' , . . .

6 o i n b r e : J A I M E G A R C I A R E Y E S

Matricula : 79221100 L I C .

/Carrera :B io log ia

Area de Concentracion: B io log ia de l a Reproduccion.

Trimestre: doceavo

Horas-Semana: 20 hr.

L u g a r donde se l l e v e a cabo : U.A.M.I.

Laboratorio 5-345.

/Fecha de i n i c i o : Enero de 1984 2 Fecha de terminacion: Noviembre de 1984.Nombr-e de l Tutor,

Pues.to y Adscripcion.

/M. en B.R. Armando Ferre i ra Nunc. Prof. Asociado "A" tiempo

J'compieto. Departamento de Diologia de la Reprodurcian.

T i t u l o : "Efecto de Iris N u r l e o l ~ t l n s Ciclirris PI) la G v i i l a c i o i i

F. I umr~c :

m ,

"Efecto de la administraciok i n vivo de dbAMPc y dbGMPc en l a

ovulación de la carpa dorada Carassius guratu&".

A. FERREIRA-NUNO, C. SANCHEZ-SOLIS Y J . GARCIA-REYES.

Departamento de Biología de la Reproducción, Universidad

Autónoma M e t r o p o l i t a n a - I z t a p a l a p a . A.P. 55-535, C.P. 09348,

Mexico.

RESUMEN.

Carpas d IS he

% fueron tratadas

ras sexualmente maduras mantenidas a

con dbAMPr o con dbGMPc por vía I.C. o

+ - I.P.El dbGMPc estimuló la ovulación por ambas vias, mientras

que el dbAMPc sólo pudo estimularla por vfa I.C.

“Efecto de la administracibn in v i vo de dbAMPc y dbGMPc sobre la

ovulacidn de la carpa dorada Carassius auratus”. - _-_ --- -I-

Armando F e r r e i r a - N u l o . Carlos Sánchez-Solfs y Jaime Garcla-Reyes

Departamento d e 8lolngía de la Reproducción Universidad Autbnoma

M e t r o p o l i t a n a - l z t a p a l a p a . Av. Michoacán y Purisiaa.

Col Vicentina A.P 55-535 C P. 09348. Mexico 13. D F

I

"Efecto d e l a

ovulacibn de

Armando Ferre

IMTRODUCCION

1

administración <- in - vivo de dbAMPc y db6MPc sobre la a carpa dorada Carassius auratus". .-- --

ra-Nuno Carlos Sánchez-Soils y Jaime Garcfa-Reyes

Existen numerosas evidencias obtenídas principalmente en

mamlferos y anfibios que indican que l o s nuclgetidos clcllcos

(MCs) están involucrados en la mayoría dc los procesos

reproductivos {para una revisión ver Harsh 1975: Sanborn 19801,.

incluyendo aauellos relacionados con l a ovulacibn. tales como la

secrecidn de las horraonas gonadotr6ficas íH6tsl y sus factores

Iiberadores(FL-HGts) (Labrie i?t a l . 1976; Riqler et a l . , 1978;

Snyder et a l . . 1980; Kirnu:*ó e t al . 1980) síntesis de esteroides

ovdricos (Harsh. 1964. 1976). reiniciación de la meiosis

(Schorderet-Slatkine et a l . . ,1980). maduracidn del ovocito(

Speaker & Butcher. 1977: Morrill et a l . . 1977: Mailer et a l . .

1978: Eppig 6 Downs 1984). y la ruptura folicular (Strickland 8

Beers. 1979). Se ha demostrado que en varios de estos procesos

l o s NC's actuan CORO un segundo mensajero para muchas hormonas

(Butcher et al.. 1974: SInghaR 8 Sutherland. 1975; Labris et a l , .

1978; Vaitukaitis 6 Albertson 1979) y oue es posible nimetirar el efecto de hormonas tales como la hormona (Channíng 6 Seymour. 1970; Tsafriri et al . ,

1974: Hunzicker-Dunn et al.. 1979) y el de d e LH (LH-RH) (Kercret et al.. 1977: Nakano

luteinitante (LH)

1972; Lindner et a l . .

a hormona 1 1 beradora et ai.. 1978)

2

mediante l a administracibn de los NC's, sus derivados o

substancias que modifican los niveles intracelulares de estos

co mpue s t o s

Aunque la información en peces a éste respecto es aún

escasa. se sabe que los NC's están relacionados de alguna manera

con el mecanismo de accidn del FL-HGt's a nivel hipofisiario

(Oeery & Jones. 1975) con el mecanismo de acción de la HGt a

nivel ovárico (Fontaine et al., 1972; Fontaine-Bertrand et al..

