tetracycline-resistance genes of clostridium perfringens, clostridium septicum and clostridium...

9
Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema Yoshimasa Sasaki * , Kinya Yamamoto, Yutaka Tamura, Toshio Takahashi National Veterinary Assay Laboratory, Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries, 1-15-1 Tokura, Kokubunji, Tokyo 185-8511, Japan Received 5 February 2001; received in revised form 17 May 2001; accepted 1 June 2001 Abstract The minimal inhibitory concentrations MICs) of 10 antimicrobial agents against a total of 33 isolates of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii from cattle affected with malignant edema in Japan was determined. The low MIC activities of benzylpenicillin con®rm the place of benzylpenicillin as the antibiotics of choice for treatment of malignant edema. Five 22%) of 23 C. septicum strains, ®ve 71%) of seven C. perfringens strains and all strains of C. sordellii showed resistance to oxytetracycline. These oxytetracycline-resistant strains carried tetracycline-resistance genes [tetAP), tetA408P), tetBP) and tetM]. The sequences of the tetracycline-resistance genes of some C. septicum strains were completely or nearly completely identical to those of strains belonging to other clostridiual species. This is the ®rst report of resistance of C. septicum to tetracycline. # 2001 Published by Elsevier Science B.V. Keywords: Cattle-Bacteria; Clostridium perfringens; Clostridium septicum; Clostridium sordellii; Tetracycline resistance; tet-gene 1. Introduction The genus Clostridium comprises a group of microorganisms of which many are pathogens in both humans and animals. Most of them are normal inhabitants of soil, Veterinary Microbiology 83 2001) 61±69 * Corresponding author. Tel.: 81-42-321-1841; fax: 81-42-321-1769. E-mail address: [email protected] Y. Sasaki). 0378-1135/01/$ ± see front matter # 2001 Published by Elsevier Science B.V. PII:S0378-113501)00402-3

Upload: yoshimasa-sasaki

Post on 16-Sep-2016

217 views

Category:

Documents


3 download

TRANSCRIPT

Page 1: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

������������������� ��� �� ������������ �������� ��������� ������ ��

��������� ��������� ������� ���� �������������� ��� ��� �� �����

�������� ������� ��� ��������������� ������� ����� ��������

�������� ���������� ����� ����������� �������� � ����������

�������� ��� ���������� ������ �� ��� !� ��"�� �� �� �#��#���� $����

������� � �������� !!"# ������� ������ ���� "$ %�� !!"# ����&��� " '�� !!"

��������

��� ���� ������ ���������� (%)*�+ �� "! ��������� � ��� � ��� � ����� �� ,,

������� �� ��������� ��� �������� ��������� ������ �� ��������� ��������� ���� ������

�������� ��� ��� �� ����� '�&� ��� ��������- ��� ��� %)* ������� �� ��.��&����

��/�� ��� &���� �� ��.��&���� �� ��� ������� �� ����� ��� �������� �� ��� �� �����-

��� ( 0+ �� , �% ������ ������ /�� ($"0+ �� ���� �% ��� ������� ����� �� ��� ����� �� �%

��������� ������ �������� �� �1�����������- ����� �1������������������� ����� ������

������������������� ��� 2����(3+� ����&'#(3+� ���((3+ �� ���%4- ��� ��5����� �� ���

������������������� ��� �� ���� �% ������ ����� ���� ���&������ �� ����� ���&������

������ �� ����� �� ����� ���� �� ����� ���������� �&����- ��� � ��� /��� ��&��� ��

�������� �� �% ������ �� ����������- � !!" 3������� �� 6������ ����� 7-8-

!��)����* *������7������# ��������� ��� �������# ��������� ������# ��������� ���������# ����������

��������# ���� ��

� ���� ������

��� ��� ��������� ���&���� � ���& �� ������ ���� �� ���� ��� ���

&���� �� ���� ����� �� �����- %��� �� ���� ��� ����� ������� �� ����

8������� %������� � 9, ( !!"+ :";:<

� *�����&�� ������- ���-= �9"�> �, "�"9>"# ��1= �9"�> �, "�"$:<-

+���� �������= ������?���- �-@& (�- �����+-

!,$9�"",�A!"AB ; ��� ���� ������ � !!" 3������� �� 6������ ����� 7-8-

3))= � ! , $ 9 � " " , � ( ! " + ! ! > ! � ,

Page 2: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

����� �� ��� ����������� ����� �� �� �� �&&������� &���� �� (%���� �� ��-� "<:<#

%��� "<$�+- %�������� ��������� ��� �������� ��������� ������ �� ���������

��������� ��� ���� ������� ���� ����� �� ��� �� ����� ������-

��� �����&������ �� �% ��� �������� �% ������ �� �% ��������� �� �����&����

��������� � ��� ���� ��� �������� (C���� �� ��-� "<9"# 7��.�� �� ��-� "<9�# D����

�� ��-� "<9,+- E������� ������� ������ ���� ������� ���� ��������� � ���

��� �� ��� ���� �����&�������� ��� ��� ���� ����� �� ����- %�� �����������

��������� � ��� ��� � ��� �������� � ��� C����&����� �������- F ��� �����

���� ������� ��� �� ����������� ��������� � ��� ��� ����� ��� �&&������ ��

������� �������- G� ��������� ���� ���� ��� �����&����� ������ �� ���������

� ��� �� �% ��� �������� �% ������� �� �% ��������� ����� ������� ���� ������ ��������

��� ��� �� �����-

) ��� ������ /�� ����� �� �% ������� /�� ����� �� �% ��� ������� �� ����� �����

�� �% ��������� ���� ���� �� �� ������� �� �1�����������- )� ��� ��� ��&����� ���� �%

��� ������� ��� ���3 �� ���%� ���������� �������� ��������� (H���� �� �����

"<<:+- ���3 ������ ��� ������� ��� 2����(3+ �� ���((3+4 ���� ������& �� "$ �&

(���� �� ��-� "<<>+- %�������� H���� �� ���� ("<<:+ ���� ��&����� ���� �����������

������� ������� �� �% ��� ������� ���� ���((3+ ����� ����&'#(3+� ���� ������ ���

����� ��� ��� " �����1�������� ��� ���� �� ��� ���I(3+ &����� �� ����

����&'#(3+ � �� �� ��� &�� ���� �� ����(3+- G� ��������� ���� ���� �������

��� �1������������������� ����� �� �% ��� �������� �% ������ �� �% ���������

������� ���� ������ �������� ��� ��� �� ����� ������ ����(3+� ����&'#(3+� ���((3+

�� ���%-

� ��������� �� ����� �

,%�% (�������� �������

I ����� �� ,, ����� ��� �������� ��� ����� �� ��������� �����&�����- ������

����� ����� �� �% ������� ���� ����� �� �% ��� ������� �� ����� ����� �� �% ���������

���� ������� ���� ,! ����� ������ �������� ��� ��� �� ����� '�&�- ) ���

������ �% ������ �� �% ��������� ���� ������� ���� ��� ���� ������� �� ������

������% ������ ���% ��� ����������� ������ ���� ��� ���� ����- ��� ����� ����

������ !0 ������ ������ ��� �� ���.� �� �9!�* ��� ���� ��� �����&�����

������- ����� ����� ���� ���/�� �� ���� ��������� ������������� �� �� ��� ��� �� �

3*� ������ (����� �� ��-� !!!+- �% ��� ������� ���� '*%" <! (I�** "," >+ ��� ����

���� �� � ������-

,%,% -������������ �����

��� ���� ������ ���������� (%)*�+ ���� �������� �� ��� � ��������

������ �������� �� ��� J����� *������� ��� *���� H��������� �������� ("<<$+-

����� �������� ������ �� ��������� � ��� ���� ���&������ �� G���;*��� ��

� ��� ��� ������ ���������� �� ���� !-!:, �� " 9 � A��- )����� ����

: .% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435

Page 3: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

&��&���� ���� ��� ����� ���� ���� ��� �� ���� ���� ��� �� ,$�* ��� > �-

�� �������� (�&&��1������ "!� *�K &�� �&��+ ��� �&&��� ��� � �����&����� ��

&��������� G���;*��� �� � ��- ��� &����� ���� �������� ����� >9 � �� ������

����������� �� ,$�*- ��� %)* ��� ��/�� �� ��� ������ ��������� �� ���� ������

���� ����� ����� �����- �% ��� ������� ���� '*%" <! (I�** "," >+ ��� ���� �� �

������� ������-

,%0% 6�� �����������

�� ������ ����������� DJI ���� �������� ����� " �� �� � ���� �� ������ &����

������� ���� &������� �� �����&���� "�! �� �� ���������6� ( �0� �A� ��������

"! �% ���;E*�� " �% 6D�I� "�! �% J�*�+ ���� > � A�� �� ����.���- ���

DJI �1������ �� &��/���� ��� &�������� ������ �� ��� ������� �� ������� �� ��-

("<<$+-

,%&% 6�� ���� ������� ��� ��7������ � ��� 8�9 �������

3*� ��� &�������� � ������ ������ �� "!! �� ���� "� 3*� ������ (% �

����+� -� �% % *� � !- �% �J�3 �1����� -� ��� �� HI ��5 DJI &���������

(������ HI ��5 ��# ������ ���.� *�- H��- ������ '�&�+� "! &��� �� ���� &�����

�� " �� �� ���� ���&���� DJI ������- ��� &����� ��� ���� ����� "- *����

������ ���� � ��� � � ��������� �� <>�*� �������� �� � ������� ����

����� �� " � ��������� �� <>�*� " � ���� �� >��*� �� "-� �

�1���� �� $ �*- ����� � ������ ���� �������� �� $ � �1���� �� $ �*- �����&�/�� &������� ���� ��&������ �� �������&������ "-�0 (�A�+ � ����� ��� ��

����� ��� ������ ������- 3E� ������ (������ ���.� *�- H��- ������ '�&�+ ���

���� �� � �.� ������-

����� &���� &��� 2%"� % (G���� �� ��-� "<<:+4� 2",::� ",:$ (H���� �� ����� "<<:+4

�� 2",$,� ",$> (H���� �� ����� "<<:+4� ���� ���� ����� �� ������ ���%� ����(3+ ��

���((3+� ���&�������- �� ���� ��� ����(3+� ����&'#(3+ �� ���% ��5������ &����� ����

��� �� ���� ��5����� �&������ �� ��������� �� ��� ����(3+ �� ���% ��5�����-

%�������� �� ������� ��� ����&'#(3+ ��5����� ��� ��5���� ��������� �� ����&'#(3+

(H���� �� ����� "<<:+ ��� ���� ��� ��� &���� �6�I3�- ��� ����(3+ ��5����� �� �%

������ ���� %�� ����� �% ��������� ����� (�%!!$� �������� �� ��������>+

�� �% ��� ������� ���� G������� ���� ��������- ��� ��&�/�� &������� ����

��������� ���� � ����� ���- I�������� DJI ��5��� �� ���&��� �� DJI ���

&�������� � � DJI ��5����� (%���� ,$,I� 36 7��������� *�- H��-� K�I+- ���

��5����� ���� �������� �� ����� ��5��� - I�� ��� ��5����� ���� ��/����

�� ��5��� ���� ������- ��� ��5����� ���� ��� �� ������ ��� DD7' �����

���� ���� ��� ������� ������= I7!�><9> (���% ��5���� �� �% ������ ����

�� �����:+� I7!�><9 2����(3+ ��5���� �� �% ������ ���� %�4� I7!�><9!

