informe n°1 micropipetas (marjeory brisseth cachay gonzales)

7/18/2019 informe N°1 micropipetas (MARJEORY BRISSETH CACHAY GONZALES)

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Curso de Bioquímica

Informe de Laboratorio N° 1

¨Instrucciones sobre el manejo de micropipetas en el laboratorio de bioquímica¨

Grupo 5

Mesa N°

Cac!a" Gon#ales Marjeor"

$r% Cle&er 'rias

15 de '(osto de )*15

2. Introducción:



+n bioquímica, la !abilidad que se ten(a para reali#ar medidas e-actas "reproductibles, al i(ual que para transferir peque.os &ol/menes de líquidos, es deimportancia fundamental en el momento de obtener resultados /tiles% 0ara medir &ol/menes de líquidos menores a 1 mL, el instrumento ms utili#ado es la,micropipeta% +ste tipo de pipetas se basa en un principio de despla#amiento de aire "

en la utili#aci2n de puntas desec!ables% +ste tipo de equipos cubre amplio ran(o de&ol/menes a medir 3desde *%1 4l !asta 5 ml

No intente ajustar la micropipeta para &ol/menes ma"ores al de su capacidadm-ima, o para &ol/menes menores de cero si reali#a dic!os ajustes causar da.oa la micropipeta% 0artes de la micropipeta6 dependiendo del fabricante las formas deal(unas de las partes de las micropipetas pueden &ariar, pero en (eneral todas lasmicropipetas cuentas con las si(uientes partes6 +mbolo " &arilla de 7mbolo6selecciona el &olumen a dispensar, para toma " dispensaci2n del &olumenestablecido% 0antalla6 establece el &olumen que se est midiendo Cono6 sitio deinserci2n de puntas 0ara el uso correcto de la micropipeta usted debe tener encuenta los si(uientes pasos6 1% 'juste de &olumen6 el &olumen de la micropipeta se

muestra claramente en la pantalla situada en el man(o% 0ara ajustar el &olumen (ireel embolo en direcci2n de las a(ujas del reloj o en contra 3dependiendo si deseaaumentar o disminuir8% 9en(a en cuenta que el &olumen deseado aparece tras el clicdel embolo, todos los dí(itos deben estar completamente &isibles en la pantalla, los&ol/menes no deben estar situados por fuera del ran(o de la micropipeta que estutili#ando% +n al(unas micropipetas se inclu"e un dispositi&o de se(uridad que debeutili#arse cuando el &olumen "a !a sido establecido% )% Inserci2n : e-pulsi2n depuntas6 las puntas desec!ables que se utili#an dependen del tipo de micropipeta quese est utili#ando estas puntas se compran de acuerdo con la recomendaci2n delfabricante, pero en (eneral se !a aceptado un c2di(o de colores, en el cual laspuntas transparentes sir&en para las micropipetas de &ol/menes menores 3*%1;1*

4L8, las puntas amarillas para &ol/menes intermedios 31* : )** 4L8 " las puntasa#ules son para los &ol/menes ma"ores% 'l insertar las puntas ase(/rese que elcono este limpio " posteriormente presione la punta firmemente en el cono paraase(urar su correcta inserci2n% Cuando el ajuste es correcto se forma un anillo &isibleentre el cono " la punta% 0ara e-pulsar la punta presione el e-pulsor de puntas !astaque 7sta sal(a del cono 3siempre descartar la punta utili#ada en un recipientedestinado para este fin8% 0ipeteado sencillo6 esta t7cnica emplea la e-pulsi2n total dellíquido6 0resione el 7mbolo !asta la primera parada% <it/e la punta debajo de lasuperficie del líquido " sua&emente libere el 7mbolo !asta la posici2n de partida%=etirar cuidadosamente la punta del líquido, tocando contra la pared del recipientepara liberar el e-ceso de líquido% +l líquido es dispensado presionando el 7mbolo

!asta la se(unda parada% +ste procedimiento &aciar completamente la punta(aranti#ando la precisi2n de la dispensaci2n% 0osiciones de una micropipeta Lasmicropipetas son una !erramienta /til para el manejo de &ol/menes peque.os, perouna utili#aci2n inadecuada o un mantenimiento o calibraci2n incorrectos puedenocasionar la transferencia de &ol/menes ine-actos " problemas en los e-perimentosdesarrollados% La comprobaci2n de la calibraci2n es un procedimiento simple quepuede a!orrar un tiempo considerable, así como tambi7n reacti&os " otros recursos%



3. Objetivos:

>amiliari#arse con el manejo de las micropipetas% =econocer las aplicaciones del usode estos equipos en la prctica de laboratorio% =eali#ar adecuadamente la calibraci2n

de una micropipeta? $eterminar las posibles &ariaciones en el uso de la micropipeta%? @erificaci2n de la e-actitud " precisi2n de las micropipetas%

4. Procedimientos:

MANEJO DE LA MI!"OPIPE#A:

1% 9ome la micropipeta " presione el pist2n ) o A &eces, para !omo(eni#ar la (rasainterna de este, " permitir un mejor funcionamiento de la micropipeta%

)% Inserte bien la puntilla apropiada de la micropipeta%

A% 0resione el bot2n de mando !asta el primer tope% <umerja la puntilla de lamicropipeta &erticalmente al recipiente en el que &a a tomar la muestra 3frasco,matra# o tubo de ensa"o, etc%8 'pro-imadamente Amm en 7l líquido% La micropipetadebe permanecer en posici2n &ertical siempre%