1978) con l a síntesis de esteroides (Fostier & Jalabert, 1984)

la maduración final del ovocito (Schulz et ai., 1981) y l a

ovulación (Goetz et al.. 1982). Considerando la información

anterior, decidimos estudiar el efecto de la adainistracidn "& vivo" - del dbAMPc y del dbGMPc sobre la ovulación de la carpa dorada "Carassi us auratus".

METOOOL6IA

Se utilizaron hembras de carpa dorada de l a variedad común

(con un peso corporal de 25-50 g ) traidas del estado de Hidalgo.

durante los meses de marzo a julio entre los años de 1983-1984.

Las hembras fueron mantenidas en cuarentena durante una semana.

en peceras individuales provistas con filtros de acrílico y con

carbón activado, a temperatura ambiente (20-30 " C ) y fotoperiodo

natural. Durante todo el estudio. los animales recibirdn alimento

comercial seco en hojuelas entre las O900 y las 1200 hr. Después

de la cuarentena, los peces fueron transferidos a varias peceras

de 70 litros provistas con filtros de caja, en donde se

aclimataron a las condicionas experimentales de 13 f 1 "C y a un

fotoperiodo de 16 hr l u z 8 tir obscuridad (16 L-8 O; se encendí6

a las O900 h r ) durante un mínimo de dos seaanas antes de empezar

el experimento. Las hembras cargadas (detectadas por el abdomen

suave y distendido; Stacey el; al.. 1979) fueron seleccíonadas y

marcadas en la aleta dorsal. para ident ficarlas y dividirlas en

6 grupos de diienSiOneS corporales sini ares. Después de ésto se

transladaron a acuarios de owulaci6n de 70 litros provistos con

un filtro biológico a base da arena y se mrntuvleron en las

mismas condiciones de fotoperiodo Y temperatura ienclonadrs

anteriormente.

-

Los grupos fueron tratados con N6,02-dibutiríl adenosinr

3 l . 5 ' aonofosfato, sal de sodio (dbAMPc) y con N2.02-dibutiril

guanosinr- 3l .5 ' aonofosfato cfclico. sal de sodio (dbGUPc) tal y

como se describe en la tabla 1.

Para la adainistrrción intracrrneil ( 1 . C . ) se empleó el

adtodo descrito por La. et a l . . 1975. Antes de íii adainistrrción

1.C. . los peces fueron anestesiados con 0.058 de US222

(aetarulfonato de tricaina).

La revisión de l a ovulacibn se realit6 innediataaente

des& de la inyeccibn y durante los siguientes síete dias a fa misma hora (0900). presionando el abdomen hacia atrás. La

a U m Iz: -U o

2

N

vi

c 10 . 'c1 m N

N vi

L3 . u m N

c

A

O

I

z -I A D o W D z > r

m

a U D z V o

2

N

vi

c 0 . u ID N

N vi

c . U m N

I

m

O

O N

W

c 10 . 0

N 4

vi O

c c - - \ . u In m N

P 03

- z -I W rn -0 rn W

-I O z D r

M

m

a U D z V o

1v

03

c 10 \ 10

O

e . 10

c

2

O

VI El - c.

a (Y

O

O

A

ci c

c . 10

U

+ D W I- D

2

E

4

La ovulación se determinó cuando por el ovíporo fueron liberados

cuyo peso fue una gran cantidad de óvulos maduros y translkidos

mayor al 20 'x del peso gonadal total(Yamazaki, 1965; Stacey et

al., 1979). Además de registrar el número de peces que ovularon,

se determinó el lndice gonadosom6tico.IGS (peso del ovario + peso de los huevos ovulados/peso corporal) x 100 en todos los peces

.al final del experimento.

Análisis Estadístico. Para comparar entre los grupos el

número

Fisher

todos

B Torr

de peces que ovularon , se utilizó la prueba de una v í a de

Para determinar las diferencias de los valores del IGS en

os grupos se empleó el análisis de varianza (ANOVA) (Steel

e, 1960).

RESULTADOS.

