CROMATOGRAFIA DE GASES

En esta técnica cromatográfica, los componentes de una muestra vaporizada se separan como consecuencia de su reparto entre una fase móvil gaseosa y otra fase estacionaria liquida o solida mantenida en una columna. Al realizar separación cromatográfica de gases, la muestra se vaporiza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatográfica. La elución se logra mediante el flujo de una fase móvil se gas inerte. A diferencia de muchos otros tipos de cromatografía, la fase móvil no interacciona con las moléculas de analito, sino que su única función es transportar el analito a largo de la columna.

Son dos tipos de cromatografía de gases, la cromatografía de gas-liquido (CGL) y la cromatografía de gas-solido (CGS). La primera es de amplio uso en todos los campos de la ciencia y su nombre suele abreviarse a cromatografía de gases (CG). La de gas-solido se basa en una fase estacionaria sólida, donde la retención de los analitos ocurre como resultado de una adsorción física. Así pues esta técnica no h atenido una aplicación generalizada, salvo en la separación de ciertas especies de bajo peso molecular.

La cromatografía de gas-liquido se basa en el reparto del analito entre una fase móvil gaseosa y una fase liquida inmovilizada sobre la superficie de un sólido inerte o en las paredes del tubo capilar.

El uso de esta técnica exige algunos cuidados, entre ellos la correcta elección de la fase estacionaria (FE) y de la fase móvil (FM). La temperatura debe ser controlada, para asegurar la reproductibilidad de los análisis.

1 - Controles y depósito de gas de flujo / presión.2 - Gun (Tun) de la muestra.3 - La columna de cromatografía y Horno.4 - Detector.5 - Procesamiento Electrónico (amplificación) de la señal.6 - Registro de la señal (grabadora o PC).

TIPOS DE COLUMNAS

Columna

Es el lugar donde ocurrela separación. Se dice que es el corazón de un cromatógrafo.Los materiales con los cuales generalmente se pueden elaborar las columnas son: cobre, aluminio, acero inoxidable, vidrio o teflón. El relleno puede ser un sólido, o un líquido recubriendo un sólido.

COLUMNAS CAPILARES O TUBULARES ABIERTAS

Las columnas capilares son básicamente de dos tipos, tubulares abiertas de pared recubierta (Wall-coated open tubular, WCOT) o tubulares abiertas de soporte recubierto (Support-coated open tubular, SCOT). Las de pared recubierta son simplemente tubos capilares recubiertos con una fina capa dela fase estacionaria. En las columnas tubulares abiertas de soporte recubierto, la superficie interna del capilar posee un revestimiento de una película fina (~30µm) de un material de soporte, como barro de diatomeas. Este tipo de columna tiene una capacidad para la fase estacionaria varias veces mayor, en comparación con las de pared recubierta, de modo que su capacidad de muestra es mayor.

Las columnas capilares más usadas en esta técnica, son las columnas tubulares abiertas de sílice fundida (FSOT). Los capilares de sílice especialmente purificada, que contiene cantidades mínimas de óxidos metálicos. Estos capilares poseen una pared mucho más delgada que sus equivalentes de vidrio.

COLUMNAS EMPAQUETADAS

Actualmente, las columnas empaquetadas consisten en tubos de vidrio o de metal(inerte a ser posible como el acero inoxidable, Niquel, Cobre o Aluminio) o teflón y suelen tener entre 2-3 m de longitud, con diametro interno de 2-4 mm. Estos tubos estan densamente empaquetados con un material de empaquetamiento uniforme y finalmete dividido, o un soporte solido que sirve para mantener inmovil la fase estacionaria, de modo que esta quede expuesta a la fase movil un area de superficie tan grande como resulte posible.Debido a su longitud y a la necesidad de ser introducidas en un horno, las columnas suelen enrollarse en una forma helicoidal con longitudes de 10 a 30 cm, dependiendo del tamaño del horno.

El soporte ideal consiste en partículas esféricas pequeñas y uniformes, con una buena resistencia mecánica y áreas superficies de al menos 1m2/g. además, el material debe ser inerte a temperaturas altas y mojarse de manera uniforme con la fase líquida.

TIPOS DE DETECTORES

Detector

El detector es la parte del cromatógrafo que se encarga de determinar cuándo ha salido el analitopor el final de la columna. Es un dispositivo para revelar la presencia de las sustancias eluídas a la salida de la columna cromatográfica.

