วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

72
1 บบบบบ 1 บบบบบ บบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบบ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเ เเเเเเเ เเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเ เเเเเเเเเเเเเเเ เเเเ เเ เเเเเ เเเเเเเเเ เเเ เเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเ 1870 เเเเเเ เเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ เเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเเ

Upload: podjaman520126

Post on 10-Aug-2015

39 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

1

บทท�� 1 บทนำ��

คว�มเป็�นำม�และคว�มสำ��ค�ญของป็�ญห�

เนื่��องจากสถานื่การณ์�การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่ในื่แต�ลิะท้�องถ��นื่ของจ�งหวั�ดลิ"าปางมี%การขยายต�วัเพื้��มีมีากข'�นื่จากการท้%�ร �ฐอนื่�ญาตให�ผลิ�ตแลิะจ"าหนื่�ายส�ราท้"าให�เก�ดผ*�ประกอบ้การส�รากลิ��นื่ชุ�มีชุนื่ข'�นื่เป,นื่จ"านื่วันื่มีากท้��งนื่%�พื้บ้ในื่ร*ปแบ้บ้ของการบ้ร�หารจ�ดการในื่ร*ปนื่�ต�บ้�คคลิเป,นื่การบ้ร�หารจ�ดการในื่ลิ�กษณ์ะธุ�รก�จครอบ้คร�วัซึ่'�งมี%เอกลิ�กษณ์�แลิะตราส�ญลิ�กษณ์�ท้%�แตกต�างก�นื่การใชุ�วั�ตถ�ด�บ้ในื่การหมี�กเพื้��อผลิ�ตส�ราก1แตกต�างก�นื่ออกไปตามีแต�ลิะท้�องถ��นื่ท้"าให�ได�รสชุาต�แลิะค�ณ์ภาพื้ท้%�แตกต�างก�นื่การเลิ�อกซึ่��อส�รากลิ��นื่ชุ�มีชุนื่สามีารถเลิ�อกซึ่��อได�ง�ายด�วัยมี%รสชุาต�แลิะค�ณ์ภาพื้ท้%�พื้'งพื้อใจต�อผ*�บ้ร�โภคท้%�แตกต�างก�นื่ออกไปท้��งนื่%�ในื่กระบ้วันื่การหมี�กเพื้��อผลิ�ตเอท้านื่อลิหร�อส�รา วั�ตถ�ด�บ้ส"าค�ญท้%�เป,นื่ต�วัก"าหนื่ดรสชุาต�แลิะค�ณ์ภาพื้ของเอท้านื่อลิ ได�แก� ลิ*กแป6ง ซึ่'�งลิ*กแป6งเป,นื่กลิ�าเชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� ซึ่'�งเป,นื่ส��งมี%ชุ%วั�ตท้%�มี%ขนื่าดเลิ1กไมี�สามีารถมีองเห1นื่ด�วัยตาเปลิ�า อย*�รวัมีก�นื่เป,นื่กลิ��มี เชุ�นื่ รา ย%สต� แบ้คท้%เร%ย แลิะไวัร�ส ย%สต�เป,นื่ส��งมี%ชุ%วั�ตเซึ่ลิลิ�เด%ยวัท้%�มีองไมี�เห1นื่ด�วัยตาเปลิ�า ส�บ้พื้�นื่ธุ��โดยการแตกหนื่�อบ้างชุนื่�ดส�บ้พื้�นื่ธุ��โดยการสร�างสปอร�เพื้��อให�ได�เซึ่ลิลิ�ท้%�สามีารถท้นื่ต�อสภาพื้ควัามีแห�งแลิ�งแลิะจะงอกในื่สภาวัะท้%�เหมีาะสมี ในื่ชุ�วังท้ศวัรรษท้%� 1870 หลิ�ยส� ปาสเตอร�ได�ต%พื้�มีพื้�เก%�ยวัก�บ้ส��งมี%ชุ%วั�ตท้%�ท้"า ให�เก�ดการหมี�กไวันื่� แลิะสามีารถเปลิ%�ยนื่นื่"�า ตาลิจากผลิอง� �นื่ให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ� ได�มี%การศ'กษาจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ท้%�เก%�ยวัข�องก�บ้การหมี�กไวันื่�เร��อยมีาการหมี�กข�าวัหมีากโดยย%สต�ท้"าหนื่�าท้%�ในื่การเปลิ%�ยนื่ข�าวัให�เป,นื่นื่"�าตาลิแลิะเก�ดแอลิกอฮอลิ�ข'�นื่ในื่กระบ้วันื่การเก�ดแอลิกอฮอลิ�ไมี�จ"าเป,นื่ต�องใชุ�อากาศในื่ก ร ะ บ้ วั นื่ ก า ร ท้"า ใ ห� ส า มี า ร ถ ห มี� ก ภ า ชุ นื่ ะ ป9 ด ไ ด� แ ต� จ ะ เ ก� ด ก: า ซึ่คาร�บ้อนื่ไดออกไซึ่ด�ท้"าให�ต�องมี%ชุ�องเป9ดส"าหร�บ้ให�เก�ดการระบ้ายของอากาศในื่กระบ้วันื่การผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ป;จจ�ยท้%�มี%ควัามีส"าค�ญค�อลิ*กแป6งซึ่'�งเป,นื่ท้%�ท้ราบ้ก�นื่ด%ในื่การผลิ�ตสาโท้ หร�อส�รากลิ��นื่ต�องใชุ�ลิ*กแป6งผสมีก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัเพื้��อให�เก�ดการหมี�กนื่��นื่เป,นื่ส*ตรท้%�ผลิ�ตข'�นื่แลิะถ�ายท้อดก�นื่มีาในื่ครอบ้คร�วั

Page 2: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

2

แลิะมี�กจะป9ดเป,นื่ควัามีลิ�บ้การใชุ�ลิ*กแป6งแต�ลิะแห�งจะแตกต�างก�นื่ไปบ้างแห�งก1จะมี%การป;� นื่ลิ*กแป6งใชุ�เอง โดยมี%ส*ตรการท้"าลิ*กแป6งท้%�ตกท้อดมีาจากป*<ย�าตายายซึ่'�งถ�อวั�าเป,นื่สมีบ้�ต�ของตระก*ลิ การใชุ�ลิ*กแป6งในื่การหมี�กข�าวัหมีากจ'งส�งผลิต�อรสชุาต�แลิะค�ณ์ภาพื้ของเอท้านื่อลิของผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�นื่��นื่ๆโดยเฉพื้าะรสชุาต�ท้%�ได�จ'งก*ลิไมี�ยอมีถ�ายท้อดให�ใคร ท้"าให�ค�ณ์ภาพื้ของการผลิ�ตสาโท้แต�ลิะแห�งมี%ควัามีแตกต�างก�นื่ จากการท้%�มี%การผลิ�ตลิ*กแป6งท้'�มี%ควัามีหลิากหลิายท้"าให�เอท้านื่อลิท้%�ได�มี%ค�าปร�มีาตรท้%�ต�างก�นื่ การท้"าวั�จ�ยในื่การวั�ดปร�มีาตรของเอท้านื่อลิจ'งเก�ดข'�นื่เพื้��อศ'กษาเปร%ยบ้เท้%ยบ้ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิท้%�ได�จากการหมี�ก จากควัามีแตกต�างของการผลิ�ตลิ*กแป6งของแต�ลิะท้�องถ��นื่ การเลิ�อกใชุ�ลิ*กแป6งก1เป,นื่ส�วันื่ส"าค�ญเนื่��องจากลิ*กแป6งท้%�ด%ต�องมี%การร�กษาควัามีสะอาด ควับ้ค�มีอ�ณ์หภ*มี� แลิะควัามีชุ��นื่ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6ง นื่อกจากนื่%�ระยะเวัลิาท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กข�าวัหมีากย�งมี%ควัามีแตกต�างก�นื่บ้างท้�องถ��นื่อาจใชุ�ระยะเวัลิาท้%�ส� �นื่บ้างท้�องถ��นื่อาจใชุ�ระยะเวัลิาท้%�นื่านื่ในื่การหมี�กท้"าให�กลิ��นื่แลิะปร�มีาตรของเอท้านื่อลิแตกต�างก�นื่ออกไป ก�อให�เก�ดควัามีหลิากหลิายของผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�ท้%�ได�จากกระบ้วันื่การผลิ�ตเอท้านื่อลิหากก"าลิ�งในื่การผลิ�ตย�งเพื้��มีข'�นื่แลิะไมี�มี%การควับ้ค�มีค�ณ์ภาพื้จากการผลิ�ต ผลิเส%ยจะเก�ดก�บ้ผ*�บ้ร�โภคโดยตรงท้��งนื่%�เนื่��องจากหากร�างกายได�ร�บ้ปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�มีากเก�นื่ไปอาจท้"าให�เก�ดโรคต�างๆได� แลิะบ้างท้�องถ��นื่อาจจะใส�สารท้%�เป,นื่อ�นื่ตรายบ้างชุนื่�ดในื่กระบ้วันื่การผลิ�ตอาจท้"าให�เก�ดการสะสมีในื่ร�างกายของผ*�บ้ร�โภคแลิะท้"าให�เก�ดโรคต�างๆข'�นื่ได� การควับ้ค�มีระบ้บ้กระบ้วันื่การในื่การผลิ�ตท้��งต�วัของลิ*กแป6งแลิะระยะเวัลิาท้%�ใชุ�ในื่การหมี�ก การกลิ��นื่ท้%�ท้"าให�ได�รสชุาต�ท้%�พื้'งพื้อใจแลิะอ�ปกรณ์�ท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กแลิะกลิ��นื่จะต�องผ�านื่การฆ่�าเชุ��อหร�อไมี�มี%การเจ�อปนื่ของสารเคมี% ไมี�ก�อให�เก�ดพื้�ษก1จะท้"าให�ได�ผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�ท้%�มี%ค�ณ์ภาพื้ ซึ่'�งการกลิ��นื่เอท้านื่อลิก1เป,นื่ส�วันื่ส"าค�ญวั�าผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�ท้%� ได�จะมี%ค�ณ์ภาพื้หร�อไมี� การใชุ�วั�ธุ%การกลิ��นื่ลิ"า ด�บ้ส�วันื่ (fractional distillation) เป,นื่วั�ธุ%การแยกของเหลิวัท้%�สามีารถระเหยได�ต��งแต� 2 ชุนื่�ดข'�นื่ไป เพื้��อต�องการแยกองค�ประกอบ้ในื่สารลิะลิายออกจากก�นื่ แต�ก1จะมี%ส�วันื่ท้%�แตกต�างจากการกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา ค�อ การกลิ��นื่แบ้บ้

Page 3: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

3

กลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่เหมีาะส"าหร�บ้ใชุ�กลิ��นื่ของเหลิวัท้%�เป,นื่องค�ประกอบ้ของสารลิะลิายท้%�จ�ดเด�อดต�างก�นื่นื่�อย ๆ ในื่ข��นื่ตอนื่ของกระบ้วันื่การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่จะเป,นื่การ นื่"า ไอของแต�ลิะส�วันื่ไปควับ้แนื่�นื่ แลิ�วันื่"า ไปกลิ��นื่ซึ่"�าแลิะควับ้แนื่�นื่ไอเร��อย ๆ ซึ่'�งสอดคลิ�องก�บ้กระบ้วันื่การในื่การกลิ��นื่เอท้านื่อลิของชุาวับ้�านื่หร�อเร%ยกวั�า การต�มีเหลิ�าท้"าให�ได�เอท้านื่อลิจากกระบ้วันื่การนื่%� ท้��งนื่%�เอท้านื่อลิท้%�ได�จากการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่จะถ*กวั�ดวั�าลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กข�าวัหมีากมี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิอย*�เท้�าใด ส*ตรใดเหมีาะแก�การนื่"าไปผลิ�ตเป,นื่ผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�ต�อไป เนื่�� องจากการผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่เป,นื่ภ*มี�ป;ญญาท้%�ส� �งสมีมีาแต�บ้รรพื้บ้�ร�ษท้%�มี%การค�ดค�นื่ส*ตรของลิ*กแป6ง กระบ้วันื่การหมี�ก ระยะเวัลิาท้%�ใชุ�ในื่การหมี�ก ให�เหมีาะแก�การบ้ร�โภคแลิะเก�ดโท้ษต�อร�างกายนื่�อยท้%�ส�ดซึ่'�งนื่"ามีาประย�กต�ใชุ�ในื่กระบ้วันื่การวั�จ�ยเพื้��อหาปร�มีาตรของเอท้านื่อลิแต�ลิะส*ตรท้%�ได�จากการหมี�กแลิะกลิ��นื่แบ้บ้เด%ยวัก�นื่ การควับ้ค�มีเวัลิา ระยะเวัลิา อ�ณ์หภ*มี� ท้%�เป,นื่มีาตรฐานื่เด%ยวัก�นื่ ผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�ท้%�ได�จ'งมี%ควัามีเป,นื่มีาตรฐานื่เด%ยวัก�นื่แลิะสามีารถท้%�จะวั�ดค�าต�างๆได�อย�างถ*กต�อง

ด�งนื่��นื่การศ'กษาประส�ท้ธุ�ภาพื้ในื่การเก�ดเอท้านื่อลิโดยอาศ�ยลิ*กแป6งส"าหร�บ้การหมี�กในื่แต�ลิะส*ตรภายใต�เง��อนื่ไขในื่สภาพื้แวัดลิ�อมีเด%ยวัก�นื่ ค�อ อ�ณ์หภ*มี� แลิะระยะเวัลิาในื่การหมี�ก มี%ผลิต�อประส�ท้ธุ�ภาพื้ในื่การหมี�กจ'งเป,นื่ส��งท้%�นื่�าสนื่ใจในื่การศ'กษา

ว�ตถุ�ป็ระสำงค�ก�รว จั�ย

1. เพื้��อศ'กษาเปร%ยบ้เท้%ยบ้ส*ตรลิ*กแป6งท้%�มี%ผลิต�อการผลิ�ตเอท้านื่อลิจากข�าวัเหนื่%ยวั

นำ ย�มศั�พท�เฉพ�ะ

นื่�ยามีศ�พื้ท้�เฉพื้าะ (Operational Definition)

Page 4: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

4

ประส�ท้ธุ�ภาพื้ หมีายถ'ง ส*ตรของลิ*กแป6งท้%�นื่"ามีาหมี�กต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�ได� กระบ้วันื่การหมี�ก หมีายถ'ง การนื่"าข�าวัเหนื่%ยวัพื้�นื่ธุ� กข 6. ท้%�ได�จากบ้�านื่ท้��งตอนื่ มีานื่'�งแลิ�วัท้"าการหมี�กในื่ถ�งป9ดให�สนื่�ท้

ปร�มีาณ์เอท้านื่อลิ หมีายถ'งสารท้%�ได�จากกระบ้วันื่การหมี�กโดยการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่มี%หนื่�วัยเป,นื่ลิ*กบ้าศก�เซึ่นื่ต�เมีตร

เ ค ร�� อ ง วั� ด แ อ ลิ ก อ ฮ อ ลิ� มี� เ ต อ ร� ห มี า ย ถ' ง เ ป, นื่ ก า ร วั� ด ค� าควัามีถ�วังจ"าเพื้าะของ นื่"�า - แอลิกอฮอลิ�

ท้%�ลิะลิายปนื่ก�นื่อย*� จ'งต�องกลิ��นื่แยกเอานื่"�าแลิะแอลิกอฮอลิ�แลิ�วัแปลิงค�าออกมีาเป,นื่ด%กร%

ลิ*กแป6ง หมีายถ'ง ลิ*กแป6งท้%�เป,นื่ห�วัเชุ��อส"าหร�บ้การหมี�กท้%�ได�จากแหลิ�งต�างๆ ในื่จ�งหวั�ดลิ"าปาง

ค��สำ��ค�ญ

การหมี�ก เอท้านื่อลิ

การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่

ข&อจั��ก�ดของก�รท��ว จั�ย

- อาย� สายพื้�นื่ธุ��แลิะปร�มีาณ์ของข�าวัเหนื่%ยวัท้%�นื่"ามีาใชุ�ในื่การหมี�ก- ระยะเวัลิาในื่การผลิ�ต

Page 5: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

5

- การควับ้ค�บ้อ�ณ์หภ*มี�ในื่ขณ์ะท้%�กลิ��นื่

ป็ระโยชนำ�ท��ค�ดว*�จัะได&ร�บจั�กก�รว จั�ย - สามีารถนื่"าลิ*กแป6งท้%�มี%ประส�ท้ธุ�ภาพื้ในื่การหมี�กไปประย�กต�ใชุ�ก�บ้

วั�ตถ�ด�บ้อ��นื่ เชุ�นื่ ส�บ้ปะรด ลิ"าไย เป,นื่ต�นื่ เพื้��อเก�ดผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�จากเอท้านื่อลิท้%�แตกต�างก�นื่ - สามีารถระบ้�ได�วั�าส*ตรของลิ*กแป6งส�ตรใดเหมีาะแก�การผลิ�ตเอท้านื่อลิ