L a tabla muestra el efecto de la inyección I.P. o I.C. de

dbAMPc o de dbGMPc sobre la ovulación de carpas doradas sexualmente maduras mantenidas a 13 f 1 'C. Todos l o s grupos

tuvieron un desarrollo gonadal semejante en virtud de que la

diferencia entre los grupos utilizando ANOVA no fue

estadísticononte significativa. Por otra parte, el dbAMPc fue

capaz de inducir la ovulición significativamente (p 0.05)

-porndo se inyectd I.C.. mientras que el dbGHPc fue capaz de inducir la ovulation en forma significativa (p 0.05) por ambas

5

, . .

. - n s m

0 -I c U O

O 3 S-k -I

I

o

0. U

A O O VI

n CT

-Q P

2

N

2

U

m I+ P

O

o *

N

In

N n

&I -

o. U D

4

u5

4

03 A

I+ N

O

m *

w

U

W

A

L Y

c c E l , w .

4

U

2

U

v1

N I+

m

P

N

v)

N I w

n

v

n

5 R

OD

m

I + a

w VI

U *

U

v -

Q CT

% R

2

O

4

m

I + P

N

U

N

U

U n -

n a - 1 - u .

.o, v V I .

..

6

vias. y fuó aQn más efectivo que el dbAMPc inyectado I . C . Es

pertinente senalar que en el grupo control con la administración

por ambas vías y también con la administración I.P. de dbAHPc. algunas hembras ovularon aunque el número de ellas no fué

estadísticamente significativo.

DISCUSION.

Se ha demostrado que cuando las carpas oradas son mantenidas en ausencia de plantas acuáticas, a 12 f 1 'C y un fotoperiodo de

16 L-8 O. los ovocitos $610 alcanzan la vitelogenesis. pero no la

maduración final ni la ovulación (Yamazaki. 1965; Stacey et al.,

1979) . Esto se debe a que en éstas especies , bajo estas condimciones. noraalmente no hay la liberación aguda de H6t

(Stacey et al.. 1979) que induce la producción ovárica d e

hormonas esteroides que participan en los procesos bioqufmicos

que conducen a la ruptura de la pared folicular ((ioetz. 1983). No

obstante, se ha podido inducir la ovulación en carpas doradas

sujetas a condiciones anaovulatorias mediante la administración d e extractos hipotalánicos. LH-RH de manffero, HGt's, hormonas

esteroides o prostaglandinas, los cuales actúan a diferentes

niveles del eje hipotdlano- hipófisis- gónada. De acuerdo con

los resultados obtenidos en éste experimento, tambien es posible

inducir la ovulacídn en la carpa dorada mediante la

administración I .C . de dbAMPc o de db6MPc y con la inyección de

,

db6MPc por vía I.P. Dado que l o s NC's participan en varios de los procesos

relacionados con la ovulacidn (ver introducción) y en vista de

que en peces la información a éste respecto es aún escaza, serfa

difícil y prematuro tratar de establecer el sitio en el cual

actuaron estos compuestos para estimular este fenómeno. Es

posible que nuestros resultados reflejen la adición de los

efectos producidos por los NI3 a diferentes niveles del eje

hipotáiamo- hipófisis- gónada . No obstante, el hecho de que el

dbAHPc fue capaz de inducir la ovulación en forma significativa

solamente cuando se inyectó por v í a I.C. pero no por la vía

I.P.. sugiere que el principal sitio de acción sobre el cual

actda este compuesto varió con la vía de administración. Asi

mediante la adainistraci6n I .C . . nosotros creeaos que aabos NCk

actuaron principalaente a nivel hipotalamo-hipofisiario.

estimulando la liberación de HL-HGt's ylo la secreción de HGt's. En

peces. se sabe suy poco sobre el papel que desempeñan los NCS en

la inducción de la secreción de estas hormonas. Por ejemplo se

sabe que la LH-RH de eamfferos puede activar la adenilato-ciclasa

en el lóbulo ventral de la hipofisis del caz6n 'Scyliorhinus

-canicula" (Deery & Jones, 1!i75). En mamfferos. s i n embargo. se

dispone de mucha mis inforaación. Por ejemplo, en la rata, ha - sido Posible correiacionar Incrementos importantes de At4Pc y de

GMPc en el hipotálamo medio basal y en la hipófisis con la

secretion preovulatoria de 1.H (Kimura et al., 1980). y esto ha

8

llevado a pensar que los NC5 no s610 participan en la liberaci6n de ésta hormona, sino que también participan en la liberación de

la LH-RH. Además ha sido posible inducir la secreción de H6t4 "in

vitro" e "in vivo" rsediante la administración de derivados de los

NC's o inhibidores de fosfodiesterasas (Sundberg et al.. 1976;

Kercret et al., 1977; Nakano et ai., 1978; De la Lastra et al.,

1981 ).

