antioxidantes 2008 dra.ibanez

CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE

PLANTAS MEDICINALES

Dra. Lucy A. Ibáñez,Mg,DrLima-Perú

2008

CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE

PLANTAS MEDICINALES

Dra. Lucy A. Ibáñez,Mg,DrLima-Perú

2008

USAL

La Investigación etnobotánica y etnofarmacológica de las especies vegetales para su posible utilizaciòn fitoterapèutica, exige un delicado protocolo de trabajo que incluye toda la escala de pruebas y ensayos que van desde la selección de una determinada planta de acuerdo a ciertos criterios hasta una exhaustiva gama de ensayos farmacològicos, químicos fitoquímicos, toxicológicos y clínicos.

Manual de Técnicas Experimentales . Proyecto X.10 . CYTED

La Investigación etnobotánica y etnofarmacológica de las especies vegetales para su posible utilizaciòn fitoterapèutica, exige un delicado protocolo de trabajo que incluye toda la escala de pruebas y ensayos que van desde la selección de una determinada planta de acuerdo a ciertos criterios hasta una exhaustiva gama de ensayos farmacològicos, químicos fitoquímicos, toxicológicos y clínicos.


INVESTIGACION EN PLANTAS MEDICINALES INVESTIGACION EN PLANTAS MEDICINALES

ESTUDIOS PRE-CLÍNICOS ESTUDIOS CLINICOSESTUDIOS PRE-CLÍNICOS ESTUDIOS CLINICOS

ESTUDIOSTOXICOLÓGICOS

AUTORIDAD

REGULADORA

ESTUDIOSFARMACÓLOGICOS

ESTUDIOSQUIMICO-FARMACÉUTICOS

ESTUDIOSETNOBÓTANICOS,

AGRONÓMICOS

ESTUDIOSFASE I

ESTUDIOSFASE II

ESTUDIOSFASE III

ESTUDIOSFASE IV

AUTORIDAD REGULADORA

¿Ensayos Clínicos en Plantas Medicinales?¿Ensayos Clínicos en Plantas Medicinales? ¿Ensayos Clínicos en Plantas Medicinales?¿Ensayos Clínicos en Plantas Medicinales?

FASES DE ESTUDIO DE UN NUEVO FASES DE ESTUDIO DE UN NUEVO MEDICAMENTOMEDICAMENTO

Selección y estandarización

del material activo

Estudos pre-clínicos

FASE I

Estudos pre-clínicos

FASE II

Test clínicos

FASE II

Test clínicos

FASE I

Test clínicos

FASE III

Test clínicos

FASE IV

• Eficacia• Efectos colaterales• Toxicologia aguda• Doses repetidas

• Farmacocinética• Toxicologia especial

VOLUNTÁRIOS• limites de dosis• farmacocinética• efectos inesperados

PACIENTES• eficacia

MULTICÉNTRICO• efectos colaterales• interacciones• ventajas• limitaciones

USO GENERAL• vigilancia médica

FARMACOLOGIA TOXICOLOGIA ENSAYOS FARMACOLOGIA TOXICOLOGIA ENSAYOS CLÍNICOSCLÍNICOS((FARMACOLOGOS;,QUIMICOS FARMACEUTICOS; MEDICOS; ETC)FARMACOLOGOS;,QUIMICOS FARMACEUTICOS; MEDICOS; ETC)

QUÍMICA QUÍMICA ORGÁNICAORGÁNICA

(QUIMICOS; INGENIEROS (QUIMICOS; INGENIEROS QUÎMICOS, QUÎMICOS,

FARMACÉUTICOS, ETC)FARMACÉUTICOS, ETC)

QUÍMICA QUÍMICA ORGÁNICAORGÁNICA

(QUIMICOS; INGENIEROS (QUIMICOS; INGENIEROS QUÎMICOS, QUÎMICOS,

FARMACÉUTICOS, ETC)FARMACÉUTICOS, ETC)

QUÍMICA

COMBINATORIAL

QUÍMICA

COMBINATORIAL

FARMACOLOGÍA FARMACOLOGÍA MOLECULARMOLECULAR

FARMACOLOGÍA FARMACOLOGÍA MOLECULARMOLECULAR

FITOMEDICAMENTOSFITOMEDICAMENTOS

ETNOFARMACOLOGIA ETNOFARMACOLOGIA (FARMACÓLOGOS; ANTROPÓLOGOS;FARMACÉUTICOS; (FARMACÓLOGOS; ANTROPÓLOGOS;FARMACÉUTICOS;

BIOLOGOS;MEDICOS, ETC).BIOLOGOS;MEDICOS, ETC).

ETNOFARMACOLOGIA ETNOFARMACOLOGIA (FARMACÓLOGOS; ANTROPÓLOGOS;FARMACÉUTICOS; (FARMACÓLOGOS; ANTROPÓLOGOS;FARMACÉUTICOS;

BIOLOGOS;MEDICOS, ETC).BIOLOGOS;MEDICOS, ETC).

BOTÁNICABOTÁNICA(BOTANICOS, TAXONOMOS FARMACEUTICOS; BIOLOGOS, ETC)(BOTANICOS, TAXONOMOS FARMACEUTICOS; BIOLOGOS, ETC)

BOTÁNICABOTÁNICA(BOTANICOS, TAXONOMOS FARMACEUTICOS; BIOLOGOS, ETC)(BOTANICOS, TAXONOMOS FARMACEUTICOS; BIOLOGOS, ETC)

PLANTAPLANTA

SÍNTESISSÍNTESISSÍNTESISSÍNTESIS

PROCESO DE VALIDACIÓNPROCESO DE VALIDACIÓN

INVESTIGACION EN PLANTAS MEDICINALES(EQUIPO MULTIDISCIPLINARIO)

COMERCIALIZACION, EXPORTACIONCOMERCIALIZACION, EXPORTACION

(EMPRESARIOS, EXPORTADORES, (EMPRESARIOS, EXPORTADORES,

COMUNIDADES ANDINAS, AMAZONICAS, ETC)COMUNIDADES ANDINAS, AMAZONICAS, ETC)

CONTROL DE CALIDADCONTROL DE CALIDAD

CULTIVOCULTIVO ((ING. FORESTAL, ING. ING. FORESTAL, ING.

AGRONOMO, ETC)AGRONOMO, ETC)

CULTIVOCULTIVO ((ING. FORESTAL, ING. ING. FORESTAL, ING.

AGRONOMO, ETC)AGRONOMO, ETC)

PATENTESPATENTESPATENTESPATENTES

VALIDACIÓN DE VALIDACIÓN DE PLANTAS MEDICINALESPLANTAS MEDICINALES

PLANTAPLANTA

Perfil farmacológicoAnálisis toxicológico

EFICACIA SEGURIDAD

PLANTA MEDICINALPLANTA MEDICINAL

NUEVOS NUEVOS MEDICAMENTOSMEDICAMENTOS

Extracto total de la plantaFracciones purificadas

Principios activos aislados eidentificados

Síntesis química de derivados activos

Test in vitro,Test in vitro,

preclínicos preclínicos

Y clínicosY clínicos

Numerosos estudios en nutrición Numerosos estudios en nutrición humana demuestran una estrecha humana demuestran una estrecha correlación entre el consumo de frutas correlación entre el consumo de frutas y verduras y la menor incidencia de y verduras y la menor incidencia de enfermedades crónico degenerativas enfermedades crónico degenerativas debido a su bajo contenido en calorías, debido a su bajo contenido en calorías, colesterol y a la presencia de colesterol y a la presencia de vitaminas, fibras, antioxidantes vitaminas, fibras, antioxidantes naturales y minerales. naturales y minerales.

Así mismo el estrés oxidativo ha sido Así mismo el estrés oxidativo ha sido asociado a la patogénesis de muchas asociado a la patogénesis de muchas enfermedades humanas, como enfermedades humanas, como arterioesclerosis, artritis, demencia, arterioesclerosis, artritis, demencia, cáncer, etc; es por ello que el uso de cáncer, etc; es por ello que el uso de antioxidantes en farmacología es antioxidantes en farmacología es estudiado de forma intensiva, estudiado de forma intensiva, particularmente en el tratamiento de particularmente en el tratamiento de accidentes cerebrovasculares y accidentes cerebrovasculares y enfermedades neurodegenerativas. enfermedades neurodegenerativas.