บ ท ท�� 2 เ อ ก สำ � ร แ ล ะ ง � นำ ว จั� ย ท��เก��ยวข&อง

ภู-ม ป็�ญญ�ท&องถุ �นำของง�นำว จั�ย

Page 6: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

6

เนื่��องจากการผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่เป,นื่ภ*มี�ป;ญญาท้%�ส�บ้ต�อก�นื่มีาต��งแต�อด%ตจนื่ถ'งป;จจ�บ้�นื่แลิะได�ร�บ้การพื้�ฒนื่ามีาเร��อยๆจนื่ในื่ขณ์ะนื่%�การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่เป,นื่อ�ตสาหกรรมีท้%�ถ*กต�องตามีกฎหมีาย ลิ*กแป6งเป,นื่ป;จจ�ยส"าค�ญท้%�ท้"าให�กระบ้วันื่การการผลิ�ตส�ราประสบ้ผลิส"าเร1จเพื้ราะเป,นื่ต�วัย�อยสลิายแป6งให�เป,นื่นื่"�าตาลิแลิะเปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิเป,นื่เอท้านื่อลิ ลิ*กแป6งจ'งเป,นื่ต�วัก"าหนื่ดปร�มีาณ์แลิะรสชุาต�ของส�ราจ'งท้"าให�ส�ราพื้��นื่บ้�านื่ของแต�ลิะท้�องถ��นื่มี%ปร�มีาณ์แลิะรสชุาต�ท้%�แตกต�างก�นื่ออกไป ซึ่'�งในื่แต�ลิะท้�องถ��นื่มี%วั�ธุ%การ แลิะเคลิ1ดลิ�บ้ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6งแตกต�างก�นื่ออกไปท้"าให�ส�ราพื้��นื่บ้�านื่ท้%�ผลิ�ตจากท้�องถ��นื่นื่��นื่ๆมี%เอกลิ�กษณ์�เฉพื้าะต�วั การแสวังหาลิ*กแป6งท้%�ด%มี%ค�ณ์ภาพื้เพื้��อนื่"ามีาผลิ�ตเป,นื่ส�ราพื้��นื่บ้�านื่จ'งเป,นื่ป;จจ�ยส"าค�ญท้%�ท้"าให�การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่ของแต�ลิะอย��ได�ในื่ส�งคมีป;จจ�บ้�นื่

แนำวค ด หล�กก�ร และทฤษฎี�

ส�ราหร�อสาโท้ต�างก1ใชุ�วั�ตถ�ด�บ้หลิ�กท้%�มี%แป6งเป,นื่องค�ประกอบ้หลิ�ก เนื่��องจากการหมี�กต�องท้"าให�เก�ดกระบ้วันื่การเปลิ%�ยนื่จากแป6งให�เป,นื่นื่"�าตาลิก�อนื่ซึ่'�งข��นื่ตอนื่ด�งกลิ�าวัจะเป,นื่กระบ้วันื่การท้"างานื่ของจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�จากลิ*กแป6งจะย�อยแป6งในื่ข�าวัให�กลิายเป,นื่นื่"�าตาลิแลิะในื่พื้ร�อมีก�นื่นื่��นื่จะสร�างกรดท้"าในื่ในื่กระบ้วันื่การมี%สภาพื้เป,นื่กรดเลิ1กนื่�อย ซึ่'�งกรดด�งกลิ�าวัจะไปย�บ้ย��งไมี�ให�ข�าวับ้*ด เมี��อได�นื่"�าตาลิจะท้"าให�ย%สต�ท้"าหนื่�าท้%�เปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ�แลิะเก�ดกลิ��นื่พื้ร�อมีๆก�นื่ ลิ*กแป6ง เป,นื่กลิ�าเชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ท้%�เก1บ้ไวั�ในื่ร*ปก�อนื่หร�อก�อนื่เชุ��อแห�ง คนื่ในื่อด%ตได�ศ'กษาแลิะค�ดเลิ�อกจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� ในื่ธุรรมีชุาต�เพื้��อมีาใชุ�ในื่ร*ปของลิ*กแป6งเพื้��อใชุ�การผลิ�ตอาหารหมี�กดองหลิายชุนื่�ด ลิ*กแป6งมี%ชุ��อหลิากหลิายตามีท้�องถ��นื่ต�างๆ ลิ*กแป6งมี%หลิายชุนื่�ดเชุ�นื่ ลิ*กแป6งเหลิ�า ลิ*กแป6งข�าวัหมีาก ลิ*กแป6งนื่"�าส�มีสายชุ* ลิ*กแป6งขนื่มีถ�วัยฟู* ซึ่'�งกรรมีวั�ธุ%ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6งจะปกป9ดไวั�ส"าหร�บ้ถ�ายท้อดให�ก�บ้ท้ายาท้หร�อสมีาชุ�กท้%�

Page 7: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

7

สนื่�ท้สนื่มีก�นื่เท้�านื่��นื่ท้"าให�ลิ*กแป6งแต�ลิะท้�องถ��นื่จะมี%ลิ�กษณ์ะแลิะชุนื่�ดของจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� (ย%สต�) ท้%�แตกต�างก�นื่ออกไปหร�อลิ�กษณ์ะท้างกายภาพื้เชุ�นื่ ขนื่าด ส% นื่"�าหนื่�ก กลิ��นื่ของลิ*กแป6งท้%�แตกต�างก�นื่ออกไปแต�พื้��นื่ท้%� ลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กส�ราท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กส�ราจะมี%กระบ้วันื่การท้"า กรรมีวั�ธุ%การท้"าลิ*กแป6งจะคลิ�ายคลิ'งก�นื่ในื่ข��นื่ตอนื่การท้"าแต�จะแตกต�างก�นื่ในื่ส�วันื่ของรายลิะเอ%ยดของส*ตร โดยข��นื่ตอนื่ในื่การท้"ามี%ด�งนื่%�

1. นื่"าข�าวัเหนื่%ยวัหร�อข�าวัเจ�ามีาซึ่าวันื่"�าให�สะอาด แชุ�นื่"�าให�อ�อนื่นื่��มี 2 -

3 ชุ��วัโมีง นื่"าข'�นื่มีาท้"าให�สะเด1ดโดยใส�ตะแกรงวัางไวั�ให�นื่"�าหยดผ�านื่ไปได� จากนื่��นื่นื่"าไปบ้ดให�ลิะเอ%ยด โดยใชุ�การโมี�ด�วัยเคร��องหร�อต"าด�วัยครก เสร1จแลิ�วัให�นื่"าแป6งข'�นื่มีาห�อด�วัยผ�าวัางท้�บ้ด�วัยของหนื่�กจนื่นื่"�าแห�ง แลิ�วันื่"ามีาร�อนื่ด�วัยกระชุอนื่

2. บ้ดสมี�นื่ไพื้รให�ลิะเอ%ยดจนื่สามีารถร�อนื่ผ�านื่กระชุอนื่ได� ถ�าไมี�ผ�านื่ก1ให�นื่"ากลิ�บ้ไปบ้ดใหมี� แลิ�วัชุ��งให�ได�นื่"�าหนื่�กตามีท้%�ต�องการ

3. บ้ดลิ*กแป6งเก�าให�ลิะเอ%ยด4. นื่"าส�วันื่ผสมีท้��งสามีอย�างมีารวัมีก�นื่ ค�อ แป6งข�าวัเหนื่%ยวัหร�อข�าวั

เจ�า สมี�นื่ไพื้ร แลิะลิ*กแป6งเก�า คลิ�กเคลิ�าให�เข�าก�นื่5. นื่วัดแป6งเพื้��อท้%�จะป;� นื่แป6งลิ*กแป6ง โดยการค�อยพื้รมีนื่"�าฝนื่หร�อนื่"�า

สะอาดลิงไปพื้ร�อมีก�บ้นื่วัดแป6งไปด�วัยจนื่แป6งเหนื่%ยวัพื้อด%ท้%�จะป;� นื่เป,นื่ก�อนื่ได�ให�หย�ดพื้รมีนื่"�า

6. ป;� นื่เป,นื่ลิ*กแป6งกลิมีๆ นื่"าไปวัางไวั�ในื่ภาชุนื่ะท้%�สะอาดแลิ�วัคลิ�มีด�วัยผ�าบ้าง 2 ชุ��นื่เพื้��อให�เก�ดการอบ้ บ้�มีไวั� 2-3 วั�นื่ ลิ*กแป6งจะมี%ส%ขาวัเก�ดข'�นื่ จากนื่นื่��นื่นื่"าไปตากแดดให�แห�งสนื่�ท้ อย�าให�ถ*กควัามีชุ��นื่หร�อควัามีร�อนื่ จะเก1บ้ไวั�ได�นื่านื่ 6 เด�อนื่

Page 8: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

8

ขนื่าดของลิ*กแป6งแต�ลิะแหลิ�งจะมี%ลิ�กษณ์ะท้%�แตกต�างก�นื่ จะมี%ขนื่าดต��งแต� 1.5 – 5.0 เซึ่นื่ต�เมีตร ในื่การหมี�กแอลิกอฮอลิ� โดยปกต�จะใชุ�ลิ*กแป6งหนื่�กประมีาณ์ 2-5 กร�มีต�อข�าวัเหนื่%ยวัหร�อวั�ตถ�ด�บ้อ��นื่ๆ 1 ก�โลิกร�มี แต�ถ�าต�องการให�ได�ปร�มีาณ์แอลิกอฮอลิ�ท้%�ส*งข'�นื่ก1สามีารถเพื้��มีปร�มีาณ์ลิ*กแป6งให�ส*งข'�นื่ ก1จะท้"าให�ได�มี%กลิ��นื่รสของเคร��องเท้ศมีากข'�นื่ตามีไปด�วัย

2.1.1 ส*ตรลิ*กแป6ง

มี%การเผยแพื้ร�ส*ตรการท้"าลิ*กแป6งหลิายแห�ง ซึ่'�งส*ตรท้%�แสดงเป,นื่ต�วัอย�างเป,นื่ส*ตรท้%�สถาบ้�นื่วั�จ�ยไวันื่�แลิะส�ราพื้��นื่บ้�านื่ใชุ�จ�ดอบ้รมีหลิ�กส*ตรการผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่ ได�แบ้�งอ�ตราส�วันื่ของส�วันื่ผสมีเพื้��อให�สามีารถสร�างเป,นื่ลิ*กแป6ง ด�งมี%องค�ประกอบ้ด�งนื่%�

1. แป6งข�าวัเจ�าหร�อแป6งข�าวัเหนื่%ยวั ควัรใชุ�แป6งสดท้%�เตร%ยมีใหมี�ๆ แลิะบ้ดแป6งใชุ�แป6งคร��งๆไป ไมี�นื่�ยมีใชุ�แป6งส"าเร1จ เพื้��อลิดการปนื่เปE� อนื่ของจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�แลิะหลิ%กเลิ%�ยงกรดโพื้รพื้�โอนื่�กท้%�เป,นื่สารย�บ้ย��งเชุ��อรา ซึ่'�งมี�กใส�ลิงในื่แป6งส"าเร1จ

2. เคร��องเท้ศหร�อสมี�นื่ไพื้ร จะท้"าหนื่�าท้%�ค�ดเลิ�อกเชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ในื่ธุรรมีชุาต�ท้%�เราต�องการแลิะควับ้ค�มีย�บ้ย��งจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ต�วัอ��นื่ๆ ท้%�เราไมี�ต�องการ ท้��งชุนื่�ดแลิะปร�มีาณ์การใชุ�เคร��องเท้ศข'�นื่อย*�ก�บ้แต�ลิะส*ตร

3. นื่"�า มี%ควัามีส"าค�ญมีากในื่การควับ้ค�มีควัามีชุ��นื่ของลิ*กแป6ง ผ*�ต�องการจะใส�ให�เหมีาะ ไมี�แฉะจนื่เก�นื่ไปซึ่'�งจะท้"า ให�ลิ*กแป6งเหมี1นื่เปร%�ยวัแลิะเส%ยได� หร�อแห�งจนื่เก�นื่ไปจนื่ท้"า ให�ลิ*กแป6งแตกหร�อราเจร�ญในื่ลิ*กแป6งไมี�ด% นื่อกจากนื่%�ควัามีชุ��นื่ท้%�พื้อเหมีาะย�งมี%ผลิต�อการ

Page 9: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

9

เก1บ้ร�กษาจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ในื่ลิ*กแป6งให�อย*�นื่านื่อย�างมี%ประส�ท้ธุ�ภาพื้อ%กด�วัย ควัามีชุ��นื่ท้%�พื้อเหมีาะ ส"าหร�บ้ท้"าลิ*กแป6งอย*�ประมีาณ์ 45%

4. เชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� จะได�จากลิ*กแป6งเด�มี ต�องเป,นื่ลิ*กแป6งท้%�ไมี�เก1บ้ไวั�นื่านื่จนื่เก�นื่ไปหร�อถ*กมีอดก�นื่ แลิะไมี�มี%เชุ�� อราอ�� นื่ปนื่เปE� อนื่อย*�ภายนื่อกจนื่เห1นื่ได�ชุ�ด

5. อ��นื่ ๆ เชุ�นื่ บ้างแห�งอาจใส�ร"าหยาบ้หร�อแกลิบ้ ใส�เพื้��อให�ลิ*กแป6งโปร�งมี%อากาศเข�าได�มีากท้"าให�จ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ส"าค�ญสามีารถเจร�ญได�ด%

ต�วัอย�างส*ตรลิ*กแป6ง

แป6งข�าวัเจ�า 400 กร�มี

กระเท้%ยมี 6 กร�มี

ข�ง 6 กร�มี

ข�า 6 กร�มี

ชุะเอมี 6 กร�มี

พื้ร�กไท้ย 6 กร�มี

ด%ปลิ% 2 กร�มี

2.2 เชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ท้%�เก%�ยวัข�องก�บ้การหมี�ก

2.2.1 จ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ในื่ลิ*กแป6ง

ลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กแอลิกอฮอลิ�(ส�รา) มี%เชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�อย*� แลิะเป,นื่จ�ลิ�นื่ท้ร%ย�พื้าะเนื่��องจากเคร��องเท้ศท้%�ใส�เข�าไป มี%ฤท้ธุ�Gย�บ้ย��งการเจร�ญเต�บ้โตของจ�นื่ท้ร%ย�ชุนื่�ดอ��นื่ๆ ท้%�ไมี�ต�องการ ซึ่'�งจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ท้%�พื้บ้มีากในื่ลิ*กแป6งจะมี%ท้��งราแลิะย%สต� ซึ่'�งราท้%�พื้บ้มีากอย*�ในื่ตระก*ลิ Amylomyces sp. จะพื้บ้ในื่ลิ*ก

Page 10: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

10

แป6งข�าวัหมีากมีากกวั�าลิ*กแป6งเหลิ�า รองลิงมีาค�อตระก*ลิ Aspergillus

sp. ส�วันื่ Rhizopus sp. จะพื้บ้ในื่ลิ*กแป6งเหลิ�ามีากกวั�าลิ*กแป6งลิ*กหมีาก อ%กท้��งย�งพื้บ้ตระก*ลิ Mucor แลิะพื้บ้ในื่ตระก*ลิ Saccharomycopsis

sp. แลิะ Pichia sp. พื้บ้มีากในื่ลิ*กหมีาก ส�วันื่ Saccharomyces sp.

พื้บ้มีากในื่ลิ*กแป6งเหลิ�า โดยราจะท้"าหนื่�าท้%�หลิ�กในื่การย�อยแป6งให�เป,นื่นื่"�าตาลิ ย%สต�ท้"าหนื่�าท้%�หลิ�กในื่การเปH� ยนื่นื่"�าตาลิให�เป,นื่อแลิกอฮอลิ�ลิ*กแป6งแต�ลิะชุนื่�ดจะมี%สมี�นื่ไพื้รแลิะเคร��องเท้ศท้%�เป,นื่ต�วัควับ้ค�มีเชุ��อย%สต�หร�อเชุ��อราให�ได�ตามีท้%�ต�องการ นื่อกจากนื่��นื่ย�งผลิ�ตกลิ��นื่รสของเคร��องด��มี ท้"าให�กลิ��นื่ชุวันื่ด��มี การเจร�ญของ%สต�ไมี�จ"าเป,นื่ต�องใชุ�อากาศในื่การหายใจ ท้"าให�การหมี�กสามีารถท้"าใ นื่ ภ า ชุ นื่ ะ ป9 ด ไ ด� แ ต� เ นื่�� อ ง จ า ก ใ นื่ ก ร ะ บ้ วั นื่ ก า ร ห มี� ก จ ะ เ ก� ด ก: า ชุคาร�บ้อนื่ไดออกไซึ่ด� ซึ่'�งเป,นื่ส��งท้%�ได�ขณ์ะเก�ดกระบ้วันื่การท้"าให�ต�องมี%ชุ�องส"าหร�บ้ระบ้ายอากายกระบ้วันื่การจะเป,นื่ไปตามีภาพื้ด�านื่ลิ�าง

ร*ปแสดงข��นื่ตอนื่การเก�ดแอลิกอฮอลิ�

2.2.2 การหมี�กแอลิกอฮอลิ�

ย%สต�จะเปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิกลิ*โคส หร�อนื่"�าตาลิกลิ*โคส หร�อนื่"�าตาลิฟูร�คโตส ให�เปลิ%�ยนื่เป,นื่แอกอฮอลิ� แลิะมี%ผลิพื้ลิอยได�เป,นื่ก:าซึ่คาร�บ้อนื่ไดออกไซึ่ด�เมี��ออย*�ระบ้บ้ป9ดผลิของปฏิ�ก�ร�ยาท้%�ได�จากย%สต� จะเป,นื่ด�งสมีการ

C6H12O6 - - - > 2 C2H5OH + 2CO2

แป6งในื่ข�าวั นื่"�าตาลิแอลิกอฮอลิ� +

คาร�บ้อนื่ไดออกไซึ่ด�

รา ย%สต�

Page 11: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

11

กรณ์%เมี��อหมี�กในื่ระบ้บ้ป9ดโดยให�อากาศเข�าส*�ภาชุนื่ะท้%�ใชุ�หมี�กจะท้"าให�ย%สต�หายใจแบ้บ้ใชุ�ออกซึ่�เจนื่ เก�ดสมีการด�งนื่%�

C6H12O6 + 6O2 - - - > 6CO2 + H2O + พล�งง�นำ

2.3 กระบ้วันื่การกลิ��นื่การกลิ��นื่ค�อกระบ้วันื่การท้%�ให�ควัามีร�อนื่แก�ของเหลิวั   เป,นื่การแยก

สารลิะสายท้%�เป,นื่ของเหลิวัออกจากของผสมี  โดยอาศ�ยหลิ�กการระเหยกลิายเป,นื่ไปแลิะควับ้แนื่�นื่  โดนื่ท้%�สารบ้ร�ส�ท้ธุ�Gแต�ลิะชุนื่�ดเปลิ%�ยนื่สถานื่ะได�ท้%�อ�ณ์หภ*มี�จ"าเพื้าะ  สารท้%�มีจ�ดเด�อดต"�าจะเด�อดเป,นื่ไอออกมีาก�อนื่  เมี��อท้"าให�ไอของสารมี%อ�ณ์หภ*มี�ต"�าลิงจะควับ้แนื่�นื่กลิ�บ้มีาเป,นื่ของเหลิวัอ%กคร��ง การกลิ��นื่มี%ด�วัยก�นื่หลิายแบ้บ้ เชุ�นื่

2.3.1 ก�รกล��นำแบบธรรมด�หร2อก�รกล��นำอย*�งง*�ย(simple distillation)

2.3.2 การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่ (fractional distillation)

2.3.3 ก�รสำก�ดโดยก�รกล��นำด&วยไอนำ�3�

2.3.1 ก�รกล��นำแบบธรรมด�หร2อก�รกล��นำอย*�งง*�ย (simple distillation)

ก�รกล��นำแบบธรรมด�หร2อก�รกล��นำอย* �งง* �ย (simple

distillation) เป,นื่วั�ธุ%การท้%�ใชุ�กลิ��นื่แยกสารท้%�ระเหยง�ายซึ่'�งปนื่อย*�ก�บ้สารท้%�ระเหยยาก การกลิ��นื่ธุรรมีดานื่%�จะใชุ�แยกสารออกเป,นื่สารบ้ร�ส�ท้ธุ�Gเพื้%ยงคร��งเ ด% ย วั ไ ด� ส า ร ท้%� มี% จ� ด เ ด� อ ดต� า ง ก� นื่ ต��งแต� 80 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ข'�นื่ไป

Page 12: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

12

หลิ�กการแลิะข��นื่ตอนื่ในื่การกลิ��นื่1. เท้ของเหลิวัท้%�จะกลิ��นื่ลิงในื่ฟูลิาสกลิ��นื่ โดยใชุ�กรวัยกรอง 2. เต�มีชุ��นื่ก�นื่เด�อดพื้ลิ��ง (ใชุ� boiling stone หร�อ boiling

chips ก1ได�) เพื้��อให�การเด�อดเป,นื่ไปอย�างสมี"�าเสมีอแลิะไมี�ร�นื่แรง 3. เส%ยบ้เท้อร�โมีมี�เตอร� 4. เป9ดนื่"�าให�ผ�านื่เข�าไปในื่คอนื่เดนื่เซึ่อร�เพื้��อให�คอนื่เดนื่เซึ่อร�

เย1นื่โดยให�นื่"�าเข�าท้างท้%�ต"�าแลิ�วัไหลิออกท้างท้%�ส*ง 5. ให�ควัามีร�อนื่แก�พื้ลิาสกลิ��นื่จนื่กระท้��งของเหลิวัเร��มีเด�อด ให�

ควัามีร�อนื่ไปเร��อย ๆ จนื่ กระท้��งอ�ตราการกลิ��นื่คงท้%� ค�อได�สารท้%�กลิ��นื่ประมีาณ์ 2-3 หยด ต�อวั�นื่าท้% ให�สารท้%�กลิ��นื่ได�นื่%�ไหลิลิงในื่ภาชุนื่ะรองร�บ้

6. การกลิ��นื่ต�องด"าเนื่�นื่ต�อไปจนื่กระท้��งเหลิ�อสารอย*�ในื่ฟูลิาสกลิ��นื่เพื้%ยงเลิ1กนื่�อยอย�ากลิ��นื่ให�แห�ง

การกลิ��นื่สามีารถนื่"ามีาใชุ�ท้ดสอบ้ควัามีบ้ร�ส�ท้ธุ�Gของของเหลิวัได� ซึ่'�งของเหลิวัท้%�บ้ร�ส�ท้ธุ�Gจะมี%ลิ�กษณ์ะด�งนื่%�

1. ส�วันื่ประกอบ้ของสารท้%�กลิ��นื่ได� จะมี%ลิ�กษณ์ะเหมี�อนื่ก�บ้ส�วันื่ประกอบ้ของของเหลิวั

2. ส�วันื่ประกอบ้จะไมี�มี%การเปลิ%�ยนื่แปลิง 3. อ�ณ์หภ*มี�ของจ�ดเด�อดในื่ขณ์ะกลิ��นื่จะคงท้%�ตลิอดเวัลิา 4. การกลิ��นื่จะท้"าให�เราท้ราบ้จ�ดเด�อดของของเหลิวับ้ร�ส�ท้ธุ�Gได�

ร*ปการกลิ��นื่อย�างง�าย

Page 13: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

13

การกลิ��นื่นื่อกจากจะนื่"ามีาใชุ�ตรวัจสอบ้ควัามีบ้ร�ส�ท้ธุ�Gของของเหลิวัแลิ�วั ย�งสามีารถใชุ�กลิ��นื่ สารลิะลิายได�อ%กด�วัย การกลิ��นื่สารลิะลิายเป,นื่กระบ้วันื่การแยกของแข1งท้%�ไมี�ระเหยออกจากต�วัท้"าลิะลิายหร�อของเหลิวัท้%�ระเหยง�าย โดยของแข1งท้%�ไมี�ระเหยหร�อต�วัลิะลิายจะอย*�ในื่ฟูลิาสกลิ��นื่ ส�วันื่ของเหลิวัท้%�ระเหยง�ายจะถ*กกลิ��นื่ออกมีา เมี��อการกลิ��นื่ด"าเนื่�นื่ไปจนื่กระท้��งอ�ณ์หภ*มี�ของการกลิ��นื่คงท้%�แสดงวั�าสารท้%�เหลิ�อนื่��นื่เป,นื่สารบ้ร�ส�ท้ธุ�G

2.3.2 การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่ (fractional distillation)

การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่เป,นื่วั�ธุ%การแยกของเหลิวัท้%�สามีารถระเหยได�ต��งแต� 2 ชุนื่�ดข'�นื่ไป มี% หลิ�กการเชุ�นื่เด%ยวัก�นื่ก�บ้การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา ค�อเพื้��อต�องการแยกองค�ประกอบ้ในื่สารลิะลิายให�ออกจากก�นื่ แต�ก1จะมี%ส�วันื่ท้%�แตกต�างจากการกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา ค�อ การกลิ��นื่แบ้บ้กลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่เหมีาะส"าหร�บ้ใชุ�กลิ��นื่ของเหลิวัท้%�เป,นื่องค�ประกอบ้ของสารลิะลิาย ท้%�จ�ดเด�อดต�างก� นื่ นื่� อ ย ๆ ใ นื่ ข�� นื่ ต อ นื่ ข อ ง ก ร ะ บ้ วั นื่ ก า ร ก ลิ�� นื่ ลิ"า ด� บ้ ส� วั นื่ จะเป,นื่การ นื่"าไอของแต�ลิะส�วันื่ไปควับ้แนื่�นื่ แลิ�วันื่"าไปกลิ��นื่ซึ่"�าแลิะควับ้แนื่�นื่ไอเร��อย ๆ ซึ่'�งเท้%ยบ้ได�ก�บ้เป,นื่การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดาหลิาย ๆ คร��งนื่��นื่เอง ควัามีแตกต�างของการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่ก�บ้การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา จะอย*�ท้%�คอลิ�มีนื่� โดยคอลิ�มีนื่�ของการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่จะมี%ลิ�กษณ์ะเป,นื่ชุ��นื่ซึ่�บ้ซึ่�อนื่ เป,นื่ชุ��นื่ๆ ในื่ขณ์ะท้%�คอลิ�มีนื่�แบ้บ้ธุรรมีดาจะเป,นื่คอลิ�มีนื่�ธุรรมีดา ไมี�มี%ควัามีซึ่�บ้ซึ่�อนื่ของคอลิ�มีนื่�

Page 14: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

ร-ป็ก�รกล�3นำล��ด�บสำ*วนำ

14

2.3.3 การกลิ��นื่ด�วัยไอนื่"�า

การสก�ดโดยการกลิ��นื่ด�วัยไอนื่"�าเป,นื่วั�ธุ%การสก�ดสารออกจากของผสมี โดยใชุ�ไอนื่"�าเป,นื่ต�วัท้"าลิะลิาย วั�ธุ%นื่%�ใชุ�ส"าหร�บ้แยกสารท้%�ลิะเหยง�ายไมี�ลิะลิายนื่"�าแลิะไมี�ท้"าปฏิ�ก�ร�ยาก�บ้นื่"�าออกจากสารท้%�ระเหยยาก การสก�ดโดยการกลิ��นื่ด�วัยไอนื่"�านื่อกจากใชุ�สก�ดสารระเหยง�ายออกจาก สารระเหยยากแลิ�วัย�งสามีารถใชุ�แยกสารท้%�มี%จ�ดเด�อดส*งแลิะสลิายต�วัท้%�จ�ดเด�อดของมี�นื่ได�อ%ก เพื้ราะการกลิ��นื่โดยวั�ธุ%นื่%�ควัามีด�นื่ไอเป,นื่ควัามีด�นื่ไอของไอนื่"�าบ้วักควัามีด�นื่ไอของของเหลิวัท้%�ต�องการแยกจ'งท้"า ให�ควัามีด�นื่ไอเท้�าก�บ้ควัามีด�นื่ของบ้ ร ร ย า ก า ศ ก� อ นื่ ท้%� อ� ณ์ ห ภ* มี� จ ะ ถ' ง จ� ด เ ด� อ ดของของเหลิวัท้%�ต�องการแยกของ ผสมีจ'งกลิ��นื่ออกมีาท้%�อ�ณ์หภ*มี�ต"�ากวั�าจ�ดเด�อดของของเหลิวัท้%�ต�องการ

2.4การกลิ��นื่ส�ราพื้��นื่บ้�านื่

ส"าหร�บ้การกลิ��นื่ส�ราจะใชุ�วั�ธุ%การกลิ��นื่อย�างง�าย โดยจะอาศ�ยการแยกสารต��งแต� 2 ชุนื่�ดท้%�อย*�ในื่ของผสมีออกจากก�นื่ โดยอาศ�ยหลิ�กควัามีแตกต�างของจ�ดเด�อด แลิะหลิ�กการแลิกเปลิ%�ยนื่มีวัลิสารระหวั�างสองสถานื่ะ ค�อสถานื่ะของเหลิวั ก�บ้ สถานื่ะไอ สาหร�บ้การกลิ��นื่ส�รา ของผสมีนื่��นื่ค�อนื่"�าส�าท้%�

Page 15: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

15

มี%นื่"�าผสมีอย*�ก�บ้แอลิกอฮอลิ�แลิะสารอ��นื่ๆ เชุ�นื่เมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ� แลิะฟู*เซึ่ลิออยลิ� นื่"�าบ้ร�ส�ท้ธุ�Gมี%จ�ดเด�อดท้%� 100 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส แอลิกอฮอลิ�มี%จ�ดเด�อดท้%� 78.3 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส แต�นื่"�าผสมีก�บ้แอลิกอฮอลิ� จะมี%จ�ดเด�อดต"�ากวั�านื่"�าเด�อด แต�ส*งกวั�าแอลิกอฮอลิ� ถ�ามี%นื่"�าส�าท้%�มี%แอลิกอฮอลิ� 10% จะมี%จ�ดเด�อดท้%� 93 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ถ�าได�ไอท้%�อ�ณ์หภ*มี�ด�งกลิ�าวัจะท้"าให�ได�แอกอฮอลิ�ท้%�มี%ควัามีเข�มีข�นื่ท้%� 55% เมี��อนื่"ามีาควับ้แนื่�นื่อ%กคร��งจะท้"าให�ได�แอลิกอฮอลิ�ท้%�มี%ควัามีเข�มีข�นื่ส*งมีากข'�นื่โดยจะเพื้��มีเป,นื่ 82 % ซึ่'�งการกลิ��นื่ไมี�จ"าเป,นื่ในื่การนื่"�ามีากลิ��นื่หลิายคร��ง โดยสามีารถท้"าการกลิ��นื่ได�ในื่คร��งเด%ยวัโดยการใชุ�หอกลิ��นื่ ซึ่'�งสารท้%�มี%จ�ดเด�อดต"�าจะแยกออกมีาก�อนื่ตามีควัามีสามีารถในื่การระเหย ท้"าให�สารท้%�ระเหยง�ายจะออกมีาจกหอกลิ��นื่ก�อนื่ ส�วันื่สารท้%�มี%การจ�ดเด�อดส*งจะออกมีาท้%หลิ�ง ซึ่'�งในื่การกลิ��นื่นื่��นื่จะมี%สารท้%�เป,นื่พื้�ษออกมีาพื้ร�อมีๆ ก�นื่ โดยเมี��อให�ควัามีร�อนื่เพื้��มีมีากข'�นื่ สามีารถแยกส�วันื่ส"าหร�บ้การควับ้แนื่�นื่ แยกออกเป,นื่ส�วันื่ห�วั ส�วันื่กลิาง แลิะส�วันื่ห�าง ซึ่'�งในื่การแยกจะมี%ประโยชุนื่�เนื่��องจากสารบ้างต�วัมี%อ�นื่ตรายเราสามีารถแยกการควับ้แนื่�นื่ได� เชุ�นื่ ส�วันื่ห�วัเป,นื่ส�วันื่ท้%�ควัามีร�อนื่ไมี�เก�นื่ประมีาณ์ 78 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส จะมี%เมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ�ออกมีา เป,นื่สารท้%�มี%พื้�ษท้"าให�เก�ดอาการตาบ้อดได� หากได�ร�บ้ในื่ปร�มีาณ์มีากๆ จะท้"าให�เส%ยชุ%วั�ตได� ซึ่'�งส�ราท้%�กลิ��นื่จากนื่"�าตาลิหร�อข�าวัจะมี%ปร�มีาณ์เมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ�ออกมีานื่�อย จะไมี�ค�อยมี%ป;ญหาของการเจ�อปนื่ด�วัยเมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ�มีากนื่�ก ส�วันื่ใหญ�จะพื้บ้เมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ�ในื่การกลิ��นื่ท้%�ได�จากผลิไมี�ท้%�ย�ดหย��นื่ เชุ�นื่ สตอรอเบ้อร%� อง� �นื่ เมี��ออ�ณ์หภ*มี�เพื้��มีมีากข'�นื่อ%กจะเป,นื่ส�วันื่กลิางเป,นื่แอลิกอฮอลิ�ท้%�ต�องการซึ่'�งอ�ณ์หภ*มี�จะอย*�ระหวั�าง 78 –

85 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ซึ่'�งจะระด�บ้อ�ณ์หภ*มี�ด�งกลิ�าวัให�นื่านื่ เมี��ออ�ณ์หภ*มี�เร��มีมีากเก�นื่ 90 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส จะเป,นื่ชุ�วังท้%�เป,นื่ส�วันื่หาง โดยจะมี%นื่"�าปนื่ออกมีามีากท้"าให�ระด�บ้ด%กร%ของส�รา(แอลิกอฮอลิ�)ต"�า สามีารถท้"าให�ด%กร%เพื้��มีข'�นื่ได�โดยการนื่"ามีากลิ��นื่อ%กคร��ง

2.4.1 ชุนื่�ดของเคร��องกลิ��นื่

1.เคร2�องกล��นำแบบหม&อต&ม

Page 16: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

16

เป,นื่เคร��องกลิ��นื่ท้%�ใชุ�โดยท้��วัไปโดยหลิ�กการ ก�รกล��นำแบบธรรมด�หร2อก�รกล��นำอย*�งง* �ย (simple distillation) โดยมี%หมี�อต�มีท้"าการต�มีนื่"�าท้%�หมี�กส�ราเมี��อได�ร�บ้ควัามีร�อนื่จะท้"าให�เก�ดไอระเหยข'�นื่ ไอท้%�ได�จะถ*กส�งไปย�ง ส�วันื่ท้%�ควับ้แนื่�นื่ให�ไอท้%�ระเหยข'�นื่มีาเก�ดการควับ้แนื่�นื่เป,นื่ของเหลิวั(ส�รา)

ร*ปการกลิ��นื่ส�ราโดยใชุ�หมี�อต�มี

2.เคร2�องกล��นำแบบหอกล��นำ

เ ป, นื่ เ ค ร�� อ ง ก ลิ��นื่ ท้%� ใ ชุ� โ ด ย อ า ศ� ย ห ลิ� ก ก า ร ก า ร ก ลิ��นื่ ลิ"า ด� บ้ ส� วั นื่ (fractional distillation) ไอระเหยม�โอก�สำกล��นำหล�ยคร�3งภู�ยในำหอกล��นำจัะท��ให&สำ�ร�ท��ได&ม�คว�มบร สำ�ทธ 5ม�กข63นำและสำ�ม�รถุเล2อกช*วงท��จัะควบแนำ*นำได&