Las características de un detector ideal son:

Sensibilidad: Es necesario que pueda determinar con precisión cuándo sale analito y cuando sale sólo el gas portador. Tienen sensibilidades entre 10-8 y 10-15 g/s de analito. Respuesta lineal al analito con un rango de varios órdenes de magnitud.Tiempo de respuesta corto, independiente del caudal de salida.Intervalo de temperatura de trabajo amplio, por ejemplo desdetemperatura ambiente hasta unos 350-400ºC, temperaturas típicas trabajoNo debe destruir la muestra. Estabilidad y reproducibilidad, es decir, a cantidades iguales de analito debe dar salidas de señal iguales.

DETECTORES DE IONIZACION DE LLAMA (FID)

Es el mas usado y aplicable en cromatorafia de gases. Básicamente es un quemador de hidrógeno/oxígeno, donde se mezcla el efluente de la columna (gas portador y analito) con hidrógeno. Inmediatamente, este gas mezclado se enciende mediante una chispa eléctrica, produciéndose una llama de alta temperatura y provocando que muchos compuestos orgánicos produzcan iones y electrones. La detección consiste en la monitorización de la corriente que se produce al captar las cargas. La recolección de los iones y electrones se consigue aplicando varios centenares de voltios entre la punta del mechero y un electrodo colector, localizado encima de la llama. La corriente resultante (~10-12A) se mide entonces con un picoamperímetro.

La ionización de compuestos de carbono en unallama es un proceso poco conocido, si bien se ha observado que el número de iones producido es casi proporcional al de átomos de carbono reducidos en llama. El detector de ionización responde al número de átomos de carbono que entran en el detector por unidad de tiempo, de modo que es un dispositivo sensible a la masa, no a la concentración. En consecuencia, este detector tiene la ventaja de que los cambios en la velocidad de flujo de la fase móvil tienen un efecto mínimo en la respuesta del detector.

Este detector no es sencible a gases, como H2O, CO2,SO2 y NOx.

Ventajas:

Alta sensibilidad, del orden de 10-13 g/s. Amplio intervalo lineal de respuesta, 107 unidades. Bajo ruido de fondo (elevada relación señal/ruido). Bajo mantenimiento, fácil de fabricar.

Desventajas:

Destruye la muestra (la piroliza).

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TERMICA (DCT)

Fue uno de los primeros que se usaron en cromatografía de gases y todavia tiene muchas aplicaciones. Consiste en una fuente calentada mediante electricidad, cuya temperatura a una energia electrica constante depende de la conductividad termica del gas que lo rodea. El elemento calentado puede ser un alambre fino de platino, oro o tugsteno o un pequeño termistor. La resistencia eléctrica de este elemento depende de la conductividad termica del gas. La resistencia electrica de este elemento depende de la conductividad termicad el gas. Habitualmente, se usan detectores gemelos, uno localizado sobre la camara de inyeccion de muestras y el otro inmediantamente debajo de la columna; alternativamente tambien se puede dividir la corriente del gas. Los detectores se incorporan en los dos brazos de un corcuito de puente sencillo de modo

que se cancela la conductividad termica del gas portador. Ademas s eminimizan los efectos de las variaciones en la temperatura, preion y energia electrica.la conductividad termica del hielo del hielo

Ventajas de este detector:

Simplicidad. Amplio rango dinámico lineal, 105 unidades. Respuesta universal a compuestos orgánicos e inorgánicos. Detector no destructivo.

Desventajas:

Sensibilidad relativamente baja, 10-8 g de soluto/ml de gas portador. Imposibilidad de utilizarlo en columnas capilares (caudal de salida pequeño).

DETECTORES DE CAPTURA ELECTRONICA

Este se ha convertido en uno de los mas usados par amuestras ambientales, ya que responde selectivamente a compuestos organicos que contienen halogenos, como los plaguicidas y bifenilos policlorados. En este detector, el leuyente de la muestra de una columna pasa sobre un emisor de radiacion beta, usualmente niquel 63. Un electron del amisor causa la ionizacion del gas portador (en muchos casos nitrogeno) y la produccion de una corriente de electrones. En ausencia de especies organicas, este proceso de ionizacion genera una corriente constante entre par de electrodos. Sin embargo, la corriente disminuye mucho en precencia de moleculas organicas que contengan grupos funcionles electronegativos, que toienden a capturar electrones.el detector no es sensible a grupos funcionales del tipo de las aminas, alcoholes e hidrocarburos.

