analisis de lipoproteinas

7/23/2019 Analisis de Lipoproteinas

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Anlisis de las Lipoprotenas.Anlisis de las Lipoprotenas.

lisis de las Lipoprotenlisis de las Lipoprotenas.

Anlisis de las Lipoprotenas.

Lic. TM. MIGUEL SANDOVAL VEGASProfesor Asociado

ac!ltad de Medicina"UNMSM


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A#SO$%I&N DE LOS L'PIDOS

TAG

ESTE$ES DE%OLESTE$OL

OSOL'PIDOS

D I E T A D I G E $ I D O

A G L

( MONOGLI%)$IDOS

GLI%E$OL

%OLESTE$OL

LISOOSOL'PIDOS


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A#SO$%I&N DE %OLESTE$OL


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$ANSPO$TE DE %OLESTE$O


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TABLA 1

LIPOPROTENAS

QUILOMICRONES

VLDL LDL HDL

Densidad < 0.! < 0.! "1.00#

1.00#"1.0#$

1.0#$"1.%10

M&'i( E(e)*+,-. ORIEN PRE"BETA BETA AL/A

A,(i,+,*enas A, B 23 A, B 100

A, C " I A, C " IA, C " II A, C " II BETA BETA

A, C " III A, C " III BETA

A, E A, E

A, A " IVTa4a5, 6a7 $00"!00 %30"8!0 %10"%!0 0"1%0

P+,*enas % 8 %1 2#

T+i9(i):+id,s 3% !$ 3

C,(es*e+,( %% 28 1

/,s-,(id,s 8 13 %$ %#


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A,(i,+,*einas

Pes,4,(e);(a+da

C,n)en*+a)i&nen (as4a 9=( /;n)i&n

A, AI %3>000 1.0 ? 1.! A)*i'a+ en@i4a LCAT

A, AII 18>000 0.$ ? 0.!

A, AIV 2#>000 0.1! ? 0.%0

Se)+e)i&n de;i(,4i)+,nes *+ans,+*e +e'e+s, de),(es*e+,(.

A, B23 %!0>000 0.! Se)+e)i&n de;i(,4i)+,nes

A, B100 !1$>000 0.3 ? 1.0In*e+a))i&n ),n +e)e*,+LDL

A, CI #>!00 0.02 ? 0.08 A)*i'a)i&n de LACT

A, CII 3>!00 0.0$ ? 0.03 C,-a)*,+ de LPL

A, AIII 3>8!0 0.3 ? 0.1!Inii)i&n de LPL s;+e)e*,+

A, E $>000 0.0$ ? 0.0#In*e+a))i&n ),n +e)e*,+LDL +e)e*,+ A, E


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Ta*an+o relati,o entre as di,ersaslipoprotenas!ilo*icrons e VLDL s/o as *aiores e de *aior teor de

0ord!ra.Os 1!ilo*icros t2* !*a *eia",ida de no *3i*o 45 *in!tos6 o1!e si0ni7ca 1!e o clearance se8a de 9 a :5 +oras.VLDL te* !*a *eia ,ida de : +ora.LDL te* *eia ,ida de ;5 +oras.

Preparaci


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Ra@,nes ,+ (as ;e se +ea(i@a e( eFa4en de),(es*e+,(

E( e+G( de +ies9, ),+,na+i, se +ea(i@a ),n 4a,+-+e);en)iaC,4, ;na +;ea de de*e))i&n a+a de*e+4ina+ (asa(;d 9ene+a( de (a e+s,na

Pa+a ),n*+,(a+ a (a e+s,na si *iene an*e)eden*esde +,(e4as )a+da),s ; ,*+,s *+as*,+n,s+e(a)i,nad,s ),n (a a*e+,es)(e+,sisPa+a de*e+4ina+ (a e-e)*i'idad de (a die*a (,s4edi)a4en*,s en e( ),n*+,( de( ),(es*e+,( a(*,.

