laboratorio de biologia grupo sanguineo

LABORATORIO N 8 BIOLOGIA MOLECULAR

GRUPO SANGUINEO

INDICE

I. INTRODUCCION ...................................................................................................... 1

II. OBJETIVOS ................................................................................................................ 5

III. MATERIALES Y METODOS.............................................................................. 5

IV. PROCEDIMIENTO: .............................................................................................. 6

V. DISCUSIONES ........................................................................................................ 13

VI. CONCLUSIONES ................................................................................................ 13

VII. BIBLIOGRAFIA. ................................................................................................. 14

VIII. CUESTIONARIO ................................................................................................ 15

GRUPO SANGUINEO: SISTEMA ABO Y FACTOR Rh

LABORATORIO DE BILOGA MOLECULAR Pgina 1

I. INTRODUCCION

Los grupos sanguneos humanos ocupan un lugar especial en la gentica, en primer

lugar por sus contribuciones al establecimiento de algunos principios genticos y luego

por su importancia clnica en la transfusin de sangre en obstetricia.

Antgenos del sistema ABO

Los antgenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta

semana del embrin y no se desarrollan completamente hasta despus del

nacimiento. Esta podra ser una razn para que la enfermedad hemoltica del feto y del

recin nacido por incompatibilidad ABO, sea usualmente leve. Durante el crecimiento,

se van adicionando los azcares terminales sobre la cadena de oligosacridos en la

membrana de los eritrocitos, dando origen a cada uno de los antgenos de forma

especfica. Entre los 2 y 4 aos de edad, los antgenos A y B estn completamente

desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida.

Gentica: hay tres genes que controlan la expresin de los antgenos ABO. El gen H,

ubicado en el cromosoma 19, codifica para la produccin de una enzima transferasa

(transferasa H), que une una molcula de L-fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un

precursor comn (sustancia precursora) unido a los lpidos o protenas de membrana

del eritrocito, dando origen al antgeno

H, el cual es el paso anterior en la formacin de los antgenos de los grupos sanguneos

ABO. Los individuos que son homocigticos para el gen nulo (h/h) no producen

antgeno H y desarrollan anticuerpos anti-H; por lo tanto, estas personas aparte de no

producir el antgeno H, tampoco producen los antgenos A o B, y su suero contiene

anti-A, anti-B y anti-H. Este fenotipo se conoce como el fenotipo Bombay.



Desarrollo de los antgenos del sistema ABO.

El gen ABO, ubicado en el cromosoma 9, posee tres alelos que son el A, el B y el O, que

varan de acuerdo a las sustituciones de nucletidos, las cuales determinan las

especificidades de las enzimas para las cuales codifican. El alelo A codifica para la

enzima transferasa A que cataliza la adicin de un residuo de N-acetilgalactosamina

(GalNAc) al antgeno H, generndose as el antgeno A. El alelo B codifica para la

enzima transferasa B que cataliza la adicin de un residuo de D-galactosa (Gal) al

antgeno H, generndose el antgeno B. El alelo O slo difiere del alelo A en la delecin

de un nucletido (guanina G en la posicin 261), lo que tiene como consecuencia un

cambio en el marco de lectura o frameshift y la produccin de una protena sin

actividad de

transferasa . La figura 2 ilustra la sntesis de los antgenos ABO.

El gen Se, ubicado tambin en el cromosoma 19, codifica para una enzima

(fucosiltransferasa) que se expresa en el epitelio de tejidos secretores, incluidas las

glndulas salivares y los tractos respiratorio y gastrointestinal. Esta enzima cataliza la

produccin de antgeno H en secreciones del organismo; as, los individuos

secretores poseen al menos una copia del gen Se (Se/Se o Se/se) que codifica para

una enzima funcional, produciendo antgeno H en las secreciones, el cual a su vez es



procesado como antgeno A y/o B, dependiendo del genotipo ABO del individuo. Por

su parte, los individuos no secretores son homocigticos para el gen nulo (se/se) y

por lo tanto no pueden producir la forma soluble del antgeno H.

Expresin de los genes ABO. Convenciones: Fuc: Lfucosa; Gal: Dgalactosa; GalNAc: N

acetilgalactosamina.

CARACTERSTICAS DEL SISTEMA ABO

Las personas con sangre del tipo A tienen glbulos rojos que expresan

antgenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el

plasma de su sangre.

Las personas con sangre del tipo B tiene la combinacin contraria, glbulos

rojos con antgenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los

antgenos A en el plasma de su sangre.

