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Vorläufiges Programm, interaktiv
1. Einordnung der Biotechnologie als eine Einführung
2. Der jetzige Stand3. Einige molekularbiologische Grundlagen4. Biotechnologische Methoden, die man kennen muss! Teil I5. Was sind Mutanten und wie werden sie erzeugt?6. Wie macht man gentechnisch veränderte
Pflanzen? 7. Biotechnologische Methoden, die man kennen
muss! Teil II8. Umweltaspekte und ethische Erwägungen
9. Biotechnologische Diagnostik
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Reaktionen zum Kopieren von Sequenzen
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Die Grundreaktion
1. PCR
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1. PCR
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1. PCR
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1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung
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1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung
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1. PCRSynthese in 5´- 3´-Richtung
3´ 5´
5´ 3´
5´
5´
3´
3´
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Viele Fehler sind möglich!1. PCR
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Die Primerlänge ist kritisch
1. PCR
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Prinzip der PCR
1. PCR
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1. PCR
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1. PCR
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1. PCR
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1. PCR
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1. PCR
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Verwendung der PCR-Reaktion1. Amplifizierung von DNA-Fragmenten zwischen den Primern2. Quantifizierung von DNA-Fragmenten3. Quantifizierung von RNA-Konzentrationen4. Lokalisierung von Inserts (getaggte Mutationen) in der DNA5. Charakterisierung von Genotypen (RAPD et al.)6. Einsatz für molekularte Marker
1. PCR
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2. Sequenzierung
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2. Sequenzierung
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2. Sequenzierung
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2. Sequenzierung
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1234567 dATPαS
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ATP-
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ATP-
+ PPi
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DNA polymerase — an enzyme that
synthesises DNA using nucleotide
phosphate (dNTP) according to the
single stranded DNA template. PPi
(inorganic phosphate) is formed as a by-
product.
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ATP sulfurylase — an enzyme that forms
ATP from adenosine phosphosulfate (APS)
and pyrophosphate (PPi).
Luciferase — an enzyme that catalyzes the
conversion of luciferin to oxyluciferin
with the liberation of light. It requires ATP.
Apyrase – an enzyme that destroys NTPs:
catalyses e.g. the hydrolysis of ATP to yield
AMP and inorganic phosphate Pi.
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?
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Key substrate: not used by DNA polymerase
Adenosine-5´-phosphosulphate (APS), substrate for ATP sulfurylase:
PPi + APS + ATP sulfurylase → ATP + by-product
APS
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dATP
?
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Key substrate:
Deoxyadenosine alpha-thiotriphosphate (= dATPαS):
accepted by DNA polymarese as ATP
but not by luciferase.
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(Synthesis)
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dATPαS
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1. Einordnung der Biotechnologie als eine Einführung
2. Der jetzige Stand3. Einige molekularbiologische Grundlagen4. Biotechnologische Methoden, die man kennen muss! Teil I5. Was sind Mutanten und wie werden sie erzeugt?6. Wie macht man gentechnisch veränderte
Pflanzen? 7. Biotechnologische Methoden, die man kennen
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9. Biotechnologische Diagnostik