- - -

Por otra parte, utilizando la vía I.P. esperabamos que los

N c 4 actuaran preferenteaente a nivel ovárico considerando que este órgano sería ass accesible a la llegada de los N C f . Gran

parte de la información, obtenida de estudios "In vitro". muestra

que el AMPc tiene un papel inhibitorio sobre la maduración final

del ovocito y la ovulación. Por ejeaplo, la administración de

dbAHPc o substancias que incrementan l o s niveles intracelures d e

l o s NC's en folículos o en ovocitos desnudos de anfibios y

maafferos. produce inhibición de la maduración final estimulada

Por la progesterona y las HGt's. respectivamente (Cho et al.,

--

-1974; O'Connor & Smith. 19761; Schorderet-Slatkine et al., 1980;

- Hubbard & Terranova. 1982). En la trucha de arrollo Salvelinus

fontinaiis se ha demostrado que la ovulación inducida por la

P6F2- alfa es bloqueada Por el dbAMPc O por la adiinistración de

inhibidores de fosfodiesteraias a folfculos en los cuales el I

rompiiiento de la veSfCU1a germinal y a ha ocurrido (6oetr et al.. I

1982). En nuestra ivestigación. la adeinistracldn I.P. de dbAMPc

no indujo la ovulaci6n, lo que indica que el AHPc no tuvo un

!

9

efecto estimulante sobre la ovulacián a esa dosis, quiza porque su principal efecto a nivel ovárlco sea inhibitorio.

Como mencionamos anteriormente, el dbGMPc fue capaz de

inducir la ovulación por ambas vías 1 . P e I . C . NO obstante, hubo

una diferencia en el tiempo en el que ocurrió la ovulación,ya que

por vía I . C . ésta tuvo lugar alrededor del tercer día, mientras

que por la vfa I . P . ocurri6 alrededor del séptimo día. El retraso

observado con la administración I.P. es algo raro, considerando

que en otros estudios en los cuales s e han utilizado varias

substancias para inducir la ovulación en la carpa dorada, éste

fenómeno ocurrio durante los cuatro días posteriores al

tratamiento en la mayoría de los casos ( Yamazaki, 965; Yamarnoto

- et al., 1966; Pandey & Hoar, 1972; Lam et a l . , 1975 Stacey et

al., 1979). No obstante, algunos investigadores han observado

retrasos considerables en lei ovulación de algunas carpas doradas,

cuando trataron de inducir este fenómeno fuera de la época

reproductiva ( Yamamoto et al., 1966) o cuando usaron dosis bajas

( Yamazaki, 1965). En nuestro caso consideramos que el retraso

observado con la administración I.P. de dbGMPc posiblemente se

debió a que la dosis fue baja. Además, otros investigadores

sefialan que la latencia de respuesta de ovulación al tratamiento

- hormonal es dosis-dependiente ( Harvey & Hoar, 1980; Lam, 1982).

A pesar de que l o s estudios "in vivo" en ésta área son -- -escasos (Ryan 8 Coronel, 1969: Ensinck et al., 1970;

Gonzalez-Barcena et al., 1974; De la Lastra et al., 1981) se ha

.__..,. .,. , , ," , . . , .. , , .. . . , .. . .. .. ~

nivel hipofisia

que el principa

I . P . fue a nive

visto que es posible inducir la ovulación en las ratas mediante

la administración I.P. de aminofilina.un inhibidor de

fosfodiesterasas, ( De la Lastra et al., 1 9 8 1 ) , y en virtud de

que éste efecto mostro una correlación con la secreción

significativa de L H , es posible que esta substancia actuara a

io. Basados en esta evidencia, nosotros asumimos

sitio de acción del db6MPc administrado por vía

hipofisiarlo.

De acuerdo con lo anterior, nuestro estudio apoya la idea de

que los NCk participan en los procesos que conducen a la

ovulacidn en l a carpa dorada. Sin embargo, es evidente que es

nvestigaciones para poder comprender

papel preciso de l o s NCD en este

necesario realizar mas

completamente cual es e f enomeno .

