modified atmosphere packaging of filleted rainbow trout

6
Modified atmosphere packaging of filleted rainbow trout Begon ˜a Gime ´nez, Pedro Roncale ´s and Jose A Beltra ´n* Laboratory of Food Technology, Department of Animal Production and Food Science, Faculty of Veterinary Science, University of Zaragoza, Miguel Servet 177, E-50013 Zaragoza, Spain Abstract: Shelf-lives of ®lleted rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) packaged in over-wrap, vacuum and gas mixture conditions and stored at 1 1 °C were compared by measurement of pH, total volatile bases (TVB), hypoxanthine content, lipid oxidation (TBARS value), super®cial counts of aerobic psychrotrophic ¯ora and sensory analysis (colour, odour and ¯avour). The gas mixtures evaluated were 10% O 2 50% CO 2 40% N 2 , 10% O 2 50% CO 2 40% Ar, 20% O 2 50% CO 2 30% N 2 , 20% O 2 50% CO 2 30% Ar, 30% O 2 50% CO 2 20% N 2 and 30% O 2 50% CO 2 20% Ar. Sensory quality deterioration was delayed and bacterial growth as well as increases in pH, TVB and hypoxanthine levels were reduced by modi®ed atmosphere packaging (MAP). Lipid oxidation was higher in gas packages with 20 and 30% O 2 than in those with 10% O 2 . Vacuum-packed ®llets presented the lowest TBARS values. In summary, MAP gave rise to a signi®cant extension of shelf-life when compared with vacuum and over-wrap packaging. No signi®cant differences were found between the packages containing either N 2 or Ar. The best evaluated atmosphere consisted of 10% O 2 50%CO 2 40% N 2 /Ar. # 2002 Society of Chemical Industry Keywords: rainbow trout; modi®ed atmosphere packaging; vacuum packaging; shelf-life extension INTRODUCTION Fish is an extremely perishable food when compared with other fresh commodities, so marketing has traditionally focused on frozen and processed pro- ducts. 1 However, in recent years there has been an increase in consumer demand for fresh ®sh that has necessitated the development of new technologies that permit the shelf-life of ®sh products to be extended. Modi®ed atmosphere packaging (MAP) has become a very useful technology for this purpose, since it guarantees the freshness and high-quality standards that are demanded by consumers whilst offering the product in attractive and ready-to-cook units. Conse- quently, MAP increases the commercial value and the range of marketing presentations of the product. Products may be distributed to long-distance markets with fewer deliveries, leading to decreased transport and distribution costs. Furthermore, fresh ®sh could be held on sale for a longer period of time. Many studies on different ®sh species have demon- strated that MAP can lead to a signi®cant shelf-life extension compared with over-wrap 2±4 and vacuum 5,6 packaging. The gases used in gas packaging of ®sh are usually CO 2 ,O 2 and N 2 . 6 Some noble gases such as Ar have also been studied. Argon is an inert gas that might be used as a substitute for N 2 . Several authors 7,8 found that Ar-containing mixtures slowed down the produc- tion of total volatile bases (TVB) more effectively than those containing N 2 . Although, in general, gas mixtures of 30% O 2 40% CO 2 30% N 2 and 60% CO 2 40% N 2 are recommended for lean ®sh and fat ®sh respectively, 9 MAP is highly speci®c for each ®sh product and each packaging system. Therefore it is necessary to establish the composition of the gas mixture according to the characteristics of the product and the packaging system. The aim of this research was to compare the quality attributes of ®lleted rainbow trout in over-wrap, vacuum and modi®ed atmosphere packaging as well as to establish the more suitable gas mixtures in order to maintain the freshness characteristics of the product. MATERIAL AND METHODS Samples and gas mixtures Cultured rainbow trout ®llets (250 25 g) were pack- aged in over-wrap, vacuum and modi®ed atmosphere conditions at 6h post mortem. Over-wrap-packed samples were placed on styrofoam trays that were wrapped with low-density polyethylene. A Tecnotrip EV-15/CN vacuum-packaging machine was used for modi®ed atmosphere and vacuum packaging. The gas- packaged ®llets were also laid on styrofoam trays and packed into pouches that were sealed after ¯ushing with the gas mixture. The pouches consisted of a polyethylene and polyamide laminate with a water (Received 30 July 2001; revised version received 1 February 2002; accepted 19 February 2002) * Correspondence to: Jose A Beltra ´n, Laboratory of Food Technology, Department of Animal Production and Food Science, Faculty of Veterinary Science, University of Zaragoza, Miguel Servet 177, E-50013 Zaragoza, Spain # 2002 Society of Chemical Industry. J Sci Food Agric 0022±5142/2002/$30.00 1154 Journal of the Science of Food and Agriculture J Sci Food Agric 82:1154±1159 (online: 2002) DOI: 10.1002/jsfa.1136

