azoado creatinina
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AZOADOS
PRESENTA:
GALLARDO VALENCIA URIEL
GARCIA GARCIA IVONNE SARAHI
TÉLLEZ AZPEITIA MA. DE LOS ÁNGELES B.
QFB's: URIEL G.V.- SARAHI G.G.- ANGELES T.A.
¿QUÉ SON?
Azoar – nitrogenar
Azoado = compuesto nitrogenado
Existen más de 15 compuestos nitrogenados no proteicos (NPN)
Se encuentran como consecuencia de una insuficiencia renal.
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ÁCIDO ÚRICO
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¿QUÉ ES?
En el ser humano, el ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas.
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nucleótidos monofosfato de
guanina, inosina y adenina
(GMP, IMP y AMP).
Liberación de los ácidos
nucleicos
adenina, guanina,
hipoxantinay xantina
ácido úrico
Formación de las bases purínicas
sufren un metabolismo oxidativo
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video
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El adulto medio tiene un contenido total aproximado de 1.2 gr de acido úrico en el cuerpo reserva miscible.
Aproximadamente, un 60% de esta reserva es respuesta diaria por formación y excreción.
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ELIMINACIÓN DEL ÁCIDO ÚRICO
Se excreta aproximadamente de o.4 a 0.8 gr de ácido úrico por la orina cada 24hrs.
Dieta baja en purinas se excreta de entre 275 - 600mg de ác. úrico
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El 75% del ácido úrico formado
riñón.
25% restante aparato digestivo.
Las bacterias intestinales degradan el ácido úrico a alantoína y CO2, de tal forma que
la cantidad de ácido úrico en las heces es
indetectable.
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ETAPA PRE-ANALITICA
Es recomendable que 3 días antes de la determinación se abstenga de comer:
Evitar el estrés y mantenerse en reposo.
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ETAPA PRE-ANALITICA
TÉCNICAS ANALITICAS
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Método espectrofotométricoIncorpora una oxidación alcalina directamente sobre un
filtrado de suero libre de proteínas por precipitación previa con ác. tungstico.
El agente oxidante empleado es ác. fosfotungstico en presencia de cianuro de sodio en un buffer con urea.
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Método enzimático – colorimétrico FUNDAMENTO
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que en presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosáceo.
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MUESTRAS.
Suero, plasma.
El ácido úrico es estable 7 días a temperatura de 2 – 8 ºC
Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro
no interfieren
Orina
Diluir la orina 1/10 con agua destilada antes del ensayo.
El ácido úrico es estable 4 días a temperatura ambiente si se ajusta
el pH a > 8 con NaOH. No refrigerar.
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PROCEDIMIENTO
1. Colocar el reactivo a temperatura ambiente.
2. Pipetear en tubos de ensayo: (Nota 1)
3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25ºC) o durante 5 minutos a 37ºC.
4. Leer la absorbancia (A) del Patrón y de la Muestra a 520 nm frente al Blanco. El color es estable durante al menos 30 minutos.
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COLOR DE LA MUESTRA
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CÁLCULOS
La concentración de ácido úrico en la muestra se calcula a partir de la siguiente fórmula general:
ETAPA POS-ANALITICA
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INTERVALO DE REFERENCIA
Suero o plasma
Orina
Hombres 3.4 - 7 mg/dL
Mujeres 2.4 - 5 mg/dL
Dieta promedio 250 - 750 mg/24 h
Dieta pobre en purinas 450 mg/24 h
Dieta rica en purinas 1 g/24 h
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GOTA
La hiperuricemia es el nombre que recibe el hecho de tener el nivel de ácido úrico en sangre demasiado alto.
Esta sustancia química es segregada un 70% por nuestro cuerpo y aportada por los alimentos que ingerimos en un 30%.
El exceso de ácido úrico se convierte en cristales que se acumular en las articulaciones y generan dolor.
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La hiperuricemia o los niveles elevados de ácido úrico puede producirse sin síntomas evidentes, es decir, puede tratarse de una afección asintomática. En muchas ocasiones, las personas que la padecen no se dan cuenta hasta que el médico observa en los análisis de sangre que el nivel de ácido úrico supera los valores normales.