Numerosos estudios en nutrición Numerosos estudios en nutrición humana demuestran una estrecha humana demuestran una estrecha correlación entre el consumo de frutas correlación entre el consumo de frutas y verduras y la menor incidencia de y verduras y la menor incidencia de enfermedades crónico degenerativas enfermedades crónico degenerativas debido a su bajo contenido en calorías, debido a su bajo contenido en calorías, colesterol y a la presencia de colesterol y a la presencia de vitaminas, fibras, antioxidantes vitaminas, fibras, antioxidantes naturales y minerales. naturales y minerales.

Así mismo el estrés oxidativo ha sido Así mismo el estrés oxidativo ha sido asociado a la patogénesis de muchas asociado a la patogénesis de muchas enfermedades humanas, como enfermedades humanas, como arterioesclerosis, artritis, demencia, arterioesclerosis, artritis, demencia, cáncer, etc; es por ello que el uso de cáncer, etc; es por ello que el uso de antioxidantes en farmacología es antioxidantes en farmacología es estudiado de forma intensiva, estudiado de forma intensiva, particularmente en el tratamiento de particularmente en el tratamiento de accidentes cerebrovasculares y accidentes cerebrovasculares y enfermedades neurodegenerativas. enfermedades neurodegenerativas.

INCIDENCIA DE ENFERMEDADES DE CRONICO DEGENERATIVAS


El oxígeno es esencial para la mayoría de los organismos que viven bajo condiciones aerobicas. Este es utilizado por la célula , la cual posee diversos sistemas que producen radicales libres de oxígeno(RLO).

Frente al poder agresivo de estos RLO, la célula posee un arsenal defensivo de mecanismos neutralizantes formado por enzimas y compuestos que evitan la formación incontrolada y excesiva de RLO y producen la neutralización, eliminación y bloqueo de su actividad en cadena

El oxígeno es esencial para la mayoría de los organismos que viven bajo condiciones aerobicas. Este es utilizado por la célula , la cual posee diversos sistemas que producen radicales libres de oxígeno(RLO).

Frente al poder agresivo de estos RLO, la célula posee un arsenal defensivo de mecanismos neutralizantes formado por enzimas y compuestos que evitan la formación incontrolada y excesiva de RLO y producen la neutralización, eliminación y bloqueo de su actividad en cadena



La enzima superóxido dismutasa La enzima superóxido dismutasa remueve el anión superóxido remueve el anión superóxido (O2º) convirtiéndolo en H2O2, el (O2º) convirtiéndolo en H2O2, el cual es transformado por la cual es transformado por la enzimas catalasa y Glutatión enzimas catalasa y Glutatión peroxidasa en agua (H2O)peroxidasa en agua (H2O)

. .

Así mismo también posee Así mismo también posee moléculas que remueven los moléculas que remueven los radicales libres por reacción radicales libres por reacción directa (no catalítica) tales como: directa (no catalítica) tales como: el glutation reducido, los el glutation reducido, los tocoferoles (vitamina E) y el ácido tocoferoles (vitamina E) y el ácido ascórbico (Vitamina C). ascórbico (Vitamina C).

La enzima superóxido dismutasa La enzima superóxido dismutasa remueve el anión superóxido remueve el anión superóxido (O2º) convirtiéndolo en H2O2, el (O2º) convirtiéndolo en H2O2, el cual es transformado por la cual es transformado por la enzimas catalasa y Glutatión enzimas catalasa y Glutatión peroxidasa en agua (H2O)peroxidasa en agua (H2O)

. .

Así mismo también posee Así mismo también posee moléculas que remueven los moléculas que remueven los radicales libres por reacción radicales libres por reacción directa (no catalítica) tales como: directa (no catalítica) tales como: el glutation reducido, los el glutation reducido, los tocoferoles (vitamina E) y el ácido tocoferoles (vitamina E) y el ácido ascórbico (Vitamina C). ascórbico (Vitamina C).



Así mientras que niveles moderados de RLO Así mientras que niveles moderados de RLO constituyen y modulan vías fisiológicas de funciones constituyen y modulan vías fisiológicas de funciones celulares, incluyendo señalización en cascadas y el celulares, incluyendo señalización en cascadas y el control de la expresión génica transcripcional y post-control de la expresión génica transcripcional y post-transcripcional, el estrés oxidativo severo induce transcripcional, el estrés oxidativo severo induce daño celular que puede conducir a apoptosis o a la daño celular que puede conducir a apoptosis o a la necrosis. necrosis.

Por tanto el estrés oxidativo se deriva de la falta de Por tanto el estrés oxidativo se deriva de la falta de equilibrio entre los mecanismos de defensa equilibrio entre los mecanismos de defensa antioxidante y los fenómenos favorecederos de la antioxidante y los fenómenos favorecederos de la oxidación.oxidación.

Dos fenómenos muy importantes en nuestra vida son Dos fenómenos muy importantes en nuestra vida son procesos oxidativos: la combustión y la respiración. procesos oxidativos: la combustión y la respiración. Ambos se asemejan, ya que son procesos a través Ambos se asemejan, ya que son procesos a través de los cuales sustratos combustibles se transforman de los cuales sustratos combustibles se transforman en energía consumiéndose oxígeno y liberándose en energía consumiéndose oxígeno y liberándose agua y dióxido de carbono.agua y dióxido de carbono.

Así, la combustión, es un proceso oxidativo en el cual Así, la combustión, es un proceso oxidativo en el cual un combustible se transforma en energía en forma un combustible se transforma en energía en forma de luz y calor, produciéndose además dióxido de de luz y calor, produciéndose además dióxido de carbono (CO2) y agua. Pero si el proceso no es carbono (CO2) y agua. Pero si el proceso no es perfecto, la oxidación no es total y produce perfecto, la oxidación no es total y produce contaminantes, como el monóxido de carbono.contaminantes, como el monóxido de carbono.

PROCESOS OXIDATIVOS

En la respiración ocurre lo mismo: La glucosa y En la respiración ocurre lo mismo: La glucosa y ácidos grasos - se transforman en energía. Esta ácidos grasos - se transforman en energía. Esta transformación se realiza al interior de la célula, en la transformación se realiza al interior de la célula, en la mitocondria y exactamente, se produce ATP, la mitocondria y exactamente, se produce ATP, la molécula clave para la síntesis de los componentes molécula clave para la síntesis de los componentes celulares y para la mayoría de los procesos celulares, celulares y para la mayoría de los procesos celulares, y que se conoce también como la "moneda" y que se conoce también como la "moneda" energética de la célula. energética de la célula.

En la respiración se consume oxígeno, se genera En la respiración se consume oxígeno, se genera ATP, y quedan como residuos dióxido de carbono y ATP, y quedan como residuos dióxido de carbono y agua. Pero, este proceso no es perfecto ya que se agua. Pero, este proceso no es perfecto ya que se producen también otras moléculas contaminantes, las producen también otras moléculas contaminantes, las Especies Reactivas del Oxígeno (EROs)Especies Reactivas del Oxígeno (EROs).. Entre el 1 Entre el 1 y 3 % del oxígeno que respiran nuestras células al y 3 % del oxígeno que respiran nuestras células al oxidar sus sustratos se transforma en EROs, que, o oxidar sus sustratos se transforma en EROs, que, o bien son radicales libres, o llevan a su formación.bien son radicales libres, o llevan a su formación.

Por causas ambientales (radiación), así como por la Por causas ambientales (radiación), así como por la ingesta de algún contaminante o incluso como ingesta de algún contaminante o incluso como consecuencia de nuestro propio metabolismo, consecuencia de nuestro propio metabolismo, surgen algunas moléculas que nos pueden surgen algunas moléculas que nos pueden provocar daño. provocar daño.

A estas se les conoce como especies oxigeno A estas se les conoce como especies oxigeno reactivas (ROS), que se asocian a enfermedades reactivas (ROS), que se asocian a enfermedades como cáncer, problemas cardiacos o al natural como cáncer, problemas cardiacos o al natural envejecimiento humano. envejecimiento humano.

