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Vigilancia Resistencia Antimicrobiana Carbapenemasas
Dr. Juan Carlos Hormazábal O.
T.M. Soledad Prat M.
Subdepto. Enfermedades Infecciosas
Sección Bacteriología
Curso Microbiología Clínica SOCHINF 2017
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Decreto Vigilancia MINSAL N°158
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Vigilancia de Carbapenemasas
3
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RECEPCIÓN LABORATORIO AGENTES IAAS ISP
Enterobacterias
Imipenem y/o Meropenem : < 22 mm o > 2 ug/ml
y/o Test fenotípicos positivos
CONFIRMACIÓN SUSCEPTIBILIDAD :DIFUSIÓN Y CIM
TEST FENOTÍPICOS: HODGE + y/o A. BORÓNICO + o EDTA+
BLUE CARBA*
MICROBIOLOGIA MOLECULAR
PCR
FLUJOGRAMA: VIGILANCIA CARBAPENEMASAS
Laboratorio Referencia
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MICROBIOLOGIA MOLECULAR Determinación genes por PCR
Serin Carbapenemasas: KPC, GES, Sme, Nmc
Metalo Beta Lactamasa: IMP, VIM , NDM,SPM
Carbapenemasa tipo OXA: 23, 51,24, 48, 181, 370
PCR + BLEE: CTX-M, SHV, TEM, PER, OXA
GENOTIPIFICACIÓN
MLST PFGE
FLUJOGRAMA: VIGILANCIA CARBAPENEMASAS
Laboratorio Referencia
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Región
Año
2011 Año 2012 Año 2013 Año 2014 Año 2015 Año 2016
XV Arica Par. 18 30 11 0 0 2
I Tarapacá 1 4 1 12 1 0
II Antofagasta 2 20 4 17 15 12
III Atacama 0 2 1 11 2 3
IV Coquimbo 4 26 2 29 47 29
V Valparaíso 65 67 37 48 108 144
R.M. 185 503 714 723 906 1433
VI L.B.O’Higgins 4 20 6 13 13 20
VII Maule 2 26 5 8 41 49
VIII Bío Bío 10 9 25 36 32 143
IX Araucanía 23 59 44 41 76 73
X Los Lagos 3 50 90 64 19 15
XI Aysén 0 2 0 0 1 1
XII Magallanes 0 0 1 2 1 0
XIV de los Ríos 21 49 7 7 3 2
Total cepas 338 867 948 1011 1265 1926
Vigilancia Carbapenemasas Enterobacterias 2012 - 2016
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Total cepas estudiadas: 6017
Frecuencia carbapenemasas positivas:
Año 2012: 7 aislamientos de 867 (0,8%)
Año 2013: 13 aislamientos de 948 (1,4%)
Año 2014: 14 aislamientos de 1011 (1,4%)
Año 2015: 55 aislamientos de 1265 (4,4%)
Año 2016: 217 aislamientos de 1926(11,3%)
Total positivas: 303 aislamientos (5%)
Vigilancia Carbapenemasas Enterobacterias 2012 - 2016
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Distribuidas en 33 centros
hospitalarios de regiones
del país.
20 centros del sistema
público y 13 del sistema
privado
Carbapenemasas (+)
Años 2012 a 2016
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Tipo muestra
Años 2012- 2014
Año 2015
Año 2016
Total cepas + 34 55 217
Respiratorias 6 9 19
Sangre y
L. estériles
6
10
12
Heridas y
secreciones
7
6
16
Orina 10 15 33
hisopado rectal 5 15 137
Vigilancia Carbapenemasas en Enterobacterias
Cepas confirmadas por origen de muestra, 2012 2016
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KPC OXA NDM VIM
96 1 5
10 8 1
18
0
19 1 11
15 19
1
1
2
2 1
2016
217
Vigilancia Carbapenemasas Enterobacterias 2012 - 2016
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RECOMENDACIONES PARA INCLUSIÓN DE
PRUEBAS DE SCREENING PARA
CARBAPENEMASAS EN Klebsiella sp.