Los individuos con sangre del tipo O 0 (cero) no expresan ninguno de los dos

antgenos (A o B) en la superficie de sus glbulos rojos pero tienen anticuerpos

contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos

antgenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos.



Esta clasificacin internacional, debida a Landsteiner, ha reemplazado a la de

Moss, en la cual el grupo I corresponde al grupo AB de la precedente, el grupo

2 al grupo A, el grupo 3 al grupo B, y el grupo 4 al grupo O. Estos cuatro grupos

sanguneos constituyen el sistema ABO.

A causa de estas combinaciones, el tipo 0 puede transfundir a cualquier

persona con cualquier tipo y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.

FACTOR RH

El factor Rh es una protena integral de la membrana aglutingena de los

glbulos rojos. Son Rh positivas aquellas personas que presenten dicha

protena en sus eritrocitos y Rh negativa quienes no presenten la protena. Un

85% de la poblacin tiene en esa protena una estructura dominante, que

corresponde a una determinada secuencia de aminocidos que en lenguaje

comn son denominados habitualmente Rh+. Alrededor de la sexta semana de

gestacin, el antgeno Rh comienza a ser expresado en los glbulos rojos

humanos.

Tener Rh [erre hache negativo] significa que se tiene la misma protena pero

con modificaciones en ciertos aminocidos que determinan diferencias

significativas en la superficie de los glbulos rojos, y hacen a los humanos Rh

disponer de anticuerpos (aglutininas) en el plasma que reaccionan contra los

glbulos rojos Rh+ [erre hache positivo].

El principal antgeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de

antgeno D es el anti-D. Si el antgeno D est presente el fenotipo es Rh positivo

y si D est ausente es Rh negativo. Se han identificado ms de 45 antgenos del

sistema Rh, pero de todos ellos apenas cinco son frecuentes, estos son: D, C, E,

c, e. Los anticuerpos a los distintos antgenos Rh aparecen despus de

exponerse un individuo Rh negativo a eritrocitos de sangre Rh positivo. La

herencia de los antgenos Rh es determinada por un complejo de dos genes, de

los cuales uno codifica la protena transportadora de antgeno D y otro codifica

la protena transportadora de antgeno "C" o "c", o de "E" y "e". Las personas



Rh positivas poseen genes RHD, que codifica la protena transportadora de

antgeno D y RHCE, que codifica la especificidad de la protena transportadora

de C y E. Mientras el Rh negativo tiene nicamente el gen RHCE. El 45% de los

individuos Rh positivos es homocigoto al factor D, y el 55% restante es

heterocigoto por haber heredado un factor D positivo y otro negativo de sus

progenitores.

La transfusin de sangre de un Rh+ a un Rh que no tiene dicho aglutingeno

induce la formacin de anticuerpos, que en sucesivas donaciones puede

aglutinar la sangre (formar cogulos). De ah que en las donaciones de sangre y

rganos se tenga en cuenta dicho factor.

II. OBJETIVOS

Entender la clasificacin de los grupos sanguneos humanos de acuerdo al

sistema ABO.

Determinar el grupo sanguneo de los estudiantes.

III. MATERIALES Y METODOS

Placas de microtubulacion

Mondadientes

Algodn, alcohol y lancetas

Suero anti-A

Suero anti-B

Suero anti-AB

Suero anti-D



IV. PROCEDIMIENTO:

TIPO DE SANGRE A

1.- Se limpia el dedo ndice con algodn y alcohol.

2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estril.

3. se deja caer una gota en la placa de microtubulacion.



4. Mezclar con mondadientes de manera independiente.

Se observa que glbulos sanguneos presenta una aglutinacin donde se coloc

el anticuerpo B por lo tanto la sangre es de tipo A

Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D

SE DEJAR REPOSAR POR

UN MINUTO



TIPO DE SANGRE O



3. se deja caer una gota en los 3 pocillos

4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D



Mezclar con mondadientes de manera independiente.

Se observa una aglutinacin en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos

anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es O

SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO

Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D



TIPO DE SANGRE Y FACTOR Rh



3. se deja caer una gota en los 3 pocillos

4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D



Anti- A Anti - B

Anti - D Factor Rh

El principal antgeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de

antgeno D es el anti-D. Si el antgeno D est presente el fenotipo es Rh positivo y si

D est ausente es Rh negativo



Mezclar con mondadientes de manera independiente.

Leer los pocillos y determine el grupo sanguneo y el factor Rh a cada

paciente.

SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO

Se observa una aglutinacin en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es O

Con el anti D se observa que no hay formacin de aglutinaciones lo que indica que es un Rh +



V. DISCUSIONES

Se identific la presencia de antgenos en los eritrocitos, utilizando reactivos

compuestos de anticuerpos conocidos como anti A anti B y anti D.

La prueba para la clasificacin sangunea de rutina se basa en una tcnica de

hemaglutinacin, se utilizan reactivos comerciales que contienen anticuerpos

especficos para cada antgeno, que se mezclan con la sangre a clasificar.

Despus de mezclar una gota del reactivo con una gota de sangre, se observa la

presencia de hemaglutinacin.

VI. CONCLUSIONES

Se entendi la clasificacin de los grupos sanguneos humanos de acuerdo

al sistema ABO.

Al realizar las reacciones de hemaglutinacin en los glbulos rojos se

determin el grupo sanguneo de los estudiantes obtenindose: sangre de

tipo A, y sangre de tipo O. Del mismo modo se obtuvo el factor Rh,

dando como resultado Rh (+).



VII. BIBLIOGRAFIA.

1. Garca CAA. medigraphic. [Online].; 2009 [cited 2014 diciembre 8. Available

from: HYPERLINK "http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-

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2. UNLP. amazonasws. [Online].; 2010 [cited 2014 diciembre 8. Available from:

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3. enciclopedia de salud dietetica y psicologia. [Online].; 2014 [cited 2014

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4. S.L.U. EIT. Medicina molecular FIBAO. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8.

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5. Definicion abc. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from:

HYPERLINK "http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php"

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6. Diaz Y. slideshare. [Online].; 2012 [cited 2014 Diciembre 8. Available from:

HYPERLINK "http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupos-

sanguineos" http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupos-

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7. Lau LGFM. farmaciaulat. [Online].; 2011 [cited 2014 Diciembre 8. Available

from: HYPERLINK "http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-

factor-rh.html" http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-factor-

rh.html .



VIII. CUESTIONARIO

1. QU ES UN ANTGENO Y QUE ES UN ANTICUERPO? Antgeno

Un antgeno es una molcula capaz de producir una respuesta del sistema inmune

adaptativo mediante la activacin de linfocitos. Esta definicin ampla el concepto

de antgeno ms all del concepto clsico que defina antgeno como la sustancia

que desencadena la produccin de anticuerpos. As dentro de esta definicin de

antgeno se incluyen las molculas que, previa presentacin antignica, son

capaces de desencadenar la activacin de clulas T citotxicas capaces de destruir

las clulas diana sin la participacin de anticuerpos.

La mayora de los antgenos son de naturaleza peptdica, aunque tambin pueden

actuar como antgenos molculas de distintos tipos como lipopolisacridos e

incluso ADN. Los antgenos pueden ser molculas enteras pero generalmente son

el resultado del procesamiento por clulas presentadoras de antgenos. A las

regiones especficas de los antgenos que son reconocidas por los anticuerpos o

por los receptores de clulas T (TCRs) se les conoce como eptopos o

determinantes antignicos. Los anticuerpos reconocen eptopos conformacionales

que deben ser accesibles en la protena original. Los TCR reconocen la estructura

que adopta un antgeno, ya procesado, dentro de la binding-groove de las

molculas MHC. En el proceso de presentacin antignica las clulas

presentadoras de antgeno procesan y presentan tanto protenas propias como

extraas a las clulas T. A los pptidos propios que son reconocidos como extraos

por el sistema inmune se les llama autoantgenos. La respuesta descontrolada

frente a autoantgenos puede ocasionar procesos patolgicos.

Anticuerpo

Un anticuerpo es una glucoprotena o una protena unida a uno o varios hidratos

de carbono que se puede encontrar en forma soluble en la sangre o en algn otro

fluido corporal de los seres vivos vertebrados. La razn de ser o funcin ms

importante que despliega un anticuerpo en el cuerpo es que son la principal



herramienta con la que cuenta el sistema inmunitario para defenderse y

neutralizar la accin de algn elemento extrao que ingresa en el, como puede ser

el caso de una bacteria, un parsito o cualquier virus.

Si bien por supuesto puede haber variaciones, el anticuerpo tpico est formado

por unidades estructurales bsicas, ostentando cada una de estas de dos cadenas

pesadas y dos ligeras ms pequeas.

Asimismo, los anticuerpos tambin despliegan y tiene una importante

participacin en la medicina en lo inherente al diagnstico de las enfermedades,

ya que a travs de una prueba conocida como prueba serolgica, los profesionales

mdicos pueden determinar si hay anticuerpos presentes y si por el contrario,

luego del test se comprueba que los mismos no estn, entonces, ah si se podr

confirmar fehacientemente que la persona no se encuentra infectada.

