mosaicismos e alterações genéticas na fiv

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Reunio Cientfica: mosaicismos e alteraes genticas na FIVOscar B. Duarte Filho, M.D.

19 de janeiro de 2017

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Fertility and Sterility Vol. 101, No. 1, Jan 2017

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Fertility and Sterility Vol. 101, No. 1, Jan 2017

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MosaicismoErros na mitose ps-fertilizao (2 ou 3 clivagem mais comum)Genoma inativado Transcriptoma citoplasmticoAneuploide-aneuploide ou aneuploide-euploide (75% em clivagem!!)Aneuploide-euploide 50% corrigem em blasto normalDiviso + lentaApoptoseEuploides ICM

Mosaicismo: aCGHEstudo comparando FISH x aCGH de todo o blastoDeteco depende do grau de mosaicismo< 25% clulas aneuploides no detecta25-40% clulas aneuploides detecta em 3/5 dos casos>40% detecta em todos os casosConcordncia de 97% entre ICM e TE

Mosaicismo: NGS+ rpido, + barato, vrias amostras de DNA ao mesmo tempoMiSeq (Illumina): >50% de aneuploidia para detectar mosaicismoAneuploidia de cromossomos inteiros + Contagem mitocondrialPersonal Genome Machine (Thermo-Fischer Sci)>20% de aneuploidia para detectar mosaicismoAneuploidia de cromossomos inteiros, delees e duplicaes + Contagem mitocondrial (+ sensvel 800 kb 1,2 mb)

Aumento a taxa de falso positivo at 33%

Mosaicismo: NGSGarisi et al (2016)43 blastos mosaico descartados mltiplas bipsias:11,6% de blastos normais (TE e ICM)41,8% de blastos normais (ICM)TE = ICM (83% das vezes)Taxa global de predio de mosaicismo: 58,2%Maxwell et al (2016)14 blastos mosaico descartados mltiplas bipsiasTaxa global de predio de mosaicismo: 48,3%

The detection of low-grade mosaicism within an embryo appears to be subject to some degree of sampling error.

Mosaicismo: NGSMaxwell et al (2016)78 blastos euploides com CGH38 abortos 12 (32%) eram mosaico por NGS38 NV 5 (16%) eram mosaico por NGS

This suggests that some mosaic embryos result in live birth, but they may also be at increased risk of early pregnancy loss. The implantation potential of mosaic embryos has yet to be determined, but data suggest that it may be reduced

Mosaicismo: grupos de risco?Idade avanada NO fator de risco (alteraes ps-zigticas)In a study including 192 donor oocyte cycles from nine different IVF centers, rates of mosaicism detected by NGS performed at a single genetics laboratory ranged from 17% to 47%

Mosaicismo: aconselhamento pr-testeNGS: 1/3 dos embries so mosaico!!! aconselhamento pr-teste sobre:falsos positivosRebipsiaincertezas sobre repercusso clnica (nascido vivo saudvel, abortamento e no implantao, repercusses neonatais)

Mosaicismo: qual transferir?Princpios: Guideline (PGDIS)Monossomia + euploide > trissomia + euploide(cuidado trissomia:monossomia for 1:1, um dos dois pode ser subdiagnosticado)Sexuais > autossomosMosaico com trissomias 1, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11, 12, 17, 19, 20, 22, X, Y > 2, 7, 13, 14, 15, 16, 18, and 21 Mosaicos: + dissomias uniparentais (piores dissomias para o feto: 7, 14 e 15)Mosaicismo confinado a placenta (2,7, 16 e 22): RCF e OFIU

REGRAS PARA CROMOSSOMOS INTEIROS

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Mosaicismo: aneuploidias parciaisAneuploidias parciais/segmentares puras: no transferir

Mosaico euploide + aneuploidia parcial: ?

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Mosaicismo: pr-natal nos mosaicos NIPT: (?) ACMGG 13, 18 e 21; risco de mosaicismo confinado placentaCVS: risco de mosaicismo confinado placentaAmniocentese: pode no representar todos os tecido fetaisTipo de estudo genticoCitogentica convencionalMicroarrayFISH Estudos para dissomias uniparentais

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Mosaicismo: ConclusoPhysicians should understand that mosaic embryos may represent a third category between normal (euploid) and abnormal (aneuploid) embryosIt can be difficult to determine which mosaic aneuploidies may be the safest to transfer. Although counseling patients about the risks associated with trisomies 13, 18, and 21 and aneuploidies involving chromosomes 2, 7, 14, 15, and 16 may certainly be more straightforward, it is essential to emphasize that full or partial aneuploidies involving other chromosomes may not necessarily be safer to transfer; there is simply less known about the risks.

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CNVs: copy number variationsDelees parciais ou duplicaes parciaisOrigem na meiose paterna e materna por igualNO TEM INFLUNCIA DA IDADE MATERNA> 50 bpEspectral: adaptativas doena letalidade Como testar: Chomossome microarray (CMA) aCGH, SNP arrayQuem testar: atrasos de DNPM e intelectual a/e (MM Syndromes)

CNVs: copy number variationsCaritipo convencional > 5 MbCaritipo de alta resoluo 2-5MbCMA: 100 Kb

CMA: Pr-natal2,5% dos caritipos normais em pr-natal tinham CNVs de significado clnico3,2% dos caritipos normais em pr-natal tinham CNVs de significado incerto

CMA (aCGH, SNP): PGS

CNV: PGSResoluo atual prejudicada pela necessidade de amplificao de DNA: as detectadas provavelmente patognicas porque so grandesFalta de banco de dados para interpretar os resultadosBenignoPatognicoVUS