2(����(3+ ��5���� ���% ��� ������� ����G�������+4� I7!�><9, 2(����&'#(3+ ��5����

�� �% ������ ���� *��� �+4 �� I7!�><9" 2(����&'#(3+ ��5���� �� �% ��� �������

���� �� �����>+4-

.% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435 :,

Page 4: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

� �������

0%�% ������������ ��������������� � �% ��� �������� �% ������ ��� �% ���������

%)*� ��� ���� ����� - I�� �� ��� ����� �� �% ������ �� �% ������������� � ���

�����&���� (%)*= L!-!:, � A�+ �� &����� (��&���� ��.��&����+- ��� �%

��� ������� ����� ���� ���� �����&���� �� &����� ��� ���� ��� ����� �� �% ������

�� �% ���������- ��� �% ������ ����� ���� ���� �����&���� �� ����.��� ���M�1��

�� ������ ��� ���� ��� ����� �� �% ��� ������� �� �% ���������- F ��� ����� ����

��� �% ��������� ����� ���� ���� �����&���� �� ���������� ��� ���� ��� ����� �� �%

������ �� �% ��� �������- ��� ������ %)*� ��� �% ��� ������� �� �% ���������

������ ������ �� ��� �������� &����- ���� ����� ���% ��� ������� �� ��� ����� ��

����� "

3����� ���� ��� ��&������ ��A�� ��5���

3���� ��5���� �� � 3�����

%" ���C�CCI*IIICC�I*II*CIC�,� ���% ;�

% ���*CC�IIIC��*C�*I*I*I*�,� ���% ;�

�6�%, ���CCC*����CII�CCICCIIII�*�,� ���% ><�;�"$�

�6�%> ���CI*I*C**ICCI*I�I�CCI����,� ���% >�; :$

�6�%� ���CIII�*IC�ICII��C****I�*�,� ���% , >;,!

�6�%: ���CII*���I**CII�*�CII*�,� ���% � :;�>�

�6�%$ ���C��*ICI��*CC�IIIC��*�,� ���% �>�;� :

�6�%9 ���CCICI�I*IIIC*�I��C**�,� ���% "!!$;"! :

�6�%< ���CC*II�IC*���C�I�*�**�,� ���% "! :;"!!$

�6�%"! ���**���*�CCC*��**I��CC�,� ���% ",>,;",:

�6�%"" ���**II�CCIIC***ICIIICC�,� ���% ",: ;",>,

�6�%" ���**�C��IC�I****IC*ICI����*CC�,� ���% "��!;"�$:

�6�%", ���**CIIII�*�C*�CCCC�I*�II*ICC�,� ���% "�$:;"��!

�6�%"> ���*IICIII**I�I���I�I�II*II*�,� ���% >$>; >�!�

",:: ���*I*ICI��C�I�CCCCI��ICC�,� ����(3+ ;�

",:$ ���*I���I�ICIIIC*I*IC�IC*�,� ����(3+ ;�

�6�I3, ���CIII�I*�ICCI�CC�CI�CI��I�,� ����(3+ "!,<;"!: �

�6�I3> ���CIIC*��CCI��C*CCIICIIC�,� ����(3+ ,$,;,<>

�6�I3� ���*IC�C*��IC�I*�I��**�,� ����(3+ >9";>:,

�6�I3: ���*�I�C*��**�III*��CCI�,� ����(3+ $:";$9!

�6�I3$ ���C�C�C*�I*CI��**�I�I�,� ����(3+ ,>>; , :�

�6�I3� ����*III��I�*��*I�����II�***�,� ����(3+ ;

",$, ���I*IICII�I��I���CI*I*I��,� ���((3+ ;�

",$> ���I��*����CII����*�I*�CC�,� ���((3+ ;�

� 3����� �� ��� �� �� ���% �� ����(3+ ��5���� �� �% ������ ����� �� �����: (������� �����=

I7!�><9>+ �� %� (������� �����= I7!�><9 +� ���&�������-� 3����� ���� ��&����� �� G���� �� ��- ("<<:+-� 3����� ���� ��� �� � ��� ���� �� ��� ��5���� �� ��� ���% �� �� +% ������� (������� �����=

%9� �+-� 3����� ���� ��&����� �� H���� �� ���� ("<<:+-� 3���� ��� ��� �� � ��� ���� �� ��� ��5���� �� ��� ����(3+ �� �� �% ��� ������� (������� �����=

H !9!!+-

:> .% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435

Page 5: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

�����

������� �� �����&����� ���� �� �% ������� �% ��� ������� �� �% ���������

I�������� � �� %)* (� A�+

�� � %)*�! %)*<!