Entre los problemas que originan figuran: Entre los problemas que originan figuran: destrucción de paredes celulares, inactivación de destrucción de paredes celulares, inactivación de enzimas, debilitamiento de la capacidad defensiva, enzimas, debilitamiento de la capacidad defensiva, alteración del sistema inmunológico e incluso daño alteración del sistema inmunológico e incluso daño del material genético .del material genético .

Por causas ambientales (radiación), así como por la Por causas ambientales (radiación), así como por la ingesta de algún contaminante o incluso como ingesta de algún contaminante o incluso como consecuencia de nuestro propio metabolismo, consecuencia de nuestro propio metabolismo, surgen algunas moléculas que nos pueden surgen algunas moléculas que nos pueden provocar daño. provocar daño.

A estas se les conoce como especies oxigeno A estas se les conoce como especies oxigeno reactivas (ROS), que se asocian a enfermedades reactivas (ROS), que se asocian a enfermedades como cáncer, problemas cardiacos o al natural como cáncer, problemas cardiacos o al natural envejecimiento humano. envejecimiento humano.

Entre los problemas que originan figuran: Entre los problemas que originan figuran: destrucción de paredes celulares, inactivación de destrucción de paredes celulares, inactivación de enzimas, debilitamiento de la capacidad defensiva, enzimas, debilitamiento de la capacidad defensiva, alteración del sistema inmunológico e incluso daño alteración del sistema inmunológico e incluso daño del material genético .del material genético .

ESPECIES OXIGENO REACTIVAS (ROS) ESPECIES OXIGENO REACTIVAS (ROS)

Además la radiación cósmica y la radiación electromagnética de baja longitud de onda (por ejemplo los rayos gama) pueden dividir el agua en el cuerpo para generar el radical hidroxilo, OH▪.

Este radical débilmente reactivo una vez producido ataca a cualquier cosa que este cerca, siendo su vida media extremadamente pequeña y reaccionando en su punto de formación dejando tras de si una secuela de reacciones en cadena de radicales libres en propagación.

Además la radiación cósmica y la radiación electromagnética de baja longitud de onda (por ejemplo los rayos gama) pueden dividir el agua en el cuerpo para generar el radical hidroxilo, OH▪.

Este radical débilmente reactivo una vez producido ataca a cualquier cosa que este cerca, siendo su vida media extremadamente pequeña y reaccionando en su punto de formación dejando tras de si una secuela de reacciones en cadena de radicales libres en propagación.

RADICALES LIBRES RADICALES LIBRES

Es así que un estudio realizado en China demostró la eficacia de una “suplementación nutricional" con β-caroteno, vitamina E y Selenio sobre la mortalidad total y por cáncer (especialmente carcinoma de esófago en una población deficitaria).

Sin embargo un estudio Finlandés realizado sobre una población de alto riesgo (fumadores importantes) mostró que la suplementación con dosis elevadas de β -caroteno aumentaba el riesgo de padecer un carcinoma de pulmón.

Es muy importante que una dieta diaria debe proveer cantidades adecuadas de nutrientes esenciales “naturales” para el mantenimiento de una salud óptima. Estos antioxidantes naturales se encuentran presentes en prácticamente todas las plantas, microorganismos, hongos e incluso en los tejidos animales.

Es así que un estudio realizado en China demostró la eficacia de una “suplementación nutricional" con β-caroteno, vitamina E y Selenio sobre la mortalidad total y por cáncer (especialmente carcinoma de esófago en una población deficitaria).

Sin embargo un estudio Finlandés realizado sobre una población de alto riesgo (fumadores importantes) mostró que la suplementación con dosis elevadas de β -caroteno aumentaba el riesgo de padecer un carcinoma de pulmón.

Es muy importante que una dieta diaria debe proveer cantidades adecuadas de nutrientes esenciales “naturales” para el mantenimiento de una salud óptima. Estos antioxidantes naturales se encuentran presentes en prácticamente todas las plantas, microorganismos, hongos e incluso en los tejidos animales.

SUPLEMENTACION NUTRICIONAL SUPLEMENTACION NUTRICIONAL

Las tendencias mundiales de la alimentación en los últimos años indican un interés acentuado de los consumidores hacia ciertos alimentos que además de contener nutrientes contengan sustancias fisiológicamente activas que cumplan, al igual que los nutrientes esenciales, una función de beneficio en la reducción de ciertas enfermedades.

Las tendencias mundiales de la alimentación en los últimos años indican un interés acentuado de los consumidores hacia ciertos alimentos que además de contener nutrientes contengan sustancias fisiológicamente activas que cumplan, al igual que los nutrientes esenciales, una función de beneficio en la reducción de ciertas enfermedades.

TENDENCIAS MUNDIALES DE LA ALIMENTACION


A estos alimentos se les ha denominado “alimentos funcionales” y se vienen realizando la identificación de ciertos principios activos, a fin de evaluar su seguridad y las dosis respectivas a utilizar, estableciéndose en la mayoría de casos marcadores analíticos, marcadores farmacológicos, realizándose además ensayos clínicos controlados a doble ciego y la demostración de sus efectos bioquímicos, fisiológicos, farmacológicos y toxicológicos.

A estos alimentos se les ha denominado “alimentos funcionales” y se vienen realizando la identificación de ciertos principios activos, a fin de evaluar su seguridad y las dosis respectivas a utilizar, estableciéndose en la mayoría de casos marcadores analíticos, marcadores farmacológicos, realizándose además ensayos clínicos controlados a doble ciego y la demostración de sus efectos bioquímicos, fisiológicos, farmacológicos y toxicológicos.



El término Alimento Funcional fue propuesto por primera vez en Japón en la década de los 80’s con la publicación de la reglamentación para los "Alimentos para uso específico de salud" ("Foods for specified health use" o FOSHU).

Aunque el término alimentos funcionales no es una categoría de alimento legalmente reconocida por la Administración de alimentos y Drogas (FDA) de los Estados Unidos, sin embargo se han dado recientemente algunos cambios legislativos acerca de la información que deben contener las etiquetas de los productos relacionados con beneficios funcionales de los alimentos.

El término Alimento Funcional fue propuesto por primera vez en Japón en la década de los 80’s con la publicación de la reglamentación para los "Alimentos para uso específico de salud" ("Foods for specified health use" o FOSHU).

Aunque el término alimentos funcionales no es una categoría de alimento legalmente reconocida por la Administración de alimentos y Drogas (FDA) de los Estados Unidos, sin embargo se han dado recientemente algunos cambios legislativos acerca de la información que deben contener las etiquetas de los productos relacionados con beneficios funcionales de los alimentos.

ALIMENTOS FUNCIONALES ALIMENTOS FUNCIONALES

Las regulaciones de la NLEA (Ley de Etiquetado y Regulación Nutricional) y de la DSHEA (Ley de Suplementos Dietéticos Salud y Educación) se encaminan a preparar el camino legal en que se debe fundamentar el uso de estos productos. La posición oficial de la U.S. Food & Drugs Administration (FDA) es: "Las sustancias específicas de los alimentos pueden favorecer la salud como parte de una dieta variada".

Las regulaciones de la NLEA (Ley de Etiquetado y Regulación Nutricional) y de la DSHEA (Ley de Suplementos Dietéticos Salud y Educación) se encaminan a preparar el camino legal en que se debe fundamentar el uso de estos productos. La posición oficial de la U.S. Food & Drugs Administration (FDA) es: "Las sustancias específicas de los alimentos pueden favorecer la salud como parte de una dieta variada".

REGULACIONES REGULACIONES

AntioxidantesAntioxidantes

Se define como cualquier sustancia que, a bajas concentraciones en Se define como cualquier sustancia que, a bajas concentraciones en comparación con el sustrato oxidable, retrasa o inhibe comparación con el sustrato oxidable, retrasa o inhibe significativamente la oxidación de dicho sustrato. Para lograrlo los significativamente la oxidación de dicho sustrato. Para lograrlo los antioxidantees entregan un electron a los radicales libres, con lo cual antioxidantees entregan un electron a los radicales libres, con lo cual los desactivan, apagando el proceso de oxidaciòn y transformandose los desactivan, apagando el proceso de oxidaciòn y transformandose ellos en radicales libres inactivos o poco reactivos.ellos en radicales libres inactivos o poco reactivos.

