Untuk menerapkan terapi onkologi pada manusia, peneliti mencoba memperpanjang hidup dengan menerapkan beberapa siklus pengobatan kemoterapi. Selama 4 hari setelah implantasi tumor, mencit menerima dua suntikan TMZ (Total 30 mg / kg, kelompok TMZ) atau dipuasakan selama 48 jam (kelompok STS). Mencit pada kelompok STS + TMZ menerima kombinasi kedua perlakuan (Gambar 5A). Sebelum memulai siklus yang kedua, kami membuat mencit dari kedua kelompok STS untuk mendapatkan kembali berat badan yang sama dengan kelompok yang tidak berpuasa (Gambar 5B). Pada periode ini sebagian besar mencit telah kehilangan sekitar 15% dari berat badan sebelumnya dan tampak lemah, menambah periode puasa pendek (24 jam) dan pemberian dosis tunggal 15 mg / kg dari TMZ pada hari ke-10 menjadi satu-satunya intervensi yang memungkinkanDua siklus pengobatan (STS atau TMZ) menunda kematian hewan yang menderita tumor dibandingkan dengan kelompok control (Gambar 5A), yang menunjukkan tingkat kelangsungan hidup yang mirip dengan yang diamati dalam percobaan kami sebelumnya intrakranial (Gambar 4C). Kelompok mencit yang menerima beberapa dosis TMZ menunjukkan penundaan onset kematian dibandingkan dengan mencit kelompok kontrol dan STS (hari-14 vs hari-12 vs hari-8, berurutan). Selanjutnya, munculnya morbiditas juga menjadi tertunda dibandingkan dengan mencit yang menerima satu dosis TMZ dalam percobaan sebelumnya (Gambar 4C, hari -13). Tambahan siklus ke-2 STS dan TMZ lebih lanjut mampu menunda morbiditas pada kelompok eksperimen yang menerima terapi kombinasi. Meskipun kemampuan kita untuk menunda timbulnya kematian pada bantalan tumor tikus dengan melakukan intervensi seperti kemoterapi dan puasa jangka pendek atau kombinasi pada keduanya, perkembangan yang sangat cepat dari model glioma intrakranial GL26luc tidak memungkinkan untuk kelangsungan hidup jangka panjang. Dalam kondisi klinis, di mana beban tumor berkurang melalui pembedahan, atau di mana tumor glioma kurang agresif, STS kaitannya dengan terapi adjuvan memberikan potensi yang lebih besar manfaatnya.

DISKUSITerapi multimodal dari GBM, melalui operasi pengangkatan tumor kemudian diikuti dengan kemoterapi dan radioterapi berhasil meningkatkan kelangsungan hidup pasien GBM. Namun, frekuensi kekambuhan dan perkembangan yang cepat pada orang dewasa menekankan perlunya peningkatan utama dari terapi untuk mencapai ketahanan hidup jangka panjang tanpa bergantung pada ketidakpastian dan jangka panjang dan proses pengembangan obat yang mahal.Selain itu, kemoterapi sering menyebabkan efek samping toksik yang berat dan bahkan mungkin gagal akibat resistensi obat sebagaimana glioma dan GBM secara khusus adalah tumor yang paling resisten terhadap kemoterapi [35,36].Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki apakah puasa yang cepat, murah dan mudah untuk diterapkan ke dalam pengobatan kanker oleh dokter, dapat meningkatkan efektivitas kemoterapi dan radioterapi dalam mengobati mouse model agresif GBM. Inokulasi intrakranial dari C57BL / 6 tikus dengan sel GL26luc menunjukkan perkembangan tumor yang progresif yang menyebabkan tanda-tanda keparahan penyakit seperti punggung membungkuk, mengurangi perawatan (mengacak-acak coat) dan penurunan aktivitas, mungkin terjadi akibat meningkatnya tekanan intrakranial. Satu siklus terapi TMZ pada hari ke 7 dan 8 setelah inokulasi tumor, atau melakukan STS selama 48 jam, memperpanjang kelangsungan hidup rata-rata selama 14-15 hari, meskipun efek ini secara statistik tidak signifikan. Sebaliknya,kombinasi STS dan TMZ menunda timbulnya kematian tetapi secara signifikan memperpanjang kelangsungan hidup rata-rata selama 