adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related n2o emissions from soil

8
ã 2004 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, Weinheim 1436-8730/04/0408-471 J. Plant Nutr. Soil Sci. 2004, 167, 471±478 DOI: 10.1002/jpln.200421393 Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N 2 O emissions from soil Ulrike Sehy 1 , Jens Dyckmans 2, 3 , Reiner Ruser 1 *, and Jean Charles Munch 1 1 GSF-National Research Center for Environment and Health, Institute of Soil Ecology, Ingolstädter Landstraûe 1, D-85764 Neuherberg, Germany 2 Department of Environmental Resource Management, University College Dublin, Belfield, Dublin 4, Ireland 3 present address: Institute of Soil Science and Forest Nutrition, University of Göttingen, Büsgenweg 2, D-37077 Göttingen, Germany Accepted 3 June 2004 PNSS P139/3B SummaryÐZusammenfassung It has been assumed that high winter N 2 O emissions from soils are the result of increased amounts of microbially avail- able organic C liberated during freezing and metabolized dur- ing subsequent thawing. In a laboratory experiment, we attempted to simulate freeze-thaw events by adding dis- solved organic C (DOC) to sieved soil of high water content (95% water-filled pore space). In a full factorial design, CO 2 and N 2 O emissions of a) soil samples provided with DOC extracted from frozen soil and b) soil samples frozen for 46 days and thawed were compared. Additionally, NO 3 , DOC and microbial ATP contents of all treatments were repeatedly analyzed during the experiment. The addition of DOC to unfrozen soil (±F+C) resulted in a substantial (22-fold) increase in N 2 O emissions as compared to the control (±F±C). However, following thawing, the increase in N 2 O emissions was much larger (828-fold in +F±C and 1243-fold in +F+C). Freezing, but not the addition of DOC led to increased CO 2 emissions. Neither treatment affected microbial adenylate content. By adding 15 N-labeled nitrate to the soil samples, the main process leading to ele- vated N 2 O flux rates after both DOC addition and freeze-thaw treatment was identified as denitrification. We conclude that the availability of C substrate plays an important role for freeze-thaw-related N 2 O emissions. How- ever, the fact that the simulated treatment and the freeze- thaw treatment yielded significantly different amounts of N 2 O suggests that both quantity and quality of available C differed between the treatments. The localization of the liberated sub- strate, i.e., the availability in situ, seems to be of major impor- tance for the amount of N 2 O produced. Key words: nitrous oxide / DOC / freezing and thawing / available carbon / ATP / soil respiration Die Zugabe gelöster organischer Substanz zur Simulation von durch Frost und Auftauen induzier- ten N 2 O-Freisetzungen aus Böden Die vorgestellten Untersuchungen basieren auf der An- nahme, dass hohe N 2 O-Emissionsraten im Winter auf durch Frostwirkung erhöhte Mengen an mikrobiell verfügbarem organischem C zurückzuführen sind. In einem Laborexperi- ment sollten daher Frost-Auftau-Ereignisse durch die Zugabe von gelöstem organischem C (DOC) zu gesiebtem Boden mit einem hohen Wassergehalt (95 % wassergefülltes Porenvo- lumen) simuliert werden. In einer vollständigen Faktorenana- lyse wurden die CO 2 - und N 2 O-Emissionen von a) Bodenpro- ben, die mit DOC, der aus gefrorenem Boden gewonnen wurde, beaufschlagt wurden, und b) Bodenproben, die über 46 Tage gefroren waren und aufgetaut wurden, verglichen. Zusätzlich wurden die Nitrat-, DOC- und mikrobiellen ATP- Gehalte in allen Varianten während des Versuches wiederholt bestimmt. Die Zugabe von DOC zu einem ungefrorenen Boden (±F+C) verursachte einen starken Anstieg (22fach) der N 2 O-Emissio- nen im Vergleich zur Kontrollvariante (±F±C). Die Zunahme der N 2 O-Emissionen war jedoch in den Auftauvarianten wesentlich stärker (828facher und 1243facher Anstieg in der +F±C- bzw. +F+C-Variante gegenüber der Kontrolle). Das Einfrieren, aber nicht die Zugabe von DOC, bewirkte gestei- gerte CO 2 -Emissionen. Die mikrobielle Biomasse war in kei- ner der Varianten verändert. Durch die Zugabe von 15 N-mar- kiertem Nitrat zu den Bodenproben wurde die Denitrifikation als hauptverantwortlich für die gesteigerten N 2 O-Emissionen identifiziert. Wir folgern, dass die Verfügbarkeit von C-Substrat einen wichtigen Beitrag zu durch Frost-Auftau-Ereignisse verur- sachten N 2 O-Emissionen leistet. Die Tatsache jedoch, dass die N 2 O-Emissionen in den Frost-Auftau-Varianten wesent- lich höher waren als in der Variante mit DOC-Zugabe, deutet darauf hin, dass sich sowohl die Quantität als auch die Quali- tät des verfügbaren C zwischen den Varianten unterschied. Die räumliche Verteilung, d. h. die Verfügbarkeit in situ des freigesetzten Substrates scheint von wesentlicher Bedeutung für die N 2 O-Produktionsrate zu sein. 1 Introduction Nitrous oxide (N 2 O) is an important greenhouse gas (IPCC, 2001) and contributes to the breakdown of stratospheric ozone (Crutzen, 1981). Agricultural activity contributes largely to anthropogenic N 2 O emissions (Flessa et al., 2002; * Correspondence: Dr. Reiner Ruser; E-mail: [email protected] 471

Upload: jean-charles

Post on 03-Feb-2017

215 views

Category:

Documents


2 download

TRANSCRIPT

Page 1: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� �� ��� !"��#��#���!�"�

�� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"! ���� �������#%&����������'�

����� ���� �� ������ ������ �� ������� ����������� ���������� ������ ���� ��������� ��� !" #�� � ������" $" %����� %���!&" ��( #��� '����� (����!

� �)*+�,����� - . ��/� � �, � 0�� ��1����� �, ��( � ��,�� ��.,�,2, �0 )��� �/����3� �����.,4(, � ���(.,��5 �� 6!7" �+ 2� �� ��� � ����3

� 6 &��,� �, �0 ��1����� �,�� - .�2�/ 8���� � �,� 9��1 �.�,3 ���� � 62����� : �0� �(� 62���� �� �� ���(� &� . �, �((� ..; ��.,�,2, �0 )��� )/� �/ ��( *�� ., +2,��,���� 9��1 �.�,3 �0 �<,,��� �� :=.� �> � �� 6�"�"" �<,,��� ��� ����3

�// &, ( � ?2� ���� @+)) @��'#�:

������ )*�����������, ��. � � �..2� ( ,��, ���� >��, � +�A ��..���. 0���.���. �� ,� � .2�, �0 ��/� �. ( ���2�,. �0 ��/�������3 �1������ ������/ � ��� ��, ( (2���� 0� B��� ��( � ,�����B ( (2���� .2�. C2 �, ,��>���� �� � ������,��3 D& ��� �,� > �,, �&, ( ,� .��2��, 0� B ,��> 1 �,. �3 �((��� (�..��1 ( ������/ � E6A�F ,� .� 1 ( .��� �0 ���� >�, � /��, �,E'7G >�, �0��� ( &�� .&�/ F� �� � 02�� 0�/,����� ( .���� �A���( +�A ��..���. �0 �F .��� .��&� . &��1�( ( >�,� 6A� D,��/, ( 0��� 0��B � .��� ��( �F .��� .��&� . 0��B � 0�� � (�3. ��( ,��> ( > � /��&�� (� �((�,������3� +A�

� � 6A���( ��/������ �H@ /��, �,. �0 ��� ,� �,� �,. > � � & �, (�3����3B ( (2���� ,� D& ��� �,�H� �((�,��� �0 6A� ,� 2�0��B � .��� E$*I�F � .2�, ( �� �.2�.,��,��� E��0��(F ��/� �. �� +�A ��..���. �. /��&�� (,� ,� /��,��� E$*$�F� ��> 1 �� 0����>��� ,��>���� ,� ��/� �. �� +�A ��..���. >�. �2/� ���� � E!�!0��( ��I*$� ��( ����0��( �� I*I�F� *� B���� �2, ��, ,� �((�,����0 6A� � ( ,� ��/� �. ( �A� ��..���.� + �,� � ,� �,� �,�00 /, ( ��/������ �( �3��, /��, �,� :3 �((��� �7+��� � (��,��, ,� ,� .��� .��&� .� ,� ���� &��/ .. � �(��� ,� � 1�, ( +�A 0�2D ��, . �0, � ��,� 6A� �((�,��� ��( 0� B ,��>,� �,� �, >�. �( �,�0� ( �. ( ��,��0�/�,����� /��/�2( ,��, ,� �1��������,3 �0 � .2�.,��, &��3. ����&��,��, ��� 0�� 0� B ,��>� ��, ( +�A ��..���.� ��> 1 �� ,� 0�/, ,��, ,� .��2��, ( ,� �,� �, ��( ,� 0� B ,��> ,� �,� �, 3� �( ( .����0�/��,�3 (�00 � �, ���2�,. �0 +�A.2�� .,. ,��, ��,� C2��,�,3 ��( C2���,3 �0 �1������ � (�00 � (� ,> � ,� ,� �,� �,.� H� ��/���B�,��� �0 ,� ��� ��, ( .2�.,��, � ���� ,� �1��������,3 � � �� . �. ,� � �0 ��%�� ��&��,��/ 0�� ,� ���2�, �0 +�A &��(2/ (�

+� ����� ��,��2. �D�( # 6A� # 0� B��� ��( ,��>��� # �1������ /����� # �H@ # .��� � .&���,���

��� *���� ��,��� ��������� ������� ������������� �� ����� -��� ��� �������� ������������ ����-���������� �� .,���6� 1��� ., ��, � 9�, �.2/�2�� � ��.� � � �20 ( � ������ � (�.. ��� +�A���..���.��, � �� ���, � �20 (2�/�*��.,>��J2�� ��<�, 8 �� � �� ��J���� �� 1 �0=���� �������./� � � B2�=/JB20=�� � .��(� �� �� � ����� D& ��� �, .���, � (�� � *��.,�20,�2�� ����.. (2�/� (� K2��� 1�� � �<., � ������./� � � E6A�F B2 � .� �, � :�( � ��, �� � ��� � ��.. �� ���, E'7G >�.. �� 0=��, . @�� �1��2� �F .��2�� �, > �( �� �� �� � 1���.,4�(�� � *�J,�� �����3. >2�( � (� �A� 2�( +�A���..��� � 1�� �F :�( �&��� �� (� ��, 6A�� ( � �2. � 0��� � � :�( � � >��� �>2�( � � �20./����, >2�( �� 2�( �F :�( �&��� �� (� =� �� H�� � 0��� � >�� � 2�( �20� ,�2, >2�( �� 1 ����/� ��K2.4,B��/� >2�( � (� +�,��,� 6A� 2�( ��J���� �� � �H@� ���, �� ��� � �����, � >4�� �( ( . �.2/� . >� ( ����,� .,���,�6� K2��� 1�� 6A� B2 �� � 2�� 0��� � � :�( � E$*I�F1 �2�.�/�, �� � .,��J � ��.,� � E��0�/�F ( � +�A���..��� � �� ��� �/� B2� ���,����1�����, E$*$�F� 6� K2���� ( � +�A���..��� � >�� % (�/� �� ( � �20,�21�����, �> . �,��/� .,4�J � E!�!0�/� � 2�( ����0�/� � ��.,� � �� ( �I*$� �B>� I*I������, � � �=� � ( � ���,���� F� 6�.���0�� � �� �� � ��/�, (� K2��� 1�� 6A�� � >��J, � ., �� �, �A����..��� �� 6� ��J���� �� :����.. >�� �� J �� � ( � �����, � 1 �4�( �,� 62�/� (� K2��� 1�� �7+���J� �, � +�,��, B2 ( � :�( �&��� � >2�( (� 6 ��,��0�J�,�����. ��2&,1 ���,>��,��/� 0=� (� � ., �� �, � +�A���..��� ��( �,�0�B� �,���� 0��� ��� (�.. (� �0=����J �, 1�� �)2�.,��, �� �>�/�,�� � : �,��� B2 (2�/� *��.,�20,�2�� ����.. 1 �2�.�/�, � +�A���..��� � � �., ,� 6� H�,.�/� % (�/�� (�..(� +�A���..��� � �� ( � *��.,�20,�2�����, � > . �,��/� �<� � >�� � ��. �� ( � �����, ��, 6A�K2��� � ( 2, ,(���20 ���� (�.. .�/� .�>��� (� L2��,�,4, ��. �2/� (� L2���,4, ( . 1 �0=���� � � B>�./� � ( � �����, � 2�, �./�� (�6� �42���/� �, ��2��� (� �� (� �0=����J �, � � � ( .0� �� . ,B, � )2�.,��, . ./� ��, 1�� > . �,��/� � : ( 2,2��0=� (� +�A@��(2J,���.��, B2 . ���

! ������������

+�,��2. �D�( E+�AF �. �� ��&��,��, �� ���2. ��. E���������F ��( /��,���2, . ,� ,� �� �J(�>� �0 .,��,�.&� ��/�B�� E������ �'!�F� ����/2�,2��� �/,�1�,3 /��,���2, .���� �3 ,� ��,���&�� ��/ +�A ��..���. E������ , ���� ����MN ���� .&��( �/ ; 6�� - �� � -2. �M �����; � �� ���2. �O> ��(

�"�

Page 2: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

����� , ���� �'''M ��� � , ���� �''!F� ���, � +�A ��..���. 0� C2 �,�3 �//�2�, 0�� � ,> � 7�G E������� , �����''!M �� �� , ���� �''!�M ��� , ���� ����F ��( "�GE���� , ���� �''!F �0 ,�,�� ���2�� +�A ��..���. 0��� ����� 0� �(. ��( ��1 � � .��>� ,� � � ��, ( ,� .��� 0� B��� ��(,��>��� E����� , ���� �'!�M !"# , ���� �'!�M $��%&��% ��( �����#� �'!�M ������ , ���� �''7M �� �� , �����''!�� �''!�F� ��,��2�� ,� &� ��� ��� �0 0� B ,��>� ��, ( +�A ��..��� & �J. �. > �� J��>�� ,� 2�( ��3���� /����.�. �� ��, 02��3 2�( �.,��(� ) 1 ��� &��/ .. .��3 /��,���2, ,� +�A ��..��� & �J. 0����>��� 0� B ,��> 1 �,.� *��.,�3� +�A ��3 � &��(2/ ( �� 2�0��B � �� �.>�,��� �,� �>�. 0��B � .��� ��( �. .2(( ��3 � � �. ( >� ���. (�002.��� �. �� ���� � ���( � ( �3 �/ ����� �.� ���� ��(����'��( E�''�F �( �,�0� ( ,� ��> � .��� ��3 �. �. &��(2/,��� �� �. >��� )��(� , ��� E����� ����F /��/�2( ( ,��,+�A &��(2/,��� �� 0��B � .��� ��3 ,�J &��/ �� 2�0��B �>�, � 0���.� A,� �. ��1 .2�� ., ( ,��, .��� 0� B��� � .2�,.�� ,� � � �. �0 ��/�������3 �1������ ������/ /��&�2�(.E�' ������� ��( �' �������� �''�F ,��, �� � ,�����B ((2���� .2�. C2 �, ,��>���� H��. .2�.,��, ��3 �������, 0��� ��/������ �����.. J��� ( (2���� 0� B��� E�*�+���% ,���� �'!!M �' ������� ��( �' �������� �''�M ����,, , �����''!M -����� ��( . ���� ����F �� 0��� ,� &�3.�/�� (�.�2&,��� �0 .��� ���� ��, . (2 ,� 0��., �/,��� E�' ���������( �' �������� �''�M /%0�%� ��( ������ �''�M ������'��� , ���� ����F� � � ����3� ���� .��� >�, � /��, �,. ������� >�,� ,��>��� ��( &��1�( /��(�,���. 0�1����� 0�� ( ��,��0�/�,��� E �� %���� �''�F�

H� �3&�,� .�. �0 �2� .,2(3 >�. ,��, ���� +�A� � �. ��, ./�� � ,���� � (P���,,��� ,� &��/ .. �0 0� B���P�3 �((��� (�..��1 ( ������/ � E6A�F ��( �2,�� �,. ��� ��, ( 2&��.��� 0� B��� ,� � /��( .���� H� ��� �0 ,� .,2(3 >�. ,� D���� &�..��� (�00 � �/ . � ,> � ���� +�A0�2D ��, . .,��2��, ( �,� � �3 ,� �((�,��� �0 .2�.,��, � � �. ( �3 0� B ,��> �� ,��. .��� �� �3 0� B ,��> 1 �,.� H� ���2�, ��((3����/. �0 +�A ��( �A� ��..���. �� ,� �� ���(� ��(,� �� � ��,��� ,� ,� ���2�, ��( (3����/. �0 .��� ��,��, ��(6A� /��/ �,��,���. ��( ��/������ �H@ /��, �, �� ,� �,� ����(� > � D���� (� �((�,������3� �7+ ��� ���� >�. 2. ( ,��( �,�03 ,� /��,���2,��� �0 ��,��03��� ��( ( ��,��03��� &��/ .. . ,� +�A ��..���.�

� (������� ��� ������

�/! ����

)��� >�. ,�J � 0��� �$�� /� �0 �� ����� 0� �( �� ���3 �&������� &���� ,� ,� 0��., ����� � �, �/,���.� H� 0� �( >�.��/�, ( �, ,� � . ��/� .,�,��� )/� 3 �� �0 ,� 82��/�- . ��/� ������/ �� ���� /�.3., �. E*�8F� �&&��D���, �3�� J� ���,� �0 82��/�� � ����3� )��� >�. /��..�0� ( �. 63.,��/ �2,��/�� &, E9)6� ,�D����3FM &� E�����F >�. ��� ������( +, /��, �,. > � ���G ��( ���7G� � .& /,�1 �3� H� &��,�/� .�B (�.,���2,��� >�. �'G .��(� 7�G .��,� ��( ��G /��3�

*� .� .��� >�. .� 1 ( Q��� ��( 0��� ( ��,� /��,��� �. >�,� �(��� , � �0 7 /� ,� � � ���, �0 � /�� H� .��� �� �/� /��,��� � >�. /��&�/, ( ,� � �2�J ( �.�,3 �0 ��� � /�$�� 3� �(���

�"" � (�3 .���� )��&� . > � ���2��, ,� � >�, � /��, �, �0���7G >��/� /��� .&��( ( ,� " G >�, �0��� ( &�� .&�/ E�*@)F� *�� �/� ,� �,� �, E. � ��>F� �� /��,��� �. > � &� &�� ( 0�� ( .,�2/,�1 .��� .��&���� ��( � /��,��� �. > � 2. ( ,� ����,�� ��. 0�2D .� ��� .��&� . > � ��/2��, ( �,�R� 0�� �" (�3. � 0�� &� ,� �,� �,�

�/� 0��������

*�2� ,� �,� �,. > � D���� ( �� ,��. .,2(3 EH��� �F� 62����&� ,� �,� �,� ���0 �0 ,� .��&� . > � 0��B � �, $��R� EI*,� �,� �,.F 0�� � (�3. >��� ,� �,� � ���0 >�. J &, �, I�R�E$*,� �,� �,.F� �, ,� � ������� �0 ,� D& ��� �,. E(�3 �F�

� �� �� .��2,��� E�(%2., ( ,� ��7 S ��$� 8 �����F >�.�(( ( ,� ��� .��&� .� /��,������

� ��� � ( + 0�� ��� ,� �,� �,. E�&&�� ( �. �+A��'! �,��G �7+F� ��(

� � .2�.,��, 0�� ,� I� ,� �,� �,. ���3 E. � ��>FM

� ,� 0��B � .��&� . > � ,��> (�

:3 �((��� ,� .��2,���� ,� >�, � /��, �, �0 ��� .��&� . >�.��/� �. ( ,� ��G ���1�� ,��/ >�, � /��, �, E�*@) T '7GF���( ��� �� + E� .���F$� E��� ,� �,� �,.F ��( ��� �� � E� .���F$�

�0 D,��/, ( 6A� EI� ,� �,� �,. ���3F > � �(( (� H� ���2�, �0 ��,��, �� 6A� �(( ( /��� .&��( ( ,� Q�G ��(Q7�G �0 ,� .��� ��,��, ��( 6A� &���.� � .& /,�1 �3� H� �*@) �0 '7G /��� .&��( ( ,� 1��2 . �0, � 0�2�( �� ,� 0� �((2���� >��, � �, ,� )/� 3 �� .�, E��'# , ���� ����F�

�/$ 1��2������� �� ��� ' �������

H� � .2�.,��, �(( ( ,� ,� I� ,� �,� �,. >�. D,��/, (�0, � 0� B��� � .2�.��&� �0 ,� .��� 0�� �� (�3. �, $��R���D,��/,��� >�. & �0��� ( 2.��� � �7 �8 ����� .��2,��� E.���; D,��/,��, ��,�� �;�F ��( 0��, � ( ,���2�� � ���7 �� &��3/������, 0��, � �0, � .��J��� 0�� ������ �, �. ��, >��,�3 ,��, ,� .2�.,��, D,��/, ( �0, � � 0� B ,��> 1 �, (� . ��, ���3/��.�., �0 �� �2, ��.� �,� � �2,�� �,.� �� &��,�/2��� ��,��� ��H� � 0�� � 6A� �((�,��� �� ,� I� ,� �,� �,. (� . ��, ���3� .2�, �� ,� �((�,��� �0 � �2, ��.� �0 + ��( �,� � �2,�� �,.���> 1 �� ,��. �. /��&����� ,� ,� I* ,� �,� �,� >� � ,� 0� B ,��> 1 �, ��� ��, . � /��&����� ��D,2� �0 �2,�� �,. � � ��

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

0���� !� H �& ��,2� (2���� &� ,� �,� �, ��( 6A� �((�,��� �� ,� (�00 � �, ,� �,� �,.�0������ !� H �& ��,2� >4�� �( ( � ����J2��,��� 2�( 6A�K2��� � �� ( � 1 �./�� ( � � �����, ��

&� ,� �,� �, 6A� �((�,����, (�3 �

$*$� I�R� ��

$*I� I�R� 3 .

I*$� $��R� ��

I*I� $��R� 3 .

�"� ) �3� 63/J���.� -2. �� 82�/� �� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"!

Page 3: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

�/3 4� ��2���

��. .��&���� >�. & �0��� ( �3 &��/��� ,� .��� .��&� . �����.. %��. E�"�� ��F C2�&& ( >�,� � ��. ,���, ��( ��( � . &,2�� ��/� ,� �,� �, >�. .��&� ( �� 0�2� � &��/�, .� H� %��.> � /��. ( 0�� � ,> � �� ��( ,>� ��2�. ( & �(��� ��,� D& /, ( 0�2D ��, .� ��( 0�2� ��. .��&� . > � & ���(�/���3 ,�J � (2���� �//2�2��,��� ,�� � : 0�� �/� ��. .��&����� �� ���2�, �0 � /��� .&��(��� ,� ,� .��&� 1��2� >�. �(( ( ,� �1��( &� ..2� ( 0�/�,� ��. .��&���� >�. & �0��� ( �, � �., ��/ �/� (�3M � �.2� � �, 0� C2 �/3 >�.���� � �, ,� � ������� �0 ,� D& ��� �,� H��/ ��. /��/ �,��,���. > � � �.2� ( 2.��� � ��. /�����,����&� C2�&& (>�,� � �+� � /,���/�&,2� ( , /,�� E1�,�, ��% , ���� �''"F�H� 0�2D ��, . > � /��/2��, ( 0��� ,� ��� �� ��/� �. �� �A���( +�A /��/ �,��,���. (2���� �//2�2��,��� ,�� � : �������>�,� (�3 �� ��. 0�2D ��, . > � ����,�� ( 0�� �" (�3.�

*�� ,� ( , �����,��� �0 ,� �7+ /��, �, �0 +�A� �� ��.��&� . > � ,�J � 0��� ,� %�� �,��.&� � �, ,� � ���������( �, ,� �( �0 ,� �//2�2��,��� & ���(� )��&� . > � ����3B ( 2.��� � ���-8) E6 �,� I� *������� 8�,F� H� /��,���2,��� �0 ( ��,��0�/�,��� EG6F ,� ,�,�� +�A ��..��� >�. /��/2��, ( 2.��� � ,>�.�2�/ ��D��� ��( � E���0��� ��(����*"� �''�F �//��(��� ,�

G6 � ��,��G�7+�� �,��G�7+

9�

��,��G�7+�� �,��G�7+

9� � ���

>� � �,��G�7+� �. ,� �7+ /��, �, �0 ,� +�A ��..�����,��G�7+� �. ,�

�7+ /��, �, �0 ,� E��� � (F ��,��, &��� ��(�,��G�7+9 �. ,� �7+ /��, �, �0 ,� E2���� � (F ������2�&��� E��� ' �,��G �7+F�

�,��G�7+� �.

�,��G�7+� � �/)� �,��G�7+

)�/

�� �,��G�7+

��

�/)�/

��

>� � /) �. ,� +�A /��/ �,��,��� �0 ,� .��&� � /� �. ,� +�A /��/ �,��,��� �0 ���� �,��G �7+) �. ,�

�7+ /��, �, �0 ,� +�A �� ,� .��&� � �,��G �7+� �. ,�

�7+ /��, �, �0 ,� +�A�� ��� ��� (��, �3 �0, � %�� /��.2� �

H� . /��/2��,���. > � ��. ( �� ,� �..2�&,��� ,��, ��� ��� ����B�,��� �0 ��� � ( ��,��, ��( ,�J � &��/ (2���� ,� D& ��� �,�

�/5 ���� ��2���

*�� .��� ����3.�.� 0�2� .��&� . & � ,� �,� �, ��( .��&����(�, > � D���� (� )��&� . > � ����� ��B (� ��( �����C2�, >�. D,��/, ( >�,� ��$� 8 ����� 0�� ,� ( , �����,����0 6A� ��( ��� ��� + E+���F /��, �,. E.��� ; .��2,��� �;� >#>F�

���,� � ���C2�, >�. 2. ( 0�� �( �3��, D,��/,���� 6A� .��&� . > � ( , ���� ( �� � H�,�� ������ ����3B � EHA�7�7�� )����(B2F� +��� >�. ( , ���� ( �� � ���,��2�2.*��> ����3B � E)� ��#�� )J���� ����3,�/��F� )��� � ��( +/��, �,. > � ����3B ( �� � �+ ����3B � E+� �7��� ���������F� �0, � � ��1�� �0 ,� ������2� 0��� ,� .��� D,��/,.�3 ��J���B�,���� �7+ �� ,� ��,��, &��� >�. ( , ���� ( �//��(��� ,� ������ E�''�F �. E+��F�)A� �� �� �-8) E6 �,� I� *������� 8�,F�

8 �.2� � �,. �0 �( ��� �2/� �,�( . E�( ��.�� �����(�� ��( ,��&��.&��, � �8@� �6@� ��( �H@F > � ��( ��.2�.��&� . �0 � � ���., .��� �//��(��� ,� #�*���� ��(��"�' E�''"F >�,� .�� ��, ��,���.� *�2� �������, �.(�� ,�3�.2�&��D�( E68)AF ��( � �� �200 � E�� �8+��@A� �200 � I �� �8 �6H� �(%2., ( ,� &� ��F > � 2. (�. D,��/,��,.� H�,�� D,��/,��� ,�� >�. ����� *��, � ( ��J���� D,��/,. > � .,�� ( �, $��R� � 0�� ����3.�.� �0, � ( ��1�,�B�,��� >�,� /������/ ,��( �3( � ,� �( ��� �2/� �,�( .> � ( , ���� ( �3 �@�� >�,� 0�2�� ./ �/ ( , /,����

�/6 ��������

�2�2��,�1 ��. 0�2D . > � /��/2��, ( . &���, �3 0�� �/� %��& � ,� �,� �, �..2���� � �.2� ( 0�2D . ,� � ., �(3� ,> � ,>� .��&���� (�, .�

��� (�,� �� ��1 � �. ���,�� ,�/ � ��. >�,� .,��(��( ( 1��,���� H� �.. .. .����0�/��, (�00 � �/ . � ,> � ,� �,� �,.����,�� ,�/ � ��. > � .2�% /, ( ,� &���>�. �2�,�&� /��&���.��. 2.��� ,� ),2( �,+ >���� 2�. , ., �, � .����0�/��/ � 1 � � Q ���7�

$ %����

��� ������ � 0�� (�3 � > � ��> ��( .������ �� ��� ,� �,� �,. E*��� ��� �F� �, (�3 �� .��� >�, � /��, �, >�. ���. ( ,�'7G�*@) �� ��� ,� �,� �,.� 6A� >�. �(( ( �� ,� I� ,� �,� �,.� ��( ,��>��� >�. ��(2/ ( �� ,� I*,� �,� �,.� *�2D��, . �0 +�A ��/� �. ( ,� � �0, � �� ,� I* ,� �,� �,. ��( ��$*I�� � ������� �0, � �� � �� ,� I* ,� �,� �,. ��( �0, �!� � �� ,� $*I� ,� �,� �,� +� ��/� �. �� +�A ��..���.>�. ��. �1 ( �� ,� $*$� ,� �,� �, ,���2���2, ,� D& ��� �,� :3 ,� �( �0 ,� D& ��� �,� ,� �((�,��� �0 � �� ,� $*I� ,� �,� �, ��( � .2�, ( �� /2�2��,�1 +�A ��..���.,��, > � �� ,�� . ���� � ,��� �� ,� /��,��� E$*$�F EH��� �F���> 1 �� 0��., ,� �,� �, ��(2/ ( �2/� ���� � +�A ��..���.; ���&�� ( ,� $*$�� /2�2��,�1 +�A ��..���. > � ��/� �. ( �3 � 0�/,�� !�! �� ,� I*$� ��( ���� �� ,� I*I�,� �,� �, EH��� �F�

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

0���� �� �2�2��,�1 0�2D . �0 +�A ��( �A� � ,> � (�3 � ��( (�3 �'� ���,�� ,�/ � ��. ��( .,��(��( ( 1��,��� �� &�� �,� . .�0������ �� �2�2��,�1 +�A 2�( �A�*�=.. B>�./� � H�� � 2�( H�� �'� ���,�� ,�./� 8�,, � ��, ),��(��(��> �/�2�� � �� ����� ���

$*$� $*I� I*$� I*I�

+�A+ U�� �$�V ������ E� W ��$�F ���!'� E���7 F �����/ E��� �F ��'�"/ E��77 F

�A�� U�� �$�V � ��� E7�'F ���'� E����F "���� E�7�7F "���� E����F

),�,�.,�/���3 .����0�/��, (�00 � �/ . � ,> � ,� /2�2��,�1 0�2D . E),2( �,+ >���� 2�. , .,� � Q ���7F �� ��(�/�, ( �3 (�00 � �, � ,, �.�

�� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"! �((��� 6A� ,� .��2��, 0� B ,��> � ��, ( +�A ��..���. �"�

Page 4: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

0�� !5� ���������� �� ��� ��� ������ � � ����3 ��/� �. ( >�,� ,� ��..��� ��, . E*��� �/� (F� A��3 �� ,� $*$�,� �,� �,� �7+�A 1��2 . � ���� ( � �� ��,2��� ��2�(��/ ,���2���2, ,� D& ��� �,� �� ,� $*I� ,� �,� �,� �7+�A1��2 . > � ��> �, (�3 �� ��/� �. ( ,� � ��D��2� �0 ��'G�7+ �, (�3 �� ��( .2�. C2 �,�3 ( /� �. (� �� ,� I* ,� �,� �,.� �7+�A 1��2 . > � ���1 ��,2��� ��2�(��/ � ������� >�,� ,� 0��., � �.2� � �, �, (�3 �� �� I*$�� ��D��2�1��2 . �0 ���1 ���G > � � �/� ( �3 (�3 � ��( � ���� (.,��� 2�,�� ,� �( �0 ,� D& ��� �,� ��,��2�� ��, .����0�/��,�3� ,� �7+ 1��2 . �� ,� I*I� ,� �,� �, , �( ( ,� � ��> � ,��� �� ,� I*� ,� �,� �,� � �/���� � ��D��2� �0���G �7+�

������� /��/ �,��,���. �� ��� ,� �,� �,. > � ,� .�� �, ,� � ������� ��( �, ,� �( �0 ,� D& ��� �, E*��� ��� �F� ��> 1 �� (2���� ,� D& ��� �,� (�00 � �, (3����/. > �

��. �1 ( �� ,� (�00 � �, ,� �,� �,.� �� ,� $*$� ,� �,� �,���,��, /��/ �,��,���. (�( ��, /���� ,���2���2, ,� D& ��� �,� >� � �. �� ,� $*I� ,� �,� �,� � , �&����3 ��/� �. >�. ��. �1 (� >�,� � ��D��2� �0 ���! �� +A�

� + E� (�>�F$�

�, (�3 �"� �� ,� I* ,� �,� �,.� +A�� /��/ �,��,���. .���&�3

( /� �. ( >�,��� ,� 0��., (�3. �0, � ,� � ������� �0 ,� D& ��� �,� ,��. ( /� �. � ��� ��� &����2�/ ( �� ,� I*$� E,� '� �� +A�

� + E� (�>�F$� �, (�3 �F �. /��&�� ( ,�,� I*I� E,� ���� �� +A�

� + E� (�>�F$� �, (�3 !F ,� �,� �,�)2�. C2 �,�3� ,� 1��2 . � /�1 � ( ,� ���! ��(��� �� +A�

� + E� (�>�F$� �� ,� I*� ��( I*I� ,� �,� �,�� .& /,�1 �3� �, ,� �( �0 ,� D& ��� �,�

������2� /��/ �,��,���. > � � ��> ,� ( , /,��� ����, �0,� ���,��2�2. *��> ����3B � E��� &&� +��

� +F ��., �0 ,� ,�� E(�,� ��, .��>�F� ���. C2 �,�3� �� �7+ ����3.�. >�.&�..��� 0�� ,� D,��/,��� +��

� �

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

-���� !� 63����/. �0 +�A0�2D ��, . E�� �F��7+ ���/�� �, �� +�A E/� (F� �7+ ���/�� �,�� +A�

� E � 0F� +A�� /��/ �,��,��� �� ,� .���

E�� �F� ��( �A�0�2D ��, . E�� %F (2���� ,� D& ��� �,� � E(�3 �F; �*@) �0 ��� ,� �,� �,. ���2��, ,� '7G� �((�,��� �0 6A� ��I� ,� �,� �,.� ,��>��� �0 I* ,� �,� �,.�8 ��. ��( .,��(��( ( 1��,��� E� T � 0�� $*�� T � 0�� I*F��������� !� ��420 ( � +�A*�2..��, �E�� �F� ( � �7+��� �/� �2�� �� +�A E/� (F�( � �7+��� �/� �2�� �� +A�

� E � 0F� +A��

���B �,��,��� �� :�( � E�� �F 2�( ( � �A�*�2..��, � E�� %F >4�� �( ( . �.2/� .�� EH�� �F; ��.. �� 0=��, . @�� �1��2� �>2�( �� ��� � �����, � �20 '7G ��� ., ��,�K2��� 1�� 6A� �� ( � I� �����, ���20,�2 � ( � I* �����, �� 8�,, �> �, 2�(),��(��(��> �/�2�� � E� T � 0=� $*� � T �0=� I*F�

�"� ) �3� 63/J���.� -2. �� 82�/� �� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"!

Page 5: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

H� !5� ���� �� ��� ������� 2��� �0 ,� $* ,� �,� �,. 0�2/,2�, ( ���3 .����,�3 ���2�( ���" �,��G �7+ ,���2���2, ,� D& ��� �, E*��� � F� �� ��,� I* ,� �,� �,.� ,� �7+A�

�1��2 . ( /��� ( ., �(��3 0��� ���� ��( ��7� �,��G �7+ �,(�3 � ,� ���! ��( ���� �,��G �7+ �, (�3 �� �� ,� I*I� ��(,� I*$� ,� �,� �,� � .& /,�1 �3 E*��� �0F� �D/ &, 0�� (�3 ��,� �7+A�

� 1��2 . �� ,� I*$� ,� �,� �, > � /��.,��,�3���� � ,��� �� ,� I*I� ,� �,� �,�

'�� ������ � 0�� (�3 � > � (�.,��/,�3 ���� � �� ,� $*,� �,� �,. ,��� �� ,� I* ,� �,� �,. E���' ��( ���� �� �A�� �$� �$� 0�� $* ��( I*� � .& /,�1 �3F E*��� ��� %F� �2, ,��. &�,, �� >�. ��1 �, ( �0, � (�3 �; H� ��..���. 0��� ,� I*,� �,� �,. > � .���&�3 ��/� �. ( ! � �0, � ,� .,��, �0 ,� D& ��� �, >� � �. ,� ��..���. 0��� $* � ���� ( �� ���> � 1 �� H� ���,��� ��/� �. �0 �A� ��..��� �� ,� I* ,� �,� �,. ��., ( 0�� ���3 ,>� (�3. ��( ( /� �. ( ,� � �0, ��8�D��2� ��..���. �0 ��� �� �A�� �$� �$� > � ��. �1 (�0, � (�3 !�

H� �((�,��� �0 6A� ��( �� .����0�/��, 00 /, �� /2�2��,�1 �A� ��..���.� � �,� � �� ,� $* ��� ,� I* ,� �,� �,.��,��2�� �A�� ��..���. > � ��/� �. ( �3 !�' �� �$� ��,� $*I� �. /��&�� ( ,� $*$�� >��/� �. ��� ,��� ,>�/ ,� ���2�, �0 ,� �(( ( � E��� �� �$�F� �� /��,��.,� � (�.,��/,0� B ,��> 00 /, >�. ��. �1 (; :3 ,� �( �0 ,� D& ��� �,� /2�2��,�1 �A� ��..���. �� ,� I* ,� �,� �,. > � ��/� �. ( �3 � 0�/,�� � �. /��&�� ( ,� $*$� EH��� �F�

78��������� ��' ������������� > � ��, .����0�/��,�3�00 /, ( �3 ,� �((�,��� �0 D, ���� 6A� �� ,� I� ,� �,� �,.EH��� �F� : 0�� (�3 �� .��� 6A� /��, �,. > � ���� � �� ,� I* ,� �,� �,. ,��� �� ,� $* ,� �,� �,.� �� ,� $* ,� �,� �,.� �� /���� �0 6A� /��/ �,��,���. >�. ��. �1 ( �0, �(�3 �� ��( 6A� /��/ �,��,���. 0�2/,2�, ( ���2�( 7 �� �E� (�>�F$� (2���� ,� D& ��� �,� �� /��,��.,� �� ,� I* ,� �,� �,.� 6A� (��&& ( 0��� '� ,� �� � ��( ��'� �� �

E� (�>�F$� �� ,� I*� ��( I*I� ,� �,� �, �, ,� � ������� �0,� D& ��� �,� � /�1 � ( ,� "��' EI*I�F ��( '�'� �� � E�(�>�F$� EI*$�F �, (�3 ��� ��( ( /��� ( ���(2���3 2�,�� ,� �(�0 ,� D& ��� �,�

H� ����3.�. �0 ��������� �01 ������� �. � � �.2� �0��/������ �����.. E #�*���� , ���� ����F � 1 �� ( ,��,� �,� � 6A� �((�,��� ��� 0� B ,��> ,� �,� �,. ��0�2 �/ (,� ��/������ �����.. EH��� �F� H� 1��2 . ���� ( � ,> � ���( ��7 ���� �H@ E� (�>�F$� (2���� ,� D& ��� �, >�,� ��, �&���� ,� �( �� ,� �,� �, 00 /,� � .������ &�,, �� >�.0�2�( 0�� ,�,�� �( �3��, /��, �, E(�,� ��, .��>�F�

3 �������

�� 0��B � .��� EI* ,� �,� �,. � 0�� (�3 �F� D,��/,��� 6A�>�. ��/� �. ( �3 � �� � �$� �. /��&�� ( ,� ,� 2�0��B � $*,� �,� �,. EH��� �F� H��. .��>. ,��, .��� 0� B��� � .2�,. �� ����/� �. ( � � �. �0 D,��/,��� �� �((�,������3� /��,���2,���,� ,� �2��(2& �0 � �� 0��B � .��� ��3 � ,� 0�/, ,��, ,� � ,�����B�,��� �0 � � �. ( � �. ( /� �. (� �. ��(�/�, ( �3,� ��> � .&���,��� ��, . E*��� �%F� �&��, 0��� ��> , �& ��,2� .� ,��. /�� � �,,���2, ( ,� ,� ��> .2�.,��, �1��������,3 ��0��B � .��� >�, � E ����% ��( ����'��(� �''�F ��(� (2/ ( ��. (�002.��� �� 0��B � .����

���..���. �0 +�A > � .����0�/��,�3 ��/� �. ( 0����>��� ,� �((�,��� �0 6A� �� ,� $*I� ,� �,� �, E*��� ��F /��� .&��(��� ,� � 1�, ( +�A ��..���. �0, � 0� B ,��> 1 �,.� H��.��(�/�, . ,��, .2�.,��, �1��������,3 E��+�� � ��( +F �. � ��%��0�/,�� ,���� ���� ��/� �. ( +�A ��..���. �0, � ,��>��� �00��B � .���.� ��> 1 �� ,� ,�,�� ���2�, �0 +�A ��,, ( �� ,� $*I� ,� �,� �, >�. .���� /��&�� ( ,� ,� I* ,� �,� �,.�>� � /2�2��,�1 ��..��� �, ,� �( �0 ,� D& ��� �, >�.��/� �. ( �3 � 0�/,�� �" EI*$�F ��( 77 EI*I�F �. /��&�� (,� $*I� EH��� �F� � ,� � 0�� /��/�2( ,��, ,� �((�,��� �0

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

0���� $� 63����/. �0 6A� ��( �H@ /��/ �,��,���. �� ,� .��� 0�� ,� (�00 � �, ,� �,� �,.� ���,�� ,�/ � ��. ��( .,��(��( ( 1��,��� �� &�� �,� . .�0������ $� ��420 ( � 6A� 2�( �H@���B �,��,��� � �� :�( � �� ( � 1 �./�� ( � � �����, �� ���,�� ,�./� 8�,, � ��, ),��(��(��> �/�2�� � �� ����� ���

,�� $*$� $*I� I*$� I*I�

6A� U�� � �$�V

(�3 $� ��� E����F ��� E����F '� E�� �F '� E�� �F

� ��!' E��"�F 7��� E��7�F �� � E����F ��'� E���!F

� ��! E����F 7��� E�� "F 7��� E��"�F ��� E��'!F

�� 7�7! E���'F 7��" E���!F �'� E���7F "��' E��! F

�� ���" E���!F ��"� E��� F ��"� E���'F ��!' E����F

�H@ U���� �$�V

(�3 $� ���� E����F ���� E����F ��7� E��'�F ��7� E��'�F

� ��(� ��(� ���� E���7F ��'� E��"�F

� ��'� E���!F ��� E��!'F ���� E��7'F ��7" E���!F

�� ���� E��! F ���� E��7�F ��7� E��' F ���' E����F

�� ��!� E��'�F ��!" E��7"F �� � E��7 F ���� E��'!F

��(� ��, ( , /, (

�� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"! �((��� 6A� ,� .��2��, 0� B ,��> � ��, ( +�A ��..���. �"7

Page 6: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

6A� (�( ��, ����/ /��(�,���. &� 1������ �0, � 0� B���� H��.�. ( .&�, ,� 0�/, ,��, ,� ���2�, �0 � �(( ( ,� ,� I� ,� �,� �,. /��� .&��( ( ,� ,� ��/� �. �� D,��/,��� � � 0�� (�3 � �� ,� I* �. /��&�� ( ,� ,� $* ,� �,� �,. EH��� �F�

���� � �� ,� $* ,� �,� �,.� +�A 0�2D >�. .,�����3 E��( .����0�/��,�3F ��/� �. ( �3 ,� �((�,��� �0 �� ,� ��/� �. �0 /2�2��,�1 �A� ��..��� �� $*I� �3 !�' �� �$� E>��/� �. ��! ,�� .,� �(( ( ���2�, �0 ��� �� �$�F �. /��&�� ( ,� $*$� >�.��, .����0�/��, EH��� �F� ���..���. �0 �A� �� ,� I* ,� �,� �,. ���� �3 .2�&�.. ( ,��. �� ,� $*I� ,� �,� �,� ��(,� ��/� �. �� /2�2��,�1 ��..���. � ,> � ,� I* ,� �,� �,. ��( ,� /��,��� E$*$�F >�. � ,�� . ���� � ,��� ,� .2�.,��, �((�,��� �� ,� I� ,� �,� �,.� ��(�/�,��� ��� �>�. � .&�� (� H��.� �� ,2��� .2�� .,. ,��, ��� .2�.,��, >�.�1������ 0�� ��/��������.�. 0����>��� ,��>��� �0 0��B � .����� ,� I* ,� �,� �, ,��� 0����>��� ,� �((�,��� �0 � �� $*I������ � � .&���,��� ��, . �� ,� I* ,� �,� �,. �. /��&�� ( ,�$*I� �� ����� >�,� ��/� �. ( A� /��.2�&,���� 02�,� � ����/��� ( ��,��0�/�,��� ��( +�A ��..��� ��, . E*��� �F�

9���J �A� ��..���.� � 1�, ( +�A ��..���. �//2�� ( >�,�� ,�� ���� �� 1�, ( ��..���. > � ��. �1 ( �0, � �� (�3�� ,� I* ,� �,� �,. ��( �0, � ,�� (�3. �� ,� $*I� ,� �,� �, E*��� ��� �F� �' ������� ��( ) �%2� E�'!!F ��1 .��>�,��, ,��. ,�� ��� /��� .&��(. ,� ,� ,�� � / ..��3 0�� ,� .,����.�� �, �0 ���D�/ /��(�,���.� H� 3 ��. �1 ( ,��,P0����>��� ,� ��% /,��� �0 ( �( /� ��� / ��. ,� .��� �, 0� �( /�&�/�,3P� .&���,��� ��, . ��/� �. ( ��� (��, �3� >��� ( ��,��0�/�,��� ��, . ��/� �. ( ���3 �0, � 0�2� (�3.� �� /��,��.,�� .&���,��� ��( ( ��,��0�/�,��� ��, . ��/� �. ( ��� (��, �3>� � / ��. > � ��% /, ( ,� ��� ����/ .��� .2.& �.���� H� .���, � (2��,��� �0 ,� ���&��. �� ,� I* ,� �,� �,. �� �2� D& ��� �, /�� � �,,���2, ( ,� ,� 0�/, ,��,P�. ��(�/�, ( �3,� ���� � � .&���,��� ��, .PA� /��.2�&,��� >�. ���� � ��(,�2. ���D�/ /��(�,���. > � .,����.� ( ���� � ,��� �� $*I��

H� � >�. ���3 ��,,� P�0 ��3P(�00 � �/ �� ,� +�A ��( �A�0�2D . � ,> � I*$� ��( I*I� ,� �,� �,. E*��� �� ��( %F���(�/�,��� ,��, ,� �((�,��� �0 6A� /��,���2, ( ���3 ��,,� D,��,� ,� ��. 0�2D . ,���� � ( �3 0� B ,��> �/,���.� : .�( .(�00 � �, C2��,�,� . �0 �1������ � �� I� ��( I*� ,��. ��(�/�, .,��, &������3 ,� � ��� ��, ( 2&�� 0� B ,��> �. C2���,�,�1 �3(�00 � �, E��+�� �� �1��������,3F 0��� ,� � �(( (� -�������( . ��� E����F � &��, ( ,��, �G �0 � D,��/,��� (2 ,�0� B ,��> 1 �,. >�. �0 ��/������ ������� A� ,� �,� ����(� ,� 3 0�2�( ,��, ,��. .�� ���2�, �0 D,��/, ( � /��� .&��( ( ,� ���3 7G �0 ,� ,�,�� ��/������ �����.. �0 ,� .����A2� (�,� /��������, ,� ��,, �� .��/ > 0�2�( �� 00 /, �00� B ,��> /3/� . �� ��/������ �( �3��, /��, �, EH��� �F���(�/�,��� ,��, ���3 � ����� &��&��,��� �0 ,� ��/������ �����.. �. �00 /, ( �3 0� B���� ��1 � ,��, ,� ��� ��, ( .2�.,��, �. ��.,�3 �0 ��/������ ������� �, >��� &� (������,�3 � � � �. ( �, .�, . �0 ���� ��/������ ��2�(��/ � H� � ������������.. �, ,� . .�, . >��� ��&�(�3 � ,���� � ( ��,� �/,�1�,3 �3,� �2,�� �,. � � �. ( ,���2�� 0��., �/,���� � .& /2��, ,��,� ��%�� (�00 � �/ � ,> � ,� �((�,��� �0 6A� ��( 0� B ,��> 1 �,. �. ,� ��/�� (�.,���2,��� �0 ,� .2�.,��, ; ���� D, �����3 �(( ( 6A� >��� � /�� �1������ ,� ��/��������.�. ���3 �0, � ���(2�� (�.,���2,���� ,� .2�.,��, ��� ��, ( ��

0� B ,��> 1 �,. �. �1������ � � � ��( /�� � ��� (��, �3 2,���B ( �, .�, . �0 ���� ��/������ ��2�(��/ �

�� � �,� � $*I� ��� I*I�� 6A� �((�,��� � .2�, ( �� ����/� �. �0 D,��/,��� 6A�� ��,��2�� � �.2� � �,. > � ��( ���3 7 � �0, � 6A� �((�,��� EH��� �F� H��. 0��(��� /��� .&��( ( ,� � .2�,. 0��� � . &���, D& ��� �,� >� � ,� �((�,��� �0 � D,��/, ( 0��� 0��B � .��� (�( ��, � �( ,� ����� � ���2�, �0 D,��/,��� � �� (�3 �0, � �((�,��� ,� �.���� >� � �. D,��/,. 0��� (�� ( .���� >� �, .,��>� �� /��1 �� .2�, ( �� �� ��/� �. �0 D,��/,��� � �0, � �� (�3 E2�&2���.� ( (�,�F� H��. ��3 &��,�3 � �,,���2, ( ,� ,� ���� ( ���(�����,3 �0 ,� �(( ( .2�.,��, � )��/ ,� .2�.,��, ��( �1������ �3 0� B��� �. /��.�( � ( ,� � &� (������,�3( ��1 ( 0��� ��/������ �����.. E-����� ��( . ���� ����M1���� , ���� ����F� �, /��,���. � �. > �� �. �,� � �2,�� �,..2&&��,��� ��/������ �/,�1�,3 ��( ,�2. � �(��� ,� � ��&�(( /��&�.�,��� �0 ,� .2�.,��, � H� ��. �1�,��� ,��, D,��/,��� � >�. .���&�3 ( /� �. ( EH��� �F ��( � .&���,��� ��, .> � ���� E*��� �%F �, (�3 � �� ,� I* ,� �,� �,. ��(�/�, . ,��,6A� �/,2���3 . �1 ( �. .2�.,��, 0�� ,� ��/��������.�.�A� ,� �,� � ���(� ����� ��( -�%+� E�'''F � &��, ( ���0��1 . �0 �.��3 ( ���(��� .2�.,��, . E��+�� ����� �/�(.F ��.��� �� ,� ��( � �0 . 1 ��� ��2�.� ��(�/�,��� ,��, ��/�������� �J(�>� ���� /����, D&���� ,� 0�., (�.�&& ����/ �06A�� � ,� � 0�� �..2� ,��, .��&,��� &��/ .. . ��( (�002.��� ��,� ��/��&�� . ��, �// ..��� ,� ��/��������.�. �� ��.� ��1��1 (� H��. �. /��������, ( �3 ,� 0�/, ,��, ���� ��/������ �/,�1�,3 �0, � 6A� �((�,��� �. .2.,��� ( 0�� ��� ,��� ,>�> J. �� ,� $*I� ,� �,� �, E*��� ��F� ��(�/�,��� ,��, 6A��(( ( �, (�3 � �. �1������ 0�� � ���� & ���( �0 ,�� � H� (�./� &��/3 � ,> � � ��,�1 �3 ��> ���2�,. �0 D,��/,��� 6A��0, � ,� 0� B ,��> 1 �, /��&�� ( ,� ,� ���� /2�2��,�1 �A� ��..��� (2���� ,� D& ��� �, EH��� �F ��(�/�, . ,��,6A� ��� ��, ( 2&�� 0� B ,��> �. ���3 &����3 D,��/,��� �

*����>��� (�3 �� 6A� /��/ �,��,���. �� ,� I* ,� �,� �,.���(2���3 ��/� �. ( 2�,�� (�3 �� (2���� ,� &��. �0 ���� .,+�A ��..���. EH��� �F� H��. ��3 � /�2. ( �3 ,� ��/��&� , ��� ����B�,��� �0 ,� .2�.,��, ��( �//2�2��,��� �0( ���(�,��� &��(2/,. 0��� ���D�/ � ,�����.�� �. >�.� &��, ( 0��� �,� � .,2(� . E������ ��( ������ �''�M 3� ,���� ����F� �� ,� . .,2(� .� (�..��1 ( ������/ /��&�2�(.��&�(�3 (�.�&& �� ( �0, � � � ��,��� �0 ,� ���D�/ .���� >� �A� ����> ( ,� /��&� , �D�(�,��� �0 ,� ������/ /��&�2�(.,� �A�� � �..2� ,��, ( /� �. �0 6A� /��/ �,��,��� ���2� D& ��� �, �0, � (�3 �� ��3 � �,,���2, ( ,� � ,, � A��1��������,3 E(2 ,� ( /� �. ( A� /��.2�&,���F � .2�,��� ��,� �D�(�,��� �0 ,� �//2�2��, ( 6A� ,� �A�� �//��(����3�,� �A� ��..���. 0��� ,� I* ,� �,� �,. .��> ,� �� ���� .,1��2 . �0 ,� D& ��� �, �, ���2, (�3 �� E*��� �%F�

H� �((�,��� �0 ��� � ( +A�� � .2�, ( �� !5� ���� �� �������

�0 ���2, ��� �,��G E*��� � � 0F� ��2 . � ���� ( 0����3 .,��� �� ,� $* ,� �,� �,.� �� $*I�� ,� �7+ ���/�� �, �0 ,� +�A D/ ( ( ,� ���/�� �, �0 ,� +A�

� &���� ��(�/�,��� ,��, 0��( ��,��0�/�,��� ��( +�A 0����,��� ,� �(( ( +A�

� >�. &� 0 � �,����3 2. (� H��. .2�� .,. ,��, ,� �((�,��� �0 D, ���� 6A�,�� ,� � >�,� ��� � ( +A�

� � .2�, ( �� ,� 0����,��� �0 ��,.&�,. �0 ��/� �. ( ( ��,��0�/�,��� 0����>��� ,� .,����.�� �,�0 ��� ����/ /��(�,���.�

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

�" ) �3� 63/J���.� -2. �� 82�/� �� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"!

