps de contact
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3.1. Désinfectants (2)
• Chaux vive (oxyde de calcium, CaO)
• Hypochlorite de sodium (eau de Javel, NaClO)
• Alcool
• Eau oxygénée (H2O2)
• Ozone (O3)
• Ammoniums quaternaires
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3.1. Désinfection
3.2. Antisepsie
3.3. Antibiothérapie
3. Action des agents chimiques
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3.2. Antisepsie• Opération, au résultat momentané, permettant,
au niveau de , dans la limite de leur tolérance, d’éliminer, ou de tuer, les micro-organismes, et/ou d’inactiver les virus.
• Action
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3.2. ANTISEPTIQUES (1)
• Agents anti-microbiens destinés à être utilisés sur des surfaces vivantes (peau,...)
• Usage local
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3.2. ANTISEPTIQUES (2)
• Hypochlorite de sodium (eau de Javel, NaClO)
• Alcool à 70°
• Eau oxygénée (H2O2) (10 volumes)
• ...
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3.2. ANTISEPTIQUES (3)
• Chlorhexidine
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• Bétadine
3.1. Désinfection
3.2. Antisepsie
3.3. Antibiothérapie
3. Action des agents chimiques
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• Traitement par d’une infection
• : quantité de principe actif / nombre de fois par jour / durée du traitement
• Dépend :✦ du patient (âge, poids,...)
✦ de l’infection
✦ de la voie d’administration
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3.3.1. Définitions (1)
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• Substance qui possède une activité spécifiquement anti-microbienne,✦ par interaction avec le métabolisme de la cellule hôte,
✦ peu toxique pour les organismes eucaryotes, donc utilisables par voie générale,
✦ active à faibles doses (de l’ordre du µg/mL).
3.3.1. Définitions (2)
• Molécules synthétisées par des micro-organismes, modifiées chimiquement, ou totalement synthétiques (cas des sulfamides)
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Alexander Fleming1881-1955
Structure de la pénicillineInhibition bactérienneautour du Penicillium
3.3.1. Définitions (3)
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A : Empêcher la construction de la paroi
B : Dissoudre la membrane
C : Agir sur l’ADN
D : Agir sur l’ARN
E : Bloquer la synthèse des protéines
3.3.2. Modes d’action
• Inhibition de la synthèse du
• Inactivation des pénicillines par une enzyme bactérienne :
• Ajout d’un inhibiteur des ß-lactamases :
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A- Empêcher la construction de la paroi bactérienne
3.3.2. Mode d’action (A) B- Dissoudre la membrane
• Ex : polymyxines : surfactants cationiques
• Action contre les bacilles
• Usage local
car neurotoxiques et néphrotoxiques
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3.3.2. Mode d’action (B)
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C- Agir sur l’ADN ou l’ARN
• Ex : quinolones ; Oflocet®
• Inhibition de la réplication de l’ADN
• Indications : infections urinaires
3.3.2. Mode d’action (C)
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D- Agir sur la synthèse des protéines• Ex : chloramphénicol
• Blocage de la formation de la liaison
• Usage externe local car toxique
• spectre
3.3.2. Mode d’action (D)
3.3.3. EFFICACITÉ (1)
• CMI (concentration minimale inhibitrice)= la plus petite concentration en antibiotique
capable d’inhiber visiblement la croissance bactérienne
(absence de trouble, 100 % de survivants)
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3.3.3. CMI (1)
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Tubes à hémolyse 1 2 3 4 5 6 7
Volume de diluant (mL) 1 0 1 1 1 1 1
Volume d’ATBQà (mL) 1 1
Volume du tube précédent (mL) 1 1 1 1
Volume d’inoculum (mL) 1 1 1 1 1 1 1
Dilution ATBQ
Concentration en ATBG (µg/mL) 0 512 256 128 64 32 16
Trouble + - - - - + +
3.3.3. CMI (2)
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Cupules 1 2 3 4 5 6 7
Volume de diluant (µL) 50 50 50 50 50 50 50
Volume d’ATBQà (µL) 50
Volume de la cupule précédente (µL) 50 50 50 50 50
Volume d’inoculum (µL) 50 50 50 50 50 50 50
Dilution ATBQ
Concentration en ATBQ (µg/mL) 128 64 32 16 8 4 0
Trouble + + + + + + +
3.3.3. CMI (3)
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Cupules 1 2 3 4 5 6 7
Volume de diluant (µL) 50 50 50 50 50 50 50
Volume d’ATBQà 256 µg/mL (µL) 50
Volume de la cupule précédente (µL) 50 50 50 50 50
Volume d’inoculum (µL) 50 50 50 50 50 50 50
Dilution ATBQ
Concentration en ATBQ (µg/mL)
Trouble - - - - - - +
• Efficacité mesurée par :✦ .
✦ .
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Tube %%%%%%%%1%% %%%2%%%%% %%3%%%%%4 %%%%%5%% %%%%6%%% %%%%
+ + %% %%%-%%%% %%-%% %%% %-%%% %%+ %%%+ + %%
Dénombrement%survivants.
Tube %n°2
Tube %n°3
Tube %n°4
Déterm ina tion%C MI
Déterm ina tion%C MB
Lec ture %a près%inc uba tion%de %18h%à %37°C
3.3.3. Efficacité (2)
• Résistance :✦ Action sur certaines bactéries et pas sur d’autres
✦ Caractère résistant porté par chromosome ou plasmide (caractère constant)
✦ Ex : résistance des coques Gram + aux polymyxines
• Résistance :✦ par sur le chromosome bactérien
✦ par mutation ou d’un plasmide portant un de
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3.3.4. Résistances (1)
• Mécanismes de résistance✦ Absence de pénétration de l’antibiotique
✦ Excrétion active
✦ Destruction de l’antibiotique
✦ Séquestration de l’antibiotique par une protéine
✦ Production accrue de la cible
✦ Modification de la cible
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3.3.4. Résistances (2) CONCLUSION
Agents physiques Agents chimiques
AGENTS ANTI-MICROBIENS
Peu spécifiques Peu spécifiques Spécifiques
Sulfamides
Agents chimio-thérapeutiques
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