16 hari. Hebatnya, salah satu hewan pada kelompok STS + TMZ mampu mencapai kelangsungan hidup jangka panjang. Hasil ini menunjukkan bahwa kombinasi puasa dengan TMZ, obat kemoterapi standar untuk pengobatan keganasan glioma, memiliki potensi untuk memperpanjang kelangsungan hidup, setidaknya dalam bagian dari subjek yang diobati.Ketika kami memperluas pengobatan untuk dua siklus, kami membatasi pengobatan yang ke-2 untuk 24 jam kelaparan karena hilangnya tubuh berat sebelum STS, mungkin karena beban tumor. Meskipun disingkat rejimen kelaparan dan mengurangi takaran TMZ, yang STS + kelompok TMZ menunjukkan kelangsungan hidup diperpanjang dibandingkan dengan siklus tunggal kelompok perlakuan (Gambar 4, 5). Meskipun hanya terlihat sebagai perbaikan yang terbatas dalam terapi lanjutan glioma, sensitisasi yang berbasis puasa memiliki potensi hasil kesembuhan yang lebih baik dalam pengobatan penyakit residu setelah pembedahan tumor.Semakin lama pasien bertahan hidup dalam model glioma subkutan dibandingkan dengan intrakranial memungkinkan kita untuk menganalisis efek yang menguntungkan dari STS dalam kombinasi dengan TMZ-atau radioterapi. Kedua terapi tersebut, merupakan terapi standar pada glioma, secara signifikan mampu menunda perkembangan tumor bila dikombinasikan dengan puasa. Secara khusus, STS saja sudah mampu memperlambat perkembangan tumor dalam model subkutan pada tingkat yang sebanding.

Informasi PendukungGambar S1 Glukosa darah dan level IGF-1 setelah 48 jam puasa di murine GL26 Model glioma (S.C.) (A) Pengambilan darah kadar glukosa dari C57BL / 6 tikus setelah 48 jam makan (kelompok STS dan kelompok STS + TMZ) atau kontrol makan ad libitum dan TMZ pada kelompok perlakuan hewan kemudian diukur menggunakan glucometer standar (ACCU-Chek). Darah diperoleh dengan menjepit ujung ekor dan glukosa dapat terbaca secara langsung. Hewan kontrol dan TMZ yang kelaparan selama 4 jam sebelum penarikan darah. (B) Efek dari puasa 48 jam dengan pengobatan TMZ pada serum IGF-1 dapat diukur dengan menggunakan IGF-1 ELISA spesifik (R & D Systems). potongan menunjukkan median; *** p, 0,001; ANOVA, beberapa Tukey perbandingan, berpuasa vs iklan lib kelompok untuk pengukuran glukosa; ttest, dua ekor untuk IGF-1.Gambar S2 pencitraan Bioluminescence intrakranial GL26luc pada hari ke 6 setelah inokulasi tumor. Ekspresi luminescent sel GL26luc intrakranial pada hari ke 6 setelah inokulasi tumor digunakan untuk menentukan ukuran tumor. hewan yang dibius menggunakan 2% isoflurane, disuntik dengan luciferin (ip, 50 mg / kg berat badan) dan dicitrakan menggunakan sistem Xenon IVIS. Daerah sasaran (ROI) yang digunakan untuk mendapatkan ekspresi bioluminescence. Berdasarkan kekuatan sinyal, hewan ditugaskan untuk kelompok eksperimen untuk mencapai pemerataan sebelum terapi dimulai.Profil berat badan untuk tikus diinokulasi dengan GL26luc glioma intracranially. Profil berat badan untuk hewan glioma-bearing menerima satu siklus jangka pendek baik kelaparan (STS), pengobatan TMZ atau keduanya. STS dan STS + TMZ pada hewan awalnya mengurangi berat badan selama siklus STS (grey area) tetapi akan mendapatkan kembali berat badan kontrol tidak diobati dan TMZ-diperlakukan hewan dalam 1 sampai 2 hari setelah ulang makan. TMZ dan STS + TMZ hewan menerima i.v. suntikan 15 mg / kg Temozolomide di hari 7 hari 8 (garis merah), dengan total 30 mg / kg dalam siklus pengobatan. Perkembangan tumor menyebabkan penurunan berat badan yang cepat berikut pengobatan pada semua kelompok eksperimen sedangkan garam disuntikkan shamanimals (tidak ada tumor) pulih dalam waktu satu sampai tiga hari dari Prosedur inokulasi. (PDF)