liquidos serosos 1 comp
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ESTUDIO CITOQUÍMICO
DELIQUIDOS SEROSOS
Lic. Mercedes Catani Dra. Rosario San Martín
Dr. Isidoro Prudente Dra. Silvia Zunino Torres
Hospital de Clínicas.
Departamento de Laboratorio Clínico.
Repartición Hematología y Citología.
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LÍQUIDO SEROSO:
Se denomina así al líquido quenormalmente se encuentra en lascavidades serosas:
-Cavidad pleural: 10-20 ml
-Cavidad peritoneal: 50 ml-Cavidad pericárdica: 100 ml
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DERRAME SEROSO:
Acumulación patológica de líquido enuna cavidad serosa
Pleural (derrame pleural)
Pericárdica (derrame pericárdico)
Peritoneal (ascitis)
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Capilarsistémico
serosavisceralserosaparietal
Presiónhidrostática
Presióncoloidosmótica
Capilarpulmonar
c. linfático
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MECANISMOS DE FORMACIÓN DE DERRAMESSEROSOS
p. hidrostática
p. coloidosmótica
permeabilidad capilar
obstrucción del drenaje linfático
InsuficienciaCardíacaCongestiva
S.nefrótico
Cirrosis
InfeccionesE.. Inflamatorias
Neoplasias
Neoplasias
Traumatismo
TRASUDADO
EXUDADO
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Los derrames serosos pueden presentarsecomo complicación de distintas patologías.
Su estudio citoquímico y bacteriológico no
sólo proporciona una orientacióndiagnóstica sino que en algunas situacionesdetermina conductas terapéuticas.
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Examen macroscópico
ASPECTOHemorrágico Punción traumática, derramesneoplásicos, traumatismos,TEP
Hemático o serohemático No tiene valor diagnóstico
Turbio Sobrenadante límpido: células
Sobrenadante turbio: bacterias
lípidosOpalescente, lechoso Derrames quilosos y
seudoquilosos.
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Examen químico
1. Parámetros bioquímicos utilizados para
diferenciar trasudados y exudados
2. Parámetros bioquímicos para
determinar la etiología de un exudado
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Criterios de Light
Proteínas líquido pleuralProteínas séricas
LDH liquído pleuralLDH sérica
LDH en líquido pleural 200 UI / L
> 0.5
> 0.6
>Se considera que el líquido es un exudado cuando cumple uno
o más de estos criterios
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60 mg / dl60 mg / dlColesterol *
200 U / L 200 U / LLDH
30 g / L 30 g / LProteínas
ExudadoTrasudado
* Sólo en líquidos pleurales , en líquidos de ascitis se
utiliza como criterio para diferenciar derramesneoplásicos de no neoplásicos
PARÁMETROS BIOQUÍMICOS UTILIZADOS PARADIFERENCIAR TRASUDADOS de EXUDADOS
PLEURALES
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PARAMETROS UTILIZADOS EN LIQUIDOS
DE ASCITIS
Gradiente de Albúmina
Albúmina sérica – albúmina líquido :
>= 1.1 g/l = HTTP < 1.1 g/l = no HTP
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Etiología de un exudado pleural
Parámetros bioquímicos GLUCOSA
pH
TRIGLICÉRIDOS
AMILASA
CREATININA
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•DERRAMES PARANEUMÓNICOSCOMPLICADOS
•BK
•ENF. REUMÁTICAS
•NEOPLASIAS
GLUCOSA
Su concentración es similar a la plasmática enlos trasudados y en la mayoría de los exudados
Valores 60 mg/dl pueden verse:
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•DERRAMES PARANEUMÓNICOSCOMPLICADOS
•BK
•Enf. Reumáticas•Neoplasias
•Acidosis sistémica
pH Sólo tiene valor diagnóstico cuando se
determina en las mismas condiciones que el pHarterial
Valores 7.2 pueden observarse en:
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Triglicéridos Su determinación está indicada en líquidos de aspecto
opalescente o lechoso y en aquellos con sobrenadanteturbio. Permite diferenciar:
- derrames quilosos (obstrucción del drenaje linfático con
acumulación de linfa – neoplasias-)-seudoquilosos ( por acumulación de colesterol – BK, AR-).
