bases - reconocimiento macroscópico de drogas vegetales

Prácticas de Farmacognosia

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PRÁCTICA 1

I. BASES PARA EL RECONOCIMIENTO MACROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES

II. BASES PARA EL RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES: ELEMENTOS DE VALOR DIAGNÓSTICO EN LA IDENTIFICACIÓN DE DROGAS VEGETALES

� Cristales

� Elementos conductores

� Granos de almidón (Féculas)

� Células epidérmicas con estomas

� Células de parénquima

� Células de Súber

� Células de esclerénquima: Células pétreas y Fibras

� Pelos

III. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES

DROGAS VEGETALES:

� Flor de Manzanilla

� Sumidad de Cáñamo Indiano

IV. EXTRACCIÓN DE ACEITES ESENCIALES


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I. BASES PARA EL RECONOCIMIENTO MACROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES II. BASES PARA EL RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES: ELEMENTOS DE VALOR DIAGNÓSTICO EN LA IDENTIFICACIÓN DE DROGAS VEGETALES

1. INTRODUCCION

Para el reconocimiento de una droga, disponemos de una serie de

características como son:

� Caracteres morfológicos: forma, tamaño, color y forma de las hojas, de

los frutos...

� Caracteres organolépticos: olor, sabor, color.

Pero el estudio macromorfológico no siempre es posible ya que con

frecuencia la droga a reconocer llega ya pulverizada y en muchos casos en

pequeña cantidad. Por otra parte los caracteres organolépticos no son

suficientes para la identificación de una droga, por lo que en estos casos es

necesario recurrir al examen microscópico para poder identificarla

correctamente.

El estudio microscópico de las drogas tiene un amplio interés práctico en

el campo de la Farmacognosia, y por tanto de la Farmacia, y permite resolver

problemas que con frecuencia se plantean en este ámbito profesional, entre

otros:

� Identificación de drogas expedidas en forma pulverizada

� Detección de posibles adulteraciones

� Completar la identificación de drogas no pulverizadas cuando los datos

morfológicos y organolépticos no son suficientes.


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2. OBSERVACION MICROSCOPICA

La observación microscópica debe hacerse con paciencia y

meticulosidad, examinando distintos campos detenida y ordenadamente, ya

que no es posible la observación en un solo campo de todos los elementos

necesarios para la identificación.

Uso del microscopio: Indicamos algunas normas generales de orden

práctico, relativas a su manejo:

• Limpieza de lentes: Antes de comenzar a trabajar con un microscopio,

debe realizarse una inspección del estado de limpieza: lente frontal de cada

objetivo, lente superior del ocular, condensador y espejo.

• Aumentos a emplear: Los aumentos comúnmente empleados para

estos trabajos son de 10X y 40X. Es conveniente recordar que no por ver las

cosas muy aumentadas, se ven mejor. La nitidez e intensidad de la imagen y la

extensión abarcada en el campo de la preparación son mayores empleando

objetivos débiles que fuertes. Por lo que emplearemos habitualmente el de 10X

para el examen general de la preparación y el de 40X, solo si queremos

apreciar mejor algún detalle de la misma.

• Enfoque:

a) Iluminación. En general se utilizara el espejo cóncavo para la iluminación

artificial. El espejo plano suele utilizarse para la luz natural. Accionando

el espejo elegido es fácil conseguir la iluminación del campo del

microscopio.

b) Enfoque propiamente dicho. Con el tornillo de paso rápido se hace

descender el tubo hasta que la lente frontal del objetivo quede cerca de

la preparación sin llegar en ningún momento a tocarla, lo que se

comprobara por visión lateral, nunca mirando por el ocular. A partir de

este momento se comienza el enfoque propiamente dicho.


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Montaje de la preparación:

Antes de realizar el montaje hay que comprobar la limpieza de portas y

cubres. Se pueden hacer dos tipos de preparaciones:

• Extemporáneas: Se montan en agua. Para el montaje se pone sobre

el porta una gota de agua y sobre ella se coloca con cuidado el polvo de la

droga, tomando una pequeña cantidad del mismo con una esquina del cubre y

espolvoreándolo de forma que apenas llegue a cubrir la superficie superior a la

gota. Se remueve esta con la esquina del cubre para que el polvo quede

impregnado por el liquido. Se toca el borde de la gota con una de las aristas del

cubre, se resbala esta sobre el porta para extender convenientemente la gota y

se deja caer sobre ella con suavidad el cubre. Si hubiera exceso de líquido que

rebosa fuera del cubre, se eliminara absorbiéndolo con papel de filtro. Si por

falta de liquido queda parte de la preparación seca, bastara poner en uno de

los bordes del cubre una gota de agua y esta penetrara por capilaridad.

• Duraderas o definitivas: Se suelen hacer con glicero-gelatina que

permite hacer preparaciones definitivas en muy pocos minutos y permiten

conservarlas durante largo tiempo. Previamente al montaje, fundimos la glicero-

gelatina por inmersión en un baño de agua templada y a continuación se opera

como en el caso anterior.

Reactivos:

Emplearemos reactivos de dos tipos:

• Aclarantes: Facilitan la observación microscópica de los elementos en

estudio, por hacerlos más transparentes:

• Agua

• Glicerina

• Hidrato de cloral

• Mezcla aclarante

• De coloración: Hacen más patentes determinadas estructuras, parte de

ellas o contenidos celulares, bien por ser tenidos selectivamente del color del

propio reactivo o bien por dar lugar a nuevas coloraciones distintas a la del

reactivo:


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ESPECIFICOS

• Agua de lodo: Colorea los granos de fécula o almidón de azul oscuro

• Sudan III: Colorea las grasas de rojo anaranjado

• Floroglucina +HCI: colorea la Lignina de rojo

GENERALES

• Cloroyoduro de Zinc: Colorea la celulosa de violeta, la fecula de azul

y la lignina de amarillo.

