universidad de guayaquil facultad de medicina …repositorio.ug.edu.ec/bitstream/redug/39273/1/2019...

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TRABAJO DE TITULACIÓN

PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

TÍTULO

“VALORES HEMATOLÓGICOS RELACIONADOS CON LA PRESENCIA DE

EHRLICHIA EN PERROS”

AUTORES

ARELLANO IDROVO NAOMI ALINA

SAAVEDRA LUCAS ANDREA TATIANA

TUTOR

MVZ. KLEINER ARREAGA PANTALEÓN MSc.

GUAYAQUIL, 08 ABRIL 2019

III


CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

UNIDAD DE TITULACIÓN

REPOSITORIO NACIONAL EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA

FICHA DE REGISTRO DE TESIS

TITULO Y SUBTITULO: “Valores hematológicos relacionados con la presencia de Ehrlichia en perros”

AUTOR/ES:

Naomi Alina Arellano Idrovo

Andrea Tatiana Saavedra Lucas

TUTOR REVISOR:

MVZ. Galo Martínez Cepeda MSA.

INSTITUCIÓN:

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD:


CARRERA: MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

FECHA DE PUBLICACIÓN: 08 ABRIL - 2019

N. DE PAGS: 84

ÁREAS TEMÁTICAS: Salud y Sanidad Animal

PALABRAS CLAVE: EHRLICHIA CANIS, RHIPICEPHALUS SANGUINEUS, HEMOGRAMA

RESUMEN: Esta investigación tuvo como objetivo registrar los valores hematológicos en perros infectados con

ehrlichiosis atendidos en el consultorio veterinario ¨El fortín¨ de la ciudad de Guayaquil de octubre del

2018 a enero del 2019. Se analizaron 80 muestras y se detectó la presencia de E. canis en el 42,5% de

ellas mediante frotis sanguíneo e inmunocromatografía; en cuanto a los valores hematológicos que se

presentaron en los pacientes positivos, con respecto al hematocrito el 41,2% presentó anemia moderada,

según el volumen corpuscular medio el 94,1% tuvo anemia normocítica, de acuerdo a la concentración de

hemoglobina corpuscular media el 82,4% exhibió anemia normocrómica, el 91,2% tuvo trombocitopenia,

el 50% presentó un recuento de glóbulos blancos dentro del rango normal, el 55,9% mostró linfocitosis, el

88,2% manifestó un recuento de monocitos dentro del rango de referencia, el 67,6% tuvo reducción de

granulocitos, y el 97,8% de los animales enfermos no presentaron pancitopenia.

N. DE REGISTRO (en base de datos):

N. DE CLASIFICACIÓN:

DIRECCIÓN URL (tesis en la web):

ADJUNTO URL (tesis en la web):

ADJUNTO PDF: SI NO

CONTACTO CON AUTOR:

Teléfono:

0994583900

0939135076

E-mail:

[email protected]

[email protected]

CONTACTO EN LA INSTITUCION:

Universidad de Guayaquil

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE MEDICINA

VETERINARIA Y ZOOTECNIA

Teléfono:04-211-9498

E-mail: [email protected]

x

X

mailto:[email protected]



XI


CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA


LICENCIA GRATUITA INTRANSFERIBLE Y NO EXCLUSIVA PARA EL USO

NO COMERCIAL DE LA OBRA CON FINES NO ACADÉMICOS

Nosotras, Naomi Alina Arellano Idrovo con C.I. 0942534090 y Andrea Tatiana

Saavedra Lucas con C.I. 0931473680, certificamos que los contenidos

desarrollados en este trabajo de titulación, cuyo título es “Valores

hematológicos relacionados con la presencia de Ehrlichia en perros” son de

nuestra absoluta propiedad y responsabilidad y según el Art. 114 del CÓDIGO

ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS,

CREATIVIDAD E INNOVACIÓN*, autorizo el uso de una licencia gratuita

intransferible y no exclusiva para el uso no comercial de la presente obra con

fines no académicos, en favor de la Universidad de Guayaquil, para que haga

uso del mismo, como fuera pertinente.

________________________

Naomi Arellano Idrovo

C.I. N° 0942534090

________________________

Andrea Saavedra Lucas

C.I. N° 0931473680

*CÓDIGO ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN

(Registro Oficial n. 899 - Dic./2016) Artículo 114.- De los titulares de derechos de obras creadas en las

instituciones de educación superior y centros educativos.- En el caso de las obras creadas en centros educativos,

universidades, escuelas politécnicas, institutos superiores técnicos, tecnológicos, pedagógicos, de artes y los

conservatorios superiores, e institutos públicos de investigación como resultado de su actividad académica o de

investigación tales como trabajos de titulación, proyectos de investigación o innovación, artículos académicos, u

otros análogos, sin perjuicio de que pueda existir relación de dependencia, la titularidad de los derechos

patrimoniales corresponderá a los autores. Sin embargo, el establecimiento tendrá una licencia gratuita,

intransferible y no exclusiva para el uso no comercial de la obra con fines académicos.

XII

DEDICATORIA

Dedico este trabajo a mis padres Ana y Kléber, y a mis hermanos Gianella y

Andrés, quienes me han apoyado incondicionalmente a lo largo de mi vida

universitaria.


XIII

DEDICATORIA

Dedico este trabajo con mucho amor a mi madre, por demostrarme siempre su

cariño y apoyo incondicional; también a mis sobrinos, quienes llenan mis días

de alegría.


XIV

AGRADECIMIENTO

Agradezco a Dios por darme la salud y la fortaleza necesaria para terminar

exitosamente mi carrera.

A mi familia y amigos por darme ánimos a lo largo de mi vida, y especialmente

en esta etapa.

A mi mejor amiga y compañera de tesis Andrea Saavedra, sin la cual no

hubiera sido posible la elaboración de este trabajo investigativo.

A nuestro tutor MVZ. Kleiner Arrega, y a los docentes Dr. Pablo Torres y Dra.

Georgia Mendoza; gracias a su apoyo, guía, conocimiento y paciencia este

trabajo pudo llevarse a cabo.

Al personal del consultorio veterinario ¨El Fortín¨ en el cual se realizó esta

investigación, gracias por su ayuda y comprensión.


XV

AGRADECIMIENTO

Agradezco principal e infinitamente a Dios por ser mi guía y haberme dado la

fuerza y valor para culminar esta etapa de mi vida y permitirme ser una Médico

Veterinaria.

A mi familia, amigos y demás personas que siempre estuvieron a mi lado

apoyándome y ayudándome espontáneamente en todo momento sobre todo en

la realización de la tesis.

A mi mejor amiga Naomi Arellano por su leal amistad; quien también puso

esfuerzo y dedicación a este trabajo para alcanzar nuestra meta.

Al MVZ. Kleiner Arreaga, el cual fue mi tutor; por su calidad humana y todas

sus enseñanzas.

Finalmente, a los docentes Dra. Georgia Mendoza, Dr. Pablo Torres gracias

por su colaboración, orientación y su desprendimiento de tiempo para la

revisión de este trabajo.


XVI

ÍNDICE DE CONTENIDO

REPOSITORIO NACIONAL EN CIENCIA Y TECNOLOGÍA ............................ III

TRABAJO DE TITULACION ............................................................................ IV

CERTIFICACIÓN DE TUTOR ACADÉMICO .................................................... VI

CERTIFICADO PORCENTAJE DE SIMILITUD .............................................. VIII

CERTIFICACIÓN DE TUTOR REVISOR .......................................................... IX

LICENCIA GRATUITA INTRANSFERIBLE ...................................................... XI

DEDICATORIA ................................................................................................ XII

AGRADECIMIENTO ...................................................................................... XIV

ÍNDICE DE CONTENIDO ............................................................................... XVI

ÍNDICE DE TABLAS ...................................................................................... XIX

ÍNDICE DE GRÁFICOS .................................................................................. XX

ÍNDICE DE ILUSTRACIONES ....................................................................... XXI

ÍNDICE DE ANEXOS .....................................................................................XXII

RESUMEN ....................................................................................................XXIII

ABSTRACT .................................................................................................. XXIV

GLOSARIO ...................................................................................................... 25

I. INTRODUCCIÓN........................................................................................... 26

1.1 Planteamiento del problema ................................................................ 27

1.2 Justificación e importancia: ................................................................. 27

1.3 Objetivos de la investigación ............................................................... 28

1.3.1 Objetivo general: ............................................................................. 28

1.3.2 Objetivos específicos: .................................................................... 28

1.4 Variables ................................................................................................ 28

1.4.1 Variable dependiente ...................................................................... 28

1.4.2 Variables independientes ............................................................... 28

1.5 Hipótesis ................................................................................................ 29

1.5.1 Hi ...................................................................................................... 29

1.5.2 Ho ..................................................................................................... 29

II. MARCO TEÓRICO....................................................................................... 30

2.1 Ehrlichiosis ............................................................................................ 30

2.1.1 Ehrlichiosis canina ......................................................................... 30

2.1.2 Etiología ........................................................................................... 31

2.1.3 Taxonomía ....................................................................................... 31

XVII

2.1.4 Morfología ....................................................................................... 32

2.1.5 Ciclo de vida de Ehrlichia .............................................................. 33

2.1.6 Fases de la ehrlichiosis .................................................................. 33

2.1.7 Patogenia ......................................................................................... 35

2.1.8 Lesiones .......................................................................................... 35

2.1.9 Diagnóstico de ehrlichiosis ........................................................... 35

2.2 Ciclo evolutivo de Rhipicephalus sanguineus ................................... 37

2.3 Índices eritrocitarios ............................................................................. 38