Valores entre 50-110 mg/dl : estudio de quilomicrones
quiloso seudoquiloso
TG 110 mg/dl 50 mg/dl
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Líquido de Ascitis
Parámetros Bioquímicos
Gradiente de Albúmina
Albúmina sérica – albúmina líquido :
>= 1.1 g/l = HTTP < 1.1 g/l = no HTP
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Amilasa
Valores de amilasa mayores al límite superiornormal en suero pueden verse en derramescausados por:
•Pancreatitis
•Rotura esofágica
•Neoplasias
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Urea y creatinina
Su determinación está indicada ante la sospechade presencia de orina en la cavidad serosa
(estallido vesical, posoperatorio de cirugía abdominal).
Se encuentran valores aumentados de urea ycreatinina en el líquido seroso y valores normalesde creatinina en sangre.
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Citología de líquidos decavidades serosas
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Citología de líquidos decavidades serosas
Normalmente procedentes de:
• revestimiento seroso : célula mesotelial
• sistema monocítico / macrofágico
• capilares subserosos
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Célula mesotelial
NORMAL
• Redondeada
• 18 a 40 u (25 u)
• Núcleo central ovoide
• 2 a 3 nucléolos• Citoplasma denso adelgazado en periferia
• Aisladas o en grupos de menos de 12 células
(ventana)
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Célula mesotelial
REACTIVA• Mayor basofilia citoplásmica
• Bordes bien delimitados
• Discreto grado de anisocariosis
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Célula mesotelial
INVOLUTIVA
• Derrames crónicos
• Degeneración vacuolar
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Macrófago
• 45 % células normales en peritoneo. (CD68+)• 15 – 100 u (30 u)
• Núcleo excéntrico arriñonado
• Citop. claro,finamente vacuolado (encaje)• Material fagocitado
• Formas multinucleadas
y gigantes sólo enserositis reumática
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Células procedentes de
capilares subserosos• Glóbulos rojos. Punción (1 ul/mm3)
Hemorragia.• PMN. % variable. Inflamación.
Infarto.• Linfocitos. Procesos benignos: Formas T
NA. viral, TBC, neoplasias• Eosinófilos. (10%) Infección viral, parasitaria,
mesenquimopatías, TEP, Ntx, Htx.
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Cuadros citológicos patológicos
Células en proporciones variables dependiendo dela causa, duración y complicaciones del derrame.
• Inflamación . Inespecífica. Específica
• TBC• TEP• Cirrosis hepática• Derrames neoplásicos
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Inflamación
• Inespecífica. -células mesoteliales y PMN - IC- NA- sobreinfección
PMN +50%:- pleura: empiema- ascitis: PBE : recuento en
cámara de NeubauerPMN > 250/ mm3
- DPCA: GB > 100/ mm3
50% PMN
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Inflamación
- AR - macrófagos
- m. gigantes multinucleados
- material necrótico granular
• Específica. eosinófilo.
- LES - cél.LE 30% pleuritis lúpica.
- cél. mesoteliales y eosinófilos
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TBC• En pleura - infiltrado linfocitario crónico sin
reacción mesotelial.
• En peritoneo - infiltrado linfocitario crónico con
reacción mesotelial y macrofágica.
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TEP
Necrosis hemorrágica subpleural con reaccióninflamatoria perilesional.
• Citología pleomórfica : - fondo hemorrágico.
- reacción mesotelial a/v con
alt. citomorfológicas.- macrófagos con gránulos
de hemosiderina.
- PMN y linfocitos.
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Cirrosis hepática
Celularidad pleomórfica: células mesoteliales,macrófagos, linfocitos, y PMN.
Puede observarse hepatocitos como célulasepiteliales poliédricas con núcleo central ydisposición acinar (no debe confundirse conmetástasis)
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Derrame neoplásico
• Mayor frecuencia corresponde a adenocarcinomas
de pulmón, mama, ovario.
• Tendencia a formar grupos celulares cohesivos,
tridimensionales o seudoacinos, cuyas células
presentan variadas atipías citomorfológicas.• El mesotelioma ( neoplasia de la serosa ) es muy
poco frecuente.
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MARCADORESTUMORALES
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MARCADORES
TUMORALES• Sustancia producida por la célula neoplásica
que refleja su crecimiento y/o actividad, y
permite conocer la presencia, evolución orespuesta terapéutica de un tumor maligno.• Incluye: 1)productos detectables in situ en
el tumor o sus metástasis y 2) productos
liberados a la sangre y detectables en suero.• Al 1º grupo dedicaremos nuestra atención.