• Reactivo universal de Steinmetz: colorea la lignina de amarillo, las

grasas de rojo anaranjado, las féculas de violeta y los taninos de azul o verde

3. ELEMENTOS DE VALOR DIAGNÓSTICO EN LA IDENTIFICACIÓN

DE DROGAS VEGETALES

A. CRISTALES

1. Oxalato cálcico: Se pueden presentar de diferentes formas según la

droga de que se trate. Las formas pueden ser:

� Aciculares: Se denominan RAFIDIOS y pueden encontrarse:

o Aislados

o Agrupados

� Paquetes

� Estrella

� Haz

� Prismáticos: de formas muy diversas

� Cristales agrupados en forma de roseta: DRUSAS

� Cristales arenáceos

2. Carbonato cálcico: se denominan cistolitos, y se encuentran en la base

ensanchada de ciertos pelos característicos de algunas especies

vegetales (Cáñamo Indiano).

CRISTALES DE OXALATO CÁLCICO

1. ACICULARES: RAFIDIOS

• AISLADOS

• AGRUPADOS

Paquetes

2. PRISMÁTICOS

3. CRISTALES AGRUPADOS EN ROSETA

4. CRISTALES ARENÁCEOS


CRISTALES DE OXALATO CÁLCICO

: RAFIDIOS

AISLADOS

AGRUPADOS

Paquetes Estrella

CRISTALES AGRUPADOS EN ROSETA: DRUSAS

CRISTALES ARENÁCEOS


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Haz


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B. ELEMENTOS CONDUCTORES: VASOS Y TRAQUEIDAS

Los vasos y traqueidas son elementos constitutivos del xilema de los

vegetales, el principal tejido conductor de una planta, que está formado por

fibras, parénquima y elementos conductores (vasos y traqueidas) y está

asociado al floema, tejido conductor de sustancias alimenticias.

Morfológicamente son estructuras alargadas, con las paredes

transversales reabsorbidas. Las paredes laterales están ligeramente

lignificadas y engrosadas no uniformemente, originándose espesamientos de

distintos tipos, que son los que dan lugar a las distintas denominaciones que

reciben

Vasos:

• ANILLADOS

• ESPIRALADOS

• RETICULADOS

• ESCALARIFORMES

• PUNTEADOS

Traqueidas:

• PUNTUACIONES AREOLADAS


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ELEMENTOS CONDUCTORES: VASOS Y TRAQUEIDAS


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C. GRANOS DE ALMIDÓN (Féculas)

Para estudiar el almidón es necesaria la observación de las siguientes

características:

1. Frecuencia: abundantes, poco abundantes o escasos

2. Granos simples o compuestos, aislados o agrupados

3. Forma: Lenticular, elíptica, poliédrica, ovoide...

4. Tamaño de los granos: pequeño, medio, grande, variable...

5. Hilo:

• Posición

� Céntrico

� Excéntrico

• Forma

� Lineal

� Puntiforme

� Estrellado

4. Zonas de hidratación: Son visibles en algunos casos y otros no.

Si los granos son escasos o pequeños, se puede facilitar su visión con

agua de lodo, que los teñirá de azul si los hubiera.


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Granos de almidón (Féculas)


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D. CÉLULAS EPIDÉRMICAS

Las plantas herbáceas y en general todos los tejidos jóvenes, que no

experimentan un desarrollo secundario, tienen su superficie constituida por

células de epidermis y su forma varía según las distintas especies.

Existen distintos tipos de epidermis y entre ellas destacaremos:

3. Epidermis de células poligonales, con paredes finas, rectas o

ligeramente sinuosas

4. Epidermis con grandes células de paredes finas y contorno sinuoso

5. Epidermis formada por células rectangulares con paredes irregularmente

engrosadas o arrosariadas

6. Epidermis de células con paredes ligeramente sinuosas y cutícula

fuertemente estriada.

En la epidermis es frecuente que se observen ESTOMAS: aberturas de

la epidermis rodeadas por dos celulas oclusivas, y en muchos casos dos o más

células adyacentes de epidermis (células anexas) suelen estar rodeando a las

células oclusivas del estoma.

Se pueden clasificar en 4 tipos:

A. ANOMOCITICO: Las células epidérmicas que rodean al estoma,

no presentan una disposición particular.

B. ANISOCITICO: Poseen tres células epidérmicas alrededor del

estoma y una de ellas es más pequeña que las otras dos.

C. PARACITICO: Con una o más células epidérmicas a cada lado

del estoma, en posición paralela al eje longitudinal del mismo.

D. DIACITICO: células epidérmicas que envuelven al estoma y su

membrana común forman ángulos rectos con el eje longitudinal

del mismo.


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Células epidérmicas

ESTOMAS


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E. CÉLULAS DE PARÉNQUIMA

Las células de parénquima, son el tipo de células de paredes celulósicas

más comunes de todas las drogas. Se encuentran en la mayoría de los

órganos de las plantas, constituyendo lo que se llama "tejido fundamental". La

forma de sus células puede ser muy variada, pero en general son células vivas,

isodiametricas y de paredes finas y suele presentar un color pardo-verdoso. En

la madurez se pueden producir engrosamientos de sus membranas, aparecen

espacios intercelulares, pudiendo cambiar de forma.

Entre los distintos tipos de parénquima señalamos los siguientes:

A. Tejido de parénquima simple

B. Tejido de parénquima simple con espacios intercelulares

C. Parénquima con paredes lignificadas

D. Parénquima reticulado

F. CÉLULAS DE SÚBER

Las células de súber constituyen un tejido protector que reemplaza a la

epidermis en tallos y raíces que experimentan crecimiento secundario. La

presencia de células suberosas nos indica que estamos ante un tallo, raíz o

corteza, ya que los frutos, semillas, hojas y flores, no la presentan.

Se caracterizan por ser células muertas, con las membranas recubiertas

de suberina (Sustancia de naturaleza grasa con un papel protector).

