Mikroskopska vizualizacija morfolokih i funkcionalnih struktura bakterijske elije

Obrada materijalaObrada materijala predstavlja skup razliitih tehnika i postupaka koji imaju za cilj izolaciju, identifikaciju bakterija i po potrebi ispitivanje osetljivosti izolovanih bakterija na hemioterapijska sredstva.

MikroskopOptiki deloviOkular Makrozavrtanj Mikrozavrtanj Objektivi Telo mikroskopa Stoi za preparat Kondenzor Zavrtanj za pomeranje kondenzora Izvor svetla

Mehaniki delovi

MikroskopUkupno uvelianje mikroskopa: proizvod uvelianja okulara i uvelianja objektiva Razdvojna mo mikroskopa (rezolucija): najmanje rastojanje izmeu dve take na kome se one vide odvojeno (za svetlosne mikroskope 200 nm)

nerazdvojene

delimino razdvojene

razdvojene

Vrste preparata

1. Nativni preparat 2. Bojeni preparat

1. Direktni preparat (iz materijala) 2. Preparat iz kulture

MikroskopPreporuke za mikroskopiranje: koristiti objektive 10 ili 40 za posmatranje bakterija na nativnom preparatu koristiti imerzioni objektiv (100) za posmatranje bakterija na bojenom preparatu postaviti preparat tako da razmaz bude okrenut na gore, ka soivu objektiva

Nativni preparatNativni preparat omoguava vizualizaciju:

1. Oblika bakterija 2. Veliine bakterija 3. Pokretljivosti bakterija

Osnovni oblici bakterija

Koke (loptast)

Bacili (tapiast)

Spirohete (spiralan)

Kokobacili

Vibrio

Veliina bakterijanekoliko mikrona ali:

Thiomargarita namibia

Nativni preparatVrste nativnog preparata:

1. Nativni preparat (u uem smislu) 2. Visea kap 3. Tamno polje

Nativni preparat

Nativni preparat

Objektiv

Nativni preparat

Nativni preparat - visea kap

Nativni preparat - visea kap

Nativni preparat - tamno poljeSVETLO POLJE TAMNO POLJE

u svetlom polju se spirohete ne vide jer je popreni presek ovih bakterija 0,1 m (rezolucija svetlosnog mikroskopa je 0,2 m) tamno polje omoguava posmatranje spiroheta

Nativni preparat - tamno polje

Bojeni preparatBojeni preparat omoguava vizualizaciju:1. Oblika bakterija 2. Veliine bakterija 3. Rasporeda bakterija 4. Pojedinih struktura bakterijske elije (kapsula, spore, granule...) ne i pokretljivost

Raspored (grupisanje) bakterijaKoke Diplokoke Bacili Diplobacili Kokobacil

Streptokoke

Tetrade Sarcine

Streptobacili

Vibrio

Spirohete Stafilokoke

Bojeni preparatPodela bojenja u bakteriologiji: prosta bojenja sloena bojenja: diferencijalna specijalna

Prosto bojenje metilenskim plavim

Diferencijalna bojenja

bojenje po Gram-u bojenje po Ziehl-Neelsen-u

Bojenje po Gram-uOmoguava razlikovanje: Gram-pozitivnih bakterija (plavo-ljubiasto obojene) Gram-negativnih bakterija (crveno obojene) razlika u bojenju je posledica razlika u grai elijskog zida

elijski zid Gram pozitivnih bakterija

elijski zid Gram negativnih bakterija

Bojenje po Gram-uGram pozitivne bakterije Gencijana violet Rastvor joda Alkohol (etanol) Voda Karbol fuksin / safranin Voda Gram negativne bakterije

Bojenje po Gram-u

Specijalna bojenjaBojenje intracitoplazmatskih granula (po Neisser-u) Bojenje spora (po Hauser-u) Bojenje kapsule (po Olt-u)

Bojenje intracitoplazmatskih granula

Bojenje kapsule

Priprema razmaza za bojeni preparat