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Liquido Cefalorraquídeo Dra. VIOLETA DAVILA I.

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Page 1: Liquidos LCR

Liquido Cefalorraquídeo

Dra. VIOLETA DAVILA I.

Page 2: Liquidos LCR

Entre el cráneo y el cerebro hay 3 membranas protectoras (meninges) que rodean completamente tanto al cerebro como a la Médula espinal

El LCR fluye en el espacio entre estas membranas, llamado espacio subaracnoideo, este líquido esta en constante circulación y cumple varias funciones importantes.

 

SISTEMA NERVIOSO

Page 3: Liquidos LCR

Examinar el LCR (Ej. Sospecha de meningitis o hemorragia intracraneana).

Medir la presión del LCR, detectar alteraciones en el flujo del mismo o reducir la presión.

Introducir anestésicos, medicamentos o medios de contraste radiológicos en Médula Espinal.

PUNCION LUMBARPermite obtener LCR, se realiza para:

Page 4: Liquidos LCR

Patologías en los que se requiere examen LCR

Infecciones Meningitis (purulento, aséptica)EncefalitisNeurosifilis (aguda)Meningitis TB

Cerebrovascular Hemorragia subaracnoideaDemencia y degenerativas Enfermedad de Alzheimer

Neoplásicas Carcinomatosis meningealDepósitos secundarios

Desmielinizante Esclerosis múltiple

autoinmune Sarcoidosis

Otros: Hidrocefalia de presión normalpseudotumor cerebral

Page 5: Liquidos LCR

Patógenos comunes en el SNC

Bacterias aerobias:

Estreptococo pneumoniae Haemophilus influenza

Neisseria meningitidis StaphylocoousStreptococcus agalactiae Mycobacterium tuberculosoEscherichia coli Treponema palidumLeptospira Borelia

Diagnóstico Neurológico LCR

Page 6: Liquidos LCR

Hongos:Candida albicans Cryptococcus

neoformansHistoplasma capsulatum

Virus:

Enterovirus Herpes simpleArbovirus V. De la paperaVIH V. Del sarampión

Parásitos:

Cistecercosis Quiste hidatídicoNaegleria fowleri Acanthamoeba spp.

Diagnóstico Neurológico LCR

Page 7: Liquidos LCR

MENINGITIS

Etapa de la vida Germen causal

Recién nacidos •E.coli,•Listeria monocytogenes•streptococcus agalactiae ( b )

Niños menores de 15 años

•haemophylus influenzae tipo b•neisseria meningitidis

Adultos •streptococcus pneumoniae•neisseria meningitidis

Ancianos •streptococcus pneumoniae

Page 8: Liquidos LCR

1. Paciente en decúbito lateral, flexiona la cabeza sobre el tórax.

2. Punción entre L4 y L5, inyectar anestésico local e introducir aguja espinal con estilete hasta que penetra en el espacio subaracnoideo.

TÉCNICA DE PUNCION LUMBAR

3. Extraer el estilete y medir Pr. LCR.

4. Extraer 10-20 ml de LCR, en 3 muestras de 2-3 ml en distintos tubos estériles, rotulados.

5. Medir nuevamente presión.

6. Colocar apósito estéril en sitio de punción.

Page 9: Liquidos LCR
Page 10: Liquidos LCR

Los tubos se rotulan con el número secuencial correspondiente (1, 2, 3).

Se coloca el nombre del paciente y la fecha se envía al laboratorio con las solicitudes correspondiente.

Anotar hora de inicio y fin del procedimiento, estado del paciente, aspecto del LCR y las presiones.

TÉCNICA DE PUNCION LUMBAR

No refrigerar por que altera resultados bacteriológicos y micóticos, para estudio viral se congela.

Page 11: Liquidos LCR

Recepción de la muestra:  Los líquidos tienen prioridad sobre otras

muestras. verificar que la información del envase coincida

con la orden médica.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Page 12: Liquidos LCR

Toma de muestra: Las muestras recogidas en tres tubos estériles,

marcados como 1, 2 y 3, en el orden en que se retiren.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Page 13: Liquidos LCR

Tubo 1: Pruebas bioquímicas y serológicas.Porque estas pruebas son menos afectados por la sangre o las bacterias introducidas como resultado del procedimiento de punción.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Tubo 2: Generalmente para microbiología.

