informe cromatografia en papel
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UNIVERSIDAD CATÓLICA LOS ÁNGELES DE CHIMBOTE IV CICLO
ANALISIS INSTRUMENTAL Página 1
ESCUELA PROFESIONAL:
Farmacia Y Bioquímica.
CURSO:
Análisis Instrumental
CICLO:
IV
TEMA:
Cromatografía en papel.
INTEGRANTES:
Bocanegra García Dirse.
Gutiérrez Ortiz Melissa.
Lozada Castillo Josselyn.
Milla Hoyos Carlos
Neyra Vargas Luis.
Paredes Velásquez Mercedes.
Pedreros Cavero Anthony.
Quispe Mejía Lilian.
Román Hidalgo Ericka
Ruiz Rosas Ericka
Shijap Romero Belmer.
Zavaleta Reyes Ayul.
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INTRODUCCION La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para
realizar análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica potente no requiere de
ningún tipo de equipamiento. La fase estacionaria está constituida simplemente por
una tira de papel de filtro. La muestra se deposita en un extremo colocando pequeñas
gotas de la disolución y evaporando el disolvente. Luego el disolvente empleado como
fase móvil se hace ascender por capilaridad. La separación se realiza en función de la
afinidad de los solutos con las dos fases, las más solubles en agua se quedarán cerca
del punto donde se aplicó la muestra, y las menos solubles en agua y más solubles en
el disolvente llegarán más lejos. Las sustancias separadas se identifican mediante
diversos procedimientos físicos o químicos.
La cromatografía en papel es una técnica utilizada para análisis inorgánico cualitativo,
permite llevar a cabo la separación e identificación de iones, trabajando con
cantidades mínimas de sustancia. Pertenece al tipo de “Cromatografía de partición” se
fundamenta en que las sustancias problema, pueden tener diferentes coeficientes de
reparto en dos disolventes de inmiscibilidad limitada, uno permanece fijo en la
superficie del papel “fase estacionaria” generalmente en agua, la fase móvil constituida
generalmente por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella. Hay
varios tipos de cromatografía, la ascendente (papel hacia arriba), descendente (papel
invertido), radial y de separación de zonas y sectores manchas características sobre el
papel, generalmente, estas no son coloreadas y se revelan con una lámpara
fluorescente, los contornos se marcan con lápiz. Como medida en cromatografía sobre
papel se emplea el Rf (Retention factor), el cual se define como el cociente de dividir el
recorrido de la sustancia por el disolvente, esto es, la distancia media desde el origen
hasta el centro de la mancha (X) dividida por la distancia que media desde el origen
hasta el frente del disolvente (S). 𝑅𝑓=𝑋𝑆 [1] En la cromatografía en papel se utiliza
como fase estacionaria una hoja de papel de celulosa de elevada pureza recubierta de
una capa de agua asociada a las fibras de celulosa. La fase móvil, en la que irá
disuelta la muestra, se forma por disolventes cuya naturaleza se elige en función de
los componentes que se pretenden separar.
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CROMATOGRAFIA EL PAPEL
OBJETIVO GENERALES:
Conocer la cromatografía como técnica de separación de mezclas de
sustancias, sus características y los factores que en ella intervienen.
Estudiar la incidencia del coeficiente de reparto entre la fase móvil y la fase
estacionaria.
Analizar la influencia del solvente en la separación cromatografía.
Observar las diferentes características de la placa en la cromatografía.
OBJETIVOS ESPECIFICOS:
Medir la distancia recorrida por el absorbente en el papel.
Calcular los RF para cada una de las sustancias separadas.
Separar los componentes de una mezcla.
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
La cromatografía en papel es a técnica de separación de identificación de sustancias
químicas en la cual la fase estacionaria es el gua absorbida y adsorbida que hay en el
papel (papel filtro hecho de celulosa) y el soporte es el mismo papel. La fase móvil es
una solución que consiste en un disolvente de una mezcla de varios líquidos que
contiene agua.
La palabra cromatografía proviene de kromatos (color) y graphos (escrito). El nombre
de la técnica deriva de los primeros ensayos d los que se separaron pigmentos de
plantas como la clorofila, los cuales tienen colores definidos. Estos primeros pasos los
dio el botánico Ruso de origen Italiano Mijail Tswett cuando separo diversos
pigmentos en las plantas.
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MATERIALES Y REACTIVOS
Papel filtro de 22cm. de lardo por 13cm.de ancho
Horno de Secado
Lápiz
Capilares (4 unidades)
Pinza
Rociador para cromatografía
Tubo de ensayo
Cubeta para cromatografía
Solución de Fenol
Ninhidrina
Alanina
Glutamato
Acido malónico
Succinato de sodio al 0.2M
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PROCEDIMIENTO DE LA CROMATOGRAFÍA
En un papel filtro de 22 x 13 cm, trazamos una línea superior a 2.5 cm (que
será nuestra línea de referencia del corrido cromatográfico), en la parte inferior
trazamos otra línea a 1.5 cm de la base (en donde colocaremos las muestras)
ubicamos las muestras de Alanina y Glutamato en ambos extremos.
Luego enrollamos el papel y lo grapamos en ambos extremos sin sobreponerlo
(sino juntándolo solo en los extremos) y lo ponemos sobre la solución de fenol
con agua.
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Luego esperamos que las muestras migren hasta la línea de referencia y de
ahí ponemos a secar en la estufa a 80° C por 1 minutos, luego retiramos.
Una vez secado el papel procedemos a realizar el revelado con la sustancia
reveladora: Ninhidrina, rociándola suavemente hasta cubrir el papel hasta
donde se ha realizado la migración. Después de esto volvemos a poner a secar
en la estufa a 80° por 10 minutos.
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Luego del segundo secado procedemos a retirar las grapas del papel y
observaos las manchas que se han producimos y procedemos a realizar el
barrido cromatográfico utilizando la formula siguiente:
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RESULTADOS
Alanina
GlutamATO
RF= 4.8 =0.50
9.5
RF= 2.5 = 0.26
9.5
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Conclusión
De acuerdo con los resultados obtenidos, llegamos a la conclusión que
el aminoácido como la Alanina tiene un RF de 0.50 y el Glutamato tiene
un RF de 0.26, por lo tanto afirmamos que el desplazamiento es mayor
en la Alanina, lo que nos quiere decir que tiene un menor peso
molecular, al contrario del Glutamato, eso nos quiere decir que su
desplazamiento es menor por poseer mayor peso molecular y que las
soluciones no se rebelan ante la ninhidrina por no ser aminoácidos.
WEBGRAFÍAS
http://www.slideshare.net/honey61187/cromatografa-de-papel#btnNext