ÌÎËÎÊÎ - docs.nevacert.rudocs.nevacert.ru/files/gost/gost_r_51600-2000.pdf · ÃÎÑÒ...

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÛÉ ÑÒÀÍÄÀÐÒ ÐÎÑÑÈÉÑÊÎÉ ÔÅÄÅÐÀÖÈÈ

Ì Î Ë Î Ê Î

Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ íàëè÷èÿàíòèáèîòèêîâ

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå

Ïðåäèñëîâèå

1 ÐÀÇÐÀÁÎÒÀÍ Ãîñóäàðñòâåííûì ó÷ðåæäåíèåì Âñåðîññèéñêèì íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèì èí-ñòèòóòîì âåòåðèíàðíîé ñàíèòàðèè, ãèãèåíû è ýêîëîãèè (ÃÓ ÂÍÈÈÂÑÃÝ), Èíñòèòóòîì ïèòàíèÿ ÐÀÌÍè Ãîñóäàðñòâåííûì ó÷ðåæäåíèåì Âñåðîññèéñêèì íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèì èíñòèòóòîì ìîëî÷íîé ïðî-ìûøëåííîñòè (ÃÓ ÂÍÈÌÈ)

ÂÍÅÑÅÍ Òåõíè÷åñêèì êîìèòåòîì ïî ñòàíäàðòèçàöèè ÒÊ 186 «Ìîëîêî è ìîëî÷íûå ïðîäóêòû»

2 ÏÐÈÍßÒ È ÂÂÅÄÅÍ Â ÄÅÉÑÒÂÈÅ Ïîñòàíîâëåíèåì Ãîññòàíäàðòà Ðîññèè îò 26 àïðåëÿ2000 ã. ¹ 127-ñò

3 ÂÂÅÄÅÍ ÂÏÅÐÂÛÅ

4 ÈÇÄÀÍÈÅ (ôåâðàëü 2010 ã.) ñ Èçìåíåíèÿìè ¹ 1, 2, óòâåðæäåííûìè â ôåâðàëå 2006 ã., ÿíâàðå2008 ã. (ÈÓÑ 4—2006, 4—2008)

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

II

© ÈÏÊ Èçäàòåëüñòâî ñòàíäàðòîâ, 2000© ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ, 2010

Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò íå ìîæåò áûòü ïîëíîñòüþ èëè ÷àñòè÷íî âîñïðîèçâåäåí, òèðàæèðîâàí èðàñïðîñòðàíåí â êà÷åñòâå îôèöèàëüíîãî èçäàíèÿ áåç ðàçðåøåíèÿ Ôåäåðàëüíîãî àãåíòñòâà ïî òåõíè-÷åñêîìó ðåãóëèðîâàíèþ è ìåòðîëîãèè

1

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

Ã Î Ñ Ó Ä À Ð Ñ Ò Â Å Í Í Û É Ñ Ò À Í Ä À Ð Ò Ð Î Ñ Ñ È É Ñ Ê Î É Ô Å Ä Å Ð À Ö È È

Èçäàíèå îôèöèàëüíîå

Äàòà ââåäåíèÿ 2001—07—01

1 Îáëàñòü ïðèìåíåíèÿ

Íàñòîÿùèé ñòàíäàðò ðàñïðîñòðàíÿåòñÿ íà íàòóðàëüíîå êîðîâüå ìîëîêî — ñûðüå, ïàñòåðèçîâàí-íîå, ñòåðèëèçîâàííîå è ïðåäâàðèòåëüíî âîññòàíîâëåííîå ñóõîå ìîëîêî (äàëåå — ìîëîêî) è óñòàíàâëè-âàåò ìèêðîáèîëîãè÷åñêèå è ðåöåïòîðíûå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ íàëè÷èÿ àíòèáèîòèêîâ.

Ðàçäåë 1 (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 1, 2).

2 Íîðìàòèâíûå ññûëêè

Â íàñòîÿùåì ñòàíäàðòå èñïîëüçîâàíû ññûëêè íà ñëåäóþùèå ñòàíäàðòû:ÃÎÑÒ 427—75 Ëèíåéêè èçìåðèòåëüíûå ìåòàëëè÷åñêèå. Òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 3145—84 ×àñû ìåõàíè÷åñêèå ñ ñèãíàëüíûì óñòðîéñòâîì. Îáùèå òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 9225—84 Ìîëîêî è ìîëî÷íûå ïðîäóêòû. Ìåòîäû ìèêðîáèîëîãè÷åñêîãî àíàëèçàÃÎÑÒ 16317—87 Ïðèáîðû õîëîäèëüíûå ýëåêòðè÷åñêèå áûòîâûå. Îáùèå òåõíè÷åñêèå óñëîâèÿÃÎÑÒ 23454—79 Ìîëîêî. Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâÃÎÑÒ 24065—80 Ìîëîêî. Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ ñîäûÃÎÑÒ 24066—80 Ìîëîêî. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ àììèàêàÃÎÑÒ 24067—80 Ìîëîêî. Ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ïåðåêèñè âîäîðîäàÃÎÑÒ 25336—82 Ïîñóäà è îáîðóäîâàíèå ëàáîðàòîðíûå ñòåêëÿííûå. Òèïû, îñíîâíûå ïàðàìåòðû è

ðàçìåðûÃÎÑÒ 29169—91 (ÈÑÎ 648—77) Ïîñóäà ëàáîðàòîðíàÿ ñòåêëÿííàÿ. Ïèïåòêè ñ îäíîé îòìåòêîéÃÎÑÒ 29227—91 (ÈÑÎ 835-1—81) Ïîñóäà ëàáîðàòîðíàÿ ñòåêëÿííàÿ. Ïèïåòêè ãðàäóèðîâàííûå.

×àñòü 1. Îáùèå òðåáîâàíèÿ

3 ×àøå÷íûé ìåòîä ñ Bac. stearothermophilus

3.1 Ñóùíîñòü ìåòîäàÌåòîä îñíîâàí íà ñïîñîáíîñòè àíòèáèîòèêîâ, ñîäåðæàùèõñÿ â ìîëîêå, äèôôóíäèðîâàòü â àãàðî-

âóþ ñðåäó ñî ñïîðàìè òåñò-ìèêðîáà è ïðåïÿòñòâîâàòü åãî ðîñòó, ÷òî ïðèâîäèò ê îáðàçîâàíèþ ïðîçðà÷-íûõ çîí èíãèáèöèè. Íàëè÷èå ëþáîãî àíòèáèîòèêà â ìîëîêå óñòàíàâëèâàþò ïî äèàìåòðó çîíûèíãèáèöèè.

3.2 Àïïàðàòóðà, ðåàêòèâû è ìàòåðèàëû3.2.1 Àïïàðàòóðà, ðåàêòèâû è ìàòåðèàëû ïî ÃÎÑÒ 9225 è óêàçàííûå â 3.2.2—3.2.16.3.2.2 Õîëîäèëüíèê áûòîâîé ïî ÃÎÑÒ 16317.3.2.3 Öåíòðèôóãà ÷àñòîòîé âðàùåíèÿ 3000 ìèí—1 è ðàçäåëÿþùèì ôàêòîðîì 750 ì/ñ2.