Page 17: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

17

ร*ปเคร��องกลิ��นื่แบ้บ้หอกลิ��นื่

เอกสำ�รและง�นำว จั�ยท��เก��ยวข&อง

กนื่กวัรรณ์ ท้"าการศ'กษาแนื่วัท้างในื่การท้%�จะลิดควัามีเข�มีข�นื่นื่"�าตาลิท้��งหมีดในื่ส�าส�งกลิ��นื่ท้%�ได�จากกระบ้วันื่การหมี�กแบ้บ้ก'�งกะ(2 ข��นื่ตอนื่) ให�มี%ควัามีเข�มีข�นื่นื่"�าตาลิท้��งหมีดลิดลิงต"�ากวั�า 3.5% แลิะศ'กษาผลิของควัามีเข�มีข�นื่นื่"�าตาลิท้��งหมีดรวัมีไปถ'งวั�ธุ%การป6อนื่กากนื่"�าตาลิท้%�มี%ต�อประส�ท้ธุ�ภาพื้ใ นื่ ก า ร ห มี� ก แ อ ลิ ก อ ฮ อ ลิ� เ มี�� อ นื่"า ส� า ส� ง ก ลิ�� นื่ มี า เ ต� มี ก ลิ� า เ ชุ�� อ Saccharomyces cerevisae จ"า นื่ วั นื่ 2x108 เ ซึ่ ลิ ลิ� /มี� ลิ ลิ� ลิ� ต ร ท้"าการหมี�กต�อเป,นื่เวัลิา 2 วั�นื่ พื้บ้วั�า ปร�มีาณ์ย%สต� แลิะควัามีเข�มีข�นื่นื่"�าตาลิท้��งหมีดท้%�เหลิ�ออย*�ไมี�มี%ควัามีแตกต�างก�บ้ส�าส�งกลิ��นื่ก�อนื่เต�มีเชุ��อย%สต� แลิะเมี��อนื่"าส�าส�งกลิ��นื่ไปวั�เคราะห�โดยวั�ธุ% modified Lane-Eynon ควัามีเข�มีข�นื่นื่"�าตาลิท้��งหมีดท้%�เหลิ�ออย*�มี%ค�า 3.44% แต�เมี��อท้"าการวั�เคราะห�โดยวั�ธุ% HPLC พื้บ้วั�านื่"�าตาลิท้%�ย%สต�ใชุ�หมี�กเอท้านื่อลิได�อย�างก*ลิโคสแลิะซึ่*โครสไมี�มี%เหลิ�ออย*�ในื่ส�าส�งกลิ��นื่ ในื่การท้ดลิองเพื้��อหาแนื่วัท้างในื่การเพื้��มีประส�ท้ธุ�ภาพื้การผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�จากกากนื่"�าตาลิได�ท้"าการท้ดลิองแปรค�าควัามีเข�มีข�นื่

Page 18: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

18

ของนื่"�าตาลิหมี�กเป,นื่ 17.5% , 18.5% แลิะ 19.5% พื้บ้วั�าการหมี�กส�าท้%�ควัามีเข�มีของนื่"�าตาลิหมี�ก 18.5% จะให�ประส�ท้ธุ�ภาพื้ส*งกวั�า 17.5% แลิะ 19.5%

ส�รศ�กด�G แลิะคณ์ะได�ผลิ�ตเอท้านื่อลิจากการหมี�กกลิ%เซึ่อ-รอลิด�บ้จากก ร ะ บ้ วั นื่ ก า ร ผ ลิ� ต ไ บ้ โ อ ด% เ ซึ่ ลิ ด� วั ย เ ชุ�� อ จ� ลิ� นื่ ท้ ร% ย� Enterobacteraerogenes ซึ่'�งเป,นื่กระบ้วันื่การแบ้บ้แบ้ท้ชุ� กลิ%เซึ่อรอลิบ้ร�ส�ท้ธุ�G กลิ%เซึ่อ-รอลิด�บ้ แลิะกลิ%เซึ่อรอลิด�บ้ท้%�แยกชุ��นื่สารอ�นื่ท้ร%ย�ออกแลิ�วั (CGWO) ถ*กป6อนื่เข�าส*�กระบ้วันื่การท้%�ควัามีเข�มีข�นื่ต�างๆ ผลิการท้ดลิองท้%� 37 oC ให�ค�าเปอร�เซึ่1นื่ต� Conversion ของกลิ%เซึ่อรอลิแลิะผลิได�ของเอท้านื่อลิ (นื่"�าหนื่�กเอท้านื่อลิท้%�ผลิ�ตได�ต�อนื่"�าหนื่�กกลิ%เซึ่อรอลิท้%�ถ*กย�อย) ส*งกวั�ากระบ้วันื่การท้%�อ�ณ์หภ*มี�ห�อง (ประมีาณ์ 30oC) เลิ1กนื่�อย แลิะการใชุ�ควัามีเข�มีข�นื่ของกลิ%เซึ่อรอลิเร��มีต�นื่ท้%�ส*งเป,นื่การย�บ้ย��งการท้"างานื่ของเชุ�� อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�นื่อกจากนื่%�สารอ�นื่ท้ร%ย�ในื่กลิ%เซึ่อรอลิด�บ้ซึ่'�งเจ�อปนื่มีาจากกระบ้วันื่การผลิ�ตไบ้โอด%เซึ่ลิก1ท้"าให�ค�าเปอร�เซึ่1นื่ต� Conversion ของกลิ%เซึ่อรอลิแลิะผลิได�ของเอท้านื่อลิลิดลิง อย�างไรก1ตามีการหมี�ก CGWO ให�ค�าเปอร�เซึ่1นื่ต� Conversion แลิะค�าผลิได�เอท้า-นื่อลิเท้%ยบ้เท้�าก�บ้การหมี�กกลิ%เซึ่อรอลิด�บ้ เมี��อใชุ�ควัามีเข�มีข�นื่ของกลิ%-เซึ่อรอลิไมี�เก�นื่ 30 g/l

อรวัรรณ์ แลิะคณ์ะ การเปร%ยบ้เท้%ยบ้ระยะเวัลิาการหมี�กเอท้านื่อลิในื่กระบ้วันื่การผลิ�ตสาโท้ระหวั�างการใชุ�ย%สต�เด%�ยวัแลิะย%สต�ผสมีโดยผลิ�ตสาโท้ 4 ส*ตรค�อ สาโท้ส*ตรท้%� 1 ใชุ�ย%สต�เด%�ยวัของโรงงานื่ (หจก.ส�มีฤท้ธุ�Gมี� �นื่คง)

สา โ ท้ส*ต ร ท้%� 2, 3 แลิะ 4 ใ ชุ�ย% สต� ผสมีร ะห วั� าง ย% ส ต� โ รงงา นื่ แ ลิ ะ Saccharomyces cerevisiae NP 01, S. bayanus EC 1118 หร�อ S. cerevisiae Sweden ตามีลิ"าด�บ้ ผลิการท้ดลิองพื้บ้วั�า การใชุ�ย%สต�ผสมีในื่สาโท้ส*ตรท้%� 2 สามีารถลิดระยะเวัลิาการหมี�กเอท้านื่อลิลิงได�จาก 35 วั�นื่เป,นื่ 32 วั�นื่ โดยได�ควัามีเข�มีข�นื่เอท้านื่อลิประมีาณ์ 10

เปอร�เซึ่1นื่ต�โดยปร�มีาตร

Page 19: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

19

มีาโนื่ชุ โพื้ธุ�Gส*ง ท้"าการท้ดลิองเพื้��อศ'กษาการผลิ�ตเอท้านื่อลิจากนื่"�าเชุ��อมีท้%�ได�จากการย�อยกากมี�นื่ส"าปะหลิ�งด�วัยเอนื่ไซึ่มี� 2 ชุนื่�ดค�อ แอลิฟูา-อะไมีเลิส แลิะอะไมีโลิกลิ*โคซึ่�เดส ในื่ระด�บ้ขวัดเขย�าขนื่าด 500 มี�ลิลิ�ลิ�ตร แลิะในื่ถ�งปฏิ�กรณ์�ชุ%วัภาพื้แบ้บ้ถ�งกวันื่ขนื่าด 5 ลิ�ตร ท้"าการศ'กษาเปร%ยบ้เท้%ยบ้แบ้คท้%เร%ย Z. mobilis แลิะสภาวัะท้%�เหมีาะสมีส"าหร�บ้การหมี�กเพื้��อผลิ�ตเอท้านื่อลิจากนื่"�าเชุ��อมีท้%�ได�จาการย�อยกากมี�นื่ส"าปะหลิ�งในื่อาหารเลิ%�ยงเชุ��อส*ตรอ�ดมี แลิะการศ'กษาหาแหลิ�งไนื่โตรเจนื่ท้%�เหมีาะสมีในื่อาหารเลิ%�ยงเชุ��อส*ตรปร�บ้ต"�า แลิะการศ'กษาการผลิ�ตเอท้านื่อลิในื่ถ�งปฏิ�กรณ์�ชุ%วัภาพื้แบ้บ้ถ�งกวันื่ขนื่าด 5 ลิ�ตร โดยใชุ�อาหารเลิ%�ยงเชุ��อส*ตรปร�บ้ต"�า พื้บ้วั�าแบ้คท้%เร%ยท้%�มี%ควัามีเหมีาะสมีส"าหร�บ้นื่"า ไปใชุ�ในื่การผลิ�ตเอท้านื่อลิค�อแบ้คท้%เร%ย Z.

mobilis TISTR 548 ส"าหร�บ้การผลิ�ตเอท้านื่อลิโดยใชุ�อาหารเลิ%�ยงเชุ��อส*ตรอ�ดมี พื้บ้วั�าสภาวัะท้%�เหมีาะสมีส"าหร�บ้การผลิ�ตเอท้านื่อลิค�อการใชุ�นื่"�าตาลิร%ด�วัซึ่�เร��มีต�นื่เท้�าก�บ้ 100 กร�มีต�อลิ�ตร ท้%�ค�าควัามีเป,นื่กรด-ด�าง (pH) เร��มีต�นื่เท้�าก�บ้ 5.5 แลิะท้%�อ�ตราการเขย�าเท้�าก�บ้ 100 รอบ้ต�อนื่าท้% ซึ่'�งจะให�ผลิได�ของเอท้านื่อลิเท้�าก�บ้ 0.463 กร�มีเอท้านื่อลิต�อกร�มีนื่"�าตาลิร%ด�วัซึ่�ท้%�ถ*กใชุ�ไป ส"าหร�บ้การศ'กษาแหลิ�งไนื่โตรเจนื่ท้%�เหมีาะสมีในื่อาหารเลิ%�ยงเชุ��อส*ตรปร�บ้ต"�า พื้บ้วั�าการใชุ�เกลิ�อ NH4Cl ควัามีเข�มีข�นื่ 1 กร�มีต�อลิ�ตร จะให�ผลิได�ของเอท้านื่อลิส*งท้%�ส�ดค�อ 0.419 กร�มีเอท้านื่อลิต�อกร�มีนื่"�าตาลิร%ด�วัซึ่�ท้%�ถ*กใชุ�ไป

Altintas แลิะคณ์ะ ศ'กษาการผลิ�ตเอท้านื่อลิจากแป6งโดยใชุ�ร%คอมีร�คอมีบ้%แนื่นื่ท้�ย%สต� Saccharomyces cerevisae YPB-G ซึ่'�งได�ร�บ้การเปลิ%�ยนื่แปลิงย%นื่ให�มี%ควัามีสามีารถในื่การผลิ�ตเอนื่ไซึ่ต�อะไมีเลิส พื้บ้วั�าหากเร��มีต�นื่มี%การเต�มีนื่"�าตาลิลิงไป 4 กร�มีต�อลิ�ตร จะท้"าให�สามีารถผลิ�ตเอท้านื่อลิเพื้��มีข'�นื่จาก 0.118 เป,นื่ 0.183 กร�มีต�อลิ�ตรต�อชุ��วัโมีง

Dung แลิะคณ์ะ แยกเชุ��อจากลิ*กแป6งท้%�ได�จากแหลิ�งผลิ�ตในื่ประเท้ศเวั%ยดนื่ามีจ"านื่วันื่ 29 แหลิ�งผลิ�ต สามีารถแยกเชุ��อของเชุ��อรา เชุ��อแบ้คท้%เร%ย แลิะเชุ��อย%สต� ได�ท้��งหมีดจ"านื่วันื่ 119 ไอโซึ่เลิต ซึ่'�งประกอบ้ด�วัย เชุ��อรา 53

Page 20: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

20

ไอโซึ่เลิต เชุ��อแบ้คท้%เร%ย 15 ไอโซึ่เลิต แลิะเชุ��อย%สต� 51 ไอโซึ่เลิต โดยเชุ��อราท้%�พื้บ้มีากค�อ Amylomy ces rouxii เชุ�� อย%สต�ท้%�พื้บ้ส�วันื่ใหญ�จะเป,นื่ Saccharomyces cerevisiae

Tsuyoshi แลิะคณ์ะ แยกเชุ��อย%สต�จาก ลิ*กแป6งจากแหลิ�งผลิ�ตในื่ประเท้ศอ�นื่เด%ยจ"านื่วันื่ 6 แหลิ�ง สามีารถแยกเชุ��อย%สต�ได�ท้��งหมีด 20 ไอโซึ่เลิต เมี��อจ"านื่วันื่หมีวัดหมี*�พื้บ้วั�าสามีารถแบ้�งได�เป,นื่ 4 หมี*� ซึ่'�งหมี*�ท้%� 1 ค�อ Saccharomyces bayanus หมี*�ท้%� 2 ค�อ Candida glabrata หมี*�ท้%� 3 ค� อ Pichia anomala ห มี*� ท้%� 4 ค� อ Saccharomycopsis

fibuligera ซึ่'�งจากการศ'กษาพื้บ้โดยนื่"าย%สต�แต�ลิะหมี*�มีาท้"าการหมี�กเพื้��อให�ได�แอลิกอฮอลิ�พื้บ้วั�า หมี*�ท้%�มี%ควัามีสามีารถในื่การหมี�กเพื้��อให�ได�แอลิกอฮอลิ�มีากจะอย*�ในื่หมี*�ท้%�1 , 2 แลิะ 3

Ulgen แลิะคณ์ะ ศ'กษาป;จจ�ยท้%�มี%ผลิต�อการผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�จากแป6งโดยใชุ�เชุ��อ S. cerevisiae สายพื้�นื่ธุ�� YPG/AB ซึ่'�งผ�านื่การปร�บ้ปร�งสายพื้�นื่ธุ��ให�มี%ค�ณ์สมีบ้�ต�ในื่การย�อยแป6ง พื้บ้วั�าเชุ��อจะผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ส*งส�ด ในื่อาหารเลิ%�ยงเชุ��อท้%�มี%แป6งอย*� 40 กร�มีต�อลิ�ตร แลิะมี%การเต�มีนื่"�าตาลิกลิ*โคสลิงไปในื่ระยะเร��มีต�นื่ปร�มีาณ์ 4 กร�มีต�อลิ�ตร แลิะปร�บ้พื้%เอชุให�มี%ค�าประมีาณ์ 4.5 เมี��อท้"าการเลิ%�ยงเชุ��อแบ้บ้ batch เท้%ยบ้ก�บ้การเลิ%�ยงเชุ��อแบ้บ้ fed-batch ให�ผลิผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ท้%�ส*งกวั�าการเลิ%�ยงแบ้บ้ batch โดยให�ปร�มีาณ์แอกอฮอลิ�มีากวั�าถ'ง 47.5 กร�มีต�อลิ�ตร

กรอบ้แนื่วัค�ดแลิะสมีมี�ต�ฐานื่การวั�จ�ย

ลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่กระบ้วันื่การหมี�กเอท้านื่อลิจากข�าวัเหนื่%ยวัแต�ลิะแหลิ�งมี%ผลิต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�ได�แตกต�างก�นื่

Page 21: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

21

บทท�� 3 ระเบ�ยบว ธ�ว จั�ย

ว�สำด�และอ�ป็กรณ์�ท��ใช&ในำก�รท��ว จั�ย

อ�ป็กรณ์�

- เคร2�องช��ง 1 เคร2�อง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.1

- ครกบด 1 ช�ด ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.2

- กระบอกตวง 1000 และ 25 ม ลล ล ตร ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.3

- ช�ดกล��นำล��ด�บสำ*วนำ 1 ช�ด ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.4

- เทอร�โมม เตอร� ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.5

- ถุ�งใสำ 4 ถุ�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.6

- ถุ�ง 4 ถุ�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.7

- ย�งร�ด ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.8

Page 22: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

22

- กรรไกร 1 ด&�ม ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.9

- ป็�ก� 1 ด&�ม ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.10

ว�สำด�

- ข&�วเหนำ�ยว กข 6 0.5 ก โลกร�ม ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.11

- นำ�3�สำะอ�ด 1000 ม ลล ล ตร ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.12

- ล-กแป็8ง 10 กร�ม บ&�นำสำ&มป็9อย อ.ห&�งฉ�ตร จั.ล��ป็�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.13

บ&�นำเหม�3ยง อ.แม*ทะ จั.ล��ป็�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.14

บ&�นำท�*งแล&ง อ.เม2องป็�นำ จั.ล��ป็�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.15