AGRADECIMIENTOS.

Queremos agradecer a l o s doctores Carlos Beyer, Javier Velazquez

Moctezuma y Enrique Canchola sus valiosos comentarios durante la revisitin de éste trabajo.

"Efecto de la administración .- in vivo de dbAHPc y db6HPc sobre l a

ovulacldn d e la carpa dorada Carassius auratus". .---- ---I--

Armando Ferreira-Nulo

Departamento d e BLologla d e Ir ReDroducción. Uníversidad Autónoma

ihtropolítana-Iztapalapa. Av. nlchoacen y Purísima

Col Vtcentina A.P 55-535 C P 05346 Mexico 13. D F

Carlos Sánchez-Sol+s Y Jaine Garcia-Reyes !

REF EREN C I AS

Butcher, R.W., Robinson, G.A., & Sutherland, E.W.(1972).

Cyclic AMP and hormone action . En: Biochemical actions of

hormones (Litwack, G., ed.), Accademic Press,

N.Y. ,vol .2 ,pp.21-54.

Channing, C.P., & Seymour, J.F. (1970). Effects of dibutyryl

cyclic 3',5'-AMP and other agents upon luteinization of

porcine granulosa cells in culture. Endocrinology 87: 165-169.

Cho, W.K., Stern, S., & Biggers, J.D.(1974). Inhibitory effect

of dibutyryl CAMP on mouse oocyte maturation ''u D I ' . J.

EXP. Zoo1 . 187 : 383-386.

De l a Lastra, M., Bravo, L. & Arriagada, R. (1981). Effect of

aminophylline on spontaneous and induced ovulation in rats. J.

Reprod. Fert. 61: 475-481.

Deery, D.j. & Jones, A.C. (1975). Effects of hypothalamic

extracts, neurotransmitters, and synthetic hypothalamic

releasing hormones on adenyl cyclase activity of the lobes of

the pituitary of the dogfish (SCyJiorhinus Canicula, L.). J.

Ensinck, J.W., Stoll, R.W., Gale, C.C., Santen, R.J., Touber,

J.L. & Williams, R.H. (1970). Effect of aminophylline on the

secretion of insulin, glucagon, luteinizing hormone and growth

hormone in humans. J. Clin. Endocr. 31: 153-161.

Eppig, J.J. & Downs, S.M. (1984). Chemical signals that

regulate mammalian oocyte maturation. Biol. Reprod. 30: 1-11.

Fontaine, Y.A., Salmon, C., Fontaine-Bertrand, E.,

Bursawa-Gerard, E. & Donaldson, E.M. (1972). Comparison of the

activities of two purified fish gonadotropins on adenyl

cyclase in the goldfish ovary. Can. J . 2001. 50: 1673-1676.

Fontaine-Bertrand, E., Salmon, C. & Fontaine, Y.A. (1978).

Effet d'hormones gonadotropes, "in vitro", sur l a

concentration de 1' adenosine monophosphate cyclique dans

l'ovaire de l'anguille ( & g , u a anguilla L). Ann. Biol.

Biochim. Biophys. 18: 805-811.

Fostier, A. & Jalabert, B. (1984). Actions of gonadotropin or

dibutyryl cyclic AMP on maturation-induced steroid production ~

I I I "inyitr&" by trout ovary prior to ovulation. Abstracts X I 1

conference of european comparative endocrinologists. Agosto 5,

1983. Sheffield, England. Gen. Comp. Endocr. 53: 455.

Goetz, F.W., Smith, D.C. & Krickl, S.P. (1982). The effects

*I

< .

of prostaglandins phosphodiesterase inhibitors, and cyclic AMP

on ovulation of brook trout (Salvelinus fontinalis) oocytes.

Gen. Comp. Endocr. 48: 154-160.

Goetz, F.W.(1983). Hormonal control of oocyte final maturation

and ovulation. In: Fish Physiology (Hoar, W.S., Randall, D.J.

& Donaldson, E.M. eds.) vol. 9 part A. Academic Press,

Orlando, U.S.A.

Gonzalez-Barcena, D., Kasting, A.J., Schalch, D.S., Miller,

M.S., Henriquez-Espinoza, R. & Schally, A.V.(1974). Response

to LH-RH i n men infuced with theophylline. Int. J. Fertil.

19: 207-209.