La importancia de un antioxidante depende de su concentración, del La importancia de un antioxidante depende de su concentración, del medio donde actúa y de su habilidad para interaccionar con sistemas medio donde actúa y de su habilidad para interaccionar con sistemas regeneradores.regeneradores.

Ciertas enfermedades como la arterioesclerosis, degeneraciones Ciertas enfermedades como la arterioesclerosis, degeneraciones ligadas al envejecimiento y el cáncer, podrían estar unidas al fenómeno ligadas al envejecimiento y el cáncer, podrían estar unidas al fenómeno de la oxidación celular mediada por radicales libres.de la oxidación celular mediada por radicales libres.

EL ENVEJECIMIENTO ENFERMEDADES CRONICODEGENERATIVAS

....

Envejecimiento celular Peroxidación de los ácidos grasos de la membrana celular y daño del ADN.

Ateroesclerosis Peroxidación de lípidos en las partículas de LDL con daño de otros de sus componentes.

Cáncer Daño del ADN.

Cataratas Modificaciones irreversibles en las proteínas.

Cuadros Inflamatorios Crónicos Activación de genes relacionados con la respuesta inflamatoria.

La oxidación de las moléculas biológicas, membranas y tejidos es inducida por el oxigeno activo y mediada por radicales libres, lo cual esta relacionado con un aumento en la incidencia de enfermedades digestivas en los seres humanos.

El metabolismo oxidativo, proceso biológico normal, es capaz de generar radicales libres oxigenados, altamente reactivos. Estas especies con oxígenos activos incluyen el radical superóxido (O2º), el peróxido de hidrógeno (H2O2), el radical óxido nítrico (NO▪) y el oxígeno singulete (1O2).

La oxidación de las moléculas biológicas, membranas y tejidos es inducida por el oxigeno activo y mediada por radicales libres, lo cual esta relacionado con un aumento en la incidencia de enfermedades digestivas en los seres humanos.

El metabolismo oxidativo, proceso biológico normal, es capaz de generar radicales libres oxigenados, altamente reactivos. Estas especies con oxígenos activos incluyen el radical superóxido (O2º), el peróxido de hidrógeno (H2O2), el radical óxido nítrico (NO▪) y el oxígeno singulete (1O2).

OXIDACION DE MOLECULAS BIOLOGICASOXIDACION DE MOLECULAS BIOLOGICAS

Sustancias propias del organismo,Sustancias propias del organismo, enzimas antioxidantes enzimas antioxidantes

Tambièn cierta parte de los superóxidos son Tambièn cierta parte de los superóxidos son producidos por accidentes químicos en los que producidos por accidentes químicos en los que muchas moléculas del cuerpo reaccionan muchas moléculas del cuerpo reaccionan directamente con el Oxigeno para producir directamente con el Oxigeno para producir súperóxido. Ejemplos de ello incluyen las súperóxido. Ejemplos de ello incluyen las catecolaminas, tetrahidrofolatos y algunos catecolaminas, tetrahidrofolatos y algunos componentes de la cadena mitocondrial y otras componentes de la cadena mitocondrial y otras cadenas de transporte de electrones. cadenas de transporte de electrones.

Esta producción de superóxido es inevitable. Esta producción de superóxido es inevitable. Además cierta cantidad de súper óxido se produce Además cierta cantidad de súper óxido se produce deliberadamente por ejemplo los fagocitos deliberadamente por ejemplo los fagocitos activados (neutrófilos, monocitos, macrófagos, activados (neutrófilos, monocitos, macrófagos, eosinófilos) dan lugar a grandes cantidades eosinófilos) dan lugar a grandes cantidades superóxido como parte del mecanismo a través del superóxido como parte del mecanismo a través del cual exterminan a los organismos extraños durante cual exterminan a los organismos extraños durante las inflamaciones crónicas este mecanismo las inflamaciones crónicas este mecanismo protector normal puede afectarse. protector normal puede afectarse.

Tambièn cierta parte de los superóxidos son Tambièn cierta parte de los superóxidos son producidos por accidentes químicos en los que producidos por accidentes químicos en los que muchas moléculas del cuerpo reaccionan muchas moléculas del cuerpo reaccionan directamente con el Oxigeno para producir directamente con el Oxigeno para producir súperóxido. Ejemplos de ello incluyen las súperóxido. Ejemplos de ello incluyen las catecolaminas, tetrahidrofolatos y algunos catecolaminas, tetrahidrofolatos y algunos componentes de la cadena mitocondrial y otras componentes de la cadena mitocondrial y otras cadenas de transporte de electrones. cadenas de transporte de electrones.

Esta producción de superóxido es inevitable. Esta producción de superóxido es inevitable. Además cierta cantidad de súper óxido se produce Además cierta cantidad de súper óxido se produce deliberadamente por ejemplo los fagocitos deliberadamente por ejemplo los fagocitos activados (neutrófilos, monocitos, macrófagos, activados (neutrófilos, monocitos, macrófagos, eosinófilos) dan lugar a grandes cantidades eosinófilos) dan lugar a grandes cantidades superóxido como parte del mecanismo a través del superóxido como parte del mecanismo a través del cual exterminan a los organismos extraños durante cual exterminan a los organismos extraños durante las inflamaciones crónicas este mecanismo las inflamaciones crónicas este mecanismo protector normal puede afectarse. protector normal puede afectarse.

Sistemas antioxidantes del organismoSistemas antioxidantes del organismo

. ANTIOXIDANTES ENZIMATICOS.. ANTIOXIDANTES ENZIMATICOS. INTRACELULAR. ENDOGENOSINTRACELULAR. ENDOGENOS CatalasaCatalasa Glutation peroxidasaGlutation peroxidasa Gutation reductasaGutation reductasa Superoxido dismutasaSuperoxido dismutasa Complejo reparador de ADNComplejo reparador de ADN ANTIOXIDANTES NO ENZIMATICOS.ANTIOXIDANTES NO ENZIMATICOS. EXTRACELULAR. ENDOGENOS DIETARIOS EXOGEBNOSEXTRACELULAR. ENDOGENOS DIETARIOS EXOGEBNOS

Glutation B CarotenoGlutation B Caroteno Urato Vit C y EUrato Vit C y E Ubiquinol PolifenolesUbiquinol Polifenoles Poteínas plasmáticas Flavonoides Poteínas plasmáticas Flavonoides Químicos Químicos

sintéticossintéticos

. ANTIOXIDANTES ENZIMATICOS.. ANTIOXIDANTES ENZIMATICOS. INTRACELULAR. ENDOGENOSINTRACELULAR. ENDOGENOS CatalasaCatalasa Glutation peroxidasaGlutation peroxidasa Gutation reductasaGutation reductasa Superoxido dismutasaSuperoxido dismutasa Complejo reparador de ADNComplejo reparador de ADN ANTIOXIDANTES NO ENZIMATICOS.ANTIOXIDANTES NO ENZIMATICOS. EXTRACELULAR. ENDOGENOS DIETARIOS EXOGEBNOSEXTRACELULAR. ENDOGENOS DIETARIOS EXOGEBNOS

Glutation B CarotenoGlutation B Caroteno Urato Vit C y EUrato Vit C y E Ubiquinol PolifenolesUbiquinol Polifenoles Poteínas plasmáticas Flavonoides Poteínas plasmáticas Flavonoides Químicos Químicos

sintéticossintéticos


Además de las enzimas glutatión peroxidasa, Además de las enzimas glutatión peroxidasa, catalasa y superóxido dismutasa, hay otras catalasa y superóxido dismutasa, hay otras sustancias antioxidantes como la coenzima Q-sustancias antioxidantes como la coenzima Q-10, que ayuda a las enzimas a realizar su 10, que ayuda a las enzimas a realizar su función, y participa en numerosos procesos función, y participa en numerosos procesos corporales. corporales.

Se ha comprobado una gran similitud entre las Se ha comprobado una gran similitud entre las propiedades antioxidantes de la vitamina E y propiedades antioxidantes de la vitamina E y las de la coenzima Q-10, que juega un muy las de la coenzima Q-10, que juega un muy importante papel en la generación de energía importante papel en la generación de energía celular, y a su vez es un estimulante inmune, celular, y a su vez es un estimulante inmune, mejora la circulación y ayuda a proteger el mejora la circulación y ayuda a proteger el sistema cardiovascular.sistema cardiovascular.