Según la forma de las células y de la pared, podemos establecer los

siguientes tipos:

A. Células de súber con paredes gruesas y rectangulares (Corteza de

Cascara Sagrada)

B. Células con paredes finas y rectangulares, con la superficie externa

aplanada (Raíz de Ipecacuana)

C. Súber de células poligonales (Corteza de Quina)

D. Súber estratificado con paredes finas (Raíz de Rauwolfia)


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Células parénquimas

Células de súber


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G. CÉLULAS DE ESCLERÉQUIMA: FIBRAS Y CÉLULAS PÉTREAS

La denominación "esclerénquima", incluye a complejos de células con

paredes engrosadas generalmente lignificadas, sin contenido celular y cuya

función principal es de índole mecánica. Las células esclerenquimatosas

pueden ser de dos tipos atendiendo a su forma, tamaño y origen:

A. CÉLULAS PETREAS o ESCLEREIDAS

B. FIBRAS

A. Células pétreas:

Son células muertas de parénquima con formas muy variadas y con las

paredes engrosadas lignificadas. Pueden encontrarse aisladas o en grupos.

Existen distintos tipos:

1. Células pequeñas, isodiamétricas, con paredes gruesas y pequeño

lumen. Se pueden localizar en tejidos parenquimáticos de la corteza,

floema etc. (Corteza de Cascara Sagrada)

2. Aisladas o agrupadas en pequeños grupos, de formas y tamaños muy

variados, con paredes muy engrosados y lumen bastante amplio

(Corteza de Canela)

3. Ramificadas y de formas diversas, generalmente aisladas

(Astroescleritos de Hoja de Te)

4. Fusiformes, con lumen muy ancho (Raiz de Aconito).

B. Fibras:

Son células alargadas en sentido axial, con paredes engrosadas, lumen

estrecho y generalmente los extremos puntiagudos.

Tipos:

1. Aisladas con paredes engrosadas y lignificadas, con un lumen muy

estrecho (Corteza de Canela)

2. Fusiformes, con paredes muy engrosadas y muy lignificadas (Corteza

de Quina)

3. Fibras estrechas agrupadas en paquete, con cristales prismáticos de

oxalato cálcico (Raíz de Regaliz)


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H. PELOS

Se presentan en células epidérmicas y tienen estructuras y formas muy

diversas. Poseen un gran valor de diagnostico en el análisis de drogas

pulverizadas. Pueden ser:

A. PELOS TECTORES

Atendiendo al número de células que forman el pelo, pueden ser:

1. Tectores unicelulares:

a) Muy largos, afilados, curvos y parcialmente lignificados (Hoja de Te)

b) Muy cortos, cónicos y verrugosos (Hoja de Sen)

c) Con la base ensanchada, conteniendo en ellas cristales de carbonato

cálcico (Sumidad de Cáñamo indiano)

d) En forma de estrella o ramillete (Hoja de Boldo, Hoja de Hamamelis)

2. Tectores pluricelulares:

e) Uniseriados y cónicos compuestos de dos o tres células.

f) Uniseriados y cónicos, con 3-5 células con una o más de ellas

colapsadas (Hoja de Digital)

g) Pelos ramificados, con un eje central más largo que las ramificaciones

(Hoja de Romero)

B. PELOS GLANDULOSOS o SECRETORES

h) Glándula bicelular y pie unicelular (Hoja de Digital)

i) Pie unicelular y glándula pluricelular (Hoja de Estramonio)

j) Pie pluricelular y glándula unicelular (Hoja de Belladona, Hoja de Digital)

k) Glándula pluricelular y pie pluricelular (Hoja de Beleno)


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Pelos Tectores


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Pelos secretores

III. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO

VEGETALES

Matricaria chamomilla

Polvo de color pardo amarillento, olor fuerte, agradable

sabor ligeramente amargo.

1. Epidermis con células poligonales de paredes finas, ligeramente

sinuosas, algunas de las cuales terminan en papilas

2. Fragmentos de brácteas con estomas anomocí

3. Fragmentos de los filamentos de los estambres con

cuadradas o rectangulares

4. Abundantes granos de polen, esféricos, pequeños y con un

contorno espinoso.

5. Fragmentos de la pared interna del ovario con células de paredes

finas conteniendo numerosas y pequeñas rosetas de oxalato

cálcico.


CONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES DROGAS

FLOR DE MANZANILLA

Matricaria chamomilla

Polvo de color pardo amarillento, olor fuerte, agradable

amargo.

Epidermis con células poligonales de paredes finas, ligeramente

sinuosas, algunas de las cuales terminan en papilas

de brácteas con estomas anomocíticos

Fragmentos de los filamentos de los estambres con

cuadradas o rectangulares

Abundantes granos de polen, esféricos, pequeños y con un

contorno espinoso.

Fragmentos de la pared interna del ovario con células de paredes



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DE LAS SIGUIENTES DROGAS

Asteráceas

Polvo de color pardo amarillento, olor fuerte, agradable y aromático y

Epidermis con células poligonales de paredes finas, ligeramente

Fragmentos de los filamentos de los estambres con células

Abundantes granos de polen, esféricos, pequeños y con un

Fragmentos de la pared interna del ovario con células de paredes


SUMIDAD DE C

Cannabis sativa

Polvo de color marrón verdoso con un olor denso, característico y

desprovisto de sabor

1. Fragmentos de epidermis, a veces con drusas de pequeño tamaño

2. Epidermis con estomas anomocí

cortos, anchos en base y puntiagudos en el ápice

3. Pelos tectores, semejantes a los anteriores pero con un cristal de

carbonato cálcico en la base (cistolito)

4. Elementos conductores


SUMIDAD DE CÁÑAMO INDIANO

Cannabis sativa Cannabináceas



Epidermis con estomas anomocíticos y pelos tectores unicelulares,

base y puntiagudos en el ápice


la base (cistolito)

4. Elementos conductores


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Cannabináceas



ticos y pelos tectores unicelulares,



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IV. EXTRACCIÓN DE ACEITES ESENCIALES

Los aceites esenciales son productos aromáticos, obtenidos a partir de

vegetales, principalmente por corriente de vapor de agua. Químicamente son

mezclas complejas muy variables que pertenecen a dos series con orígenes

biosintéticos distintos:

• serie terpénica

• serie de los derivados del fenilpropano

Su localización en el vegetal es variada, aunque son más frecuentes en

flores (manzanilla) y hojas (eucalipto). Suelen encontrarse en familias

pertenecientes a los órdenes de las Magnoliales, Laurales, Rutales, Lamiales,

Asterales ...