ÌÎËÎÊÎ

Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ íàëè÷èÿ àíòèáèîòèêîâ

Milk.Methods for determination of the antibiotics indication

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

2

3.2.4 ×àñû ìåõàíè÷åñêèå ñ ñèãíàëüíûì óñòðîéñòâîì ïî ÃÎÑÒ 3145.3.2.5 Êîëáà êîíè÷åñêàÿ ïî ÃÎÑÒ 25336, âìåñòèìîñòüþ 250 ñì3.3.2.6 Ëèíåéêà ïî ÃÎÑÒ 427, ïðåäåëîì èçìåðåíèÿ 150 ìì èëè àïïàðàò Ìèêðîôîò 5ÏÎ-1.3.2.7 Ïðîáîéíèê äèàìåòðîì 10 ìì èëè ñâåðëî ïðîáî÷íîå ¹ 4.3.2.8 Ïèïåòêà ãðàäóèðîâàííàÿ ïî ÃÎÑÒ 29227, 2-ãî êëàññà òî÷íîñòè, âìåñòèìîñòüþ 25 ñì3.3.2.9 Ãèäðîëèçàò êîðìîâûõ äðîææåé.3.2.10 Äèñêè ñî ñòðåïòîìèöèíîì.3.2.11 Îïòè÷åñêèé ñòàíäàðò ìóòíîñòè ÎÑÎ 42-28-29—86.3.2.12 Ïðåïàðàò ÑÊÈÂ.3.2.13 Ñòàíäàðò ñòðåïòîìèöèíà ÐÑÎ 9347-194-00494189—99.3.2.14 Òåñò-ìèêðîá Bac. stearothermophilus ÂÊÌÂ-510, âûïóñêàåìûé Èíñòèòóòîì áèîõèìèè è

ôèçèîëîãèè ìèêðîîðãàíèçìîâ ÐÀÍ.3.2.15 Ôóêñèí îñíîâíîé, ñïèðòîâîé ðàñòâîð êîíöåíòðàöèè 50 ã/äì3.3.2.16 Ýêñòðàêò äðîææåâîé.Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíÿòü äðóãèå ñðåäñòâà èçìåðåíèé ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè è îáî-

ðóäîâàíèå ñ òåõíè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè íå õóæå, à òàêæå ðåàêòèâû ïî êà÷åñòâó íå íèæå óêàçàí-íûõ.

3.3 Îòáîð ïðîá3.3.1 Îòáîð ïðîá — ïî ÃÎÑÒ 9225.3.3.2 Ïðîáû ìîëîêà äî èñïûòàíèÿ äîïóñêàåòñÿ õðàíèòü â õîëîäèëüíèêå ïðè òåìïåðàòóðå

(5 ±1) °C íå áîëåå 24 ÷.3.3.3 Àíàëèçó ïîäëåæàò ïðîáû ìîëîêà, äàâøèå ïîëîæèòåëüíûé ðåçóëüòàò ïî ÃÎÑÒ 23454 è îòðè-

öàòåëüíûé — ïî ÃÎÑÒ 24065, ÃÎÑÒ 24066 è ÃÎÑÒ 24067.3.4 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó3.4.1 Ïîäãîòîâêà ïîñóäû è ìàòåðèàëîâ3.4.1.1 Âñþ íîâóþ ïîñóäó, ïðåäíàçíà÷åííóþ äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé, êèïÿòÿò â

ïîäêèñëåííîé âîäå (ðàñòâîð ñîëÿíîé êèñëîòû îáúåìíîé äîëè 1 %—2 %) â òå÷åíèå 15 ìèí, çàòåìîïîëàñêèâàþò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé.

Âûìûòóþ ïîñóäó ñòåðèëèçóþò â ñóøèëüíîì øêàôó ïðè òåìïåðàòóðå (160±5) °C â òå÷åíèå 2 ÷ èëèâ àâòîêëàâå ïðè (121±2) °C â òå÷åíèå (30±1) ìèí ñ ïîñëåäóþùèì ïîäñóøèâàíèåì.

×àøêè Ïåòðè, ïèïåòêè è öèëèíäðû ñòåðèëèçóþò çàâåðíóòûìè â áóìàãó èëè â ìåòàëëè÷åñêèõïåíàëàõ. Â êîíåö ïèïåòêè ïðåäâàðèòåëüíî âêëàäûâàþò êóñî÷åê âàòû. Ïðîáèðêè è êîëáû çàêðûâàþòâàòíî-ìàðëåâûìè ïðîáêàìè è îáåðòûâàþò áóìàãîé. Ñòåðèëüíóþ ïîñóäó õðàíÿò â ïëîòíî çàêðûâàþ-ùèõñÿ øêàôàõ èëè ÿùèêàõ ñ êðûøêàìè.

3.4.2 Ïðèãîòîâëåíèå ïèòàòåëüíûõ ñðåä3.4.2.1 Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ñïîð Bac. stearothermophilus ÂÊÌÂ-510 èñïîëüçóþò ïèòàòåëüíóþ ñðåäó

ñëåäóþùåãî ñîñòàâà: äðîææåâîé ýêñòðàêò — 10,0 ã, ïåïòîí — 20,0 ã, ãëþêîçà — 0,5 ã, äèñòèëëèðîâàí-íàÿ âîäà — äî 1000,0 ñì3.

Â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 1000 ñì3 ïîìåùàþò âñå êîìïîíåíòû ïèòàòåëüíîé ñðåäû, ðàñòâîðÿ-þò â íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, äîâîäÿò îáúåì ðàñòâîðà âîäîé äî ìåòêè è óñòà-íàâëèâàþò ðÍ ñðåäû ïî ðÍ-ìåòðó, ðàâíûé (7,1±0,1). Ðàçëèâàþò ðàñòâîð â êîëáû ïî 200,0 ñì3 èñòåðèëèçóþò åãî ïðè òåìïåðàòóðå (121±2) °C â òå÷åíèå (15±1) ìèí.

3.4.2.2 Äëÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà ãîòîâÿò àãàðîâóþ ñðåäó ñëåäóþùåãî ñîñòàâà: ãèäðîëèçàò êîðìîâûõäðîææåé — 1,0 ã, ïåïòîí — 0,4 ã, õëîðèñòûé íàòðèé — 0,1 ã, àãàð — 1,6 ã, äèñòèëëèðîâàííàÿ âîäà —äî 100,0 ñì3.

Â êîëáó âìåñòèìîñòüþ 200 ñì3 âíîñÿò 100 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé âîäû è âñå êîìïîíåíòû ñðåäû,ïåðåìåøèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ è íàãðåâàþò äî êèïåíèÿ. Çàòåì îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû(55±5) °C, óñòàíàâëèâàþò ðÍ ñðåäû ïî ðÍ-ìåòðó, ðàâíûé (7,3±0,1), è ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå(121±2) °C â òå÷åíèå (15±1) ìèí.

3.4.2.3 Äëÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíÿòü ïèòàòåëüíûå ñðåäû óêàçàííîãî â 3.4.2.1 è3.4.2.2 ñîñòàâà ïðîìûøëåííîãî èçãîòîâëåíèÿ.

3.4.3 Ïîëó÷åíèå ñïîð òåñò-ìèêðîáà3.4.3.1 Ñðåäó ïî 3.4.2.1 çàñåâàþò 2—3 ñì3 18—20-÷àñîâîé òåñò-êóëüòóðû Bac. stearothermophilus

ÂÊÌÂ-510, âûðàùåííîé â ïðîáèðêàõ ñ ýòîé æå ñðåäîé, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò è ïîìåùàþò âòåðìîñòàò òåìïåðàòóðîé (55±1) °C íà 3 ñóò.

Ïîñëå îêîí÷àíèÿ èíêóáàöèè èç ïîñåâîâ äåëàþò ìàçêè, îêðàøèâàþò èõ ñïèðòîâûì ðàñòâîðîì

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

3

îñíîâíîãî ôóêñèíà 50 ã/äì3 è ìèêðîñêîïèðóþò.Ïðè íàëè÷èè â ïîëå çðåíèÿ 90 %—95 % ñâîáîäíûõ ñôîðìèðîâàâøèõñÿ ñïîð êîëáû ñ ïîñåâàìè

ïîìåùàþò íà 16—18 ÷ â õîëîäèëüíèê äëÿ îñàæäåíèÿ. Íàäîñàäî÷íóþ æèäêîñòü èç êîëáû ñëèâàþò, àîñàäîê ðàçëèâàþò ïî ñòåðèëüíûì öåíòðèôóæíûì ïðîáèðêàì è ïðîãðåâàþò â âîäÿíîé áàíå ïðè òåìïå-ðàòóðå âíóòðè ïðîáèðîê (67±2) °C â òå÷åíèå (30±1) ìèí. Ïðîáèðêè öåíòðèôóãèðóþò 20—30 ìèí.Îñàäîê îòìûâàþò ñòåðèëüíîé äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé (íå ìåíåå òðåõ ðàç) äî ïîëó÷åíèÿ ïðîçðà÷íîéæèäêîñòè íàä íèì.

Âçâåñü ñïîð âòîðè÷íî ïðîãðåâàþò ïðè òåìïåðàòóðå (67±2) °C â òå÷åíèå (30±1) ìèí. Ïîëó÷åííóþâçâåñü ïåðåíîñÿò â áàêòåðèîëîãè÷åñêèå ïðîáèðêè è õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå íå áîëåå 2 ìåñ.

