INTRODUCCIÓN:

La cavidad bucal representa un ambiente del huésped que tiene características que favorecen la ubicación y el crecimiento de una gran variedad de microorganismos.

En la cavidad bucal, las áreas con diferentes ambientes fisio-químicos y nutricionales, como la mucosa del carrillo, la lengua, las hendiduras gingivales y la superficie de los dientes, favorecen la adherencia y el crecimiento de tipos selectos de microbios. Por ejemplo, la espiroqueta treponema microdentium para vivir depende de otros microorganismos y de un ambiente anaerobio como el de las hendiduras de la encía.

Las fuentes intrínsecas de nutrientes para los microorganismos de la cavidad bucal son los materiales que se encuentran en torno de los dientes, los exudados, las células epiteliales degradadas y los componentes de la saliva, ciertas proteínas salivales proporcionan aminoácidos que influyen en el crecimiento de Streptococcus mutans y de Streptococcus sanguis; la saliva de los sujetos con caries influye mejor en el crecimiento de los Streptococcus mutans. Además la comida que ingerimos permanece en la cavidad bucal, sirve como fuente extrínseca de nutrientes para la microflora bucal.

Los Streptococcus constituyen un grupo grande y complejo de bacterias son capaces de presentar patogenicidad independiente. Se clasifican los Streptococcus y los Stafilococcus como los organismos más numerosos aislados en las muestra clínicas.

En la cavidad bucal los Streptococcus constituyen el grupo más numeroso de bacterias y son las que se presentan con más frecuencia en las infecciones bucales, los Streptococcus son decisivos en la aparición de la caries dental y en periodontitis.

Los Streptococcus son células esféricas que pueden elongar y formar bacilos. Son Grampositiva, no esporuladas y sin motilidad. Son organismos que suelen crecer en colonias convexas, translúcidas y convexas.

Los Stafilococcus son miembros de la flora microbiana normal en humanos. Constituyen un género de bacterias esféricas, sin movimiento y no esporuladas. Son catalasa-positivo y capaces de crecer y producir ácido a partir de la glucosa por vía anaerobia, se tiñen fácilmente en tinciones básicas comunes y son intensamente Grampositivos. Su crecimiento es abundante, y las colonias sobre la superficie de agar son medianamente grandes, redondas, lisas y brillantes. En forma característica, se divide en más de un plano y pertenece en conjuntos irregulares que asemejan racimos de uvas. Los Stafilococcus han sido causa de numerosas lesiones dentales y bucales. Los conductos radiculares infectados a menudo producen Estafilococos, en muchas ocasiones se han encontrado parotiditis, celulitis facial, forunculosis y osteomielitis de los maxilares como resultado de una infección.

Principales microorganismos que constituyen la flora normal en la boca y faringe:

Streptococcus grupo A, Lactobacilos, Neisseria catarrhalis, Sthaphylococcus epidermis, Haemophilus influenzae, Espiroquetas, Difteroides, Pneumococcus, Candida Albicans, Klebsiella spp, E. Coli, Enterococcus, Micrococcus sp, Sthaphylococcus aureus y Actinomycetes.

OBJETIVOS:

- Se conocerán diferentes bacterias alojadas en la cavidad bucal.- Se manejará la técnica de tinción de Gram para teñir bacterias.- Se conocerán distintos tipos de agrupación de bacterias.

MATERIAL:

1 par de guantes

1 plumón para rotular

1 cotón

1 mechero

1 portaobjetos

Batería de reactivos de tinción de Gram

1 microscopio.

Aceite de inmersión.

MÉTODO:

Se toma muestra de las y encías/dientes.

Se realiza tinción de Gram, según procedimiento.

MATERIAL:

1 cajas de Petri con agar-sangre

1 caja de Petri con agar-MacConkey

1 cotón

1 mechero

1 asa

1 mascarilla

1 par de guantes

Plumón para rotular

MÉTODO:

Se toman muestras faríngeas con cotón estéril.

Prender el mechero (realizar todo el proceso de siembra cerca de este)

Colocarse mascarilla y guantes.