El contenido en los vegetales suele ser cuantitativamente bajo,

normalmente inferior al 1 % (hay excepciones: botones de clavo: 15%).

Suelen ser líquidos a temperatura ambiente, muy raramente tienen color

y en general su densidad es inferior a la del agua (excepciones: canela,

clavo…). Suelen estar dotados de poder rotatorio y con un índice de refracción

elevado. Son solubles en disolventes orgánicos (liposolubles) y poco o nada

solubles en agua y son arrastrables en corriente de vapor de agua.

Poseen una extensa variedad de propiedades farmacológicas entre las

que destacan: antisépticas, espasmolíticos, colagogas etc.

Extracción, valoración y caracterización de la esencia de Eucalipto.

La esencia de eucalipto se extrae de las hojas de Eucaliptus globulus

(Mirtaceae). Se encuentra en ellas en una proporción de 1-3 %. Es un líquido

de color ligeramente amarillento y de densidad menor que el agua.

El componente mayoritario de esta esencia es el CINEOL o

EUCALIPTOL (70-80 %) y va acompañado de carburos terpénicos, alcoholes

alifáticos, sesquiterpenos, etc.

Tanto el eucalipto como la esencia, poseen propiedades expectorantes y

antisépticas y ambos son constituyentes de numerosas

prescritas en las afecciones del aparato respiratorio.

MÉTODO

1. EXTRACCION:

La extracción se realiza en corriente de vapor de agua. Partimos de unos

30-40 g de droga que se depositan en un matraz de fondo redondo al que se

añaden unos 300ml de agua saturada de NaCl y a continuación se realiza el

montaje del aparato destilador,

tubuladuras laterales que se prolongan después en una común a ambas, donde

es recogida la esencia junto con el agua que destila, pero

nuevamente al matraz de destilación por el tubo lateral, Io que hace que el

proceso sea de destilación continua.

Una vez encendida la llama del mechero y

refrigeración, comienza el proceso de destilación. A

se irá acumulando la esencia y el agua en el tubo

caso, la esencia en la capa superior.

el volumen de esencia y se da por terminada la

dos lecturas. Antes de terminar la destilación se cierra el

se continúa destilando todavía algún tiempo, para

que quedan en el refrigerante.



antisépticas y ambos son constituyentes de numerosas

prescritas en las afecciones del aparato respiratorio.

EXTRACCION:


de droga que se depositan en un matraz de fondo redondo al que se

de agua saturada de NaCl y a continuación se realiza el

montaje del aparato destilador, de tipo CLEVENGER, provisto de dos


es recogida la esencia junto con el agua que destila, pero


sea de destilación continua.

Una vez encendida la llama del mechero y conectado el sistema de

refrigeración, comienza el proceso de destilación. A medida que

se irá acumulando la esencia y el agua en el tubo colector, quedando en este

caso, la esencia en la capa superior. A una frecuencia de 30 minutos, se mide

volumen de esencia y se da por terminada la extracción cuando coincidan

lecturas. Antes de terminar la destilación se cierra el agua del refrigerante y

se continúa destilando todavía algún tiempo, para recoger las gotas de esencia

que quedan en el refrigerante.


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antisépticas y ambos son constituyentes de numerosas especialidades


de droga que se depositan en un matraz de fondo redondo al que se

de agua saturada de NaCl y a continuación se realiza el

tipo CLEVENGER, provisto de dos


es recogida la esencia junto con el agua que destila, pero esta vuelve


conectado el sistema de

medida que esta progresa,

colector, quedando en este

A una frecuencia de 30 minutos, se mide

cuando coincidan

agua del refrigerante y

recoger las gotas de esencia


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2. VALORACION:

Consiste en medir con una regla la altura de la esencia obtenida, dentro

del tubo colector y aplicamos la formula:

V = Π r2 h

Obtenemos así el volumen (cm3) de esencia.

Con estos datos:

� Peso de la droga: P = .......g

� Densidad: D ~....,1

� Volumen obtenido de esencia: V= ....... ml

Podemos hallar la Riqueza de esencia de la droga:

R= (V.d./P)100 = (%)

3. CARACTERIZACION DE LA ESENCIA DE EUCALIPTO

Con la ayuda de un capilar depositamos una pequeña cantidad de

esencia obtenida en una placa cromatográfica de Silicagel. Seguidamente

aplicamos la misma cantidad de un patrón de EUCALIPTOL y desarrollamos la

cromatografía en la fase móvil HEXANO/ACETATO de ETILO 9:1. Se revela

con Vainillina sulfúrica, calentando posteriormente en estufa a 100 ºC, durante

5 minutos.

CUESTIONES

1. ¿Cómo se obtienen los aceites esenciales a partir de los vegetales?

2. ¿Cuáles son sus características fisicoquímicas?

3. ¿Cuales son algunas de sus propiedades farmacológicas más

destacables?

4. ¿Cuál es el componente mayoritario de la esencia de eucalipto?


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PRÁCTICA 2

I. RECONOCIMIENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES

DROGAS VEGETALES. ÓRGANOS SUBTERRÁNEOS:

� Bulbo de Escila

� Raíz de Regaliz

� Rizoma de Ruibarbo

II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE TANINOS

I. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES DROGAS

VEGETALES: ÓRGANOS SUBTERRÁNEOS.

Urginea marítima

Polvo de color blanco

acre

1. Fragmentos de epidermis

2. Células de parénquima

(rafidios) y algún fragmento de vaso espiralado

3. Vasos espiralados o anillados

4. Cristales aciculares de oxalato


RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES DROGAS

ÓRGANOS SUBTERRÁNEOS.

