Avances en identificación, Avances en identificación, cuantificación de alergenos cuantificación de alergenos

y tratamientos y tratamientos de hipo – sensibilización.de hipo – sensibilización.

Dr.MarioDr.Mario Soto AguileraSoto Aguilera

Spectrum Labs USASpectrum Labs USA

•En Diciembre 2001, nos trasladamos a nuestro propio En Diciembre 2001, nos trasladamos a nuestro propio edifico corporativo en Tempe, Arizona.edifico corporativo en Tempe, Arizona.•50% de las muestras corresponden al mercado de USA 50% de las muestras corresponden al mercado de USA y el resto al mercado internacional.y el resto al mercado internacional.•Durante 2009, Spectrum testeó Durante 2009, Spectrum testeó 35.00035.000 animales animales provenientes de 42 países.provenientes de 42 países.

Spectrum LabsSpectrum Labs

1.1. Spectrum LabsSpectrum Labs – Atiende al mercado de USA. – Atiende al mercado de USA.

2.2. Spectrum Labs WorldwideSpectrum Labs Worldwide – Atiende al – Atiende al mercado internacional .mercado internacional .

3.3. Spectrum Health CareSpectrum Health Care – Diagnóstico de alergias – Diagnóstico de alergias en personas. en personas.

4.4. Investigación & Desarrollo Investigación & Desarrollo – Subcontratado a – Subcontratado a una compañía de Portland, Oregon.una compañía de Portland, Oregon.

5.5. Laboratorio para realizar el diagnóstico de Laboratorio para realizar el diagnóstico de alergias con Metodología SPOT. alergias con Metodología SPOT.

6.6. Laboratorio autorizado por USDA para Laboratorio autorizado por USDA para elaborar tratamientos de hiposensiblizaciónelaborar tratamientos de hiposensiblización..

Test que identifica y cuantifica la fuerza de la reacción, con la cual se une el anticuerpo Ig E - alergeno específico presente en el plasma, con el alergeno en una preparación de laboratorio.

Metodología SPOTMetodología SPOT Para Para asegurar la precisión y asegurar la precisión y

exactitud de los resultados,exactitud de los resultados, la Metodología SPOT la Metodología SPOT

basada en Elisa y en K9 basada en Elisa y en K9 RAST mejorados, emplea RAST mejorados, emplea procedimientos de inmuno procedimientos de inmuno absorbancia con Proteína A absorbancia con Proteína A de origen estafilocócico de origen estafilocócico para remover la porción Fc para remover la porción Fc de la molécula de IgG de la molécula de IgG presente en la muestra; presente en la muestra; además emplea un inmuno- además emplea un inmuno- absorbante helmíntico para absorbante helmíntico para disminuir la concentración disminuir la concentración de IgE no específicas a las de IgE no específicas a las alergias.alergias.

Cuantificación de alergenosCuantificación de alergenos

El problemaEl problema: “: “No allergen present: false negative No allergen present: false negative results reported” ya que results reported” ya que el alergeno que se presenta el alergeno que se presenta en forma líquida se pierde por derrame durante el en forma líquida se pierde por derrame durante el test.test.

La solución propietaria de SPECTRUM LABSLa solución propietaria de SPECTRUM LABS: : Recubrir las micro placas de poliestireno con una Recubrir las micro placas de poliestireno con una solución adherente de tipo orgánico basada en solución adherente de tipo orgánico basada en carbono, con lo cual se asegura que los alergenos carbono, con lo cual se asegura que los alergenos se encuentren presentes en las micro placas al se encuentren presentes en las micro placas al momento de realizar el test.momento de realizar el test.

Cuantificación de alergenosCuantificación de alergenos Medición realizada en una placa de poliestireno Medición realizada en una placa de poliestireno

recubierta con una solución orgánica propietaria de recubierta con una solución orgánica propietaria de Spectrum, que mide la fuerza de la relación entre Spectrum, que mide la fuerza de la relación entre los anticuerpos IgE presentes en el suero /plasma los anticuerpos IgE presentes en el suero /plasma y el / los alergenos específicos agregados a la y el / los alergenos específicos agregados a la placaplaca..

NegativoNegativo:: Si el score es menor en un 150 % en Si el score es menor en un 150 % en relación con el Control Negativorelación con el Control Negativo. .

Sospechoso (Borderline):Sospechoso (Borderline): SSi el score en i el score en relación con el Control Negativo se sitúa entre el 151 relación con el Control Negativo se sitúa entre el 151 % y el 199 %.% y el 199 %.

PositivoPositivo cuando el score es mayor que 200 % en cuando el score es mayor que 200 % en relación con el Control Negativo.relación con el Control Negativo.