2.4 Linfocitos ............................................................................................... 39

2.5 Leucocitos ............................................................................................. 39

2.6 Monocitosis ........................................................................................... 39

2.7 Trombocitopenia ................................................................................... 40

2.8 Pancitopenia .......................................................................................... 40

2.9 Anemia ................................................................................................... 41

2.9.1 Anemias regenerativas y no regenerativas .................................. 41

2.9.2 Características de las anemias regenerativas y no regenerativas

................................................................................................................... 42

2.9.3 Clasificación de las anemias según su morfología ..................... 42

2.9.4 Clasificación de la anemia según el grado de severidad ............ 43

2.9.5 Diagnóstico de la anemia ............................................................... 43

III. MARCO METODOLÓGICO ........................................................................ 45

3.1 Localización del lugar de la investigación .......................................... 45

3.2 Materiales y Personal ........................................................................... 46

3.2.1 Materiales de laboratorio ............................................................... 46

3.2.2 Materiales de oficina ....................................................................... 46

3.2.3 Personal de trabajo ......................................................................... 46

3.3 Tipo de investigación............................................................................ 47

3.4 Metodología de trabajo ......................................................................... 47

3.4.1 Analizador hematológico veterinario automático modelo RT-7600

VET ............................................................................................................ 47

3.4.2 Frotis sanguíneo y tinción ............................................................. 49

3.4.3 SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit ........................ 50

3.5 Variables en estudio ............................................................................. 50

IV. RESULTADOS ........................................................................................... 52

4.1 Presencia de E. canis ........................................................................... 52

4.2 Síntomas ................................................................................................ 53

XVIII

4.3 Raza ........................................................................................................ 55

4.4 Presencia de garrapatas ....................................................................... 57

4.5 Parámetros sanguíneos........................................................................ 59

V. DISCUSIÓN ................................................................................................. 62

VI. CONCLUSIONES ....................................................................................... 64

VII. RECOMENDACIONES .............................................................................. 65

BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................... 66

ANEXOS .......................................................................................................... 71

XIX

ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1. Clasificación taxonómica de Ehrlichia canis ................................. 31

Tabla 2. Clasificación de la anemia según el grado de severidad ............. 43

Tabla 3. Determinaciones que realiza el analizador hematológico ............ 48

Tabla 4. Rangos de referencia de test en blanco según el parámetro....... 49

Tabla 5. Prevalencia de E. canis ................................................................... 52

Tabla 6. Comparación de síntomas entre animales con y sin ehrlichiosis 53

Tabla 7. Presencia de E. canis según la raza ............................................... 55

Tabla 8. Prueba de chi-cuadrado según la raza ........................................... 56

Tabla 9. Presencia de E. canis según la presencia de garrapatas ............. 57

Tabla 10. Prueba de chi-cuadrado según la presencia de garrapatas ....... 58

Tabla 11. Comparación de parámetros sanguíneos entre animales con

presencia y ausencia de ehrlichiosis ........................................................... 59

XX

ÍNDICE DE GRÁFICOS

Gráfico 1. Porcentaje de Presencia de E. canis ........................................... 52

Gráfico 2. Comparación de síntomas entre animales con presencia y

ausencia de ehrlichiosis ................................................................................ 54

Gráfico 3. Porcentaje de razas positivas a ehrlichiosis .............................. 56

Gráfico 4. Casos positivos y negativos a ehrlichiosis según la presencia

de garrapatas .................................................................................................. 57

Gráfico 5. Comparación de valores hematológicos según la presencia y

ausencia de ehrlichiosis ................................................................................ 61

XXI

ÍNDICE DE ILUSTRACIONES

Ilustración 1. R. sanguineus hembra ............................................................ 30

Ilustración 2. Imagen microscópica de una mórula de E. canis en el

citoplasma de un monocito con objetivo 100x ............................................ 32

Ilustración 3. Canino con epistaxis............................................................... 34

Ilustración 4. Ciclo de vida de garrapata R. sanguineus ............................ 38

Ilustración 5. Vista satelital de veterinaria ¨El Fortín¨ ................................. 45

Ilustración 6. Vista frontal de veterinaria ¨El Fortín¨.................................... 45

XXII

ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1. Ficha de registro ............................................................................. 71

Anexo 2. Paciente #1(Panda) positivo a Ehrlichia ....................................... 72

Anexo 3. Mucosas pálidas en paciente #31(Pototo) ................................... 72

Anexo 4. Presencia de equimosis en el paciente #31 (Pototo) .................. 73

Anexo 5. Extracción de sangre de vena safena ........................................... 73

Anexo 6. Tubos con EDTA ............................................................................. 74

Anexo 7. Introducción de sangre en tubo .................................................... 74

Anexo 8. Mezclado de la sangre en el tubo .................................................. 74

Anexo 9. Frotis sanguíneo ............................................................................. 75

Anexo 10. Tinción de Wright Colorante Quimical® en vaso de Coplin ...... 75

Anexo 11. Porta placas .................................................................................. 75

Anexo 12. Aceite de inmersión ..................................................................... 76

Anexo 13. Revisión de placas en microscopio ............................................ 76

Anexo 14. Mórulas intraleucocitarias compatibles con Ehrlichia; 100x,

Wright Colorante Quimical® .......................................................................... 77

Anexo 15. SensPERT® Anaplasma/Ehrlichia canis Ab combo Test Kit ..... 78

Anexo 16. Instructivo de SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

......................................................................................................................... 78

Anexo 17. Folleto de SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit .... 79

Anexo 18. Resultados positivos al kit .......................................................... 80

Anexo 19. Analizador hematológico RT-7600 VET ...................................... 81

Anexo 20. Limpieza de aguja de aspiración previo a la realización de la

prueba ............................................................................................................. 82

Anexo 21. Introducción de aguja de aspiración en el tubo ........................ 82

Anexo 22. Resultados de hemogramas ........................................................ 83

Anexo 23. Registro de base de datos ........................................................... 84

XXIII

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y

ZOOTECNIA

CARRERA MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA


“Valores hematológicos relacionados con la presencia de Ehrlichia en

perros”

Autores: Naomi Alina Arellano Idrovo


Tutor: MVZ. Kleiner Arreaga Pantaleón MSc.

RESUMEN

Esta investigación tuvo como objetivo registrar los valores hematológicos en

perros infectados con ehrlichiosis atendidos en el consultorio veterinario ¨El

fortín¨ de la ciudad de Guayaquil de octubre del 2018 a enero del 2019. Se

analizaron 80 muestras y se detectó la presencia de E. canis en el 42,5% de

ellas mediante frotis sanguíneo e inmunocromatografía; en cuanto a los valores

hematológicos que se presentaron en los pacientes positivos, con respecto al

hematocrito el 41,2% presentó anemia moderada, según el volumen

corpuscular medio el 94,1% tuvo anemia normocítica, de acuerdo a la

concentración de hemoglobina corpuscular media el 82,4% exhibió anemia

normocrómica, el 91,2% tuvo trombocitopenia, el 50% presentó un recuento de

glóbulos blancos dentro del rango normal, el 55,9% mostró linfocitosis, el

88,2% manifestó un recuento de monocitos dentro del rango de referencia, el

67,6% tuvo reducción de granulocitos, y el 97,8% de los animales enfermos no

presentaron pancitopenia.

Palabras Claves: EHRLICHIA CANIS, RHIPICEPHALUS SANGUINEUS,

HEMOGRAMA

XXIV

FACULTY OF VETERINARY MEDICINE AND

ZOOTECHNICS

CAREER OF VETERINARY MEDICINE AND

ZOOTECHNICS

TITULATION UNIT

“Hematological values related to the presence of Ehrlichia in dogs”

Authors: Naomi Alina Arellano Idrovo


Tutor: MVZ. Kleiner Arreaga Pantaleón MSc.

ABSTRACT

The objective of this research was to record the hematological values in dogs

infected with ehrlichiosis treated at the veterinarian clinic "El fortín" in the city of

Guayaquil from October 2018 to January 2019. 80 Samples were analyzed and

the presence of E. canis was detected in 42,5% of them by blood smear and

immunochromatography; as for the hematological values that occurred in the

positive patients, according to the hematocrit 41,2% had moderate anemia,

according to the mean corpuscular volume 94,1% had normocytic anemia,

according to the mean corpuscular hemoglobin concentration 82,4% exhibited

normochromic anemia, 91,2% had thrombocytopenia, 50% presented a white

blood cell count within the normal range, 55,9% showed lymphocytosis, 88,2%

manifested a monocyte count within the reference range, 67,6% had

granulocyte reduction, and 97, 8% of the sick animals didn´t have pancytopenia.