BULBO DE ESCILA

Urginea marítima

Polvo de color blanco pálido, olor débil y sabor mucilaginoso, amargo y

Fragmentos de epidermis

Células de parénquima con cristales aciculares de oxalato cálcico

(rafidios) y algún fragmento de vaso espiralado

Vasos espiralados o anillados

Cristales aciculares de oxalato cálcico aislado y agrupados (rafidios)


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Liliáceas

y sabor mucilaginoso, amargo y

con cristales aciculares de oxalato cálcico

aislado y agrupados (rafidios)

Glycyrhiza glabra

Polvo de color marrón

sabor dulce

1. Abundantes granos de

las más grandes.

2. Abundantes fibras agrupadas, con cristales

cálcico

3. Vasos aislados o en

4. Prismas de oxalato

5. Fragmentos de súber

6. Fragmentos de parénquima


RAIZ DE REGALIZ

hiza glabra Leguminosas

marrón amarillento, con un débil olor característico

Abundantes granos de almidón la mayoría simples, con hilo visible en

Abundantes fibras agrupadas, con cristales prismáticos

Vasos aislados o en pequeños grupos

Prismas de oxalato cálcico aislados

súber con células poligonales.

parénquima


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Leguminosas

característico y

simples, con hilo visible en

prismáticos de oxalato

Rheum palmatum

Polvo de color marrón amarillento o marrón rojizo, olor característico,

sabor astringente y amargo, cruje al masticar entre los dientes por las drusas

de oxalato cálcico

1. Abundantes granos de almidón, simples, esféricos y más

frecuentemente compuestos con 3 o 5 componentes, de forma diferente

y con el hilo central

2. Drusas de oxalato cálcico grandes y aisladas

3. Vasos reticulados aislados o en pequeños grupos

4. Parénquima fundamental con células de paredes engrosadas, con

granos de almidón y oca


RIZOMA DE RUIBARBO

Rheum palmatum Poligonáceas


amargo, cruje al masticar entre los dientes por las drusas

Abundantes granos de almidón, simples, esféricos y más

te compuestos con 3 o 5 componentes, de forma diferente

y con el hilo central

Drusas de oxalato cálcico grandes y aisladas

Vasos reticulados aislados o en pequeños grupos

Parénquima fundamental con células de paredes engrosadas, con

granos de almidón y ocasionalmente drusas de oxalato cálcico


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Poligonáceas


amargo, cruje al masticar entre los dientes por las drusas

Abundantes granos de almidón, simples, esféricos y más

te compuestos con 3 o 5 componentes, de forma diferente

Parénquima fundamental con células de paredes engrosadas, con

sionalmente drusas de oxalato cálcico


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II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE TANINOS

Los taninos son mezclas complejas de sustancias de origen vegetal y

estructura polifenólica, y tienen la propiedad de precipitar los alcaloides y las

proteínas. Son solubles en agua y precipitan con sales de metales pesados.

Se distinguen clásicamente dos grupos de taninos:

� Condensados o catéquicos (polímeros resistentes a la hidrolisis).

� Hidrolizables o pirogálicos (se hidrolizan en medio acido o alcalino

o por vía enzimática).

Las aplicaciones de las drogas con taninos derivan de sus propiedades

astringentes. Por vía interna actúan como antidiarreicos y antisépticos. Por vía

externa impermeabilizan las capas más externas de la piel protegiendo así las

capas subyacentes y también tienen un efecto vasoconstrictor sobre pequeños

vasos. Son hemostáticos y sirven como antídoto en caso de intoxicación con

alcaloides.

PROCESO:

A. EXTRACCIÓN:

Se pesa aproximadamente 1 g de droga en un vaso de precipitado con

unos 50 ml de agua y se hierve durante 5 minutos, así los taninos presentes en

la droga se solubilizan en el agua. Se deja enfriar y se filtra con papel.

B. DETERMINACIÓN CUALITATIVA

El filtrado recogido se reparte en tres porciones sobre las que se realizan

los siguientes ensayos:

1. Se comprueba el sabor astringente

2. Añadimos unas gotas de FeCl3 diluido, obteniéndose un precipitado

que nos indicara la presencia de taninos. La coloración del precipitado nos

puede orientar si los taninos son hidrolizables o condensados. Los hidrolizables

suelen dar un precipitado azul y los condensados un precipitado verde.

3. Reaccion de Stiasny: A la tercera porción de filtrado añadimos unas

gotas de HCl y 1 ml de formaldehido y se hierve unos minutos. La aparición de

un precipitado nos confirmara la presencia de taninos condensados.


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PRÁCTICA 3

I. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES.

CORTEZAS:

� Corteza de Quina

� Corteza de Cáscara Sagrada

� Corteza de Canela

II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE DERIVADOS ANTRAQUINONICOS EN DROGAS

I. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE

VEGETALES. CORTEZAS:

Cinchona succirubra

Polvo de color marrón rojizo, olor

astringente:

1. Abundantes fibras de color amarillento, largas, apareciendo a veces

fragmentadas, aisladas o en grupos de dos tres. Fusiformes, con las

paredes muy engrosadas y lignificadas con estriaciones que se abren al

lumen dándole una forma irregular.

2. Secciones de súber

3. Numerosos fragmentos de súber, con células poligonales en vista

superficial, con paredes moderadamente engrosadas

4. Ocasionalmente granos de

agrupados



VEGETALES. CORTEZAS:

CORTEZA DE QUINA

Cinchona succirubra

Polvo de color marrón rojizo, olor característico y sabor amargo y

Abundantes fibras de color amarillento, largas, apareciendo a veces



en dándole una forma irregular.