Paneles de alergenos definidos para Chile:

91 alergenos para Caninos y Felinos:

PastosPastosSemillasSemillas ÁrbolesÁrboles HongosHongos EpidermalesEpidermales PolvoPolvo

55 88 1414 1515 55 44

AlimentosAlimentos InteriorInterior InsectosInsectos PulgaPulga StaphStaph MalasseziaMalassezia

2424 88 55 11 11 11

46 alergenos para Caninos y Felinos:

PastosPastosSemillasSemillas ÁrbolesÁrboles HongosHongos EpidermalesEpidermales PolvoPolvo

44 33 77 66 44 22

AlimentosAlimentos InteriorInterior InsectInsectosos

PulgaPulga StaphStaph MalasseziaMalassezia

1111 55 11 11 11 11

Tratamientos de Hiposensiblización

Elaborados para cada paciente en base a los resultados del Spot Test, bajo prescripción Médico Veterinaria.

Cada set se elabora en el laboratorio de Spectrum, según estándares y normas USDA.

El tratamiento inicial de 9 meses de duración, incluye tres frascos con un máximo de 20 alergenos.

Tratamiento de mantención de por vida.

Control de calidad - Normas FDA Control de calidad - Normas FDA empleadasempleadas

Tratamiento de HiposensibilizaciónTratamiento de Hiposensibilización

Objetivo clínico:Objetivo clínico: Estimular la producción de anticuerpos Estimular la producción de anticuerpos

bloqueadores IgG específicos, mediante la bloqueadores IgG específicos, mediante la inyección subcutánea de los alergenos inyección subcutánea de los alergenos identificados y cuantificados en cantidad y identificados y cuantificados en cantidad y concentración controlada y sujeta a un estricto concentración controlada y sujeta a un estricto calendario de aplicación.calendario de aplicación.

La producción de IgG se estimula de modo que La producción de IgG se estimula de modo que bloquee la respuesta alérgica al evitar la unión del bloquee la respuesta alérgica al evitar la unión del alergeno con la IgE específica.alergeno con la IgE específica.

Umbral y Efecto sumatorio de efectos ( PJ Umbral y Efecto sumatorio de efectos ( PJ Ihrke, UC Davis, 1982)Ihrke, UC Davis, 1982)

Umbral:Umbral:

Cada individuo puede tolerar una cierta carga Cada individuo puede tolerar una cierta carga alérgica sin que se manifiesten signos de la alérgica sin que se manifiesten signos de la enfermedad, pero un pequeño incremento en la enfermedad, pero un pequeño incremento en la carga lleva al individuo sobre el umbral y se carga lleva al individuo sobre el umbral y se desencadena la signología clínica.desencadena la signología clínica.

Efecto sumatorioEfecto sumatorio: : Enfermedades concomitantes que Enfermedades concomitantes que presentan prurito pueden llevar al animal sobre el presentan prurito pueden llevar al animal sobre el umbral alérgico.umbral alérgico.

Qué es el umbral ?Qué es el umbral ?El prurito aparece cuando los niveles de anticuerpo IgE inducidos por los alergenos específicos , sobrepasan el

umbral.

Th

resho

ldT

hresh

old

Itchy!! Not itchy…

Explicación clinica THExplicación clinica TH

Las IgG se producen a medida que la concentración Las IgG se producen a medida que la concentración y la cantidad de las inyecciones aumentan.y la cantidad de las inyecciones aumentan.

El nivel de IgG alcanzado puede permitir vivir al El nivel de IgG alcanzado puede permitir vivir al animal en su ambiente, por cuanto el animal ha sido animal en su ambiente, por cuanto el animal ha sido hiposensibilizado, se han controlados los síntomas hiposensibilizado, se han controlados los síntomas alérgicos y se encuentra bajo el umbral alérgico.alérgicos y se encuentra bajo el umbral alérgico.

Alcanzar este estado,puede durar un mes en Alcanzar este estado,puede durar un mes en algunos animales, 4 a 6 meses en otros y hasta 9 algunos animales, 4 a 6 meses en otros y hasta 9 meses en algunos individuos.meses en algunos individuos.

Time/Dosage

Co

nce

ntr

atio

n

IgG

IgE

Threshold

Effects of Hyposensitization on IgE and IgG Concentrations

Cantidad de alergenos por TH.Cantidad de alergenos por TH.

Cada TH contiene 3 frascos con concentraciones en Cada TH contiene 3 frascos con concentraciones en aumento: Vial A - 1 : 720.aumento: Vial A - 1 : 720. Vial B - 1 : 180. Vial B - 1 : 180. Vial C - 1 : 60.Vial C - 1 : 60.

Para disminuir el umbral, el animal debe ser Para disminuir el umbral, el animal debe ser tratado para todos los alergenos a los tratado para todos los alergenos a los cuales es reactivo.cuales es reactivo.

A medida que se inyectan más alergenos, se A medida que se inyectan más alergenos, se producen mas anticuerpos IgG específicos y por lo producen mas anticuerpos IgG específicos y por lo tanto es mayor la oportunidad para tratar los tanto es mayor la oportunidad para tratar los síntomas y llevar al animal bajo su umbral.síntomas y llevar al animal bajo su umbral.