3.4.4 Ïðèãîòîâëåíèå çàñåÿííîé àãàðîâîé ñðåäû3.4.4.1 Â ïðîáèðêè îòáèðàþò âçâåñü ñïîð òåñò-ìèêðîáà ïî 3.4.3.1 è ðàçâîäÿò ñòåðèëüíîé äèñòèëëè-

ðîâàííîé âîäîé äî ïîëó÷åíèÿ ñóñïåíçèè ñïîð, âèçóàëüíî ñîîòâåòñòâóþùåé 10 åäèíèöàì ïî îïòè÷åñêî-ìó ñòàíäàðòó ìóòíîñòè.

3.4.4.2 Ê 100 ñì3 ðàñïëàâëåííîé è îõëàæäåííîé äî (60±2) °C ñðåäû ïî 3.4.2.2 äîáàâëÿþò 2,5 ñì3

âîäíîãî ðàñòâîðà ãëþêîçû ìàññîâîé äîëåé 40 % è 4 ñì3 ñóñïåíçèè ñïîð ïî 3.4.4.1. Ñìåñü ñðåäû è ñïîðòùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò ãðàäóèðîâàííîé ïèïåòêîé ïî (11±1) ñì3 â ÷àøêè Ïåòðè,óñòàíîâëåííûå íà ñòðîãî ãîðèçîíòàëüíîé ïîâåðõíîñòè ñòîëà.

3.4.4.3 ×àøêè çàñåâàþò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä óïîòðåáëåíèåì.Â íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ ÷àøêè õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå ïðè òåìïåðàòóðå (5±1) °C íå áîëåå 2 ñóò. Ïåðåä

èñïîëüçîâàíèåì èõ ïðîãðåâàþò â òåðìîñòàòå ïðè (55±1) °C â òå÷åíèå (20±1) ìèí.3.4.5 Ïðèãîòîâëåíèå îáåçæèðåííîãî ñòåðèëüíîãî ìîëîêà3.4.5.1 Îáåçæèðåííîå ñòåðèëüíîå ìîëîêî ïîëó÷àþò èç öåëüíîãî ìîëîêà êèñëîòíîñòüþ 16—18 °T,

ïðåäâàðèòåëüíî ïðîâåðåííîãî íà îòñóòñòâèå èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâ ïî ÃÎÑÒ 23454. Â ïðîáèðêè ðàçëè-âàþò îáåçæèðåííîå ìîëîêî ïî 10 ñì3 è ñòåðèëèçóþò ïðè 105 Ïà (1 àòì) â òå÷åíèå (10±1) ìèí.

Äîïóñêàåòñÿ èñïîëüçîâàòü ïðåïàðàò ÑÊÈÂ.3.4.6 Ïðèãîòîâëåíèå êîíòðîëüíîãî ðàçâåäåíèÿ ñòðåïòîìèöèíà àêòèâíîñòüþ 2,5 ìêã/ñì3 (Åä/ã)3.4.6.1 Êîíòðîëüíîå ðàçâåäåíèå ñòðåïòîìèöèíà èñïîëüçóþò äëÿ ïðîâåðêè àêòèâíîñòè ðîñòà òåñò-

ìèêðîáà.3.4.6.2 Êîíòðîëüíîå ðàçâåäåíèå ñòðåïòîìèöèíà ãîòîâÿò â ôîñôàòíûõ áóôåðíûõ ðàñòâîðàõ.Ñîñòàâ ðàñòâîðà 1: äâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé — 2,0 ã, îäíîçàìåùåííûé ôîñôîðíî-

êèñëûé êàëèé — 8,0 ã, äèñòèëëèðîâàííàÿ âîäà — äî 1000,0 ñì3.Â ìåðíîé êîëáå âìåñòèìîñòüþ 1000 ñì3 ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå äèñòèë-

ëèðîâàííîé âîäû è äîâîäÿò îáúåì âîäîé äî ìåòêè. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ ðàñòâîðà ïî ðÍ-ìåòðó, ðàâíûé(6,1±0,1), è ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (112±2) °C â òå÷åíèå (30±1) ìèí. Ñðîê õðàíåíèÿ ðàñòâîðà— íå áîëåå 30 ñóò ïðè òåìïåðàòóðå (5±1) °C.

Ñîñòàâ ðàñòâîðà 2: äâóçàìåùåííûé ôîñôîðíîêèñëûé êàëèé — 16,73 ã, îäíîçàìåùåííûé ôîñôîð-íîêèñëûé êàëèé — 0,523 ã, äèñòèëëèðîâàííàÿ âîäà — äî 1000,0 ñì3.

Â ìåðíîé êîëáå âìåñòèìîñòüþ 1000 ñì3 ðàñòâîðÿþò êîìïîíåíòû â íåáîëüøîì êîëè÷åñòâå äèñòèë-ëèðîâàííîé âîäû è äîâîäÿò îáúåì âîäîé äî ìåòêè. Óñòàíàâëèâàþò ðÍ ðàñòâîðà ïî ðÍ-ìåòðó, ðàâíûé(7,9±0,1), è ñòåðèëèçóþò ïðè òåìïåðàòóðå (112±2) °C â òå÷åíèå (30±1) ìèí. Ñðîê õðàíåíèÿ ðàñòâîðà —íå áîëåå 30 ñóò ïðè òåìïåðàòóðå (5±1) °C.

3.4.6.3 Êîíòðîëüíîå ðàçâåäåíèå ãîòîâÿò èç îñíîâíîãî ðàñòâîðà ñòðåïòîìèöèíà àêòèâíîñòüþ500 ìêã/ñì3, êîòîðûé ïîëó÷àþò ðàñòâîðåíèåì 5 ìã ñòàíäàðòà àíòèáèîòèêà, âçâåøåííîãî ñ îòñ÷åòîìïîêàçàíèÿ âåñîâ äî 0,1 ìã, â áóôåðíîì ðàñòâîðå 1 ïî 3.4.6.2. Îáúåì áóôåðíîãî ðàñòâîðà ñîñòàâëÿåò0,01 àêòèâíîñòè àíòèáèîòèêà.

Ï ð è ì å ð: Ïðè àêòèâíîñòè ñòàíäàðòà ñòðåïòîìèöèíà 760 ìêã/ìã íàâåñêó àíòèáèîòèêà (5 ìã)ðàñòâîðÿþò â 7,6 ñì3 áóôåðíîãî ðàñòâîðà 1 è ïîëó÷àþò îñíîâíîé ðàñòâîð àêòèâíîñòüþ 500 ìêã/ñì3.

Îñíîâíîé ðàñòâîð àíòèáèîòèêà õðàíÿò â ïîñóäå èç òåìíîãî ñòåêëà ñ ïðèòåðòîé ïðîáêîé íå áîëåå30 ñóò ïðè òåìïåðàòóðå (5±1) °C.

Èç îñíîâíîãî ðàñòâîðà â òðåõ ïðîáèðêàõ ãîòîâÿò ñåðèþ ðàçâåäåíèé àíòèáèîòèêà. Â ïåðâóþ ïðî-áèðêó íàëèâàþò 1 ñì3 áóôåðíîãî ðàñòâîðà 2 ïî 3.4.6.2 è 1 ñì3 îñíîâíîãî ðàñòâîðà, âî âòîðóþ — 9 ñì3

áóôåðíîãî ðàñòâîðà 2 è 1 ñì3 ðàñòâîðà èç ïåðâîé ïðîáèðêè, â òðåòüþ — 9 ñì3 ñòåðèëüíîãî îáåçæèðåí-íîãî ìîëîêà ïî 3.4.5 è 1 ñì3 ðàñòâîðà èç âòîðîé ïðîáèðêè. Àêòèâíîñòü àíòèáèîòèêà â ðàçâåäåíèÿõñîñòàâëÿåò ñîîòâåòñòâåííî 250; 25 è 2,5 ìêã/ñì3. Ðàçâåäåíèå àíòèáèîòèêà â ìîëîêå àêòèâíîñòüþ2,5 ìêã/ñì3 ÿâëÿåòñÿ êîíòðîëüíûì.

Êîíòðîëüíîå ðàçâåäåíèå ñòðåïòîìèöèíà èñïîëüçóþò â òå÷åíèå ðàáî÷åãî äíÿ.