Estos detectores son muy sensibles y tienen la ventaja de no alterar significativamente la muestra. Sin embargo, la respuesta lineal del detector esta limitada a unos dos ordenes de magnitud.

Ventajas:

Simple y robusto. Bajo mantenimiento. No destructivo. Muy sensible, del orden de 10-12g/ml de gas portador.

Desventajas:

Bajo rango dinámico lineal, 10² unidades. Precauciones de uso debido a la presencia de material radiactivo (63Ni o tritio). Dicho

material se encuentra en un cilindro sellado de acero y debe ser revisado periódicamente.

ESPECTROMETRIA DE MASAS

Uno de los detectores más poderosos en cromatografía de gases es el espectrómetro de masas. La combinación de estas dos técnicas se conoce como cromatografía de gases/masas (CG/MS). El espectrómetro de masas mide la relación masa/carga (m/z) de iones que se producen a partir de la muestra. Muchos de losiones producidos son monovalentes (z=1), demodo que el usuario del espectrómetro de masas frecuentes habla de la medida dela masa de los iones, cuando en realidad se mide la relación masa/carga.

Sistema de vacío

Las moléculas de la muestra entran en el espectrómetro de masas molecular típico. Las moléculas de la muestra entran en el espectrómetro por el sistema de entrada. En el caso de la CG, la muestra está en la forma de vapor y la entrada debe hacer de interface entre el sistema CG a presión atmosférica y el sistema del espectrómetro de masas, de baja presión (10 -5 a 10-8 torr.) se necesita un sistema de vacío refinado para mantener la baja presión. En el espectrómetro de masas, las fuentes de ionización de los espectrómetros de masas moleculares tienen energía suficiente para romper los enlaces químicos en las moléculas de muestra, pero no para descomponer esas moléculas en sus átomos. Las fuentes de ionización en la CG/MS producen fragmentos, que también se pueden ionizar. Por lo tanto, de la fuente de iones salen los iones de las moléculas dela muestra, llamados iones moleculares, fragmentos ionizados y moléculas ionizadas. Los fragmentos y moléculas sin carga normalmente son eliminados de la fuente de iones por las bombas de vacío utilizadas para producir el ambiente de baja presión.

La sección siguiente del espectrómetro de masas es el analizador. Este sirve para dividir los iones según sus valores masa/carga (m/z). Posteriormente, los iones separados se detectan y el sistema de análisis de datos genera una gráfica de la intensidad de los iones frente a los valores m/z.

APLICACIONES

La GC tiene dos importantes campos de aplicación. Por una parte su capacidad para separar mezclas orgánicas complejas, compuestos organometálicos y sistemas bioquímicos. Su otra aplicación es como método para determinar cuantitativa y cualitativamente los componentes de la muestra. Para el análisis cualitativo se suele emplear el tiempo de retención, que es único para cada compuesto dadas unas determinadas condiciones (mismo gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retención. En aplicaciones cuantitativas, integrando las áreas de cada compuesto o midiendo su altura, con los calibrados adecuados, se obtiene la concentración o cantidad presente de cada analito.

Algunos ejemplos típicos de las aplicaciones de la cromatografía de gases son el análisis de los hidrocarburos líquidos y gaseosos del petróleo y el análisis de los productos de reacciones orgánicas, puede emplearse también para microseparaciones preparativas y también con aparatos debidamente modificados, preparaciones a gran escala.

Entrada

Fuente deIonización

Analizador Detector de iones

Sistema de datos

En las industrias se enfoca principalmente a evaluar la pureza de los reactantes y productos de reacción o bien a monitorear la secuencia de la reacción, para los fabricantes de reactivos químicos su aplicación para la determinación de la pureza es lo más importante.

En la investigación es un auxiliar indispensable para diversas técnicas de evaluación, entre las principales están los estudios cinéticos, análisis de adsorción a temperatura programada, determinación de áreas específicas por adsorción de gas y determinación de isotermas de adsorción.

En el campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios de contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos, lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.

En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de la cromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, las mezclas de gases de refinería, gases de combustión, etc.

CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA RESOLUCION (HPLC)

La cromatografía liquida de alta resolución (HPCL) es el tipo de cromatografía de elución más versátil y ampliamente utilizado. Los líquidos la emplean para separar y determinar especies en diversos materiales orgánicos, inorgánicos y biológicos,separa con gran eficacia, identifica los compuestos separados por la columna y además lo cuantifica por su altura o área de picos en el cromatograma. La fase móvil es un líquido que circula a través de una columna en la que está contenida la fase estacionaria. La fase móvil no sólo arrastra al analito, sino que existen interacciones intensas entre el analito y la fase móvil. Los tipos de cromatografía liquida de alta resolución suelen clasificarse según el mecanismo de separación o el tipo de fase estacionaria.Estos comprenden:Cromatografía de reparto o de líquido-líquido:un soporte sólido de sílice. Se la subdivide en cromatografía en fase normal y fase reversa.En la cromatografía en fase normal, la fase fija es polar (como por ejemplo agua o trietilenglicol) y los compuestos menos polares eluyen primero.En la cromatografía en fase reversa, el compuesto unido químicamente es un hidrocarburo alifático y se emplean fases móviles polares. En este caso, las sustancias más polares eluyen primero.Cromatografía de absorción o de líquido-sólido: La fase fija es un sólido y se utiliza casi exclusivamente sílice (sílica) y en mucha menor medida alúmina.Cromatografía de intercambio de iones o iónica:Se utilizan columnas rellenas con resinas de intercambio iónico para separar y determinar iones.Cromatografía de exclusión molecular:La fase fija está formada por partículas poliméricas o de sílice que contienen una red uniforme deporos y llevan a cabo un fraccionamiento relacionado con el tamaño molecular. Las moléculas detamaño mayor son excluidas y eluyen primero, mientras que las más pequeñas que penetran enlos poros son retenidas más tiempo.

La retención cromatográfica es función de:La fase móvil.La fase estacionaria.El analito.Todas las especies que pueden disolverse pueden separarse eligiendo la combinación adecuada de fase móvil y fase estacionaria.

Componentes básicos en un equipo de HPLC:De forma esquemática los componentes básicos son:Sistema de suministroInyector Columna Detector RegistradorBombeo Conducciones de la fase móvil.En esta figura pueden observarse con más detalle:

Esquema de un aparato de HPLC.

COLUMNAS:

Construcción–Tubo de acero inoxidable (presiones hasta 10000 psi)–Ocasionalmente, tubo de vidrio con paredes resistentes (presiones hasta 600 psi)

•Columnas analíticas–Rectas, de 10 a 30 cmde longitud–Extender acoplando columnas adicionales–Diámetro interno: 4 a 10 mm–Tamaños de partículas de los rellenos: 5 a 10 μm–Standard: 25 cmlongitud; 4.6 mmdiámetero; 5 μmparticulas; N = 40,000 to60,000–Alta performance: 3 a 7.5 cmlongitud; 1-4.6 mmdiámetro; 3 o 5 mmpartículas; N = 100000 platos/metro (Ventaja: rapidez y mínimo consumo de disolvente)

•Precolumnas–Elimina materia en suspensión y componentes de la muestra que se unen irreversiblemente a lafase estacionaria. – Composición similar a la columna analítica. Se usa para mejorar la vida de la CA. Se reemplaza cuando se contamina.

• Columnas termostatizadas– La mayoría de las aplicaciones no requieren control de la temperatura y se trabaja a T ambiente. Aunque T constante mejora el cromatograma. – Los instrumentos modernos tienen control de T desde ambiente a 100-150 ºC

• Rellenos de la columna – Relleno pelicular: Esferas de vidrio o polímero no porosas de 30 a 40 μm de diámetro. En la superficie de las esferas se deposita una capa delgada y porosa de silica, alúmina, polímero. – Rellenos de partículas porosa: Micropartículas porosas con 3 a 10 μm de diámetro. Las micropartículas son de silicao alúmina o de un polímero. Se recubren muchas veces con películas orgánicas que se unen químicamente o físicamente a la superficie.

DETECTORES:

A diferencia de la cromatografía de gases, en HPLC no existen detectores tan universalmente aplicables, ni tan fiables tampoco, así pues, el detector usado depende de la naturaleza de la muestra. En lo que sí coinciden cromatografía de gases y HPLC, son las cualidades enumeradas en los detectores de cromatografía de gases.Estos deben tener un volumen muerto bajo para minimizar el ensanchamiento de banda adicional de columna.En HPLC existen dos tipos básicos de detectores:

Los basados en una propiedad de la disolución: Que corresponden a una propiedad de la fase móvil, como el índice de refracción, la constante dieléctrica, la densidad...Los basados en una propiedad del soluto: Es decir, responden a alguna de las propiedades del soluto, como la absorbancia UV, fluorescencia, intensidad de difusión, que no son propias de la fase móvil.En la siguiente tabla se presentan los detectores más comunes empleados en HPLC y algunas de sus propiedades más importantes:

Detectores más comúnmente usados en HPLC.

