laurea in scienze infermieristiche - ii° anno lezioni di immunoematologia

Laurea in Scienze Infermieristiche - II°

anno

Laurea in Scienze Infermieristiche - II°

anno

LEZIONI DI

IMMUNOEMATOLOGIA

LEZIONI DI

IMMUNOEMATOLOGIA

Altri Sistemi Gruppo-ematici


Oltre al sistema AB0 ed Rh esistono molti altri sistemi di gruppi sanguigni e molti antigeni nell’ambito di ciascuno di questi sistemi.

Alcuni di questi, come il Kell, il Kidd, il Duffy, assumono una grande importanza nella pratica trasfusionale perché la comparsa di Ac diretti contro gli Ag di questi sistemi non è affatto rara e determina spesso gravi problemi immunologici (reazioni trasfusionali o MEN)

Oltre al sistema AB0 ed Rh esistono molti altri sistemi di gruppi sanguigni e molti antigeni nell’ambito di ciascuno di questi sistemi.

Alcuni di questi, come il Kell, il Kidd, il Duffy, assumono una grande importanza nella pratica trasfusionale perché la comparsa di Ac diretti contro gli Ag di questi sistemi non è affatto rara e determina spesso gravi problemi immunologici (reazioni trasfusionali o MEN)



• Caratteristiche generali:•sono sistemi complessi, tuttavia due sono gli antigeni fondamentali

•gli antigeni sono di natura proteica e sono forti immunogeni

•sono implicati in reazioni trasfusionali e MEN

•non vi sono anticorpi naturali nel siero

Altri Sistemi Gruppo-ematicicaratteristiche specifiche

• Sistema Kell– Antigene K = Kell presente in

circa 8% della popolazione– Antigene k = Cellano presente

quasi nel 100% della popolazione– Fenotipi possibili

• KK 0,2 %Kell positivi

• Kk 7,8 %

• kk 92 % Kell negativi

• Sistema Kell– Antigene K = Kell presente in

circa 8% della popolazione– Antigene k = Cellano presente

quasi nel 100% della popolazione– Fenotipi possibili

• KK 0,2 %Kell positivi

• Kk 7,8 %

• kk 92 % Kell negativi

Altri Sistemi Gruppo-ematici:

caratteristiche specifiche


caratteristiche specifiche• Sistema Kell:

• L’Ag Kell è il più immunogeno dopo il D. Fortunatamente, data l’alta frequenza dei Kell negativi, gli anticorpi anti Kell non sono frequenti e non creano problemi di reperibilità di emazie compatibili

• Possono provocare reazioni trasfusionali e MEN

• gli anticorpi anti Cellano sono ancor meno frequenti, ma quando sono presenti creano grossi problemi trasfusionali poichè il 99,8 % della popolazione è Cellano positivo e quindi è molto difficile trovare sangue compatibile




caratteristiche specifiche•Sistema Kidd:

•antigene Jk a (kidd a)

•antigene Jk b (kidd b)

•Fenotipi:

– Jk a+ b- (jka, jka) frequenza 26%

– Jk a+ b+ (jka, jkb) frequenza 50%

– Jk a - b+ (jkb, jkb) frequenza 24%

– Jk a - b - rarissimo




caratteristiche specifiche• Sistema Kidd: è uno dei

sistemi importanti dal punto di vista trasfusionale perché piuttosto immunogeno

– Gli anticorpi, evidenziabili solo col test indiretto dell’antiglobulina, sono spesso fugaci e a titolo basso, perciò possono sfuggire

– Possono però provocare una reazione emolitica intravascolare

• Sistema Kidd: è uno dei sistemi importanti dal punto di vista trasfusionale perché piuttosto immunogeno

– Gli anticorpi, evidenziabili solo col test indiretto dell’antiglobulina, sono spesso fugaci e a titolo basso, perciò possono sfuggire

– Possono però provocare una reazione emolitica intravascolare




caratteristiche specifiche• Sistema Kidd:

• il titolo anticorpale infatti decade in genere rapidamente, per cui a distanza di tempo (anche di pochi mesi) dalla immunizzazione gli anticorpi non sono più svelabili nei test di laboratorio