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

4

3.4.6.4 Âçàìåí êîíòðîëüíîãî ðàçâåäåíèÿ ñòðåïòîìèöèíà äëÿ ïðîâåðêè àêòèâíîñòè ðîñòà òåñò-ìèêðîáà ìîãóò áûòü èñïîëüçîâàíû äèñêè ñî ñòðåïòîìèöèíîì ïî 3.2.10.

3.4.7 Ïîäãîòîâêà ïðîá ìîëîêà ê àíàëèçóÊàæäóþ ïðîáó ìîëîêà íàëèâàþò ïî 5—10 ñì3 â ÷èñòóþ ñòåðèëüíóþ ïðîáèðêó, ïðîãðåâàþò â

òå÷åíèå (10±1) ìèí íà âîäÿíîé áàíå ïðè òåìïåðàòóðå âíóòðè ïðîáèðêè (87±2) °C è îõëàæäàþò âõîëîäíîé âîäå äî òåìïåðàòóðû 18 %—25 °C.

3.5 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà3.5.1 Íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èññëåäîâàíèåì ìîëîêà íà ïîâåðõíîñòè àãàðîâîé ñðåäû, ðàçëèòîé â

÷àøêè Ïåòðè ïî 3.4.4, ïðîáîéíèêîì èëè ïðîáî÷íûì ñâåðëîì âûðåçàþò ñåìü ëóíîê äèàìåòðîì 10 ìì.Øåñòü ëóíîê ðàñïîëàãàþò ïî îêðóæíîñòè ÷àøêè íà ðàâíîì ðàññòîÿíèè äðóã îò äðóãà è íà ðàññòîÿíèè

28 ìì èõ öåíòðîâ îò öåíòðà ÷àøêè. Ñåäüìóþ ëóíêó âûðåçàþò â öåíòðå ÷àøêè(ðèñóíîê 1) òîëüêî â ñëó÷àå èñïîëüçîâàíèÿ êîíòðîëüíîãî ðàçâåäåíèÿ àíòè-áèîòèêà.

3.5.2 Â öåíòðàëüíóþ ëóíêó âíîñÿò 0,05 ñì3 êîíòðîëüíîãî ðàçâåäåíèÿàíòèáèîòèêà ïî 3.4.6.3 èëè â öåíòðå ÷àøêè íà ïîâåðõíîñòü çàñåÿííîé àãàðî-âîé ñðåäû ïîìåùàþò äèñê ñî ñòðåïòîìèöèíîì ïî 3.2.10. Â ëóíêè, ðàñïîëî-æåííûå ïî îêðóæíîñòè ÷àøêè, âíîñÿò ïî 0,05 ñì3 èññëåäóåìûõ ïðîá ìîëîêàïî 3.4.7.

3.5.3 ×àøêè Ïåòðè âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òå÷åíèå(20±1) ìèí, çàòåì èõ ïîìåùàþò â òåðìîñòàò êðûøêàìè ââåðõ è èíêóáèðóþòïðè òåìïåðàòóðå (55±1) °C â òå÷åíèå 4 ÷. ×àøêè â òåðìîñòàòå ðàçìåùàþò âîäèí ðÿä.

3.6 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ3.6.1 Ðåçóëüòàòû àíàëèçà îöåíèâàþò íåïîñðåäñòâåííî ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ. ×àøêè ïðîñìàòðèâà-

þò â ïðîõîäÿùåì ñâåòå îò ëþáîãî èñòî÷íèêà ñâåòà.Äèàìåòðû çîí èíãèáèöèè ðîñòà òåñò-êóëüòóðû, îáðàçóåìûõ èñïûòóåìûì îáðàçöîì ìîëîêà è

êîíòðîëüíûì ðàçâåäåíèåì àíòèáèîòèêà, èçìåðÿþò ëèíåéêîé èëè íà àïïàðàòå Ìèêðîôîò 5ÏÎ-1 ïîêðàÿì îêðóæíîñòåé çîí.

3.6.2 Ïðè îòñóòñòâèè çîí èíãèáèöèè êîíòðîëüíîãî ðàçâåäåíèÿ ñòðåïòîìèöèíà èññëåäîâàíèÿ ïî-âòîðÿþò ñ èñïîëüçîâàíèåì âíîâü ïðèãîòîâëåííûõ çàñåÿííûõ ÷àøåê ïî 3.4.4 è êîíòðîëüíîãî ðàçâåäå-íèÿ àíòèáèîòèêà ïî 3.4.6.

3.6.3 Ïðè îòñóòñòâèè àíòèáèîòèêîâ â ìîëîêå äèàìåòð çîíû èíãèáèöèè äîëæåí áûòü ìåíåå 12 ìì,à ïðè èõ íàëè÷èè — 12 ìì è áîëåå.

3.7 Ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè3.7.1 Íàèìåíüøèå ïðåäåëû îïðåäåëåíèÿ àíòèáèîòèêîâ ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 1.

1) 1 ìêã àêòèâíîãî âåùåñòâà ðàâåí 1 Åä àêòèâíîñòè.

Ò à á ë è ö à 1

Ðèñóíîê 1 — Ñõåìàâûðåçàíèÿ ëóíîê â àãàðîâîé ñðåäå

4 Ìåòîä ñ èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëïóðïóðîì

4.1 Ñóùíîñòü ìåòîäàÌåòîä îñíîâàí íà èçìåíåíèè îêðàñêè àãàðîâîé ñðåäû ñî ñïîðàìè Bac. stearothermophilus var.

calidolactis Ñ953 îò ôèîëåòîâîé äî æåëòîé ïðè îòñóòñòâèè â èññëåäóåìîì ìîëîêå àíòèáèîòèêîâ èäðóãèõ èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâ è ñîõðàíåíèè îêðàñêè — ïðè èõ íàëè÷èè.

Íàèìåíîâàíèåàíòèáèîòèêà

Íàèìåíüøèé ïðåäåëîïðåäåëåíèÿ, Åä/ã (ìêã/ã)1)


Íàèìåíüøèé ïðåäåëîïðåäåëåíèÿ, Åä/ã (ìêã/ã)1)

Áåíçèëïåíèöèëëèí

Ñòðåïòîìèöèí

Òåòðàöèêëèí

Îêñèòåòðàöèêëèí

Õëîðòåòðàöèêëèí

0,005

0,5—1,0

0,1

0,1

0,05

Ýðèòðîìèöèí

Íåîìèöèí

Ìîíîìèöèí

Ëåâîìèöåòèí

Îëåàíäîìèöèí

0,05

0,25

0,25

2,5

2,5

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

5

4.2 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû4.2.1 Òåðìîñòàò èëè áëîê òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü òåìïåðàòóðó îò

30 °C äî 70 °C ñ äîïóñêàåìûìè îòêëîíåíèÿìè ±0,5 °C îò çàäàííîé.(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).4.2.2 Õîëîäèëüíèê áûòîâîé ïî ÃÎÑÒ 16317.4.2.3 Àìïóëû «Delvotest SP» ãåðìåòè÷íî óêóïîðåííûå, âìåñòèìîñòüþ 1,0 ñì3 ñ àãàðîâîé ñðåäîé,

ñîäåðæàùåé ñïîðû Âàñ. stearothermophilus var. calidolactis è èíäèêàòîð áðîìêðåçîëïóðïóð, ñîáðàííûå âáëîêè.

4.2.4 Ñðåäà ïèòàòåëüíàÿ òàáëåòèðîâàííàÿ «Delvotest SP», ôàñîâàííàÿ â áóòûëî÷êè èç òåìíîãîñòåêëà ñ íàâèí÷èâàþùèìñÿ êîëïà÷êîì.