?Valores nor*ales@ de colesterolLDL #0 " 1$0 49=dLHDL s;e+i,+ a 2! 49=dL

CT 4en,s de %00 49=dLTA 10 " 1!0 4 =dL


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ETE$MINA%I&N DE %OLESTE$O%OLESTE$OL TOTAL OIDASA"PE$OIDASA


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M)TODO ALTE$NATIVO.M:*,d, en@i4*i), de ;n*, Gna(.

/;nda4en*,."E( /;nda4en*, es si)a4en*e e( 4is4, ;e e( 4:*,d, des)+i*,an*e+i,+4en*e en e( M:*,d, de R;*ina> sa(', ;e se +ee4(a@a (a2"a4in,an*ii+ina ,+ 2"a4in,-ena@,na62"A/7> e( +,d;)*, Gna(de (a ;ni&n ,Fida*i'a de :s*e ),n e( -en,( 9ene+a 26P"

en@,;in,na 4,n,i4in,7 -ena@,na J 2H%O > (, ;e 9ene+a ;n),4(eK, ),(,+ead, 4edi(e a !00 n4.

$eacciO>

>O> 9"Afenol 9Bp.Feno1!inona *onoi*inoC BPODC fenaona 9>O


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M)TODO DE $EE$EN%IAM:*,d, de ABELL ),(.

Es*e 4:*,d, ),nsis*e en (a id+&(isis de (,s :s*e+es de),(es*e+i(,> eF*+a))i&n ),n e*e+e de e*+,(e, desa++,((, de(),(,+ ),n ;n +ea)*i', de )id, a):*i),"and+i), a):*i), ")id,s;(-+i), . C,n e( e;i, a+,iad, ;ena ai(idad *:)ni)a se;eden ,*ene+ +es;(*ad,s eFa)*,s +e)is,s. La +ea+a)i&n),nsis*e en (a eF*+a))i&n de( ),(es*e+,( ),n e,(ina> id+&(isis;4i)a de (,s :s*e+es 6Sa,niG)a)i&n7 4edi)i&n de(),(es*e+,( *,*a( ,+ (a +ea))i&n de Liee+4ann"B;+)a+d > (ades'en*aKa ;e *iene es ;e es ;n 4:*,d, 4; (a,+i,s,.


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TODOS DE SEPA$%I&N DE LIPOP$OTEIN

Porultracentrifugacin:Permite separar las diferentes

familias de lipoprotenas en base

a sus densidades. Est basada

en dos propiedades, una es labaja densidad que tienen las

lipoprotenas respecto a otras

macromolculas plasmticas y

otra es que cada tipo de

lipoprotena tiene una densidad

diferente; as las lipoprotenaspueden ser separadas de otras

protenas plasmticas y a su vez

ser separadas entre ellas.


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Sea+a)i&n de(i,+,*einas ,+

e(e)*+,-,+esis

M)TODOS DE SEPA$%I&N DE LIPOP$OTEINAS


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TODOS DE DETE$MINA%I&N DE LIPOP$OTEIN

Por precipitacin: Las protenas precipitan en presencia de poli aniones como el sulfato de

heparina o en presencia de cationes divalentes como el Ca +2, Mg +2, y Mn +2. icha

precipitacin est! influida por varios factores pero se han esta"lecido condiciones para #uelas principales protenas precipiten.

$tros agentes precipitantes: %ulfato de de&trano con MgCl2 o !cido fosfotiugntico con MgCl2.


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M)TODOS DE DETE$MINA%I&N DE LIPOP$OTEINAS

DETEMINA%I&N DE LDL"c


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Determinacin de !D! colesterol

El !D! es precipitado

selectivamente mediante el uso de

"eparina #$$$$$ %&!

