HEMOGLOBINURIA PAROXÍSTICA NOCTURNA: Diagnóstico por Citometría de Flujo AUTORES: Miguel Ángel Castilla Reyes** Ángel Lara Bohórquez** Miguel Medina Alonso** María Cinta pavón López ** Antonio Amián Martínez *

** Diplomados de Enfermería del Servicio de Hematología del Hospital Juan Ramón Jiménez de Huelva * Hematólogo Adjunto del Servicio de Hematología del Hospital Juan Ramón Jiménez de Huelva

Hemoglobinuria Paroxística Nocturna

• Anemia Hemolítica crónica intravascular

• Mutación del gen fosfatidil-inositol-glucano A

• Es una enfermedad rara y grave

OBJETIVO

La Citometría de Flujo:

• Ejecución Rápida y fácil

• Económica • Mayor sensibilidad y especificidad frente a otros test

RECURSOS MATERIALES

• Citómetro Navios de Beckman CoulterR

• Anticuerpos monoclonales para serie roja: CD55, CD59, CD235, CD45

• Anticuerpos monoclonales para leucocitos: Serie Granulocítica ( CD16, CD55, CD59,CD45) Serie Monocítica (CD14, CD45,CD64)

• Muestra de sangre periférica anticoagulada con EDTA

• Solución de lavado (PBS) y Lisis (VERSALYSE)

RESULTADOS•Los resultados se basan en la negatividad o disminución de fluorescencia de la prueba:

1. Eritrocitos : CD55, CD59

Población

eritroide

2. Monocitos : CD24, CD64

Población monocítica

3. Granulocitos: CD16, CD64

Marcador CD16 paraPoblación leucocitaria

Población leucocitaria

Marcador CD59 para Población leucitaria

CONCLUSIONES

• Citometría de Flujo es una herramienta mas en el apoyo de búsqueda del diagnóstico

• Mayor sensibilidad y especificidad frente al resto de test

• Detecta y cuantifica pequeños clones de células HPN

• No interfiere que el paciente haya sido transfudido

GRACIAS