Harvey, B.J. & Hoar,W.S.(1980).Teoria y practica de l a

reproduccion inducida en los peces.centro Internacional de

Investigaciones para e l Desarrollo. Ottawa, Canada.

Hubbard,C.J. & Terranova,P.F.(1982).Inhibitory action of

cyclic guanosine 5'-phosphoric acid (GMP) on oocyte maturation

:dependence on an intact cumulus.Bio1. Reprod. 26 :628-632.

Hunzicker-Dunn,M.,Jungman,R.A. & Birnbaumer,L.(1979).Hormone

action in ovarian follicles : Adenyl cyclase and protein

kinase enzyme systems.En: Ovarian follicular development and

function. (Midgley, A.R. & Sadler, W.A. eds). Raven Press,

N.Y.,p 267.

Kercret,H.,Benoist,L. & Duval,J.(1977).Acute release of

gonadotropins mediated by dibutyryl cyclic AMP "u vitro".FEBS. - Lett.83: 222-224.

Kimura,F.,Kawakami,M.,Nakano,H. & McCann,S.(1980).Changes i n

adenosine 3',5'-monophosphate concentrations in the anterior

pituitary and hypothalamus during the rat estrous cycle and

effects of administration of sodium pentobarbital in

proestrus. Endocrinology 106:631-635.

Labrie, F., Borgea t, P., Barden,N.,Beaulieu,M.,Drouin,J.,de

Dean,A. & Morin,0.(1976).Role of cyclic AMP i n neuroendocrine

control.In :Subcellular mechanisms i n reproductive

endocrinology (Naftolin,F.,Ryan,K.J. & Davis,J. eds.).Elsevier

Scientific Publishing Company, Amsterdam, The Netherlands

pp.392-406.

Labrie,F. ,Drouin,J. ,Ferland,L.,Lagace, L. ,Beaulieu,M.,de

Lean,A.,Kelly,P.A.,Caron,M.G. & Raymond,V.(1978).Mechanism of

action of hypothalamic hormones in the anterior pituitary

gland and specific modulation of their activity by sex

steroids and thyroid hormones. Rec. Prog.Horm.Res.34: 25-93.

Lam,T.J.,Pandey,S. & Hoar,W.S.(1975).Induction of ovulation in

goldfish by synthetic luteinizing hormone-releasing hormone

(LH-RH).Can.J.Zool.53: 1189-1192.

-

Lam,T.J.(1982) Applications of endocrinology to fish culture.

Can. J . F i sh . Aquat . Sci .39 : 1 1 1 - 137.

Lindner,H.R.,Tsafriri,A.,Lieberman,M.W.,Zor,U.,Koch,Y.,Bauminge

r,S. & Barnea,A.(1974).Gonadotropin action i n cultured

graafian follicles : induction of maturation division of the

mammalian oocyte and differentiation of the luteal cells.

Rec. Prog . Horm. Res .30 : 79-1 30.

Maller,J.L.,Butcher,F.R. & Krebs,E.G.(1979).Early effect of

progesterone on levels of cyclic adenosine 3',5'-monophosphate

i n Xenopus oocytes.J.BioL.Chem. 254: 579-582.

Marsh,J.M.(1969).Role of adenosine 3',5'-monophosphate in the

action of luteinizing hormone steroidogenesis. En : Progess in

Endocrinology (Gua1,C. & Ebling,F.J.B. eds.).Excerpta Medica

Foundation,Amsterdam,The Netherlands, pp.83-88.

Marsh,J.M. (1975).The role of cyclic AMP and gonadal function

.En: Advances in Cyclic Nucleotides Research (Greengard,P. &

Robinson,G.A.eds.) vol. 6. Raven Press,N.Y. pp.137-199.

Marsh J.M.(1976). Role of cyclic AMP i n gonadal

steroidogenesis. Biol. Reprod. 14: 30-53.

Morril,G.A., Schatz,F.,Kostellow,A.B. &

Poupko,J.M.(1977).Changes i n cyclic AMP levels in the

amphibian ovarian follicle following progesterone induction of

meiotic maturation. Differentiation 8: 97-104.

Nakano,H., Fawcett ,C.P., Kimura,F. & McCann, S.M. (1978) .Evidence

for the involvement of guanosine 3',5'-cyclic monophosphate in

regulation of gonadotropin release. Endocrinology 103:

1527-1533.

