contextualização mariana bridi costa um caso que chocou o país! ...
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Contextualização
Mariana Bridi Costa
Um caso que chocou o país!http://www.youtube.com/watch?v=HVbzICCJu-U&list=WLFGpiEnH7QcQYrFWqP-DFo-6D2QELjd5Y
https://www.youtube.com/watch?v=-TnHCd4sY24&list=PL52AFB8EF8CB7E4CD
Técnicas de microbiologia
• QUESTÕES PARA AS PROVAS;• CONTEÚDO DAS AULAS;• ATIVIDADES ON-LINE;
MICROBIOLOGIA – AULA1 Fundamentos de
Microbiologia e Anatomia Funcional das
Células Procarióticas
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Os micróbios em nossas vidas
Neve fabricada com Snomax, uma proteína produzida por bactérias geneticamente modificadas, que faz com que a água congele em temperatura mais elevada que a normal;
Os micróbios em nossas vidas
Tendência a associar microrganismos somente a infecções desagradáveis;
No entanto,
Microrganismos marinhos e de água doce
Microrganismos do soloCertas bactérias e algas realizam a fotossíntese
Microrganismos e síntese de vitaminas
Os micróbios em nossas vidas
Os microrganismos também possuem muitas aplicações comerciais;
• Utilizados na síntese de produtos químicos;• Na produção de alimentos;• Na produção de substâncias terapêuticas através da
engenharia genética;
Embora somente uma minoria seja patogênica, devemos considerar que as doenças infecciosas ainda são a maior causa de morte no mundo;
Uma breve história da microbiologia
Observação das células em 1665 por Robert HookeCartas de Leewenhoek à Sociedade Real de
Londres descrevendo os “animálculos
O debate sobre a geração espontânea
Muitos cientistas e filósofos acreditavam que algumas formas de vida poderiam aparecer espontaneamente da matéria morta;
GERAÇÃO ESPONTÂNEA
Outros cientistas preconizavam que células vivas poderiam surgir somente a partir de células vivas preexistentes;
TEORIA DA BIOGÊNESEExperimentos de Pasteur que refutaram a teoria da geração espontânea
A idade de ouro da Microbiologia
Teoria do germe e da doença
Postulados de Koch
A idade de ouro da Microbiologia
A idade de ouro da Microbiologia
1888 – Roux e Yersin – toxina diftérica;
1890 – Von Behring e kitasato – antitoxina no sangue de indivíduos em recuperação da difteria;
Humoralistas Celularistas
Outras descobertas importantes:
Técnicas de cultura pura
Os microrganismos na natureza normalmente existem em culturas mistas, com muitas espécies diferentes ocupando o mesmo ambiente;
Portanto, o primeiro passo é isolar as diferentes espécies contidas em uma amostra;
Para o isolamento dos microrganismos devemos utilizar técnicas de semeadura e meios indicados de acordo com a espécie:
Técnicas de cultura pura
O equipamento necessário para a inoculação primária de amostras é relativamente simples:
Técnicas de cultura pura
Espalhamento nos quatro quadrantes
Repique por picada com movimento em S
Ágar semi-sólido para provas de motilidade
Aspecto da placa após a semeadura por estrias
O meio de cultura estéril fundido e resfriado a 45 – 48°C, em quantidade de cerca de 20 mL, é vertido sobre cada uma das placas contendo amostra, realizamos então a homogeneização com movimentos em S ou 8 sobre a bancada de trabalho, as quais permanecem até solidificação a temperatura ambiente;
Pour Plate:
Consiste na transferência de alíquota de 1 a 2 mL da diluição da amostra (de cada diluição a ser considerada) para réplicas de placas de Petri estéreis (usualmente de 2 a 3 a cada diluição);
Técnicas de cultura pura
Técnicas de cultura pura
Pour Plate:
Segue-se incubação das placas, em estufa, na posição invertida;
Após 2 a 5 dias de incubação a 30 – 35°C, para bactérias e 5 a 7 dias para bolores e leveduras, a 20 – 25°C, as colônias são contadas;
Técnicas de cultura pura
A escolha do meio de cultura, condições de incubação e cálculos para determinação da carga contaminante viável equivalem ao descrito para a técnica Pour Plate;
Semeadura da amostra em superfície:
O meio de cultura é preparado e distribuído previamente em placas de Petri. Empregando-se pipetas estéreis, volumes de 0,1 a 0,5 mL de cada diluição considerada são distribuídos na superfície do gel já solidificado, sendo o espalhamento efetuado com movimentos cuidadosos ou com o auxílio de bastão de vidro ou alça de Drigalski;
Na dependência da densidade da amostra, haverá absorção total pelo meio. As placas invertidas são então incubadas;
Técnicas de cultura pura
Mycobacterium bovis
Staphylococcus aureus
Para a conservação dos microrganismos há a possibilidade de refrigeração ou liofilização;
Microscópios
O microscópio óptico pode ampliar um objeto por aproximadamente 2000 vezes, mas sua ampliação máxima útil é de 1000 vezes o tamanho original;
Existem lentes no condensador, nas objetivas e na ocular;
As objetivas podem ser de baixo poder, alto poder e de imersão;
A ampliação útil é limitada pela resolução;
Microscópios
Microscópio Eletrônico de varredura (MEV)
Microscópio Eletrônico de transmissão (MET)
Microscopia
Microscopia de campo claro:
Utiliza uma fonte de luz direta semelhante a uma lâmpada de luz ou à luz do dia, que ilumina todo o campo contendo a amostra, como a maioria das técnicas de coloração mata os microrganismos esta é uma limitação;
Microscopia de campo escuro:
Utiliza um microscópio luminoso equipado com uma objetiva e um condensador especial para iluminar os microrganismos em uma amostra, contra um fundo escuro;
Microscopia
Microscopia de fluorescência:
É a técnica de microscopia óptica utilizada na prática clínica para a observação de espécimes corados com um corante fluorescente que absorve a energia da luz com comprimentos de onda curtos, como aqueles da luz azul;
Microscopia de contraste de fase:
Utiliza um microscópio luminoso modificado que permite maior contraste entre materiais de espessuras ou densidades diferentes. O resultado é uma imagem com graus variáveis de luminosidade (contraste);
Microscopia
Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET):
Geralmente são utilizadas quando utilizamos corantes ou cortamos os microrganismos em seções finas. Aqui os feixes de elétrons atravessam o espécime e transmissão destes feixes forma uma imagem;
O feixe de elétrons se move para trás e para frente da superfície dos microrganismos. Fornece uma visão tridimensional da superfície celular e dá uma ideia sobre certos aspectos físicos, tais como aderência;
Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV):
Microscopia
Microscopia de campo escuroMicroscopia de contraste de fase
Par obter uma imagem clara e detalhada em um microscópio óptico, as amostras devem ter um alto contraste com seu meio. Assim devemos diferenciar o índice de refração das amostras daquele do seu meio;
Anatomia funcional das células procarióticas
Teoria endossimbiôntica
MitocôndriaCloroplasto
Procarióticos e Eucarióticos
A célula procariótica
Estrutura da parede celular bacteriana
Estrutura da parede celular bacteriana
Estrutura da parede celular bacteriana
Técnica de coloração de Gram
OBRIGADO