4.2.3, 4.2.4 (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 1).4.2.5 Øïðèö-äîçàòîð àâòîìàòè÷åñêèé âìåñòèìîñòüþ 1,0 ñì3, íàñòðîåííûé íà îáúåì ïðîáû

0,1 ñì3.4.2.6 Íàêîíå÷íèêè ïëàñòìàññîâûå îäíîðàçîâûå, âìåñòèìîñòüþ 0,1 ñì3.4.2.7 Ïèíöåò.4.2.8 ×àñû ìåõàíè÷åñêèå ñ ñèãíàëüíûì óñòðîéñòâîì ïî ÃÎÑÒ 3145.Äîïóñêàåòñÿ ïðèìåíÿòü äðóãèå ñðåäñòâà èçìåðåíèé ñ ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè è îáî-

ðóäîâàíèå ñ òåõíè÷åñêèìè õàðàêòåðèñòèêàìè íå õóæå óêàçàííûõ.4.2.9 Àìïóëû «Delvotest SP-NT» èëè «Delvotest SP MINI-NT», ãåðìåòè÷íî óêóïîðåííûå, âìåñ-

òèìîñòüþ 1,0 ñì3 ñ àãàðîâîé è ïèòàòåëüíîé ñðåäîé, ñîäåðæàùåé ñïîðû Âàñ. stearothermophilus var.calidolactis è èíäèêàòîð áðîìêðåçîëïóðïóð, ñîáðàííûå â áëîêè.

(Ââåäåí äîïîëíèòåëüíî, Èçì. ¹ 1).4.2.10 Òåñòîâûé íàáîð «Copan Test» — êîìïëåêò, âêëþ÷àþùèé ãåðìåòè÷íî óêóïîðåííûå ïðî-

áèðêè, ñîáðàííûå â áëîêè, è ñîäåðæàùèå ñïîðû Âàñ. stearothermophilus var. calidolactis, ïîìåùåííûå âàãàð ñ ïèòàòåëüíûìè âåùåñòâàìè è èíäèêàòîðîì áðîìêðåçîëïóðïóðîì; ïèïåòêè ìåðíûå âìåñòèìîñòüþ0,1 ñì3 îäíîðàçîâîãî èñïîëüçîâàíèÿ è öâåòîâóþ øêàëó [3].

4.2.11 Ïèïåòêè âìåñòèìîñòüþ 0,1 ñì3 äëÿ îòáîðà îáðàçöîâ ìîëîêà äëÿ èññëåäîâàíèÿ ïîÃÎÑÒ 29169.

4.2.10, 4.2.11 (Ââåäåíû äîïîëíèòåëüíî, Èçì. ¹ 2).4.3 Îòáîð ïðîá4.3.1 Îòáîð ïðîá è ïîäãîòîâêà èõ ê àíàëèçó — ïî ÃÎÑÒ 9225.4.3.2 Äîïóñêàåòñÿ õðàíèòü ïðîáû â õîëîäèëüíèêå â òå÷åíèå 24 ÷ ïðè òåìïåðàòóðå (6±2) °C.4.4 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó4.4.1 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó àìïóë ïî 4.2.3 è áóòûëî÷åê ïî 4.2.4Ñòåêëÿííóþ áóòûëî÷êó ñ ïèòàòåëüíûìè òàáëåòêàìè âûíèìàþò èç õîëîäèëüíèêà è âûäåðæèâàþò

â òå÷åíèå 20 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå îò 15 äî 25 °C.(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 1).4.4.2 Îñòîðîæíî, íå ïîâðåæäàÿ óïàêîâêè, îòðåçàþò îò áëîêà íåîáõîäèìîå ÷èñëî àìïóë èëè

ïðîáèðîê (ñ ó÷åòîì êîíòðîëüíîé ïðîáû) è ìàðêèðóþò. Îñòàâøèåñÿ àìïóëû èëè ïðîáèðêè õðàíÿò âõîëîäèëüíèêå ïðè òåìïåðàòóðå (6 ± 2) °Ñ.

(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).4.4.3 Îòâèí÷èâàþò êîëïà÷îê áóòûëî÷êè è ïîìåùàþò åãî íà ñòîë âíèç äîíûøêîì. Ïèíöåòîì

âûíèìàþò êàïñóëó ñ ñèëèêàãåëåì è ïîðîëîíîâûé óïëîòíèòåëü. Íàñûïàþò â êîëïà÷îê íåîáõîäèìîåêîëè÷åñòâî òàáëåòîê ïèòàòåëüíîé ñðåäû. Ïîðîëîíîâûé óïëîòíèòåëü è êàïñóëó ñ ñèëèêàãåëåì ïîìåùà-þò â áóòûëî÷êó.

4.4.4 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó àìïóë èëè ïðîáèðîê — ïî 4.2.9 èëè 4.2.10.Îñòîðîæíî, íå ïîâðåæäàÿ óïàêîâêè, îòðåçàþò îò áëîêà íåîáõîäèìîå ÷èñëî àìïóë èëè ïðîáèðîê

(ñ ó÷åòîì êîíòðîëüíîé ïðîáû) è ìàðêèðóþò. Îñòàâøèåñÿ àìïóëû èëè ïðîáèðêè õðàíÿò â õîëîäèëüíè-êå ïðè òåìïåðàòóðå (6 ± 2) °Ñ.

(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).4.5 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà4.5.1 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà ñ èñïîëüçîâàíèåì àìïóë «Delvotest SP», «Delvotest SP-NT» èëè

«Delvotest SP MINI-NT»4.5.1.1 Ñîåäèíèòåëüíîé ÷àñòüþ øïðèöà ïðîêàëûâàþò óêóïîðêó àìïóë ïî 4.2.3 èëè 4.2.9.4.5.1.2 Â êàæäóþ îòêðûòóþ àìïóëó ïî 4.2.3 ïèíöåòîì ïîìåùàþò ïî îäíîé òàáëåòêå ïèòàòåëüíîé

ñðåäû «Delvotest SP», âçÿòîé èç êîëïà÷êà áóòûëî÷êè ïî 4.4.3. Çàòåì áóòûëî÷êó ïëîòíî çàêðûâàþòêîëïà÷êîì è õðàíÿò ïðè òåìïåðàòóðå (20 ± 2) °Ñ.

4.5.1.3 Øïðèöåì-äîçàòîðîì îòáèðàþò 0,1 ñì3 àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà è âíîñÿò â êàæäóþ àìïóëóïî 4.5.1.2 èëè 4.2.9. Äëÿ êàæäîé ïðîáû àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà èñïîëüçóþò íîâûé íàêîíå÷íèê. Îñòàâ-øååñÿ ìîëîêî ñîõðàíÿþò äî êîíöà àíàëèçà â õîëîäèëüíèêå ïðè òåìïåðàòóðå (6±2) °C.

4.5.1.4 Àìïóëû ïîìåùàþò â òåðìîñòàò è âûäåðæèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå (64,0±0,5) °C â òå÷åíèå 3 ÷.4.5.2 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà ñ èñïîëüçîâàíèåì òåñòîâîãî íàáîðà «Copan Test»4.5.2.1 Îäíîðàçîâîé ìåðíîé ïèïåòêîé îòáèðàþò 0,1 ñì3 àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà è âíîñÿò â ïðî-

áèðêó ñ ïðèîòêðûòîé ôîëüãîé ïî 4.2.10. Îñòàâøååñÿ ìîëîêî ñîõðàíÿþò äî êîíöà àíàëèçà â õîëîäèëü-íèêå ïðè òåìïåðàòóðå (6 ± 2) °Ñ.

4.5.2.2 Ïðîáèðêè ñ àíàëèçèðóåìûì ìîëîêîì çàêðûâàþò ôîëüãîé è ïîìåùàþò â áëîê òåðìîñòàòè-ðóåìûõ ÿ÷ååê è âûäåðæèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå (64,5 ± 0,5) °Ñ â òå÷åíèå 3 ÷.

4.5.2.3 Êîíòðîëüíîå îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ 4.5.1, 4.5.2. Â àìïóëó èëè ïðîáèðêóâíîñÿò 0,1 ñì3 ïðåäâàðèòåëüíî âîññòàíîâëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 23454 ïðåïàðàòà ÑÊÈÂ.

4.5—4.5.2.3 (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).4.6 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ4.6.1 Àìïóëû èëè ïðîáèðêè èçâëåêàþò èç òåðìîñòàòà èëè áëîêà òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê è îïðå-

äåëÿþò öâåò ñîäåðæèìîãî.4.6.2 Æåëòûé öâåò ñîäåðæèìîãî àìïóë èëè ïðîáèðîê ñ êîíòðîëüíûì è àíàëèçèðóåìûìè îáðàçöà-

ìè ìîëîêà ñâèäåòåëüñòâóåò îá îòñóòñòâèè â ìîëîêå èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâ. Ôèîëåòîâîå êîëüöî íàïîâåðõíîñòè ñîäåðæèìîãî àìïóëû (ðàçìåðîì íå áîëåå 1 ìì) íå ó÷èòûâàþò.