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TIPO
CARBAP
R: IMI R: MEM HODGE BORONICO BLEE EDTA* BLUE
CARBA
KPC
N= 213
147 141 213 213 132 0 213
OXA
N=2
2 (I) 2 (I) 2
débil
- - - 2
tardío
NDM
N=36
36 36 36 - - 36 36
VIM
N=14
14 14 10 var - - 14 14
TOTAL
N= 265
199 193 261 213 132 50 265
Detección Carbapenemasas
Test Fenotípicos Años 2012 al 2016 Oct.
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• Alcance: es posible evaluar todos los bacilos gram-
negativos, enterobacterias y BNF.
• Permite la detección mejorada de carbapenemasas tipo
NDM y tipo OXA.
Pruebas Fenotípicas Carbapenemasas:
Test de Hodge Mejorado J.C.M. Marzo 2016
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Tipo
carbapenemasa
Nº cepas
estudiadas
Sensible
COLISTIN
Sensible
TIGECICLINA
Sensible
FOSFOMICINA
KPC 213 198 170 150
NDM 36 33 32 33
VIM 14 13 14 11
OXA 2 2 1 2
Vigilancia Carbapenemasas
Años 2012- 2016
Antimicrobianos Alternativos
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cepas
estudiadas
Resistentes Sensibles Sin
estudio
Año 2016
1802 102 1675 25
% 100 5,6 92,9 1,4
Puntos de corte EUCAST 2016
Estudio resistencia a Colistin ISP
CLSI 2017
CLSI 2017
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Reciente detección gen mcr-1 “Mobile Colistin Resistance” localizado
en plásmidos, confiere resistencia a colistin/polimixinas, altamente
transferible
El gen mcr-1 codifica enzima fam. fosfoetalonamina transferasa, que
modifica la estructura del lípido de membrana externa, impidiendo la
interacción de la bacteria con las polimixinas
Mecanismo fenotípicamente indistinguible del mecanismo clásico
cromosomal de resistencia a polipéptidos
Gen mcr-1 se informó por primera vez en China el 2015, en E. coli en
alimentos y muestras clínicas
A la fecha se ha confirmado en América, Europa, Africa y Asia,
principalmente en E.coli, también en K. pneumoniae y Salmonella.
Hay casos relacionados carbapenemasas +: Oxa 48 y NDM
Emergencia Resistencia Plasmídica a Colistin
Gen mcr-1
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• En Argentina a la fecha, se han confirmado 9 cepas E. coli clínicas, portadoras
del gen mcr-1. Estudio retrospectivo en 6 hospitales entre 2012 al 2016. 87 cepas.
• Colombia 2016: reportó 7 cepas: S. Tm, E. coli, K. pneumoniae.
• Paraguay: reportó 1 cepa K. pneumoniae
Lab Referencia
no ha Detectado
Presencia de
mcr-1
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Aumento de frecuencia de cepas confirmadas desde el año
2012 (0,8%) al 2016 (11,3%)
En el período 2012-2016 se han confirmado
carbapenemasas en 306 aislamientos, siendo las más
frecuentes KPC (69.6%) y NDM (12,1%)
Esta magnitud es pequeña comparada a otras regiones,
sugiere que en nuestro país, la circulación y potencial
expansivo de carbapenemasas son aparentemente más
discretos
El aumento de cepas confirmadas, es en gran medida por
incremento de cepas de hisopado rectal (colonización)
De acuerdo a discusión con expertos locales, para
aumentar la sensibilidad de la vigilancia se remarcará la
utilización de pruebas de screening y exclusión del análisis
de las cepas provenientes de estudios de colonización
CONCLUSIONES
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Estudio de Carbapenemasas en
Pseudomonas aeruginosa
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P. aeruginosa no forma parte de un sistema de
vigilancia
Primeros casos confirmados Agosto 2015, Cepas
procedentes de la X Región
El ISP recomienda a los laboratorios del país la
realización de las pruebas de screening.
Dirigido especialmente en cepas aisladas de
pacientes críticos.
La característica de inclusión de las cepas es:
resistencia a imipenem, halo de 6 mm o CIM > 8
ug/mL.
Test rápidos de diagnóstico para carbapenemasas:
Blue Carba o Carba NP positivos.
