determinacion de vibrio cholerae

7/24/2019 Determinacion de Vibrio Cholerae

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UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICOVILLARREAL

FACULTAD DE OCEANOGRAFIA, PESQUERIA

Y CIENCIAS ALIMENTARIASESCUELA PROFESIONAL INGENIERIAALIMENTARIA

TEMA: Determinacion e Vi!rio C"o#erae

C$r%o: Micro!io#o&'a Genera# ( e #o% a#imento%

DOCENTE: In&) Ni#a Q$i%*e

+ORARIO: :-./:..*m

ALUMNOS: Pe0o O#i1era, No($ri

Ra(moni Lareo, L$cero

R$i0 A!anto, Nat"a#(

Mira2ore%, -.3


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DETERMINACIN DE VIBRIOCHOLEAREI. OBJETIVOS:

Aprender a determinar presencia de Vibrio

cholerae presentes en productos hidrobiologicos.Familiarizarse con la tcnica de aislamiento deVibrio Cholerae a partir de alimentos.Explicar el fundamento en cada etapa de

anlisis.


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II. FUNDAMENTO

Es este el medio selectivo ms adecuadopara el aislamiento de las especies de Vibrio

e inhibidor para la mayora de lasenterobacterias. Esta inhibicin se basa enlas altas concentraciones de tiosulfato ycitrato, la presencia de las sales biliares y

un pH fuertemente alcalino.


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III. MARCO TERICOVibrioes un gnero de bacterias Gramnegativas, perteneciente al orden de losVibrionales, de lasgamma-

proteobacterias, con forma de bacilos

curvados. Bioqumicamente se

caracterizan por dar positivo en laspruebas de la catalasa y de la oxidasa,tambin dan negativo en la adeninadihidrolasa,y positivo en la ornitinadescarboxilasa. Vibrio choleraeconcretamente es sacarosa y manitol

positivo y nitrato reductasa positivo. Esuna bacteria anaerobia facultativa, y sumetabolismo es fermentativo; puedenfermentar, entre otros sustratos, laglucosa.Poseen flagelacin polar, que lesotorga una movilidad mxima.
http://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Gammaproteobacteria


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CARACTERISTICASVibrio es un genero de bacteria Gram negativas, con forma

de bacilos, curvados. Bioqumicamente se caracterizan pordar positivo en las pruebas de catalasa y de la oxidasa. Esuna bacteria anaerobia facultativa, y su metabolismo esfermentativo, pueden fermentar, entre otros sustratos, laglucosa.

Pese a que nutricionalmente son un poco exigentes, seemplean medios especificos para aisalarlos de muestrasclinicas. El sodio estimula su crecimiento y ademas tolerapH alcalinas por eso se utiliza para su cultivo agua depeptona alcalina.

Sus requerimientos ambientales: el rango de temperaturas

de crecimiento estan entre 16y 42C con un optimo de 37C,con un rango de pH de 6.8 a 10.2 y un pH optimo de 7.0 a 8.0 Habitat natural: Se lo ha encontrado en ambientes marinosen regiones templadas o tropicales, en lagos y rios, enmoluscos y crustaceos, en pajaros y herbivoros aun lejos delas costas marinas. El numero de bacterias de Vibrio

cholerae disminuye a medida que la temperatura del aguabaa or debao de 20C


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El clera es una enfermedadrelacionada con el abastecimiento deaguas con poca higiene, o bien de los

alimentos provenientes de aguascontaminadas con materia fecal y quese consumen crudos. Tambin puedeaparecer V. cholerae O1 en moluscosbivalvos, crustceos o pescados que se

obtienen de aguas no contaminadas endonde el microorganismo forma partede la microbiota autctona.

La enfermedad del clera fue descritapor primera ocasin por Pacini en 1854.Esta se presenta por la ingesta de labacteria viable, la cual se establece enel intestino delgado y libera una toxinatermolbil. La produccin de esta toxinaprovoca diarrea acuosa causando lossntomas caractersticos del clera.


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Otros microorganismos pertenecientes algnero Vibrio que son causantes deenfermedades gastrointestinalestransmitidas por alimentos son V.parahaemolyticus y V. vulnificus.