4.6.3 Ôèîëåòîâûé öâåò ñîäåðæèìîãî àìïóë èëè ïðîáèðîê ñ àíàëèçèðóåìûì îáðàçöîì ìîëîêàñâèäåòåëüñòâóåò î íàëè÷èè â ìîëîêå èíãèáèðóþùèõ âåùåñòâ.

4.6.1—4.6.3 (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).4.6.4 Âûâîä î íàëè÷èè â ìîëîêå àíòèáèîòèêîâ äåëàþò ïîñëå äîïîëíèòåëüíûõ èññëåäîâàíèé ìîëî-

êà ïî ÃÎÑÒ 24065 — ÃÎÑÒ 24067 è ïðè ïîëó÷åíèè îòðèöàòåëüíûõ ðåçóëüòàòîâ.4.7 Ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè4.7.1 Íàèìåíüøèå ïðåäåëû îïðåäåëåíèÿ àíòèáèîòèêîâ ïðåäñòàâëåíû â òàáëèöå 2.

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

6



Íàèìåíüøèé ïðåäåëîïðåäåëåíèÿ, Åä/ã (ìêã/ã),

ñ èñïîëüçîâàíèåì

DH-Ñòðåïòîìèöèí

Àìîêñèöèëëèí

Àìïèöèëëèí

Áåíçèëïåíèöèëëèí

Ãåíòàìèöèí

Äàïñîí

Äèãèäðîñòðåïòîìèöèí

Äèêëîêñàöèëëèí

Äîêñèöèêëèí

Êëîêñàöèëëèí

Ëåâîìèöåòèí (õëîð-àìôåíèêîë)

Ëèíêîìèöèí

Íàôöèëëèí

Íåîìèöèí

<1,0

0,002

<0,002

—

0,1

0,002

—

0,01

0,15

0,01

—

—

0,005

0,5

Copan Test(ÑÍ-ÀÒÊ)

Delvotest SP-NT,Delvotest

SP MINI-NT






SP MINI-NT

Îêñàöèëëèí

Îêñèòåòðàöèêëèí

Ïåíèöèëëèí

Ñïåêòèíîìèöèí

Ñïèðàìèöèí

Ñòðåïòîìèöèí

Ñóëüôàäèàçèí

Ñóëüôàäèìåòîêñèí

Ñóëüôàäîêñèí

Ñóëüôàìåòàçèí

Ñóëüôàìåòîêñàçîë

Ñóëüôàíîìåòîçèí

Cóëüôàòèîçîë

Òåòðàöèêëèí

Òèàìôåíèêîë

0,005

0,25

0,001

>0,3

>0,2

<1,0

0,05

0,05

0,1

0,1

<0,05

<0,05

0,05

0,25

>0,1

—

0,003

0,003

0,0025

0,400

—

2,500

0,010

—

0,020

7,500

0,300

0,010

0,400

0,010

0,400

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

—

0,300

—

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

7

Îêîí÷àíèå òàáëèöû 2




Òèëîçèí

Òèëìèêîçèí

Òðèìåòðîïðèì

Õëîðàìôåíèêîë

Õëîðòåòðàöèêëèí

Öåôàçîëèí

Öåôàëåêñèí

Öåôàëîíèóì

0,05

0,75

0,1

>5,0

0,25

0,05

>0,045

0,025



SP MINI-NT






SP MINI-NT

0,100

—

—

—

0,300

—

0,060

0,015

Öåôàïåðàçîí

Öåôàïèðèí

Öåôàöåòðèë

Öåôêóèíîì

Öåôòèîôóð

Öåôóðîêñèì

Ýðèòðîìèöèí

0,025

0,0025

—

0,03

0,05

0,06

>0,2

0,060

0,005

0,020

—

—

—

0,250

(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 2).

5 Ðåöåïòîðíûå ìåòîäû

5.1 Ðåöåïòîðíûé ìåòîä ñ 3,3,5,5-òðèìåòèëáåíçèäèíîì è äèìåòèëñóëüôîêñèäîì5.1.1 Ñóùíîñòü ìåòîäàÌåòîä îñíîâàí íà èììóíîôåðìåíòíîé ðåàêöèè, â ïðîöåññå êîòîðîé àíòèáèîòèêè áåòà-ëàêòàìíî-

ãî òèïà çàõâàòûâàþòñÿ ñïåöèôè÷åñêèìè áåëêîâûìè ðåöåïòîðàìè, ìå÷åííûìè ôåðìåíòîì, ñîäåðæà-ùèì èíäèêàòîð, ñ îáðàçîâàíèåì õèìè÷åñêè ïðî÷íîãî îêðàøåííîãî êîìïëåêñà ïðè âçàèìîäåéñòâèè ñìîëîêîì, ñîäåðæàùèì àíòèáèîòèêè.

Íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå ïåíèöèëëèíà è àíòèáèîòèêîâ áåòà-ëàêòàìíîãî òèïà (àìïèöèëëèíà, öå-ôàïèðèíà, àìîêñèöèëëèíà, öåôòèîôóðà, êëîêñàöèëëèíà, äèêëîêñàöèëëèíà, öåôàëîíèóìà, öåôàëåê-ñèíà, íàôöèëëèíà, öåôàçîëèíà, öåôêóèíîìà, öåôàöåòðèëà, îêñàöèëëèíà, öåôàïåðàçîíà) óñòàíàâëè-âàþò, ñðàâíèâàÿ öâåò çîíû àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà ñ öâåòîì êîíòðîëüíîé çîíû èíäèêàòîðíîãî óñò-ðîéñòâà «Snap».

5.1.2 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû5.1.2.1 Òåðìîñòàò, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü òåìïåðàòóðó (45 ± 5) °Ñ.5.1.2.2 Õîëîäèëüíèê áûòîâîé ïî ÃÎÑÒ 16317.5.1.2.3 ×àñû ìåõàíè÷åñêèå ñ ñèãíàëüíûì óñòðîéñòâîì ïî ÃÎÑÒ 3145.5.1.2.4 Òåñò-íàáîð Áåòà-ëàêòàì «Snap», îäíîðàçîâûé êîìïëåêò â ãåðìåòè÷íîé óïàêîâêå, âêëþ-

÷àþùèé ïðîáèðêó «Snap» ñ 3,3,5,5-òðèìåòèëáåíçèäèíîì, óêóïîðåííóþ; ïèïåòêó ìåðíóþ âìåñòèìîñ-òüþ 0,4 ñì3; èíäèêàòîðíîå óñòðîéñòâî «Snap» ñ äèìåòèëñóëüôîêñèäîì ïî [1].

Òåñò-íàáîð Áåòà-ëàêòàì «Snap» õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå ïðè òåìïåðàòóðå îò 0 °Ñ äî 7 °Ñ. Íåîáõî-äèìîå ÷èñëî êîìïëåêòîâ äëÿ ðàáîòû â òå÷åíèå ñóòîê äîïóñêàåòñÿ õðàíèòü ïðè òåìïåðàòóðå (20 ± 2) °Ñ.

5.1.3 Îòáîð ïðîá5.1.3.1 Îòáîð ïðîá — ïî ÃÎÑÒ 9225. Ïðîáû õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå â òå÷åíèå 24 ÷ ïðè òåìïåðàòó-

ðå (6 ± 2) °Ñ.5.1.4 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó5.1.4.1 Òåðìîñòàò íàãðåâàþò äî òåìïåðàòóðû (45 ± 5) °Ñ è âûäåðæèâàþò ïðè ýòîé òåìïåðàòóðå íå

ìåíåå 5 ìèí.5.1.4.2 Âñêðûâàþò óïàêîâêó òåñò-íàáîðà Áåòà-ëàêòàì «Snap», ïðîâåðÿþò ïîëîæåíèå øàðèêà

ðåàêòèâà â ïðîáèðêå ïî 5.1.2.4. Øàðèê ðåàêòèâà ïðè çàïîëíåíèè ïðîáèðêè ìîëîêîì äîëæåí íàõîäèòü-ñÿ íà åå äíå. Ïðè íåîáõîäèìîñòè øàðèê ðåàêòèâà óñòàíàâëèâàþò âñòðÿõèâàíèåì ïðîáèðêè íà åå äíî.