Page 7: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

�� ,� I*$� ,� �,� �,� �7+ �� ,� +A�� &��� ��/� �. (

� ,> � (�3 � ��( (�3 � E*��� �0F� &� .2����3 (2 ,� ,� ���,��� &� 0 � �,��� ( ��,��0�/�,��� �0 2���� � ( +A�

� �. ���� �.,� �(( ( ��,��, >�. ��, 2��0����3 (�.,���2, ( �� ,� .���� +�.2/� ��/� �. >�. ��. �1 ( �� ,� I*I� ,� �,� �,� &� .2����3 �. � � .2�, �0 ,� 0����,��� �0 ( ��,��0�/�,��� ��, .&�,.(2 ,� ,� �((�,��� �0 ��,� D, ���� 6A� ��( +A�

� E�,��$*I�F� ���. C2 �,�3� ,� �7+ ��� � �0 ,� +A�

� &��� >�. /��.,��,�3 ��> � �� ,� I*I� ,� �,� �, �. /��&�� ( ,� I*$�� ����,� ,� I*$� ��( I*I� ,� �,� �,.� �7+ /��, �, �0 ,� .���+A�

� ( /��� ( >�,� ,�� � ��(�/�,��� /��.�( ���� + ��� ����B�,��� ��( ��,��0�/�,��� 0��� 2���� � ( &���.� )��/ �� &��� (��2,��� >�. ��. �1 ( �� ,� $* ,� �,� �,.� ��� ����B�,��� �� ,� I* ,� �,� �,. �. &� .2����3 02 �� ( �3 &� 1��2.�3 2��1������ ������/ + &���. ��( �1������ ,���2�� 0��., �/,���� �.>�. � &��, ( �3 �4��� , ��� E����F� H� �7+ /��, �, �0 ,� +�A ��..��� ���3 ���(2���3 ��/� �. ( �, ,� � ������� �0,� D& ��� �,� ��( ,� ��/� �. .,��, ( ��, � �� ,� $*I�,� �,� �, ,��� �� ,� I* ,� �,� �,.� �. (�( ���� +�A ��..���.� H� +�A ��..���. � &� . �, � ��D,2� � ,> � 2���� � ( +�A E0��� ��,��0�/�,��� �0 2���� � ( +��

� F ��( ��� � (+�A E0��� ( ��,��0�/�,��� �0 ��� � ( +A�

� F� ��,� ,� ��. , �0���� ��..��� ��, .� ,� �7+ /��, �, �0 ,� +�A .,�����3��/� �. ( ��( >�. �, ,� .�� � 1 � �. E��� �� $*I�� ���1 F,� .��� �7+A�

� /��, �, E*��� �/� (F� H��. .��>. ,��, (2����&��. . �0 ���� +�A ��..���� ( ��,��0�/�,��� �0 .��� +A�

� >�.,� &� (������, .�2�/ �0 +�A &��(2/,��� �� ,� $*I� ��(I* ,� �,� �,.� �� ,� $*$� ,� �,� �,� �7+ �0 +�A � ���� (� �� ��,2��� ��2�(��/ E*��� �/F� ��( ( ��,��0�/�,��� /��,���2, ( � ,> � ��7G ��( "G ,� ,�,�� +�A ��.. . (2���� ,� D& ��� �, E(�,� ��, .��>�F� H� . 0��(���. .2�� ., ��/������ ��,��0�/�,��� � ��� ,� ���� &��/ .. �0 +�A &��(2/,��� ��,� $*$� ,� �,� �,� ���' ��( ���'� E�'!7F �( �,�0� ( ��,��0� �( ��,��0�/�,��� �. ,� &� (������, &��/ .. 0�� +�A &��(2/,���(2���� ��,��0�/�,���P� &��/ .. ���,��, ( �3 � ��,�1 �3 ��> A�/��/ �,��,���.� +�,��0� � ( ��,��0�/�,��� �. � ��2,�,��&��/ &��/ ..� �� >��/� ������� �D�(�B �. 2,���B +A� ��., �( �0 A� �.�� � /,��� �// &,�� ��( � (2/ �, ,� +A� +�A� ��( +�E.�+� , ���� ����F� 3� , ��� E����F /�2�( .��> ,��, +�A ��..���. & �.�., ( ���3 �, A� � 1 �. >��/� ���� ( ��,���,��0�/�,��� ��( ( ��,��0�/�,���� /��� .&��(��� ,� A� /��/ �,��,���. � ,> � ��7G ��( 7G� H� ��. �1�,��� �0 +�A ��..���. ��,� ��> ��( &� (������,�3 0��� ��,��0�/�,��� �� $*$�.2�� ., ,��, ,� ��/J �0 �1������ � ����, ( ��/������ ( ��,��0�/�,��� ��( .2&&��,. �2� �3&�,� .�. ,��, � �. �� .. �,���0�/,�� 0�� ���� >��, � +�A ��..���.� �1��������,3 �0 � /��,���.� .&���,��� ��, . ��(� ,�2.� ,� �1��������,3 �0 A� �� ,� .����,� .���,�� �0 >��/� �. � / ..��3 0�� ( ��,��0�/�,��� ,� ,�J &��/ �

'��������

� /��/�2( ,��, ,� �1��������,3 �0 �.��3 ( ���(��� � >�.�� .. �,��� 0�/,�� 0�� ���� +�A ��..���. 0����>��� 0� B ,��> 1 �,. �� �2� D& ��� �,� H� ��/���B�,��� �0 ,� ��� ��, ( .2�.,��, � ���� ,� �1��������,3 � � �� . �. ,� � �0��%�� ��&��,��/ 0�� ,� ���2�, �0 +�A &��(2/ (� H� �((�,��� �0 �.��3 ( ���(��� .2�.,��, ,� � 0�� /����, �( C2�, �3 .��2��, 0� B ,��> 1 �,.� : .�( . �&� � �1��������,3� ,>� �,� � &���,. ��3 � ��&��,��,; �F H� �(( ( 6A���3 ��, D�/,�3 /��� .&��( ,� ,� ���2�, ��( C2���,3 �0 .���

� �/,2���3 �1������ 0��� �� &� 0 ����3 2. ( �3� ,� ��/��������.�.M �F ,� 6A� D,��/, ( � &� . �,. ���3 � .��&.��,�0 � �1��������,3� ��, � 0� /,��� ,� (3����/. �0 � 2. ��(.2&&�3�

H� ���� &��/ .. � .&��.��� 0�� � 1�, ( +�A ��..���.0����>��� 0� B ,��> 1 �,. �� 0����>��� ,� �((�,��� �0 �.��3 �1������ � >�. �( �,�0� ( �. ( ��,��0�/�,���� H� � � ����3 ��> >��, � +�A ��..���. E�� ,� ��. �/ �0 0� B ,��> 1 �,.F ( .&�, ���� �*@) ��( ���� .��� +A�

� /��, �, �� ��, ���3 �,,���2, ( ,� ��> .��� , �& ��,2� .� �2, ��.� ,� .���,�� �0 ( /��&�.��� ��

�������������

H��. � . ��/� >�. � &��% /, �0 ,� *�8 - . ��/� + ,>��J ������ /�.3., �. .2&&��, ( �3 ,� $���� ��%��� � � ��#�, /%��� �� ��% ������' E:8:* ���'�"�F� A1 �� �(/�.,. > � 02�( ( �3 ,� ���� �� ����� � � ��# ,� �� �����������' ��% �'� 5��� ?� 63/J���.X >��J >�. .2&&��, ( �3,� ��� ���� ���� � ,� ����� ������' ��% �����(����E�A*A-6F� 62����� �� ���(� H� �2,���. >�2�( .& /����3��J ,� ,���J �� ��++� ��( �� ����0����� �)*��.,�,2, �0)��� �/����3� 0�� .J��� ( , /���/�� �..�.,��/ �

%��������

���'���� /� ���� � ������� ��( �� ������ � E����F; �00 /,. �00� B ,��> ��( .��� .,�2/,2� �� ��,��2. �D�( &��(2/ ( �� � /��3.���� )��� )/�� )�/� ��� ?� �� � �!$� ���

������ �� ��� �� $� ��"" ��� ��( 5� �� ����*�� E�'!�F; ) �.����1��������,3 �� ��..��� �0 ��,��2. �D�( 0��� .���� � �&�3.� - .�� ,,� "� ��$ ���

����� � 1�� ��( /� $� ����'��( E�''�F; @��0�� ��,��2. �D�( ��(/����� (��D�( /��/ �,��,���. �� � .��� .2�% /, ,� 0� B���� )��� )/��)�/� ��� ?� 7!� ��7$����

�' �������� ��� ��( �� )� �' ������� E�''�F; A�����/ ��,, ��1������ 0�� ( ��,��0�/�,��� �� (�00 � �, .��� 0��/,���.; 00 /, �00� B #,��> /3/� . ��( .,��> (�.&�.��� ?� )��� )/�� ��� �"$ �"�

�' �������� ��� ��( �� �� ) �%2� E�'!!F; 6 ��,��0�/�,��� �� ,� 0� �(�����3.�. �0 .&�,��� ��( , �&���� 1��������,3� �� 6� )� ? �J��.�� ��(�� �� )��,�; +�,��� � �00�/� �/3 �� ����/2�,2��� )���.� ��. 1� �����(��� &� �'7$����

������ �� �� E�'!�F; �,��.&� ��/ /� ��/�� &��/ .. . �0 ,� �D�( .�0 ��,��� �� ��/�2(��� ��,��2. �D�( � �� �� �� 6 �>�/� ; 6 ��,��0�/�,���� +�,��0�/�,��� ��( �,��.&� ��/ +�A� ?��� ��� 3� + > ���J�&� �"$���

�� %���� /� 5� E�''�F; *�2D . �0 ��,��2. �D�( ��( ��,��/ �D�( 0���, �� .,���� /�.3., �.� �� ?� �� -�� �. ��( �� :� ���,���;8�/������ @��(2/,��� ��( ���.2�&,��� �0 �� ���2. ��. .;8 ,��� � +�,��� � AD�( . ��( ����� ,��� .� �� ��/�� )�/� ,3�0 8�/��������3� ��.����,��� 6� ��� &� ��'$��7�

����%� ��� ��( /� $� ����'��( E�''�F; 6 ��,��0�/�,��� ��( ������0�/�,��� �, ��> .��� , �& ��,2� .� ���� ?� )��� )/�� "�� �'�$����

!"#� �� ��� �&�� ���% �� �� /� )�#� ��( �� 1� )��� ��� E�'!�F;���..���. �0 ��,��2. �D�( 0��� .���.� +�,2� �'!� � �$� ��

#�*����� ��� ��( �� ��"�' E�''"F; � ��(�0�/�,��� �0 � � ,��( ,�( , ���� �( ��.�� �2/� �,�( . �� 0�� ., ������/ ��3 �. ��(��� ��� .���. �3 ���&��� ( � 1 �. (&��. ����& �0�����/ ��C2�(/�����,����&�3� ?� 8�/������� 8 ,��(. ��� ��$���

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

�� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"! �((��� 6A� ,� .��2��, 0� B ,��> � ��, ( +�A ��..���. �""

Page 8: Adding dissolved organic carbon to simulate freeze-thaw related N2O emissions from soil

#�*����� ��� �� �'��%�� �� $� ���+������ �� � ���� �� ��"�'���( 6� ��'# E����F; �( �3��, . �. �� .,���, �0 ��/�����������.. � �� (�00 � �, .��� ���2&.� )��� :���� :��/� �� �7� ��!7$��'��

/%0�%�� 5� ��� ��( �� �� ����� E�''�F; *� B��� ��( �,. 00 /, ��/� ��/�� ��( �������/�� &��& �,� . �0 .���� �(1� )��� )/�� �!� 7'$"'�

������� -�� ��( �� ����� E�''�F; �4�( �2�� � ��J���� �� � ),�002�. ,B2�� � �� :<( � (2�/� ( � Y� ����� 1�� � ��� � B2 ��� ��� � : (���2�� � $ 8�( ��2�, �.2/�2�� � �� 8�J��J�.� �� ��� � .� ZJ��� ��� ���$�� �

������� -�� �� ���'� ��( �� ����� E�''7F; ) �.���� 1����,��� �0+�A ��( ��� 0�2D . �� (�00 � �,�3 ����� ( .���. �� .�2,� ��� ����3� ?� � �&�3.� - .� ���� ����7$������

������� -�� �� ���� �� ���'� )� ���(� �� 5� � ������ �� �� ���'���( �� ����� E����F; ��, ���, ( 1��2�,��� �0 �� ���2. ��. ��..���. 0��� ,>� 0������ .3., �. �� .�2,� �� � ����3; )& /���/��.�( ��,��� �0 +�A ��..���.� ���� �/�.3.,� ��1����� '���"7$�''�

$��%��%� 1�� ��( � �� �����# E�'!�F; +�,��2. �D�( ��..���.0��� .���. (2���� ,��>���� ���� ?� )��� )/�� �� �!"$�'��

-������ 5�� ��( /� . ��� E����F; )�2�/ . �0 � ��( + /��,���2,���,� ,� 0�2.� �� ��� ����B�,��� 2&�� 0� B ,��> /3/� . �� .���.� )���:���� :��/� �� ��� ��'7$�7�7�

���� E��, ���1 ��� �,�� @��� � �� �����, ����� F E����F;�����, ����� ����; H� )/� �,�0�/ :�.�.� ������(� 9��1 �.�,3@� ..� ������(� �

������� /� �� E�''�F; �1��2�,��� �0 �2,���, ( ����3.�. �0 �7+ ��(,�,�� + �� &���, ��, ���� ��( .���� @���, )��� ���� !�$'��

������ � 1�� ��( -�%+�� 5� E�'''F; :��( ���(�,��� J�� ,�/. ��(.��&,��� � �/,���. �0 ,�� (�00 � �,�3 /���� ( ����� �/�(. �� .�����( ,� �� 00 /,. �� &���, ������/ ��,��� � �1��������,3� )��� :����:��/� �� ��� ����$�����

�� ��� /�&5�� �� ��'�� �� �4�*�� /� ��'�+� 7� -� ����#�� ��(�� �� ���' E�''!�F; +�,��2. �D�( � � �. 0��� ����� .���; ��&��,��/ �0 +0 �,���B�,���� /��&. ��( , �&���� 1����,���� )��� :����:��/� �� ��� �77�$�7 ��

�� ��� /�&5�� �� ��'�� �� �4�*�� /� ��'�+� �� �� ���'� ��(7� -� ����#�� E�''!�F; +�,��2. �D�( � � �. 0��� ����� .���;��&��,��/ �0 & � ����� 0���� /��&.� :���� * �,� )���. �!� � $���

�������� ��� 1� $4�'�+�� �� �4���� �� ����" � ��( -� �� �8+�E�''!F; ) �.���� 1��������,3 ��( ��,���,��� �&,���. 0�� +�A ��..���. 0��� (�00 � �,�3 ����� ( ���..���(.� ��1����� @���2,� �����"'$�! �

���0���� ��� ��( )� -� ����*"� E�''�F; +�,��� � �.�,�& H /���C2 .� �/�( ��/ @� ..� ���(���

������ ��� 5� ��� �� ��( 1� ��0��� E�'''F; ���.��� ,� ������+�A �2(� ,; � � ,��.& /,�1 ����3.�. �7��$�''�� �����:��� �/� �� �3/� ��� �$!�

1����� �� ��� �� ��'������� ��( 5� � �'����� E����F; - & �, (0� B ,��> /3/� . ��( ,� �� 00 /,. �� �������/�� &��/ .. . �� ,>���/,�/ /�.3., � ,3& .� �&&�� )��� �/��� ��� �!"$�'7�

1�,�, ��%� ��� -� ������� �� 5+�� �� ��( �� ����� E�''"F; �2,���, (��. /�����,����&��/ .3., � 0�� ��&�( ����3.�. �0 ,� �,��.&� ��/,��/ ��. . � ,��� � /����� (��D�( � ��( ��,��2. �D�( � ?� ��1�����L2��� � � 7 �$7 ��

��� �� 5�� �� ������ �� ��� ���� 7� 7������ �� �� �� �+�� ��(7� ��� �����(� E�''!F; ���.��� ,� ������ +�A �2(� ,; ��,��2.�D�( ��..���. ,���2�� ,� ����/2�,2��� ��,��� � /3/� $ A��6#�@��#��� &��. �� ( 1 ��&� �, �0 �@�� �2�( ��� . 0�� ��,������� ���2. ��. ��1 �,��3 � ,��(����3� +2,�� �3/�� ���� /�.3.,�7�� ��7$��!�

�4���� ��� �� ��� �� �� �� �������� �� �� 1�+'� �� �� ���������� �� $� 7���0� ��( -� �� �8+� E����F; @��/ .. . � �(��� ,� +�A ��..���. �� ���..���( .��� (2���� 0� B��� ��( ,��>���� )��� :����:��/� �� ��� ���7$�����

����,,� ��&��� �� )'�������+�� �� $9+��� ��( �� ��� "�����E�''!F; ���( .,� .. � .&��. . �� � .�&����/ ��/, ���� ��3�������3� � "7$!��

���'� ��� ��( � � ���'� E�'!7F; �7+ J�� ,�/ ����3.�. �0 +�A&��(2/,��� �3 � ��������� ��(���; �� D�����,��� �0 ��,��0� �( ��,��0�/�,���� �&&�� ��1����� 8�/������� �'� �� $����

����� ��� 7� -� ����#�� ��( /� 5� �� �� E�''!F; 8�/��������(2/ ( ��,��2. �D�( ��..���. 0��� �� ����� .��� (2���� >��, ��)��� :���� :��/� �� ��� �!7'$�! 7�

���� ��� -� ������� �� ��' �� �+� �� ������ ��( �� �� ���' E����F;�00 /, �0 /��&.& /�0�/ 0� �( ����� � �, ��( + 0 �,���B�,��� �� +�A ��..���. 0��� � 0�� ����3 .���� +2,�� �3/�� ���� /�.3.,� 7'��""$�'��

��'#� 6�� �� ���� ��( �� �� ���' E����F; +�,��2. �D�( 0�2D .0��� ���B 0� �(.; � ��,���.��& ,� 3� �(� .�, .& /�0�/ 0 �,���B�,������( .��� /��(�,���.� ����/� �/�.3.� ��1����� ''� '"$����

�*�+���%� )�� �� 1������%� ��( �� $�*��# E�'!!F; - .&���,��3 �2�.,�0, � 0� B��� ��( ,��>��� �0 .���; D& ��� �,. >�,� .��� ��/, ����)��� :���� :��/� �� ��� !7�$!7 �

)��(�� ��� �� ����� ��( �� ����� E����F; +�,��2. �D�( ��..���.0��� .��� (2���� 0� B��� ��( ,��>��� & ���(.� )��� :���� :��/� ����� �� '$��"7�

)��(�� ��� 5� 3�� �� ������ ��( �� 1%0 + E����F; ���..���. �0 +�A0��� .���. (2���� /3/� . �0 0� B��� ��( ,��>��� ��( ,� 00 /,. �0.��� >�, �� , D,2� ��( (2��,��� �0 0� B���� �2�� ?� )��� )/��� ��&� ..�

3�� )�� �� #�*����� �� 1�,�, ��%� �� ������ ��( -� ������ E����F;� ��,��� 00 /,. �� �A�� +�A� ��( ��� ��..��� ��( � �/��, /��&�.�,��� �0 � 0�� ., .���� ?� @���, +2,�� )��� )/�� � � �'$�7�

.�+�� ��� $� 1� 3���'�,� �� 1� ��� ��� �'��� ��( 7� 7�����E����F; -�� �0 ��,��0� � ( ��,��0�/�,��� �� ,� &��(2/,��� �0 ��,��2.�D�( � )��� :���� :��/� �� ��� �"��$�"���

� ���� ������� ���� ���� � ��� ����� � ��� ��

�"! ) �3� 63/J���.� -2. �� 82�/� �� ����� ��� �� � �� � ����� ���� �"�$�"!