Keywords: EHRLICHIA CANIS, RHIPICEPHALUS SANGUINEUS,

HEMOGRAM

25

GLOSARIO

EMC: Ehrlichiosis monocítica canina.

fL.: Femtolitros.

GRA: Granulocitos

HCT: Hematocrito.

HGB: Hemoglobina

LYM: Linfocitos.

MCH: Hemoglobina corpuscular media.

MCHC: Concentración de la hemoglobina corpuscular media.

MCV: Volumen corpuscular medio.

MID: Monocitos.

pg.: Picogramos.

PLT: Plaquetas.

RBC: Recuento de glóbulos rojos.

WBC: Recuento de glóbulos blancos.

26

I. INTRODUCCIÓN

La Ehrlichia canis se detectó por primera vez en Argelia en 1935 y es la

especie más común; en Ecuador también se ha encontrado E. chaffeensis, y en

Brasil la E. ewingii; se encuentra asociada a la anorexia, apatía, fiebre,

petequias, linfadenomegalia, equimosis, esplenomegalia, y trastornos

hemorrágicos; es muy frecuente en las regiones tropicales y subtropicales del

mundo, Ecuador es un país que disfruta de diversos pisos altitudinales con

variados ecotonos, y Guayaquil poseyendo los climas tropical y subtropical,

reúne las características necesarias para el mantenimiento y desarrollo de

garrapatas; la cual se transmite por la picadura de este ectoparásito

hematófago infectado con la bacteria, y según la especie tienen atracción por

granulocitos, linfocitos y monocitos.

El clima de Ecuador es propicio para la proliferación de garrapatas y los

animales se encuentran muy susceptibles a una infección por estos

ectoparásitos; en consecuencia, los dueños de mascotas en los últimos años

se han preocupado cada vez más por la salud de sus animales. Los valores

hematológicos son fundamentales para el diagnóstico de la enfermedad, la

anemia siendo una condición patológica que provoca decaimiento e impide el

desarrollo normal del paciente, es una de las mayores preocupaciones de

dichos propietarios; por lo tanto, el veterinario conociendo los valores normales

de un hemograma, puede indicar un adecuado tratamiento para el animal.

Los cambios hematológicos más comunes son leucopenia, trombocitopenia,

anemia no regenerativa. El propósito de este trabajo es analizar los cambios

hematológicos más comunes en caninos con ehrlichiosis.

27

1.1 Planteamiento del problema

Siendo la ehrlichiosis una enfermedad que puede ser potencialmente mortal, es

necesario conocer las alteraciones que provoca en el organismo y en los

valores hematológicos; teniendo en cuenta que la misma suele ser

asintomática durante meses, y que es relativamente de fácil transmisión a

través de garrapatas, consideramos necesario la utilización de exámenes de

laboratorio para determinar las alteraciones que provoca, teniendo en cuenta

que una detección temprana de los valores hematológicos anormales puede

ser un factor decisivo en el tratamiento del mismo, debido a que la enfermedad

puede llegar a ser mortal, y un hemograma rutinario podría ayudar a la

detección temprana de la enfermedad.

1.2 Justificación e importancia:

La presente investigación, que se realizó en la Veterinaria ¨El Fortín¨ de la

ciudad de Guayaquil es necesaria porque nos permitió conocer los valores

hematológicos que se pueden encontrar en perros con ehrlichiosis. De esta

manera aplicaremos nuestros conocimientos clínicos, puesto que es un

problema de gran magnitud en la población canina. El contexto socio-

económico es un factor muy importante, ya que la sociedad muestra un

desinterés o falta de recursos necesarios para llevar un adecuado control de

garrapatas, y mucho menos para realizar los análisis necesarios para confirmar

la presencia de E. canis, por lo que muchas veces se realizan tratamientos sin

haber confirmado la enfermedad o la severidad de la misma. Es importante que

se realicen estudios determinando las anormalidades que se encuentran en un

animal infectado por esta rickettsia, así el médico podrá tener un mejor

entendimiento de la situación de la enfermedad, lo que ayudará en la toma de

medidas adecuadas para controlarla.

28

1.3 Objetivos de la investigación

1.3.1 Objetivo general:

Determinar los valores hematológicos relacionados con la ehrlichiosis en

perros.

1.3.2 Objetivos específicos:

1. Confirmar la presencia de ehrlichiosis mediante frotis sanguíneo y

SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit.

2. Establecer si la presencia de garrapatas y la raza son factores asociados

a la presencia de E. canis.

3. Determinar los valores hematológicos frecuentes en perros infectados

con ehrlichiosis.

1.4 Variables

1.4.1 Variable dependiente

Presencia de Ehrlichia

1.4.2 Variables independientes

- Sintomatología

- Presencia de garrapatas

- Raza

- Valores hematológicos

29

1.5 Hipótesis

1.5.1 Hi

La ehrlichiosis provoca alteraciones en los valores hematológicos.

1.5.2 Ho

La ehrlichiosis no provoca alteraciones en los valores hematológicos.

30

II. MARCO TEÓRICO

2.1 Ehrlichiosis

2.1.1 Ehrlichiosis canina

Son bacterias parasitas intracelulares obligadas, que infectan leucocitos o

plaquetas, y provocan ehrlichiosis en humanos y animales, tanto domésticos

como silvestres (Cuello, Salinas, Caro, & Gallego, 2002).

La ehrlichiosis canina puede ser ocasionada por E. canis, E. ewingii y E.

chaffeensis (Gutiérrez, Pérez, & Agrela, 2016). Ramsey & Tennant (2012)

manifestaron: ‘‘La enfermedad canina está causada primariamente por E. canis

y es transmitida por la garrapata Rhipicephalus sanguineus’’.

Ilustración 1. R. sanguineus hembra (CDC, 2017).

31

2.1.2 Etiología

La E. canis se encuentra distribuida mundialmente y sus hospedadores

vertebrados incluyen miembros de la familia Canidae; el coyote, zorro y chacal,

además del perro doméstico, son huéspedes reservorio (Zapata, 2016).

El agente causante raras veces se observa formando colonias de cuerpos

cocoides en el citoplasma leucocitario. Los monocitos son las células afectadas

con mayor frecuencia, aunque algunas cepas pueden afectar solamente a los

neutrófilos o a los eosinófilos, o ambos. La garrapata parda del perro

(Rhipicephalus sanguineus) es el vector y reservorio primario y puede transmitir

la enfermedad hasta por 5 meses después de haber adquirido la bacteria

durante su alimentación. Las transfusiones de sangre u otros medios por los

cuales se transfieren los leucocitos infectados, también pueden transmitir la

enfermedad (Fraser, 1993).

2.1.3 Taxonomía

Tabla 1. Clasificación taxonómica de Ehrlichia canis

Dominio Bacteria

Filo Proteobacteria

Clase Alphaproteobacteria

Orden Rickettsiales

Familia Anaplasmataceae

Género Ehrlichia

Especies Ehrlichia canis

Basado en (NCBI, 2017).

32

2.1.4 Morfología

La ehrlichiosis monocítica canina (EMC) es causada por la rickettsia E. canis,

son bacterias intracelulares obligadas gramnegativas, cocoides pleomórficas

pequeñas, transmitidas por garrapatas y que parasitan el citoplasma,

principalmente de los leucocitos (monocitos, macrófagos y granulocitos)

circulantes, en grupos de organismos denominados mórulas (Zapata, 2016).

E. canis presenta tres estadíos: cuerpos elementales, cuerpos iniciales y

mórulas. Los cuerpos elementales son las formas maduras infectantes

extracelulares de 0,4 a 0,6 μm de diámetro, se adhieren a la superficie de la

célula diana y entran por endocitosis mediada por caveolas (balsas celulares

lipídicas), los cuerpos elementales se transforman en una forma intermedia IM1

y pasa al cuerpo reticular (CR) con 0,4-0,6 µm de ancho por 0,7-1,9 µm de

largo; la forma CR se multiplica por fisión binaria y forman inclusiones

citoplasmáticas inmaduras de 1,0 a 2,5 µm de diámetro denominadas cuerpos

iniciales; después se transforman en unas formas intermedias IM2 hasta formar

las mórulas que son vacuolas con 20 a 40 cuerpos elementales y pueden

observarse en el microscopio como inclusiones intracitoplasmáticas que se

colorean de azul con las coloraciones tipo Romanoswsky, estas mórulas

pueden ser redondas y medir aproximadamente 4 a 6 µm de diámetro o

también pueden ser ovaladas (Gutiérrez et al., 2016).