Upload: begona-gimenez

Post on 15-Jun-2016

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

������� �� ��� ���� �� ��� �� ���������� � � ��� ���� 8,>��+*)��+8 "������> (66(%?.<> �6��66(:@������5,

Modified atmosphere packaging of filletedrainbow troutBegona Gimenez, Pedro Roncales and Jose A Beltran�Laboratory of Food Technology, Department of Animal Production and Food Science, Faculty of Veterinary Science, University ofZaragoza, Miguel Servet 177, E-50013 Zaragoza, Spain

(Rec

� CoVete

� (

��������� �� ������ � ������� ������� ����� ���������������� �������� �� ���������� ������

��� ��� ������� ���������� ��� ������ �� ���° ���� �������� �! ����������� � �"� ����� ������������� �#$%�� !��������� �������� ����� ��������� �#%�& ������� ���������� ������ � �������

��!��������� '��� ��� ������! ����!��� �������� ����� ��� '������( #� ��� �������� ���������

���� �)* +,�-)* +,�.)* /,� �)* +,�-)* +,�.)* ��� ,)* +,�-)* +,�0)* /,� ,)*

+,�-)* +,�0)* ��� 0)* +,�-)* +,�,)* /, ��� 0)* +,�-)* +,�,)* ��( �����! 1�����!

������������� ��� ����!�� ��� ��������� ����� �� ���� �� ��������� �� �"� #$% ��� !���������

������ ���� ������� �! ������� ��������� ��������� �2�3�( 4���� ��������� ��� ���� �� ���

�������� ��� ,) ��� 0)* +, ��� �� ���� ��� �)* +,( $������������ ������ ��������� �� ������

#%�& ������( 5� ������!� 2�3 ���� ���� �� � ���������� ��������� � ��� ��� � ��� �������� ���

������ ��� ��������� ���������( /� ���������� �� ������� ���� ���� ������� �� ��������

���������� ����� /, �� ��( #� ���� ��������� ��������� ��������� � �)* +,�-)* +,�.)* /,6��(� ,)), �����! � ������ 5������!

7�!������ ������� ���� ���� �� ���������� ��������� ���� ��������� ���������� ���������

INTRODUCTION���� �� �� ��������� ���������� ���� ���� ��������

���� ����� ����� ������������ �� ��������� ���

������������� ������ �� ������ ��� ��������� ����

������ ������� �� ������ ����� ����� ��� ���� ��

�������� �� ������� ������ ��� ����� �� ���� ���

������������ ��� ����������� �� ��� ������������ ����

������ ��� ���������� �� �� ������� �� �� ���������

!��� �� ���������� ��������� "!#$% ��� ������

� ���� ���� ���������� ��� ���� ������� ����� ��

��������� ��� ��������� ��� �����&����� ���������

���� ��� �������� �� �������� ������ �������� ���

������ �� ���������� ��� ������������� ����� '�����

&������ !#$ ��������� ��� ���������� ���� ��� ���

����� �� ��������� ������������� �� ��� �������

$������ ��� �� ���������� �� ������������� �������

���� ����� ����������� ������� �� ��������� ���������

��� ����������� ������ ����������� ����� �� ����

�� ���� �� ���� ��� � ������ ������ �� �����

!��� ������ �� ��������� �� ������� ���� ������

������� ���� !#$ ��� ���� �� � ����� ���� ����������

��������� �������� ���� ���������()* ��� ����+�,

����������

-�� ����� ��� �� ��� ��������� �� �� ��� �����

'.(� .( ��� /(�, 0��� ����� ����� ��� �� #� ����

���� ���� ������� #���� �� �� ����� ��� ���� ����� ��

��� �� � �������� ��� /(� 0������ ������1�2 ����

���� #������������ ������� ������ ���� ��� ������

���� �� ����� �������� ����� "-34% ���� ����������� ����

eived 30 July 2001; revised version received 1 February 2002; accep

rrespondence to: Jose A Beltran, Laboratory of Food Technology,rinary Science, University of Zaragoza, Miguel Servet 177, E-50013 Z

66( 0������ �� '������� <������� � � ��� ���� 66(()+�*(:(

����� ���������� /(� #������� �� �������� ���

������� �� 567 .(�*67 '.(�567 /( ��� ,67

'.(�*67 /( ��� ����������� ��� ���� �� ��� ��� �� �������������8 !#$ �� ������ ����� � ��� ���� ��

������ ��� ���� ��������� ������� -�������� �� ��

��������� �� ��������� ��� ����������� �� ��� ���

������ ��������� �� ��� ��������������� �� ��� ������

��� ��� ��������� �������

-�� ��� �� ���� �������� ��� �� ������� ��� &�����

��������� �� ������ ������� ���� �� ����������

���� ��� ���� �� ���������� ��������� �� ����

�� �� ��������� ��� ���� ������� ��� ������� �� �����

�� �������� ��� ��������� ��������������� �� ���

�������

MATERIAL AND METHODSSamples and gas mixtures'����� ������� ���� ����� "(+6�(+�% ���� ��������� �� ���������� ���� ��� ���� �� ����������

���������� �� ,� ���� ������� .���������������������� ���� ������ �� ��������� ����� ���� ����

������� ���� ����������� ������������� # -��������

93��+:'/ �������������� ������� ��� ��� ���

���� �� ���������� ��� ���� ���������� -�� ����

�������� ����� ���� ���� ���� �� ��������� ����� ���

������ ���� ������ ���� ���� ������ ����� ;�����

���� ��� ��� ������� -�� ������ ��������� �� �

������������ ��� ��������� �������� ���� � �����

ted 19 February 2002�

Department of Animal Production and Food Science, Faculty ofaragoza, Spain

66(:=56�66 ��+*

�� ��� ���������� �������� �� ������� �����

����� ������������ �� +)1���( ����� �� (5°' ����� ������ ������������ �� *6)+6����( ����� ��(5°' "0����� $���������0�������� 4��������� 0����%�-�� ��� ������� ��� ���� �67 .(�+67'.(�*67 /(� �67 .(�+67 '.(�*67 #�� (67

.(�+67 '.(�567 /(� (67 .(�+67 '.(�567#�� 567 .(�+67 '.(�(67 /( ��� 567 .(�+67'.(�(67 #�� -���� ���� ��� ��� �� ����

��������� ��� ����� ���� �� ���� ���������������

���� ��� ������ ����� ������� �� ���� #�� ������� ����

������ �� ���°' ��� (6 �����

Microbial analysis0��� ���� ����� �� ������� �������������� ;��� ����

���������� �� �������� �� ���� �� �6��( �� ��� ����

������� A���� ������������ ������� ��������� ��

6��7 ������� �� ������ ������� �������������� ;���

��� ����� �� $���� '��� #��� "!����� ?���������

B������% ��� �������� �� �6°' ��� 1 ������6 '�������� ��������� �� �������������� ���� "��%���(�

Lipid oxidationC���� ��������� ��� ������� �� ��� (��������������

���� "-4#% ��������� -4#��������� ��������

"-4#D0% ����� ���� ��������� ���� � ��������

���� �� ��������������� ��� ��������� �� ��

��������������� �����

Hypoxanthine (Hx) content � ����� ��� �������� �� ���������������� ��&��

�������������� " $C'%��( ��� ��� ������� ���

��������� �� �� �����

Total volatile bases (TVB)-34 ������� ��� ���������� �� ����� ������������

��������� �� ��� ��������� ��������5 D����� ����

��������� �� �� -34�/�����

pH value� ��� ������� �� �� ����� ����������� ����

��������� ����� "����� �>�6%�

Sensory analysis-��� ����� ���� �������� �� � ���������� �������

������ -�� ��������� ������ ���� ����� ��� ���� ��

��� ��� ��� ����� �� ;���� ��������� �� ������ ���

Figure 1. Superficial counts ofpsychrotrophic aerobic bacteria in over-wrap-, vacuum- and modified atmosphere-packaged fillets.

� � ��� ���� �����+*)��+8 "������> (66(%

'���� ��� �������� ���� ��� ��������� ��������

�����> 6E������ ����� ����� �E��� ����� �����

(E�������� ���������:���� 5E���������� ���������:

���� *E�������� ���������:����� .��� ��� ��������

��������� �� � ����������� ����� ���� ��� ���������

�����> 6E����� ���� �E������ ���� (E��������

��� 5E���������� ��� *E�������� ��� +E����

�������� ��� ,E������ ������ ����� �� ;����

��������� ��� �������� �� ������������ ����� ����

1(°' �� ��� ����� ����� ���� ��� ��������� �����>

6E��������� ���� �E���� ���� (E��������

5E ��� *E���� ���� -�� ������������� ������ ����

����������� �� ��� ��������� ������> ( ���� ��� �����

"������� ���������:����%� 5 ���� ��� ���� "����������

���% ��� ( ���� ��� ����� �� ;���� ���������

"��������%� D����� ���� ��������� �� ��� ��������

���� ����� ����� �� �����������

Statistical analysis-�� ����� ����� �� ����������� ����� ������� �� ����

��� �� ������� ��� ���������� �� �������� �� ��������

"#/.3#% ���� ��� ����� �&���� ���������� "C0?%

������ �� ��� ������� ������ ����� "BC!% ��������

�� 0$00��* ?���������� ���� ���������� ����� ���� ��

��� ��6�6+ ������'����������� ����� ��� ������ ��������� ���� ����

�������� �� $������F� ����� ��� ���� ���� ����������

����� ���� �� ��� ��6�6� ������#�� �������� ���� ���� �� �������� �� ���� 6� *� 2�

�(� �, ��� (6 �� ��� ������� �������

RESULTS AND DISCUSSIONMicrobial analysis$������������� ;��� ���� ���� &����� �� ����������

������ ����� ���� �� ����� ��� ��� �������������

����� "��� �%� ��� ����� ���� ����������� ���� ����

���� ��� *�� ��� �� ������� "��6�6+%� <� �� ������������ �61�����( �� ��� ����������� ����� �� ������������� ����� �������*��+ -����� ���� ���� �� ���

����� �� �������������� ��� ������ �������� ��� ���

����� ���� ���� ���� ��� �*��)�1�� ���� �� ��������

������� �� ��� ������� �������� �� ��� ,�� ��� �6��

���� �� ��������� ��� ���� �������� �������������

<� �� ���� ����������� ���� ���������� �� ��������� ������

�� �� �� '.( ������� ����� ����������� �������� ���

��++

Figure 2. TBARS values in over-wrap-,vacuum- and modified atmosphere-packagedfillets.

