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Servicio de Proteómica y Bioquímica CABD Responsable científico: Belén Floriano Pardal Responsable técnico: Laura Tomás Gallardo Encuentro CABD-IG Junio 2016

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Servicio de Proteómica y Bioquímica

CABD

Responsable científico: Belén Floriano Pardal

Responsable técnico: Laura Tomás Gallardo

Encuentro CABD-IG Junio 2016

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Encuentro CABD-IG Junio 2016

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SERVICIOS

Separación de proteínas mediante Electroforesis Nativa, Electroforesis

monodimensional SDS-PAGE y Electroforesis bidimensional 2D-PAGE.

Separación de proteínas de una mezcla compleja mediante purificación

de proteínas.

Estudios de proteómica cuantitativa mediante electroforesis.

bidimensional con marcaje fluorescente (2D-DIGE).

Estudios de proteómica cuantitativa sin gel (iTRAQ).

Estudios de interacciones moleculares (Biacore).

Caracterización de actividades enzimáticas.

Cuantificación de la expresión de proteínas mediante western blot.

Asistencia técnica en el diseño y realización de experimentos con

proteínas.

Entrenamiento personal en el uso de equipos o programas de análisis

de imagen.

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Laboratorio de Espectrometría de Masas MALDI-TOF (Upo)

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EQUIPAMIENTO

a) Miniprotean® Tetra-cell (Bio-Rad)

Electrophoresis cell for 1-D or 2-D gel electrophoresis to

run up to four minigels (7 x 8 cm) at the same time.

b) IPGphor (GE Healthcare)

Unit for Isoelectric focusing equipped with individual Strip

Holders (6 of 24 cm and 6 of 7 cm long) and a Manifold

Unit (to run up to 12 Immobiline DryStrips from 7 to 24 cm

at the same time).

c) Ettan Dalt six (GE Healthcare)

Electrophoresis cell for 2-D able to run up to 6 maxi gels

(24 x 20 cm) at the same time.

d) ÄKTA Explorer (GE Healthcare)

Platform for protein purification

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e) BiacoreTM X100 (GE Healthcare)

f) Typhoon 9410 and Image scanner III

(GE Healthcare)

g) ChemiDoc XRS

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1. Abengoa Research (Sevilla): Caracterización de celulasas.

2. IBVF-CSIC (Sevilla): Análisis proteómico de plantas de fresas.

3. Centro Médico Trigrama (Canarias): Análisis de los efectos de la ingesta de

placenta en mujeres tras el parto.

4. Universal Diagnostics, S.L. (Sevilla): Caracterización diferencial de proteínas

en plasma humano.

5. Estación Experimental El Zaidín-CSIC (Granada): Caracterización de la unión

de un regulador transcripcional a su región promotora mediante SPR.

6. CABIMER (Sevilla): Análisis de interacción de la alfa-sinucleína con la

chaperona Hsp70 mediante SPR.

7. Bionaturis: Purificación de proteínas.

8. Instituto de Biología Molecular e Celular (Oporto): Caracterización del

fosfoproteoma de discos imaginales de Drosophila.

SERVICIOS EXTERNOS

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PROTEÓMICA APLICADA A BACTERIAS DE INTERÉS MEDIOAMBIENTAL

Laura Tomás Gallardo, Eduardo Santero y Belén Floriano

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Visualización del 3% de la proteína presente en cada spot. Visualización del 97% de la proteína presente en cada spot.

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2D-DIGE (Difference gel electrophoresis)

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T/G

N/G

Naftaleno/tetralina

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Tomás-Gallardo, L., Canosa, I., Santero, E., Camafeita, E., Calvo, E., López, J.A., and B. Floriano*. 2006. Proteomic and transcriptional characterization of aromatic degradation pathways in Rhodococcus sp. strain TFB. Proteomics 6:119-132. Tomás-Gallardo, L., Santero, E., Camafeita, E., Calvo, E., Schlömann, M., and B. Floriano*. 2009. Molecular and biochemical characterization of the tetralin biodegradation pathway in Rhodococcus sp. strain TFB. Microbial Biotechnology 2:262-273. Tomás-Gallardo, L., Santero, E., and Floriano B*. 2012. Involvement of a putative CRP-like binding sequence and a CRPlike protein in glucose-mediated catabolite repression of thn genes in Rhodococcus sp. strain TFB. Applied and Environmental Microbiology 78:5460-5462. Tomás-Gallardo, L., Gómez-Álvarez, H., Santero, E., and B. Floriano*, B. 2014. Combination of degradation pathways for naphthalene utilization in Rhodococcus sp. strain TFB. Microbial Biotechnology 7:100-113.

Encuentro CABD-IG Junio 2016

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Encuentro CABD-IG Junio 2016

Proteome-wide search for PP2A substrates in fission yeast. Manuel Bernal, Jacob Zhurinsky, Ana B.

Iglesias-Romero, Maria A. Sanchez-Romero, Ignacio Flor-Parra, Laura Tomas-Gallardo, Antonio J. Perez-

Pulido, Juan Jimenez and Rafael R. Daga. Proteomics 2014, 14, 1367–1380

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Encuentro CABD-IG Junio 2016

Total protein staining with Coomassie based stain (left panels) and

phosphoprotein-specific staining with ProQ Diamond stain (right panels)

of Gpd1 protein spots resolved in 2D gel.

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Encuentro CABD-IG Junio 2016

ECM-Regulator timp Is Required for Stem Cell Niche Organization and Cyst Production in the

Drosophila Ovary. Pearson JR, Zurita F, Tomás-Gallardo L, Díaz-Torres A, Díaz de la Loza MdC, Franze K,

Martín-Bermudo D, Acaimo González-Reyes (2016). PLoS Genet 12(1): e1005763.

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Proteómica cuantitativa sin gel

iTRAQ (isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)

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Encuentro CABD-IG Junio 2016

Chaperoned amyloid proteins for immune manipulation: a-Synuclein/Hsp70 shifts immunity toward a

modulatory phenotype. Adahir Labrador-Garrido, Marta Cejudo-Guillen, Rebecca Klippstein, Erwin J. De

Genst, Laura Tomas-Gallardo, María M. Leal, Javier Villadiego, Juan J. Toledo-Aral, Christopher M. Dobson,

David Pozo, & Cintia Roodveldt. Immunity, Inflammation and Disease. 2014; 2(4): 226–238

SPR (Surface Plasmon Resonance)

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Servicio de Proteómica y Bioquímica

CABD

(ponga una proteína en su proyecto)

Responsable científico: Belén Floriano Pardal

[email protected]

Responsable técnico: Laura Tomás Gallardo

[email protected]

MUCHAS GRACIAS