• Se però ad un paziente già immunizzato in precedenza effettuiamo una trasfusione con sangue apparentemente compatibile ma che contiene l’Ag Kidd interessato, il titolo risale molto rapidamente e raggiunge nei giorni successivi un livello sufficiente a provocare la distruzione dei globuli rossi incompatibili trasfusi

• Sistema Kidd:

• il titolo anticorpale infatti decade in genere rapidamente, per cui a distanza di tempo (anche di pochi mesi) dalla immunizzazione gli anticorpi non sono più svelabili nei test di laboratorio

• Se però ad un paziente già immunizzato in precedenza effettuiamo una trasfusione con sangue apparentemente compatibile ma che contiene l’Ag Kidd interessato, il titolo risale molto rapidamente e raggiunge nei giorni successivi un livello sufficiente a provocare la distruzione dei globuli rossi incompatibili trasfusi

TEST IMMUNOEMATOLOGICI:

PRINCIPI GENERALI


PRINCIPI GENERALIServono a:

• determinare i gruppi sanguigni

• ricercare ed identificare gli anticorpi diretti contro gli antigeni eritrocitari

• determinare la compatibilità trasfusionale tra emocomponente da trasfondere e ricevente

Servono a:

• determinare i gruppi sanguigni

• ricercare ed identificare gli anticorpi diretti contro gli antigeni eritrocitari

• determinare la compatibilità trasfusionale tra emocomponente da trasfondere e ricevente

TEST IMMUNOEMATOLOGICI

PRINCIPI GENERALI

• Si fondano sulle caratteristiche di

reazione degli antigeni e degli anticorpi

antieritrocitari

• Utilizzano metodiche semplici che rendono

la reazione visibile ad occhio nudo,

sfruttando la capacità agglutinante degli

anticorpi antieritrocitari

• Si fondano sulle caratteristiche di

reazione degli antigeni e degli anticorpi

antieritrocitari

• Utilizzano metodiche semplici che rendono

la reazione visibile ad occhio nudo,

sfruttando la capacità agglutinante degli

anticorpi antieritrocitari

REAZIONE DI AGGLUTINAZIONE

• La reazione antigene anticorpo che sta

alla base di tutta la immunoematologia

è la reazione di agglutinazione.

• Molto meno frequente è l’emolisi

• La reazione antigene anticorpo che sta

alla base di tutta la immunoematologia

è la reazione di agglutinazione.

• Molto meno frequente è l’emolisi


• Gli anticorpi si legano al determinante

antigenico specifico sulla superficie dei

globuli rossi

• Gli anticorpi, legandosi contemporaneamente

ad Ag presenti su cellule diverse, formano

dei ponti tra una cellula e l’altra .

• Perciò le cellule si aggregano a formare delle

piccole masserelle

• Gli anticorpi si legano al determinante

antigenico specifico sulla superficie dei

globuli rossi

• Gli anticorpi, legandosi contemporaneamente

ad Ag presenti su cellule diverse, formano

dei ponti tra una cellula e l’altra .

• Perciò le cellule si aggregano a formare delle

piccole masserelle

REAZIONE DI AGGLUTINAZIONEREAZIONE DI AGGLUTINAZIONE


• Una agglutinazione visibile ad occhio nudo si ha quando si formano masserelle di almeno 10 emazie

• Gli anticorpi IgM agglutinano spontaneamente le emazie sospese in fisiologica

• La reazione è rapida e avviene bene a 4° o a temperatura ambiente

• Una agglutinazione visibile ad occhio nudo si ha quando si formano masserelle di almeno 10 emazie

• Gli anticorpi IgM agglutinano spontaneamente le emazie sospese in fisiologica

• La reazione è rapida e avviene bene a 4° o a temperatura ambiente

TEST IMMUNOEMATOLOGICI:principi generali

• Se gli anticorpi sono di classe IgG hanno bisogno di un sistema rilevatore

• Il sistema rilevatore è costituito da un siero animale anti IgG umane, detto siero di COOMBS. Il frammento Fab di questo frammento Fab di questo Ac va a legarsi al frammento Fc delle Ac va a legarsi al frammento Fc delle IgG presenti sui globuli rossi, formando IgG presenti sui globuli rossi, formando un ponte che consente l’ agglutinazione un ponte che consente l’ agglutinazione delle emaziedelle emazie