En la mayoría de ocasiones, el nivel de ácido úrico excesivo da lugar a la formación de cristales en forma de aguja que se depositan en una articulación o varias de ellas, generando una inflamación.
-dolor en el dedo gordo del pie o la rodilla,
Otros de los síntomas que pueden evidenciar un exceso de ácido úrico en sangre son:-fiebre-escalofríos-taquicardia
Asimismo, en algunos casos, también se pueden dar dificultades al orinar o problemas renales, a causa de la formación de cálculos.
CreatininaPRESENTA: URIEL GALLARDO VALENCIA
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CREATININA
La creatina proviene del metabolismo muscular.
Proporciona un mecanismo de almacenamiento de fosfatos de alta energía.
Identificada en 1832 por el Químico Michel Eugéne Chevreul y la denomino como Kreas que significa Carne.La creatina sirve para el funcionamiento del músculo, aportándole energía y fuerza.
Mejora el rendimiento físico y aumenta la masa muscular
Se forma en: Riñones e Hígado
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• α-metil-guanido-ácetico • (C4H9N302)• PM= 131.133 g/mol• Hidrosoluble
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La creatina viaja a sangre distribuida por células musculares la cual contienen el 98% de creatina
Se forma de 1.5 a 1.6 % de creatina total cada 24hrs.
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Creatinina
Molécula de desecho que se genera a partir del metabolismo muscular.
Los riñones filtran la mayoría de la creatinina eliminándose en orina
Su concentración en sangre indica el estado funcional del riñón, si no funciona bien, no son capaces de eliminarla por orina, por tanto, sirve como un indicador de insuficiencia renal.
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- C4H7N30- 113.12 Dalton
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PRE – ANALITICO: PACIENTE
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MUESTRA
Toma de muestra en tubo: amarillo o rojo.
Que sea sangre venosa
Orina de 24hrs
No provocar hemolisis durante la extracción de la muestra y en el traslado
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Los valores aumentan después de:
Necrosis músculo-esquelético
Traumatismo
Distrofia muscular
Esclerosis lateral amiotrofica
Poliomielitis
Dermatomiositis
Hipertiroidismo
Acidosis diabética
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ANALÍTICA - Reacción de Jaffé
En 1986 Jaffé descubrió un método para la determinación de creatinina, haciendo reaccionar un filtrado libre de proteínas con acido pícrico en una solución alcalina.
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El ensayo se basa en un método colorimétrico cinético, en la reacción de la creatinina con picrato de sodio alcalino formando un complejo de color rojo llamado Janowsky.
O NH
NH
N
CH3
NO2
O
NO2ÁC. PÍCRICOJanowsky
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PROCEDIMIENTOLongitud de onda…… 492 nmTemperatura. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37ºC / 15-25ºC
1.Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
2. Reactivo de trabajo (RT): Mezclar volúmenes iguales de ácido pícrico + NaOH.
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BLANCO ESTÁDAR MUESTRA
RT - 1 mL. 1 Ml.
AGUA 1 mL. - -
ESTANDAR - 100 μL. -
MUESTRA - - 100 μL.
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Mezclar y empezar cronómetro.
Leer la absorbancia (ST) después de 30 segundos y después de 90 segundos (M)
Calcule: mg/dL = M / ST x nN= 2mg/dL = 176.8μmol/L.
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DEPURACIÓN DE CREATININA
Con orina de 24 hrs, se compara el nivel de creatinina en orina con sangre.
Estabilidad de creatinina: 24 horas a 2 – 8 ºC.
Diluir la muestra 1:50 con agua destilada.
Multiplicar el resultado obtenido por 50
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La creatinina reacciona con picrato de sodio alcalino formando un complejo de color rojo llamado Janowsky.
O NHNH
N
CH3
NO2
O
NO2ÁC. PÍCRICOJanowsky
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PROCEDIMIENTOTomar una muestra sanguínea y orina
Medir la estatura y el peso del paciente y determinar su superficie corporal
Medir el volumen total de la orina recolectada
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Realizar la dilución 1:50 de la orina con agua destilada
Realizar lo siguiente en tubos
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BLANCO ESTÁDAR SUERO ORINA DILUIDA
RT - 1 mL. 1 mL. 1mL.