Secciones de súber

Numerosos fragmentos de súber, con células poligonales en vista

superficial, con paredes moderadamente engrosadas

Ocasionalmente granos de almidón aislados, simples, esféricos, a


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LAS SIGUIENTES DROGAS

Rubiáceas

característico y sabor amargo y

Abundantes fibras de color amarillento, largas, apareciendo a veces



Numerosos fragmentos de súber, con células poligonales en vista

esféricos, a veces

CORTEZA DE

Rhamnus purshiana

Polvo de color pardo

sabor nauseabundo.

1. Numerosos grupos de fibras con cristales prismáticos de oxalato

cálcico

2. Fibras individuales con un lumen muy estrecho, paredes

lignificadas, con prismas de

3. Grupos de

estructuras diferentes, con

una forma irregul

4. Fragmentos de

marrón rojizo

moderadamente engrosadas

5. Fragmento de

6. Cristales de oxalato


CORTEZA DE CÁSCARA SAGRADA

Rhamnus purshiana Ramnáceas

Polvo de color pardo-amarillento a pardo rojizo, olor característico y

Numerosos grupos de fibras con cristales prismáticos de oxalato

Fibras individuales con un lumen muy estrecho, paredes

lignificadas, con prismas de oxalato cálcico (cristalícelas

Grupos de células pétreas, formados por células

estructuras diferentes, con paredes engrosadas que dan al lumen

una forma irregularmente estrellada

Fragmentos de súber, con células poligonales y con un contenido

rojizo Parénquima compuesto de células

moderadamente engrosadas Conteniendo drusas

Fragmento de parénquima con granos de almidón

Cristales de oxalato cálcico en forma de drusas y prismas aislados


31

CÁSCARA SAGRADA

Ramnáceas

amarillento a pardo rojizo, olor característico y

Numerosos grupos de fibras con cristales prismáticos de oxalato

Fibras individuales con un lumen muy estrecho, paredes

cristalícelas)

células de forma y

paredes engrosadas que dan al lumen

poligonales y con un contenido

células de paredes

en forma de drusas y prismas aislados

Cinnamomum zeylanicum

Polvo de color marrón rojizo, con olor y gusto aromático

1. Abundantes células pétreas aisladas o en pequeños grupos de

forma y tamaño diferentes. Aunque generalmente son más o menos

isodiamétricos, con las paredes engrosadas, estrecho lumen con

numerosas puntuaciones y estriaciones visibles.

2. Abundantes fibras, gen

lignificadas y un estrecho lumen. Ocasionalmente pueden estar

asociadas a células pétreas.

3. Ocasionales granos de almidón, simples y compuestos de 4 ó más

componentes, hilo visible en algunos gránulos.


CORTEZA DE CANELA

Cinnamomum zeylanicum

de color marrón rojizo, con olor y gusto aromático

Abundantes células pétreas aisladas o en pequeños grupos de



numerosas puntuaciones y estriaciones visibles.

Abundantes fibras, generalmente aisladas, con paredes engrosada y


asociadas a células pétreas.

Ocasionales granos de almidón, simples y compuestos de 4 ó más

componentes, hilo visible en algunos gránulos.


32

Lauráceas

Abundantes células pétreas aisladas o en pequeños grupos de



eralmente aisladas, con paredes engrosada y


Ocasionales granos de almidón, simples y compuestos de 4 ó más

II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE

DERIVADOS ANTRAQUINONICOS EN DROGAS

De los derivados antracénicos existentes en la naturaleza, las

antraquinonas son los que presentan mayor interés farmacognóstico. Son

derivados de la dicetona del antraceno, por lo

procedentes de difenoles.

El grado de oxidación de estos compuestos es variable. La forma

antraquinona es la más oxidada, mientras que las antronas y sus formas

tautómeras, antranoles, se designan como formas reducidas. E

muy inestables y generalmente se encuentran en la naturaleza en forma

combinada con azucares formando heterósidos, mientras que las

antraquinonas pueden encontrarse libres.

Cuando las antraquinonas se encuentran en forma de O

hidrolisis acida originan, por una parte geninas que son di, tri o tetrahidroxi

antraquinonas y por otra parte los azucares correspondientes. Las

antraquinonas suelen tener grupos hidroxilos, bien en los carbonos 1 y 8

(actividad laxante) o bien en los


MINACIÓN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE

ANTRAQUINONICOS EN DROGAS



derivados de la dicetona del antraceno, por lo tanto son dicetonas aromáticas

procedentes de difenoles.



tautómeras, antranoles, se designan como formas reducidas. Estas últimas son



antraquinonas pueden encontrarse libres.

Cuando las antraquinonas se encuentran en forma de O-heterósidos,




(actividad laxante) o bien en los carbonos 1 y 2 (actividad colorante).


33

MINACIÓN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DE



tanto son dicetonas aromáticas



stas últimas son



heterósidos, por




carbonos 1 y 2 (actividad colorante).


34

Entre las Drogas más ricas en antraquinonas tenemos: Hoja de Sen,

Hoja de Aloe, Corteza de Frángula, Corteza de Cascara Sagrada, Rizoma de

Ruibarbo etc.

DETERMINACION CUALITATIVA DE ANTRAQUINONAS

Es importante recordar que las antraquinonas libres son solubles en

disolventes apolares (Cloroformo, Diclorometano, Eter etilico…), pero en forma

de heterosidos o en forma de sales alcalinas, son solubles en agua.

1. Determinación de antraquinonas libres: Reacción de Bornträger.

Las geninas antraquinónicas en presencia de soluciones alcalinas dan

coloración roja al formarse la sal correspondiente. Esta reacción solo es valida

para las formas oxidadas (antraquinonas).

Técnica

Sobre los 0.5 g de polvo de droga se añaden 10 ml de diclorometano

(para solubilizar las antraquinonas libres) agitando durante 5 minutos. Filtramos

en un tubo de ensayo y al filtrado añadimos un volumen equivalente de

solución acuosa alcalina (NaOH al 20%). Agitamos, dejamos separar las dos

capas. Si hay antraquinonas libres la capa acuosa se colorea de rojo.

2. Determinación de antraquinonas combinadas en forma de O-

heterósidos.