Tubo 3: Para el recuento de células.Porque es el menos probable que contenga células introducidas por el procedimiento de punción lumbar.

Page 14: Liquidos LCR

Un cuarto tubo se puede extraer para pruebas de microbiología (mejor exclusión de contaminación de la piel o para pruebas serológicas adicionales).

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

El sobrenadante líquido que queda después de realizado las pruebas, pueden usarse para exámenes químicos adicionales o pr. serológicas.

Page 15: Liquidos LCR

Teniendo en cuenta el procedimiento y posibles complicaciones durante la toma de muestra, personal de laboratorio debe manejar con cuidado las muestras de LCR.

Las pruebas se realizan sobre una base STAT.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Si esto no es posible, mantener las muestras así:•Tubo de Hematología son refrigerados.

•Tubo de Microbiología a temperatura ambiente.

• De Química y tubos de serología se congelan.

Page 16: Liquidos LCR

Estudio del LCR1. Características generales - Examen físico Aspecto y Color2. Recuento celular

Leucocitos total y diferencialHematíesCélulas tumorales

3. BioquímicaGlucosaProteínas

Microbiología: Coloración Gram, BK, tinta china, aglutinacionesOtros: Coloración de Papanicolaou, VDRL, ADA, PCR

“El análisis del LCR debe procesarse de inmediato, como una Emergencia medica ”

Page 17: Liquidos LCR

Xantocrómico, Hemolizadas/con sangre, Turbio, Lechoso,

CARACTERISTICAS GENERALESCOLOR Y ASPECTO DEL LCR

Color y aspecto: Incoloro, Cristal roca, transparente.

Turbio, lechoso: Aumento de proteínas, lípidos o indicativo de infección (glóbulos blancos).

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ASPECTO Y COLOR del LCR:

Incoloro Xantocromía Rojizo Blanquecino Negruzco

En hemorragias recientes se observan hematíes y en hemorragias antiguas se observa xantocromía

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Aspecto y color al centrifugadoSEDIMENTO: Botón Blanquecino Botón Hemático Blanquecino más halo hemático Halo Blanquecino

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Causas de turbidez: > 200 leuc/l, > 500 hematies/l >105 bacterias/l Presencia de hongos, amebas Sustancia de contraste, Grasa epidural. Coagulo o formación de película en el LCR indica

aumento de proteínas > 150 mg/dl o fibrinógeno y dan color amarillo.

ASPECTO Y COLOR del LCR:

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SIGNIFICADO CLINICO - ASPECTO

ASPECTO CAUSA SIGNIFICADOTransparente -------- Normal

Turbio Leucocitos Meningitis,

Hemático Eritrocitos Hemorragia,Punción traumática

Lechoso Microorganismos,Proteínas

Meningitis,Trastornos de BHEProducción de Ig G en SNC

Aceitoso Material de Contraste Rx Altera la densidad

Coágulo Proteínas y Factores deCoagulación

Trastornos de BHE. Punción traumática

Formación de película Proteínas y Factores deCoagulación

MeningitisTuberculosa

Page 23: Liquidos LCR

El LCR debe examinarse en búsqueda de coagulación que puede ocurrir debido a:Punción traumática (coagula por la presencia

de fibrina del suero).Nivel muy elevado de proteínas.

Coagulación

* Normalmente el LCR no presenta coagulación.

Page 24: Liquidos LCR

Xantocromía: Coloración rosa, naranja o amarillo de una parte del

cuerpo (piel u otro tejido) o de un líquido orgánico.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Page 25: Liquidos LCR

Xantocromía - Causas: Presencia de productos de degradación de GR

(+frec)

Presencia bilirrubina sérica, del pigmento caroteno,

Marcado aumento de proteínas, pigmentos y el melanoma.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Page 26: Liquidos LCR

LCR sanguinolento: Causas Hemorragia intracraneal, Punción de un vaso sanguíneo durante la punción lumbar.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Examen visuales de 03 tubos recolectados:• Hemorragia cerebral: Sangre se distribuye uniformemente

a lo largo de los tres tubos de muestra de LCR,• Punción traumática: Mayor concentración de sangre en el

tubo 1, gradual disminución en los tubos 2 y 3.