2. CUL ES EL FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE TITULACIN EMPLEADA

EN EL RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUNEOS?

Los glbulos rojos del paciente se ponen en contacto con Reactivo Anti-A, Anti-B o

Anti-A, B monoclonal. Si existen en la superficie de los eritrocitos los antgenos

correspondientes, se producir una aglutinacin visible macroscpicamente. La

ausencia de aglutinacin en todos los casos, implica grupo O.

Los glbulos rojos del paciente se ponen en contacto con suero anti-D (anti-Rho).

Si existe en la superficie del eritrocito el antgeno correspondiente, se producir

una aglutinacin visible macroscpicamente.

La presencia del antgeno D se determina enfrentando los hemates problema, en

un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinacin o no aglutinacin

de los hemates ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del

correspondiente antgeno en los mismos.



La variante Du, forma dbil del antgeno D, puede detectarse mejor incubando la

suspensin de hemates con suero anti-D, efectuando la prueba de la

antiglobulina.

3. CUL ES LA DIFERENCIA ENTRE EL ANTGENO A, EL ANTGENO B Y EL

FACTOR RH?

Estos grupos sanguneos estn determinados por diferencias en los

monosacridos terminales expuestos en los globsidos de la membrana de las

clulas, los que corresponden a antgenos que en el laboratorio se detectan

mediante reacciones de hemaglutinacin en glbulos rojos. En el grupo

sanguneo A se expone una N-acetilgalactosamina, en el grupo B una galactosa,

en el grupo AB se exponen ambas, N- acetilgalactosamina y galactosa, mientras

que en el grupo O no se expone ninguna de estas.

Dependiendo de estos antgenos el cuerpo desarrolla anticuerpos contra el

antgeno no expuesto, por ejemplo, las personas que expongan solo el antgeno

A desarrollarn anticuerpos contra el antgeno B, y visceversa. Las personas de

grupo AB no desarrollan ningn anticuerpo, mientras que los del grupo O

desarrollan anticuerpos tanto para el antgeno A como el B. La presencia de

antgenos y anticuerpos determina la compatibilidad entre donantes

sanguneos y sus receptores.

Respecto al sistema Rhesus (Rh), las personas pueden ser Rh positivo o Rh

negativo, lo cual tambin est implicado en la compatibilidad sangunea entre

donantes receptores. El antgeno Rh implicado en este sistema tambin se

denomina antgeno D. A diferencia del sistema ABO, cuya herencia es de tipo

codominante, en el sistema Rhesus el Rh (+) es de tipo dominante y el Rh (-) es

recesivo. Esto puede generar la eritroblasto fetal debido a "incompatibilidad

Rh" la cual es una afeccin que se desarrolla cuando una mujer embarazada

tiene sangre Rh (-) y el beb que lleva en su vientre tiene sangre Rh (+)

heredado del pap.



4. CUL ES EL FENOTIPO BOMBAY?

El fenotipo Bombay clsico (Oh) se caracteriza por la ausencia de los antgenos

A, B y H tanto sobre los eritrocitos como en las secreciones, debido a la

herencia de dos genes hh en el locusH; por lo tanto, la sntesis de los antgenos

A y B est bloqueada por la ausencia del antgeno H necesario para su

expresin. En otras palabras, para que se produzca antgeno H, debe existir al

menos una copia funcional del gen H (H/H o H/h); si ambas copias del gen son

inactivas (h/h) se produce el fenotipo Bombay. Debido a que estas personas

son deficientes en los antgenos A, B y H, ellos producen anti-H, anti-A y anti-B

de origen natural. En las pruebas iniciales los eritrocitos Bombay se clasifican

como grupo O. Los eritrocitos no reaccionan con anti-A, anti-B ni anti-AB,

mientras que el suero reacciona con clulas A, B, AB y O. Por lo tanto, las

personas con el fenotipo Bombay deben ser transfundidas slo con eritrocitos

de fenotipo Bombay. La ausencia de los antgenos ABH en este fenotipo no est

asociada con defectos de membrana o cambios en la vida media de los

eritrocitos. La presencia de los anticuerpos en el suero hace muy difcil la

transfusin sangunea, ya que todos los eritrocitos, excepto aquellos de otro

fenotipo Bombay, son incompatibles. La frecuencia del fenotipo Bombay clsico

es de 1 en 13.000 en India, y raramente se encuentra en otras poblaciones.

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