7�.��&����

�% ������ L!-!:, (���+ L!-!:, L!-!:,

�% ��� ������� !-" �; !- �

�% ��������� L!-!:, (���+ L!-!:, L!-!:,

I�&���

�% ������ L!-!:, (���+ L!-!:, L!-!:,

�% ��� ������� !-!:,;!- � !-!:, !- �

�% ��������� L!-!:, (���+ L!-!:, L!-!:,

*���.��

�% ������ L!-!:,;!-!:, L!-!:, L!-!:,

�% ��� ������� !- �;> " >

�% ��������� !- �(���+ !- � !- �

F1�����������

�% ������ L!-!:,;": !-!:, 9

�% ��� ������� !-!:,;": ": ":

�% ��������� ":;, ":

6�����1��

�% ������ !-" �;!- � !-" � !- �

�% ��� ������� !- �;" " "

�% ��������� "(���+ " "

6���������

�% ������ !-�;> " >

�% ��� ������� ;> >

�% ��������� !-" �(���+ !-" � !-" �

8� ����

�% ��� ������� !- �;!-� !- � !-�

�% ��������� !-" �;!- � !- � !- �

H�����

�% ������ !-" �;!- � !-" � !-" �

�% ��� ������� !-�;9 > 9

�% ��������� !-�;9 9 9

8������

�% ������ !-�; " "

�% ��� ������� !- �;!-� !-� !-�

�% ��������� !-�;" !-� "

*������&�����

�% ������ !-!:,; !-� "

�% ��� ������� ;9 9

�% ��������� (���+

.% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435 :�

Page 6: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

�% ������������� ������� �� ������- F ��� ����� ���� ��� �� ��� ����� �� �% ������

���� � ��� �����&���� (%)*<!= !-" � � A�+ �� ������- ��� �1����������� %)*� ��

�% ������ �� �% ��� ������� ������ ��� �������� &����� �� ��� %)* �����&��� ��

��� ����� ������� �� �1����������� ���� ������� �� �� " � A� (�% ������+ �� � A�

(�% ��� �������+ (���� �� ����+- F ��� ����� ���� ��� %)*� �� ��� �� ��� �% ���������

����� ���� ���� ��� ": � A�- ��� ����� �� �% ������� /�� ����� �� �% ��� �������

�� ����� ����� �� �% ��������� ���� ���� �� �� ������� �� �1����������� (����� ,+-

0%,% ����������������������� ����� � �% ��� �������� �% ������ ��� �% ���������

��� �1����� �� ������������������� ��� �� �% ��� �������� �% ������ �� �%

��������� ���� ���� ���� �� 3*�- ��� 3*� ������� �� ��� ����� (�� �����:� %��

*��� �+ ��� ���� � - "- ��� ����� &���� &��� (���%� ����(3+ �� ���((3++ &�������

��� &������� ��� ���� �� >!:� $:> �� ">:" �&� ���&�������- ��� ���� �� �����:�

���� ��� ������ ������� �� �1����������� (%)*= � A�+ ������ ��� ���% (����� ,+�

�1 ����� (%�� �%!::� G�������� �%!!$� �������� �� ��������>+ ������ ����

����(3+ �� ���((3+� �� �1 ����� (*��� �� ��������"� ��������,� �� �����>�

�%!$� �� �%!$>+ ������ ��� ����(3+- ��� �1�����������������&���� ����� �� ��

����� ��� �������� ��� �� 3*�- ) ��� ��� ����� ���� �% ������ �� ���� �� �%

��������� ��� ��� ������� ���� ��� ���� ����� �% ������ ������ ��� ����(3+ �� �%

��������� ������ ����(3+ �� ���((3+- ����� ������� ����� ���� ������ ���� �� ��� ���

�� ������ ����� ���� ��������� ��� �� ����� ��� ������������������� ���������-

��� ����(3+ ��5����� �� �% ������ ���� %� �� ��� �� ��� �% ��������� ����� ����

���&������ ������ �� ���� < -"0 ������ ��� ��� ���� �� �% ��� ������� ����

����� ,

F1����������� %)*� �� ��� ������� ����� �� 3*� �������

���� %)* (� A�+

F1����������� ����(3+ ���((3+ ���%

�% ������

*��� � 9 � � �%� ": � � ��� �����: � � ���������" 9 � � ���������, ": � � �

�% ��� �������

�� �����> ": � � �G������� ": � � ��%!:: ": � � ��%!$� ": � � ��%!$> > � � �

�% ���������

�������� , � � ���������> ": � � ��%!!$ ": � � �

:: .% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435

Page 7: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

G�������- ��� ����&'#(3+ ��5����� �� ��� ����� �% ������ ����� ���� ���&������

������ �� ���� ������� �� " �& ���� ���� �� �% ��� ������� ���� �� �����>- ���

���% ��5���� �� �% ������ ���� �� �����: ��� <<-:� <9-$� <$-$ �� <�->0

������ ��� ��� ����� �� +���������� ������� (������� �����= N!>,99+� ���������

����������� (������� �����= H" > +� -����������� �������� (������� �����=

N<!<,<+ �� +������������: ������������ (������� �����= I7!,<9>�+� ���&�������-

� ����������

��� �����&������ �� �% ��� �������� �% ������ �� �% ��������� �� ���������

� ��� ���� ��� ��&����� (C���� �� ��-� "<9"# D���� �� ��-� "<9,# 7��.�� �� ��-� "<9�# H����

�� ����� "<<:+- )� ��� ���� ��� ��&����� ���� ��.��&���� ������ � � ������

� ��� ����� ��� �� ��� �� ��� ����� �� �% ��� ������� �� ���� ���������� ���

�������� �� ��� ������� �� ����� ��� �������� ����� (���������� "<9<+-

7�.��&���� ���� ��� ����� ���� ��� ��� �������� �� ��� �� ����� �������

������� ��.��&���� � � �������&������ &���� �� ���� ������ ��� ������� �

��� �������� ��������� ��� ������ �����- ) ��� ������ ��� � � ������ �� ��.��&��

��� ��/���� ��� &���� �� ��.��&���� �� ��� ������� �� ����� ��� �������� ��

��� �� ����� ������- I�� �� ��� �% ������ ����� �1���� ���� �����&���� ��

������� ������ � ���� ����� �� �% ��� ������� �� �% ��������� ���� ������� ��

������� �� ��� ��� ��&����� &�������� (���� �� ��-� "<$9� "<9�# C���� �� ��-� "<9"#

7��.�� �� ��-� "<9�+-

) ��� ������ /�� ����� ( "-$0+ �� �% ������� /�� ����� ($"->0+ �� �% ��� �������

�� ����� ����� �� �% ��������� ������ �������� �� �1�����������- ��� �1����� �� �%

������ ����� ������� �� ���������� ��� �� ��� ��������- C���� �� ��- ("<9"+� ���

������ , ���� ������� �� �% ������� �������� ���� ��� �� ��� �% ������ ����� ����

������ (%)*<!= !- � � A�+ �� ��1������- ) ��� &����� ������ /�� �1������������

�������� ����� �� �% ������ ���� ������� ���� ������ �������� ��� ��� �� �����-

��� ����� ��� ��� ��������� �� ������������������� ����� ���% ������ ���� ������ �

���� �� �� �� ��� ����� �� �1����������� �� ��������������� �� �����������

� - "- 3*� ��&������ �� ���%� ����(3+ �� ���((3+ ���� �% ������ �����- 3*� ������� ��� ��� �����

&���� &��� 2���%� ����(3+ �� ���((3+4 ���� ���� ���� ";,� >;: �� $;<� ���&�������- H�� %= &E�

������# H��� "� > �� $= �� �����:# ���� � � �� 9= %�# ���� ,� : �� <= *��� �-

.% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435 :$

Page 8: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

��������� � ��� ��� ������ ����� ������� � � ����� '�&� ���� ����������� ���

�� ��� ���� �����&�������� ��� ��� ���� ����� �� ���� ����������� �� �����������

��������� � ��� �� � ��� �� ���� ��� �1 ����� ���-

I� � ������ �� ��� ������� ��� &������ � �� ������������������ ������� ����� ��

� ��� ��� ����������� ����� �� ������ ��� ���� �� �����-

)� ��� ��� ��&����� ���� ��������� �&���� ������� �� ���������� ���� ���3� ���%�

���� �� ���H� ���������� �������� ��������� (������� �� ��-� "<<># H���� �� �����

"<<:+- ����� ��� ��� ������� � ���������� &������ �� ����&���� (I������ ��

����� "<9�# *������ �� C�����7����� "<9:+- ) ��� ������ ��� ���% ��5���� �� �%

������ ��� ���� �� �� <<-:0 ������ ��� ��� ���� �� +% ������� &����� ���

����������� �����- %�������� � ��� ��� ��&����� ���� ���% � ������ � ��� ��@� ����

����&���� �5�3 �� ���&�� ���� ��� ����������� ���� +% ������� �� ���������

����������� (G������ �� ��-� "<9<+- ) ��� &����� ������ � ��� ���� ���� ��� ����(3+

��5����� �� �% ������ ���� %� �� ��� �� ��� �% ��������� ����� ���� ���&������

������ �� ���� < -"0 ������ ��� ��� ���� �� �% ��� ������� ���� G�������- ���

����&'#(3+ �� ��5����� �� ����� �% ������ ����� ���� ���&������ ������ �� ����

������� �� ��� " �& ���� ���� �� �% ��� ������� ���� �� �����>- ���������� ��

��&�����.� ���� ���� �� ���� ���� ��� ������� �� ���������� �� ��� ��� ��� ����

����&��� �� ����� �� ����� ���� ����� �� ��������� �&����� ����������������

���� ��������� (���3 �� ���%+ ��� ����������� ����� �� ��� ��� �� ������

�����- %�������� ��� ��� ����� �� ��������� ��� �&���� �� ������������������

�� ����� ���� ����� �� ��������� �&����� ��� � �� ���- G�� � ��� ������� �

������ ����� � ������������������ ��� �� ����� ����� ���� � &����� ��� ����

��� ���� ��� ��� ���� ��� ���� ���� �� ��� ��� ��� ������& ��� �� �����-

) ��� &����� ������ ������������������� ����� ������ ���3 �� ���% ��- ��� ���3

�� � ���� ��� ��������� �&���� (������� �� ��-� "<<># H���� �� ����� "<<:+- F

��� ����� ���� ��� ���% �� � ���� ���� C����&����� �� C����� ���� �������

(�������� "<<:+- %�������� ��� ����� ��� �� ���������� �������� ��������� ���

���� ������� ������� ���� ������ ������ �� ����� �� ����� �� ���� �����- ���

������ ��� ���O �� ��� ��� ���� ���� C����&����� �� C����� ���� ��������

���� �� ��������� (���������� �� 8��;������ �&����� �� ��� ����������� �� �����

�������� �&���� (J����� �� ��-� "<<># H� �� ��-� "<<$+- ������� ����� � ����� ��

���� ��� ��� ��������� �� ��� ���������� �������� ��������� ������� ����

���� �����-

�������� �������

��� ������� ���� ��� ����� �� ��� H������� E� �� ������ *����� ������ '�&� ���

���� &������ ����� �������-

����������

I������� H-'-� ����� '-)-� "<9�- *�� �� ������ �� ��� ��������� ��� ������� ���������� ��������

&����� &*G,- 3����� ",� "��;": -

:9 .% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435

Page 9: Tetracycline-resistance genes of Clostridium perfringens, Clostridium septicum and Clostridium sordellii isolated from cattle affected with malignant edema

7��.��� '-�-� H������ 3-J-� ������� I-'-� 3���&�� �-D-� G���� I-�-� "<9�- I����� �����&����� �� �����

������� �� ��������- '- I������- *��������- "�� "9";"9�-

*������� D-7-� C�����7����� *-� "<9:- *�@� ���� ����&���� �� ��� �������� �� ������ ��������

����&������- I�- ���- %������- >!� :,�;:�<-

D����� C-J-� D������� H-I-� 8� I������ 3-�-� "<9,- �����&����� �� �������� ���� ���� ����� �� "