AGUA 1 mL. - -
ESTANDAR - 100 μL. -
MUESTRA - - 100 μL.
ORINA - - - 100 μL.
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Mezclar y leer la densidad óptica 30 seg.
Calcule: mg/dL = M / ST x nN= 2mg/Dl = 176.8μmol/L.
Calcule:mL/min=UV/P X 1.73/SCU= Cr. En orina (mg/dL.)V= vol. Urinario 24h (mL/min)P= Cr en suero1.73= S.C.ESC= S.C.P
Superfice Corporal:Estatura(0.725) x Peso(0.425) x 71.84
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POS-ANALITICAOrina:
10 - 20 mg/Kg/24h 88– 177 mol/Kg/24h
– Hombres8 – 18 mg/Kg/24h
71– 177 mol/Kg/24h – Mujeres
Suero:0,7 - 1,4 mg/dL
61,8 – 123,7 mol/L –
Hombres0,6 - 1,1 mg/dL
53,0 – 97,2 mol/L –
Mujeres
Plasma:0.2 a 0.6 mg/dL –
Hombres0.6 a 1 mg/dL – Mujeres
1000 – 2000 mg/24h Hombres.600 – 1500 mg/24h Mujeres
Hombres: 105 + 20 ml/min.Mujeres: 95 + 20 ml/min.
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RELACIÓN CLÍNICOPATOLÓGICO
Insuficiencia cardiaca congestiva
Hipovolemia por deshidratación
Nefropatía
Cálculos uretrales, Cálculos vesiculares
Hiperplasia prostática
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Embarazo
Ancianos
Dieta hipoproteicas
Insuficiencia hepática
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Síndrome de deficiencia de creatinina cerebral.
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CRTR (Proteina Trasportador
ligada al Cromosoma X) –
Gen SLC6A8 Cromosoma Xq28
GAMT – Cromosoma 19p13.3 (guanidino
acetato metiltransf
erasa)
AGAT – Cromosoma
15q15.3 (argininaglici
na amidinotrans
ferasa)
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Beber mas de 6 vasos de agua al día (eliminación de Cr)
Evitar alimentos salados
Evitar alimentos ricos en proteínas
Comer frutas, vegetales, granos integrales, frijoles (grasas y azucares esenciales, sin agregar tensión al riñón)
Conclusión
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UREA
¿QUÉ ES?
Compuesto químico cristalino e incoloro descubierto por Friedrich Wöhler.
ABUNDANTE MENOR CANTIDAD
OrinaMateria fecal
El HígadoLa sangreLa linfaLos fluidos
serosos
Procede de la degradación de los diversos compuestos con nitrógeno.
La urea es hidrolizada enzimáticamente a dióxido de carbono y amoníaco por la enzima ureasa.
ESTRUCTURA QUÍMICA.
Carbamida
Carbonildiamida
Ácido carbamídico.
Sustancia nitrogenada.
Medio de eliminación del amoníaco.
Producto de la degradación de las proteínas por el hígado.
Filtrada por los riñones, la urea luego es eliminada por la orina.
Puede ser considerada como un residuo del organismo.
ELIMINACIÓN DE LA UREA.
CICLO DE LA UREAVIDEO
REACCIONES
PASOS REACTANTES PRODUCTOSCATALIZADO
PORLOCALIZACIÓN
1 2ATP + HCO3− + NH4
+ carbamoil fosfato + 2ADP + Pi
CPS1 mitocondria
2carbamoil fosfato
+ ornitinacitrulina + Pi OTC mitocondria
3citrulina + aspartato + AT
Pargininosuccinato + AMP
+ PPiASS citosol
4 argininosuccinato Arg + fumarato ASL citosol
5 Arg + H2O ornitina + urea ARG1 citosol
PRE-ANALITICA.
EN SANGRE.
No se precisa estar en ayunas.
Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clínica, hospital).
Localizar una vena apropiada y en general se utilizan las venas situadas en la flexión del codo.