Detectores de Absorbancia: Miden la absorbancia de los efluyentes de una columna cromatográfica. Muchos detectores de absorbancia son dispositivos de doble haz, uno de los haces pasa por la cubeta de flujo y el otro a través de un filtro que reduce su intensidad. Para comparar las intensidades de los dos haces se usan detectores fotoeléctricos contrastados. En cualquier caso, el cromatograma consiste en una representación en función del tiempo del logaritmo del cociente de las dos señales transducidas. También se utilizan instrumentos de un solo haz, en cuyo caso, las medidas de intensidad del disolvente se almacenan en la memoria de un ordenador y al final se recuperan para el cálculo de la absorbancia.

Detectores de Fluorescencia: La fluorescencia es detecta por medio de un detector fotoeléctrico colocado perpendicularmente respecto al haz de excitación. Los detectores más sencillos utilizan una fuente de excitación de mercurio, y uno o más filtros para aislar la radiación fluorescente.

Detectores de Índice de refracción: Los detectores de índice de refracción tienen la ventaja de que responden a casi todos los solutos. Es decir, son detectores universales análogos a los detectores de llama en cromatografía de gases. Se añade que son fiables,no dependen del caudal, son muy sensibles a los cambios de temperatura, y se han de mantener a una temperatura constante. Por otra parte, no son tan sensibles como la mayoría de los otros detectores, y por lo general no se pueden utilizar en la elución con gradiente.

Detector de dispersión de luz: El efluyente de la columna pasa a un nebulizador donde se convierte en una fina niebla gracias a un flujo de nitrógeno o aire. Estas finas gotitas pasan por un tubo de conducción a una determinada temperatura de forma que se evapora la fase móvil y se originan partículas de analito. Estas partículas pasan a través de un láser y por un fotodiodo de silicio se detecta la radiación dispersada perpendicularmente al flujo. Su principal ventaja es que resulta ser más sensible que el detector de índice de refracción.

Detectores Electroquímicos: Actualmente hay varios tipos de detectores electroquímicos, que se basan en cuatro métodos: amperometría, voltamperometría, coulombimetría, conductimetría.

Detectores por espectrometría de masas: Consiste en el acoplamiento de la cromatografía de líquidos con la espectrometría de masas. De forma general se pueden obtener tanto cromatogramas a tiempo real como reconstruidos por ordenador hasta los espectros de los picos eluidos.

APLICACIONES

Determinaciones cuantitativas exactas.

Separación de especies no volátiles.

Gran aplicabilidad: aminoácidos, proteínas, ácidos nucleicos, hidrocarburos, carbohidratos, fármacos, plaguicidas, antibióticos, esteroides, especies organometálicase inorgánicas.

Cromatografía de reparto en productos de alimentación: edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos, colorantes, aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos.

Las aplicaciones de la cromatografía iónica está el análisis de drogas y sus metabolitos, sueros, conservantes de alimentos, mezclas para vitaminas, azúcares, y preparaciones farmacéuticas.

Respecto a las aplicaciones referidas a productos alimenticios en cromatografía por exclusión de tamaños: separación de ácidos grasos, determinación de glucosa fructosa y sacarosa en zumos enlatados.

Cromatografía de exclusión, esta técnica se emplea en la separación de proteínas de alimentos, determinación de glucosa y fructosa en zumos de fruta, etc.

Esta técnica tiene como ventaja su capacidad de separar macromoléculas de interés en la industria biotecnológica y química. Ha sido un método muy útil para la separación de proteínas (enzimas, hormonas) y ácidos nucleicos (DNA y RNA) con gran resolución.

La cromatografía de adsorción es particularmente adecuada para el análisis de moléculas no ionizantes, insolubles en agua y relativamente simples, que frecuentemente son isómeros o compuestos muy relacionados. El intervalo de compuestos que pueden separarse se extiende es de los hidrocarburos muy polares hasta compuestos polifuncionales fuertemente polares.