Ilustración 2. Imagen microscópica de una mórula de E. canis en el citoplasma de un monocito con objetivo 100x (Sainz, et al., 2015).

33

2.1.5 Ciclo de vida de Ehrlichia

Su ciclo de vida incluye las etapas de reproducción que tienen lugar tanto en

las garrapatas Ixodidas, que actúan como vectores, como en los animales

vertebrados. Son capaces de causar una infección persistente en los

hospedadores vertebrados, lo que les permite ser reservorios del agente de la

noxa. Las garrapatas Ixodidas son capaces de transmitir Ehrlichia spp. y

Anaplasma spp. transestadialmente (de larvas a ninfas y de ninfas a adultos)

en lugar de transováricamente (de huevos a nueva generación de garrapatas);

alimentándose de animales previamente infectados, las garrapatas no

infectadas se infectan y en la siguiente etapa puede transmitir el agente

infeccioso a otros mamíferos. Cuando las garrapatas se alimentan de

hospedadores infectados, los patógenos entran primero en el epitelio del

intestino medio de la garrapata, donde tiene lugar su replicación primaria.

Luego, los patógenos se mueven hacia las glándulas salivales de la garrapata

para invadir las células epiteliales. En las células epiteliales salivales, la

bacteria se somete al segundo ciclo de replicación y entra en la secreción, para

continuar su ciclo a otro hospedador (Rar & Golovljova, 2011).

2.1.6 Fases de la ehrlichiosis

La EMC, es una enfermedad multisistémica causada por E. canis,

caracterizada por tres etapas: aguda, subclínica y crónica. En el organismo, la

E. canis entra en los monocitos y macrófagos del hospedador y se esparce a

través del sistema monocito macrófago en el cuerpo. El período de incubación

es de 8-20 días, cuando la bacteria se multiplica en macrófagos y se esparce a

través del cuerpo (Atanaskova, et al., 2018).

La ehrlichiosis es considerada por muchos como una enfermedad más común

en verano, la enfermedad se puede presentar durante todo el año y en varias

condiciones climáticas, además pueden verse afectados perros de cualquier

edad (Durán, 2012).

34

1. Fase aguda: Dura aproximadamente 2-4 semanas. Los síntomas son muy

poco específicos:

– Apetito caprichoso, apatía, pérdida de peso y, en ocasiones, incremento

del tamaño de los ganglios linfáticos y del bazo. Esta fase en algunos

animales se puede superar espontáneamente aún sin tratamiento.

2. Fase subclínica: En esta fase no existe ninguna sintomatología. Puede

durar desde unas semanas hasta incluso años. Sólo mediante análisis se

puede detectar:

– Aumento de las globulinas (un tipo de proteínas de la sangre)

– Leve trombocitopenia (disminución del número de plaquetas).

3. Fase crónica: Es la que habitualmente llega a nuestro centro. El cuadro

clínico más frecuente es el de un animal con:

– Fiebre, apatía y anorexia, cuadro que es común a muchos procesos

patológicos.

– Aumento de tamaño de los ganglios linfáticos.

– Signos hemorrágicos: sangre en heces, en orina, por la nariz, en las

conjuntivas oculares, encías sangrantes, etc.

– Problemas musculares y articulares: cojeras, caminar envarado.

– Problemas respiratorios, alteraciones cardíacas, neurológicos (meningitis),

cutáneos, oculares, etc.

– Insuficiencia renal (Speroni, 2014).

Ilustración 3. Canino con epistaxis (Speroni, 2014).

https://www.veterinariargentina.com/revista/wp284/wp-content/uploads/FORO-UNO557.jpg

35

2.1.7 Patogenia

Estos microorganismos llegan a la sangre tras la picadura de una garrapata.

Desde allí afectan los leucocitos circundantes y células del sistema

reticuloendotelial. En el interior de las células inhiben la fusión fagosoma-

lisosoma y retrasan la apoptosis. Las ehrlichias se aglomeran en el citoplasma

de las células que infectan, formando unas inclusiones observables al

microscopio óptico denominadas mórulas. Al ser infecciones sistemáticas,

provocan daño en diferentes órganos y sistemas (Oteo, 2009).

2.1.8 Lesiones

Entre los hallazgos histopatológicos que se pueden encontrar en caninos

infectados con E. canis, se encuentran hemorragias petequiales y equimóticas

en las superficies serosas y mucosas de la cavidad nasal, tracto

gastrointestinal, vejiga urinaria y tejido subcutáneo (Gutiérrez et al., 2016).

Las lesiones generalmente no son específicas, pero es común observar

esplenomegalia. En los casos crónicos estas lesiones pueden ser

acompañadas de hemorragias difundidas y aumento de la infiltración de células

mononucleares a los órganos (Fraser, 1993).

2.1.9 Diagnóstico de ehrlichiosis

La Ehrlichia infecta a leucocitos circulantes dentro de los cuales se multiplica

en el interior de vacuolas fagocíticas. El diagnóstico se confirma mediante la

observación de cuerpos de inclusión típicos en los leucocitos y con el hallazgo

de un aumento en cuatro veces del título de anticuerpos (Brooks, Butel, &

Ornston, 1996).

Se confirma el diagnóstico mediante la observación de los microorganismos

dentro de los leucocitos o por una combinación de los síntomas, y su respuesta

36

al tratamiento; además los caninos con ehrlichiosis pueden tener un sólo linaje

celular disminuido como por ejemplo la presencia de trombocitopenia;

manifestar linfocitosis, e hiperglobulinemia, en frotis sanguíneo es raramente

visto el microorganismo (Thrall, 2012; Fraser, 1993).

Debido a que en un paciente pueden coexistir infecciones mixtas causadas por

otros microorganismos transmitidos por garrapatas, la visualización de mórulas

en una extensión de sangre tomada con tinción de Giemsa o Wright es muy

sugestiva (Oteo, 2009).

Aunque la bacteria individual tiene generalmente menos de 0,5 μm de

diámetro, estas bacterias se multiplican por fisión binaria dentro de la vacuola

citoplasmática hasta formar una microcolonia o mórula, la cual se puede

observar con coloraciones tipo Romanoswsky como una inclusión granular

basófila en el citoplasma de monocitos y linfocitos, en el caso de E. canis o E.

chaffeensis y en neutrófilos en el caso de E. ewingii, midiendo entre 4-6 μm de

diámetro (Gutiérrez et al., 2016).

El diagnóstico de EMC se puede complicar por la aparición de coinfecciones

con otros patógenos transmitidos por vectores, entre ellos A. platys, B. canis, B.

vogeli, B. microti-like, H. canis y L. infantum (René-Martellet, et al., 2015).

El diagnóstico diferencial, durante la etapa aguda, debe incluir otras causas de

fiebre y linfadenopatía (como fiebre de las Montañas Rocosas, brucelosis,

blastomicosis, endocarditis), enfermedades mediadas por la inmunidad,

especialmente la trombocitopenia y el lupus eritematoso sistemático, y el

linfosarcoma. El diagnóstico diferencial durante la etapa crónica debe descartar

toxicidad por estrógeno, mieloptisis, pancitopenia mediada por inmunidad y

otras enfermedades asociadas con trastorno orgánicos específicos como

glomerulonefritis (Fraser, 1993).

37

2.2 Ciclo evolutivo de Rhipicephalus sanguineus

Las garrapatas Ixodidas de tres hospedadores tienen un ciclo de vida que

generalmente abarca tres años, aunque algunas especies pueden completar

el ciclo en solo dos años.

1. Las hembras adultas dejan el tercer huésped para poner huevos después

de la alimentación.

2. Los huevos eclosionan en larvas de seis patas.

3. Las larvas buscan y se unen al primer huésped, generalmente un

pequeño roedor.

4. Después en el verano, las larvas engordadas abandonan al primer

huésped

5. Y se mudan a las ninfas,

6. Las ninfas buscan y se unen al segundo huésped,

7. Usualmente otro roedor o lagomorfo. Las ninfas se alimentan del

segundo huésped y lo dejan más tarde en el verano. 7a-7b) Las ninfas se

transforman en adultos fuera del anfitrión hibernan en esta etapa.

8. Los adultos buscan y se unen a un tercer huésped, que generalmente es

un herbívoro más grande (incluidos los cérvidos y bóvidos), carnívoro o

humano. Los adultos se alimentan y se aparean en el tercer huésped.

Las hembras dejan al huésped para continuar el ciclo. Las hembras

pueden volver a unirse y alimentarse varias veces. Los tres

hospedadores no necesariamente tienen que ser especies diferentes, o

incluso individuos diferentes. Además, los humanos pueden servir como

primer, segundo o tercer huésped (CDC, 2017).

38

Ilustración 4. Ciclo de vida de garrapata R. sanguineus (CDC, 2017).