บ&�นำท�*งตอนำ อ.แม*ทะ จั.ล��ป็�ง ด�งแสดงในื่ร*ปท้%� 3.16

ร-ป็ท�� 3.1 เคร2�องช��ง

Page 23: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

23

ร-ป็ท�� 3.2 ครกบด

ร-ป็ท�� 3.3 กระบอกตวง

ร-ป็ท�� 3.4 ช�ดกล��นำล��ด�บสำ*วนำ

ร-ป็ท��3.5 เทอร�โมม เตอร� ร-ป็ท�� 3.6 ถุ�งใสำ

Page 24: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

24

ร-ป็ท�� 3.7 ถุ�ง ร-ป็ท�� 3.8 ย�งร�ด

ร-ป็ท�� 3.9 กรรไกร ร-ป็ท�� 3.10 ป็�ก�

ร-ป็ท�� 3.11 ข&�วเหนำ�ยว กข 6 ร-ป็ท�� 3.12

นำ�3�สำะอ�ด

ร-ป็ท�� 3.13 ล-กแป็8งบ&�นำสำ&มป็9อย ร-ป็ท�� 3.14 ล-กแป็8งบ&�นำเหม�3ยง

Page 25: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

25

ร-ป็ท�� 3.15 ล-กแป็8งบ&�นำท�*งตอนำ ร-ป็ท�� 3.16 ล-กแป็8งบ&�นำท�*งแล&ง

ว ธ�ด��เนำ นำก�รว จั�ย

จาการส"ารวัจพื้��นื่ท้%� ต. วั�งเง�นื่ อ. แมี�ท้ะ จ.ลิ"าปาง มี%การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่เป,นื่จ"านื่วันื่มีากเนื่��องจากสถานื่การณ์�การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่ในื่แต�ลิะท้�องถ��นื่ของจ�งหวั�ดลิ"าปางมี%การขยายต�วัเพื้��มีมีากข'�นื่ ซึ่'�งแหลิ�งผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่แต�ลิะแห�งได�ปร�มีาณ์ของส�ราออกมีาแตกต�างก�นื่ ท้��งนื่%�เก�ดจากการใชุ�ลิ*กแป6งในื่กระบ้วันื่การหมี�กก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวั

ผ*�วั�จ�ยจ'งได�ส"ารวัจการผลิ�ตลิ*กแป6งแต�ลิะแห�งของจ�งหลิ�ดลิ"าปาง แลิะนื่"าลิ*กแป6งท้%�ได�จากแหลิ�งผลิ�ตท้%�แตกต�างก�นื่มีาหมี�กก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัเพื้��อศ'กษาหาปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่ซึ่'�งจะชุ�วัยให�ท้ราบ้วั�าลิ*กแป6งจากแหลิ�งผลิ�ตใดเหมีาะแก�การนื่"ามีาผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่

ข�3นำตอนำก�รทดลองด�งนำ�3

1.จั�ดเตร�ยมว�สำด�-อ�ป็กรณ์�ต*�งๆ สำ��หร�บก�รหม�กเอท�นำอล และก�รกล��นำล��ด�บสำ*วนำ

2.ช��งข&�วเหนำ�ยว 0.5 ก โลกร�ม3.นำ��ล-กแป็8งไป็ให&ละเอ�ยดช��ง 10 กร�ม

Page 26: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

ข�3นำตอนำก�ร

26

4.นำ��ข&�วเหนำ�ยว และล-กแป็8งใสำ*ลงไป็ในำถุ�งใสำ*ท��เตร�ยมไว&เพ2�อคล�กเคล&�ให&เข&�ก�นำ

5.ใสำ*นำ�3� 1000 ม ลล ล ตร

6. ใช&ย�งร�ดป็�งถุ�งให&แนำ*นำใสำ*ลงในำถุ�งป็;ดฝ�ให&ม ดช ด เก=บไว&ท��อ�ณ์หภู-ม ห&อง (ท��เหม2อนำก�นำท�3ง 4 สำ-ตร)

7. หล�งก�รหม�กท�กๆ 5 ว�นำ ต&องม�ก�รเต มนำ�3� 500 ม ลล ล ตร 8. ครบ 15 ว�นำแล&วนำ��ม�กล��นำล��ด�บสำ*วนำ

เตร�ยมว�สำด�อ�ป็กรณ์�

Page 27: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

ข&�วเหนำ�ยว+ล-ก

เทนำ�3� 1000 ml

ร�ดย�ง

เก=บไว&อ�ณ์หภู-ม

27

ช��ง 10 กร�ม

ผสำมให&เข&�ก�นำ

เต มนำ�3�ท�กๆ 5 ว�นำ จันำครบ 15

ว�นำ

กล��นำล��ด�บสำ*วนำ

Page 28: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

28

บทท�� 4 ผลก�รว จั�ย

ผลก�รศั6กษ�ป็ระสำ ทธ ภู�พของล-กแป็8งในำกระบวนำก�รหม�กเอท�นำอลจั�กข&�วเหนำ�ยว

4.1. ป็ระสำ ทธ ภู�พของล-กแป็8งท��ใช&ในำก�รหม�ก

เนื่��องจากลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรท้%�นื่"ามีาหมี�กนื่��นื่ มี%ลิ�กษณ์ะท้%�แตกต�างก�นื่ เชุ�นื่ ขนื่าดของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรท้%�แตกต�างก�นื่ ส%ของลิ*กแป6งท้%�แตกต�างก�นื่ แต�ท้%�ส"าค�ญค�อกระบ้วันื่การผลิ�ตลิ*กแป6งซึ่'�งในื่แต�ลิะหมี*�บ้�านื่มี%กระบ้วันื่การท้%�ผลิ�ตลิ*กแป6งแตกต�างก�นื่ตามีส*ตรท้%�ถ�ายท้อดก�นื่มีาของแต�ลิะคร�วัเร�อนื่ โดยปกต�ท้��วัไปส*ตรของลิ*กแป6งจะมี%องค�ประกอบ้ด�งนื่%�

องค�ป็ระกอบ ป็ร ม�ณ์ (กร�ม)

กระเท้%ยมี 40

ข�ง 40

ข�า 20

ชุะเอมี 40

Page 29: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

29

พื้ร�กไท้ย 6

องค�ประกอบ้ ปร�มีาณ์(กร�มี)

ด%ปลิ% 6

องค�ป็ระกอบ ป็ร ม�ณ์ (กร�ม)

ห�วัหอมี 20

ข�าวัเจ�า 2500

ข�อมี*ลิจากนื่ภา โลิ�ห�ท้อง. 2535. กลิ�าเชุ��ออาหารหมี�กแลิะเท้คโนื่โลิย%การผลิ�ต. ฟู;นื่นื่%� พื้�บ้บ้ลิ�ชุชุ��ง. กร�งเท้พื้ฯ

แต�ท้��งนื่%�กรรมีวั�ธุ%ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6งของแต�ลิะคร�วัเร�อนื่ท้%�ผลิ�ตออกมีานื่��นื่ มี%เท้คนื่�คแลิะวั�ธุ%การท้%�แตกต�างก�นื่ท้"าให�ผลิของการหมี�กของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่แตกต�างก�นื่ไปตามีแต�ประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรด�วัย

ลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรท้%�นื่"ามีาศ'กษาประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งในื่กระบ้วันื่การหมี�กเอท้านื่อลินื่��นื่ลิ�วันื่ประกอบ้ไปด�วัยย%สต� รา แลิะแบ้คท้%เร%ย ซึ่'�งก�อนื่ท้%�จะนื่"าลิ*กแป6งมีาผสมีก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัพื้�นื่ธุ� กข 6 ได�ส�งเกตลิ�กษณ์ะของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรวั�าหลิ�งจากท้%�บ้ดลิ*กแป6งแลิ�วัมี%ลิ�กษณ์ะเป,นื่อย�างไร จากการวั�จ�ยพื้บ้วั�า

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ส�มีป<อย มี%เนื่��อหยาบ้ มี%ส%ด"า มี%เศษสมี�นื่ไพื้รมีาก

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่เหมี%�ยง มี%เนื่��อลิะเอ%ยด มี%ส"าด"ากระจ�กเป,นื่จ�ดๆ

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งแลิ�ง เนื่��อลิะเอ%ยด มี%ส%ด"ากระจายอย*�ท้��วัไป

Page 30: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

30

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งตอนื่ มี%เนื่��อลิะเอ%ยด ไมี�ค�อยมี%จ�ดส%ด"า มี%เศษสมี�นื่ไพื้รเลิ1กนื่�อย

  ลิ*กแป6งท้%�มี%ประส�ท้ธุ�ภาพื้เหมีาะแก�การหมี�กควัรจะมี%ลิ�กษณ์ะร�วันื่พื้ร�นื่ มี%ลิ�กษณ์ะนื่วัลิส%ขาวั แลิะไมี�มี%ราส%ด"าหร�อส%เข%ยวั แต�ถ�าตากแห�งชุ�าเก�นื่ไปราจะออกดอกส%ด"า ท้"าให�ลิ*กแป6งมี%ส%ด"า เมี��อนื่"าไปหมี�กก1จะได�ผลิไมี�ค�อยด%นื่�ก

ต�ร�งท�� 1 แสำดงล�กษณ์ะของล-กแป็8งแต*ละสำ-ตร

ท�� สำ-ตร ล�กษณ์ะ1 บ้�านื่ส�มีป<อย เนื่��อหยาบ้ มี%ส%ด"า มี%เศษสมี�นื่ไพื้รมีาก2 บ้�านื่เหมี%�ยง เนื่��อลิะเอ%ยด มี%ส"าด"ากระจ�กเป,นื่จ�ดๆ3 บ้�านื่ท้��งแลิ�ง เนื่��อลิะเอ%ยด มี%ส%ด"ากระจายอย*�ท้��วัไป4 บ้�านื่ท้��งตอนื่ เนื่��อลิะเอ%ยด ไมี�ค�อยมี%จ�ดส%ด"า มี%เศษสมี�นื่ไพื้ร

เลิ1กนื่�อย

4.2 ระยะเวล�ในำก�รหม�ก

เร��มีจากการนื่"าลิ*กแป6งแต�ลิะมีาส*ตรท้%�ได�จาก บ้�านื่ส�มีป<อย บ้�านื่เหมี%�ยง บ้�านื่ท้��งแลิ�ง แลิะบ้�านื่ท้��งตอนื่มีาหมี�กก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัพื้�นื่ธุ�� กข 6

โดยใชุ�ระยะเวัลิาในื่การหมี�กจ"านื่วันื่ 15 วั�นื่ เร��มีท้"าการหมี�กต��งแต�วั�นื่ท้%� 15

ส�งหาคมี 2555 – วั�นื่ท้%� 30 ส�งหาคมี 2555 แลิะท้�กๆ 5 วั�นื่ จะต�องเต�มีนื่"�ากลิ��นื่ปร�มีาตร 500 ml ลิงในื่ถ�งหมี�ก การเต�มีนื่"�าท้�กๆ 5

วั�นื่ เร%ยกวั�า การผ�านื่"�า เป,นื่การเต�มีนื่"�าลิงไปในื่ข�าวัท้%�หมี�กก�บ้ลิ*กแป6งจนื่เก�ดนื่"�าซึ่'มีออกมีาแลิ�วั เพื้��อไปลิะลิายนื่"�าตาลิออกจากข�าวั ท้"าให�ย%สต�สามีารถนื่"าไปใชุ�หมี�กแอลิกอฮอลิ�ได� นื่"�าท้%�ใชุ�ควัรเป,นื่นื่"�าสะอาด ปราศจากเชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� โดยอาจใชุ�นื่"�าต�มี หร�อนื่"�ากรอง หากใชุ�นื่"�าท้%�ไมี�สะอาด จะมี%โอกาสท้%�จะท้"าให�ส�รา

Page 31: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

31

เปร%�ยวัได� การผ�านื่"�ามี%จ�ดประสงค�เพื้��อเจ�อจางควัามีเข�มีข�นื่ของนื่"�าตาลิท้%�เก�ดจากการหมี�ก ให�เหมีาะสมีก�บ้การเจร�ญของย%สต�

เมี��อเก�ดกระบ้วันื่การหมี�กข'�นื่ย%สต�จะเปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิเป,นื่แอลิกอฮอลิ� ถ�าปร�มีาณ์ของนื่"�าตาลิท้%�เก�ดข'�นื่จาการย�อยของเชุ��อรามี%ปร�มีาณ์เท้�าไหร� ย%สต�จะสามีารถย�อยนื่"�าตาลิให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ�ได�เพื้%ยงคร'�งหนื่'�ง เชุ�นื่ ปร�มีาณ์นื่"�าตาลิมี%ร�อยลิะ 50 ปร�มีาณ์ท้%�ย%สต�จะสามีารถย�อยนื่"�าตาลิให�เก�ดเป,นื่แอลิกอฮอลิ�ได�เพื้%ยงร�อยลิะ 25 เท้�านื่��นื่เพื้ราะนื่"�าตาลิท้%�เหลิ�อจะต�องเปลิ%�ยนื่เป,นื่สารอ��นื่ท้%�ให�รสแลิะกลิ��นื่ของเคร��องด��มีนื่��นื่ๆ แต�ท้��งนื่%�การท้%�จะเก�ดแอลิกอฮอลิ�ได�มีากหร�อนื่�อยข'�นื่อย*�ก�บ้สภาวัะโดยรอยท้%�เอ��อต�อการเจร�ญของย%สต�หร�อไมี�

4.3 ผลของป็ร ม�ณ์ก�รเก ดเอท�นำอล

เมี��อนื่"านื่"�าหมี�กท้%�ได�จากการหมี�กเป,นื่ระยะเวัลิา 15 วั�นื่ มีากลิ��นื่แบ้บ้ลิ"าด�บ้ส�วันื่เพื้��อปร�มีาตรเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่จากกระบ้วันื่การหมี�กของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตร โดยแต�ลิะส*ตรจะใชุ�ปร�มีาณ์ในื่การกลิ��นื่จ"านื่วันื่ 200 ml. จากการศ'กษาพื้บ้วั�า

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ส�มีป<อย

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 11.19 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 70 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 54.40 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่เหมี%�ยง

Page 32: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

32

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 12.25 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 80 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 1.38

นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

- ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งแลิ�ง

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 11.45 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 70 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 50.37 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

- ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งตอนื่

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 13.21 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 75 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 1.17

นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

จากสมีมีต�ฐานื่ท้%�วั�า ลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่กระบ้วันื่การหมี�กเอท้านื่อลิจาก“

ข�าวัเหนื่%ยวัแต�ลิะแหลิ�งมี%ผลิต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�ได�แตกต�างก�นื่ ผลิ”

ของการวั�จ�ยพื้บ้วั�า

ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ส�มีป<อย มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 19 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่เหมี%�ยง มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 16 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งแลิ�ง มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 17.5 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งตอนื่ มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 20.5 ml.

Page 33: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

33

ต�ร�งท�� 2 แสำดงระยะเวล�และป็ร ม�ณ์ของเอท�นำอลท��เก ดข63นำจั�กล-กแป็8งสำ-ตรต*�งๆ

สำ-ตรของล-กแป็8ง

เวล�ท��เก ดเอท�นำอล

(หยดแรก/

นำ�ท�)

เวล�ท��หย�ดก�รเก ดเอท�นำอล

(หยดสำ�ดท&�ย/นำ�ท�)

อ�ณ์หภู-ม

( ˚c )

ป็ร ม�ณ์เอท�นำอลท�3งหมด(ml)

บ้�านื่ส�มีป<อย 11.19 54.40 70 19

บ้�านื่เหมี%�ยง 12.25 1.38 80 16

บ้�านื่ท้��งแลิ�ง 11.45 50.37 70 17.5

บ้�านื่ท้��งตอนื่ 13.21 1.17 75 20.5

Page 34: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

34

บทท�� 5 สำร�ป็ผลก�รว จั�ย อภู ป็ร�ยผล และข&อเสำนำอแนำะ

สำร�ป็ผลก�รว จั�ย

1. ประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่การหมี�ก ลิ�กษณ์ะของลิ*กแป6งท้%�แตกต�างก�นื่ เชุ�นื่ ขนื่าด ส%ของลิ*กแป6ง

แต�ท้%�ส"าค�ญค�อกระบ้วันื่การผลิ�ตลิ*กแป6งซึ่'�งในื่แต�ลิะหมี*�บ้�านื่มี%กระบ้วันื่การท้%�ผลิ�ตลิ*กแป6งแตกต�างก�นื่ตามีส*ตรท้%�ถ�ายท้อดก�นื่มีาของแต�ลิะคร�วัเร�อนื่ ซึ่'�งแต�ลิะส*ตรท้%�ผลิ�ตข'�นื่ลิ�วันื่เป,นื่ควัามีลิ�บ้ แต�ท้��งนื่%�กรรมีวั�ธุ%ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6งของแต�ลิะส*ตรท้%�ผลิ�ตออกมีานื่��นื่ มี%เท้คนื่�คแลิะวั�ธุ%การท้%�แตกต�างก�นื่ท้"าให�ผลิของการหมี�กของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่แตกต�างก�นื่ไปตามีแต�ประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรด�วัย ลิ*กแป6งท้%�มี%ประส�ท้ธุ�ภาพื้เหมีาะแก�การหมี�กควัรจะมี%ลิ�กษณ์ะร�วันื่พื้ร�นื่ มี%ลิ�กษณ์ะนื่วัลิส%ขาวั แลิะไมี�มี%ราส%ด"าหร�อส%เข%ยวั แต�ถ�ามี%ลิ�กษณ์ะผ�ดไปจากนื่%� เมี��อนื่"าไปหมี�กก1จะเก�ดผลิไมี�ค�อยด%นื่�ก

2 ระยะเวัลิาในื่การหมี�ก

นื่"าลิ*กแป6งแต�ลิะมีาส*ตรมีาหมี�กก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัพื้�นื่ธุ�� กข 6 โดยใชุ�ระยะเวัลิาในื่การหมี�กจ"านื่วันื่ 15 วั�นื่ แลิะท้�กๆ 5 วั�นื่ จะต�องผ�านื่"�า เป,นื่การเต�มีนื่"�าลิงไปในื่ข�าวัท้%�หมี�กก�บ้ลิ*กแป6งจนื่เก�ดนื่"�าซึ่'มีออกมีาแลิ�วั เพื้��อ

Page 35: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

35

ไปลิะลิายนื่"�าตาลิออกจากข�าวั ท้"าให�ย%สต�สามีารถนื่"าไปใชุ�หมี�กแอลิกอฮอลิ�ได� นื่"�าท้%�ใชุ�ควัรเป,นื่นื่"�าสะอาดหากใชุ�นื่"�าท้%�ไมี�สะอาดจะมี%โอกาสท้%�จะท้"าให�ส�ราเปร%�ยวัได�

3 ผลิของปร�มีาณ์การเก�ดเอท้านื่อลิ

โดยแต�ลิะส*ตรจะใชุ�ปร�มีาณ์ในื่การกลิ��นื่จ"านื่วันื่ 200 ml. จากการศ'กษาพื้บ้วั�า

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ส�มีป<อย

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 11.19 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 70 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 54.40 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

-ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่เหมี%�ยง

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 12.25 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 80 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 1.38 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

- ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งแลิ�ง

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 11.45 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 70 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 50.37 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

- ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งตอนื่

Page 36: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

36

เมี��อเร��มีกลิ��นื่ เวัลิาผ�านื่ไป 13.21 นื่าท้% ท้%�อ�ณ์หภ*มี� 75 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส เอท้านื่อลิเร��มีหยด ใชุ�เวัลิาในื่การกลิ��นื่ 1.17 นื่าท้% เอท้านื่อลิจ'งไมี�เก�ดการหยด

ปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่พื้บ้วั�า

ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ส�มีป<อย มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 19 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่เหมี%�ยง มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 16 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งแลิ�ง มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 17.5 ml. ลิ*กแป6งส*ตรบ้�านื่ท้��งตอนื่ มี%ปร�มีาตรของเอท้านื่อลิ 20.5 ml.