Además de las enzimas glutatión peroxidasa, Además de las enzimas glutatión peroxidasa, catalasa y superóxido dismutasa, hay otras catalasa y superóxido dismutasa, hay otras sustancias antioxidantes como la coenzima Q-sustancias antioxidantes como la coenzima Q-10, que ayuda a las enzimas a realizar su 10, que ayuda a las enzimas a realizar su función, y participa en numerosos procesos función, y participa en numerosos procesos corporales. corporales.

Se ha comprobado una gran similitud entre las Se ha comprobado una gran similitud entre las propiedades antioxidantes de la vitamina E y propiedades antioxidantes de la vitamina E y las de la coenzima Q-10, que juega un muy las de la coenzima Q-10, que juega un muy importante papel en la generación de energía importante papel en la generación de energía celular, y a su vez es un estimulante inmune, celular, y a su vez es un estimulante inmune, mejora la circulación y ayuda a proteger el mejora la circulación y ayuda a proteger el sistema cardiovascular.sistema cardiovascular.


Entre los principales antioxidantes dietarios esta la Entre los principales antioxidantes dietarios esta la vitamina E que se ha demostrado posee actividad vitamina E que se ha demostrado posee actividad antioxidante in vivo. antioxidante in vivo.

La vitamina C in vitro regenera a la vitamina E, lo que La vitamina C in vitro regenera a la vitamina E, lo que probablemente ocurra tambien in vivo.probablemente ocurra tambien in vivo.

Los carotenoides estàn presentes en zanahorias , berros, Los carotenoides estàn presentes en zanahorias , berros, espinacas, tomates , mangos y damascos.espinacas, tomates , mangos y damascos.

Los polifenoles son un grupo de compuestos presentes Los polifenoles son un grupo de compuestos presentes en la naturaleza, en su mayoría potentes antioxidantes en la naturaleza, en su mayoría potentes antioxidantes necesarios para el funcionamiento de las células necesarios para el funcionamiento de las células vegetales, que se encuentran en frutas y verduras, vegetales, que se encuentran en frutas y verduras, principalmente manzanas y cebollas y en bebidas como principalmente manzanas y cebollas y en bebidas como el té y el vino. el té y el vino.

Entre los principales antioxidantes dietarios esta la Entre los principales antioxidantes dietarios esta la vitamina E que se ha demostrado posee actividad vitamina E que se ha demostrado posee actividad antioxidante in vivo. antioxidante in vivo.

La vitamina C in vitro regenera a la vitamina E, lo que La vitamina C in vitro regenera a la vitamina E, lo que probablemente ocurra tambien in vivo.probablemente ocurra tambien in vivo.

Los carotenoides estàn presentes en zanahorias , berros, Los carotenoides estàn presentes en zanahorias , berros, espinacas, tomates , mangos y damascos.espinacas, tomates , mangos y damascos.

Los polifenoles son un grupo de compuestos presentes Los polifenoles son un grupo de compuestos presentes en la naturaleza, en su mayoría potentes antioxidantes en la naturaleza, en su mayoría potentes antioxidantes necesarios para el funcionamiento de las células necesarios para el funcionamiento de las células vegetales, que se encuentran en frutas y verduras, vegetales, que se encuentran en frutas y verduras, principalmente manzanas y cebollas y en bebidas como principalmente manzanas y cebollas y en bebidas como el té y el vino. el té y el vino.

Los principales polifenoles identificados en la Los principales polifenoles identificados en la dieta son àcidos fenólicos, derivados de dieta son àcidos fenólicos, derivados de tirosina, estilbenos, flavonoides y tirosina, estilbenos, flavonoides y compuestos poliméricos como los taninos. compuestos poliméricos como los taninos.

En estudios in vitro, muchos polifenoles En estudios in vitro, muchos polifenoles naturales son mejores antioxidantes que la vit naturales son mejores antioxidantes que la vit C y E, C y E, siendo la quercetina la sustancia más siendo la quercetina la sustancia más abundante. abundante.

Los citroflavonoides presentes en algunos Los citroflavonoides presentes en algunos cítricos, como el hesperidósido y el rutósido, cítricos, como el hesperidósido y el rutósido, son eficaces antioxidantes. son eficaces antioxidantes.

Moléculas con actividad antioxidante Flavonoides

Investigación de plantasInvestigación de plantascon actividad antioxidantecon actividad antioxidante

OBTENCION DEL OBTENCION DEL MATERIAL VEGETAL(MV)MATERIAL VEGETAL(MV)

El MV que serà utilizado para la investigación se El MV que serà utilizado para la investigación se debe recolectar de acuerdo con cada especie, la debe recolectar de acuerdo con cada especie, la época de recolección, la parte que es utilizada, época de recolección, la parte que es utilizada, la naturaleza, cantidad y tipo de principio la naturaleza, cantidad y tipo de principio activo, los mismos que varían activo, los mismos que varían considerablemente de acuerdo a la familia, considerablemente de acuerdo a la familia, género y especie de cada planta medicinal y se género y especie de cada planta medicinal y se debe proceder de forma rigurosa a su correcta debe proceder de forma rigurosa a su correcta identificación, posterior preservación, identificación, posterior preservación, conservación y preparación.conservación y preparación.

El MV que serà utilizado para la investigación se El MV que serà utilizado para la investigación se debe recolectar de acuerdo con cada especie, la debe recolectar de acuerdo con cada especie, la época de recolección, la parte que es utilizada, época de recolección, la parte que es utilizada, la naturaleza, cantidad y tipo de principio la naturaleza, cantidad y tipo de principio activo, los mismos que varían activo, los mismos que varían considerablemente de acuerdo a la familia, considerablemente de acuerdo a la familia, género y especie de cada planta medicinal y se género y especie de cada planta medicinal y se debe proceder de forma rigurosa a su correcta debe proceder de forma rigurosa a su correcta identificación, posterior preservación, identificación, posterior preservación, conservación y preparación.conservación y preparación.

Plantas peruanas nativas e introducidas evaluadas

EXTRACCION DEL MATERIAL EXTRACCION DEL MATERIAL VEGETALVEGETAL

Una vez seleccionada y Una vez seleccionada y recolectada la especie que recolectada la especie que se quiere estudiar se se quiere estudiar se dispondra de una cantidad dispondra de una cantidad apropiada de material apropiada de material vegetal seco que puede vegetal seco que puede triturarse en mayor o menor triturarse en mayor o menor grado,según el caso y grado,según el caso y posteriormente someterse a posteriormente someterse a la acción del disolvente la acción del disolvente oportuno en las condiciones oportuno en las condiciones y con la duración adecuadas y con la duración adecuadas para conseguir la extracción para conseguir la extracción más completa posible de las más completa posible de las sustancias activas en el MV.sustancias activas en el MV.

El objetivo de la primera extracción se El objetivo de la primera extracción se

centra en la obtención de una pequeña centra en la obtención de una pequeña porción de extracto, en cantidad porción de extracto, en cantidad suficiente que permita por un lado, la suficiente que permita por un lado, la realización de los bioensayos realización de los bioensayos preliminares programados , preliminares programados , encaminados a demostrar la presencia encaminados a demostrar la presencia de sustancias bioactivas en él y por otro de sustancias bioactivas en él y por otro disponer de materia para obtener disponer de materia para obtener cromatogramas (CF) en diversas cromatogramas (CF) en diversas condiciones de elución, espectros de condiciones de elución, espectros de infrarojo(IR) y de Resonancia Magnetica infrarojo(IR) y de Resonancia Magnetica Nuclear de protón (RMN), que sirvan Nuclear de protón (RMN), que sirvan para caracterizar suficientemente el para caracterizar suficientemente el extracto y proporcionar información extracto y proporcionar información sobre su probable composición. sobre su probable composición.