2.3 Índices eritrocitarios

Thompson, Husney, & Gabica (2017) indicaron: Existen tres índices de

glóbulos rojos: volumen corpuscular medio (MCV, por sus siglas en inglés),

hemoglobina corpuscular media (MCH, por sus siglas en inglés) y

concentración de hemoglobina corpuscular media (MCHC, por sus siglas en

inglés). Se miden con una máquina y sus valores se obtienen de otras

mediciones realizadas en un hemograma completo.

Volumen corpuscular medio: Es el volumen medio de los eritrocitos, expresado

en femtolitros (fL.), 10-15 L: MCV= Hematocrito (%) x 10/ recuento de eritrocitos

(x 1012/L). Hemoglobina corpuscular media: Es el peso medio de la Hb en un

eritrocito, expresada en picogramos (pg.), 10-12 g: MCH= Hemoglobina (g/dL) x

10/recuento de eritrocitos (x 1012/L). Concentración de la hemoglobina

corpuscular media: Es la concentración media de Hb en cada eritrocito. Las

unidades usadas son gramos por decilitro: MCHC= Hemoglobina (g/dL) x 100

hematocrito (%) (Clark & Hippel, 2004).

39

2.4 Linfocitos

Linfocitosis: Aumento del número de linfocitos por encima de los valores de

referencia fisiológicos para la especie. Causas: fisiológica en animales jóvenes

(sobre todo en gatos), inducida por liberación de epinefrina, fisiopatológica por

estimulación antigénica prolongada (post vacuna, infecciones/inflamaciones

crónicas), ehrlichiosis, enfermedades linfoproliferativas.

Linfopenia: Disminución del número de linfocitos por debajo de los valores de

referencia fisiológicos para la especie. Causas: niveles elevados de corticoides

(leucograma de estrés), enfermedades víricas, pérdida de linfa rica en linfocitos

(quilotórax), inmunosupresión por radiación y quimioterápicos (Sanz, 2017).

2.5 Leucocitos

Los leucocitos intervienen en la defensa del organismo contra sustancias

extrañas. La leucocitosis puede ocurrir en las leucemias, procesos infecciosos.

La leucopenia puede suceder por lesiones en la médula ósea (quimioterapia,

invasión de células cancerígenas o invasión por microorganismos) (Alfaro,

2019).

2.6 Monocitosis

En general la podemos ver asociada a cualquier inflamación o bien como parte

del leucograma de estrés. Recuentos muy elevados pueden sugerir leucemias;

se debe evaluar bien el frotis para descartar o confirmar la presencia de células

blásticas (las células inmaduras de la médula ósea) (Sanz, 2017).

40

2.7 Trombocitopenia

Se considera que la trombocitopenia es la anormalidad hematológica más

común y consistente de perros infectados natural o experimentalmente con E.

canis; ésta ocurre en más del 90% de los perros infectados. La trombocitopenia

en la EMC se atribuye a diferentes mecanismos en las diferentes etapas de la

enfermedad (Gutiérrez et al., 2016).

Entre los trastornos de las plaquetas se puede encontrar la trombocitopenia

adquirida, está presente con frecuencia en perros y raramente en otras

especies; posee varias causas, la mayoría está relacionada a la destrucción

inmunológica o directa de plaquetas.

La E. canis provoca trombocitopenia de leve a grave en perros, y rara vez es lo

suficientemente intensa como para ocasionar el sangrado clínico (Merck,

2007).

Para perros, se utilizan en muchos laboratorios valores de referencia del

recuento de plaquetas de 200 a 500 x 109/L, tal y como históricamente se ha

descrito en la literatura. Sin embargo, algunos valores de referencia

establecidos recientemente utilizan aproximadamente 150 x 109/L como el

límite inferior de lo normal (Sullivan et al., 1995). Por tanto, los perros con leve

trombocitopenia según algunos laboratorios serían normales (Villiers, 2012).

2.8 Pancitopenia

Es la reducción del recuento de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en la sangre

por debajo del rango normal; por lo tanto, es la combinación de anemia,

leucopenia y trombocitopenia (Lipton, 2019).

No es una enfermedad en sí, sino el signo de una enfermedad que necesita ser

diagnosticada. Se trata de un problema hematológico bastante frecuente en la

práctica clínica y debe sospecharse cuando un paciente presenta palidez,

fiebre prolongada y tendencia a los sangrados (González, Vallejo, Gómez,

Ortega, & Panadero, 2018).

41

2.9 Anemia

Anemia es una condición médica en la que la concentración de hemoglobina y

el RBC son inferiores al rango normal. Las principales causas de anemia son la

disminución de RBC, síntesis de hemoglobina insuficiente o aumento de la

destrucción de glóbulos rojos, y la causa primaria es una deficiencia de hierro

(Elsayid, Al-Qahtani, Alanazi, & Qureshi, 2015).

Existen muchas causas de la anemia; todas ellas entrarían en uno de estos dos

grupos:

Anemia producida por una reducción de eritrocitos (causando anemia no

regenerativa).

Anemia producida por un aumento de la pérdida de eritrocitos (causando una

anemia regenerativa). Esto puede ser consecuencia de hemorragia o hemólisis.

(Villiers, 2012)

La anemia no es una enfermedad, sin embargo es la manifestación clínica de

otro problema, es decir que es el resultado en el paciente de una patología de

base (Durán, 2012).

La anemia se clasifica de acuerdo a su morfología, volumen corpuscular medio

y el ancho de distribución de los glóbulos rojos (Lanzkowsky, Lipton, & Fish,

2016).

2.9.1 Anemias regenerativas y no regenerativas

La anemia se clasifica como regenerativa o no regenerativa. Con la anemia

regenerativa, la médula ósea responde adecuadamente a la disminución de la

masa de glóbulos rojos al aumentar la producción de glóbulos rojos y liberar

reticulocitos. Con la anemia no regenerativa, la médula ósea responde de

manera inadecuada a la creciente necesidad de glóbulos rojos. La anemia

causada por hemorragia o hemólisis es típicamente regenerativa. La anemia

causada por la disminución de la eritropoyetina o una anomalía en la médula

ósea no es regenerativa (Marks, 2018).

42

‘‘Las anemias debidas a hemorragias o hemólisis normalmente son

regenerativas. Las anemias causadas por una disminución de eritropoyetina o

una anomalía en la médula ósea no son regenerativas’’ (Merck, 2007).

2.9.2 Características de las anemias regenerativas y no regenerativas

Debido a que los reticulocitos son más grandes, el volumen corpuscular medio

aumenta, y debido a que tiene menos hemoglobina, la MCHC está disminuida:

la anemia es macrocítica e hipocrómica. No obstante, el MCV y la MCHC no

son marcadores muy sensibles de regeneración, y pueden estar alterados por

otras causas. La anchura de distribución de los eritrocitos (RDW) es un

indicador más sensible, ya que un número relativamente pequeño de células

grandes aumentaran este parámetro. En las anemias no regenerativas no

existe un aumento en la liberación de reticulocitos desde la médula ósea y, por

tanto, la anemia es normocítica y normocrómica, sin aumento del RDW

(Villiers, 2012).

2.9.3 Clasificación de las anemias según su morfología

Las anemias según su morfología se dividen dependiendo del resultado del

hemograma, índices celulares y eritrocitos (Bell, 2004).

-Anemia normocítica normocrómica: Se produce una disminución hematocrito y

hemoglobina, pero los índices eritrocitarios no se modifican. Se puede

ocasionar por hipoplasia y aplasia medular, fases iniciales de anemia por

sangrado, y por insuficiencia renal crónica por déficit de eritropoyetina; también

puede ocurrir por anemias secundarias a cuadros inflamatorios crónicos en sus

primeras etapas.

-Anemia microcítica hipocrómica: En esta anemia los eritrocitos se encuentran

con un tamaño inferior a lo normal, usualmente está ligada a hipocromía; su

causa más común es la ferropenia, talasemia menor, y enfermedades

inflamatorias crónicas en sus fases más avanzadas (Torrens, 2015).

43

-Anemia microcítica normocrómica: Debido a enfermedades crónicas,

malignas, agentes tóxicos, esplenomegalia, o trastornos endocrinológicos

(García, 2015).

-Anemia macrocítica hipocrómica: Es regenerativa, debido a hemorragias, y

hemólisis (Day, Mackin, & Littlewood, 2012).

-Anemia macrocítica normocrómica: Debido a anemia megaloblástica:

congénita, endocrinopatía, malabsorción, déficit de vitamina B12, vitamina B9,

vitamina C; ingestión de anticonvulsivantes, y aplasia (García, 2015).

2.9.4 Clasificación de la anemia según el grado de severidad

El valor del hematocrito es usado frecuentemente para valorar la anemia,

también se puede usar el recuento de glóbulos rojos o la concentración de

hemoglobina. Cada especie de animal tiene un valor normal de hematocrito

diferente (Day, Mackin, & Littlewood, 2012).