% <oltar poco a poco la presi2n del bot2n de mando para que la micropipetasuccione la soluci2n que est pipeteando% +spere apro-imadamente A se(undosantes de sacarla del líquido%

5% <aque la micropipeta del recipiente% <i considera necesario, con una (asa, elimine

cuidadosamente el e-ceso de líquido de las paredes e-tremas de la puntilla, sin tocar la punta%

% Introdu#ca &erticalmente la pipeta al recipiente en el que &a a depositar la soluci2ncar(ada, baje !asta el fondo sin tocarlo 3en el caso de que el recipiente receptor este&acío8 o lo baje lo ms pr2-imo posible al líquido que el recipiente conten(a 3sintocarlo8%

% 0resione el pist2n o bot2n de mando al primer tope, para eliminar el líquidocar(ado

D% <aque la micropipeta del recipiente, las puntillas se e-pulsan apretando el bot2n

lateral o en forma manual%

E% $ispon(a la puntilla en el recipiente de desec!o%

1*% Limpie la micropipeta por el e-terior con un pa.o que no deje residuos%

11% Guarde en su porta pipetas de manera &ertical%



#$cnic% invers%

<e recomienda esta t7cnica para el pipeteo de líquidos mu" &iscosos o con tendencia

a formar espuma fcilmente% 'simismo, resulta apropiada para el trabajo con&ol/menes reducidos%Llene un frasco de reacti&os limpio con el líquido con el que &a a trabajar%

1% 0resione el pulsador !asta la se(unda posici2n%)% <umerja la punta apro-imadamente 1cm bajo la superficie " suelte el pulsador

lentamente para llenarla% <aque la punta, retirando el e-ceso de líquido delborde del frasco%

A% $escar(ue el &olumen ajustado presionando li(eramente el pulsador !asta laprimera posici2n% Manten(a el pulsador en este punto% +l líquido que quede enla punta no debe incluirse en la dispensaci2n%

% $esec!e el líquido restante junto con la punta%

#$cnic% direct%

Llene un fresco para reacti&os limpio con el líquido que &a a trabajar%

1% 0resione el pulsador !asta la primera posici2n)% <umerja la punta apro-imadamente 1cm bajo la superficie del líquido " suelte

el pulsador lentamente% <aque la punta, retirando el e-ceso de líquido delborde del frasco%

A% $escar(ue el líquido presionando li(eramente el pulsador !asta la primeraposici2n%

% <uelte el pulsador para que &uel&a a la posici2n inicial% <i es necesario,cambie la punta o tip " si(a pipeteando%



&. "esu't%dos:<e obtu&o como resultado la prctica del manejo de micropipetas de acuerdo almedio líquido, capacidad &olum7trica " t7cnica aplicada de acuerdo al casopresentado%(. Inter)ret%ción de "esu't%dos:

<e obser&2 que durante la e-periencia en el laboratorio no se !i#o el correcto manejode las micropipetas, sin embar(o con la prctica se aprendi2 el uso adecuado de lasmicropipetas de acuerdo a su capacidad &olum7trica, medio líquido " t7cnicaempleada%%*. !onc'usiones:

• La micropipetas se usan para medir &ol/menes e-actos

• Las t7cnicas se aplican de acuerdo al líquido usado%

• La utili#aci2n de micropipetas de &olumen fijo nos permitir tener un ma"or

control dentro " entre ensa"os%• +-isten diferentes tipos de micropipetas6 manuales, en las que el &olumen

a aspirar se fija (irando un bot2n en su parte superior que est conectado

a un sistema anal2(ico de confirmaci2n de &olumen, " automticas, en las

cuales dic!o sistema es di(ital%

• Fa" micropipetas simples, que s2lo aco(en una punta cada &e#, "

multicanales, que permiten incorporar m/ltiples puntas 3por ejemplo, oc!o8,

absorbiendo el mismo &olumen en todas ellas%



• <e utili#aron ) tips en la prctica, uno amarillo 3);)** ul8 " a#ul 35* ;1*** ul8%

• <e aprendi2 el uso de las t7cnicas directa e in&ersa de las micropipetas%

+. "ecomend%ciones:

Mantener la micropipeta en una posici2n tan &ertical como sea posible, nunca enn(ulo%La aspiraci2n debe reali#arse lentamente " uniformemente, no demasiado rpido%No presionar el tip mu" fuerte al cono de la micropipeta%La temperatura de la micropipeta, la punta, el líquido " la !abitaci2n debe estar enequilibrio%

+l mantenimiento re(ular " el c!equeo de la calibraci2n (aranti#a que la micropipetaopere de acuerdo a las especificaciones%

,. -ib'ior%/0%:

Internet:

!ttps6HH%clubensa"os%comHCienciaHMicropipetasH1A1D*%!tml

Informaci2n sobre la medici2n del &olumen%!ttp6HH%brand%deHfileadminHuserHpdfHInformationJ@olHBroc!uereJ@olumenmessun(

J+<%pdfBrand 1AH*DH15

http://www.brand.de/fileadmin/user/pdf/Information_Vol/Brochuere_Volumenmessung_ES.pdfBrand




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