rumahedukasiipa.files.wordpress.com · web viewlaporan praktikum metabolisme reaksi hopkins-cole...
TRANSCRIPT
LAPORAN PRAKTIKUM METABOLISME
REAKSI HOPKINS-COLE
KELOMPOK 9 :
1. DIAN KURVAYANTI I (12030654018)
2. DENYS ARLIANOVITA (12030654019)
3. BELLA FIDDIINI R (12030654021)
4. ELLA WAHYUNI (12030654039)
5. NURUL FATHONAH (12030654050)
PEND. SAINS A 2012
UNIVERSITAS NEGERI SURABAYA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
PRODI PENDIDIKAN SAINS
2014
A. Judul Percobaan : Reaksi Hopkins-Cole
B. Tujuan Percobaan : Menguji kandungan Tryptophan pada bahan makanan
C. Kajian Teori :
Uji Hopkins-Cole digunakan untuk menunjukan inti indol asam aminotriptofan yang
ditandai dengan terbentuknya cincin berwarna ungu pada sampel percobaan. Jadi reaksi
Hopkins-Cole merupakan cara untuk menguji keberadaan Asam amino tryptofan pada
bahan makanan. Pereaksi Hopkins Cole mengandung asam glioksilat (HgSO4). Prinsip uji
Hopkins-Cole adalah kondensasi inti indol dengan aldehid dimana jika terdapat asam kuat
yang menyebabkan terbentuknya cincin ungu pada bidang batas. Reaksi tersebut hanya
akan berhasil jika ada oksidator kuat, seperti senyawa H2SO4 yang digunakan pada
percobaan ini. Fungsi penambahan asam sulfat ini adalah sebagai oksidator agar terbentuk
cincin ungu pada larutan sampel (Poedjiadi 2007).
Gambar 3.1 Reaksi Hopkins-Cole (Joshy dan Saraswat 2002)
Gambar 3.2 Gugus asam amino Triptofan (Yuwono Triwibowo 2005)
Larutan protein yang mengandung tryptofan direaksikan dengan asam glioksilat,
kemudian ditambahkan asam sulfat pekat sehingga membentuk larutan pekat berwarna
violet.
D. Rancangan Percobaan
1. Gambar Rangkaian
a.
Gambar 1. Larutan A dari larutan protein
encer
b.
Gambar 2. Larutan A dari larutan protein
encer dicampuran 1 mL formaldehid dan
1 tetes larutan millon
c.
Gambar 3. Larutan B dari larutan protein
pekat
d.
Gambar 4. Larutan B dari larutan protein
pekat dicampuran 1 mL formaldehid dan
1 tetes larutan millon
Larutan protein encer
1 mL formaldehid
Larutan protein encer
1 tetes larutan millon
Larutan protein pekat
1 mL formaldehid
Larutan protein pekat
1 tetes larutan millon
2. Alat dan Bahan
Alat:
- Tabung reaksi
- Pipet tetes
- Rak tabung
2 buah
4 buah
1 buah
Bahan:
- Larutan Millon
- Larutan Formaldehid
- Larutan H2SO4
- Putih Telor
10 mL
10 mL
10 mL
10 mL
3. Sifat Fisika dan Sifat Kimia bahan
1) Sifat Fisika
a. Formaldehid : cairan jernih (tidak berwarna), berbau menusuk, titik didih dan
titik cair yaitu 96oC dan –15oC
b. H2SO4 :
- Asam sulfat murni berupa cairan bening seperti minyak
- H2SO4 anhidrat adalah cairan yang sangat polar.
- Konstanta kesetimbangan autopirolisisnya adalalah
Kap(25 °C)= [H3SO4+][HSO4
−] = 2,7 × 10−4.
2) Sifat Kimia
a. Formaldehid :
Berat jenis dan pH : 1.08 gr/cm3 dan 2.8
Volatilasi (21oC) : 100
Kepadatan uap (1 atm): 1.04
Tekanan Uap: 1.3 @ pada 20
b. H2SO4 :
- Reaksi hidrasi asam sulfat sangatlah eksotermik
- asam sulfat bereaksi dengan kebanyakan basa, menghasilkan garam sulfat
- Asam sulfat bereaksi dengan kebanyakan logam via reaksi penggantian
tunggal, menghasilkan gas hidrogen dan logam sulfat
4. Langkah Percobaan
Langkah pertama membuat larutan A yaitu protein encer dan larutan B yaitu
protein pekat. Lalu masing-masing larutan di teteskan 1 mL formaldehid dan 1 tetes
larutan millon melalui dinding tabung. Kemudian mengocok hingga terjadi 2 lapisan.
Langkah terakhir adalah mengamati perubahan warna dan adanya endapan yang
terjadi kemudian mencatat pada tabel pengamatan.
E. Hasil Pengamatan
Dari praktikum yang telah kami lakukan di dapat data hasil pengamatan sebagai berikut.