El objetivo de la primera extracción se El objetivo de la primera extracción se

centra en la obtención de una pequeña centra en la obtención de una pequeña porción de extracto, en cantidad porción de extracto, en cantidad suficiente que permita por un lado, la suficiente que permita por un lado, la realización de los bioensayos realización de los bioensayos preliminares programados , preliminares programados , encaminados a demostrar la presencia encaminados a demostrar la presencia de sustancias bioactivas en él y por otro de sustancias bioactivas en él y por otro disponer de materia para obtener disponer de materia para obtener cromatogramas (CF) en diversas cromatogramas (CF) en diversas condiciones de elución, espectros de condiciones de elución, espectros de infrarojo(IR) y de Resonancia Magnetica infrarojo(IR) y de Resonancia Magnetica Nuclear de protón (RMN), que sirvan Nuclear de protón (RMN), que sirvan para caracterizar suficientemente el para caracterizar suficientemente el extracto y proporcionar información extracto y proporcionar información sobre su probable composición. sobre su probable composición.


SCREENING FITOQUIMICO SCREENING FITOQUIMICO

Para conseguir el aislamiento y purificaciòn de los principios activos , se recomienda utilizar algunas técnicas fisicoquímicas e instrumentales que puedan informar sobre la naturaleza y composición de los extractos y fracciones que se estén analizando y puedan permitir detectar la presencia de algunos tipos de metabolitos, alcaloides, flavonoide, esteroides, saponinas.

Como herramienta fitoquímica se utiliza un conjunto de técnicas muy bien establecidas, que están basadas en reacciones coloreadas, selectivas o específicas y que mediante reactivos de diverso tipo, aplicados generalmente de forma directa sobre el extracto o sus fracciones o sobre placas cromatográficas desarrolladas, proporcionan información sobre la presencia de distintos grupos de metabolitos.

Manual de Técnicas Experimentales .

Para conseguir el aislamiento y purificaciòn de los principios activos , se recomienda utilizar algunas técnicas fisicoquímicas e instrumentales que puedan informar sobre la naturaleza y composición de los extractos y fracciones que se estén analizando y puedan permitir detectar la presencia de algunos tipos de metabolitos, alcaloides, flavonoide, esteroides, saponinas.

Como herramienta fitoquímica se utiliza un conjunto de técnicas muy bien establecidas, que están basadas en reacciones coloreadas, selectivas o específicas y que mediante reactivos de diverso tipo, aplicados generalmente de forma directa sobre el extracto o sus fracciones o sobre placas cromatográficas desarrolladas, proporcionan información sobre la presencia de distintos grupos de metabolitos.

Manual de Técnicas Experimentales .

CARACTERIZACION PRELIMINAR DE LOS EXTRACTOS CARACTERIZACION PRELIMINAR DE LOS EXTRACTOS

Otro grupo de herramientas muy útiles Otro grupo de herramientas muy útiles se basan en la aplicación de técnicas se basan en la aplicación de técnicas espectróscopicas generalmente espectróscopicas generalmente disponible.disponible.

Es conveniente obtener espectros IR Es conveniente obtener espectros IR (neto) y RMN1H (Preferentemente en (neto) y RMN1H (Preferentemente en CDCl3 o DMSO-d6) del extracto o la CDCl3 o DMSO-d6) del extracto o la fracción, para tratar de detectar y fracción, para tratar de detectar y estimar particularmente la presencia y estimar particularmente la presencia y la proporción de componentes lineales la proporción de componentes lineales y otros tipos de metabolitos y otros tipos de metabolitos secundarios definidossecundarios definidos..

Otro grupo de herramientas muy útiles Otro grupo de herramientas muy útiles se basan en la aplicación de técnicas se basan en la aplicación de técnicas espectróscopicas generalmente espectróscopicas generalmente disponible.disponible.

Es conveniente obtener espectros IR Es conveniente obtener espectros IR (neto) y RMN1H (Preferentemente en (neto) y RMN1H (Preferentemente en CDCl3 o DMSO-d6) del extracto o la CDCl3 o DMSO-d6) del extracto o la fracción, para tratar de detectar y fracción, para tratar de detectar y estimar particularmente la presencia y estimar particularmente la presencia y la proporción de componentes lineales la proporción de componentes lineales y otros tipos de metabolitos y otros tipos de metabolitos secundarios definidossecundarios definidos..

OXIDACION DE MOLECULAS BIOLOGICASOXIDACION DE MOLECULAS BIOLOGICAS

La estimación de la presencia de componentes lineales se consigue directamente mediante observación simple de la intensidad y proporción de las absorciones hacia 720 cm-1(IR) y 1,25 ppm (RMN 1H).

La estimación de componentes funcionalizados se puede llevar a cabo tambien mediante la observación del espectro de IR, a través de las absorvaciones que aparezcan en las regiones de 3,500-3000 cm-1(funciones NH y OH, olefinas y sistemas aromáticos), 1800-1500 cm-1 (carbonilos, carboxilos e insaturaciones ) y 1100-800 cm-1 (éteres e insaturaciones); complementandola con la observación del espectro de RMN1H , en las zonas 13-8 ppm (H puente, aldehidos, amidas), 8-6 ppm (aromáticos y olefínicos conjugados)), 6-3 ppm (olefínicos, alcoholes, ésteres, grupos metoxilo, azúcares) y 3-0,5 (metilos) ppm.

Manual de Técnicas Experimentales . Proyecto X.10 . CYTED (pag 37)

La estimación de la presencia de componentes lineales se consigue directamente mediante observación simple de la intensidad y proporción de las absorciones hacia 720 cm-1(IR) y 1,25 ppm (RMN 1H).

La estimación de componentes funcionalizados se puede llevar a cabo tambien mediante la observación del espectro de IR, a través de las absorvaciones que aparezcan en las regiones de 3,500-3000 cm-1(funciones NH y OH, olefinas y sistemas aromáticos), 1800-1500 cm-1 (carbonilos, carboxilos e insaturaciones ) y 1100-800 cm-1 (éteres e insaturaciones); complementandola con la observación del espectro de RMN1H , en las zonas 13-8 ppm (H puente, aldehidos, amidas), 8-6 ppm (aromáticos y olefínicos conjugados)), 6-3 ppm (olefínicos, alcoholes, ésteres, grupos metoxilo, azúcares) y 3-0,5 (metilos) ppm.

Manual de Técnicas Experimentales . Proyecto X.10 . CYTED (pag 37)

CARACTERIZACION PRELIMINAR DE LOS EXTRACTOS CARACTERIZACION PRELIMINAR DE LOS EXTRACTOS

VALIDACION EXPERIMENTALVALIDACION EXPERIMENTAL

TamizajeTamizaje In vitro (céluas , órganos aislados) In vitro (céluas , órganos aislados) / In vivo/ In vivo: preclínica (animales) y clínica (humanos) : preclínica (animales) y clínica (humanos)

antiinflamatoria, antitumoral, antiviral espasmolítica, antiinflamatoria, antitumoral, antiviral espasmolítica, analgésica, diurética, hipoglicémica, sedante,analgésica, diurética, hipoglicémica, sedante, antioxidanteantioxidante, , antiinfecciosa, antiinfecciosa, cicatrizante, etc.cicatrizante, etc.

Extracción fraccionada ( > ó < polaridad)Extracción fraccionada ( > ó < polaridad) Fraccionamiento dirigido.Fraccionamiento dirigido. Elucidación estructural: a) Universidad de Salamanca.Elucidación estructural: a) Universidad de Salamanca. (Departamento de Química Farmacéutica(Departamento de Química Farmacéutica Dr. Arturo San Feliciano)Dr. Arturo San Feliciano) b) Universidad Autónoma de Mexicob) Universidad Autónoma de Mexico (Instituto de Química. Dr. Ricardo Reyes Chilpa).(Instituto de Química. Dr. Ricardo Reyes Chilpa).

Plantas con acciónPlantas con acciónantioxidanteantioxidante

Aunque el rutósido es relativamente Aunque el rutósido es relativamente frecuente en la naturaleza, solo un frecuente en la naturaleza, solo un pequeño número de plantas lo pequeño número de plantas lo contienen en cantidad suficiente para contienen en cantidad suficiente para permitir su extracción industrial.permitir su extracción industrial.