Limpiar la zona del pinchazo con un antiséptico, mediante palpación localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja.
Cuando la sangre fluya por la aguja el químico realizará una aspiración.
Se le indicará que flexione el brazo y mantenga la zona presionada.
EN ORINA.
Se realiza principalmente para:
Determinar que tanta proteína consume una persona.
Evaluar la función renal.
Determinar el equilibrio proteico de una persona.
La cantidad de proteína en la dieta necesaria para pacientes gravemente enfermos.
No se requiere ninguna preparación especial para este examen, pues implica únicamente la micción normal y no produce ninguna molestia.
La urea ha sido determinada cuantitativamente.
Forma directa: análisis químico.
Forma indirecta: conversión de amoniaco y determinación posterior de este último.
ANALITICA.
En la mayoría de los métodos históricos, el nitrógeno, se mide después que las muestras han sido sometidas a 125°C en la autoclave o a la acción de la enzima ureasa.
2 H2O + (NH2)2CO ureasa (125°C) (NH4)2 CO3 2 NH4+ + CO3
=
Los valores de BUN (mg de urea en sangre) pueden ser convertidos en concentraciones de urea de la siguiente manera:
1. Peso atómico del nitrógeno = 14g/mol
Peso molecular de la urea = 60.06g/mol
2. La urea contiene dos átomos de nitrógeno por molécula.
3. El nitrógeno de urea (urea N) constituye el 46.6% de su peso (28 dividido por 60.06) = 0.466
4. En consecuencia:
10mg/L de BUN dividido por 0.466 =
21.46mg/L de urea = 0.36mmol/L de urea
ó
mg de urea N/L x 2.146 = mg de urea/L
mg de urea N/L x 0.036 = mmol de urea/L
REACCIÓN DE BERTHELOT.
Análisis cuantitativo, y espectrofotométrico.
Formación de un producto coloreado.
La reacción entre el amoniaco y el fenol-NaOCl producía un complejo de color azul (indofenol) con un máximo de absorción en 630nm.
Se realizaba a menudo con nitroferricianuro de sodio (nitroprusiato) como catalizador.
Ambas reacciones colorimétricas pueden realizarse directamente con sangre o suero o muestras de orina.
Usualmente se diluían de 10 – 15 veces antes de su análisis dado que la concentración de la urea es muy elevada.
Orina: contiene 1,000 veces más amoniaco que el suero, por lo tanto debe hacerse una corrección en los niveles de amoniaco medidos.
En las muestras de orina se determinaba la cantidad de amoniaco antes del tratamiento con ureasa y después de él, para descontar el nivel de amoniaco endógeno.
REACCIÓN ENZIMÁTICO ACOPLADOUreasa/glutamato deshidrogenasa (GLDH).
Análisis cuantitativo, cinético y espectrofotométrico.
Es una reacción rápida y específica.
Determina la concentración de urea en suero u orina, por medio de la medición de amoniaco formado en la reacción con la ureasa.
Sistema enzimático acoplado.
Reacción NAD/NADH indicadora.
Estas Rx se miden a 340nm.
Otras enzimas endógenas (GLDH) pueden competir para oxidar el NADH.
Esto disminuirá la exactitud del sistema enzimático acoplado.
El amoniaco exógeno proveniente de los reactivos también pueden dar un resultados elevados erróneos.
El análisis cinético puede ser empleado para medir la urea en orina cuando los niveles de amoniaco endógeno son normales.
Este último es consumido rápidamente durante los segundos iniciales de la reacción.
Las variaciones posteriores en la A340 están causadas por el amoniaco generado en la reacción de la ureasa con la urea.
PRUEBA DE UREA
Determinación y cuantificación en orina de 24 horas.
En suero sanguíneo.
Reacción cinética enzimática.
Longitud de onda 340 nm.
Temperatura 37 °C.
Estándar de 50 mg/dL.