No Bahan PerlakuanPengamatan
Sebelum Sesudah
1
Protein cair
Formaldehid
Milon
H2SO4
Dicampur
lalu
dikocok
Warna putih
bening
Bening
Bening
Bening
o Terbentuk 2
lapisan dan ada
lingkaran warna
ungu
2
Protein pekat
Formaldehid
Milon
H2SO4
Dicampur
lalu
dikocok
Warnanya
kuning
bening
Bening
Bening
Bening
o Terbentuk 2
lapisan. Lapisan
pertama
berwarna
bening
kekuningan dan
lapisan kedua
seperti endapan
berwarna
orange
keunguan
F. Analisis Data
Pada tabel dapat dilihat bahwa pada percobaan 1 dengan menggunakan bahan
uji berupa protein (putih telur) yang telah diencerkan, kemudian di campur dengan
reagen serta H2SO4. Dari percobaan ini diperoleh perubahan pada keadaan sebelum
perlakuan dan sesudah perlakuan. Semua bahan yang digunakan awalnya berwarna
bening/ putih bening. Kemudian setelah diperlakukan dengan dicampur dan dikocok
muncul 2 lapisan serta adanya cincin atau lingkaran ungu.
Sedangkan pada percobaan 2, bahan yang digunakan adalah sampel protein
(putih telur) pekat, kemudian dicampur dengan reagen dan H2SO4. Dari percobaan 2
diperoleh hasil perubahan yang berbeda dari percobaan 1. Pada percobaan 2 perubahan
yang terjadi adalah setelah perlakuan, terbentuk pula 2 lapisan. Namun tidak terbentuk
cincin ungu. Lapisan pertama/ atas berwarna bening kekuningan, sedangkan lapisan
kedua berbentuk seperti endapan berwarna putih dibagian bawah dan orange keunguan
dibagian atas.
G. Diskusi
Tryptofan merupakan satu dari 20 asam amino penyusun protein yang bersifat
esensial bagi manusia. Bentuk yang umum pada mamalia adalah, seperti asam amino
lainnya, L-triptofan. Meskipun demikian D-triptofan ditemukan pula di alam. Gugus
fungsional yang dimiliki triptofan, indol, tidak dimiliki asam-asam amino dasar lainnya.
Tryptofan bisa ditemukan pada telur, terutama bagian putih telur.
Dari data dapat diketahui bahwa uji protein Hopkins Cole yang pertama
menggunakan bahan protein cair, formaldehid, milon dan H2SO4 . Ketika semua bahan
telah dicampur terbentuk 2 lapisan dan ada lingkaran berwarna ungu. Hal ini
menunjukkan bahwa protein cair ini positif mengandung triptofan. Triptofan ini
mengandung gugus indol yang akan berkondensasi dengan aldehid bila ada asam kuat
yaitu H2SO4 sehingga terbentuk cincin berwarna ungu dibagian atas. Dalam hal ini
sebagai H2SO4 oksidator kuat.
Dengan reaksi :
Kedua menggunakan bahan protein pekat, formaldehid, milon dan H2SO4 .
Ketika semua bahan telah dicampur terbentuk 2 lapisan. Lapisan pertama berwarna
bening kekuningan dan lapisan kedua seperti endapan berwarna orange keunguan. Hal
ini menunjukkan bahwa protein pekat ini negatif mengandung triptofan. Cincin warna
ungu akan terbentuk jika triptofan mengandung gugus indol yang akan berkondensasi
dengan aldehid bila ada asam kuat yaitu H2SO4 . Protein pekat ini tidak mengandung
triptofan sehingga tidak terbentuk cincin warna ungu pada bagian atas. Adapun endapan
putih ini akibat penambahan milon. Apabila milon ditambahkan pada senyawa protein
yang mengandung asam amino dengan rantai samping gugus fenolik akan menghasilkan
endapan warna putih yang akan berubah menjadi merah jika dipanaskan. Sedangkan
warna kuning berasal dari warna protein pekatnya yang mengakibatkan lapisan kedua
seperti endapan berwarna putih kekuningan atau orange.
H. Kesimpulan
Uji triptofan pada protein dapat dilakukan dengan mencampurkan protein
dengan reagen Hopkins cole, diantaranya berbahan formaldehid, milon, dan penambahan
H2SO4 sebagai oksidator kuat. Uji triptofan dikatakan positif jika terbentuk cincin ungu
pada campuran. Reaksi yang terjadi pada uji triptofan ini adalah
LAMPIRAN
Pada protein cair terbentuk dua lapisan dengan lingkar ungu pudar
Pada protein pekat terbentuk dua lapisan yaitu adanya endapan
Bahan-bahan yang digunakan yaitu H2SO4, Formaldehid, dan Milon
DAFTAR PUSTAKA
Poedjadi, Ana dan Titin Supriyanti. 1994. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: Universitas Indonesia
Wirahadikusuma, Muhamad. 2001. Biokimia: Protein, Enzim dan Asam Nukleat. Bandung: Penerbit ITB
Sari,Risna dkk.2009.Laporan Praktikum Biokim Protein. http://www.scribd.com/doc/75367880/62148145-Laporan-Praktikum-Biokim-Protein-1 diakses pada tanggal 3 Juni 2014 Pukul 06.15 WIB
Perbedaan yang terlihat antara menggunakan protein cair dan protein pekat