Se obtiene fundamentalmente a partir Se obtiene fundamentalmente a partir de la sófora (de la sófora (Sophora japonica Sophora japonica L., L., FabaceaeFabaceae), el trigo sarraceno ), el trigo sarraceno ((Fagopyrum esculentum Fagopyrum esculentum Moench., Moench., Fagopyrum tataricum Fagopyrum tataricum [L.] Gaertn., [L.] Gaertn., PolygonaceaePolygonaceae), ), Eucalyptus Eucalyptus macrorrhyncha macrorrhyncha F. Muell., (F. Muell., (MyrtaceaeMyrtaceae), ), y y Dimorphandra Dimorphandra spp. spp. ((CaesalpinaceaeCaesalpinaceae).).

Por su contenido en flavonoides, la Por su contenido en flavonoides, la hoja hoja de ginkgo (de ginkgo (Ginkgo bilobaGinkgo biloba, , GinkgoaceaeGinkgoaceae) ) , también llamado , también llamado «árbol de los cuarenta escudos», es «árbol de los cuarenta escudos», es un excelente captador de radicales un excelente captador de radicales libres, lo que explica sus propiedades libres, lo que explica sus propiedades antioxidantes.antioxidantes.

Ginkgo biloba.

Otras plantas utilizadas como Otras plantas utilizadas como antioxidantes en productos antioxidantes en productos cosméticos por su contenido en cosméticos por su contenido en flavonoides son la manzanilla flavonoides son la manzanilla ((Chamomilla recutita Chamomilla recutita [L.] [L.] Rauschert, Rauschert, AsteraceaeAsteraceae), la ), la caléndula (caléndula (Calendula officinalis Calendula officinalis L., L., AsteraceaeAsteraceae) y el lúpulo ) y el lúpulo ((Humulus lupulusHumulus lupulus, , CannabaceaeCannabaceae), si bien también ), si bien también se emplean flavonoides puros, se emplean flavonoides puros, como el hesperidósido y el como el hesperidósido y el rutósido.rutósido.

En el caso de la vid roja (En el caso de la vid roja (Vitis Vitis vinifera vinifera L., L., VitaceaeVitaceae)su )su utilización como antioxidante en utilización como antioxidante en la industria de los cosméticos se la industria de los cosméticos se debe a la presencia de debe a la presencia de proantocianidoles.proantocianidoles.

Vitis vinifera.

Los flavanolignanos Los flavanolignanos presentes en el fruto del presentes en el fruto del cardo María (cardo María (Silybum Silybum marianum marianum [L.] Gaertn., [L.] Gaertn., AsteraceaeAsteraceae) inhiben la ) inhiben la peroxidación lipídica de la peroxidación lipídica de la membrana y actúan como membrana y actúan como captadores de radicales captadores de radicales libres. libres.

El principio activo El principio activo mayoritario se conoce mayoritario se conoce como silimarina, y está como silimarina, y está constituido por una constituido por una mezcla de silibina, mezcla de silibina, silicristina y silidianina.silicristina y silidianina. Silibina, silicristina, silidianina

Las ceramidas (esfingosinas Las ceramidas (esfingosinas NN-aciladas por un ácido -aciladas por un ácido graso) y glicosilceramidas del trigo y del arroz, que graso) y glicosilceramidas del trigo y del arroz, que constituyen una alternativa de las ceramidas animales; constituyen una alternativa de las ceramidas animales; la industria cosmética las utiliza por su posible la industria cosmética las utiliza por su posible capacidad en la prevención o atenuación del capacidad en la prevención o atenuación del envejecimiento cutáneo.envejecimiento cutáneo.

Los ácidos grasos insaturados (aceites). Como Los ácidos grasos insaturados (aceites). Como ejemplo podemos citar el aceite de sésamo (semillas ejemplo podemos citar el aceite de sésamo (semillas de de Sesamum indicumSesamum indicum, , PedaliaceaePedaliaceae), el aceite de maíz ), el aceite de maíz (estigmas de (estigmas de Zea mays Zea mays L., L., GramineaeGramineae), aceite de oliva ), aceite de oliva (frutos de (frutos de Olea europaeaOlea europaea, , OleaceaeOleaceae) y aceite de ) y aceite de cacahuete (semillas de cacahuete (semillas de Arachis hypogaeaArachis hypogaea, , LeguminosaeLeguminosae).).

OTROS PRODUCTOS CON ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE

Efecto antioxidante del hidroxitirosol Efecto antioxidante del hidroxitirosol procedente de la hoja de olivo (Olea procedente de la hoja de olivo (Olea

europaea L)europaea L) El hidroxitirosol(2-(3,4-dihidroxifenil)etanol) es un compuesto El hidroxitirosol(2-(3,4-dihidroxifenil)etanol) es un compuesto

fenólico presente en la hoja del olivo en forma libre y fenólico presente en la hoja del olivo en forma libre y esterificada y que destaca del resto de polifenoles por sus esterificada y que destaca del resto de polifenoles por sus múltiples actividades farmacológicas como antimicrobiano múltiples actividades farmacológicas como antimicrobiano con actividad in vitro frente a bacterias gram + y gram -, con actividad in vitro frente a bacterias gram + y gram -, inhibidor de la formación del leucotrieno B4 a nivel de la 5-inhibidor de la formación del leucotrieno B4 a nivel de la 5-lipooxigenasa implicadas en el proceso antiinflamatorio e lipooxigenasa implicadas en el proceso antiinflamatorio e inductor de apoptosis en células HL-60. inductor de apoptosis en células HL-60. La actividad La actividad antioxidante del hidroxitirosol es una de las más elevadas antioxidante del hidroxitirosol es una de las más elevadas entre los polifenoles, siendo incluso superior a la de la entre los polifenoles, siendo incluso superior a la de la Vitamina E.Vitamina E.

P. de la Fuente, P Chamorro, M. Moreno. M.A Poza.P. de la Fuente, P Chamorro, M. Moreno. M.A Poza. Revista de Fitoterapia 2004;4(2):PI-PF 139,140Revista de Fitoterapia 2004;4(2):PI-PF 139,140

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE ANTI-ESTRES DE MACAANTI-ESTRES DE MACA

EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE DE PLANTAS MEDICINALES PERUANAS NATIVAS E PLANTAS MEDICINALES PERUANAS NATIVAS E

INTRODUCIDAS.INTRODUCIDAS.Dr. Castañeda C. B.1, Q.F. Ramos LL. E. 2, Dra. Ibáñez V. L. 3Dr. Castañeda C. B.1, Q.F. Ramos LL. E. 2, Dra. Ibáñez V. L. 3 RESUMENRESUMEN Se evaluó la capacidad antioxidante de veintinueve extractos de las Se evaluó la capacidad antioxidante de veintinueve extractos de las

siguientes plantas medicinales: siguientes plantas medicinales: Cinnamomum zeylanicumCinnamomum zeylanicum “canela”, “canela”, Calophyllum brasilienseCalophyllum brasiliense “lagarto caspi”, “lagarto caspi”, Myrciaria dubiaMyrciaria dubia “camu camu”, “camu camu”, Minthostachys mollisMinthostachys mollis “muña”, “muña”, Alchornea castaneifoliaAlchornea castaneifolia “hiporuro”, “hiporuro”, Smallanthus sonchifoliusSmallanthus sonchifolius “yacón”, “yacón”, Lepidium peruvianumLepidium peruvianum y y Lepidium Lepidium meyeniimeyenii “maca”, por el método de la decoloración del radical 2,2-difenil-1- “maca”, por el método de la decoloración del radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH). picrilhidrazilo (DPPH).