• La reazione è lenta ed avviene a 37°C

AGGLUTINAZIONE MEDIANTE SIERO DI COOMBS

AGGLUTINAZIONE MEDIANTE SIERO DI COOMBS


PRINCIPI GENERALI


PRINCIPI GENERALIPer ricercare gli antigeni presenti sui G.R. si utilizzano anticorpi a specificità nota. Viceversa per ricercare gli anticorpi si usano antigeni a specificità nota

• Normalmente per la determinazione dei gruppi sanguigni ABO ed Rh si usano anticorpi noti di classe IgM

• Gli anticorpi IgG si usano per gli altri gruppi ematici

Per ricercare gli antigeni presenti sui G.R. si utilizzano anticorpi a specificità nota. Viceversa per ricercare gli anticorpi si usano antigeni a specificità nota

• Normalmente per la determinazione dei gruppi sanguigni ABO ed Rh si usano anticorpi noti di classe IgM

• Gli anticorpi IgG si usano per gli altri gruppi ematici

DETERMINAZIONE GRUPPO AB0-Rh

DETERMINAZIONE GRUPPO AB0-Rh


principi generali


principi generali

• Per la ricerca di Anticorpi è necessario utilizzare globuli rossi con specificità antigeniche note.

• Se si ricercano Ac freddi ( di classe IgM) l’esame può essere effettuato semplicemente in salina

• Se lo scopo della ricerca è la determinazione della compatibilità trasfusionale oppure la ricerca e l’identificazione degli anticorpi antieritrocitari immuni, poiché questi sono di classe IgG, la tecnica usata deve avvalersi del siero di COOMBS

• Per la ricerca di Anticorpi è necessario utilizzare globuli rossi con specificità antigeniche note.

• Se si ricercano Ac freddi ( di classe IgM) l’esame può essere effettuato semplicemente in salina

• Se lo scopo della ricerca è la determinazione della compatibilità trasfusionale oppure la ricerca e l’identificazione degli anticorpi antieritrocitari immuni, poiché questi sono di classe IgG, la tecnica usata deve avvalersi del siero di COOMBS


PRINCIPI GENERALI


PRINCIPI GENERALI

• Quando si ricercano antigeni, il

prelievo deve essere anticoagulato

(EDTA o litio-eparina)

• Per le ricerche anticorpali si possono

usare campioni coagulati o prelevati

in Litio eparina

• Quando si ricercano antigeni, il

prelievo deve essere anticoagulato

(EDTA o litio-eparina)

• Per le ricerche anticorpali si possono

usare campioni coagulati o prelevati

in Litio eparina


PRINCIPI GENERALI


PRINCIPI GENERALI

•IN TUTTI I CASI E’

IMPORTANTE IDENTIFICARE

CORRETTAMENTE IL

CAMPIONE

•IN TUTTI I CASI E’

IMPORTANTE IDENTIFICARE

CORRETTAMENTE IL

CAMPIONE


principi generali


principi generali

• CHIUNQUE ESEGUA IL PRELIEVO DEVE:

– CHIEDERE AL PAZIENTE NOME COGNOME

E DATA DI NASCITA

– TRASCRIVERLI CORRETTAMENTE sulla

provetta

– ESEGUIRE IL PRELIEVO

– SIGLARE IL CAMPIONE

• CHIUNQUE ESEGUA IL PRELIEVO DEVE:

– CHIEDERE AL PAZIENTE NOME COGNOME

E DATA DI NASCITA

– TRASCRIVERLI CORRETTAMENTE sulla

provetta

– ESEGUIRE IL PRELIEVO

– SIGLARE IL CAMPIONE

TEST IMMUNOEMATOLOGICIprincipi generali

•LE AZIONI PRECEDENTI DEVONO ESSERE ESEGUITE SENZA SOLUZIONI DI CONTINUITA’