Esta cromatografía se ve poco influida por las diferencias en peso molecular y más por los grupos funcionales específicos. En consecuencia, la separación por adsorción de compuestos que difieren solamente en el grado o tipo de sustitución alguilo, como en los miembros de las series homólogas, es pobre. Esta cromatografía se utiliza en la separación de la vitamina D3 y sus metabolitos las vitaminas A, D y E (y compuestos muy relacionados a estas vitaminas), muchas drogas de abuso (LSD, por ejemplo), antidepresivos tricíclicos, bloqueadores beta y los PTHamino ácidos. Los aceites naturales y los extractos de esencias se analizan fácilmente y los pigmentos menos polares de las plantas, tales como los carotenoides y las porfirinas, se han separado con éxito durante muchas décadas. Los ésteres también son factibles de ser separados, siendo los glicéridos y los ftalatos típicos de esta clase de compuestos. También han sido separadas en columnas de sílice las aflatoxinas y otras micotoxinas.

En química clínica cada vez se realiza con más frecuencia el análisis cuantitativo de las drogas deabuso por medio de la cromatografía de fase reversa. Los productos farmacéuticos que se analizan en forma rutinaria incluyen a los barbitúricos, drogas antiepilépticas, analgésicos y sedantes. Aplicaciones adicionales de los métodos de fase reversa son los conservadores alimentarios, herbicidas y azúcares. En el campo farmacéutico ha venido en aumento el uso de esta técnica a costa de la cromatografía de adsorción. Un amplio espectro de biomoléculas, lipofílicas o iónicas, pequeñas o grandes, pueden ser separadas debido a que el contenido de agua en la fase móvil puede variar desde el 100% hasta porcentajes muy bajos o ninguno en absoluto.Los compuestos lipofílicos, tal como los triglicéridos, que tienen una solubilidad muy pobre en los disolventes acuosos de la fase inversa, con frecuencia pueden separarse con una fase inversa no acuosa utilizando una columna empacada de octadecilo y disolventes orgánicos polares como el acetonitrilo o el tetrahidrofurano.

En la actualidad, la cromatografía ha alcanzado tal nivel de fineza y especialización que cada uno de sus tipos constituyen herramientas imprescindibles en las áreas de la ciencia y la tecnología, en la industria química, farmacéutica, cosmética, en estudios ambientales, en la clínica, en alimentos, etc.

DIFERENCIAS ENTRE CROMATOGRAFIA DE GASES Y CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS

En HPLC no existen detectores tan aplicables universalmente, ni tan tampoco tan fiables como en CG.

El detector en HPLC no es necesario que sea sensible en un intervalo tan grande de temperaturas.

En HPLC, en lugar de variar la temperatura de la columna para mejorar la resolución del cromatograma, se cambia la composición de la fase móvil a lo largo de la separación utilizandomezclas de entre dos y cuatro solventes.

Dado que los detectores de HPLC son no destructivos, es posible recuperar los productos que salen de él.

El cromatografo de gases se trata de un equipo sencillo y barato en comparación con HPLC.La HPCL puede acomodar muestras no volátiles e inestables térmicamente y es aplicable a iones inorgánicos.

La CG se conecta fácilmente con la espectroscopia de masas (MS).

La CG, ofrece la ventaja de la velocidad y simplicidad del equipo, pero la HPLC es aplicable a sustancias no volátiles y materiales térmicamente inestables.

En la HPCL la fase móvil es un disolvente líquido que contiene la muestra como mezcla de soluto, mientras que en la CG la fase móvil es gas.

La CG realiza un análisis cuantitativo general de mezclas multicomponentes de orgánicos volátiles, mientras que la HPCL técnica de separación para los materiales menos volátiles eiónicos.

En La HPCL su fenómeno molecular es el reparto entre una solución líquida y un substrato, lo contrario a la CG donde su fenómeno molecular es el reparto entre una fase de vapor y el substrato.

En el análisis cuantitativo la HPCL tiene una aplicación amplia en los materiales volátiles, y bastante sensibilidad en casos especiales en el caso de la CG su aplicación es amplia pero en los materiales menos volátiles.

BIBLIOGRAFIA

Fundamentos de la química analítica. Octava edición. Autores: Skoog, West, Holler, Crouch.

www.monografias.com

http://labquimica.wordpress.com/2008/02/07/cromatografia-liquida-de-alta-eficiencia-hplc/