Tabla 2. Clasificación de la anemia según el grado de severidad

Leve Moderada Severa Muy Severa Normal

Hematocrito 30-36% 20–29% 13–19% < 13% 37-56 %

Adaptado de (Gutiérrez, 2017).

2.9.5 Diagnóstico de la anemia

La etiología de la anemia puede conocerse mediante la correlación con la

historia clínica, examen clínico y otras investigaciones adecuadas, lo que

permite a los médicos a conocer los diferentes tipos de anemia y sus causas

más comunes, y ayuda a tomar las medidas necesarias para prevenirla

(Bangera, 2017).

El diagnóstico de laboratorio de la anemia se basa en los valores de

hemoglobina, hematocrito y eritrocitos. La caracterización de la anemia es

44

facilitada por los índices eritrocíticos: MCV, MCH y MCHC; la MCH y la MCHC

proporcionan información similar, pero la MCHC se considera más exacta, de

manera que, los dos índices más usados son MCV y MCHC (Fraser, 1993).

Los signos clínicos en animales anémicos dependen del grado de anemia, la

duración (aguda o crónica) y la causa subyacente. La anemia aguda puede

provocar shock e incluso la muerte si más de un tercio del volumen sanguíneo

se pierde rápidamente y no se reemplaza. En la pérdida de sangre aguda, el

animal generalmente se presenta con taquicardia, membranas mucosas

pálidas, pulsos periféricos limitantes o débiles e hipotensión. Los animales con

anemia crónica han tenido tiempo para adaptarse, y su presentación clínica

suele ser más indolente con signos vagos de letargo, debilidad y

anorexia. Estos animales pueden tener hallazgos similares en el examen físico,

como membranas mucosas pálidas y pulsos periféricos débiles (Marks, 2018).

En la etapa aguda generalmente el hemograma es normal, puede haber

anemia normocítica normocrómica, leucopenia o leucocitosis leve; es normal

que haya trombocitopenia, usualmente no se logran ver petequias; muy

raramente la trombocitopatía provoca hemorragia. En el estado crónico, el

hemograma es anormal; usualmente la trombocitopenia es severa, lo cual

causa hemorragias. En dolicéfalos es frecuente la epistaxis, y en todos los

perros se produce melena, equimosis de las membranas mucosas y cutáneas,

hematuria, petequias, además puede suscitarse una pancitopenia (Fraser,

1993).

45

III. MARCO METODOLÓGICO

3.1 Localización del lugar de la investigación

La veterinaria ‘‘El Fortín’’ se encuentra ubicada en el norte de Guayaquil, en la

parroquia Pascuales de la provincia del Guayas entre las calles 20mo Pasaje

56N-O y la Av. Casuarina; es una zona urbana marginal, tiene clima tropical, y

sus coordenadas geográficas son: -2.119138, -79.955702.

Ilustración 5. Vista satelital de veterinaria ¨El Fortín¨ (Google Maps, 2015).

Ilustración 6. Vista frontal de veterinaria ¨El Fortín¨ (Google Maps, 2015).

46

3.2 Materiales y Personal

3.2.1 Materiales de laboratorio

- Placas porta objeto

- Porta placas

- Wright Colorante Quimical®

- Tubos de 3 ml con EDTA

- Vaso de Coplin

- Microscopio

- Jeringas descartables de 3 cc

- Guantes

- Algodón

- Alcohol

- SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

- Reactivo de SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

- Analizador hematológico RT-7600 VET

- Reactivos para analizador hematológico RT-7600 VET

3.2.2 Materiales de oficina

- Computadora

- Bolígrafos

- Fichas de registro

- Cámara fotográfica

- Cinta de papel

3.2.3 Personal de trabajo

- Tutor

- Estudiantes

- Personal del consultorio veterinario

47

3.3 Tipo de investigación

La investigación es de tipo analítico descriptivo.

3.4 Metodología de trabajo

Se llevó a cabo un muestreo selectivo estratificado, se incluyó a aquellos

perros que acudían a la consulta que mostraban síntomas de la enfermedad o

presencia de garrapatas. En total se recolectaron 80 muestras durante un

periodo de 4 meses (octubre-enero).

En el historial clínico, durante la anamnesis se recopilaron datos como: nombre

del animal, edad, sexo, peso, temperatura, grado de deshidratación, presencia

o ausencia de garrapata, síntomas; si el animal presentaba los signos

característicos de la enfermedad y un historial de haber tenido garrapatas en

los últimos 3 meses, se realizaba un frotis sanguíneo con Wright Colorante

Quimical® sin diluir, para determinar en el microscopio la presencia de

inclusiones intraleucocitarias tipo mórula compatibles con Ehrlichia spp.,

también se les realizaba la prueba inmunocromatográfica de E. canis, para

detectar anticuerpos contra la enfermedad; si el resultado era positivo en

cualquiera de las dos técnicas, se extraían 3 cc de sangre de la vena cefálica o

safena, y se depositaba su contenido en un tubo de ensayo con EDTA, luego

se homogenizaba con el mayor cuidado posible para evitar hemolisis y la

muestra se llevaba al analizador hematológico veterinario automático modelo

RT-7600 VET.

3.4.1 Analizador hematológico veterinario automático modelo RT-7600

VET

Este analizador hematológico funciona mediante el principio de impedancia

eléctrica para categorizar y contar las células sanguíneas, y el principio de

colorimetría para medir la hemoglobina.

48

- Recolectar 1,5-2,2 ml de sangre venosa en un tubo con anticoagulante, y

homogenizarla durante 3-5 minutos.

- Presionar el botón prueba que hace que baje la aguja de aspiración, la

cual antes de cada prueba se debe limpiar con una gasa empapada del

limpiador concentrado.

- Colocar el tubo de manera que la aguja quede completamente rodeada

por sangre.

- Presionar la tecla aspirar y retirar el tubo una vez que la aguja haya

subido.

- Esperar alrededor de 1 minuto para obtener los resultados e imprimirlos

(Rayto Life and Analytical Sciences Co., 2017).

Tabla 3. Determinaciones que realiza el analizador hematológico

Nombres en Español Abreviación en Ingles Unidad (Default)

Glóbulos Blancos # WBC 109/L

Linfocitos # LYM# 109/L

Células Intermedias # MID# 109/L

Granulocitos # GRA# 109/L

Linfocitos % LYM% %

Células Intermedias % MID% %

Granulocitos % GRA% %

Glóbulos Rojos RBC 1012/L

Hemoglobina HGB g/dL

Hematocrito HCT %

Volumen corpuscular medio MCV fL

Hemoglobina corpuscular media MCH pg

Concentración de hemoglobina

corpuscular media

MCHC g/dL

Ancho distribución Eritrocitos SD RDW-SD fL

Ancho distribución Eritrocitos CV RDW-CV %

Plaquetas # PLT 109/L

Plaquetas volumen medio MPV fL

49

Ancho distribución Plaquetas PDW fL

Plateletcrito PCT %

Platelet-large cell ratio P-LCR %

Histograma Glóbulos Blancos WBC Histogram

Histograma Glóbulos Rojos RBC Histogram

Histograma Plaquetario PLT Histogram

Fuente: Rayto Life and Analytical Sciences Co., 2017.

Tabla 4. Rangos de referencia de test en blanco según el parámetro

Parámetro Rango de Referencia

WBC ≤ 0.2 x 109 / L

RBC ≤ 0.02 x 1012 / L

HGB ≤ 1 g / L

HCT ≤ 0.5 %

PLT ≤ 10 X 109 / L

Fuente: Rayto Life and Analytical Sciences Co., 2017.

3.4.2 Frotis sanguíneo y tinción

- Colocamos una gota de sangre sobre la placa porta objetos.

- Sobre la placa sostenemos otra porta objetos en un ángulo de 45°,

dejando que toque la sangre y se esparza a lo ancho del mismo.

- Se lleva con rapidez hacia adelante formando un extendido y esperamos

que la placa se seque.

- Procedemos a teñir la placa con Wright Colorante Quimical® en solución

de uso durante 1 minuto (Maedel, 2004).

- Lavar la placa con agua del grifo o destilada hasta que la extensión tome

un color rosa pálido y la dejamos secar.

- Se observa la morfología intracelular en el microscopio con objetivo de

100x (Kraft & Schillinger, 1998; Torrance, 2012).

50

3.4.3 SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

Este kit está diseñado para detector anticuerpos de Anaplasma y E. canis en

sangre entera, suero o plasma. Los resultados del test aparecen en las líneas

de Control (C) y Test (T) donde los principios de inmunocromatografía son

usados; cuenta con 98% de sensibilidad y 100% de especificidad.

Se toma una gota de sangre con el gotero y se la deposita en el pozo de

muestra del kit y se espera a que se absorba completamente antes de agregar

2 gotas del buffer en el mismo y el resultado estará en 5-10 minutos (VetAll

Laboratories, 2015).

Los resultados se interpretan de la siguiente manera:

- Resultado negativo: Si aparece una banda púrpura en la línea control ¨C¨.

