Retrovirus: HIV 1 parte

Infecciones Virales Transmisibles por Vía Transfusional: Hitos, Paradigmas, Aprendizajes. Fundación Hemocentro Buenos Aires

Dra. Mirta Remesar

Laboratorio de ITT, Centro Regional de Hemoterapia

Dra. Andrea Mangano

Lab. Biología Celular y Retrovirus- CONICET

Hospital de Pediatría “Juan P. Garrahan”

7 de Noviembre de 2013

• Familia: Retroviridae

– subfamilia Lentiviridae

• HIV-1, HIV-2

Virus de la Inmunodeficiencia Humana (HIV)

• HIV-1, HIV-2

• Agente causal del Sindrome de

Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA)

(1983)

• Es un virus citolítico con tropismo por

células T CD4+ y macrófagos

ESTRUCTURA DEL VIRION

Genoma del HIVGenoma del HIV--11

p10 p66/51 p32

Ciclo de Replicación del HIV-1

CD4

2. Transcripciónreversa

3. Integración

Desnudamiento

4. Ensamble

5.Brotación

1. Unión Transcriptasareversa

Integrasa

CCR5

CD4

CXCR4

6. Maduración

Proteasa

http://www.youtube.com/watch?v=J8bL3JMFg4g

CLASIFICACIÓN DEL HIV

Tipos

Grupos

Subtipos

B, A/E, C, A/GD, Grupo O, HIV-2

HIV-2, A/G, G

B, A/B, A, A/E, C, D, FG, H, J, A/GA, Grupo O, HIV-2

C, A/E, BB/C, HIV-2

B, F, B/F, CA, C, A/G,

D, F, G, H, J, A/E,B, otros recombinantesGrupo O, N

B

McCutchan y col. 2000

SIVsm/HIVSIVsm/HIV--22

Sooty mangabeySooty mangabey

ORIGEN Y DISEMINACIÓN DE LA EPIDEMIA ORIGEN Y DISEMINACIÓN DE LA EPIDEMIA

•• HIVHIV--1 y HIV1 y HIV--22 •• Diferentes Diferentes

GorilaGorila

SIVcpz/HIVSIVcpz/HIV--11

Pan Pan trogloditestroglodites

•• HIVHIV--1 y HIV1 y HIV--22

•• HIVHIV--1 grupos1 gruposM, N, O, M, N, O, PP

•• HIVHIV--1 grupo M1 grupo Msubtipos y subtipos y

recombinantesrecombinantes

•• Diferentes Diferentes primatesprimates

•• Diferentes Diferentes introduccionesintroducciones

•• Diseminación Diseminación mundial mundial

Adaptada de Dr. Manuel Gomez Carrillo, CNRS

•HIV infecta células T CD4+ y del linaje de

macrófagos

•Monocitos

•Macrófagos

•Células dendríticas (piel)

INFECCIÓN POR HIV

•Células de la microgía (CNS)

•El virus produce una infección lítica de Céls. CD4+ y

una infección en macrófagos de tipo persistente y

productiva (bajo nivel)

•El virus altera las funciones de las células T y de los

macrófagos

Características del HIV-1

• Alta tasa replicativa (109- 10 10 partículas diarias)

• Tiempo de generación viral de 2.6 días con una

vida media de 6 horas.

• Tasa de mutación (1 sustitución por • Tasa de mutación (1 sustitución por

genoma/ciclo)

• Alta tasa de recombinación (3 a 30 rec/ciclo)

•• Rápida acumulación de variantes en órganos y tejidos Rápida acumulación de variantes en órganos y tejidos

•• Persistencia viral en reservoriosPersistencia viral en reservorios

�Historia de los métodos de tamizaje en donantes de

sangre

�Interpretación de pruebas confirmatorias de infección

�Historia natural de la infección: Etapas de la infección

�Incidencia de la infección: Estudios para definirla en una

población dada

�NAT en donantes de sangre: breve reseña de métodos y

algunos datos de detección de la infección en el mundo

Tamizaje en donantes de sangre

Las primeras pruebas para la detección de anticuerpos a-HIV fueron accesibles a principios de los años 80

Estaban basados en enzimo-inmunoensayos cuyos materiales antigénicos provenían de lisados virales materiales antigénicos provenían de lisados virales (primera generación)

La incorporación de antígenos recombinantes y péptidos específicos en los Elisas de segunda generación los hizo más estables y sensibles

Tamizaje en donantes de sangre

Posteriormente se incorporan los ensayos para detección combinada de HIV-1 y HIV-2, así como componentes antigénicos de HIV-1 grupo O

Los ensayos de tercera generación utilizan el principio de antígeno “sandwich”, el cual permite una menor dilución de la muestra y mejora la detección de anticuerpos IgM

Por lo tanto, se mejora la sensibilidad para la detección de anticuerpos en la sero-conversión temprana

Esquema de Elisa de formato de antígeno “sandwich” en fase sólida

Anticuerpos en la muestra

Antígeno en fase sólida

Conjugado: antígeno marcado

Sustrato

Tamizaje en donantes de sangre

Incorporación de Elisa para antígeno p24, con el objeto de detectar la infección temprana

Incorporación de ensayos de cuarta generación o “combos”, es decir, de detección simultánea de “combos”, es decir, de detección simultánea de anticuerpos y antígeno p24

Estas pruebas detectan la infección por HIV entre 1 y 14 días antes que los ensayos de tercera generación (sólo anticuerpos)

Tamizaje en donantes de sangre

Hacia fines de los años 90 se introducen en E.E.U.U. las pruebas para detección de ácidos nucleicos para HCV y HIV (NAT) para la reducción del periodo de ventana infeccioso

En los primeros tres años de NAT para HIV en dicho país, se encontraron 12 donaciones positivas para RNA de HIV-1 (negativas para p24 y anticuerpos) en 37 millones de donaciones

Período de ventana¿Cómo definirlo?: Período transcurrido entre la infección y la posibilidad de detectarla

�56 días con las pruebas para detección de anticuerpos de primera generación

�33 días con las pruebas de segunda generación�33 días con las pruebas de segunda generación

�22 días con las pruebas de tercera generación

�16 días con pruebas para p24 o “combo”

�11 días con pruebas para RNA de HIV por NAT en minipool