Estudio P. aeruginosa Chile 2016
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OBJETIVO: Dimensionar el impacto que
pudiera tener esta especie en la diseminación
de KPC en nuestros hospitales
El ISP entre 15 de febrero al 15 de
mayo 2016 estudiará las cepas de
P. aeruginosa descritas
Circular P. aeruginosa KPC+
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RECEPCIÓN LABORATORIO AGENTES IAAS
Pseudomonas aeruginosa
Imipenem halo 6 mm o > 8 ug/mL
y Blue carba + o Carba NP +
CONFIRMACIÓN SUSCEPTIBILIDAD:DIFUSIÓN Y CIM
TEST FENOTÍPICOS:
BLUE CARBA* AZTREONAM
MICROBIOLOGIA MOLECULAR
PCR para KPC
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
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MICROBIOLOGIA MOLECULAR
Determinación genes por PCR
Serin Carbapenemasas: KPC
Metalo Beta Lactamasa: VIM
GENÉTICA MOLECULAR MLST PFGE
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
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Resultados
Entre febrero y mayo de 2016 se recibieron 123 cepas
de P. aeruginosa sospechosas de presencia de
carbapenemasas
El 58,5% (72/123) procedentes de la Región
Metropolitana, de éstas el 40,3% (29/72)
correspondieron a laboratorios privados y el 26,4%
(19/72) al Servicio de Salud Metropolitano Central
El 57,7% (71/123) fueron confirmadas mediante el test
de screening blue carba como cepas productoras de
carbapenemasas
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
RESULTADOS
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En el 31% (22/71) de las cepas confirmadas se identificó
el gen KPC, en el 59,2% (42/71) el gen VIM, en 1 cepa
no se identificaron genes de resistencia y en el 8,5%
(6/71) restante se confirmó fenotípicamente la presencia
de MBL.
El 77,3% (17/22) de las cepas en las que se identificó la
presencia del gen KPC proceden de la Región
Metropolitana y el 22,7% (5/22) del Servicio de Salud
Reloncaví.
Origen de las cepas KPC+: AET (7), heridas (4),
hisopado rectal (5), sangre (2), orinas (2), nasofaríngea
(2)
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
RESULTADOS
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En las cepas KPC positivas, se identificó presencia del
gen KPC-2.
En todas las cepas estudiadas para la identificación de
linajes por MLST, presentaron la secuencia tipo ST 654.
El estudio de subtipificación molecular mediante PFGE,
se identificaron los subtipos CL-PAE-SPE-085 y CL-
PAE-SPE-088 en 10 cepas respectivamente y CL-PAE-
SPE-087 en una cepa.
Los tres subtipos
genéticos identificados
presentan 95% similitud
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
RESULTADOS
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Resultados susceptibilidad
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa KPC+
RESULTADOS
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Conclusiones
Este estudio permitió conocer la circulación de cepas
P.aeruginosa KPC+ en Chile y estar alerta frente a la
diseminación de este mecanismo de resistencia
Se recomienda a todos los laboratorios utilizar test de
screening para la detección rápida de carbapenemasas
y el envío de cepas sospechosas al Instituto de Salud
Pública para confirmación
Si bien no constituye una vigilancia, el ISP recibirá para
estudio y caracterización todos los aislamientos
provenientes de brotes
Estudio ISP:
Pseudomonas aeruginosa presuntivamente KPC+
Conclusiones
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www.ispch.cl
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Vigilancia integrada de enfermedades zoonóticas y
transmitidas por alimentos
Dr. Stanley Maloy, Microbiólogo
• Decano del College of Sciences,
San Diego State University, USA.
• Ex presidente de la Sociedad
Americana de Microbiología
(ASM)
• Experto mundial en Microbiología
Molecular y Evolutiva
• Referente en el enfoque
microbiológico en UNA SALUD
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II Simposio Una salud y Vigilancia Integrada: Resistencia
Antimicrobiana una Amenaza Transversal
Salud Humana, Salud Animal, los Alimentos y el Ambiente
ISP-OPS Washington- ACHIPIA-SAG-SERNAPESCA-FAVET-MINSAL
15 – 16 Junio de 2017 Inscripciones Gratuitas
Instituto de Salud Pública de Chile
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GRACIAS
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RELAVRA- ANLIS/OPS
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