•Qualora vi sia pericolo di omonimia, bisogna aggiungere altri elementi distintivi

•LE AZIONI PRECEDENTI DEVONO ESSERE ESEGUITE SENZA SOLUZIONI DI CONTINUITA’

•Qualora vi sia pericolo di omonimia, bisogna aggiungere altri elementi distintivi


principi generali


principi generali• Non vi sono prescrizioni particolari

sulle condizioni di prelievo

• Tuttavia se si debbono ricercare anticorpi attivi a temperatura inferiore alla ambiente, il prelievo deve essere effettuato con siringa preriscaldata ed il campione conservato in thermos a 37-40°C

• Non vi sono prescrizioni particolari sulle condizioni di prelievo

• Tuttavia se si debbono ricercare anticorpi attivi a temperatura inferiore alla ambiente, il prelievo deve essere effettuato con siringa preriscaldata ed il campione conservato in thermos a 37-40°C


TEST DI COOMBS• Il test di Coombs serve ad

evidenziare la presenza di anticorpi antieritrocitari di classe IgG

• Poiché gli anticorpi IgG non agglutinano spontaneamente, per ottenere l’agglutinazione si usa un siero immune anti IgG umane

• Il test di Coombs serve ad evidenziare la presenza di anticorpi antieritrocitari di classe IgG

• Poiché gli anticorpi IgG non agglutinano spontaneamente, per ottenere l’agglutinazione si usa un siero immune anti IgG umane

TEST IMMUNOEMATOLOGICITEST DI COOMBS DIRETTO


• Ricerca la presenza di Anticorpi adesi alle emazie (quindi serve per evidenziare una reazione antigene eritrocitario-anticorpo già avvenuta in vivo, in circolo)(TCD, DAT)

• Ricerca la presenza di Anticorpi adesi alle emazie (quindi serve per evidenziare una reazione antigene eritrocitario-anticorpo già avvenuta in vivo, in circolo)(TCD, DAT)

TEST IMMUNOEMATOLOGICITEST DI COOMBS INDIRETTOTEST IMMUNOEMATOLOGICITEST DI COOMBS INDIRETTO

• Serve ad evidenziare la presenza di anticorpi liberi nel siero del paziente la reazione antigene eritrocitario-anticorpo viene generata in laboratorio (TCI, IAT)

• Serve ad evidenziare la presenza di anticorpi liberi nel siero del paziente la reazione antigene eritrocitario-anticorpo viene generata in laboratorio (TCI, IAT)


TEST DI COOMBS


TEST DI COOMBS

Riepilogando

• Il test di Coombs diretto ricerca Ac presenti sulle emazie del paziente

• Il test di Coombs indiretto ricerca Ac liberi nel siero del paziente

Riepilogando

• Il test di Coombs diretto ricerca Ac presenti sulle emazie del paziente

• Il test di Coombs indiretto ricerca Ac liberi nel siero del paziente



• Dovendo lavorare sulle emazie è opportuno che il campione di sangue sia anticoagulato

• Le emazie, separate dal plasma, lavate e risospese in fisiologica nella percentuale opportuna, vengono fatte reagire con il siero di Coombs

• Dovendo lavorare sulle emazie è opportuno che il campione di sangue sia anticoagulato

• Le emazie, separate dal plasma, lavate e risospese in fisiologica nella percentuale opportuna, vengono fatte reagire con il siero di Coombs

TEST IMMUNOEMATOLOGICI test di Coombs diretto

TEST IMMUNOEMATOLOGICI test di Coombs diretto

• Il test è positivo se compare agglutinazione

• Un test positivo indica che le emazie sono state ricoperte da anticorpi

• Il test è positivo nelle anemie emolitiche autoimmuni, nella MEN, in caso di trasfusione incompatibile

• Il test è positivo se compare agglutinazione

• Un test positivo indica che le emazie sono state ricoperte da anticorpi

• Il test è positivo nelle anemie emolitiche autoimmuni, nella MEN, in caso di trasfusione incompatibile


test di Coombs indiretto



• In questo caso si utilizza il siero

• Il campione viene centrifugato per separare le emazie dal siero

• In una provetta da reazione si fanno reagire a 37°C il siero da esaminare e una miscela di emazie test a composizione antigenica nota