Los resultados obtenidos al evaluar la capacidad antioxidante a las Los resultados obtenidos al evaluar la capacidad antioxidante a las concentraciones de 1 ug/mL, 50 ug/mL, 100 ug/mL y 200 ug/mL fueron: concentraciones de 1 ug/mL, 50 ug/mL, 100 ug/mL y 200 ug/mL fueron: canela (Extracto etanólico de la corteza) 97.59% a una concentración de canela (Extracto etanólico de la corteza) 97.59% a una concentración de 1 ug/mL, lagarto caspi (E. Metanólico de hojas) 99.76% a 50 ug/mL, camu 1 ug/mL, lagarto caspi (E. Metanólico de hojas) 99.76% a 50 ug/mL, camu camu (E. Metanólico del fruto) 98.09% a 50 ug/mL, muña (E. Acuoso de camu (E. Metanólico del fruto) 98.09% a 50 ug/mL, muña (E. Acuoso de hojas) 92.41% a 50 ug/mL, hiporuro (E. Metanólico de hojas) 100.57% a hojas) 92.41% a 50 ug/mL, hiporuro (E. Metanólico de hojas) 100.57% a 100 ug/mL, Lagarto (E. Acuoso de hojas) 110.56% a 100 ug/mL, 100 ug/mL, Lagarto (E. Acuoso de hojas) 110.56% a 100 ug/mL, Lepidium Lepidium peruvianumperuvianum (E. Acuoso de hipocótilo) 95.55% a 200 ug/mL y (E. Acuoso de hipocótilo) 95.55% a 200 ug/mL y Lepidium Lepidium meyeniimeyenii (E. Metanólico de hipocótilo) 88.21% a 200 ug/mL, en (E. Metanólico de hipocótilo) 88.21% a 200 ug/mL, en comparación con el al ácido ascórbico (Vitamina C) que presentó una comparación con el al ácido ascórbico (Vitamina C) que presentó una actividad antioxidante en promedio de 92.82%. actividad antioxidante en promedio de 92.82%.

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El Fundamento del método desarrollado por Brand-Willams et al , DPPH, consiste en que este radical tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta, decolorándose hacia amarillo pálido por la reacción de la presencia de una sustancia antioxidante siendo medida la absorbancia espectrofotométricamente a 517 nm.

La diferencia de absorbancias permite obtener el porcentaje de captación de los radicales libres .

El Fundamento del método desarrollado por Brand-Willams et al , DPPH, consiste en que este radical tiene un electrón desapareado y es de color azul-violeta, decolorándose hacia amarillo pálido por la reacción de la presencia de una sustancia antioxidante siendo medida la absorbancia espectrofotométricamente a 517 nm.

La diferencia de absorbancias permite obtener el porcentaje de captación de los radicales libres .

DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE POR EL METODO DEL DPPH

DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE POR EL METODO DEL DPPH

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTEACTIVIDAD ANTIOXIDANTEProcedimiento: Procedimiento: 1.1. Se preparó 100 ml una solución de DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazilo) en metanol Se preparó 100 ml una solución de DPPH (2,2-difenil-1-picril hidrazilo) en metanol de 20 mg/L. de 20 mg/L. 2.2. Luego se preparó una solución metanólica de los extractos en una concentración de Luego se preparó una solución metanólica de los extractos en una concentración de 300 ug/ml (Solución A) y de 600 ug/mL (Solución D)300 ug/ml (Solución A) y de 600 ug/mL (Solución D) 3.3. El Blanco se preparó con metanol agua 2:1 para ajustar el espectrofotómetro a El Blanco se preparó con metanol agua 2:1 para ajustar el espectrofotómetro a cero.cero. 4.4. El Blanco de muestra se preparó con 0.75 mL de muestra (solución A) y 1.5 mL de El Blanco de muestra se preparó con 0.75 mL de muestra (solución A) y 1.5 mL de metanol.metanol. 5.5. Se preparó el patrón de referencia con 1.5 mL de DPPH y 0.75 mL de agua.Se preparó el patrón de referencia con 1.5 mL de DPPH y 0.75 mL de agua. 6.6. Luego se procedió a preparar la muestra con 0.75 mL de solución A y 1.5 mL de Luego se procedió a preparar la muestra con 0.75 mL de solución A y 1.5 mL de DPPH, obteniéndose una concentración final de 100 ug/mL, dejándose x 5 min. Y se DPPH, obteniéndose una concentración final de 100 ug/mL, dejándose x 5 min. Y se leyó a 517 nm en un espectrofotómetro.leyó a 517 nm en un espectrofotómetro. 7.7. Se midió la absorbancia del patrón de referencia y del blanco de la muestra.Se midió la absorbancia del patrón de referencia y del blanco de la muestra. 8.8. Luego se diluyó la solución A con metanol en una proporción 1:2 (solución B) para Luego se diluyó la solución A con metanol en una proporción 1:2 (solución B) para obtener una concentración final de 50 ug/mL, y en una proporción de 1:10 (solución obtener una concentración final de 50 ug/mL, y en una proporción de 1:10 (solución C) para obtener una concentración final de 1 ug/mL.C) para obtener una concentración final de 1 ug/mL. 9.9. Con las soluciones B, C y D se procedió igual a los puntos 6 y 7.Con las soluciones B, C y D se procedió igual a los puntos 6 y 7.

Actividad Antioxidante

N

N

NO2

O2N

O2N

DPPH

(Forma reducida)

DPPH

(Forma radicalaria)

Compuesto Compuesto oxidado

Violeta Amarillo

N

NH

NO 2

O2 N

O2 N

un

Los extractos fueron evaluados por triplicado a diferentes Los extractos fueron evaluados por triplicado a diferentes concentraciones de 1, 25, 50, 100 y 200 ug/mL utilizando como concentraciones de 1, 25, 50, 100 y 200 ug/mL utilizando como fármaco control, vitamina C.fármaco control, vitamina C.

Posteriormente con los valores de las absorbancias obtenidas Posteriormente con los valores de las absorbancias obtenidas se determinó el % de captación de radicales libres (DPPH) se determinó el % de captación de radicales libres (DPPH) mediante la siguiente formula:mediante la siguiente formula:

Capacidad Antioxidante = [ 1 – (A2 – A3) / A1 ] x 100Capacidad Antioxidante = [ 1 – (A2 – A3) / A1 ] x 100% Captación de Radical Libre% Captación de Radical Libre

Donde:Donde: A1= Absorbancia del patrón de referenciaA1= Absorbancia del patrón de referencia A2= Absorbancia de la muestraA2= Absorbancia de la muestra A3= Absorbancia del blanco de muestraA3= Absorbancia del blanco de muestra

Preparación de soluciones antioxidantes

Medición de absorbancias de las soluciones en el Espectrofotómetro

Tabla 1. Capacidad Antioxidante por el método del DPPH

MUESTRA Extracto% CAPTACION DE RADICAL

LIBRE (R.L.)

VITAMINA C (Control )(Acido Ascórbico) ----- 92,82

Canela, corteza(Cinnamomum zeylanicum) 10% Etanol 97.59 a

Lagarto, hoja(Calophyllum brasiliense) 20% Metanol 99.76 b

Camu- camu, fruto(Myrciaria dubia) 10% Metanol 98.09 b

Muña, hoja(Minthostachys mollis) 10% Acuoso 92.41 b

Hiporuro, hoja(Alchornea castaneifolia) 10% Metanol 75.96 b

Lagarto, hoja(Calophyllum brasiliense) 10% Acuoso 110.56 c

Yacón, hoja(Smallanthus sonchifolius) 10% Etanol 103.19 d

MACA KOKEN, hipocótilo(Lepidium peruvianum) 10% Acuoso 95.55 d

MACA AMAZON, hipocótilo(Lepidium meyenii) 10% Metanol 88.21 d

a 1 ug/mL, b 50 ug/mL c 100 ug/ mL d 200 ug/ mL

Porcentaje de Captación de Radical Libre x DPPH

Capacidad antioxidante % Captación de R.L.

93 98 100 9892

76

111103

9688

0

20

40

60

80

100

120

Vit C CAN - ET

1 ug/mL

LAG - MET

50 ug/mL

CAM - MET

50 ug/mL

MUÑ - AC

50 ug/mL

HIP -MET

50 ug/mL

LAG - AC

100 ug/mL

YAC - ET

200 ug/mL

MAC- K -

AC

200 ug/mL

MAC- A -

AC

200 ug/mL

Concentración

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE PRINCIPIOS ACTIVOS DE PLANTAS CON ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE

LAGARTO CASPI , CALOPHYLLUM BRASILIENSE

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA (ESPAÑA)

Lepidium peruvianum Ch. “MACA”

UNIVERSIDAD DE SALAMANCA (ESPAÑA)

199 3.0

MUCHAS GRACIASMUCHAS GRACIAS

http://www.usal.es

(BECAS INTERNACIONALES)

Dra. Lucy A. Ibáñez Vásquez [email protected] [email protected]

antioxidantes 2008 dra.ibanez

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