Proceso de HiposensibilizaciónProceso de Hiposensibilización

Inyección subcutánea de alergenos conInyección subcutánea de alergenos con dosificación y concentración que aumentan dosificación y concentración que aumentan en el tiempo.en el tiempo.

Los tres frascos inciales permiten un Los tres frascos inciales permiten un tratamiento de 9 meses de duración.tratamiento de 9 meses de duración.

Se recomienda que el animal prosiga con Se recomienda que el animal prosiga con tratamiento de mantención. ( cada frasco de tratamiento de mantención. ( cada frasco de mantención alcanza paramantención alcanza para 9 meses)9 meses)

Efectividad del tratamientoEfectividad del tratamiento

El tratamiento se considera exitoso cuando:El tratamiento se considera exitoso cuando: La dependencia a los esteroides y / o La dependencia a los esteroides y / o

drogas antiinflamatorias se reduce o drogas antiinflamatorias se reduce o elimina.elimina.

Al observar al paciente, tanto el veterinario Al observar al paciente, tanto el veterinario como el dueño estiman que existe como el dueño estiman que existe mejoría.mejoría.

Hasta el momento, Hasta el momento, Spectrum ha testeado Spectrum ha testeado 380.000 animales, de380.000 animales, de los cuales el 70 % ha los cuales el 70 % ha realizado el cambio de dieta recomendado y realizado el cambio de dieta recomendado y el tratamiento de hiposensibilizaciónel tratamiento de hiposensibilización . .

Efectividad del TratamientoEfectividad del Tratamiento

Durante el 2009, Durante el 2009, Spectrum contactó a 2,463 Spectrum contactó a 2,463 veterinarios de USA que realizaron nuestro veterinarios de USA que realizaron nuestro tratamientos: tratamientos:

Sólo cambio de dieta: 48% de mejoría.Sólo cambio de dieta: 48% de mejoría. Solo hiposensibilización: 67 % de mejoríaSolo hiposensibilización: 67 % de mejoría Cambio de dieta mas TH: 85% de mejoríaCambio de dieta mas TH: 85% de mejoría.. Solamente el cambio de dieta, unido al TH Solamente el cambio de dieta, unido al TH

puede garantizar una disminución del umbral puede garantizar una disminución del umbral que permita al animal vivir en forma que permita al animal vivir en forma confortable.confortable.

Razones posibles para pobres Razones posibles para pobres respuestas al tratamientorespuestas al tratamiento

1.1. Animales de mayor edad por lo general dan una escasa Animales de mayor edad por lo general dan una escasa respuesta inmunitaria.respuesta inmunitaria.

2.2. Fallas en el tratamiento de otras enfermedades antes de Fallas en el tratamiento de otras enfermedades antes de iniciar el tratamiento. iniciar el tratamiento.

3.3. Escaso compromiso del dueño con el regimen de Escaso compromiso del dueño con el regimen de hiposensibilización y con los cambios de dieta.hiposensibilización y con los cambios de dieta.

4.4. Sistema inmunológico deprimido:Sistema inmunológico deprimido:

Por lo menos en el 50 % de los animales que no Por lo menos en el 50 % de los animales que no responden, la causa radica en un sistema inmunológico responden, la causa radica en un sistema inmunológico deprimido.deprimido.

Se requiere un inmunoestimulante para destrabar (jump Se requiere un inmunoestimulante para destrabar (jump start) el sistema inmune.start) el sistema inmune. . .

Pomeranian/Poodle mix with severe Feet Licking as well as Atopic dermatitis.

8 ½ months into hyposensitization

“A picture speaks 1000

words”

““UPDATE on ATOPIC DERMATITIS and UPDATE on ATOPIC DERMATITIS and SECONDARY INFECTIONS”SECONDARY INFECTIONS”

presented at the Ontario (Canada) Veterinary presented at the Ontario (Canada) Veterinary Medical Association, Medical Association,

26 Jan 0626 Jan 06

Stephen D. White, DVM Professor, University of California at Stephen D. White, DVM Professor, University of California at Davis:Davis:

““There is a great deal of controversy over which is more accurate, There is a great deal of controversy over which is more accurate, intradermal skin testing or serological tests. In 3 studies, at University intradermal skin testing or serological tests. In 3 studies, at University

of California at Davis, Colorado State University and Gifu University of California at Davis, Colorado State University and Gifu University (Japan), involving a combination of over 250 dogs, the number of (Japan), involving a combination of over 250 dogs, the number of

positive responses to hyposensitization were similar regardless of positive responses to hyposensitization were similar regardless of whether the hyposensitization solutions were based on Intradermal whether the hyposensitization solutions were based on Intradermal

Skin Testing results or ELISA tests”.Skin Testing results or ELISA tests”.

MUCHAS GRACIAS POR SU TIEMPO…

Mario.soto@itrconsultores.cl

Celular: 09 499 2316