Realizar el recuento de eritrocitos en los tres tubos para medir la disminución o la sangre constante, no siempre es fiable.

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LCR H. Subaracnoidea PL traumáticaPr. del LCR Con frec elevada Baja Sangre en tubos de LCR

Mezcla de sangre en todos los tubos es uniforme

Primeros tubos más hemáticos que subsecuentes

Coagulación No se coagula. Frec se coagula

Sobrenadante Xantocromico Incoloro

Xantocromía Pte más de 8 a 12 hrs desp hemorragia

Ausente, excepto en pac ictérico.

Microscopía Hematíes crenados Hematíes normales

Otra PL a un nivel más alto

LCR igual a la punción inicial

LCR transparente (si es atraumática).

Características del LCR hemático

Page 28: Liquidos LCR

GLUCOSA PROTEINAS TOTALES GLURURO ACIDO LACTIVO LACTATO DESHIDROGENASA

PARAMETROS BIOQUIMICOS

En general el uso de enzimas es de valor diagnóstico limitado

Page 29: Liquidos LCR

Valor de referencia: Adulto 40 – 70 mg/100 ml. Niños: 60 a 80 mg/100 ml. Valor crítico: menor de 20 mg/100ml

GLUCOSA

LCR = 40 a 80 % de la glucemia.Relación de glucosa en LCR/plasma = 0.4/0.8

Page 30: Liquidos LCR

La concentración de glucosa en LCR guarda estrecha relación con la concentración de glucosa en plasma, por eso es recomendable realizarlas simultáneamente (Glucosa en sangre y en LCR) y compararlas.

El valor de glucosa en LCR no tiene ningún significado si no va acompañado de la determinación de glucosa en suero.

Cambios de glucemia se reflejan en LCR de 1 a 3 hr. después

GLUCOSA

Page 31: Liquidos LCR

Su presencia en el LCR recibe el nombre de glucorraquia. Hipoglucorraquia: En meningitis bacterianas y micóticas (mayor

utilización de glucosa por leucocitos y microorganismos)

Hiperglucorraquia: En diabetes, encefalitis, virosis (meningitis,

poliomielitis), uremia.

GLUCOSA

Page 32: Liquidos LCR

Valor de referencia: (Variable según edad y sitio de punción)

◦Neonatos: 15 – 100 mg/100 ml◦6 meses a 13 anos: 7 - 28 mg / 100 ml. ◦17 - 50 anos: 15 - 45 mg / 100 ml. ◦Mayor de 60 anos: 15 - 60 mg / 100 ml. ◦Ventricular: 10 - 25 mg / 100 ml.

PROTEINAS TOTALES EN LCR

Su presencia en el LCR se denomina proteinorraquia Proteinorraquia: 80 % albúmina y 20 % globulinas.

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Valor de referencia: Adulto: 120 a 130 meq/l o 730 mg/dl Niños: 111 a 130 meq/L

CLORURO EN LCR

Hipoclorurorraquia: Disminuye en Meningitis TBC y bacteriana.EN Meningitis tuberculosa se observan los valores más bajos, pueden llegar a 5 gr/dl

Alteración de Cl plasmática afecta el Cl en LCR.En LCR es más abundante (1.2 a 1) que en plasma.

Page 34: Liquidos LCR

Valores de referencia: Menor 24 mg/100ml Adultos: 10 a 25 mg/100 mg. 

Es independiente de la concentración plasmática.

ACIDO LÁCTICO EN LCR

Dx diferencial de meningitis bacteriana o viral.

Aumenta en:

• Meningitis bacteriana.• Pleocitosis• Traumatismo cerebral.

Page 35: Liquidos LCR

Composición del LCR comparado con el plasma

Componente L:P LCR Plasma Unidades

pCO2 1.28 50.2 39.5 Cloruro 1.21 125 103 Sodio 1.03 144 140Bicarbonato 1.01 25.1 24.8 Magnesio 0.8 2.4 3 Potasio 0.54 2.1 4Calcio 0.33 64 100

Urea 0.8 12.0 15 Glucosa 0.64 64.0 100Proteína 0.0033 20 6000 Colesterol 0.0002 0.14 175

mg/dl

mEq/l

Page 36: Liquidos LCR

Determinación de la enzima adenosindesaminasa ADA, de gran utilidad en el diagnóstico de meningitis tuberculosa.