- Resultado positivo: Si aparecen dos bandas púrpuras, una en la línea testigo

¨T¨ y otra en la línea control ¨C¨.

- Resultado inválido: Si la banda púrpura no es visible en la línea control ¨C¨

después de haber realizado la prueba (BioNote, 2016).

3.5 Variables en estudio

Presencia de E. canis

- Sí

- No

Sintomatología

- Apatía (sí, no)

- Caquexia (condición corporal 1 – 5) sí a partir de 4

- Fiebre (sí, no)

- Petequias (sí, no)

- Equimosis (sí, no)

- Epistaxis (sí, no)

- Deshidratación (0-5%, 6-7%, 8,9%, +10%) sí a partir de 6-7% a +10%

51

- Vómito (cantidad de vómitos al día 1-7 v/d) sí a partir de 3v/d

- Melena (sí, no)

- Hematuria (sí, no)

Raza

- Puro

- Mestizo

Presencia de garrapatas

- Sí

- No

Parámetros sanguíneos

- Hematocrito: anemia leve (30-36%), anemia moderada (20–29%),

anemia severa (13–19%), anemia muy severa (< 13%), normal (37-56

%).

- Volumen corpuscular medio: normal (60-77fL), elevado (>77fL),

disminuido (<60fL).

- Concentración de hemoglobina corpuscular media: normal (32-36g/dL),

disminuido (<32g/dL), elevado (>36g/dL).

- Recuento plaquetario: normal (150-500x109/L), disminuido (<150x109/L),

elevado (>500x109/L).

- Glóbulos blancos: normal (6-18x109/L), elevado (>18x109/L), disminuido

(<6x109/L).

- Linfocitos: normal (1-4,8x109/L), elevado (>4,8x109/L), disminuido

(<1x109/L).

- Monocitos: normal (0-1,8x109/L), elevado (>1,8x109/L).

- Granulocitos: normal (4-12,6x109/L), disminuido (<4x109/L), elevado

(>12,6x109/L).

- Pancitopenia: (sí, no).

52

IV. RESULTADOS

4.1 Presencia de E. canis

De las 80 muestras que se analizaron se detectó presencia de E. canis en 34

ellas, representando el 42,5% de casos positivos y 57,5% de casos negativos

para ehrlichiosis.

Tabla 5. Prevalencia de E. canis

Frecuencia Porcentaje válido

Si 34 42,5

No 46 57,5

Total 80 100,0

Fuente: Naomi Arellano & Andrea Saavedra

Gráfico 1. Porcentaje de Presencia de E. canis


42%

58%

Si No

53

4.2 Síntomas

Entre los síntomas que se tuvieron en cuenta se encuentran: apatía, caquexia,

fiebre, petequias, equimosis, epistaxis, deshidratación, vómito, melena y

hematuria; los que se presentaron con más frecuencia en perros positivos a E.

canis según el porcentaje de casos fueron apatía 91,2%, fiebre 79,4%,

linfadenomegalia 47,1%, y petequias 41,2%.

Tabla 6. Comparación de síntomas entre animales con y sin ehrlichiosis


Respuestas Porcentaje de casos N Porcentaje

Si Síntomasa Apatía 31 22,1% 91,2%

Caquexia 9 6,4% 26,5%

Fiebre 27 19,3% 79,4%

Petequias 14 10,0% 41,2%

Equimosis 7 5,0% 20,6%

Epistaxis 7 5,0% 20,6%

Deshidratación 9 6,4% 26,5%

Vómito 3 2,1% 8,8%

Melena 3 2,1% 8,8%

Hematuria 9 6,4% 26,5%

Linfadenomegalia 16 11,4% 47,1%

Postración 5 3,6% 14,7%

Total 140 100,0% 411,8%

No Síntomasa Apatía 43 25,0% 95,6%

Caquexia 5 2,9% 11,1%

Fiebre 24 14,0% 53,3%

Petequias 8 4,7% 17,8%

Epistaxis 3 1,7% 6,7%

Deshidratación 24 14,0% 53,3%

Vómito 16 9,3% 35,6%

Melena 9 5,2% 20,0%

Hematuria 7 4,1% 15,6%

Linfadenomegalia 22 12,8% 48,9%

Postración 11 6,4% 24,4%

Total 172 100,0% 382,2%

a. Grupo de dicotomía tabulado en el valor 1.


54

Gráfico 2. Comparación de síntomas entre animales con presencia y ausencia de ehrlichiosis


0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Ehrlichia + Ehrlichia -

55

4.3 Raza

De 34 pacientes positivos a E. canis 15 eran mestizos que representa el

44,12% del total de positivos y 19 eran perros de raza pura que representa el

55,88% del total de positivos.

Tabla 7. Presencia de E. canis según la raza


Total Si No

Raza Mestizos 15 21 36

French Poodle 11 11 22

Golden Retriever

0 1 1

Schnauzer Miniatura

2 1 3

Pekinés 0 2 2

Basset Hound 0 2 2

Cocker Spaniel 0 1 1

Pitbull 2 1 3

Rottweiler 0 1 1

Sharpei 1 0 1

Chihuahua 1 1 2

Yorkshire Terrier

0 2 2

Chow Chow 0 1 1

Gran Danés 0 1 1

Labrador 1 0 1

Bulldog Inglés 1 0 1

Total 34 46 80


56

Gráfico 3. Porcentaje de razas positivas a ehrlichiosis


Según los resultados de la tabla del chi-cuadrado, la raza no es un factor

asociado a la presencia de E. canis dado que el valor P es >0,05.

Tabla 8. Prueba de chi-cuadrado según la raza

Valor gl Sig. asintótica (2

caras)

Chi-cuadrado de Pearson

14,186a 15 ,511

Razón de verosimilitud

19,286 15 ,201

Asociación lineal por lineal ,016 1 ,899

N de casos válidos 80

a. 28 casillas (87,5%) han esperado un recuento menor que 5. El recuento mínimo esperado es ,43. Fuente: Naomi Arellano & Andrea Saavedra

44%

32%

6%

6%

3%3%

3%3%

Mestizo French Poodle Schnauzer Miniatura

Pitbull Sharpei Chihuahua

Labrador Bulldog Inglés

57

4.4 Presencia de garrapatas

De los 34 pacientes positivos a E. canis, 32 presentaron garrapatas que

representa el 94,12% del total de positivos y 2 no presentaron garrapatas que

representa el 5,88% del total de positivos

Tabla 9. Presencia de E. canis según la presencia de garrapatas


Total Si No

Presencia de garrapatas Si 32 42 74

No 2 4 6

Total 34 46 80


Gráfico 4. Casos positivos y negativos a ehrlichiosis según la presencia de

garrapatas


0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

Si

No

Pre

sen

cia

de

garr

apat

as

Presencia de Ehrlichia No Presencia de Ehrlichia Si

58

Según los resultados de la tabla de chi-cuadrado, la presencia de garrapatas

no es un factor asociado a la ehrlichiosis puesto que el valor P es >0,05.

Tabla 10. Prueba de chi-cuadrado según la presencia de garrapatas

Valor gl

Sig. asintótica (2

caras) Significación

exacta (2 caras) Significación

exacta (1 cara)

Chi-cuadrado de Pearson

,223a 1 ,637

Corrección de continuidadb ,002 1 ,966

Razón de verosimilitud

,228 1 ,633

Prueba exacta de Fisher 1,000 ,491

Asociación lineal por lineal ,220 1 ,639

N de casos válidos

80

a. 2 casillas (50,0%) han esperado un recuento menor que 5. El recuento mínimo esperado es 2,55. b. Sólo se ha calculado para una tabla 2x2


59

4.5 Parámetros sanguíneos

Los valores hematológicos que se presentaron con mayor frecuencia en perros

positivos a E. canis fueron anemia moderada en 14 pacientes (41,2%),

normocitosis en 32 (94,1%), normocromía en 28 (82,4%), trombocitopenia en

31 (91,2%), WBC dentro del rango de referencia en 17 (50%), linfocitosis en 19

(55,9%), MID dentro del rango establecido en 30 (88,2%), reducción de GRA

en 23 (67,6%), y ausencia de pancitopenia en 28 (82,4%).