PROCEDIMIENTO
1. Mezclar 4 volúmenes de reactivo 1 con un volumen de reactivo 2 (NADH).
2. Colocar 1 mL del reactivo preparado (paso 1), ponerlo a 37 °C en la celda por 5 min.
3. Agregar 10 mL de la muestra.
4. Mezclar y realizar la lectura de la variación de la densidad óptica entre 30 y 90 segundos.
5. Posteriormente registrar la densidad óptica y realizar el cálculo para obtener la concentración de urea.
IMPORTANTE. Cuidar la temperatura y el tiempo, ya que pueden intervenir en los resultados.
CálculosEstándar a 340 nm.
LECTURA ABSORBANCIA TIEMPO (seg)
PRIMERA 0.XXX 30
SEGUNDA 0.XXX 90
LECTURA ABSORBANCIA TIEMPO (seg)
PRIMERA 0.XXX 30
SEGUNDA 0.XXX 90
Problema a 340 nm.
Δ A Estándar = 0.XXX – 0.XXX = 0.XXX Abs
Δ A Problema = 0.XXX – 0.XXX = 0.XXX Abs
Δ A Problema / Δ A Estándar x n = mg/dL
n = concentración estándar = 50 mg/dL
VALORES DE REFERENCIA.
Suero y plasma= 15-45 mg/dL
Orina = 26 – 43 g/24 h
POST-ANALITICA.VALORES DE REFERENCIA.
Normal = 19 – 36 mg/dL de urea
(corresponde a 9 – 17 mg/dL de nitrógeno ureico)
Bibliografía.
Ángel Mejia, G., & Ángel Ramelli, M. (1996). INTERPRETACIÓN CLÍNICA DEL LABORATORIO. Colombia: Editorial Medica Panamericana.
UREMIA.
Trastorno clínico.
Disminución de la función excretora renal.
Están comprometidas la función glomerular y tubular.
Retención en los productos nitrogenados, por acentuada disminución de las nefrones funcionales con disminución de la filtración.
Sintomatología variada.
Alteraciones como:ORINA.
Color pálido.
Densidad alrededor de 1.010 o inferior.
Proteinuria variable y ausente en la esclerosis renal avanzada.
Sedimento: característicos los cilindros anchos de la insuficiencia renal crónica, hialinos, céreos y granulosos.
Eritrocitos y leucocitos abundantes.
CUADRO HEMÁTICO.
Anemia, manifestación general del cuadro clínico.
Está directamente relacionada con la causalidad de la enfermedad.
Severidad de los síntomas y duración de la enfermedad.
Dermatitis urémica.
ELECTROLITOS.Excreción de sodio elevada, debido al mayor flujo por el riñón y al aumento residual de la sobrecarga de solutos.
Disminuye la filtración glomerular.
El sodio está disminuido en niveles séricos y el potasio está aumentado
BALANCE ELECTROLÍTICO.
Al disminuir la filtración glomerular.
Pocos iones buffer fosfatos y aniones del tipo de los sulfatos, en los túbulos.
Origen de trastornos de absorción y eliminación.
En consecuencia aparece una acidosis de tipo metabólico o acidosis de tipo hiperclorémico con disminución del bicarbonato, de la reserva alcalina con baja del pH en los casos descompensados.
BIOQUÍMICA SANGUÍNEA.
Elevación de la urea con intensidad, directamente proporcional al grado de lesión glomerular.
Igual que el ácido úrico y la creatinina.
Marca la elevación progresiva de la enfermedad que es irreversible.
Cifras superiores a 3 mg/dL indican desenlace en poco tiempo.
Hay hipoproteinemia que a veces se encuentra disimulada por hemoconcentración cuando la eliminación urinaria es muy baja.
QFB's: URIEL G.V.- SARAHI G.G.- ANGELES T.A.
BIBLIOGRAFÍA
Diagnostico y Tratamiento Clínico, Jhon Bernard Henry, 9ª Edición.
Neurología Pediátrica, By Fejerman, Fernández Álvarez, Natalio Fejerman, pág.. 498.
Interpretación Clínica del Laboratorio, Gilberto Ángel M, Mauricio Ángel R, 5ª Edición.
Química Clínica Métodos, Pesce, Kaplan.
http://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS13-I_CREATININA_2014.pdf
www.elsevier.es/es-revista-medicina-clinica-2-articulo-deficiencia-cerebral-creatina-primeros-pacientes-13145031