'reactivoprecipitante !D!(, quedespus de la centrifu)acin queda

en el sobrenadante las

lipoptroteinas *D! y +!D!, los

cuales son determinados

colorimetricamente, finalmente la

concentracin de !D!se encuentrapor diferencia entre el colesterol

total y la concentracin de esta

prueba

M)TODOS DE DETE$MINA%I&N DE LIPOP$OTEINAS

DETEMINA%I&N DE LDL"c

LDL

DL VLDLDe*e+4ina)i&n de),(es*e+,(

LDL") CT ? 6HDL J VLDL


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LAS APOLIPOP$OTEINAS


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A,(i,+,*einas

Pes,4,(e);(a+da

C,n)en*+a)i&nen (as4a 9=( /;n)i&n

A, AI %3>000 1.0 ? 1.! A)*i'a+ en@i4a LCAT

A, AII 18>000 0.$ ? 0.!

A, AIV 2#>000 0.1! ? 0.%0

Se)+e)i&n de;i(,4i)+,nes *+ans,+*e +e'e+s, de),(es*e+,(.

A, B23 %!0>000 0.! Se)+e)i&n de;i(,4i)+,nes

A, B100 !1$>000 0.3 ? 1.0In*e+a))i&n ),n +e)e*,+LDL

A, CI #>!00 0.02 ? 0.08 A)*i'a)i&n de LACT

A, CII 3>!00 0.0$ ? 0.03 C,-a)*,+ de LPL

A, AIII 3>8!0 0.3 ? 0.1!Inii)i&n de LPL s;+e)e*,+

A, E $>000 0.0$ ? 0.0#In*e+a))i&n ),n +e)e*,+LDL +e)e*,+ A, E


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!a apolipoprotena 'po ( se encuentraasociadas a las lipoprotenas *D!, con dos

formas la po #, que corresponde al - / de

las *D! y la po 0 que es el 0$/ de las *D!.

1iempre que se encuentre *D! elevado

aparecer la po elevada, siendo as ms

frecuente en las mujeres que en los "ombres.

!a medicin de la po0 es un indicador mejor

que el *D! en el ries)o disminuido de

arterioesclerosis.

APOLIPOPROTEINA A

La apolipoprotena A-I y A-II constituyen aproximadamente el 90% del total de las

protenas de la HDL.

La relacin entre apo A-I/apo A-II en HDL es 3! aproximadamente.

La apo A-I es un importante componente estructural de la HDL y adem"s es un co#actor

de la lecitin colesterol acil trans#erasa $LA& en'ima responsa(le de la #ormacin de

colesterol plasm"tico).


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APOLIPOPROTEINA A

Ni,eles nor*ales de Apo AEn ,4+es desde 8! a 1#0 49=dL. En 4;Ke+es desde

30 a 18! 49=dL.

Edad Masculino (mg/dl) Femenino (mg/dl)

2- a3os 402## 4$2##

524 a3os 462## 472##

#$2## a3os 462## 402##

#02#8 a3os 552## 582#76

#72# a3os 52#84 462#76

#62#- a3os 582#76 462##

0$204 a3os 5#2#8 5$2#57

8$284 a3os -42# 582#5-

7$274 a3os #$$2#7$ 482#5#

$24 a3os 5#2#64 -620$7

6$26 a3os 562#66 #0020#7

Valores de referencia


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MHtodo: 9D:, :9; E!91; inmunonefelometra, inmunoensayo, turbidimetra.!os dos ltimos m:todos son los ms usados.

APOLIPOPROTEINA A

Utilidad clnica:Evaluaci&n temprana de ries)o

coronario. Estimaci&n de ries)oen personas con una "istoriafamiliar de cambios

ateroscler&ticos tempranos.De forma similar con el *D!2,

el ries)o es inversamente

proporcional a los valores de apo

9.


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Variables preanalticas:

Aumentado:

:educci&n de peso en pacientes consobrepeso, ejercicio fsico 'po 29(,in)esti&n de aceite de pescado, post2

parto, incremento de colesterol de ladieta, menopausia.

Disminuido:

=umar, dieta rica en carbo"idratos o

)rasos poliinsaturados.

po 29> administraci&n de alco"ol,ayuno, dieta rica en fibras,administraci&n endovenosa de"eparina, terapia "ormonal de

reemplazo.