อภู ป็ร�ยผลก�รว จั�ย

การวั�จ�ยคร��งนื่%�มี%วั�ตถ�ประสงค� เพื้��อศ'กษาเปร%ยบ้เท้%ยบ้ส*ตรลิ*กแป6งท้%�มี%ผลิต�อการผลิ�ตเอท้านื่อลิจากข�าวัเหนื่%ยวั จากการศ'กษาประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งในื่กระบ้วันื่การหมี�กเอท้านื่อลิจากข�าวัเหนื่%ยวัโดยศ'กษาเปร%ยบ้เท้%ยบ้ส*ตรลิ*กแป6งท้%�มี%ผลิต�อการผลิ�ตเอท้านื่อลิจากข�าวัเหนื่%ยวั จากการนื่"าลิ*กแป6งแต�ลิะมีาส*ตรท้%�ได�จาก บ้�านื่ส�มีป<อย บ้�านื่เหมี%�ยง บ้�านื่ท้��งแลิ�ง แลิะบ้�านื่ท้��งตอนื่มีาหมี�กก�บ้ข�าวัเหนื่%ยวัพื้�นื่ธุ�� กข 6 โดยใชุ�ระยะเวัลิาในื่การหมี�กจ"านื่วันื่ 15 วั�นื่ สามีารถอภ�ปรายผลิได�ด�งนื่%�

4.2.1 ประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งท้%�ใชุ�ในื่การหมี�ก

กระบ้วันื่การผลิ�ตลิ*กแป6งซึ่'�งในื่แต�ลิะหมี*�บ้�านื่มี%กระบ้วันื่การท้%�ผลิ�ตลิ*กแป6งแตกต�างก�นื่ตามีส*ตรท้%�ถ�ายท้อดก�นื่มีาของแต�ลิะคร�วัเร�อนื่ ซึ่'�งแต�ลิะส*ตรท้%�ผลิ�ตข'�นื่ลิ�วันื่เป,นื่ควัามีลิ�บ้แลิะไมี�สามีารถถ�ายท้อดแก�ผ*�ใดได� โดยปกต�ท้��วัไปส*ตรของลิ*กแป6งจะมี%องค�ประกอบ้ด�งนื่%�

Page 37: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

37

องค�ประกอบ้ ปร�มีาณ์ (กร�มี)

กระเท้%ยมี 40

ข�ง 40

ข�า 20

ชุะเอมี 40

พื้ร�กไท้ย 6

ด%ปลิ% 6

องค�ประกอบ้ ปร�มีาณ์(กร�มี)

ห�วัหอมี 20

ข�าวัเจ�า 2500

ข�อมี*ลิจากนื่ภา โลิ�ห�ท้อง. 2535. กลิ�าเชุ��ออาหารหมี�กแลิะเท้คโนื่โลิย%การผลิ�ต. ฟู;นื่นื่%� พื้�บ้บ้ลิ�ชุชุ��ง. กร�งเท้พื้ฯ

แต�ท้��งนื่%�กรรมีวั�ธุ%ในื่การผลิ�ตลิ*กแป6งของแต�ลิะคร�วัเร�อนื่ท้%�ผลิ�ตออกมีานื่��นื่ มี%เท้คนื่�คแลิะวั�ธุ%การท้%�แตกต�างก�นื่ท้"าให�ผลิของการหมี�กของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรต�อปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิท้%�เก�ดข'�นื่แตกต�างก�นื่ไปตามีแต�ประส�ท้ธุ�ภาพื้ของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรด�วัย

สมี�นื่ไพื้รพื้��นื่บ้�านื่ซึ่'�งแตกต�างก�นื่ออกไปในื่แต�ลิะท้�องถ��นื่เป,นื่องค�ประกอบ้หลิ�กในื่การผลิ�ตลิ*กแป6ง สมี�นื่ไพื้รมี%หนื่�าท้%�ย�บ้ย��งเชุ��อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ปนื่เปE� อนื่ท้%�เราไมี�ต�องการ โดยเฉพื้าะเชุ��อราชุนื่�ดท้%�สร�างสารพื้�ษ แต�สมี�นื่ไพื้รจะไมี�ย�บ้ย��งการเจร�ญเต�บ้โตของเชุ��อราแลิะย%สต�ท้%�ใชุ�ในื่การหมี�กข�าวัเหนื่%ยวัให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ� สมี�นื่ไพื้รท้%�มี%ฤท้ธุ�Gด�งกลิ�าวั ได�แก� ข�ง ข�า ชุะเอมี พื้ร�กไท้ย กระเท้%ยมี ด%ปลิ% เป,นื่ต�นื่ ในื่การเตร%ยมีลิ*กแป6งหากผ*�ป;� นื่แป6งไมี�มี%ควัามีชุ"านื่าญในื่การผสมีแป6งก�บ้นื่"�าเพื้��อให�ป;� นื่เป,นื่ก�อนื่ ถ�าป;� นื่แฉะไปท้"าให�

Page 38: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

38

ควัามีชุ��นื่ส*งเหมีาะแก�การเจร�ญของแบ้คท้%เร%ย ถ�าแห�งไปก1จะป;� นื่เป,นื่ก�อนื่ได�ไมี�ด%ลิ*กแป6งจะไมี�ข'�นื่ฟู* ถ�าผลิ�ตลิ*กแป6งในื่ท้%�ท้%�ไมี�สะอาดอาจจะเก�ดการปนื่เปE� อนื่ได�ง�าย จะเห1นื่วั�าการป;� นื่ลิ*กแป6งต�องใชุ�ควัามีชุ"านื่าญแลิะควัามีระมี�ดระวั�งพื้อสมีควัร

จ�ลิ�นื่ท้ร%ย�ท้%�พื้บ้ในื่ลิ*กแป6ง

รา เป,นื่ส��งมี%ชุ%วั�ตท้%�ต�องการอากาศในื่การหายใจ แลิะจะผลิ�ตเอนื่ไซึ่มี� เพื้��อย�อยแป6งในื่ให�กลิายเป,นื่ นื่"�าตาลิ ราท้%�ตรวัจพื้บ้ในื่ลิ*กแป6ง ได�แก� Amylomyces   Rhizopus  Chlamydomucor 

ย%สต�  เป,นื่ส��งมี%ชุ%วั�ตขนื่าดเลิ1กเซึ่ลิลิ�เด%ยวั ท้%�มีองด�วัยตาเปลิ�าไมี�เห1นื่ เชุ��อย%สต�ท้%�ส"าค�ญในื่ลิ*กแป6งค�อ Saccharomyces cerivisiae   

ซึ่'�งจะหมี�ก (fermentation)  เปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิ ให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ�

แบ้คท้%เร%ย ท้%�พื้บ้ในื่ลิ*กแป6ง เชุ�นื่ แบ้คท้%�เร%ยท้%�ผลิ�ตกรดแลิกต�ก (lactic acid bacteria) ได�แก� Pediococcus Lactobacillus 

แลิะ แบ้คท้%เร%ยท้%�ผลิ�ตกรดอะซึ่�ต�ก (acetic acid bacteria)

ได�แก� Acetobacter แลิะ Gluconobacter

จากการเพื้าะเลิ%�ยงเชุ��อราสองสก�ลิ ได�แก� Amylomyces แลิะ Rhizopus ท้%�แยกได�จากลิ*กแป6งข�าวัหมีากแลิะลิ*กแป6งเหลิ�าในื่ข�าวัเหนื่%ยวันื่'�ง ผลิการศ'กษาพื้บ้วั�าราท้��งสองสก�ลิมี%บ้ท้บ้าท้ในื่การหมี�กข�าวัต�างก�นื่ โดย Amylomyces spp. ผลิ�ตกรดได�ต"�าประมีาณ์ 0.88-1.29 % ส�วันื่ Rhizopus spp. ผลิ�ตกรดได�ประมีาณ์ 3.7-4.3 % การท้ดสอบ้การสร�างเอนื่ไซึ่มี�ย�อยแป6งบ้นื่อาหาร Rose Bengal dichloran

chloramphenical agar (RBDC) ท้%�มี% soluble starch 4 %

พื้บ้วั�าราท้�กไอโซึ่เลิท้ย�อยแป6งได�นื่�อย โดยมี%อ�ตราส�วันื่ระหวั�างเส�นื่ผ�านื่ศ*นื่ย�กลิางของบ้ร�เวัณ์ใสแลิะเส�นื่ผ�านื่ศ*นื่ย�กลิางของโคโลินื่%นื่�อยกวั�า 1 แต�ไมี�เท้�าก�บ้ 0 โดย Rhizopus spp. ย�อยแป6งเป,นื่นื่"�าตาลิได�ต"�ากวั�า Amylomyces spp.

Page 39: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

39

จากการศ'กษาป;จจ�ยท้%�มี%ผลิต�อการเจร�ญของย%สต� Saccharomycopsis fibuligera (แยกจากลิ*กแป6งข�าวัหมีากแลิะลิ*กแป6งเหลิ�า จากแหลิ�งลิ*กแป6ง 10 แหลิ�ง) จ"านื่วันื่ 20 ไอโซึ่เลิท้ เมี��อเปร%ยบ้เท้%ยบ้ก�บ้ Saccharomyces cerevisiae RIT I (แยกได�ในื่ระหวั�างการหมี�กสาโท้) พื้บ้วั�า S. fibuligera ท้�กไอโซึ่เลิท้ให�ลิ�กษณ์ะการเจร�ญคลิ�ายก�นื่ แลิะเจร�ญได�ชุ�ากวั�า S. cerevisiae RIT I ในื่ท้�กป;จจ�ยการท้ดลิองพื้บ้วั�าอ�ณ์หภ*มี� พื้%เอชุ แลิะควัามีเข�มีข�นื่ของกลิ*โคส ท้%�เหมีาะสมีต�อการเจร�ญของ S. fibuligera ค�อ อ�ณ์หภ*มี� 30 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส พื้%เอชุ 4.0 แลิะควัามีเข�มีข�นื่ของกลิ*โคสเท้�าก�บ้ 100 กร�มีต�อลิ�ตร การศ'กษาผลิของอ�ณ์หภ*มี� (10, 20 แลิะ 30 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส) ต�อการเจร�ญแลิะการมี%ชุ%วั�ตของ S. fibuligera เมี��อเลิ%�ยงในื่อาหารท้%�มี%เอธุานื่อลิต�างก�นื่ (0. 5, 10 แลิะ 15 %) พื้บ้วั�าอ�ณ์หภ*มี�ส*งชุ�วัยให�ย%สต�มี%อ�ตราการเจร�ญส*งข'�นื่ ส�วันื่อ�ณ์หภ*มี�ต"�าชุ�วัยให�ย%สต�ท้นื่เอธุานื่อลิได�ด%ข'�นื่ การท้ดสอบ้การผลิ�ตเอกซึ่�ตร�าเซึ่ลิลิ*ลิ�าเอนื่ไซึ่มี� พื้บ้วั�า S. fibuligera ท้��ง 20

ไอโซึ่เลิท้ แสดงก�จกรรมีของอมี�ยเลิสแลิะโปรต�เอสได� แต�ไมี�แสดงก�จกรรมีของไลิเปส แลิะพื้บ้วั�าย%สต� S. fibuligera ท้��ง 20 ไอโซึ่เลิท้ ไมี�แสดงสมีบ้�ต�การเป,นื่ killer strain แลิะ sensitive strain

( ท้%�มีา : มีณ์ชุ�ย เดชุส�งกรานื่นื่ท้� .2546.วั�ท้ยานื่�พื้นื่ธุ� ปร�ญญาโท้สาขาเท้คโนื่โลิย%ชุ%วัภาพื้ มีหาวั�ท้ยาลิ�ยเกษตรศาสตร� .กร�งเท้พื้ฯ)

การระบ้�สปHชุ%ส�ของย%สต�ท้%�แยกจากข�าวัหมีาก  แลิะเคร��องด��มีท้%�มี%แอลิกอฮอลิ�ของไท้ย  โดยการศ'กษาลิ"าด�บ้เบ้สบ้ร�เวัณ์  rDNA  ในื่ส�วันื่ของ D1/D2  domain  ท้%�อย*�บ้ร�เวัณ์ปลิาย 5’  ของย%นื่  26S

rRNA  แลิะส�วันื่ของ ITS-5.8S rDNA  พื้บ้วั�าย%สต�ท้�กไอโซึ่เลิท้ท้%�ท้"าการศ'กษาให�ขนื่าดของผลิผผลิ�ต PCR บ้ร�เวัณ์  D1/D2

domain ประมีาณ์  600 bp  แตกต�างจากขนื่าดของผลิผลิ�ต  PCR  บ้ร�เวัณ์  ITS-5.8S rDNA  จะให�ขนื่าดแตกต�างก�นื่ในื่แต�ลิะไอโซึ่เลิท้  ซึ่'�งอย*�ในื่ชุ�วังประมีาณ์  340-1040 bp ผลิ�ต PCR ถ*ก

Page 40: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

40

นื่"ามีาหาลิ"าด�บ้เบ้สโดยวั�ธุ%  direct sequencing  แลิะเปร%ยบ้เท้%ยบ้ลิ"าด�บ้เบ้สท้%�ได�ก�บ้ฐานื่ข�อมี*ลิ  GenBank   โดยใชุ�  Blast search tool  ซึ่'�งสามีารถระบ้�สปHชุ%ส�ย%สต�จากต�วัอย�างย%สต�ท้��งหมีด  19  ไอโซึ่เลิท้  ได�แก�ย%สต�สปHชุ%ส�ต�าง ๆ ด�งต�อไปนื่%�  Candida atlantica, C. colliculosa, C. guilliermondii, C. lusitaniae, C. tropicalis,  Hanseniaspora  osmophila, H. uvarum,  H. vineae,  Loderomyces elongisporus, Pichia anomala, Saccharomyces  cerevisiae  แลิะ Saccharomycopsis

fibuligera   โดยผลิการระบ้�สปHชุ%ส�ด�งกลิ�าวัถ*กนื่"ามีาเปร%ยบ้เท้%ยบ้ก�บ้ผลิการระบ้�สปHชุ%ส� โดยการท้ดสอบ้ควัามีสามีารถในื่การใชุ�แหลิ�งคาร�บ้อนื่   โดยใชุ�ชุ�ดท้ดสอบ้  API 20C AUX   เปร%ยบ้เท้%ยบ้ลิ"าด�บ้เบ้สโดยโปรแกรมี  Clustal X   ค"านื่วัณ์ค�าควัามีแตกต�างท้างพื้�นื่ธุ�กรรมีโดยวั�ธุ%  Kimura 2-parameter   แลิะสร�าง  phylogenetic tree

โดยวั�ธุ%neighbor-joining เพื้��ออธุ�บ้ายควัามีส�มีพื้�นื่ธุ�ท้างพื้�นื่ธุ�กรรมี  พื้บ้วั�า phylogenetic tree  ท้%�ได�จากการศ'กษาลิ"าด�บ้เบ้สท้��ง  2  บ้ร�เวัณ์นื่��นื่ให�ผลิท้%�สอดคลิ�องก�นื่

