imiquimod, a topical immune response modifier, induces migration of langerhans cells1

7
Imiquimod, a Topical Immune Response Modi®er, Induces Migration of Langerhans Cells 1 Hirotake Suzuki, Binghe Wang, Gulnar M. Shivji, Paola Toto, Paolo Amerio, Mark A. Tomai,* Richard L. Miller,* and Daniel N. Sauder Division of Dermatology, Sunnybrook Health Science Center, University of Toronto, Toronto, Ontario, Canada; *3M Pharmaceuticals, Department of Pharmacology, St Paul, Minnesota, U.S.A. Langerhans cells are bone marrow derived dendritic cells that represent the major antigen-presenting cells in the skin. Langerhans cells take up and process antigen within the epidermis and present processed antigen to T lymphocyte in the regional lymph nodes and thus form an integral part of the cuta- neous immune response. The cutaneous immune response can be modi®ed by a number of pharmaco- logic agents, including corticosteroids, cyclosporine, and retinoids as well as physical agents, such as ultra- violet light. For the most part these agents act by suppressing immune function. A topical immune response modi®er, imiquimod has been shown to enhance the cutaneous immune response. Imiquimod has anti-viral and anti-tumor effects in animal models and has been approved for the topical treatment of external genital and perianal warts in humans. The biologic activity of imiquimod in part is due to its effect as a cytokine inducer. Preliminary data suggested that imiquimod could have an effect on Langerhans cells. In order to clarify this effect on Langerhans cells, we examined Langerhans cell mor- phology and migration in imiquimod-treated skin. The density of Ia + cells decreased 2 d after treatment, falling to approximately 43% by day 10. The Ia posi- tive in cells remaining in the skin appeared larger and more dendritic suggesting an activated state. ATPase staining of epidermal sheet con®rmed the decreased number of Langerhans cells. To clarify sta- tus of Langerhans cells, the activation of B7 was examined. Activation of B7-1 or B7-2 was not detected. Imiquimod, however, did enhance Langerhans cell migration from skin to draining lymph nodes. This enhanced Langerhans cell migra- tion was also associated with an enhanced allergic contact hypersensitivity. These results suggest that the mechanism of modulation of immune response by imiquimod is in part due to effects on Langerhans cells. Key words: imiquimod/Langerhans cells. J Invest Dermatol 114:135±141, 2000 L angerhans cells are bone marrow derived, dendritic cells, which represent the major antigen-presenting cells within the epidermis. Langerhans cells take up antigen, process and present antigen to T lymphocytes in the draining lymph nodes (DLN) resulting in the initiation of the cutaneous immune response (Banchereau and Steinman, 1998). After contact with hapten, morphologic changes in Langer- hans cells are seen. Langerhans cells appear to increase in size and change from the characteristic dendritic shape to a less dendritic rounded morphology (Larsen et al, 1990; Teunissen et al, 1990; Ozawa et al, 1996). These changes are thought to facilitate migration of Langerhans cells from skin to DLN and are indicative of activated Langerhans cells (Larsen et al, 1990; Kondo and Sauder, 1995) and are thought to involve downregulation of E-cadherin (Borkowski et al, 1994; Jakob and Udey, 1998). Following activation, Langerhans cells express a number of cell surface markers including B7, ICAM-1, and ICAM-3 and increase their expression of major histocompatibility complex (MHC) class II antigens (Shimada et al, 1987; Aiba and Katz, 1990; Tang and Udey, 1991; Manara et al, 1996; Laihira and Jansen, 1997). As Langerhans cells play a crucial part in immunosurveillance there has been considerable interest in agents that modify Langerhans cell function (Simon et al, 1992; Bacci et al, 1996; Ozawa et al, 1996; Qu et al, 1997). Imiquimod [1-(2-methylpropyl)-1H-imidazo[4,5c]quinolin-4- amine] is an immune response modi®er, which has been shown to have anti-viral and anti-tumor effects. Previous studies have demonstrated ef®ciency in infectious and neoplastic diseases including the treatment of primary and recurrent genital herpes simplex virus and cytomegalovirus infection in guinea pigs (Chen et al, 1988; Harrison et al, 1988, 1994). Imiquimod has been demonstrated to have anti-tumoral properties in a number of murine models, including MC-26 colon carcinoma, Lewis lung carcinoma, FCB bladder tumor (Sidky et al, 1992). 2 The biologic activity of imiquimod in part is due to its effect as a cytokine inducer. Imiquimod has been shown to induce interferon (IFN)-a, tumor necrosis factor (TNF)-a, interleukin (IL)-1a, IL-6, and IL-8 0022-202X/00/$15.00 ´ Copyright # 2000 by The Society for Investigative Dermatology, Inc. 135 Manuscript received August 10, 1999; revised September 20, 1999; accepted for publication October 4, 1999. Reprint requests to: Dr. D.N. Sauder. Division of Dermatology, Sunnybrook Health Science Center A-319, University of Toronto, 2075 Bayview Avenue, Toronto, Ontario, Canada M4N 3M5. Abbreviations: CHS, contact hypersensitivity; DLN, draining lymph nodes. 1 The authors have declared a con¯ict of interest. 2 Sidky YA, Bryan GT, Weeks JM, Hatcher JM, Borden EC: Effect of treatment with an oral interferon inducer, imidazoquinolinamine (R-837) on the growth of mouse bladder carcinoma FCB. J Interferon Res 10:S123, 1990 (abstr.)

Upload: daniel-n

Post on 06-Jul-2016

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

���������� ���� ������ �������� �������� ��������������� �� �������� �� ��

�������� ���� ����� ����� ����� �� ������ ����� ����� ����� ������� ���� �� �������������� �� �������� ��� ����� !� ���� ���"��� �# ���������$� ��$%���� ������ ������ &������ '�����"��$ �# �������� �������� (������� &�����) �*� �������������"� �+�������

�# �����������$� � ���� �����"���� '����

�������� �� � �� ���� ����� ������� ����������� � ��� ��������� ��� ���� ������ ���������� �� ��� ��� �!��" �������� �� � �!� �� �� ������������� ������ ��� ��������� �� ������� ��������������� �� #�����#�� �� ��� ������ #�������� �� ���� ���� � ������ ��� �� ��� ��� ����� ������ ��������" �� �������� �������������� �� �� ������� �# ������ �� ������ ���� ������ ��� ����� ���������������� �#� ����������� ��������� � �� � ��#��� ������ ���� � � �� ��� �� ����" $�� ��� ���� ��� ����� ����� �� �#����������� ������ ��������" % ����� �������������� �������� ��������� �� ���� ����� �������� ��� �������� ������ ��������"��������� �� ��� ��� �� ��� ����� ������� ����� ���� � �� �� ���� ������� ��� ��� ����� �������� �� �&���� ����� �� ����� ���� �������" �� ��� ���� ������# �� ��������� �� ����� ��� �� ��� ������ � �#��!��� �������" '�� �����#�� ��������� ��� ��������� ��� � ��� � ������

�� �������� �� �" �� ����� �� � ���# ���� ������ ���������� �� �� �� �&����� �������� �� ��� ��� ��# �� �������� �� ��������� ������ �!��"�� ������# �� �( �� � �������� ) � ���� ���������� ��� �� ����&���� # *+, �# �# �-" �� � ���� ���� �� �� � �������� �� ��� �!�� ������ ������ ���� ��������� ���������� � ������� ����"%'�� ������� �� ������� ����� �������� ����������� ������ �� �������� �� �" � � ���# �� ��� �� �������� �� �� ��� �������� �� ./ ���&�����" %�������� �� ./ � �� ./ ) �� �����������" ���������� �������� ��� �������������� �� �������� ���� �!�� �� ������� #��� �����" ��� ������� �������� �� ���� ���� �� �� �������� ���� � ������� ����������� �#�������������#" ���� ���� �� ������� ������ �������� �� ���� ���� �� ������ ���������# ��������� �� �� ��� ��� �� ������� �� ���������� �" ��� ����� �� �������������� ������ � �������������� ������ ���! "###

���������" ����" ��� %��������,�������� ��������� ����"�,���� ��+��"��� ��� ����� �������-+��"������ ����",����� ��� �+������"� ���������" ����" ���� + ��������+����"" ��� +��"��� ������� �� � �$�+���$��" �� ����������� �$�+� ����" . �!/ ��"����� �� ��� ����������

�# ��� ������" ����� ��"+��"� . �������� ��� ��������0112/� �#��� ������� ,��� ��+���� ���+������� ������" �� ������-���" ����" ��� "���� ���������" ����" �++��� �� ������"� �� "��� ��������� #��� ��� ����������"��� ��������� "��+� �� � ��"" ��������������� ���+�����$ .���"�� �� ��� 0113) ����""�� �� ��� 0113)(��,� �� ��� 0114/� ���"� ������" ��� ������ �� #��������� ����������# ���������" ����" #��� "��� �� �! ��� ��� ���������� �# ������������������" ����" .���"�� �� ��� 0113) 5���� ��� ����� 0116/ ��� ��������� �� ������� ��,���������� �# 7-�������� . ����,"�� �� ���0118) 9���% ���'��$� 0112/� :����,��� ����������� ���������" ����"�;+��"" � ��%�� �# ���� "�#��� ������" �������� <� =&��-0� ���

=&��-* ��� ������"� ����� �;+��""��� �# ����� ��"�����+���%����$���+��; .��&/ ���"" == �������" .������ �� ��� 012<) ��%� ���5����0113) ���� ��� '��$� 0110) ������ �� ��� 0114) ������� ��� 9��"���011</� �" ���������" ����" +��$ � ������ +��� �� �����"��������������� ��" %��� ���"�����%�� ������"� �� �����" ���� ����#$ ���������"���� #������ .���� �� ��� 011>) ���� �� ��� 0114) (��,� �� ��� 0114)? �� ��� 011</�=��@���� A0-.>-����$�+��+$�/-0�-�������A8�6�B@������-8-

�����B �" �� ����� ��"+��"� ����C��� ,���� ��" %��� "��,��� ���� ����-����� ��� ����-���� �##���"� ������" "����" ���������"������ �#C�����$ �� ��#�����" ��� ���+��"��� ��"��"�"�������� ��� ��������� �# +�����$ ��� �������� ������� ���+�""��+��; ���" ��� �$�����������" ��#������ �� ����� +��" .&����� ��� 0122) �����"�� �� ��� 0122� 0118/� =��@���� ��" %��������"������ �� ���� ����-������ +��+�����" �� � ��%�� �#����� �����"� �������� �&->4 ����� ���������� ��,�" ������������� :& %������ ���� .���$ �� ��� 011>/�> ��� %��������������$ �# ���@���� �� +��� �" �� �� ��" �##��� �" � �$������������� =��@���� ��" %��� "��,� �� ����� �����#���� .=:!/-������ �����"�" #����� .�!:/-�� ���������� .=�/-0�� =�-4� ��� =�-2

33>>->3>DE33EF06�33 G &�+$����� � >333 %$ ��� �����$ #�� =���"�������� ���������$� =���

�+0

���"���+� �������� ��"� 03� 0111) ����"�� �+���%�� >3� 0111)����+��� #�� +%�������� (���%�� 8� 0111���+���� ��@�"�" ��H �� �!� ����� ���"��� �# ���������$�

��$%���� ������ ������ &����� �-*01� '�����"��$ �# �������� >3<6 �$���, ������ �������� (������� &����� �8! *�6��%%���������"H &�� ������� �$+��"��"������$) �!� �������� �$�+�

����"�0��� �����" ���� �������� � ���I��� �# ������"��

>���$ J�� �$�� ��� ����" 9�� ������� 9�� ����� 7&H 7##��� �#��������� ,��� �� ���� �����#���� ������� �������@����������� .�-2*</�� ��� ���,�� �# ��"� %������ ��������� :& � � �������� ��� 03H0>*�0113 .�%"���/

.���$ �� ��� 011>) ����" ��� ��%"��� 011<) ���� �� ��� 011*) 5����� ��� 0118) ������ �� ��� 0118) ��%"�� �� ��� 0116) ��"������ �� ���0116/ ������ �������� �����" �����"������ �#C���$ �# ��+�������@���� �� ��� ��������� �# �;������ ������� ��� +������� ,���".7�,���" �� ��� 0112 �$���� �� ��� 0112/� ��� �� ���" ����� �;+��""����# & 0� �� ��� "��� ,�" ������"��� �" & 0� �" � ������ #�����������" ����"� ���" ������"� "���"��� ���� ���������" ����" �������������� �� �# ��� "��� �� ,��� �� ������ �;+��""��� ���"�������� �� +�"������ ���� ��� �������"� �# ������ �#���@���� ��$ ������� �������� ��������� �# ���������" ����"�� ��� �������� �$�+� ����� �� ���C�� ���" �$+����"�"� ,� �������� ����� ����� �# ���������" ���� ��������� �� �!� ��� ��"��"�# ���"� "����" �����"������ ���� ���@���� ������� ���������"���� ���+�����$� �������� ���������" ���� ��������� ����������� �������� ������� �$+��"��"������$�

���7�=�� �! �7��(

%��� � &6< �E4 ���� ,��� �%������ #��� 9���"�� ��%��������" . �����%��� �7/� ���� ,��� ��"�� �� ��� ������ #������$ �# ��$%���������� ������ &������ '�����"��$ �# �������� ������$ 2K0>,� ��� ����,��� "�� #�� ���" "��$� 7��� �;+��������� ���+ ��������� C�� ����� ��������� +�������" ,��� �++����� %$ ��� =�"��������� ������ &��� ��� '"�&��������� 7��� �;+������� ,�" ��+������� ����� ����"�

������� :��� +������ ���@���� ����� ��� ������� ����� ,���+��+���� ��� "++���� %$ *� +������������" .� ���� �!/� :����"�����"������$����� .:=�&� �"����/� ������� �����$������ ���������"� �$+�=L� �����"��� 6�-���+��"+���� ��"���� "��� .���/� ������� "�C��������� ���� ��� ��%�$�+�������� ,��� +����"�� #��� ���� .� ���"��(/� !: ,�" +����"�� #��� =!& ���������" .������ (�/� �����=� ����%��$ .=��0 #��� (D-4/ ,�" +����"�� #��� ������ &�����.�������� (������/� �����-��������� ��� ����-��"� =�� ����%��$�"���+�������-��������� :=�&� :=�&-��������� ��"� ����-��"� =�%�+�$����$����� .�7/-��������� ��� ����-��"� & 23 . <-0/� �7-��������� ��� ����-��"� & 24 . <->/� :=�&-��������� ��"� =����� �7-��������� ��� =��>� ,��� +����"�� #��� &�������� ��%��������".����%$� (������� &�����/� !�"� = ,�" +����"�� #��� ����������������� .������ ?�%��� &�����/� ����-& *>E& 04 .:���==E===/ �������-=�E�7 ,��� +����"�� #��� ��������� .�� ����� &�/�

������ �� ��� �� �������� �� � �� ����"������ ,���������@���� �����" ���������" ���� ���������� ,� ������ �� C�"��;����� ���������" ���� ���"��$ ��� ���+�����$ �#��� ��� ��+�����++�������� �# ���@����� ����-=� � � �� �������%����� ,�" +��#������" +�����"�$ ��"���%�� .���� �� ��� 011>/� ���� ,��� ������� �� ��������+"� �; ����������" �# ������ ���@���� ����� �� ������� ����� ,�"�++���� �� ��� ���"� �# ���� ��� ���� � ��$ #�� 0K< �� L������ �����,����� ���@���� ,�" "�� �" � �������� �������� �" � #����� ������� ,�������� ���� ,�� ��� ��� ������� ������ ���@���� �� �������� 7+�������"����" ,��� "�+������ #��� ��� �����" "��� 3�6� ������� �����$�������������-C;�� �+������� "����" ,��� ��%���� ,��� ����-=� �� � �����-"��+�������%����� +������� �" +�����"�$ ��"���%�� .���� �� ��� 011>/� ���I$� ��� �+������� "����" ,��� ���%���� ,��� � ����� ����-=� ����%��$��������� �� ���� ���+������� ,�"��� ,��� +��"+����-%##���� "�����.� /� ��� ���� ���%���� ,��� %�����-��������� ��� ����-��"� =������%��$ =�� �� *<�& #�� 0 �� �#��� ,�"���� ,��� � � ��� "����" ,������%���� ,��� "���+�������-��������� :=�& *<�& #�� 0 �� ��"������$��%���� ����" ,��� ������ ��� ���+�����$ ,�" �;������ ���� �I���"���� �����"��+�� ��� �������$ "������� C���" ,��� �;������� ���=�M ����" ,��� �;+��""�� �" ����" +�� ��> .����� 7�/� ��� ���� ,����;������ %$ �� ����+������ �%"����� ,�� ,�" %������ �� ��� "+���C��;+��������� ����������

'�������� �� ���� � �� ���������� �� 1�� �#��������� #��� �� ���C�� ��� ������"� �# ��& ���"" == +�"����� ����" ���+������" ��� �� ����"������ #������ ��� �##��� �# ���@���� �� ���������"����" %$ ����" �# I�, �$�������� ����$"�" ,�" +��#����� �������� "��������� ""+��"��� �# ��"� �+������"� ���� ,��� ������� �� C�� ���+"� �;�$����������" �# ���@���� ����� �� ������� ����� ,�" �++���� �� ��� "��������� ���� � ��$ #�� > �� < �� L������ ����� ,����� ���@���� ,�" "�� �"� �������� �������� �" � #����� ������� ,� ������� ���� ,�� ��� ���������� ������ ���@���� �� �������� ����� ���� ""+��"��� ,�" +��+���� �"+�����"�$ ��"���%�� ,��� "��� ����C������ .���� �� ��� 0114/� ���I$��+������� "����" ,��� "�+������ #��� ��� �����" "��� 3�6N ��"+�"����%����� #�� 43��� �� *<�&� ����� ���� ""+��"��� ,�" �%������ %$��$+"��������� .3�>6N ��$+"��E� / #�� >3��� �� *<�&� ���� C������

������ �$��� ��"�� &���" ,��� �������%���� ,��� ����-=� ��� ����- <.& 23 �� & 24/ �" #����,"H &���" ,��� ���%���� #�� 6��� �� ��� ,�������-& *>E& 04 �� %���� :���==E===� ��� ���� ������� ,��� :=�&-��������� ����-=� #�� *3��� �� ���� ���� ,�"��� ,��� 0N #���� %�����"���� 3�0N !�!*E� �,���� !�;�� ����" ,��� ���%���� ,��� �7-��������� ����-& 23 �� �7-��������� ����-& 24 #��*3��� �� ���� :���"��$+� �������� "��+�� "������ ,��� :=�&-��������� ��"� =�� ��� �7-��������� ��� =��>� ,�" +��+����� �,�-����� �����I���"����� �#:=�& ��� �7 ,�" ����$��� %$ ����" �# &����� 7�=& <6� I�,�$������� .��������� :�/� �� ���"� 03�333 ����" ,��� ����$����

%'�� ������� �� �������� �� � ��� ��"�� �# �������%�����"���"��� ������ � ������"� �� ���������" ���� ��%�� �� ��"" �# ��& ���""== �������"� �� ��������� ,������ �� ��� ��� ��%�� �# ���������" ����"������"��� ����"� "������� �# �+������� "����" ,�" +��#������ ���I$����� ,��� ������� �� ����� ���+"� �; ����������" �# ������ ���@��������� �� ������� ����� ,�" �++���� �� ��� ���"� �# ���� ��� ���� � ��$ #��< �� L������ ����� ,����� ���@���� ,�" "�� �" � �������� ��������7+������� "����" ,��� "�+������ #��� ��� �����" %$ ���%����� #�� * � ��*<�& �� >3�� ���$����������� ����������� ���� �� � � ��� �+�������"����" ,��� ���"�� �� ���"E������� ,��� 2�*N "���"� %##�� .+� <�*/ ���C;�� #�� >3��� �� 8�& �� 8N #��������$�� �� � � %"�@����$� "����",��� ���%���� #�� *3��� �� *<�& �� 06�� �# ���-��"���� "���� 8>���# ���"E������� ,��� 2�6N "���"� %##��� 6�� �# 6N ��(8� ��� *�� �#>N �%.!(*/>� ��+��" ,��� ���"�� ,��� ���"E������� ,��� 2�*N %##������%���� #�� 03��� �� ���� ���+������ �� � 0N "������ �# �������+��$"�C�� �� � � ���"��� ��� ������ �� ��$������ ��� ��%�� �#����"�M ���������" ����" +�� ��> ,�" ������� ��� �������$ "�������C���" ,��� �;������� ��� ����"�M ����" ,��� �;+��""�� �" ����" +�� ��>

.����� 7�/�

%��# ��� ����� ������� �������� �� �������� �� �;�����,������ ���@���� �++�������� ������� ���������" ���� ��������� #��� ���"��� �� ��� �������� �$�+� ����"� ,� ������� ��� I���"���� ��+��� :=�&�������" ����"��������" ���� "��,� ���� :=�& ��� %� "�� %��� �" � �������"��"������ ��� �" �� �����I���"���� ������ #�� ����" .5������ ������������ 011>) ���� �� ��� 0114/� =� ���" "��$� ���� ,��� +��������� ,���43 �� �# ���@���� ����� �� ������� ����� #�� * � ���� � ��$� ���� +�������� ��� "����� ����� #��� +��"� ��� ���" ,��� 833�� �# 3�6N :=�& �� �63H63 .���E���/ �������E��%�$�+�������� ��;��� 0> � �#��� ��"� �++���������# +������������ �" � #����� ������� ��� ���� ��������� ������� ��� ���������� ,��� ��"� +������ ,��� :=�&� �,���$-#�� ���" ����� ������� ����;�����$ �$�+� ����" ,��� �%������� �$�+� ����" ,��� �����$ ��"�+������ ���� ""+��"���" ,��� +��+���� %$ C������� ��� ��"�+��� ��""�" �������$��� ��"�� ��� "������ #�������" ,��� ����"��� ,��� � "������ �#���������"� =L .3�6�� +����/E !��"� = .3�3>�� +����/ �� �������+������ #�� >6���� ��� ����� C������ ������ �$��� ��"�� �! ����",��� �������%���� ,��� ����-=� �" #����,"H �! ����" ,��� ���%���� #��6��� �� ��� ,��� ����-& *>E& 04 �� %���� :���==E===� ��� ���� �������,��� ����-=�E�7 #�� 86��� �� ���� �,�-����� �����I���"����� �#:=�& ��� �7 ,�" ����$��� %$ ����" �# &����� 7�=& <6 � I�,�$�������� �� ���"� 03�333 ����" ,��� ����$����

% ����� ������ �#�������������# �� ����"������ ,������ ���������"���� ��������� ,�" �""������� ,��� �� ���������� �# ������� �$+��"��"������$.&�/� ,� �;������ ��� �##��� �# ���@���� �� !: -������ ��������$+��"��"������$� �#��� * "���""��� ��$" �# 02�� ���@���� �� ���������������� .+����%�/� &� ,�" ������ �" ��"���%�� +�����"�$ .5���� �� ���0118�/� ���I$� ��� ���� ,��� +������ ,��� >3�� �# 3�6N !: �� 8H0�������H����� ���� �" � #����� �������� "��� ���� ���� ��� ��� ������������� ��� �� ������� ,��� "��"������ �" �%���� :��� ��$" ������ ��� ����,��� ���������� �� ��� ���"�� "�#��� �# ��� ���" ,��� 03�� �# 3�>N !: �!��-"��"������ ���� ,��� ���������� ,��� 3�>N !: �" � ������� #�� �������������� 7�� �������"" ,�" ���"��� ,��� � ������� "+����-���������������� .(����� ���$� 9�+��/ ����������$ %�#��� ��������� ��� �� >8��� 82 � �#��� ������������ ��������� ,������ ���@���� �������� �������� ������� ���������"�

"����" ,��� ������ ��� �" �� �������� ,��� +��#������ ���� ,��� ������� ������� ���+"� �; ����������" �# ������ ���@���� ����� �� ������� �����,�" �++���� �� ���"� �# ���� ��� ���� � ��$ #�� * �� L������ ����� ,��������@���� ,�" "�� �" � �������� �������� :�� #����� ������� ����,����� �������� ��������� ,��� �������� &������ "��"��������� ,�"������ �" ��"���%�� +�����"�$ ,��� ����C������ .5���� �� ��� 0114/� ���I$� 03 �� �# 0N ������ ��� �� 8H0 �������E����� ��� ,�" �++���� �� %���"���" �# ����� ����� ���"� L������ "������ ,�" �++���� �� ����� ��#� ���"� 7���������"" ,�" ���"��� ,��� � ������� "+����-������ ���������� �� >8 ��#��� ������ ��� �++���������

�+2 'O'5= �� �� ��7 9('�!�� (: =!L7�=���=L7 7����(�(�J

�3% �&������� �� ������� ������������ =� ��� ���"� �# ������������ +��"� �# �������� ������� "��"���������� � ��%�� �# �$������" ������,� �� %� ������ .7�� ��� 5���� 011>) 5���� ��� ����� 0116/� =���������� ���@���� �" � ���,� �$������ ������ .�����"�� �� ��� 0122)���� �� ��� 011*) 5��� �� ��� 0118) ��"������ �� ��� 0116/� �� ���������,������ ���@���� #����� �������� �;+��""��� �# �$������" ������������ "��"���������� �����"� ����"���+��"�K+��$����"� ����� ��������.�����"� ����"���+��"�K�&�/ ,�" +��#������ ��� �$������" ��������,��� �!:-�� =:!-�� =�-4� =�-2� ��� =�-03� �,���$-#�� ���" �#������������� "��+��" #��� ��� ���" ,��� ��������� #��� ��� ���� ��� +����� ���� ������ ������ ���������� � "���� ����� �# ��@�� ��������� ����"��+��" ,��� ����#��$ ����� �� � C�� +�,��� ��� �$"�� �� �!� ���-43.�7�-�7� PP QQ� :�����",���� �D/� ����� �!� ,�" �;������� ����������� ���#������Q" ��"�������"� �����"� ����"���+���� ,�" +��#����� %$"������� ������" ,��� "��� ����C������" .5��� �� ��� 0118/� (����������� �# ����� �!� ��""����� �� 03�� �# ,���� ���������� 03' �#�!�"�� .���������� ������ ?�%��� &�����/ ��� 0�� �# �����-��-+�����".���������/ ,�" ������ �� 46�& #�� 6���� ���� ������� �� ���� ���"

"������ ,�" ��;�� ,��� �����"� ����"���+��"� %##�� AC��� ��������������43�� 5&�� 63�� ���" .+� 2�*/� *�� ��&�>B .��%�� ��� ��������� (������� &�����/� 03�� �������������� .��%�� ��/� ���03�� �# ���� �!�� . ��������� ��������� ������ &�����/ ��� >33'�# ������$ ����� ������� ���" �����"� ����"���+��"� .��%�� ��/ ������� ����� >3��� �#��� 0 � ���%����� �� *<�&� ��� �������� ,�" "��++��%$ ������� �� 16�& #�� 6����

'�� ���" ,�" +��#����� �" ��"���%�� +�����"�$ .5���� �� ��� 0114/������� "��" #�� �-����� ��� =:!-� ,��� +����"�� #��� &���������%��������" .���� ����� &�/� ������" #�� ����� =�-4� =�-03� �!:-����� =:!-� ,��� "$����"���� �� ����� &������� ��%��������" =!&�.�������� (������� &�����/� ��� "�@����" #�� ���� +����� "��" ,��� �""��,� �� � � ��+���C� � !� �%������ #��� ��� �����"� ����"���+��"� ��;��� ,���

��+��C�� �� � ����� ����� �# 03 �� ���������� �&� %##�� AC���������������� �� 63�� 5&�� 03�� ���"K�&� .+�-2�*/� 0�6����&�>B .���������/ >33�� ���� �# ��� #�� �!��"� 03K4� ���������$-�������� �������� .���&/� >3 +��� ���� +������ ��� 3�>6' �# ��@ !� +��$����"� .���������/� ��� ��;��� ,�" �������� ,��� 06�� �#������� ���� �&� �$���" ,��� +��#����� �� � ������-7���� &��" �������&$���� 823 .������-7����E&��"� !��,���� &�/ ,��� ����������� #��0��� �� 16�&� ��������� �� 43�& #�� 86 " ��� �;���"��� #�� *3 " �� <>�&�(+����� �&� �$��� ��%��" ,��� ���������� #�� ���� ���� +��������"+�������$�

%� #��� �� '�� �������� �� ���@�� .6 ��/ �# ���� �&� +����� ,�"������ �� �� 0�6N �����"� ���" ���������� ������� %������ ����������+����"�� �� ���"-������� %##�� #�� 03K>3��� �� 033L� ��� ���",��� +�������+��� ���� ���������� ������ !������� C��" ,��� "������ %$����" �# � ��"�� ���"�������� .5� >>>>K3>3� '����&�! D������������/ #�� "���@���������� �# �- !�� �" �-����� ,�" ��##����� %$���@���� ���������� ���"��������� ����" �# ���� �$������ ,������������� �� ���� �# �-������

4������� � #��� ��� ���� ,��� �;+��""�� �" ����� 7�� ���"����"����� "����C����� �# ��##������" %��,��� ��� ����" ,�" ����������%$ �++�$��� ��� �����Q" � ��"� .�,� ����"/� � ��##������ ,�" ���"������ ��%� "����"������$ "����C���� �# + R 3�36�

�7'��

��������� ���� ��� ������# �� ������ ��# �� �(

�������� �� � =������%����� �# ��� �+������� "����"�����"������ � ������"� �� =�M ��������� ����" .���������" ����"/ ��82 � �#��� ���@���� ��������� .���@����-������� ���+�*>1� 04 +�� ��>) �������� 8><� 00 +�� ��>� ����� 7�/����" ������"� �� ���"��$ +��"�"��� �������� ���������� ������"����� �++��;������$ 8*N �# ������� %$ ��$ 03 .$�� �/� ��� ���������"����" ��������� �� ��� "��� #����,��� ���@���� ��������� �# �����++����� ������ ��� ���� ��������� ���+���� ,��� ���������" ����"#��� ������� ���� .$�� )/� �������� ��� �;+��""��� �# =� ��������� ���������" ����" #��� ���@����-������� ���� �++�����"������� ���� �� ������� ���� �� ��$ > ��� ���"� ������"+��"�"��� �������� ��� �;+������� ���� ��$ 03 .$�� �/�

��������� ����� ��� ���� ���� �� �������� �� � ��������� �� �� ��� ��� ��� ������ ������� ���#����� �� ���C�� ��� ������"� �# ��& ���"" ==E=� +�"��������� �� �+������" I�, �$�������� ����$"�" ,�" +��#����� ��������"����� ���� ""+��"��� �# ��"� �+������"� �� ��"� �;������,������ ���@���� ������� �;+��""��� �# ��� ��"��������$�������" <-0 .& 23/ ��� <-> .& 24/� ��� ������"� �#

� � �" 4�������� ��� ��� ������

'+"����� +�����" �,�"����� +�����"

=�-4 ������������������������������� ������������������������������=�-03 ������������������������������ ����������������������������������!:-� ������������������������������ �����������������������������=:!-� ������������������������������������� �������������������������������������=:!-� �������������������������������������� ���������������������������������������-����� ��������������������������� ������������������������������

$����� �" 5����� �� ��������� �� �������� �� ������# ���������� �� ���" ��+���� ���@���� �� ������� ,�" �++���� �� ��� "����# ���� ��� "��� ,�" �%������ #��� 3 �� 03 � +�"�-���������� 7+������",�" "�+������ #��� �����" ��� "������ #�� =�M ����" �" ��"���%�� �� ����� ������ ������� � ������"� �� ���������" ���� ���"��$ ,�" ����� > � �#������������ .+R 3�36/ #������ �� �++��;������$ 8*N �# ������� %$ ��$ 03.028� 04 �� 8*>� >0 ����" +�� ��>� + R 3�36/�

L(�� 008� !(� 0 9�!'��J >333 =�=?'=�( =! '&7 ��!�7���! &7�� �=����=(! �+/

��& ���"" ==E=� +�"����� ����" �� �+������� ����" ��� ��� �;+��""����# <-0 ��� <-> ,��� �;������ %$ ����" �# �,�-����� I�,�$������$� =� ��� ���@����-������� ���+ 0�2N �# �+������� ����",��� =� +�"����� �#��� < � �# ��������� ���+���� ,��� *�>N �� ���+����%�-������� ���+� !������ ���@���� ��������� ��� +����%���������� ������"�� �;+��""��� �# ��"��������$ #�����"� <-0 ��� <-> .$�� +/�

��������� ���� ��� ������# �� %'��( ���������� � �� ���C�� ��� ���� #��� �������%����� �# � ������"� �����������" ���� ��%��� ����"� "������� �# �+������� "����" ,�"+��#������ ����"�M ��������� ����" .���������" ����"/ ������"�� %$40N �#��� ���@���� ��������� .���@����-������� ���+� 063� <+�� ��>) �������� >8<� 03 +�� ��>� ����� 7�/ .$�� */�

��������� ������� �������� �� �������� ���� �!���� 6�3 �#��� �����"������� � ������"� �� ���������" ����" �����@����-������� "���� ,� �$+����"���� ���� ���" ������"� ,�"�� �� �������� ���������" ���� ��������� #��� "��� �� �!� ����"� ���" �$+����"�"� ,� �""�""�� :=�&-������ ���������" ������������� #����,��� ���@���� ��������� .��������� �� ��� 012<)5������ ��� ��������� 011>) ���� �� ��� 011>/� ��� +���� �������"+��� �# :=�& %$ ���������" ����" ,�" ������ %$ I���"�������,���$-#�� ���" �#��� :=�& +������� .#����,��� ���@�������������/� ��� �������� �! ,��� ��������� ��� ���� ""+��"���",��� +��+����� �! ����" ,��� �������%���� ,��� ����-=�E�7����� ����$��� %$ �,�-����� :�& ����$"�"� =� ��� ���@����-������� ���+"� ��� #��@���$ �# =�M� :=�& %������ ����" ,�""����C�����$ ������ ���� ��� ������� ����� ������� ���+ .$�� 0/.8�>� 3�4>2N �� >�*� 3�410N� ����� 7�� +R 3�36/ ��"�����"������� ���� ���@���� "����C�����$ �������� ���������"���� ��������� #��� "��� �� �!�

��������� ������� ������ �#�������������# ��� ��� ��� ��� ��� �������� �� ������� ������ �#�������������# ����������� �# ��� �������� ���������" ���� ��������� ,�" ����"��������� �� �������� &� ��"+��"�� ,� �;������ ��� �##��� �#���@���� �� !& -������ �������� ������� �$+��"��"������$�7�� ",������ ,�" "����C�����$ �������� �� >8 � �#��� ��������� ������ ������� ,��� ���@���� >8 � %�#��� "��"��������� ���+����,��� ��� ������� ���+ .+R 3�30/ .$�� 2$/� &� ,�" 40N �������� ���@����-������� ������" ���� ��� ������� ���+��� ��������� ��� ���� �# ���@���� �� �������� �������

���������" ��"+��"�� ���� ,��� ������� ,��� 3�0N ������ ��� �#������@���� �� +����%� ���������� '����� �� ��"��" �����"��������������� �������� ������� ���������"� ���@���� ��� ��� ��������������� ������� ���������" .$�� 2%/�

��������� ������ ��� �#��!���� ��3% �&�������� ����������� �# ��� �%��� �������� &� ,�" �""������� ,��� ���������$������ �;+��""���� �����"� ����"���+��"�K�&� ,�" +��#������ :���������� @����������� ��� ���"�������$ ����" #�� ���� �$������ ,������������� �� ���� �# ����-������,����,�" ��� �##����� %$ !: �����@���� ���������� �,���$-#�� ���" �#��� ���������� ��!��;+��""��� �# =�-4� =�-03� =:!-�� =:!-�� ��� �!:-� �# ���������"��� ,��� +�������� �� %��� ���+"� =� ��� ���� ������� ,������@����� ��,����� �$������ �����" ,��� "����C�����$ ������ �����������-������� ���+ .$�� /$� %/�

=&'=(!

