Fyziológia krvi II

Practické cvičenia

• Určovanie sedimentačnej rýchlosti erytrocytov

• Osmotická rezistencia erytrocytov

• Určovanie hustoty krvi

• Počítanie erytrocytov

Sedimentačný rýchlosť erytrocytov

• Jednoduchý test• FW (skratka, Fahreus-Westergren)

• Sérové proteíny hrajú asi najdôležitejšiu úlohu

• Test meria vzdialenosť pádu ERY po jednej hodine vo vertikálnom stĺpci. Predpokladom pádu je gravitácia.

• Zvýšená rýchlosť sedomentácie znamená nešpecifické zistenie.

• Najuspokojivejšia metóda bola popísaná v 1921 Westergrenom

• 4 minútový test - rýchly

• Wintrobova metóda – úzka trubica

Princíp

Gra

vitačná s

ila

Referenčné hodnoty

DospelíHorná hranica

(mm/hr)

Vek < 50 r

Muži

Ženy

Do 15

Do 20

Vek > 50 r

Muži

Ženy

do 20

Do 30

ESR = erythrocyte sedimentation rate.

Information from Bottiger LE, Svedberg CA.

Normal erythrocyte sedimentation rate and

age. Br Med J 1967;2:85-7.

Faktory ovplyvňujúce sedimentáciu

Zvýšená

sedimentáciaZnížená

sedimentácia

Faktory

neovplyvňujúce

sedimentáciu

Vyšší vek

Ženské pohlavie

GraviditaAnémia

Abnormality ERY

Makrocytóza

Technické faktory

Dilúcia

Zvýšená teplota

Naklonená skúmavka

Vyšší fibrinogén

Infekcia

Zápal

Malignita

Leukocytóza

Polycytémia

Abnormality ERYSférocytóza

Akantocytóza

Microcytóza

Technické faktory

Dilúcia

Neadekvátne zmiešanie

Zrázenie krviKrátka skúmavka

Vibrácie

Abnormality

proteínovHypofibrinogenémia

Hypogammaglobulinémia

Dysproteinémia s

hyperviskozitou

Obezita

Telesná teplota

jedlo

Aspirín

Iné NSAID

NSAIDs = nonsteroidal anti-inflammatory drugs;

Vek(roky) + 10 (ak žena)

ESR [mm/hod]=

2

Sedimentácia – ako to vyzerá

Osmotická rezistencia

• Osmóza• Bunkové/plazmatické membrány sú semipermeabilné

• Osmotický gradient hýbe rozpúšťadlo z prostredia s ↓ koncentráciou solútov do prostredia s koncentráciou

• Osmotický tlak závisí od rozdielu nedifuzibilných látok/iónov na každej zo strán membrány

• Fyziologický roztok• 0.9% NaCl roztok, alebo 0,9 g NaCl doplniť do 100 ml vodou

• Isotonický = osmotická rovnováha• Bez influxu/efluxu vody cez membránu

• Osmotická rezistenica• Schopnosť ERY odolávať osmotickej sile predtým ako sa ERY rozpadnú

• Hypertonický roztok = hemolýza

• Hypotonický roztok = hemolýza

• Čím starší erytrocyt, tým nižšia osmotická rezistencia, tým skôr hemolýza

Osmotická rezistencia

• Hodnoty hemolýzy• Čiastočná hemolýza

• Minimálna osmotická rezistencia• 0.39% do 0.45% roztoku NaCl

• Kompletná rezistencia• Maximálna osmotická rezistencia• 0.30% do 0.33% roztoku NaCl

• Rezistenčná šírka• Rozdiel medzi čiastočnou a

kompletnou hemolýzou

• za 24 hod pri 37 °C (98.6 °F)

Výsledky

• osmotická rezistencia = ↓ osmotická fragilita• Anémia z nedostatku železa (microcytic anemia)

• thalasémia

• Kosáčikovitá anémia

• Obštrukčná žltačka

• Po splenektómii

• ↓ osmotická rezistencia = osmotická fragilita• Hereditárna sférocytóza

• Vrodená hemolytická anémia

• Sférocytóza iná ako hereditárna

Určovanie hustoty krvi

• Špecifická hustota– Celková masa [hmotnosť]/rovnaký objem vody [hmotnosť]; = M / V– Meranie nepriamou metódou Van Slykeova metóda

• Hustota krvi závisí od• hematokritu (Počet ERY, obsah hemoglobínu)• Koncentrácia a zloženie plasmatických proteínov• Obsah vody

• Dobrý ukazovateľ hemoglobínového obsahu(koncentrácie)• Rýchla metóda na skríning donorov• Počas vojny, pri katastrofách – rýchla metóda na zhodnotenie toho, či niekto

potrebuje transfúziu

Určovanie hustoty krvi

1,045 0,40 0,52 0,68 CuSO4 x 5 H2O

Nízka normálna vysoká hustota

• hustota celej krvi je 1048-1066 kg/m3

• Faktory denzitu

• vysoká nadmorská výška

• novorodenci

• nadmerné potenie

• hnačka

• zvracanie

• polycytémia

• Fakotry ↓ hustotu krvi

• gravidita

• príjem vody čistej (nadmerný)

• nefrotický syndróm

Červené krvinky

• Najväčšia skupina krvných elementov• transport

• pH regulácia

...

• Bikonkávny tvar

• Normálny počet• Ženy 3.8 – 4.8 x 1012 /L krvi

• Muži 4.5 – 5.3 x 1012 /L krvi

V = 85 ± 10 fl

S = 140 mm2

Počer ERY

• Odobrať 25 ml krvi z prsta kapilárkou

• Rozpustiť odobratú krvi v malej fľaštičke a zmiešať so 4,975 ml Hayemovho roztoku

• Hayem solution• Sodium chloride – osmolalita

• Sodium sulphate – zabraňuje zhlukovaniu ERY

• Mercuric chloride – antibakteriálny a antimykotický účinok

• Voda – rozpúšťadlo

• Rozmiešať

• Dať do Burkerovej komôrky a pod mikroskop

Počítanie ERY – Burkerova komôrka

Počítanie ERY – Burkerova komôrka

• Počitať v 20 obdĺžnikoch

• Získané číslo vydeliť 100

• Následne vynásobť 1012, čo je aj počet ERY v 1 L krvi

Výsledky

• počet ERY• Vysoká nadmorská výška

• novorodenci

• Nadmerné potenie

• hemokoncetrácia (Zvracanie, hnačka)

• chronická hypoxia (vrodené srdcové vady, emfyzém, pľúcna obštrukcia)

• polycythemia vera

• ↓ počet ERY• gravidita

• deti (v porovnaní s dospelými)

• ženy (v porovnaní s mužmi)

• anéme z rôznych príčin (nedostatok Fe, vit B12, kyseliny listovej, atď...)

• relatívna anémia v podmienkach hemodilúcie (eg. Nádory hypofýzy a ADH sekrécia)

↓

Otázky?