Rotular placas de Petri con nombre, fecha, y tipo de secreción.

Se toma la muestra faríngea con cotón estéril.

Recuerde que no se debe hablar para no expulsar microgotas de saliva.

Se lleva a siembra la muestra en las cajas de Petri de agar-sangre (primer paso).

Deslice el cotón estéril en el agar sangre en uno de sus extremos tratando de no tocar las paredes y sin dañar el medio.

Se lleva a siembra la muestra en las cajas de Petri de agar MacConkey (segundo Paso)

Deslice el cotón estéril en el agar sangre en uno de sus extremos tratando de no tocar las paredes y sin dañar el medio.

Desechar el cotón.

Las muestras se inoculan directamente en las placas, respetando que debe ser siempre el agar sangre y luego el agar MacConkey conteniendo estos agar se estrían con asa de nycrón y se incuban durante 24 horas a 37ºC.

Realizar el mismo proceso con el agar MacConkey.

Segunda sesión:

Se recogen las cajas de Petri.

Se hacen las anotaciones necesarias.

Se llevan muestra pequeñas al portaobjetos con una gota de cloruro de sodio al 9%.

Se deja secar al aire.

Se tiñen con la técnica de Gram.

Se observan al microscopio, se hacen anotaciones.

CONCLUSIONES:

Se lograron observar los diferentes tipos de microorganismos que tenemos en la faringe, y su manera de agruparse.

RESULTADOS:

Secreción faríngea (agar-sangre):

Primera Colonia

- Color: Blanquecino-amarillento- Forma: pequeños puntos- Borde: discontinuo- Luz reflejada: brillosa- Superficie: rugosa- Hemólisis: Alfa

Segunda colonia

- Color: Verdoso- Forma: Uniforme- Borde. Continuo- Luz reflejada: Mate- Superficie: rugosa- Hemólisis: Alfa

Tercera colonia

- Color: blanco- Forma: puntiforme- Borde: continuo- Luz reflejada: brillosa- Superficie: lisa- Hemólisis: beta

Secreción faríngea (Agar MacConkey)

- No hubo desarrollo de colonias

Agar MacConkey

Historia

Este medio se basa en la fórmula original de MacConkey a base de sales biliares, rojo neutro y lactosa para el aislamiento de bacilos entéricos Gram-negativos. El medio ha sufrido múltiples variaciones en el

transcurso del tiempo, ya sea por la adición de otros ingredientes o por la modificación de las proporciones entre ellos.

Fundamento

Por la presencia de las sales biliares y el cristal violeta se inhibe el crecimiento de las bacterias Gram-positivas. Por la presencia de la lactosa, las bacterias capaces de fermentarla acidifican el medio, cambiando el color del rojo neutro y formando colonias rojas o rosadas, pudiendo presentar un halo turbio correspondiente al precipitado biliar. Las bacterias lactosa-negativas dan colonias incoloras.

Modo de empleo

Sembrar por estría en la superficie de la placa.Incubar a 37ºC de 18 a 24 horas.Color: beige-rosado.

Base Agar sangre

Se emplea, añadiendo sangre o sangre cocida, para el cultivo y aislamiento de microorganismos exigentes, sobre todo patógenos y para su determinación. Si no se añade sangre, es adecuado como base para la preparación de otros medios especiales.

Historia

Se trata básicamente del medio de Huntoon modificado. Más tarde Norton observó que el pH ligeramente bajo era muy útil para el cultivo de Estreptococos y Neumococos.

Fundamento

Dada la excelente base nutritiva, permite el crecimiento de prácticamente todos los microorganismos que pudieran estar presentes. Si se añade sangre se pueden determinar las distintas formas de hemólisis que pudieran tener lugar. Si se calienta se obtiene el Agar Chocolate, también muy empleado. Por la adición de distintos antibióticos se obtienen medios con caracteres selectivos.

Modo de empleo

Sembrar las placas en la superficie del medio.Incubar a 37ºC de 24 a 48 horas.

Espirilos Cocos Basilos