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INMUNOCITOQUIMICA
• .Definición: técnica que hace visible unareacción antígeno - anticuerpo en muestras
citológicas.• .Inmunohistoquímica (IHQ): si dicha
reacción se realiza sobre tejidos.
• .Aporta mayor sensibilidad diagnóstica a loscriterios exclusivamente morfológicos.
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METODOLOGIA
• Se utilizan Ac Monoclonales (Moabs):poseen alta homogeneidad de lugares
específicos de unión con el antígeno.• Los antígenos no deben ser destruidos nienmascarados por los procedimientostécnicos.
• Fijador: debe estar en función de los gruposreactivos antigénicos que se pretendedemostrar.
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METODOLOGIA
• Fijador: debe buscar un equilibrio entre lapreservación de la morfología y la
inmunoreactividad.• Se clasifican: 1) actúan por precipitación2) actúan estableciendo uniones cruzadas.
• Sistemas de revelado: hacen visible lareacción (IFD, IFI).
• Aplicable a PAAF, derrames, bloquescelulares, improntas, etc.
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PANELES DE
ANTICUERPOS• Los paneles de Moabs se realizan siguiendo 2
líneas: 1) por ANTIGENOS a estudiar
2) por TUMORES a detectar.• 1)Por Antígenos a detectar:• Ag Oncofetales : AFP, CEA.
• Mucinas: MUC1, MUC2, MUC3A, (CA-125,CA15-3, CA 27-29).• Citoqueratinas: 8, 18, 19, (CIFRA, TPS, TPA).
• Enzimas e inhibidores: NSE, SCC.
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Tumores a estudiar
CQ VM LCA HMB
45
Carcinoma + - - -
Linfoma - + + -
Sarcoma - + + -
Melanoma - + + +
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Adenocarcinoma vsMesotelioma
AdenoC Mesotel.
CEA + -
CQ B Peso + +
CQ A Peso - +
CD 15 + -
B 72.3 + -
Desmina - +
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PROTOCOLO DE
PROCESAMIENTO DELIQUIDOS SEROSOS
PROTOCOLO DE
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PROTOCOLO DEPROCESAMIENTO DE
LIQUIDOS SEROSOS•Recepción de la muestra
Los líquidos obtenidos por punción seránremitidos rápidamente al laboratorio en 4 tubosa) tubo estéril para estudio bacteriológico.
b) tubo seco sin anticoagulante para estudiobioquímico.c) tubo con anticoagulante para estudio citológico.
d) tubo en anaerobiosis para determinación de pH.
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Procesamiento
1) Macroscopía• color• aspecto• presencia o no de coágulo• presencia de restos tisulares
2) Centrifugación • convencional 2500 rpm 10’
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Procesamiento
3) Postcentrifugado• sobrenadante - color
- aspecto
• sedimento - volumen
- características -hemático- capa blanca celular
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Procesamiento
4) Estudio bioquímico del sobrenadante• glucosa
• proteínas totales
• colesterol
•
LDH• Tg (sobrenadante turbio)
• otras determinaciones - amilasa, urea, iones, etc.
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Procesamiento
5) Citología• Frotis del sedimento resuspendido de
centrifugación convencional.
• CitocentrifugaciónSe realiza de rutina excepto en líquidos muy
hemorrágicos o purulentos, o con una gran capacelular en el sedimento convencional.Se resuspende el sedimento en 250ul de
sobrenadante y se carga la cápsula.
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Ventajas de la citocentrifugación
• Mayor concentración celular.
• Disposición celular en monocapa evitando elsolapamiento.
• Conserva intacta la morfología celular.
• Permite realización de técnicas inmunocito-
químicas.
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• La citocentrifugación siempre debe ser realizadaen forma paralela a la centrifugaciónconvencional que aporta la noción cuantitativa de
los elementos celulares.
• De una serie de citologías de líquidos serosos que
fueron negativas para atipías citomorfológicasmediante centrifugación convencional , 36 %resultaron positivos para citocentrifugación.
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Procesamiento
6 ) Secado de lo frotis al aire y tinción con
MGG.Los tiempos de tinción son similares a los
empleados en extendidos hematológicos,
debiéndose acortar a la mitad la etapa deGiemsa.
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Confección del informe
• Nombre del paciente• Procedencia• Datos filiatorios
• Tipo de material• Estudio realizado - macroscopía
- bioquímica
- citología- en suma diagnóstico
• Fecha