• In questo caso si utilizza il siero

• Il campione viene centrifugato per separare le emazie dal siero

• In una provetta da reazione si fanno reagire a 37°C il siero da esaminare e una miscela di emazie test a composizione antigenica nota





• Al termine della incubazione si aggiunge il siero di Coombs e si legge per la presenza o assenza di agglutinazione

• Se compare agglutinazione il test è positivo

• Al termine della incubazione si aggiunge il siero di Coombs e si legge per la presenza o assenza di agglutinazione

• Se compare agglutinazione il test è positivo

TEST IMMUNOEMATOLOGICItest di Coombs indiretto

TEST IMMUNOEMATOLOGICItest di Coombs indiretto

• Un test positivo indica che nel siero in esame sono presenti anticorpi antieritrocitari

• Il test è positivo nei pazienti immunizzati da precedenti trasfusioni o gravidanze e nelle anemie emolitiche autoimmuni

• Un test positivo indica che nel siero in esame sono presenti anticorpi antieritrocitari

• Il test è positivo nei pazienti immunizzati da precedenti trasfusioni o gravidanze e nelle anemie emolitiche autoimmuni

• Le emazie utilizzate per la ricerca di Ac sono Le emazie utilizzate per la ricerca di Ac sono di gruppo 0 e sono state testate per i di gruppo 0 e sono state testate per i determinanti antigenici più comunideterminanti antigenici più comuni

TEST DI COOMBS INDIRETTOTEST DI COOMBS INDIRETTO

Positività del Test di Coombs

indiretto

•In questo caso è necessario proseguire le indagini per identificare di quale anticorpo si tratta



• Il TCI è la metodica di base per:

– ricerca, identificazione, titolazione di anticorpi antieritrocitari

– prova di compatibilità trasfusionale

• Il TCI è la metodica di base per:

– ricerca, identificazione, titolazione di anticorpi antieritrocitari

– prova di compatibilità trasfusionale

TEST IMMUNOEMATOLOGICI prova di compatibilità

• Nella prova di compatibilità :

– In una schedina opportuna si fa reagire il siero del pz che deve essere trasfuso con i globuli rossi della unità che deve essere trasfusa

– Si mette a incubare a 37° per 10’

– Si centrifuga e si legge

– Il sangue è compatibile se non si è formata alcuna agglutinazione

• Nella prova di compatibilità :

– In una schedina opportuna si fa reagire il siero del pz che deve essere trasfuso con i globuli rossi della unità che deve essere trasfusa

– Si mette a incubare a 37° per 10’

– Si centrifuga e si legge

– Il sangue è compatibile se non si è formata alcuna agglutinazione


richiesta di emazie• Ad ogni richiesta di emazie vengono eseguiti:

– Test di Coombs indiretto per la ricerca nel siero del paziente di eventuali anticorpi

– Prova di compatibilità tra il siero del paziente e le emazie della sacca

– Controllo del gruppo del paziente e della sacca

• Ad ogni richiesta di emazie vengono eseguiti:

– Test di Coombs indiretto per la ricerca nel siero del paziente di eventuali anticorpi

– Prova di compatibilità tra il siero del paziente e le emazie della sacca

– Controllo del gruppo del paziente e della sacca

TEST IMMUNOEMATOLOGICI test

di Coombs• MEMO:

– il test di coombs diretto si esegue sulle emazie da esaminare; se positivo indica presenza di anticorpi adesi alle emazie

– il test di Coombs indiretto si esegue sul siero; se positivo indica che il paziente è immunizzato contro qualche antigene dei G.R.

• MEMO:

– il test di coombs diretto si esegue sulle emazie da esaminare; se positivo indica presenza di anticorpi adesi alle emazie

– il test di Coombs indiretto si esegue sul siero; se positivo indica che il paziente è immunizzato contro qualche antigene dei G.R.

laurea in scienze infermieristiche - ii° anno lezioni di immunoematologia

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