V. parahaemolyticus es una bacteriahaloflica encontradas normalmente conmicrobiota normal de aguas y animalesestuarios. El microorganismo tiene unadistribucin mundial en ambientesestuarios y costeros, y se ha aislado demuchas especies de pescados, mariscos y

crustceos.V. vulnificus es una bacteria haloflicaencontrada en ambientes estuarios y esfenotpicamente similar a V.parahaemolyticus. Esta bacteria causaenfermedades transmitidas por alimentos

y en heridas, cualquiera de stas puedeprogresar rpidamente hasta unasepticemia mortal. Los moluscos bivalvoscrudos son la principal

fuente de transmisin alimentaria del V.vulnificus.

Vibrio parahemolitico

Vibrio vulnificus


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IV. PARTE EXPERIMENTALMateriales, reactivos y

equipos

Estufa a 37C

Gradilla

Mechero

Tubos de ensayo

Placas petriPipetas

Balanza

Pinzas

Vaso de licuadora y licuadoraSSP (solucin salina peptonada)

TCBS


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MUESTRA: PESCADO PEJERREY

Proveedor:VIVANDA Av.Pardo-Miraflores.

Responsable:LuceroRaymondi

Fecha de compra:27/10/14

Hora:5:00 pm


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PRE- ENRIQUECIMIENTO

Pesar 25g muestra enun matraz

Agregar 225ml AguaPeptonadaAlcalina(APA)Esta solucin va apreenriquecer, revitalizarsi es que hubiese

presencia de Vibrocholerae.Incubar por 6h/37C


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TCNICA DE AISLAMIENTO

A partir de la solucin incubada, sembrar en unAGAR TCBS(Tiosulfato Citrato Sales Biliares).Dejar incubar por 24h/ 37C


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DETECCIN DEVIBRIO CHOLERAE

Confirmacin Bioqumica (TSI): Si se encontraron colonias en la placa conagar TCBS, Inocular en un tubo con TSI

Incubar a 37C por 24h y confirmar losiguiente:

Lactosa (+)

Glucosa (+)

SH2 (-) Gas (-)


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DETECCIN DEVIBRIO CHOLERAE

RESULTADOS:

No se encontraron

colonias

Especificas(amarillas )

-No se realizaron

pruebas bioquimicas

REPORTE:Vibrio cholerae/25g muestra pescado:

AUSENCIA


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CONCLUSIONES

Se aprendi a determinar presencia de Vibriocholerae presentes en productos hidrobiolgicos.

Se conoci la tcnica de aislamiento de VibrioCholerae a partir de alimentos.

Se explic el fundamento en cada etapa deanlisis.


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DISCUSIONES:

Segn Durazo Beltrn El Agua peptonada

alcalina es un medio de enriquecimiento

utilizado para la bsqueda de Vibro cholerae a

partir de muestras clnicas y de alimentos ya que

la viabilidad de los vibrios se mantiene intacta apH alcalino para incrementar la recuperacin

de los mismos.

En la practica, se utiliz 225ml de AguaPeptonada Alcalina(APA) en 25g de muestra, conel objetivo de revitalizar la presencia de Vibriocholerae ya que la muestra de pescado seencontraba en refrigeracin antes de usarla.


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DISCUSIONES

Segn M Pascual y V Caldern en su libro microbiologa delos alimentos: Metodologa analtica para alimentos ybebidas dice:Entre las especies bacterianas de interssanitario que pueden formar parte de la microflora

normal del pescado, se encuentran : clostridium

botulinum tipo E y Vibrio parahemolyticus; existe

otra flora que, aunque no es normal en el pescado, se

puede transmitir al hombre por pescado

contaminado: Salmonella,Shigella y vibrio cholerae.

En la practica, el resultado fue AUSENCIA de Vibrio

Cholerae, y es por que debi a las buenas conservacion quela muestra tuv (en congelacion manteniendo su cadena defrio), mas no se realiz la Determinacion de Vibrioparahemolitico que es uno de los microorganismos conmayor riesgo de presencia en productos hidrobiologicos


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BIBLIOGRAFIA

Durazo B. (2006). Aprovechamiento de losproductos pesqueros. Universidad Autonoma deBaja California. Edicion Tomas Di Bella.

Fernndez Escartn, E. 1981. MicrobiologaSanitaria. Agua y Alimentos. 1. EDUG.Guadalajara, Jalisco, Mxico.

ICMSF. 1978. Microorganismos de los Alimentos1. Tcnicas de anlisis microbiolgico. Ed.

Acribia. Zaragoza, Espaa.

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