En primer lugar procedemos a hidrolizar el O-heterosido para obtener la

antraquinona libre y así poderla identificar.

Técnica

Tomamos 1 g de polvo de droga y hervimos con 10 ml de agua (para

solubilizar los heterosidos) durante 5 minutos, al cabo de los cuales se deja

enfriar y se filtra. Al filtrado se le adiciona unas gotas de HCl y se vuelve a

hervir unos minutos con objeto de realizar la hidrolisis para liberar las


35

antraquinonas combinadas. Se deja enfriar y se añade diclorometano. Se

forman dos fases. Agitamos y las antraquinonas libres pasan a la capa de

diclorometano. Añadimos una solución acuosa alcalina, se forma la sal

correspondiente y esta al ser soluble en agua pasa a la capa acuosa y además

se colorea de rojo.

-----------------------

Determinación cuantitativa de antraquinonas

Debido a que las antraquinonas dan una coloración roja en medio

alcalino (solución al 20% de NaOH), podemos determinar la cantidad de

antraquinonas de una droga mediante una técnica colorimétrica. Una vez

pesada la droga y extraídas las antraquinonas (ver pasos 1 y 2), se añade un

volumen determinado de una solución al 20% de NaOH y se mide su

absorbancia en un espectrofotómetro a λ = 515 nm. Se puede utilizar como

patrón emodina a diferentes concentraciones para obtener la correspondiente

curva de calibrado.

Cuestiones

1. ¿En qué forma suelen estar los derivados antracénicos en las drogas?

2. ¿Cuáles son las principales propiedades fisicoquímicas y farmacológicas

de estos compuestos?

3. Estructura general de estos principios activos

4. Cítense ejemplos de drogas antraquinónicas


36

PRÁCTICA 4

I. RECONOCIMIENTO MICROSCÓPICO DE LAS SIGUIENTES

DROGAS VEGETALES. HOJAS:

� Hoja de Digital

� Hoja de Sen

� Hoja de Te

II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE HETERÓSIDOS CARDIOTÓNICOS EN DROGAS

III. DETERMINACIÓN DE ALCALOIDES SUBLIMABLES: CAFEINA

I. RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE

HOJAS:

Digitalis purpurea

Polvo de color verde claro, olor débil y sabor amargo y desagradable

1. Epidermis superior compuesta de células de formas irregulares, con

las paredes ligeramente engrosadas y escasos estomas

2. Epidermis inferior de paredes finas y sinuosas y con abundantes

estomas anomociticos

3. Pelos tectores muy numerosos y pelos glandulosos

tipos.


RECONOCIMENTO MICROSCÓPICO DE DROGAS VEGETALES.

HOJA DE DIGITAL

Digitalis purpurea Escrofulariáceas


Epidermis superior compuesta de células de formas irregulares, con

las paredes ligeramente engrosadas y escasos estomas

Epidermis inferior de paredes finas y sinuosas y con abundantes

estomas anomociticos.

Pelos tectores muy numerosos y pelos glandulosos


37

DROGAS VEGETALES.

Escrofulariáceas


Epidermis superior compuesta de células de formas irregulares, con

las paredes ligeramente engrosadas y escasos estomas.

Epidermis inferior de paredes finas y sinuosas y con abundantes

Pelos tectores muy numerosos y pelos glandulosos de distintos

Cassia angustifolia

Polvo de color verde amarillento

1. Fragmentos de epidermis con células poligonales

2. Pelos típicos: cortos, unicelulares y con un contorno

engrosado

3. Fibras cristalífelas

4. Drusas muy pequeñas

5. Cristales prismáticos de oxalato cálcico


HOJA DE SEN Cassia angustifolia

Polvo de color verde amarillento

Fragmentos de epidermis con células poligonales

Pelos típicos: cortos, unicelulares y con un contorno

engrosado

Fibras cristalífelas

Drusas muy pequeñas

Cristales prismáticos de oxalato cálcico


38

Fabáceas

Pelos típicos: cortos, unicelulares y con un contorno rugoso y

Thea sinensis

Polvo de color negro (te negro), olor aromático y

1. Epidermis de paredes delgadas. La superior carece de estomas

y en la inferior hay abundantes estomas anomociticos.

2. Pelos tectores unicelulares, largos, afilados y curvos

3. Células pétreas de forma típicamente estrelladas

(astroescleritos)

4. Algunos vasos espiralados


HOJA DE TE

Polvo de color negro (te negro), olor aromático y sabor astringente:

Epidermis de paredes delgadas. La superior carece de estomas


Pelos tectores unicelulares, largos, afilados y curvos

Células pétreas de forma típicamente estrelladas

(astroescleritos)

Algunos vasos espiralados


39

Teáceas

sabor astringente:

Epidermis de paredes delgadas. La superior carece de estomas


Pelos tectores unicelulares, largos, afilados y curvos

Células pétreas de forma típicamente estrelladas


40

II. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE HETERÓSIDOS CARDIOTÓNICOS EN DROGAS

Concepto

Los heterósidos cardiotónicos son un grupo de productos naturales de

naturaleza esteroídica capaces de modular el funcionamiento del corazón,

actuando directamente sobre la contractibilidad del músculo cardíaco y sobre la

circulación aurícula-ventrículo.

Localización

Su distribución en la naturaleza está restringida a un número reducido de

familias botánicas, principalmente a las Apocináceas (Strophantus, Nerium,

Thevetia), Escrofulareáceas (Digitalis), Liliáceas (Urginea, Convallaria) y

Ranunculáceas (Helleborus, Adonis).

Propiedades físico-químicas

Los heterósidos cardiotónicos están formados por una parte glucídica

constituida por una o varias unidades de azúcar y una genina (aglicona), la cual

tiene un núcleo esteroídico unido a un anillo lactónico insaturado. El sistema

tetracíclico de la genina posee dos grupos alcoholes en las posiciones 3 y 14.