การศ'กษาลิ"าด�บ้เบ้สบ้ร�เวัณ์  ITS-5.8S rDNA  ถ*กนื่"ามีาใชุ�ในื่การย�นื่ย�นื่ผลิการระบ้�สปHชุ%ส�ของย%สต�ท้%�ผ�านื่การระบ้�สปHชุ%ส�โดยวั�ธุ% con

ventional method  จ"านื่วันื่  50  ไอโซึ่เลิท้   ซึ่'�งประกอบ้ด�วัยย%สต�ท้%�แยกจากลิ*กแป6งเหลิ�า  11  ไอโซึ่เลิท้   ลิ*กแป6งข�าวัหมีาก 23 ไอโซึ่เลิท้  แลิะจากศ*นื่ย�จ�ลิ�นื่ท้ร%ย� สถาบ้�นื่วั�จ�ยวั�ท้ยาศาสตร�แลิะเท้คโนื่โลิย%แห�งประเท้ศไท้ยจ"านื่วันื่  16  ไอโซึ่เลิท้  ผลิการระบ้�สปHชุ%ส�โดยการศ'กษาลิ"าด�บ้เบ้สบ้ร�เวัณ์ ITS-5.8S rDNA  ให�ผลิแตกต�างจากผลิการระบ้�เด�มี  9  ไอโซึ่เลิท้  เนื่��องจากข�อจ"าก�ดในื่การระบ้�สปHชุ%ส�โดยวั�ธุ%  conventional

method   มี�กจะมี%ป;ญหาในื่การระบ้�สปHชุ%ส�ย%สต�ท้%�มี%ลิ�กษณ์ะท้างฟูHโนื่ไท้ปLท้%�คลิ�ายก�นื่ อย�างไรก1ตามีการระบ้�สปHชุ%ส�โดย   conventional method

ย�งคงเป,นื่ข��นื่ตอนื่ส"าค�ญท้%�ควัรจะท้"าการท้ดสอบ้ร�วัมีก�บ้การท้ดสอบ้ในื่ระด�บ้โมีเลิก�ลิ  ซึ่'�งสามีารถนื่"ามีาแก�ป;ญหาข�อจ"าก�ดในื่การระบ้�สปHชุ%ส�โดย  conve

Page 41: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

41

ntional method  แลิะเพื้��อให�ผลิการท้ดลิองท้%�มี%ควัามีถ*กต�อง แมี�นื่ย"า  แลิะนื่�าเชุ��อถ�อมีากข'�นื่

(ท้%�มีา : เสาวัลิ�กษณ์� ด�านื่สก�ลิ. 2548. วั�ท้ยานื่�พื้นื่ธุ� ปร�ญญาโท้สาขาเท้คโนื่โลิย%ชุ%วัภาพื้ มีหาวั�ท้ยาลิ�ยเกษตรศาสตร� .กร�งเท้พื้ฯ)

ย%สต�หลิ�กท้%�พื้บ้ในื่ลิ*กแป6ง ค�อ แซึ่คคาโรไมีคอปซึ่�ส ฟู9บ้*ลิ�เจอร�า (Saccharomycopsis fibuligera ) ซึ่'�งเป,นื่ย%สต�ท้%�มี%ควัามีสามีารถผลิ�ตนื่"�าย�อยย�อยแป6งได� อออออแต�ในื่ลิ*กแป6งกลิ�บ้ไมี�ค�อยพื้บ้ย%สต� แซึ่คคาโรไมีซึ่�ส ซึ่�ร�วั�ซึ่�อ% ( Saccharomyces cerevisiae ) ซึ่'�งเป,นื่ย%สต�ท้%�ใชุ�ท้"าไวันื่� ซึ่'�งข�ดก�บ้ควัามีเชุ��อ เด�มีท้%�วั�า ลิ*กแป6งเป,นื่แหลิ�งของย%สต�นื่%� ซึ่'�งเป,นื่ย%สต�ท้%�ท้"าให�เก�ดการหมี�ก เพื้ราะผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ได�ด% แต�ในื่ระหวั�างการหมี�ก ย%สต� Saccharomycopsis จะเจร�ญได�เพื้%ยงชุ�วังแรกของการหมี�ก จากนื่��นื่ S.cerevisiae จะเป,นื่ย%สต�ท้%�ด"าเนื่�นื่การหมี�กจนื่ส��นื่ส�ด เนื่��องจาก Saccharomycopsis ไมี�ท้นื่แอลิกอฮอลิ�แต�ย%สต�นื่%�อาจมี%ควัามีจ"าเป,นื่ในื่ชุ�วังแรกของการหมี�กเพื้��อชุ�วัยย�อยแป6งท้%�เหลิ�อจากการหมี�กด�วัยเชุ��อราแลิะอาจผลิ�ตกลิ��นื่รสท้%�เฉพื้าะซึ่'�งจ"าเป,นื่ต�องมี%ผลิงานื่วั�จ�ยย�นื่ย�นื่ต�อไป

Saccharomyces มี%บ้ท้บ้าท้ส"าค�ญในื่การท้"างานื่ของย%สต�ในื่ระหวั�างการผลิ�ตเคร��องด��มีแอลิกอฮอลิ�ท้%�มี%อ�ท้ธุ�พื้ลิต�อการด*ดซึ่'มีนื่"�าตาลิแอลิกอฮอลิ�แลิะการผลิ�ตรสชุาต�

( ท้%�มีา : school of Biological and Molecular Sciences,

Oxford Brookes University, Headington, Oxford OX3 0BP, UK )

สายพื้�นื่ธุ��ย%สต� Saccharomyces cerevisiae แสดง glucoamylase จากเชุ��อรา Rhizopus oryzae บ้นื่ผ�วัเซึ่ลิลิ� (Murai

Page 42: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

42

et al. Appl. Environ. Microbiol., 63, 1362-1366, 1997)

ระบ้บ้นื่%�ถ*กนื่"าเข�ามีาในื่สายพื้�นื่ธุ��ย%สต� , G-1315, ท้%�มี%ควัามีสามีารถหมี�กส*งแลิะการผลิ�ตโดยตรงจากเอท้านื่อลิจากข�าวัโพื้ด ข�าวัโพื้ดด�บ้เป,นื่แป6งเอท้านื่อลิท้%�ผลิ�ตท้%�มี%ควัามีเข�มีข�นื่ของ 2.34% (w / w) สามีารถการหมี�กให�เอท้านื่อลิ 5.32% (w / w) ซึ่'�งเท้%ยบ้เท้�าก�บ้ glucoamylase

secreting transformants ผลิลิ�พื้ธุ�เหลิ�านื่%�แสดงให�เห1นื่วั�า "ย%สต�" ท้%�พื้�ฒนื่าโดยเซึ่ลิลิ�ผ�วัเท้คนื่�ควั�ศวักรรมีสามีารถใชุ�ได�ก�บ้การหมี�กแป6ง

(ท้%�มีา : Evaluation of the function of arming yeast

displaying glucoamylase on its cell surface by direct fermentation of corn to ethanol Original Research Article

Journal of Fermentation and Bioengineering, Volume 86, Issue 6, 1998, Pages 569-572)

แบ้คท้%เร%ยท้%�ผลิ�ตกรดแลิกต�ก เชุ�นื่ Pediococcus Lactobacillus ท้"าให�เก�ดกรดนื่"�าส�มี มี%รสเปร%�ยวัแลิะกลิ��นื่รสแปลิกปลิอมี ท้%�เก�ดจากแบ้คท้%เร%ยกรดอะซึ่�ต�ก แลิะสาเหต�อ��นื่ๆ แต�ในื่ป;จจ�บ้�นื่ แบ้คท้%เร%ยกรดแลิคต�ก ได�ร�บ้ควัามีสนื่ใจจากนื่�กวั�ท้ยาศาสตร�มีาก เนื่��องจากเป,นื่ต�วัการ ท้"าให�เก�ดการหมี�กมีาโลิแลิคต�ก (malolactic

fermentation หร�อ MLF) บ้ท้บ้าท้ของ MLF ค�อการเปลิ%�ยนื่กรดมีาลิ�ก ซึ่'�งเป,นื่กรดแรง เนื่��องจากมี%กลิ��มีคาร�บ้อกซึ่�ลิสองกลิ��มี ให�เป,นื่กรดแลิคต�ก ซึ่'�งเป,นื่กรดท้%�อ�อนื่กวั�า ท้"าให� pH ลิดลิง ซึ่'�งเป,นื่ประโยชุนื่�มีากในื่การผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ย�งให�กลิ��นื่รสเฉพื้าะของแบ้คท้%เร%ย งานื่วั�จ�ยในื่ป;จจ�บ้�นื่ จะศ'กษาค�ณ์สมีบ้�ต�ต�างๆ ของแบ้คท้%เร%ย จนื่ถ'งระด�บ้ด%เอ1นื่เอ เชุ�นื่การจ"าแนื่กสายพื้�นื่ธุ��ด�วัยวั�ธุ%ท้างด%เอ1นื่เอ การต�ดต�อย%นื่ท้%�ท้"าให�เก�ดการหมี�กมีาโลิแลิคต�กใส�ลิงในื่ย%สต� หร�อการผลิ�ตสารกลิ��นื่รสของแบ้คท้%เร%ยสายพื้�นื่ธุ��

Page 43: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

43

ต�างๆ เป,นื่ต�นื่ ในื่ประเท้ศไท้ยมี%การวั�จ�ยเก%�ยวัก�บ้แบ้คท้%เร%ยกรดแลิคต�ก ค�อนื่ข�างกวั�างขวัาง แต�เป,นื่ผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�อ��นื่ เชุ�นื่แหนื่มี ผ�กดอง แลิะผลิ�ตภ�ณ์ฑ์�นื่มี เป,นื่ต�นื่

(ท้%�มีา : เจร�ญ เจร�ญชุ�ย .วัารสาร จาร�พื้า ปHท้%� 8 ฉบ้�บ้ท้%� 60 (พื้ฤษภาคมี/มี�ถ�นื่ายนื่ 2544))

4.2.2 ระยะเวัลิาในื่การหมี�ก

เร��มีท้%�การนื่"าข�าวัเหนื่%ยวั ไปนื่'�ง นื่"ามีาผ'�งให�เย1นื่ แลิ�วันื่"าไปคลิ�กก�บ้ลิ*กแป6งท้%�บ้ดให�เป,นื่ผงแลิ�วั โดยผสมีนื่"�าลิงไปเพื้��อให�คลิ�กเคลิ�าได�ด% แลิะชุ�วัยให�จ�ลิ�นื่ท้ร%ย�เจร�ญได� โดยผ*�ผลิ�ตบ้างรายใชุ�วั�ธุ%นื่"าข�าวันื่'�ง ไปลิ�างนื่"�า 1 คร��ง แลิ�วัจ'งผสมีลิ*กแป6ง ตามีควัามีเชุ��อเด�มีวั�าเป,นื่การลิ�างยางข�าวัออก เมี��อคลิ�กลิ*กแป6งแลิ�วั จ'งนื่"าไปใส�ในื่โอ�งหร�อภาชุนื่ะปากกวั�าง ท้��งนื่%�เพื้��อให�ข�าวัแลิะเชุ��อ ได�ร�บ้อากาศเพื้%ยงพื้อ โดยใส�ข�าวัลิงเพื้%ยงประมีาณ์ 1 ในื่ 3 หร�อ 1 ในื่ 4 ของปร�มีาตรโอ�ง ป9ดฝาหลิวัมีๆ เชุ�นื่ผ�าพื้ลิาสต�ก หร�อเอาไมี�ป9ดไวั� แลิะหมี�กไวั� 3

วั�นื่

เมี��อเวัลิาการหมี�กผ�านื่ไปประมีาณ์ 3 วั�นื่ เชุ��อราจากลิ*กแป6งจะเจร�ญ แลิะย�อยแป6งให�กลิายเป,นื่นื่"�าตาลิ แลิะเก�ดนื่"�าซึ่'มีออกมีา เร%ยกวั�า นื่"�า“

ต�อย แลิ�วัจ'งเต�มีนื่"�าลิงไปเพื้��อลิะลิายนื่"�าตาลิท้%�เก�ดข'�นื่ แลิะสร�างสภาพื้ท้%�”

ไมี�มี%อากาศ ซึ่'�งเหมีาะสมีก�บ้ย%สต� แลิะย%สต�ท้%�อย*�ในื่ลิ*กแป6งก1จะหมี�กนื่"�าตาลิให�กลิายเป,นื่แอลิกอฮอลิ�แลิะกลิ��นื่รสต�างๆ ต�อไป การเต�มีนื่"�านื่%�เร%ยกวั�า การ ผ�านื่"�า โดยปกต�จะเต�มีเฉพื้าะนื่"�า แต�บ้างรายอาจเต�มีนื่"�าตาลิลิงไปด�วัย “ ”

เพื้��อเร�งการหมี�กแอลิกอฮอลิ� ให�ได�ด%กร%แรงๆ เมี��อผ�านื่"�าแลิ�วั จ'งหมี�กต�อไปในื่ภาชุนื่ะเด�มี จนื่กวั�าจะได�ควัามีแรงแอลิกอฮอลิ�ตามีต�องการ โดยท้��วัไปใชุ�เวัลิา 1 – 2 ส�ปดาห� หร�ออาจหมี�กถ'ง 1 เด�อนื่ 

(ท้%�มีา : เจร�ญ เจร�ญชุ�ย .วัารสาร จาร�พื้า ปHท้%� 8 ฉบ้�บ้ท้%� 60 (พื้ฤษภาคมี/มี�ถ�นื่ายนื่ 2544))

Page 44: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

44

4.2.3 ผลิของปร�มีาณ์การเก�ดเอท้านื่อลิ

เมี��อเก�ดกระบ้วันื่การหมี�กข'�นื่ย%สต�จะเปลิ%�ยนื่นื่"�าตาลิเป,นื่แอลิกอฮอลิ� ถ�าปร�มีาณ์ของนื่"�าตาลิท้%�เก�ดข'�นื่จาการย�อยของเชุ��อรามี%ปร�มีาณ์เท้�าไหร� ย%สต�จะสามีารถย�อยนื่"�าตาลิให�เป,นื่แอลิกอฮอลิ�ได�เพื้%ยงคร'�งหนื่'�ง เชุ�นื่ ปร�มีาณ์นื่"�าตาลิมี%ร�อยลิะ 50 ปร�มีาณ์ท้%�ย%สต�จะสามีารถย�อยนื่"�าตาลิให�เก�ดเป,นื่แอลิกอฮอลิ�ได�เพื้%ยงร�อยลิะ 25 เท้�านื่��นื่เพื้ราะนื่"�าตาลิท้%�เหลิ�อจะต�องเปลิ%�ยนื่เป,นื่สารอ��นื่ท้%�ให�รสแลิะกลิ��นื่ของเคร��องด��มีนื่��นื่ๆ แต�ท้��งนื่%�การท้%�จะเก�ดแอลิกอฮอลิ�ได�มีากหร�อนื่�อยข'�นื่อย*�ก�บ้สภาวัะโดยรอยท้%�เอ��อต�อการเจร�ญของย%สต�หร�อไมี� ท้��งนื่%�ส��งท้%�มี%ผลิต�อย%สต�ในื่กระบ้วันื่การเก�ดเอท้านื่อลิค�อ

-สารอาหาร

เนื่��องจากย%สต�ต�องการปร�มีาณ์นื่"�าตาลิท้%�เหมีาะสมีจ'งจะสามีารถผลิ�ต เอท้านื่อลิออกมีาได�อย�างเพื้%ยงพื้อหากปร�มีาณ์นื่"�าตาลิท้%�เก�ดข'�นื่มี%นื่�อยจนื่เก�ดไปเมี��อนื่"ามีากลิ��นื่จะได�ปร�มีาตรของ แอลิกอฮอลิ�ท้%�นื่�อยแลิะได�นื่"�าส�าค�อนื่ข�างมีากเนื่��องจากย%สต�ผลิ�ตแอลิกอฮอลิ�ออกมีาได�นื่�อย

-อ�ณ์หภ*มี�

ย%สต�จะสามีารถท้"างานื่ได�ด%ในื่ชุ�วังอ�ณ์หภ*มี� 10-25 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ถ�าอ�ณ์หภ*มี�ส*งมีากเก�นื่ไป ย%สต�จะหย�ดการท้"างานื่ท้�นื่ท้% แต�ถ�าควับ้ค�มีอ�ณ์หภ*มี�ให�อย*�ในื่ชุ�วังต"�าๆ การหมี�กก1จะเก�ดข'�นื่อย�างชุ�าๆท้"าให�เก�ดการผลิ�ตค�อนื่ข�างด%

-ควัามีเป,นื่กรด

Page 45: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

45

ควัามีจ"าเป,นื่ของหารท้"าให�นื่"�าหมี�กเป,นื่กรดเพื้ราะจะชุ�วัยป6องก�นื่เชุ��อปนื่เปE� อนื่ท้%�ได�จากแบ้คท้%เร%ย ถ�าแบ้คท้%เร%ยเจร�ญจะท้"าให�นื่"�าหมี�กบ้*ดเส%ยได� นื่อกจากนื่%�ย%สต�ย�งเจร�ญได�ด%ในื่สภาวัะท้%�นื่"�าหมี�กเป,นื่กรด

-เชุ��อปนื่เปE� อนื่

หากไมี�ควับ้ค�มีเชุ��อปนื่เปE� อนื่ท้%�มีาก�บ้วั�ตถ�ด�บ้ เมี��อเชุ��อสบ้โอกาสท้%�จะเจร�ญจะท้"าลิายนื่"�าหมี�ก เชุ�นื่ การเก�ดนื่"�าส�มีสายชุ*ท้"าให�มี%รสเปร%�ยวั อ%กท้��งย�งท้"าลิายสภาวัะท้%�เหมีาะสมีแก�การเจร�ญของย%สต�อ%กด�วัย

ซึ่'�งสอดคลิ�องก�บ้บ้ท้ควัามีท้างวั�ชุาการเก%�ยวัก�บ้เท้คโนื่โลิย%การผลิ�ตส�รา ในื่ร*ปแบ้บ้ไฟูลิ� PDF