Valores superiores a las 9 U/l son muy específicos de esta enfermedad.

Test de ADA

Page 37: Liquidos LCR

Proteína C reactiva Ayuda en el diagnóstico diferencial entre

meningitis bacterianas y otras etiologías. Un resultado negativo prácticamente

excluye dicho origen (bacteriano) con un 99% de seguridad

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Células LE: Para LES Células tumorales, pueden derivarse de

neoplasias primarias ometastasicas. Amebas. Cryptococcus neoformans. Hongos y levaduras. Toxoplasma. Proteina C Reactiva: Se ha sugerido para Dxo

diferencial de mening bact frente a la vírica. (tiene 100 % de sensibilidad y 94% de especificidad para meningitis bacteriana.

OTROS

Page 39: Liquidos LCR

1)Antígeno carcinoembionario del LCR se ha utilizado como marcador de carcinoma meníngeo metastásico.

2)La alfafetoproteina se ha utilizado como marcador para carcinoma embrionario.

3)La gonadotropina coriónica humana del LCR se ha empleado como marcador del coriocarcinoma metastásico en SNC

Marcadores Tumorales

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Cuenta Celular total

Adultos RECIEN NACIDO(0-14 días)

Leucocitos 0-5 células 0-30 células

Linfocitos 40-80% 5-35%

Monocitos 15-45% 50-90%

Polimorfos 0-6% 0-8%

CITOLOGIA DEL LCR

La presencia de leucocitos de denomina pleocitosis

Page 42: Liquidos LCR

Pleocitosis:

Aumento de los leucocitos en LCR > 5 cel/mm3.

Esto indica un proceso inflamatorio de las

meninges cualquiera que sea su etiología.

PLEOCITOCIS

Ligera: 10 a 30 por mm. Moderada: 30 a 100 por mm. Acentuada o marcada: 100 a 150 por mm.

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EXAMEN DIRECTO Debe realizarse de rutina para evaluar la cantidad

y el tipo de células.

Se debe evaluar también la presencia de hematíes crenados, y se informa el porcentaje de los mismos respecto del total de hematíes presentes..

También puede realizarse un examen en fresco con azul de metileno al 0.3% para evaluar un recuento diferencial o presencia de levaduras.

NO son válidos los reportes de células por campo

Page 44: Liquidos LCR

Recuento de Célular: Cualquier recuento debe realizarse

inmediatamente. Los glóbulos blancos (especialmente

granulocitos) y los glóbulos rojos comienzan a lisar el plazo de 1 hora (un 40% de leucocitos se desintegra después de 2 horas).

Las muestras que no pueden ser analizados de inmediato se deben refrigerar.

En LCR normal, la relación GB/GR es <1:500

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO

Page 45: Liquidos LCR

Recuento celular

Colocar directamente LCR directo sin diluir en la cámara de Neubauer.

Contar los 9 cuadrantes grandes. El resultado se multiplica por 10/9 (1.11)

Factor de corrección de la cámara = 1.11= 3mmx3mmx0.1mm=0.9 mm3

Para llevarlo a 1 mm3 multiplicar por10/9)

Page 46: Liquidos LCR

Recuento celular

Nº células =

Nº células contadas x corrección de dilución x volumen corregido

= Nº células x 1 x  10/9  mm³

=  Nº células  x  10/9  mm³

Page 47: Liquidos LCR

Cuando hay pocos GB llenar los 2 compartimientos de la cámara de Neubauer con LCR bien mezclado, sin centrifugar, ni diluir, se esperan 5 minutos.

Contar GB de los 9 cuadrados grandes de ambos retículos = 18 cuadrados, cada retículo con una capacidad de 0.9 mm3 (total 1.8 mm3).

RECUENTO CELULAR

cel/mm3 = Células contadas en los dos retículos ÷ 1.8

Page 48: Liquidos LCR

Cuando hay muchos glóbulos pueden contarse en el cuadriculo central del retículo, los 5 cuadrados utilizados para glóbulos rojos.

La cantidad obtenida multiplicada por 50 da la cifra de células por mm3.