El anillo de lactona (éster cíclico) está unido a la posición 17 del núcleo

esteroídido y puede ser de 5 o 6 miembros, lo cual permite su clasificación. La

parte glucídica contiene en ocasiones azúcares que son bastante específicos

de estos compuestos, como los 2,6-desoxiazúcares (digitoxosa, cimarosa) o los

6-desoxiazúcares (ramnosa, fructosa, digitalosa). Hay azúcares metilados, con

un OH en forma de éter (cimarosa, digitalosa) y también se encuentran

azúcares acetilados.

Heterósido cardiotónico (digitoxina = digitalina)

Lactona decardenólidos

Lactona debufdienólidos

AZÚCAR

GENINA

Grupo esteroídico

Anillo lactónico


41

La actividad de los hererósidos cardiotónicos está directamente

relacionada con su estructura. Estos compuestos se pueden clasificar en dos

grupos:

• Cardenólidos: poseen una lactona insaturada de 5 miembros en la

posición 17 del núcleo esteroídico. La parte glucídica se une al OH de la

posición 3 y suele contener azúcares como la glucosa y 2,6-

desoxiazúcres como la digitoxosa o la cimarosa.

• Bufadienólidos o bufanólidos: poseen una lactona insaturada de 6

miembros en la posición 17 del núcleo esteroídico. La parte glucídica se

une al OH de la posición 3 y suele contener azúcares como la glucosa y

la ramnosa.

Los heterósidos cardiotónicos son más o menos solubles en agua

dependiendo de la cantidad de grupos OH que presenta la parte glucídica, pero

completamente insolubles en disolventes orgánicos muy apolares. Las geninas

libres son insolubles en agua y solubles en alcohol y cloroformo.

Extracción e identificación

Para la identificación de los heterósidos cardiotónicos hay una serie de

reacciones coloreadas para determinar la identificación de los azúcares, el

anillo esteroídico o del anillo lactónico.

Identificación de los azúcares: hay dos tipos de reacciones, las

generales, destinadas a detectar la presencia de azúcar, y las específicas de

determinados azúcares, como los 2-desoxiazúcares, que responden a la

reacción de Keller-Kiliani. Puede observarse un anillo pardo en la interfase una

coloración azul-verdosa en la capa acética. Los 2-desoxiazúcares también dan

positivo en la reacción con el reactivo xantidrol produciendo una coloración roja

al calentarlo al baño María.

Identificación del núcleo esteroídico: son reacciones inespecíficas, es

decir, son positivas tanto para los cardenólidos como para los bufanólidos.

Destaca la reacción de Liebermann-Burchard, en la que se observan

coloraciones que van del rojo al rosado. También se pueden utilizar reactivos

como el tricloruro de antimonio (Reactivo de Carr-Price).


42

Identificación del anillo lactónico: hay varias reacciones que permiten

detectar los anillos lactónicos de 5 miembros, es decir, los cardenólidos, como

por ejemplo las reacciones de Baljet, Kedde y Raymond. Todos estos reactivos

son derivados nitrados del benceno que, en medio básico, causan la abertura

del anillo de lactona y producen una coloración rojo-violáceo.

Ensayo de Kedde

A. EXTRACCIÓN:

Aproximadamente 1 g de droga se coloca en un tubo de ensayo (el de

mayor diámetro) con unos 20 ml de agua. Se hierve durante 10 minutos, se

deja enfriar y se filtra.

B. DETERMINACIÓN CUALITATIVA

Al extracto obtenido se le añade 0.5 ml del reactivo de Kedde, el cual

se ha preparado previamente mezclando la solución 1 y solución 2 a partes

iguales (Ej: 3 ml de solución 1 + 3 ml de solución 2). Se deja reposar durante

5-10 minutos. Un ensayo positivo es el que se desarrolla con una coloración

marrón oscura (parda) persistente que puede estar precedido por un color rojo-

violáceo.

El reactivo de Kedde se prepara de la siguiente forma:

Solución 1: Ácido 3,5-dinitrobenzóico al 2 % en etanol

Solución 2: Hidróxido de potasio al 5.7% en agua

Se mezclan a partes iguales, en el momento de realizar el ensayo. Dicha

mezcla es la que se adiciona a la alícuota a evaluar.

Cuestiones

¿Cuáles son las principales acciones de los heterósidos cardiotónicos?

¿Qué tipo de lactona tienen los heterósidos cardiotónicos?

¿Con qué tipo de disolventes se extraen los heterósidos cardiotónicos?

III. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALCALOIDES SUBLIMABLES: CAFEINA

La cafeina (1,3,7-

de las bases xánticas o bases púricas. Es un derivado metilado de un

heterociclo constituido por un anillo de pirimidina y otro de imidazol. Este

principio activo es estimulante del sistema ner

Entre las drogas que contienen cafeína podemos citar: semilla de café,

hoja de té, semilla de nuez de cola, hojas de mate, semillas de guaraná.

Las bases xánticas no dan las reacciones típicas de alcaloides. La

cafeína al sublimar cristaliz

microscopio.

Microsublimación

Una pequeña cantidad de droga pulverizada se coloca extendida sobre

la parte central de un porta

de manera que un ángulo d

Se coloca sobre una rejilla metálica y se calienta suavemente a la llama.

Al principio, en el porta superior se condensan gotas de agua, tras lo

cual se va sustituyendo el porta superior por otros. La cafeína cristaliza al

sublimar formando cristales aciculares.


DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALCALOIDES SUBLIMABLES:

-trimetilxantina) es un alcaloide perteneciente al grupo



principio activo es estimulante del sistema nervioso central.




cafeína al sublimar cristaliza en forma de cristales aciculares observables al

Microsublimación


la parte central de un porta-objetos. Se pone otro porta-objeto sobre el anterior

de manera que un ángulo de aproximadamente 30°.




formando cristales aciculares.


43

DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALCALOIDES SUBLIMABLES:

trimetilxantina) es un alcaloide perteneciente al grupo






a en forma de cristales aciculares observables al


objeto sobre el anterior




bases - reconocimiento macroscópico de drogas vegetales

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