��������� � ��� ���� ���� ���� ��� ����� &������- '- I������- *��������- " � ,>$;,�:-

C����� 6-H-� ������ �-D-� �� ���� �-%-� "<9"- �����&����� �� ��������� ������ �� , ���������

� ���- I������- I ��� *��������- !� 9� ;9�,-

H� � P-� ����� D-6-� 7�� ��� �-6-� ��� ��� '-J-� �������� %-*-� "<<$- D������� �� ������ �� ���

���������� �������� �������� ���O- '- I��������- *��������- >!� ��";��<-

H����� D-� ����� '-� "<<:- C���� �� �.��� �� �������� �� ���������� �������� ���������

��������� ��� �������- I������- I ��� *��������- >!� �!!; �!>-

%����� G-6-*-� *���� 6-3-� E������ H-8-� "<:<- I����� ������� �� ��� ����������� ����� �� ����

��������� ����� ������- '- )����- D�- ""<� :>";:><-

%��� �-� "<$�- *������� ��� �� ��� I�������- '&- '- %��- ��- 7��- 9� !"; ",-

J����� *������� ��� *���� H��������� ��������� "<<$- %������ ��� ��������� �����&����� ���� ��

������� �������� >�� 6���- I&&����� ������� %""�I>- J����� *������� ��� *���� H���������

��������� G���� 3I-

J������ %-3-� E� � C-� ����������� J-7-� "<<>- 6����� ��� ������ ���.���� ������� �� ���O ������

������� ���� ������� ����.� ����� �� ������� ���� ������� ����.� ��������- I&&�- 6���-

%������- :!� , ��;, :!-

�������� %-*-� %�������� H-8-� %������ 3-� %��� �� �-� "<<>- *��������.��� �� ��� ���� ���� ��

������ �������� ��������� �� �����- '- I������- *��������- ,,� >"<;> <-

�������� %-*-� "<<:- ���������� �������� ���������= �������� �� ����� �� ����� �� �1&������

���� ������� �� ��������- �6%� %������- ���- "<� "; >-

���������� '-6-� "<9<- �����&����� ���� �� ������� �������- *�- H��- %��- <� ,<; �>-

����� '-)-� %����� 6-I-� ������� 6-7-� *��&��� 6-� D���� *-H-� "<$9- )������ �� ���������.��� ��

����&�� ������ ������� ��������� ��� ������� ����� ���� &���� �����- I������- I ���

*��������- ",� 9$";99!-

����� '-)-� 7������ '-�-� G����� I-'-� ����� �-� "<9�- ��� ��������� �� ������ �������� ���������

��� ������� ���� & �- I���- 8��- '- : � $:; $9-

������ �-� ��������� �-� ��@��� I-� J�������� %-� ������� �-� !!!- ��&� �������� �� ����������

�� &���� �� �������� �� � ��� �� &��������� ��� ������ ����� � ��� ":�; ,� �DJI �&����

�� �- ���- 8��- ��- :<� 9<; <>-

����� '-� %�%����� H-%-� H����� D-� H���� �-7-� ����� '-)-� "<<>- ��� ��������� ��� ������� ���3 ��������

���&���� ��� ������&& ���= ����(3+� ���� ������� ����� ���������� �����1� �� ���((3+� ����

� ������� �� ��� �������� &������� ����� �� ������������������� ���������- %��- %������- ""�

>!,;>"�-

�������� �-� E���.���� J-� ������� �-� ������ �-� ������� �-� "<<$- D������ �� ��������� ������

������� �� �� &��������� ��� ������- '- 8��- %��- ��- �<� 9�,;9��-

G����� K-*-� J������� %-� )��� �-� F������� �-� F����� �-� �������� *-� �� �� I-� )���� %-� "<<:-

D������ �� ���� �� ���% -������������ ���� �� ��� ������� �� &��������� ��� ������- '-

I����- ><� "" $;"", -

G������� �-*-� 3����� I-� I����� �-'-� ��� � %-� "<9<- ������� �� ���&� �� �5�3 �� ���������

�����������- 3����� � ":<;"$>-

.% -��� � �� ��% / ���������� ������������ #0 1,''�2 3�435 :<