O'Connor, C.M., & Smith, L.O. (1976). Inhibition of oocyte

maturation by theophylline: possible mechanism of action.

Develop'. Biol. 52: 318-322.

Pandey, S., & Hoar, W . S . (1972

goldfish by clomiphene citrate

. Induction of ovulation in Can. J. Zool. 50: 1679-1680.

Rigler, G.L., Peake, G.T.,& Ratner, A. (

luteinizing hormone releasing hormone on

pituitary cyclic AMP and GMP "in vitro". -- 367-368.

978). Effect of

accumulation of

J. Endocr. 76:

Ryan, W.L. & Coronel O.M. (1969). Adenosine 3', 5 '

monophosphate as an inhibitor of ovulation and reproduction.

Amer. J. Gynecol. 105: 121-.123.

Sanborn, B.M. (1980). The role of cyclic nucleotides in

reproductive processes. Ann. Rev. Physiol. 42: 37-57.

Schorderet-Slatkine, S., Schorderet

F., Boquet, P., & Baulieu, E. (1980

the process of meiosis reinitiation

oocytes: effects of progesterone, i

M., El-Etr, M., Godeau,

. Role of cyclic AMP in in "Xenopus laevis"

sulin, and cholera toxin.

In Steroids and their mechanism of action in non mammalian

vertebrates (Delrio, G. & Brachet , J. eds.). Raven Press, New

York pp. 93-101.

Schulz, R.,Schaghecke, R., & Blum, V. (1981). Variations of

gonadal CAMP content of male and female rainbow trout "Salmo - gairdneri" (Richardson) during the reproductive cycle. Comp.

Biochem. Physiol. 70A: 53-56.

Singhal, R. L., and Sutherland, D.J.B. (1975). Cyclic 3 ' ,

5'-adenosine monophosphate and accesory sex organ responses.

En: Molecular mechanisms of gonadal hormone action (Thomas,

J.A. & Singhal, R.L. eds.). University Park Press, Baltimore,

pp. 257-277.

Snyder, G., Naor, Z., Fawcett, C.P. & McCann, S.M. (1980).

Gonadotropin release and cyclic nucleotides: evidence for

luteinizing hormone-releasing hormone-induced elevation of

guanosine 3 ' , 5'- monophosphate levels in gonadotrophs.

Endocrinology 107: 1627-1633.

Speaker, M.G., & Butcher, F.R. (1977). Cyclic nucleotide

fluctuations during steroid induced meiotic maturation of frog

oocytes. Nature 267: 848-850.

Stacey, N.E., Cook, A.F., & Peter, R.E. (1979) . Spontaneous

and gonadotropin-induced ovulation i n the goldfish "Carassius

jiuratus". J. Fish. Biol. 15: 349-361.

Steel, R.G.D., & Torrie, J.H. (1960) . Principles and

procedures of statistics. McGraw-Hill. New York.

Strickland, S., & Beers, W.H. (1979) . Studies of the enzimatic

basis and hormonal control of ovulation. En: Ovarian

follicular development and function (Midgley, A.R. & Sadler,

W.A. eds.). Raven Press, New York pp. 141-153. 1

Sundberg, D.K., Faw

involvement of cycl

from the anterior p

151: 149-154.

ett, C.P. & McCann, S.M. (1976 . The c-3I, 5 ' - AMP i n the release of hormones

tuitary "in vitro". Proc. Soc. Exp. Med.

Tsafriri, A., Lindner, H.R., Zor, U., & Lamprecht, S.A.

(1972) . "In vitro" induction of meiotic division in

follicle-enclosed rat oocyte by LH, cyclic AMP and

prostaglandin E2. J. Reprod. Fert. 31: 39-50.

Vaitukaitis, J.L., & Albertson, B.D. (1979). Mechanisms

modulating gonadotropin action. En: Ovarian f.oiiicular

* * . .

development and function (Midgley, A.R. & Sadler, W.A. eds.).

Raven Press, New York. pp. 247-253.

Yamamoto, K, Nagahama, Y., Yamazaki, F. (1966). A method to

induce artificial spawning of goldfish all through the year.

Bull. Jap. Soc. Sci. Fish. 32: 977-983.

Yamazaki, F. (1965). Endicrinological studies on reproduction

of the goldfish, "Carassius auratus", w

to the function of the pituitary gland.

Hokkaido Univ. 13: 1-64.

th specia

Mem. Fac.

reference

Fish.