โดย ดร. เจร�ญ เจร�ญชุ�ย แลิะนื่�กวั�ชุาการร�บ้เชุ�ญ

รายงานื่ผลิการศ'กษาผลิกระท้บ้ของการผลิ�ต amyl alcohol

เมี��อจลินื่พื้ลิศาสตร�แลิะผลิของการหมี�กเอท้านื่อลิท้%�มี%กากนื่"�าตาลิเป,นื่สารต��งต�นื่ การผลิ�ต amyl alcohol ท้%�ควัามีเข�มีข�นื่ข'�นื่ 1 กร�มี/ลิ�ตร ไมี�ได�ส�งผลิกระท้บ้ต�อการหมี�กแอลิกอฮอลิ� การผลิ�ตเคร��องด��มีแอลิกอฮอลิ� ท้%�มี%ควัามีเข�มีข�นื่ของแอลิกอฮอลิ� ข'�นื่อย*�ก�บ้ขนื่าดของเชุ��อ เมี��อระยะของการหมี�กเป,นื่อ�ตราส*งส�ดของการผลิ�ตเคร��องด��มีแอลิกอฮอลิ�

( ท้%�มีา : Kinetics of amyl alcohol production during

ethanol fermentation of blackstrap molasses Original Research Article

Biomass, Volume 1, Issue 2, October 1981, Pages 115-126

W. Borzani, M.L.R. Vairo, L.H. Koshimizu, M.R. De Melo

Cruz, L. Perego Jr.)การกลิ��นื่เป,นื่กระบ้วันื่การการแยกสารต��งแต� 2

ชุนื่�ดท้%�อย*�ในื่ของผสมีให�ออกจากก�นื่โดยอาศ�ยหลิ�กควัามีแตกต�างของ

Page 46: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

46

จ�ดเด�อดแลิะหลิ�กการแลิกเปลิ%�ยนื่มีวัลิสารระหวั�างมีวัลิสาร 2 สถานื่ะ ค�อ สถานื่ะของเหลิวัแลิะสถานื่ะไอ การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่เป,นื่วั�ธุ%การแยกของเหลิวัท้%�สามีารถระเหยได�ต��งแต� 2 ชุนื่�ดข'�นื่ไป มี% หลิ�กการเชุ�นื่เด%ยวัก�นื่ก�บ้การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา เพื้��อต�องการแยกองค�ประกอบ้ในื่สารลิะลิายให�ออกจากก�นื่ แต�ก1จะมี%ส�วันื่ท้%�แตกต�างจากการกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา ค�อ การกลิ��นื่แบ้บ้กลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่เหมีาะส"าหร�บ้ใชุ�กลิ��นื่ของเหลิวัท้%�เป,นื่องค�ประกอบ้ของสารลิะลิาย ท้%�จ�ดเด�อดต�างก�นื่นื่�อยๆ ในื่ข��นื่ตอนื่ของกระบ้วันื่การกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่จะเป,นื่การนื่"าไอของแต�ลิะส�วันื่ไปควับ้แนื่�นื่ แลิ�วันื่"าไปกลิ��นื่ซึ่"�าแลิะควับ้แนื่�นื่ไอเร��อย ๆ ซึ่'�งเท้%ยบ้ได�ก�บ้เป,นื่การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดาหลิาย ๆ คร��งนื่��นื่เอง ควัามีแตกต�างของการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่ก�บ้การกลิ��นื่แบ้บ้ธุรรมีดา จะอย*�ท้%�คอลิ�มีนื่� โดยคอลิ�มีนื่�ของการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่จะมี%ลิ�กษณ์ะเป,นื่ชุ��นื่ซึ่�บ้ซึ่�อนื่ เป,นื่ชุ��นื่ๆ ในื่ขณ์ะท้%�คอลิ�มีนื่�แบ้บ้ธุรรมีดาจะเป,นื่คอลิ�มีนื่�ธุรรมีดา ไมี�มี%ควัามีซึ่�บ้ซึ่�อนื่ของคอลิ�มีนื่� ท้"าให�เหมีาะแก�การค�ดแยกสารท้%�ได�จากกระบ้วันื่การหมี�กเพื้��อหาปร�มีาตรของเอท้านื่อลิท้%�ได�จากการหมี�กของลิ*กแป6งแต�ลิะส*ตรซึ่'�งนื่"�าหมี�กท้%�เก�ดข'�นื่ ค�อการผสมีของนื่"�าส�าก�บ้แอลิกอฮอลิ�แลิะสารชุนื่�ดอ��นื่ๆ เชุ�นื่ เมีธุ�ลิแอลิกอฮอลิ� ฟู*เซึ่ออยลิ� นื่"�าบ้ร�ส�ท้ธุ�Gจะมี%จ�ดเด�อดอย*�ท้%� 100 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ส�วันื่แอลิกอฮอลิ�จะมี%จ�ดเด�อดอย*�ท้%� 78.3 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส

จากการศ'กษาพื้บ้วั�าชุ�วังอ�ณ์หภ*มี�ท้%�ด%ท้%�ส�ดของการเก�ดเอท้านื่อลิ ค�อ อ�ณ์หภมี� 70-80 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส ซึ่'�งสอดคลิ�องก�บ้การวั�จ�ยการผลิ�ตไบ้โอเอท้านื่อลิจากมี�นื่ส"าปะหลิ�งของ รศ.ดร.เฉลิ�มี เร�องวั�ร�ยะชุ�ย อาจารย�ประจ"าภาคเคมี% คณ์ะวั�ท้ยาศาสตร� มีหาวั�ท้ยาลิ�ยขอนื่แก�นื่ท้%�พื้บ้วั�าเมี��อนื่"านื่"�าหมี�กไปกลิ��นื่เพื้��อให�ได�เอท้านื่อลิอ�ณ์หภ*มี�ท้%�เหมีาะสมีต�อการกลิ��นื่ ค�อ ชุ�วังอ�ณ์หภมี� 70-80 องศาเซึ่ลิเซึ่%ยส

Page 47: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

47

ข&อเสำนำอแนำะในำก�รว จั�ยคร�3งต*อไป็

1. ควัรเลิ�อกซึ่��อลิ*กแป6งจากสถานื่ท้%�ท้%�สามีารถเป9ดเผยส*ตรแลิะกระบ้วันื่การผลิ�ตลิ*กแป6งเพื้��อสามีารถท้%�จ"าข�อมี*ลิท้%�ได�จากการส"ารวัจมีาประกอบ้ในื่การท้"าวั�จ�ยเพื้��อนื่"าเสนื่อข�อเท้1จจร�งต�อไป

2. ควัรค�ดเลิ�อกข�าวัเหนื่%ยวัท้%�นื่"ามีาหมี�กหลิายๆสายพื้�นื่ธุ��เพื้��อให�สามีารถเปร%ยบ้เท้%ยบ้ได�วั�าข�าวัเหนื่%ยวัแต�ลิะพื้�นื่ธุ��ท้%�นื่"ามีาหมี�กได�ปร�มีาณ์ของเอท้านื่อลิแตกต�างก�นื่หร�อไมี�

บรรณ์�นำ�กรม

กนื่กวัรรณ์ แก�วัแกมีเส�อ การศ'กษาแนื่วัท้างในื่การเพื้��มีประส�ท้ธุ�ภาพื้การหมี�กกากนื่"�าตาลิ

Page 48: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

48

ในื่โรงงานื่ บ้ร�ษ�ท้ แสงโสมี จ"าก�ด จ�งหวั�ดกาญจนื่บ้�ร%, สารนื่�พื้นื่ธุ�วั�ท้ยาศาสตร�มีหาบ้�ณ์ฑ์�ต บ้�ณ์ฑ์�ตวั�ท้ยาลิ�ย มีหาวั�ท้ยาลิ�ยศ�ลิปกร, 2547.

เจร�ญ เจร�ญชุ�ย .2555.การผลิ�ตส�ราพื้��นื่บ้�านื่.(ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา : http://www.surathai.net. 26 มี�ถ�นื่ายนื่ 2555 นื่ภา โลิ�ห�ท้อง. 2537. กลิ�าเชุ��ออาหารหมี�กแลิะเท้คโนื่โลิย%การผลิ�ต. ภาควั�ชุาจ�ลิชุ%วัวั�ท้ยา คณ์ะวั�ท้ยาศาสตร� มีหาวั�ท้ยาลิ�ยเกษตรศาสตร�, 2537.

ร*ปการกลิ��นื่อย�างง�าย (ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา :http://web.ku.ac.th/schoolnet/snet5/distill.html 9 ก�นื่ยายนื่ 2555

ร*ปการกลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่ (ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา :http://www.il.mahidol.ac.th 9 ก�นื่ยายนื่ 2555

ร*ปเคร��องกลิ��นื่แบ้บ้หอกลิ��นื่ (ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา :

http://www.korattreat.net/node/19 9 ก�นื่ยายนื่ 2555

ร*ปการกลิ��นื่ส�ราโดยใชุ�หมี�อต�มี (ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา :http://www.vcharkarn.com/vcafe/60235/2 9 ก� นื่ ย า ย นื่ 2555

ปราโมีท้ย� ธุรรมีร�ตนื่� .2555.การท้"าข�าวัหมีาก.(ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา :http://www.ku.ac.th/e-magazine/january44/agri/kmak/ . 26 มี�ถ�นื่ายนื่ 2555 มีาโนื่ชุ โพื้ธุ�Gส*ง การผลิ�ตเอท้านื่อลิจากนื่"�าเชุ��อมีกลิ*โคสท้%�ได�จากการย�อยกากมี�นื่ส"าปะหลิ�งโดย

Page 49: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

49

แบ้คท้%เร%ย Zymomonas mobilis, มีหาวั�ท้ยาลิ�ยขอนื่แก�นื่, 2545.

ส�พื้�ฒนื่� โตวั�จ�กษณ์�ชุ�ยก�ลิ แลิะคณ์ะ.2555 .ส�ราพื้��นื่บ้�านื่ก�บ้การพื้�ฒนื่าเศรษฐก�จชุ�มีชุนื่ในื่พื้��นื่ท้%�จ�งหวั�ด ลิ"าปางแลิะลิ"าพื้*นื่.(ออนื่ไลินื่�). แหลิ�งท้%�มีา : http://library.cmu.ac.th/rsc/?newsdetail.php&id=96. 26 มี�ถ�นื่ายนื่ 2555 ส�รศ�กด�G แป6นื่แก�วั แลิะคณ์ะ การศ'กษากระบ้วันื่การผลิ�ตเอท้านื่อลิจากการหมี�กกลิ%เซึ่อรอลิด�บ้ซึ่'�งเป,นื่

ผลิพื้ลิอยได�จากกระบ้วันื่การผลิ�ตปาลิ�มีไบ้โอด%เซึ่ลิ , บ้ท้ควัามีวั�ชุาการ, การประชุ�มีเคร�อจ�าย พื้ลิ�งงานื่แห�งประเท้ศไท้ยคร��งท้%� 5, มีหาวั�ท้ยาลิ�ยนื่เรศวัร พื้�ษณ์�โลิก, 2552.

วั%ระส�ท้ธุ�G ก�ลิปLยากฤต แลิะ วัรศ�กด�G ชุ�างภา อ�ท้ธุ�พื้ลิของสารสก�ดหยาบ้สมี�นื่ไพื้รต�อจ�ลิ�นื่ท้ร%ย� ในื่ลิ*กแป6ง, ภาควั�ชุาเท้คโนื่โลิย%ชุ%วัภาพื้ คณ์ะอ�ตสาหกรรมีเกษตร มีหาวั�ท้ยาลิ�ยเกษตรศาสตร�, 2552.

อรวัรรณ์ ด%ส�ท้ธุ�G แลิะคณ์ะการลิดระยะเวัลิาการหมี�กเอท้านื่อลิในื่การผลิ�ตสาโท้โดยใชุ�

Rhizopus sp. แลิะย%สต�ผสมี,วัารสารวั�จ�ย มีข, 2553.Altntas, M.M., Ulgen, O.K., Kirdar, B. Improvement of ethanol production from starch by recombinant yeast through manipulation of environmental factors. Enzyme Microb. Tech. 31: 640-647, 2002.

Dung, N.T.P., Rombouts, F.M. Functionality of selected strains of moulds and yeasts from Vietnamese rice wine starers. Food Microbiol. 23:331-340, 2006.

Page 50: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

50

Tsuyoshi, N., Fudou, R., Yamanaka, S. Identification of yeast strains isolated from marcha in Sikkim a microbial starter for amylolytic fermentation. Int. J. Food Microbiol. 99 : 135 – 146. 2005.

Ulgen, O.K., Saygili, B., Onsan, Z.I. Bioconversion of starch into ethanol by a recombinant Saccharomyces serevisiae strain YPG-AB. Process. Biochem. 37 : 1157-1168, 2002

Page 51: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

51

ภู � คผนำวก

Page 52: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

52

จ�ดเตร%ยมีวั�สด�อ�ปกรณ์�วั�สด�อ�ปกรณ์�

ส*ตรลิ*กแป6ง

Page 53: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

53

บ้ดลิ*กแป6ง

Page 54: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

54

ชุ��งลิ*กแป6ง

Page 55: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

55

ชุ��งข�าวัเหนื่%ยวั กข 6

Page 56: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

56

ผสมีข�าวัเหนื่%ยวัก�บ้ลิ*กแป6งให�เข�าก�นื่

Page 57: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

57

ร�ดยางเก1บ้ไวั�อ�ณ์หภ*มี�ห�อง

Page 58: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

58

เต�มีนื่"�าท้�กๆ 5 วั�นื่

Page 59: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

59

นื่"ามีากลิ��นื่ลิ"าด�บ้ส�วันื่

Page 60: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

60

ปร�มีาณ์เอท้านื่อลิท้%�ได�

ป็ระว�ต ผ-&ว จั�ย

ชุ��อ : นื่ายคงกพื้�นื่ ต�นื่มีลิ

เก�ดวั�นื่ท้%� 7 เด�อนื่ ก�นื่ยายนื่ พื้.ศ.2534 อาย� 21 ปH

ท้%�อย*�ป;จจ�บ้�นื่ : บ้�านื่เลิขท้%� 72 หมี*� 2 ต"าบ้ลิ วั�งเง�นื่ อ"าเภอ แมี�ท้ะ จ�งหวั�ด ลิ"าปาง 52150

ประวั�ต�การศ'กษา

Page 61: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

61

-ประถมีศ'กษา โรงเร%ยนื่บ้�านื่ท้��งตอนื่ อ"าเภอแมี�ท้ะ จ�งหวั�ด ลิ"าปาง

-มี�ธุยมีศ'กษาตอนื่ต�นื่ โรงเร%ยนื่แมี�ท้ะประชุาสามี�คค% อ"าเภอแมี�ท้ะ จ�งหวั�ด ลิ"าปาง

-มี�ธุยมีศ'กษาตอนื่ปลิาย โรงเร%ยนื่แมี�ท้ะประชุาสามี�คค% อ"าเภอแมี�ท้ะ จ�งหวั�ด ลิ"าปาง

-ป;จจ�บ้�นื่ ก"าลิ�งศ'กษาระด�บ้ปร�ญญาตร% ชุ��นื่ปHท้%� 3

โปรแกรมี วั�ท้ยาศาสตร�

คณ์ะวั�ท้ยาศาสตร� มีหาวั�ท้ยาลิ�ยราชุภ�ฏิลิ"าปาง

งานื่อด�เรก : ฟู;งเพื้ลิง ด*หนื่�ง

ส%ท้%�ชุอบ้ : ส%แดง

อาหารท้%�ชุอบ้ : ผ�ดกระเพื้รา

คต�ประจ"าใจ : ท้"าวั�นื่นื่%�ให�ด%ท้%�ส�ด

Page 62: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

62

ป็ระว�ต ผ-&ว จั�ย

ชุ��อ : นื่างสาวัพื้จมีานื่ จงไกรจ�กร�

เก�ดวั�นื่ท้%� 16 เด�อนื่ มี%นื่าคมี พื้.ศ.2534 อาย� 21 ปH

ท้%�อย*�ป;จจ�บ้�นื่ : บ้�านื่เลิขท้%� 16 หมี*�4 ต"าบ้ลิ บ้�านื่กลิาง อ"าเภอ สอง จ�งหวั�ด แพื้ร� 54120

ประวั�ต�การศ'กษา

-ประถมีศ'กษา โรงเร%ยนื่บ้�านื่กลิาง(สนื่�ท้วั�ท้ยาการ) อ"าเภอสอง จ�งหวั�ดแพื้ร�

-มี�ธุยมีศ'กษาตอนื่ต�นื่ โรงเร%ยนื่พื้�ฒนื่าประชุาอ�ปถ�มีภ� อ"าเภอหนื่องมี�วังไข� จ�งหวั�ดแพื้ร�

-มี�ธุยมีศ'กษาตอนื่ปลิาย โรงเร%ยนื่พื้�ฒนื่าประชุาอ�ปถ�มีภ� อ"าเภอหนื่องมี�วังไข� จ�งหวั�ดแพื้ร�

-ป;จจ�บ้�นื่ ก"าลิ�งศ'กษาระด�บ้ปร�ญญาตร% ชุ��นื่ปHท้%� 3 สาขาชุ%วัวั�ท้ยา

คณ์ะวั�ท้ยาศาสตร� มีหาวั�ท้ยาลิ�ยราชุภ�ฏิลิ"าปาง

งานื่อด�เรก : ฟู;งเพื้ลิง อ�านื่หนื่�งส�อ

ส%ท้%�ชุอบ้ : ส%ฟู6า

อาหารท้%�ชุอบ้ : ต�มีย"าก��ง

คต�ประจ"าใจ : นื่กไมี�มี%ขนื่ คนื่ไมี�มี%การศ'กษา ย�อมีบ้�นื่ข'�นื่ท้%�ส*งไมี�ได�

Page 63: วิจัยการหมักเอทานอล ครั้ง3

63