5.1.5 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà5.1.5.1 Ìåðíóþ ïèïåòêó ïî 5.1.2.4 íàïîëíÿþò àíàëèçèðóåìûì ìîëîêîì äî ìåòêè.

5.1.5.2 Àíàëèçèðóåìîå ìîëîêî èç ïèïåòêè âûëèâàþò â ïðîáèðêó. Ïðîáèðêó çàêðûâàþò è òùà-òåëüíî ïåðåìåøèâàþò êðóãîâûìè äâèæåíèÿìè äî ðàñòâîðåíèÿ ðåàêòèâà. Ïðîáèðêó è èíäèêàòîðíîåóñòðîéñòâî ïîìåùàþò â òåðìîñòàò è âûäåðæèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå (45 ± 5) °Ñ â òå÷åíèå 5—6 ìèí.

5.1.5.3 Âûíèìàþò ïîäîãðåòîå èíäèêàòîðíîå óñòðîéñòâî èç òåðìîñòàòà è óñòàíàâëèâàþò íà ãîðè-çîíòàëüíîé ïîâåðõíîñòè òàê, ÷òîáû ïðèåìíàÿ âîðîíêà äëÿ çàëèâêè àíàëèçèðóåìûì ìîëîêîì íàõîäè-ëàñü ñëåâà îò îïåðàòîðà.

5.1.5.4 Ñîäåðæèìîå ïðîáèðêè ïåðåëèâàþò â ïðèåìíóþ âîðîíêó èíäèêàòîðíîãî óñòðîéñòâà.5.1.5.5 Ïðè ïîÿâëåíèè àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà â êðóãëîì îêíå êëàâèøè èíäèêàòîðíîãî óñòðîé-

ñòâà êëàâèøó íàæèìàþò äî óïîðà äëÿ èçìåíåíèÿ òîêà æèäêîñòè è ïðîìûâêè ïîðèñòîãî ìàòåðèàëàðàñòâîðîì àíòèáèîòèêîâ. Âêëþ÷åíèå èíäèêàòîðíîãî óñòðîéñòâà ñîïðîâîæäàåòñÿ õàðàêòåðíûì ùåë÷êîìêëàâèøè.

5.1.5.6 Èíäèêàòîðíîå óñòðîéñòâî ïîâòîðíî ïîìåùàþò â òåðìîñòàò, âûäåðæèâàþò ïðè òåìïåðàòóðå(45 ± 5) °Ñ â òå÷åíèå 4 ìèí è èçâëåêàþò èç òåðìîñòàòà. Ñòàáèëüíîñòü îêðàñêè ñîõðàíÿåòñÿ â òå÷åíèå15 ìèí ïîñëå èçâëå÷åíèÿ óñòðîéñòâà èç òåðìîñòàòà.

5.1.6 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ5.1.6.1 Ñðàâíèâàþò öâåò êîíòðîëüíîé çîíû â èíäèêàòîðíîì îêíå ñ öâåòîì çîíû àíàëèçèðóåìîãî

ìîëîêà.5.1.6.2 Êîíòðîëüíàÿ çîíà äîëæíà áûòü ñèíåãî öâåòà. Åñëè èçìåíåíèå öâåòà êîíòðîëüíîé çîíû

ïîñëå ïðîâåäåíèÿ ïðîöåäóð ïî 5.5.4—5.5.6 íå ïðîèçîøëî, òî îïðåäåëåíèå ïîâòîðÿþò ñ íîâûì òåñò-íàáîðîì Áåòà-ëàêòàì «Snap».

5.1.6.3 Åñëè öâåò çîíû àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà íà èíäèêàòîðíîì óñòðîéñòâå àíàëîãè÷åí èëèòåìíåå öâåòà êîíòðîëüíîé çîíû — ïåíèöèëëèí èëè àíòèáèîòèêè áåòà-ëàêòàìíîãî òèïà â àíàëèçèðóå-ìîì ìîëîêå îòñóòñòâóþò.

Áåëûé èëè ìåíåå èíòåíñèâíûé öâåò çîíû àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà ïî ñðàâíåíèþ ñ öâåòîì êîíò-ðîëüíîé çîíû ñâèäåòåëüñòâóåò î íàëè÷èè â àíàëèçèðóåìîì ìîëîêå ïåíèöèëëèíà èëè àíòèáèîòèêîâáåòà-ëàêòàìíîãî òèïà.

5.1—5.1.6.3 (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 1, 2).5.2 Ðåöåïòîðíûé ìåòîä ñ êîëëîèäíûì çîëîòîì5.2.1 Ñóùíîñòü ìåòîäà5.2.1.1 Ìåòîä îñíîâàí íà ïðîâåäåíèè ðåàêöèè êîìïëåêñîîáðàçîâàíèÿ àíòèáèîòèêîâ áåòà-ëàêòàì-

íîãî òèïà ñî ñïåöèôè÷åñêèìè áåëêîâûìè ðåöåïòîðàìè, ìå÷åííûìè êîëëîèäíûì çîëîòîì, è ïîñëåäó-þùåì âèçóàëüíîì âûÿâëåíèè îñòàâøèõñÿ ñâîáîäíûìè ìå÷åíûõ ðåöåïòîðîâ ïóòåì õðîìàòîãðàôèè íàïîëîñêàõ õðîìàòîãðàôè÷åñêîé áóìàãè, ñîäåðæàùèõ â âèäå ñîîòâåòñòâóþùèõ ëèíèé ðåàêöèîííóþ èêîíòðîëüíóþ çîíû.

5.2.2 Àïïàðàòóðà, ìàòåðèàëû è ðåàêòèâû5.2.2.1 Òåðìîñòàò èëè áëîê òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê, ïîçâîëÿþùèé ïîääåðæèâàòü òåìïåðàòóðó

(47,5 ± 0,5) °Ñ.5.2.2.2 Õîëîäèëüíèê áûòîâîé ïî ÃÎÑÒ 16317.5.2.2.3 ×àñû ìåõàíè÷åñêèå ñ ñèãíàëüíûì óñòðîéñòâîì ïî ÃÎÑÒ 3145.5.2.2.4 Òåñò-íàáîð «Beta Star» [4], âêëþ÷àþùèé ôëàêîíû ñî ñïåöèôè÷åñêèìè ðåöåïòîðàìè, ìå-

÷åííûìè êîëëîèäíûì çîëîòîì; ïîëîñêè õðîìàòîãðàôè÷åñêîé áóìàãè ñ çîíîé èññëåäóåìîãî ìîëîêà èêîíòðîëüíîé çîíîé; øïðèö-äîçàòîð âìåñòèìîñòüþ 0,2 ñì3 ñ íàêîíå÷íèêàìè.

5.2.3 Îòáîð ïðîáÎòáîð ïðîá — ïî ÃÎÑÒ 9225. Ïðîáû õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå â òå÷åíèå 24 ÷ ïðè òåìïåðàòóðå

(6 ± 2) °Ñ.5.2.4 Ïîäãîòîâêà ê àíàëèçó5.2.4.1 Òåðìîñòàò èëè áëîê òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê íàãðåâàþò äî òåìïåðàòóðû (47,5 ± 0,5) °Ñ è

âûäåðæèâàþò ïðè ýòîé òåìïåðàòóðå íå ìåíåå 5 ìèí.5.2.4.2 Ôëàêîí âñòðÿõèâàþò äëÿ îñàæäåíèÿ ñîäåðæèìîãî â íåì íà äíî.5.2.5 Ïðîâåäåíèå àíàëèçà5.2.5.1 Øïðèöåì-äîçàòîðîì ñ íàêîíå÷íèêîì îòáèðàþò 0,2 ñì3 àíàëèçèðóåìîãî ìîëîêà è ïåðåëè-

âàþò âî ôëàêîí ïî 5.2.4.2. Ôëàêîí çàêðûâàþò êðûøêîé è âñòðÿõèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ ñóõèõâåùåñòâ áåç îáðàçîâàíèÿ ïåíû.

5.2.5.2 Ïîìåùàþò ôëàêîí â òåðìîñòàò èëè áëîê òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê ïî 5.2.2.1.