! ���"��#� � $�����"�� �� !�����"�

�������������� ������� B������������ ��������� ���

���� �������� �����;��� �� ������������ ��� �����

��� �� �� ���� ������ ���� ��������������

Lipid oxidation-�� ������� �� -4#D0 ����� ��� ����� �� ��� (�

C���� ���������� ������� �� -4#D0 ������ ���

������ �� !#$ ���� �� ���� ���������� .�����

������������� �� ��� ��� ������� ��� � �� ����

��;���� �� ��� ��������� ����� �� !#$ ������

0���� ���� ����������� ���� ���� ������� ��� ����

���� ���� (6 ��� 567 .( ��� ����� ���� �67 .(�

0������ ������ ���� ���� �������� �� ���� ������

�������� �� !#$�5 -4#D0 ����� ��������� �� ���

��������� �� ������� �� ���������������� ������ ��

������� �� �������� &����� ���� ��� ����� ������

�������� -��� �������� ��� �� �� �� ��� �������� ��

���������������� ��� ������� ����������� ��� ���

������������ �������� �� ����� ���� ������ �� ������

���� ������� ����������� ���������,��1 3���

�������� ��������� ��� ������ -4#D0 ������ �� �

�����&���� �� ��� ������� �� ������ �� ��� ��������

Hypoxanthine content-�� ��������� �� � �� ����� �� ��� 5� � ������

��������� ����� ������ "��6�6+% �� ��������� ������� ��������� ���� ��� *�� ��� 2�� ���� ��

������� ������������� ������� ��� ��������� �� �

��� ����������� ������ ���� �� !#$� ��� ��

����� ���� ����������� ���� ���� ����� ��� ���

������� "��6�6+%� -��� ����� ��������� ���� '.(�������� �� ������� ��� ���������� �� �� -��� �� ��

Figure 3. Hypoxanthine content in over-wrap-, vacuum- and modified atmosphere-packaged fillets.

��+,

��������� ���� ������� ������ ��� ���� ��������

������� ������ ��� ����� �� ������� �������� ��

���� �� ����������� ���������� '.(��2)(6 -����� �

���� �� 5�� ��� �� ��� ����� �� �������������� ���� ������� ��� ������� �� !#$ ���� ���� ��� �,�� ����

������� �� ��� �������� �� ��� ,�� ��� �6�� ���� ��

������� �� ��������� ��� ���� �������� �������

�������

Total volatile bases (TVB)��� * ����� ��� ������� �� -34 ������ !#$ ��� ����

��������� �� ������� -34 ���������� ���� ��

����������� "��6�6+% ����� ��� �������� ?������������� �� -34�/ ���� ���� ����������� �� ������ ��

������������� ��� ������� �� ������� �� ��� ����������

��� �� �� ���� ��� ��������� ������� ����� �� 566)

*66�� -34�/���� ���� ���� �������� �� ������ ����������������(� C����� �� (26)5+6�� -34�/���� ������������� ���&��� ��� ����� �� ���� �� �������(( ���

���� �� � ���� �� (+6�� -34�/���� ��� �������������� �� ��� ����� �� ��������������(5 9' ?�������

8+:�*8�5 ����������� ������� ���������� ������ �� -34�

/ ���� ��� ������� ���� ���������� ����������������������� ������� "(+6�� -34�/����% ����������� �� "566�� -34�/����%� ���� ��� ��������� �������������� ��� ���� ������ ������� �� ��� � � ��"5+6�� -34�/����%� 0���� �� ����� �� ���������������� ������� ���� ��� ���� ����������� �� 9' ?�������

8+:�*8 �� �������� �� ��� ���������� � ���� �� (+6��

-34�/���� ��� ����� �� ��� ������� ���������� ������� ���� ����� ���� ����� ��� ������ ���� �������� ���

��� ����� ��� /��� �� ��� ��� ������� �������� ����

� � ��� ���� �����+*)��+8 "������> (66(%

Figure 4. TVB production content in over-wrap-, vacuum- and modified atmosphere-packaged fillets.

Figure 5. pH evolution in over-wrap-,vacuum- and modified atmosphere-packaged fillets.