��� ����� ��"+��"� ����C��� ���@����� ��" ����-����� �������-���� �##���"� ����-����� �������$ ��" %��� "��,� �� "������������ �����" �������� ���+�" "��+��; ���" ��� �$�����������"�� ����� +��" .&��� �� ��� 0122) �����"�� �� ��� 0122� 0118/� ����-���� �##���" �# ���@���� ���� ��"� %��� �����"�������=��@���� �" �%�� �� ����%�� ��� ���,�� �# ����� ����� ������������ %������ ��������� .���$ �� ��� 011>/�> ������" ��� �;����������"� �# ������ �# ���@���� �" ������� �� �" ���,� �������@���� �����" � ��%�� �# �$������" �������� =�-0� =�->��!:-�� =:!-�� ��� ��7> .5��� �� ��� 0118) ��"������ �� ���0116/� =��@���� +�������" ��� +�������� �# �!:-�� =:!-��

$����� )" 5����� �� ��������� �� �������� �� ������ ��#"��+���� ���@���� �� ������� ,�" �++���� �� ��� "��� �# ����� ���� "���,�" �%������ #��� 3 �� 03 � +�"�-���������� 7+������" ,�" "�+������ #��������" ��� "������ #�� =�M ����" �" ��"���%�� �� ��� ����� ��� ��� ������� ���+��"�������� +������������+� #��� ��$ 03 �" "��,�� ���������" ����" ����� ���@����-������� ���+ �++����� ������ ,��� %������� =� �������"������� .�/ ���+���� ,��� ������� .�/) �����C������ � 833� ���"� ������",��� "��� #��� ��$ > �� ��$ 03� ����� ���H 63���

$����� +" ��������� �������� ��� ������ �� �������� �� � ����������� ��� ��� ��� ������ �&�������� �� ./" ���� ,��� �������,��� ���@���� �� ������� ����� #�� < � ���� "����� ���� ""+��"��� ,�"+��+����� &���" ,��� �������%���� ,��� ����-=� ��� ����- < . <-0E& 23 �� <->E& 24/ "��� � �,�-����� �����I���"����� �# :=�&��� �7� � ������"�� ��%�� �# ���������" ����" ,�" �%"����� �� ��� < ����@����-������� ���+ .�/ ���+���� ,��� ��� +����%�-������� ���+ .�/�:��, �$�������� ���� ,�" ���"�� "� ���� ��� �"��$+� ������� ��� � 3�0N+�"����� ����" 1�/� !� ������ ,�" "��� �� <-0 ��� <-> �;+��""��� ,������@���� ����������

�+7 'O'5= �� �� ��7 9('�!�� (: =!L7�=���=L7 7����(�(�J

=�-4� ��� =�-03 �� ���� %���� ���� ��� �����$��-�������������� ��� �����" =�-4 ��� =�-2 +�������� �# ���������$�� ������� �+������� ��������� ����" .��%"�� �� ��� 0116) ��"�������� ��� 0116/� ��� ����-����� ��� ����-���� �##���" �# ���@���� ��������� �� %� �������� �� +��� %$ ��� �##��� �� ������� ���"��$������" .���$ �� ��� 011>) ������ �� ��� 0118/� ��� ����-����� ��� ����-���� �##���" ��� ������ �� ������� ���

+��"�������� �# ����� �� ���� �������" %$ �������-+��"������ ����",���� �� ��� +��"��� +����""�� ������� �� � �$�+���$��" �� �!.L�"��$ �� ��� 0113) &������� �� ��� 0114/� ���" +����"" ����" �� ������������� ��� "%"�@��� +����#������� �# �������-"+���C� ��$�+���$��"� ,���� ���� ��"� �� ��� "+���C� ����� ��"+��"�.�������� �� ��� 012*/� ���������" ����" ��+��"��� ��� ������������-+��"������ ����" �� "��� ��� ��� ��+�%�� �# +��"������ �������� ���� �������" .5����� ��� ���������� 0122) ���%%� �� ���0110) 5���� ��� ����� 0116) ����� �� ��� 0116) &������� �� ���0114/�=� ���" "��$� ,� "���� �� ��������� ��� �##��� �# ���@���� ��

���������" ����"� ��� ���"��$ �# ���������" ����" �� ��� "���������"�� > � �#��� ��������� ,��� ���@���� ��� #��� �� 8*N %$��$ 03� =� ��������� ��������� ���������" ����" #��� ���@����-������� "��� �++����� ������ ��� "������ "������� #�� =� ��������=��@���� ��"��# ���" ��� ��� �" � ��+��� �" ����� ��� �������� �����"�� �������� �# �������� ������� �$+��"��"������$ ,�" �%"������

$����� 0" 5����� �� ��������� �� ���������� ��������" ���� ,��� ������� ,��� ��+�������@���� �� ������� ������ ���� :=�& ,�"�++���� �+�������"�$� �,���$-#�� ���" ����� �! ,��� �%������ ��� "����� ���� ""+��"���",��� +��+����� �������%���� ,��� ����-=�E�7��� ���� ����$��� #�� �7E:=�&-��%���� ����" �"��"���%�� �� ����� ��� ��� ������� 7����������������" ���� ��������� ,�" "��� �� ������@����-������� ���+ .�/ ���+���� ,��� ����������-������� ������� ���+ .�/� :��, �$������������ ,�" ���"�� "� ���� ��� �������� ������� .��:=�&/ ��� � 3�0N +�"����� ����" .�/�

$����� *" ��������� ������� �������� �� ������#" .�� �/ 7##��� �# ���@���� �� ���������" ���� ���"��$ %$ ����"� "�������� =��@���� �� ������������ ,�" �++���� �� ���"� �# ���� ��� ���� � ��$ #�� < �� 7+������" ,�" "�+������ #��� �����" ��� "������ #�� ����"�M ����" .���������" ����"/ �" ��"���%���� �������� ��� ��� ������� � "����C���� ������"� �� ��� ���"��$ �# ���������" ����" ,�" �%"����� �� ��� ���@����-������� ���+ .�/ ���+���� ,��� �������.�/) �����C������ � 833� ����� ���H 63��� .�/ ���������" ����" ,��� ��������� %$ �;������� �� ���"� 03 ������ C���" �� ���� ���+� ���������" �������"��$ ������"�� %$ �++��;������$ 40N ���+���� ,��� ������� .063� < �� >8<� 03 ����" +�� ��>� +R 3�36/�

$����� 2" ��������� ������� ����� ������ �#�������������#".�/ ���� ,��� ������� ,��� ��+���� ���@���� �� ������� ����� .������� 0/���� ���� &� ,�" ������ %$ !: � :�� #����� ������� &� ,�"������ �� ��� ���� ,����� �������� ��������� .������� >/� ���� ,������������� �� ��� ���"�� "�#��� �# ���" ��� ��� �������"" ,�" ���"��� �" �����#�"������ �# &� .����� 7�/� .�/ =��@���� ��� ��� ����� ��������������� �$+��"��"������$� ���� ,��� ������� ,��� ��+���� ���@���� ��������� ����� .������� 0/� ��� ���� ���������� ,�" ������ %$ ������ ���� �"� #����� �������� �������� ���������� ,�" ������ ,��� ������ ��� �� ������������� �� +����������� .������� >/� 7�� �������"" ,�" ���"��� �" �����#�"������ �# ���������� �#��� >8 � .����� 7�/�

L(�� 008� !(� 0 9�!'��J >333 =�=?'=�( =! '&7 ��!�7���! &7�� �=����=(! �+8

���"� �%"��������" "���"� ���� ���@���� ��������" ���������"����" ��� �����" ���������" ���� ���������� ��� �������������,����� ,�" ��� �""������� ,��� ��� �������� �# ��� ��"���-�����$ #����� <� �" � ������"�� ��%�� �# ���������" ����" �� ���"��� ���� %� ��� ��"�� �# �������� ��������� �# ���������" ����"#��� "��� �� �!� ,� ��;� �������� ��� ���@���� �##��� �����������" ���� ������������ �;����� ���������" ���� ��������� ,� ������� :=�&

������ ���������" ���� ��������� �" +�����"�$ ��"���%�� .������ ��� 011>/� :��, �$�������� ����$"�" �# �! ����" �����"������ ������� #��@���$ �# :=�& %������ ����" +��"��� �� ���@����-������� ���� ���+���� ,��� ��� �������" .0�2K*�2N �� ���@����/�=� �" +�""�%�� ��� =�M� :=�& %������ +�+������ ������ %����+������� ��� ������ ��������� ����"� ����� ��������� ����" ���� ����� �" �������-+��"������ ����" �" ,��� �" �+������� ���������"����") ��,����� 63K23N �# ��� ��������� ����" �� ��� �$�+�������""��" ��� ������ �� %� ���������" ����" .���" �� ��� 0114) ������ ��� 011</� ����� �� ��"��" "++��� ��� �$+����"�" �������@���� ��������� �������� ���������" ���� ��������� #���"��� �� �!��� �;����� ,������ ��� �������� ���������" ���� ���������

,�" ����"����� ���� �������� ������� �$+��"��"������$� ,� ����������� �##��� �# ���@���� �� !: -������ &�� �� �����-"������ � 40N �������� &� ��"+��"� �� ���@����-�������������" ���+���� ,��� ������� ����� .+R 3�30/� �� ���C��#����� ��� ����� ����������� ��� �$������ ������� �##��� �#���@����� ,� �;������ �$������ �;+��""��� �� "���� 7���������!� �;+��""��� �# =�-4� =�-03� =:!-�� =:!-�� �!:-� ,���

"��� �� ���@����-������� "��� ���+���� ,��� �������-�������"���� �" +�����" "����" ���� "��,� ���� ���"� �$������" ��� "����� ��� ��������� +��"� �# ������� ���������" .7�� ��� 5���� 011>)5���� �� ��� 0118%/� ���"� ���� "���"� ���� ���@���� �������"������� �$+��"��"������$ �� +��� %$ +��������� �$������ �;+��"-"�������"� ��"��" "���"� ���� ��� �������"� %$ ,���� ���@����

�������" ����� #������ �" �� +��� �� �� �##���" �� ���������"����"� =� +��������� ���@���� ������"�" ���������" ���� ����������� ��� �������� �$�+� ����� ,���� �� ��� ����" �� �����������������" ���� ������� +��"�������� �;��"����$ #�� ���������$+��"��"������$� ��� ��"��" �# ���" "��$ ��"� "���"� ����� ��"��"�������" ,���� ���@���� ��������� ��$ %� %���C����� #�� �;��+���������� ���������" ���� ������� +��"�������� ���� %� ��+�������� ��� ��������� �# ������" ���+��"�"�

�7:7�7!&7

��%� � 5��� =H ������$+�� ��� #�������� ����������"���" �# �� ����-������������������" ����"� � ������ 086H><10K><14� 0113

���� � !������ �� ��������� 9�H :����� ������� +��"�������� �#��� 'L ������������������" ,��� ����C������ �# ���������" ���� �$��"�������� � ������ �������03<H2*2K28*� 0114

�������� 9� ������� ��H �������� ����" ��� ��� ������� �# ������$� ������*1>H>86K>6>� 0112

����,"�� ��� L�� $�� 9� ��,�����%����� 5� ��:������ L�� :��� ��� '��$�&H 7;+��""��� �# 7-�������� %$ ����� ��������� ����"H 7-�������� �" ���������� ���� ��##����������� ������� ����������"��� �# �+������� ���������" ����"��� ������� ����"� ��� � ������ >8H><4<K><<8� 0118

&������� ��� �$��� �� ������"�� 5�� �����"�� �� �������$ ��H 7+����������������"Q ���� �������� �# ������$ �����"� �� ����������-������ "�������� �������� 2<H8<6K823� 0114

&��� �� ���#C�� �� ���� ��� �"��� � H 7#C�����$ �# >4*32 �����"� +���$�����������" ��#������� ��� � ��� ������ ������� *>H4<2K42*� 0122

7�,���" �� :������$ �� 7��� �� �� ��H ��#-������"����� ��+���� 6N ���@���� �����#�� �;������ ���������� ,���"� ��L ��$ ���+ ���� ��+������ L��"� ����������� 0*8H>6K*3� 0112

7�� ��� 5��� =H 7���$ �������� �����" �� ��� �������� +��"� �# ������� "��"������$�!�� ���� ���� �� "�� 21H0*12K083>� 011>

��%"�� 9� =�%���"�� ��� ������ ��� ��"������ ��� ������ �9� ������ ��� ������ ��H &������ ��@�������" #�� �$������ +�������� �� ��"+��"� �� ����������������" ���@���� ��� -><431� � �������� ��# �� ��� 06H6*<K686� 0116

���%%� � ����" � ����� ��� 5��"��$ ��� !������� �� ����"���� � H ����������� +��"�������� %$ ����� �+������� ����"� � ������ 084H*464K*440�0110

�����"�� &9� 9��"�� �� L�$������"�� �� ���"���� =H ����C������ �#������������ ��"+��"�" ��� �������� ��"��"� ����� ��+���� �-2*< ����������# ������� �L-> ��#������� ��� � ��� ��� 03H>31K>>*� 0122

�����"�� &9� ������ ��� ���"���� =H ��"������+$ "++��""��� �# ���+�" "��+��;���" .�L/ ���������" ��� ����������� �# �L-"+���C� �-���� �����$ %$���@���� �� ����� +��"� ��� � ��� ������ ������� *2H>361K>348� 0118

9���% �� '��$ �&H ��������� �# 7-��������-�������� ����"��� �� ���������"-������������� ����" %$ ��I�������$ ��������" ���� ��%����� ���������" ����" ������� � ������ 043H834<K83<*� 0112

5����� &� ��������� 7H �������� ����" ��� ���"�"� ������ ���� 01H0<<K020�0122

5���� � ���� !H 7+������� �$������" �� �������� ������� ���������"� � �� ����������� **H<24K233� 0116

5���� � 5��� � ��,� ��� ��"���� � ��5����� �&� ���� H �$�+���$��#������-�""������� �������-0 �" ��@���� #�� ��;��� ����������� �# ��������������� ���������"� �� � ������� 0*0H*68K*61� 0118�

5���� � ��"���� � ����� �� ��5����� �&� ���� !H &��������������� �#�+������� �$������ +��C��" �� "��"��������� ��� ����������� +��"� �# ��������������� ���������" �" ,��� �" �������� ������� ���������" �� ��"� "�������$�# �� ��# �� ��� 0*H*4<K*<6� 0118%

5���� � ���� !� 5��� �� �����$ 5�� ��5����� �&H �##�������� ����������# ���������� 0-� .=�0-�/ ��� ���������� 0-� .=�-0�/ �� ���� �+����������������$��" %$ 'L � �%$ ������� *H>1K*1� 0118�

5���� � 5��"��"� :� ���� � :��"�,� �� ���� !H &�����%���� �# ��� & >2������� �� �������� ��� ��������-������ "��� ��������" �� & >2 -E- ����� ������� 0<6H82>>K82>1� 0114

5��� �� 5���� � ��"���� � ����� ��� ����� ��� ��5����� �� ���� !H7##��� �# � ����� ��+���� �������������� ���@����� �� ���������$���$������ ���� �;+��""���� ���$�# �� ��# �� ��� 0*H<0K<4� 0118

5������ =� �������� 9�H ��"-'������� ���� "++��""��� �# ������� �$+��"��"������$�������� �" �������� ��� ���� �����"�" #�����-�� � ������ 082H*3<>K*3<2�011>

������� 95� 9��"�� &�H '+��������� �# ���� �+������� ���������" ����" <-0 ��� <-> ��-"��������$ �������" �� ���� %$ "����-"�������� ������������ ��� ������� ><H128K121� 011<

���"�� &�� ������� ��� ������-���� �� ������" :� �����" �9� �"�$� 9�H

$����� /" ��������� ������ ��� �#��!���� ��3% �&��������".�/ �,���$-#�� ���" �#��� ���������� ����� �!� #��� ��� ���������"��� "��� ,�" �%������� ��� ��!� �;+��""��� #�� =�-4� 03� =:!-�� =:!-���!:-�� ��� �-����� ,�" �������� %$ �����"� ����"���+��"�K�&�� �&�+�����" ,��� ��"����� �� �����"� ��� ��� +�������+��� ���� ���������������� =��@����-������� ���+ .=/ ��� �������-������� ���+ .&/� .�/ ������"�������$ ����" #�� ���� �$������ ,��� @��������� %$ ����������� �������� �# ��� �$������ ��!� �� ���� �# �-������ =��@����-������� ���+.=/ �����"������ �������� �$������ �;+��""��� ���+���� ,��� ��� �������-������� ���+ .&/�

�*- 'O'5= �� �� ��7 9('�!�� (: =!L7�=���=L7 7����(�(�J

��������� ��� ��������� �# ���������" ����" �� "��� ����"+����" ��� �;+����"� ��%$ ��� 0<>H082*K081*� 0113

���" �� ��""�� �� ��#�� �� �� ��H ���� ������" ��������� ����" ������� ������������ �$�+����� ��""��" �� � "��� ����� ����� ������ � ������ �������034H0>1*K0>11� 0114

��������� 7� 5����� &� 7�,���" �9� ���#C��" � :�$�� �H ������������ �# ��������� �$�+� ���� ��������� ����" �#��� �;+�"�� �� ��� ������� "��"������I���"���� �"������$������ � �%$ ��� 044H0468K044<� 012<

������ �&� ��"@������� �� ������- � ������ �� :������ &� ������� �� :�"��� � ���� 7H ���� �+������� ���������" ����" �;+��"" ��� =&��-* ��������=������"���������� ��� ������������� �����"��+���� �����"�������� �� �������� 0*8H>>K><� 0114

����� (�� ����$ =� �$���� 5H ���-�""������� �$�+���� ��""� �� �����������C�����$ ���"-0� ���� +�+���������"� ��� ���+�" "��+��; ���"��#������� � ������ ������� 036H11K038� 0116

(��,� �� !�����,� � ������ �� ��%� H =���������-0� ��� �������$��-�����+���� �����$-"��������� #����� ������� ���������" ���� �����������##������� � ������ ������� 034H880K886� 0114

? �� ����� �5� ����" ��H &������� �����������"�" ��� �������" ������%�� ��������" ���� +�������� %$ ��+������ �+������� ���������" ����"� ��� ������ � 02H0><<K0><1� 011<

�������� 7�� ���� &� ����""��� :H ��� ����������� �# ������� ����+���" ������ � �$�+���$��"� ������ ���� 8H6K2� 012*

������ �9� ��"������ ��� ������ ��� ����" &7� ����� ��H &$������ ���������� ���� %$ ��� ������������� ���@����� � ���#��� � � 66H>*8K>83�0118

������ � &������ �� �����, (� ��+���$ � 5��� =H 7������� �������-+��"������ ��+����$ �# ������ ���������" ����" �" �""������� ,��� �������$������"�� �;+��""��� �# =� �������� � ������ 0*1H>660K>666� 012<

���$ J�� ����� 7&� ����" 7� ������ �9� ������� 9:� �$�� ��H =���%����� �#����� ���� ���,�� %$ �� �����#����-������� �������@������������ �������� 6>H*6>2K*6**� 011>

���� 9&� ������ �� ���+# 7� ��������� � H 7##��� �# ��� �����"++��""�����+�+���� �-���$�-�-������ (-����$� �"��� �� �+������� ���������" ����"� ������� ������� 11H23K2>� 011>

���� �� '��$ �&H =���%����� �# �+������� ���������" ���� #������ %$ ��, ��"����������� ��������� "���������$ �������" =&��-0 .& 68/ �;+��""��� %$����� ���������" ����"� � ������ 084H**8<K**66� 0110

��"������ ��� =�%���"�� ��� ������ �9� ������ ��� ������ ��� ����� ��H&$������ �������� %$ ��� �������������" ���@���� ��� -><431� �������� � � 62H*46K*<>� 0116

����""�� � � �������"��� 9� 5���� �� �����" �9� L����" =�� 5�+"��%��� ��� �" 9 H ���� �+������� ���������" ����" ������ +��#��� ���+���������� +�����$+���� ������" ����� �� ����� ������ � ������ ������� 18H044K0<*�0113

�$���� 5� ����$ =� �����$ ��� �� ��H � ����������� ����������� �������� "��$ �#����$������ �������� ��������� ����� ��������� ,��� ���@����� � ������������� 003H<*8K<*1� 0112

L�"��$ 9�� !����� �� ��,�� 7� ������$ 9�� !��� �H ������� +��"�������� ��+������" ,��� ������"���� ���#����� ���+�" "��+��; ���" ��#������"� �� �������� 0>>H**K8>� 0113

���� � ������ �� 5���" (� �� ��H 7+������� ���������" ����" #��� ������ ����"��� %��� ��������� =�7 ��� :���=� � �%$ ��� 0<6H0*6*K0*46� 011>

���� � 5���� � ����� ��� :��"�,� �� ��� ��� ���� !H ���� �����"�"#����� ����+��� == .+<6/ "�������� �" ��@���� #�� ��� ��������� �# ���������"����"� �������� 22H>28K>22� 0114

���� � :��"�,� �� O���� �� �� ��H �+��""�� ���������" ���� ��������� ��������� ������� �$+��"��"������$ ��"+��"� �� ���� ������� �!: ����+��� +<6� ������� 061H4082K4066� 011<

����" &7� ��%"�� 9H =������� �# �����#���� ��� ����� �$������" %$ ���@������� ��" �$���;$����� ����%���� �-28> �� ���� %���� ����" �� ������ � ����������� 08H20K26� 011<

���� ��� ����� �� ������ � �� ��H � ���"� = ����� �# �� ���� ������������� ��������#���� ������ �� ������ +������� ����� ��� 6*H60<4K6023� 011*

L(�� 008� !(� 0 9�!'��J >333 =�=?'=�( =! '&7 ��!�7���! &7�� �=����=(! �*