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

8

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

9

5.2.5.3 Íå ìåíåå ÷åì ÷åðåç 3 ìèí òåðìîñòàòèðîâàíèÿ âî ôëàêîí, íàõîäÿùèéñÿ â òåðìîñòàòå èëè âáëîêå òåðìîñòàòèðóåìûõ ÿ÷ååê, ïîìåùàþò âõîäÿùóþ â êîìïëåêò ïîëîñêó õðîìàòîãðàôè÷åñêîé áóìàãè.

5.2.5.4 Õðîìàòîãðàôèðîâàíèå ïðîâîäÿò â òå÷åíèå 2 ìèí. Çàòåì ïîëîñêó õðîìàòîãðàôè÷åñêîé áóìà-ãè èçâëåêàþò èç ôëàêîíà.

5.2.6 Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ5.2.6.1 Ñðàâíèâàþò èíòåíñèâíîñòü öâåòà îêðàøåííûõ â êðàñíûé öâåò çîí, ïîÿâëÿþùèõñÿ ïîñëå

ïðîâåäåíèÿ ïðîöåäóðû ïî 5.2.5.4 â âèäå ëèíèé íà ïîëîñêàõ õðîìàòîãðàôè÷åñêîé áóìàãè.5.2.6.2 Çîíà íà âåðõíåé ÷àñòè ïîëîñêè ÿâëÿåòñÿ êîíòðîëüíîé. Åñëè åå îêðàøèâàíèÿ íå ïðîèçîøëî

ïîñëå âûïîëíåíèÿ òðåáîâàíèé ïî 5.2.5.3, 5.2.5.4, òî ïîâòîðÿþò âñå ïðîöåäóðû â ñîîòâåòñòâèè ñ 5.2.5.2.6.3 Çîíà èññëåäóåìîãî ìîëîêà ðàñïîëîæåíà ïîä êîíòðîëüíîé çîíîé. Áîëüøàÿ èëè ðàâíàÿ èí-

òåíñèâíîñòü öâåòà êîíòðîëüíîé çîíû, à òàêæå îòñóòñòâèå îêðàñêè çîíû îáðàçöà ÿâëÿåòñÿ ïðèçíàêîìíàëè÷èÿ àíòèáèîòèêîâ áåòà-ëàêòàìíîãî òèïà â ìîëîêå.

5.2.6.4 Ìåíüøàÿ èíòåíñèâíîñòü öâåòà êîíòðîëüíîé çîíû, ïî ñðàâíåíèþ ñ èíòåíñèâíîñòüþ öâåòàçîíû ïîä íåé, ÿâëÿåòñÿ ïðèçíàêîì îòñóòñòâèÿ àíòèáèîòèêîâ.

5.2.6.5 Êîíòðîëüíîå îïðåäåëåíèå ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ 5.1 è 5.2. Â àìïóëó èëè ïðîáèðêóâíîñÿò 0,1 ñì3 ïðåäâàðèòåëüíî âîññòàíîâëåííîãî ïî ÃÎÑÒ 23454 ïðåïàðàòà ÑÊÈÂ.

5.2—5.2.6.5 (Ââåäåíû äîïîëíèòåëüíî, Èçì. ¹ 2).5.3 Ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêèÍàèìåíüøèå ïðåäåëû îïðåäåëåíèÿ àíòèáèîòèêîâ áåòà-ëàêòàìíîãî òèïà ïðåäñòàâëåíû â òàá-

ëèöå 3.





Àìîêñèöèëëèí

Àìïèöèëëèí

Äèêëîêñàöèëëèí

Êëîêñàöèëëèí

Íàôöèëëèí

Îêñàöèëëèí

Ïåíèöèëëèí

Ïåíèöèëëèí G

0,007

0,005

0,02

0,03

0,07

0,04

0,003*

—

Áåòà-ëàêòàì«Snap»

Beta Star




0,002

0,002

0,005

0,005

0,008

0,005

—

0,002

Áåòà-ëàêòàì«Snap»

Beta Star

Öåôàçîëèí

Öåôàëåêñèí

Öåôàëîíèóì

Öåôàïåðàçîí

Öåôàïèðèí

Öåôàöåòðèë

Öåôêóèíîì

Öåôòèîôóð

0,02

0,025

0,04

0,01

0,011

0,05

0,02

0,006

—

—

0,007

0,005

0,008

—

—

0,075

* 0,003 ìêã àêòèâíîãî âåùåñòâà ðàâíî 0,005 Åä àêòèâíîñòè.

(Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. 1, 2).

6 Òðåáîâàíèÿ áåçîïàñíîñòè

Ðàáîòó ñî ñïîðîâîé êóëüòóðîé òåñò-ìèêðîáà â ëàáîðàòîðèè ïðîâîäÿò â ñîîòâåòñòâèè ñ ñàíèòàðíû-ìè ïðàâèëàìè ïî [2].

Ðàçäåë 6 (Ââåäåí äîïîëíèòåëüíî, Èçì. ¹ 1).

ÓÄÊ 637.11:543.06:006.354 ÎÊÑ 67.100.10 Í19 ÎÊÑÒÓ 9209

Êëþ÷åâûå ñëîâà: ìîëîêî, èíãèáèðóþùèå âåùåñòâà, àíòèáèîòèêè, òåñò-ìèêðîá, çîíà èíãèáèöèè,àíòèáèîòèêè áåòà-ëàêòàìíîãî òèïà, ñóëüôàíèëàìèäíûå ïðåïàðàòû

ÏÐÈËÎÆÅÍÈÅ À(ñïðàâî÷íîå)

Áèáëèîãðàôèÿ

[1] Òåñò-íàáîð Áåòà-ëàêòàì «Snap». Ðîññèÿ, ÎÎÎ «ÇÈÏ-È Äèàãíîñòèêñ».[2] ÑÏ 1.2.731—99 Áåçîïàñíîñòü ðàáîòû ñ ìèêðîîðãàíèçìàìè III — IV ãðóïï ïàòîãåííîñòè è ãåëüìèíòàìè.[3] Òåñòîâûé íàáîð «Copan Test» Äàíèÿ, CHR HANSEN. Ðîññèéñêîå ïðåäñòàâèòåëüñòâî: Ðîññèÿ,

105318 Ìîñêâà, óë. Ùåðáàêîâñêàÿ, 53, êîðï. 17, 3 ýòàæ, ÎÎÎ «Õð. Õàíñåí».[4] Òåñò-íàáîð «Beta Star» Äàíèÿ, CHR HANSEN. Ðîññèéñêîå ïðåäñòàâèòåëüñòâî: Ðîññèÿ, 105318 Ìîñê-

âà, óë. Ùåðáàêîâñêàÿ, 53, êîðï. 17, 3 ýòàæ, ÎÎÎ «Õð. Õàíñåí».ÏÐÈËÎÆÅÍÈÅ À (Èçìåíåííàÿ ðåäàêöèÿ, Èçì. ¹ 1, 2).

ÃÎÑÒ Ð 51600—2000

ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ»,123995 Ìîñêâà, Ãðàíàòíûé ïåð., 4.www.gostinfo.ru [email protected]

Íàáðàíî â Êàëóæñêîé òèïîãðàôèè ñòàíäàðòîâÎòïå÷àòàíî â ôèëèàëå ÔÃÓÏ «ÑÒÀÍÄÀÐÒÈÍÔÎÐÌ» — òèï. «Ìîñêîâñêèé ïå÷àòíèê», 105062 Ìîñêâà, Ëÿëèí ïåð., 6.

Ðåäàêòîð Í.Â. Òàëàíîâà

Òåõíè÷åñêèé ðåäàêòîð Â.Í. Ïðóñàêîâà

Êîððåêòîð Í.È. Ãàâðèùóê

Êîìïüþòåðíàÿ âåðñòêà À.Í. Çîëîòàðåâîé

Ïîäïèñàíî â ïå÷àòü 25.04.2010. Ôîðìàò 60õ841/8. Áóìàãà îôñåòíàÿ. Ãàðíèòóðà Òàéìñ. Ïå÷àòü îôñåòíàÿ.

Óñë. ïå÷. ë. 1,40. Ó÷.-èçä. ë. 1,10. Òèðàæ 110 ýêç. Çàê. 45.

ÌÎËÎÊÎ - docs.nevacert.rudocs.nevacert.ru/files/gost/gost_r_51600-2000.pdf · ÃÎÑÒ...

Documents