RECUENTO CELULAR

Nº Glob / mm3 =

Glob contados en 5 cuad x 50

(Nº/h x dil x área)

Page 49: Liquidos LCR

Recuento celular con contraste

1) Mezclar

2) Esperar 10 min. para su coloración.3) Volver a homogeneizar y cargar 10 l , en la

cámara de Neubauer, dejar reposar 2 min.

Nº leucocitos:Nº leucocitos contados x 1.23 (Factor corrección)

10 l de cristal violeta 0.2% o

10 ul azul de metileno 0.3%

+ 90 l de LCR (dilución 1/10)

FC de la cámara (1,11) multiplicado por 1,1FC de la dilución 1/10)

Page 50: Liquidos LCR

Recuento celular

1. Dilución con Solución Türck, dependiendo de la turbidez:◦1/10 (20 L de LCR + 180 L de Türck), ◦1/20 (10 L de LCR + 190 L de Türck),

2. Se cuenta el número de células que hay en los 4 cuadrantes de la cámara y

3.El Nº contado se multiplica o por 25 (dil 1/10) oo por 50 (dil 1/20).

Page 51: Liquidos LCR

En LCR hemático, es difícil distinguir los leucocitos. Tomar igual cantidad de LCR y de acido acético

glacial como diluyente, para lisar los GR. Se llenan los dos compartimientos de la cámara y el

resultado final se multiplica por 2.

RECUENTO DE GB EN LCR HEMATICO

Fórmula:

Células contadas x 2 --------------------------- 1.8

= células/ mm3

Page 52: Liquidos LCR

Para corregir glóbulos blancos y la proteína introducida en el LCR como el resultado de una punción traumática.

Corrección de leucocitos en LCR Hemático

O cuando los GR y GB en sangre están en rango normal:o Leucocito: Restar 1 leucocito por c/700 hematíes de LCRo Proteína: Restar 1mg por cada 1000 hematíes.

Page 53: Liquidos LCR

RECUENTO DIFERENCIAL

Es importante para separar los leucocitos de otras células, normales o tumorales

Existen 2 técnicas para la diferenciación celular:

1. Coloración con Wrigh, giemsa, extender el sedimento en una lámina porta objeto y colorear.

◦Tener en cuenta que la centrifugación y la extensión del frotis deforma las células o las destruye, alterando el recuento diferencial.

2. Coloración Supravital: es sencilla y fácil, nos permite observar nítidamente los elementos y diferenciarlos.

Page 54: Liquidos LCR

Se centrífuga el LCR a poca velocidad 500 rpm por 5 minutos, Se descarta el sobrenadante y Se hacen extendidos con sedimento, Se dejan secar bien y luego se tiñen por Wright. Se cuentan 100 células blancas.

Recuento Diferencial:

En LCR normales: Se encuentran escasos leucocitos.• Linfocitos: Meningitis tuberculosa, infecciones crón. y

agudas no bacterianas. •PMN: Meningitis bacteriana agudas, en la evolucion a la curación los linfocitos las reemplazan (fórmula mixta). •Los eosinófilos: Ciertas parasitosis, como la cisticercosis.

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Forma radial.

Tincion Gram para Criptococo neoformans

Page 56: Liquidos LCR

Células tumorales en LCR

Page 57: Liquidos LCR

Tinta china para Criptococo neoformans

Page 58: Liquidos LCR

Meningitis: Etiologías más frecuentesTipo de Meningitis

Bacteriana

Vírica Tbc Criptococo

Valores normale

s

Presión apertura (mm H2O)

200-400 90-200 180-300 180-300 90-180

Glucosa LCR (mg/dL)

<40 50-75 <40* <40 50-75

Proteínas (mg/dL)

>100 50-100 100-200 50-200 15-40

Leucocitos (µL) 100-5.000 10-300 0-500 0-200 0-5

Predominio celular Neutrófilos Linfocitos**

Linfocitos Linfocitos Linfocitos

* La concentración de glucosa en el LCR puede ser normal inicialmente con desarrollo posterior de hipoglucorraquia. ** En los primeros estadios de una meningitis vírica puede existir una predominancia (inicial) de neutrófilos.

# Un LCR con glucosa < 34 mg/dL; proteínas > 220 mg/dL, nº leucocitos > 2.000 o > 1.180 neutrófilos: permite presuponer Meningitis bacteriana con una certeza del 99%.