Table 1. Colour evaluation of over-wrap-, vacuum- and modifiedatmosphere-packaged fillets

���������

�� �� ���� �

� � � �� �� ��

��������� � � � �

�� ��� � � � �

� ����� ������ �� � � �

� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

� ���� ������� ���� � ��! �"��� ���� � ��! ��#������$

$��� ��#�%"��&! ��� "������$ $��� ��#�%"��&! ��#�� '��$

$��� ��#�%"��&(

�� ��� ���������� �������� �� ������� �����

����� �� ��� ��� �� ��� ������� ����� ������� ���� �����

��� �������� ����� ��� *�� ��� �,�� ���� �� ������� ��

��������� ��� ���� �������� ������������� -��

���������� ������ �� ��� ������� �� -34 ���������

����� �� ��� ����� �� � �������� �� ��������� ������

���:�� � �������� �� ��� �������� �� �������� ���

��������� ����������� �� ����������� �������� ����

������(* 0������ ������ ���� ���� ���� ���

������� ���������� #� �� � �������� ��� /( ������

���� -34 �����������1�2 <� ��������� �� ����� ����

����������� "��6�6+% �� -34 ��������� ���� ������ ���� �������� ������� ��� ������� ���� ������ #� ��

/(�

pH value��� + ����� ��� ������� �� � ������ #�� �������� ��

� ������������ ������� ��� ��������� �� !#$

�������� # ������ ������� �������� �� � "��6�6+%��� �������� �� !#$ ������� ����� �� '.( �������

���� �� ��� ������ ����� �� �� ��������� �� ��������

����� ������� ������� ��� � �(*)(, <� ��������� �

����� ��������� ����� ������ "��6�6+% ���� ����������� ���� �� ���������������� ������ D�������� ���

�� ���������� ������� � ����� ��������� �� ���

��������� �� ��� ������� ���� "��6�6+%� � �������� ��� ����� ���� ����� ���� ��� 2�� ��� �� �������

������ "��6�6+%� -��� �������� ��� ���� ���������� ����������� ������� ���� �� ����� �������(1

�� ��� ������ ��� �� ���� �������

Sensory analysis-����� �)5 ���� ��� ������ �� ������� ��������� ��

� � ��� ���� �����+*)��+8 "������> (66(%

��� ������ ������� ����� 0������ &����� �� �����

������������ ������ �� ��������� ��� ���� ������

���� ���� �� !#$� #������ ���� ��������� ����

����� ������ �� -4#D0 ���� !#$� �� ���� ���� �� �

������ ���� �� ����� �� ;���� ���������� ����� ���� �

������������� �� ��� ����� ������ �� ��� ����� B��

������� ���� (6 ��� 567 .( ���� ����� ����� ������

��� ����� "-���� �% ��� ����� �� ;���� ���������

"-���� 5% ���� ����� ���� �67 .(� ����� (6 ��� 567

.( ���� ���� �� ��������� ���������� ��� ����;������

-�� ���������� �� ���� ������� ������������� ��

���������� ���� ���� -4#D0 ����� ��� ��� ���������

�� ��������� �� ����� ���������� <� ��������� ���

������� ���������� �67 .( ���� ���� �� �������� ��

��� ���� ������ ���� ���������� ������� ����� -����

��+1

Table 2. Odour evaluation of over-wrap-, vacuum- and modifiedatmosphere-packaged fillets

���������

�� �� ���� �

� � � �� �� ��

��������� � ) ) )

�� ��� � � ) )

� ����� ������ �� � � �

� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

�� ����� ������ �� � � �

� ���� �*��#� " ��! �'������ " ��! ��#������$ +#�$!

��� "������$ +#�$! ��#�� '��$ +#�$! �����$ #�� '��$ +#�$!

)�'����$ �����"(

Table 3. Fresh fish flavour intensity in over-wrap-, vacuum- andmodified atmosphere-packaged fillets

���������

�� �� ���� �

� � � �� �� ��

��������� '� '� '� '�

�� ��� � � � '� '�

� ����� ������ �� �

� ����� ������ �� � '�

�� ����� ������ �� � � '�

�� ����� ������ �� � � '�

�� ����� ������ �� � � '�

�� ����� ������ �� � � �

� ���� ��,������$ ����! ����$ ����! ��� "�����! �� � �!