APOLIPOPROTEINA A


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+ariables por dro)as>

Aumentado:

arbamacepina, estr&)enos, etanol 'moderada(,derivados del cido fbrico, lovastatin, niacina,

anticonceptivos orales, fenobarbital, difenil"idantona,estatinas en )eneral, cido nicotnico, vitamina .po 299> deficiencia de "ormona de crecimiento,

deficiencia de # antitripsina, enfermedad fibroqustica demama.

Disminuido:

ndr&)enos, beta bloqueantes, diur:ticos, probucol,pro)estinas.

APOLIPOPROTEINA A


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APOLIPOPROTEINA B

A, B100 es en e( ),n*eF*, de( es*;di, de ;naie+(ie4ia si+'e a+a e'a(;a+ (,s -a)*,+es de+ies9, de a+*e+i,es)(e+,sis> en-e+4edades)i+);(a*,+ias> ),+,na+ias> e*). S; e(e'a)i&na;4en*a e( +ies9, de es*e *i, deen-e+4edades.

La A,(i,+,*ena B100 6A,B1007 es e(+in)ia( ),4,nen*e ,(ie*di), de (as(i,+,*enas LDL> )asi (a 4i*ad de (as 4is4asde (as VLDL.

La A,B100 se sin*e*i@a en e( 9ad, s,n e(4e)anis4, de *+ans,+*e de ),(es*e+,(end&9en, 4s i4,+*an*e. La A, B100 *ieneaGnidad ,+ e( +e)e*,+ de (a LDL si*;ad, en (as;e+G)ie )e(;(a+> es (a +in)ia( )a;san*e de(de&si*, de ),(es*e+,( en (as ):(;(as.


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APOLIPOPROTEINA B

La apolipoprotena # e3iste en dos for*as= apo#":55 apo #"9J6 1!e di7eren en s! sec!encia

a*inoacdica en peso *olec!lar= La apo #"9J6de sntesis intestinal6 co*ponente de los M6posee !n peso *olec!lar de >;9.555. La apo #":556 sintetiada en el +0ado for*a parte de laVLDL6 transferida a las IDL l!e0o a las LDL enla cadena de delipidaciones posee !n PMapro3i*ado de K55.555%ada partc!la de VLDL contiene !na *olHc!la

de apo #":55. En el estado de a!no6 la *aorade la apo # plas*tica es la apo #:55.

La apo #":55 no p!ede *o,erse desde !napartc!la de lipoprotena a otra6 el re*anentede apo #":55 VLDL con la lipoprotena escataFoliado a LDL. Un per7l ad,erso de apo"#apo A"I es !n *arcador potencial para ries0ode enfer*edad cardaca coronaria.

Modi7caciones del $es!ltadoA!*entan apo # :55= ali*entaci


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APOLIPOPROTEINA B

Ni,eles nor*ales de Apo #:55En ,4+es desde !0 a 1%! 49=dL. En 4;Ke+es desde 20 a 1%0

49=d(.

Edad Masculino (mg/dl) Femenino (mg/dl)

2- a3os 7-2#$6 742##$

524 a3os 742#$ 82#80

#$2## a3os 02##$ 72#0#

#02#8 a3os 762##8 762##$

#72# a3os 772#$8 7#2#$5

#62#- a3os 752#84 7#246

6$26 a3os 762#-7 762#70

Valores de referencia


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APOLIPOPROTEINA B!os niveles aumentadosde

apo ?#$$ se relacionan con>@*iperlipemia tipo 99a, 99b, 9+ y +

@1ndrome nefrtico@Diabetes@*ipotiroidismo@Embarazo@olestasis@ardiopata isqumica

coronaria@noreAia

!os niveles disminuidos de

apo ?#$$ se relacionan

con>*ipertiroidismo


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P$OTE'NAS T$ANSE$IDO$AS DE %OLESTE$OL OSOL'PIDOS B%ETP P%TPC

P$OTE'NAS T$ANSE$IDO$AS DE %OLESTE$OL


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%e han identificado varios transportadores de esteroles entre los #ue se

incluyen el '(C )ATP-binding cassette) A1, ABCG1, ABCG4, '(C* y'(C*. '(C'- es un transportador monomrico #ue reside en la

mem"rana plasm!tica de te/idos tales como el hgado, el intestino, la

placenta, el te/ido adiposo y el "a0o.

