Universidad politcnica de Tlaxcala ingeniera qumica

Cromatografa de ColumnaProf. Sandra ma. Cruz Cruz

Alumnos: Melndez Serrano Alejandra Adriana Montes Hernndez Miguel ngel Rodrguez Zamora Erika Vargas Granillo Oscar

En la cromatografa de columna las molculas de una mezcla son separadas en base a la afinidad de las molculas por la fase estacionaria o por la fase mvil.

CROMATOGRAFA DE COLUMNA

Consiste en la aplicacin de una muestra a una columna de cristal. Contiene una matriz slida porosa que est inmersa en el solvente.

Se bombea una gran cantidad de solvente a travs de la columna.

OBSERVACIONESLas diferentes mezclas se van retrasando de manera distinta segn sus interacciones con la matriz. Se pueden separar de acuerdo a su carga, su tamao o su capacidad de unirse a grupos qumicos particulares. La pureza de las fracciones obtenidas se suele comprobar mediante la electroforesis en geles de poliacrilamida.

COLUMNAS PARA LA CROMATOGRAFA

Columnas de relleno

Columnas capilares

3-4m diam inter 2-4ml

diam inter 0.1-0.53ml

En esta las molculas son separadas por su tamao. El gel consiste de una cama de esferas con poros de un tamao dado.Las molculas de igual o menor tamao que el poro entran a las esferas mientras que las molculas ms grandes pasan rpidamente por la columna. Las molculas de tamao intermedio pueden entrar las esferas pero pasan menos tiempo en ellas. Las molculas salen en orden de tamao por el eludo.

Se usa para purificar protenas. Separa molculas en base a su carga inica. La fase estacionaria presenta una matriz con carga. Al eluir una muestra, las molculas de igual carga salen con el amortiguador. Las molculas de carga opuesta se adhieren al material de empaque con distintos grados de afinidad.

Esta es una cromatografa de interaccin en la que la fase estacionaria, con molculas hidrofbicas, interacta con molculas hidrofbicas en la muestra. La matriz conciste de fibras de silicato con cadenas de hidrocarburos. Estas atraern a las molculas hidrofbicas de la muestra mientras que las hidroflicas salen con el amortiguador. Las molculas son eludas de la columna lavando con soluciones de distinta concentracin de alcohol o cualquier otro solvente no polar.

El gel de slice es una forma granular y porosa de dixido de silicio hecho a partir de silicato sdico. A pesar de su nombre es un gel slido y duro. Su gran porosidad de alrededor de 800 m/g, le convierte en un absorbente de agua, por este motivo se utiliza para reducir la humedad en espacios cerrados; normalmente hasta un cuarenta porciento. El gel de slice, tambin conocido como Silicagel, es un producto absorbente, catalogado como el de mayor capacidad de absorcin de los que se conocen actualmente.

Es una sustancia qumica de aspecto cristalino, porosa, inerte, no txica e inodora, de frmula qumica molecular SiO2 nH2 O, insoluble en agua ni en cualquier otro solvente, qumicamente estable, slo reacciona con el cido fluorhdrico y el lcali.

La almina es el xido de aluminio (Al2O3). Junto con la slice, es el componente ms importante en la constitucin de las arcillas y los esmaltes, confirindoles resistencia y aumentando su temperatura de maduracin. El xido de aluminio existe en la naturaleza en forma de corindn y de esmeril. Tiene la particularidad de ser mas duro que el aluminio y el punto de fusin de la almina son 2.000 C (2.273,15 K) frente a los 660 C (933,15 K) del aluminio, por lo que su soldadura debe hacerse a corriente alterna.

1 Tcnicas analticas de separacin. Miguel Valcrcel Cases. Editorial Revert, 1994. ISBN: 8429179844. Cap. 12: Introduccin a la cromatografa. Pg.333 2. Mtodos de separacin: Clasificacin de la cromatografa. 3. Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. Jorge David Roriguez Miranda :) amooooor. Editorial Revert, 1991. ISBN: 8429118195. Cap. 8: Cromatografa. Pg. 179 4. La cromatografa. Fundamentos de tecnologa de productos fitoteraputicos. Nikolai Sharapin. Editorrial Convenio Andrs Bello, 2000. ISBN: 9586980014. Pg. 159-190.l 5. Glosario de los trminos ms usados en cromatografa. Introduccin a la Cromatagrafa. Stella Torres de Young. Ediciones de la Univ. Nacional de Colombia. ISBN: 9581701192. Pg. 15