�����$ � �! '�- ' � ��������"(

! ���"��#� � $�����"�� �� !�����"�

���� ������� ����������� ����� ��� ������� ����

��������� ���� ������ "-���� (%�

0������ ������ ���� ���� ���� ��������� �� �������

������ ���� ���������� ���� ��������� �� � ������

����� ��������(2)56 -�� � ������� ���� ����� �� �

���� ��������� &����� ���������� <� ���� ����� � �����

��� ����� ������ ���������� ���� ;���� ��� ����

������� ������ "��6�6�%� <������ � ����� ���� ������������ ��� ���� ������� � ��������� ��� ���������

������ ��� -34 ������� "��6�6�%�

CONCLUSIONS!��� �� ���������� ��������� �� ������ �������

���� ���� ���� �� � ����� ���� ��������� �� ��� ����������

"��6�6+% �������� ���� ���� ��� ���������

���������� -��� ���������� ��������� ��� �� �� ���

���������� ������ �� ��������� ������ ��� �� ��� �����

��������� �� �������� �������� ��� �� �����

�������� ����� ��� �������������

B�� ������� ���� (6 ��� 567 .( ��������� ������

-4#D0 ����� ��� ����� ������ �� ������� ��������

���� ��� ������� ���� �67 .(� /� ����� ����

����������� ���� ���� ������� ��� �������� ��������

��� ������ / �� #� �� ��� �� ��� ������� �����������

(

��+2

-�� ���� �������� ���������� ��������� �� �67

.(�+67 '.(�*67 /(:#��

REFERENCES� 4���� 9B� !������ �� ���������� ����������� ��� &�����

��������� �� � %���� �� ���� ���� �� &��������� 9� ��

'������ GG� ������� /��� 4����� ������� "�818%�

( D������ 9D ��� 4������ BG� !�������������� ��� �������

��������� �� ����� �� �������� �� ������ ������� ��� ������

������ �� ��� �������� � ��� ������ .9>(*+)(*1 "�825%�

5 $�������� C� 0������� B� ������ GG ��� '��� !C� 9����� ��

���� �� ���������� ��������� �� ����� ���� �� ���� ����� ����

������� � � ��� ���� :�>+*�)+*1 "�88,%�

* .���H�I�� G#� C�H����B�H���� ?9� �����H���� !� ����� 9 ��� ?�

�� �� C�!�������� ��� ��������������� ���� ������� �� ����

"�������� ��������% ������ ������ ���� ������ �������

�������� ������������ � � ��� ���� 8)>�25�)�2*6 "(666%�

+ B���� #� ��������� C� '������ 0� $����������� C ��� ���� $�

!�������� &����� ��� ����� ���� �� ������� ��� ����� �� �����

���� ��� ���� �� ���������� ���������� ��� &����� �

9>�*1)�+1 "�885%�

, D������ J� ����� - ��� #��������� D� 9����� �� ���������

������ �� ��� &����� �� ������� ���� ��� 4����� �������

������ '������ (��� &����� 0)>+,),� "�881%�

1 D�������� BC� '#$F8�� ���������� ������� ��� &����� )*�

,9"5%>��)�5 "�88�%�

2 0�������� 0� -�� ������ �� ����� ����� �� ��������� ��� ����� ����

�� ������ �� ����� ���� �� ��� �+�� ,������������ -�������� ��

-�������� .�� ��� ����������./���� ��������� 9� 0�����

���� 4������ D������� <��� $��������� /G� �� ���)�(6

"�88�%�

8 0���� G� D�������� ��� 0������ 4� ?����������� �� ����

��������� ����������� $��� (> 0������ �������� &��� � ��� �

&����� �"+%>���)��2 "�886%�

�6 9����� D$� '���� ?0 ��� C���� J � ,-��0 ������������� ��

��� �1 &���� �������� �� ����� � �� 2����������� 3�� <�

#������� K������� "�825%�

�� $�������� #� �����! ��� 0�������� � #���� ���������� ��������

��� ����� ��������� �� ���� ����� ��� ������� ����� �����

�������� � ���� ��� -��� .0>�558)�5*( "�88+%�

�( 3�������/���H� !-� <�&������$���� ! ��� 3�����'���

!'� ?������������ �� #-$ ������� �������� �� ����� ���

������ ��� �� �� $C'� ��� -��� -;>*,1)*1( "�881%�

�5 9������ A����� '��������� �������� 8+:�*8:9'� 2 !����

�88+� 3�� � 2�� -����� 4;:>2*)21 "�88+%�

�* 0$00� � ��� (�� ���� 415161� 0$00 <��� '������� <C "�88+%�

�+ B������ D ��� /���� #� !�������������� ��������� ��� ������

����� ���� �� "���������� ������ ���� %� �� �������� ��

���������� -������� 9� �� #���� GL� C0A ?������� ��

'�������� 9�������� 4���� D���� C# "�81+%�

�, J���� -L� !���� ?4 ��� #����� !0� D��������� ��

������������� ���� ���� ������������ � ��� � ,)>262)

2�5 "�8,+%�

�1 ?��� G'� !������� D� ���L����� '!� 9����� �� �������� ���

�������� ���������� �� ��������� ����������� �� ������ �����

"����� �������% ������ � ��� � .,>5**)5*1 "�811%�

�2 4���� GC� C������ D' ��� 0����� ?#� #������ ���������

����������� �� ���� �� ���������� ������������ ����� ��� �

��� � -9>�(,1)�(16 "�88�%�

�8 ���������� ' ��� 0���� GC� #������ ������ ����� ���

������� ��������� ������� �� '.( ������ ������������ �������

���� ������� � ��� � -;>,1),8 "�88*%�

(6 .M ���� �� -����� J?#� N������ $ ��� .M ���� O� '��������

��������������� ��� ������� ��������� �� #������� �������

"-����� ��������% ������ �� ���� ���� �� ���������� ���

���� ����� ��� -��� :�>(,1)(15 "(666%�

(� '������ GG� '������ �� �� &������ �� � %��� ���� ����

&��������� 9� �� '������ GG� ������� /��� 4����� ��������

�� �65)�(6 "�81+%�

(( !���� $� $���� # ��� 3������ #!� -���� �� ����� ����&�

� � ��� ���� �����+*)��+8 "������> (66(%

�� ��� ���������� �������� �� ������� �����

�������� ����� � ���� �������� ��� ������� ������� $�% ��

���� ->+�),� "�886%�

(5 0������!9� #��������� �������� �� ,� ������� ������� &���������

9� D������� $�������� '����������� /O� �� *(+)*5�

"�8,5%�

(* 4���� � /�������� D ��� ����� B� 0��������� ������ �� ������

������� �������� � �� ���� ��� B�� �� !������ � ��� �

.->�+1)�,( "�826%�

(+ $����� J� L���� !G ��� 4���� L?� !��� �� ����������

������� �� ���� �� ������ � ��� � .:>�2�)�2* "�82�%�

(, C������� !9 ��� !������ GD� !�������������� ��� ��������

������� �� ������� ������ "��� ���� ���������% ������ ����

���� �� ������������ � ��� ������ .:>*+5)*+1 "�82*%�

(1 D���PH��� 'G� 4������� < ��� $����� '� 4���������� ������� ��

� � ��� ���� �����+*)��+8 "������> (66(%

���������� ������� ���� "3��������� ������% ����� �������

�������� � � ��� ���� :;>�*15)�*26 "�888%�

(2 !����� D9� B��� DG ��� $������ !?� N����� ���������� ��

����� �� ��� ��� ���� �� �������� �������� �����;���� ���

&����� 0,>�22 "�812%�

(8 �������� B'� .���� G� 0������ G# ��� 3��� #!#� <������

�������������� ������������ ��� ����� ����� ������ ��� ��

;���� �������������� -,$3 &�������� $������� '���������

3������� ����� )� 76 "�82,%�

56 B���� ? ��� 4�������4���� 9<� #�������� ������������

����������� �� ;���� �������� ��� ��������� ���������� ��

$��� � ��� " � �� �����������% ��� ������� "&�������

�����������%� � ��� � -->(+1)(+2 "�886%�

��+8