Los transportadores '(C consisten en protenas integrales de mem"rana#ue utili0an la energa generada por la hidrlisis de '1P para el transporte

de un sustrato a travs de la mem"rana. ichos transportadores

pertenecen a una gran familia de protenas implicadas en el transporte de

un sustrato especfico de un compartimiento a otro.

l '(C'- ha sido identificado como un transportador especfico de

esteroles aun#ue tam"in se ha descrito #ue transporta fosfolpidos y se

cree #ue es un paso limitante en el transporte reverso de colesterol.


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Los transportadores dimricos ABCG1, ABCG4, ABCG5, y ABCG8, estn

probablemente asociados a membranas de orgnulos intracelulares y todos

ellos estn implicados en el trfico intracelular de esteroles en macrfagos

!en el caso de ABCG1 y "ui#s ABCG4$ y en el %&gado e intestino delgado'n este sentido, mutaciones en los genes ABCA1 y ABCG5(G8 se traducen

en alteraciones en el metabolismo de colesterol) enfermedad de *angier y

sitosterolemia+4,8 La enfermedad de *angier, un trastorno en el "ue el

eflu-o de colesterol desde las clulas es defectuoso, es probablemente el

e-emplo ms caracter&stico de un defecto en la funcin de ABCA1+. Lae/presin de ABCA1 se encuentra transcripcionalmente regulada por los

%eterod&meros L0(0+

P$OTE'NAS T$ANSE$IDO$AS DE %OLESTE$OL


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i0!ra. Papel de L$ en el transporte re,erso de colesterol.En es*e es;e4a se +e+esen*a e( )i+);i*, de *+ans,+*e de( ),(es*e+,( ind;)id,,+ (a a)*i'a)i&n de LR desde (a n*i4a de (a a+*e+ia as*a (a i(is. AB> )id,si(ia+es ABC> ATP-binding cassette; C, colesterol; CYP7A1, colesterol 7hidroxilasa; EC> :s*e+es de ),(es*e+,( LDL> (i,+,*enas de aKa densidad LDLR>+e)e*,+ de LDL LPL> (i,+,*ena (iasa ,F"LDL> (i,+,*enas de aKa densidad,Fidadas LRP> +,*ena e4a+en*ada ),n e( +e)e*,+ de LDL PLTP> +,*ena*+ans-e+id,+a de -,s-,(id,s PTEC> +,*ena *+ans-e+id,+a de :s*e+es de


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%na de las funciones ms importantes de las *D! es el transporte

reverso del colesterol desde los macrfa)os y clulas tisulares al

")ado donde ser eAcretado directamente o tras su conversin en

cidos biliares '=i)ura 0(. Este ciclo comienza con la transferenciade =! desde las clulas por el transportador ?# a las po #

pobres en lpidos formando las preC2*D!, que por un mecanismo

an desconocido comienzan a car)arse tambin de colesterol libre.

Estas preC2*D! por accin de la ! 'que esterifica el colesterol

libre( las convierte en F2*D! esfricas y peque3as.

$OL DE LAS P$OTE'NAST$ANSE$IDO$AS DE %OLESTE$OL

OSOL'PIDOS


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HEMOS VISTOM:*,d,s de An(isis de (asLi,+,*enas. T:)ni)as de sea+a)i&nde (as Li,+,*enas. Si9niG)ad,C(ni), de (as A, AI B. R,( de (as

+,*enas *+ans-e+id,+as de ),(es*e+,( -,s-,(id,s

Lic. TM. MIGUEL SANDOVAL VEGASProfesor Asociado

ac!ltad de Medicina"UNMSM

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G$A%IAS

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