Tabla 11. Comparación de parámetros sanguíneos entre animales con

presencia y ausencia de ehrlichiosis


Si No

Recuento

% del N

de

columna Recuento

% del N

de

columna

HCT Leve (30-36%) 2 5,9% 14 30,4%

Moderada (20-

29%) 14 41,2% 10 21,7%

Severa (13-

19%) 5 14,7% 0 0,0%

Muy severa

(<13%) 2 5,9% 1 2,2%

Normal (37-

56%) 11 32,4% 21 45,7%

Total 34 100,0% 46 100,0%

MCV Macrocítica

(>77fL) 0 0,0% 2 4,3%

Microcítica

(<60fL) 2 5,9% 1 2,2%

Normocítica

(60-77fL) 32 94,1% 43 93,5%

60

Total 34 100,0% 46 100,0%

MCHC Hipocrómica

(<32g/dL) 3 8,8% 4 8,7%

Normocrómica

(32-36g/dL) 28 82,4% 30 65,2%

Hipercrómica

(>36g/dL) 3 8,8% 12 26,1%

Total 34 100,0% 46 100,0%

PLT Disminuido

(<150x109/L) 31 91,2% 19 41,3%

Normal (150-

500x109/L) 3 8,8% 27 58,7%

Total 34 100,0% 46 100,0%

WBC Elevado

(>18x109/L ) 9 26,5% 8 17,4%

Normal (6-

18x109/L) 17 50,0% 32 69,6%

Disminuido

(<6x109/L) 8 23,5% 6 13,0%

Total 34 100,0% 46 100,0%

LYM Elevado

(>4,8x109/L) 19 55,9% 28 60,9%

Normal (1-

4,8x109/L) 14 41,2% 18 39,1%

Disminuido

(<1x109/L) 1 2,9% 0 0,0%

Total 34 100,0% 46 100,0%

MID Elevado

(>1,8x109/L) 4 11,8% 0 0,0%

Normal (0-

1,8x109/L) 30 88,2% 46 100,0%

Total 34 100,0% 46 100,0%

GRA Normal (4- 11 32,4% 15 32,6%

61

12,6x109/L)

Disminuido

(<4x109/L) 23 67,6% 31 67,4%

Total 34 100,0% 46 100,0%

PANCITOPENIA Si 6 17,6% 1 2,2%

No 28 82,4% 45 97,8%

Total 34 100,0% 46 100,0%


Gráfico 5. Comparación de valores hematológicos según la presencia y

ausencia de ehrlichiosis


0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

Leve (30-36%)

Moderada (20-29%)

Severa (13-19%)

Muy severa (<13%)

Normal (37-56%)

Macrocítica (>77fL)

Microcítica (<60fL)

Normocítica (60-77fL)

Hipocrómica (<32g/dL)

Normocrómica (32-36g/dL)

Hipercrómica (>36g/dL)

Disminuido (<150x109/L)

Normal (150-500x109/L)

Elevado (>18x109/L )

Normal (6-18x109/L)


Elevado (>4,8x109/L)

Normal (1-4,8x109/L)


Elevado (>1,8x109/L)

Normal (0-1,8x109/L)

Normal (4-12,6x109/L)


Si

No

HC

TM

CV

MC

HC

PLT

WB

CLY

MM

IDG

RA

Pan

cito

pen

ia

Ehrlichia No Ehrlichia Si

62

V. DISCUSIÓN

En la investigación de Domínguez (2011), realizada en la ciudad de Cuenca

para determinar la prevalencia de hemoparásitos (E. canis, B. canis y A.

phagocytophilum) en 560 caninos, resultaron positivos a E. canis 36 de los 64

pacientes positivos que representan el 56,25% del total de casos positivos; en

esta investigación, de un total de 80 se reportó presencia de anticuerpos contra

E. canis en 34 pacientes que representan el 42,5% de casos positivos.

Hoyos, Li, Alvarado, Suárez, & Díaz (2007), en su investigación realizada en

Perú, reportaron que en los casos positivos a E. canis los síntomas más

frecuentes fueron epistaxis 100%, equimosis 92,3%, postración 81,8%,

linfadenomegalia 80%; por el contrario, en el presente estudio los síntomas

más frecuentes ene pacientes positivos fueron apatía 91,2%, linfadenomegalia

47,1%, petequias 41,2%, fiebre 79,4%.

En la investigación de Salazar, Buriticá, Echeverry, & Barbosa (2014), se

concluyó que tanto la presencia de garrapatas al momento de la consulta o 6

meses antes de ésta, como la raza no son factores asociados a la presencia de

Ehrlichia; al igual que en este estudio, en la que se concluyó que las variables

presencia de garrapatas y raza no obtuvieron una asociación significativa a la

presencia de ehrlichiosis.

Según Pauta (2016), en su investigación manifestó que la E. canis afecta a la

raza French Poodle en un 47,1; lo que concuerda con esta investigación en la

que determinó que la enfermedad afectó a la raza French Poodle en un 13,8%.

De acuerdo a Morales (2014), en su investigación realizada en Guayaquil, los

resultados positivos a ehrlichiosis fueron 68,42% para perros de razas puras y

63

31,57% para mestizos; similarmente, en la presente investigación el 55,88% de

los casos positivos eran perros de raza pura y 44,12% eran mestizos.

Castillo (2017), indicó que 90% de los animales positivos a E. canis

presentaron trombocitopenia y 57% anemia; similarmente, en esta

investigación el 91,2% de los pacientes positivos presentaron trombocitopenia y

67,7% anemia.

Aceña, Andrés, & Borobia (2006), reportó la presencia de anemia normocítica

normocrómica y linfocitosis en infección crónica por E. canis; en la presente

investigación se reportó anemia normocítica normocrómica con 94,1% y 82,4%

respectivamente, además de linfocitosis en 55,9% de los pacientes positivos a

la enfermedad, lo que nos llega a indicar que la mayoría de los pacientes

positivos a la enfermedad se encontraban en la fase crónica.

Das & Konar (2013) reportaron leucocitosis en 48,93% de perros infectados

con ehrlichiosis; sin embargo, en el presente estudio encontramos que el 50%

de los positivos presentaron WBC normal y 17,6% pancitopenia; al contrario de

la investigación realizada por Caballero (2010) en la que se reportó

pancitopenia en 71% de animales con ehrlichiosis.

Tintel, Amarilla, & Nara (2016) encontraron que una de las principales

alteraciones hematológicas fue la monocitosis con 32,55%, sin embaego en la

presente investigación solo se encontró monocitosis en 11,8% de los pacientes

positivos a Ehrlichia.

64

VI. CONCLUSIONES

Se confirmó la presencia de ehrlichiosis mediante frotis sanguíneo y

SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit en 34 de los 80 caninos, que

representa el 42,5% de los casos muestreados.

Determinamos que no hubo asociación significativa entre la raza y la presencia

de E. canis según los resultados obtenidos en la prueba del chi cuadrado.

Según los resultados de la prueba del chi cuadrado, se concluyó que no existe

asociación estadística entre la presencia de garrapatas y la ehrlichiosis.

Se determinó que los valores hematológicos más frecuentes en perros

infectados con ehrlichiosis son anemia moderada 41,2%, normocitosis 94,1%,

normocromía 82,4%, trombocitopenia 91,2%, WBC dentro del rango de

referencia 50%, linfocitosis 55,9%, MID dentro del rango normal 88,2%,

agranulocitosis 67,6%, y ausencia de pancitopenia 82,4%.

65

VII. RECOMENDACIONES

Realizar un control de garrapatas en la zona de ¨El Fortín¨ para evitar

enfermedades hemotrópicas a futuro.

Solicitar exámenes de laboratorio por parte del médico veterinario para realizar

un mejor tratamiento.

Realizar un tratamiento con los medicamentos adecuados para evitar que la

enfermedad sea aún más severa.

Separar a las mascotas sanas de aquellas que se encuentren cursando con la

enfermedad para evitar el contagio por medio del ectoparásito mientras se

controla la misma.

Es necesario que existan más médicos veterinarios especialistas en

laboratorio, puesto que así sería más fácil la correcta identificación de los

microorganismos que producen enfermedades hemotrópicas.

66

BIBLIOGRAFÍA

Aceña, Andrés, & Borobia. (2006). Pancitopenia en un perro por infección

crónica por ehrlichia canis. Clínica veterinaria de pequeños animales,

26(2). Recuperado el 27 de Diciembre de 2018, de

https://ddd.uab.cat/pub/clivetpeqani/11307064v26n2/11307064v26n2p17

9.pdf

Alfaro, K. (2019). Hemograma: Valores Normales de hematología completa.

Recuperado el 3 de Febrero de 2019, de Puertalab:

https://puertalab.com/valores-normales-de-la-hematologia-completa/

Atanaskova, E., Ulcar, I., Celeska, I., Ilievska, K., Spasovska, P., Novakov, T., .

. . Stefanovska, J. (2018). Effects of Doxycycline Treatment on

Hematological and Blood Biochemical Parameters in Dogs Naturally

Infected With Ehrlichia canis. Macedonian Veterinary Review.

doi:https://doi.org/10.2478/macvetrev-2018-0011

Bangera, I. (2017). A Study of Morphological Types of Anemia. International

Journal of Science and Research (IJSR), 6(6), 1181. Retrieved January

7, 2019, from https://www.ijsr.net/archive/v6i6/ART20174380.pdf

Bell, A. (2004). Anemias: morfología de los eritrocitos y enfoque diagnóstico. En

B. Rodak, Hematología Fundamentos y Aplicaciones Clínicas (Segunda

ed.). Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica Panamericana.

BioNote. (2016). Prueba de un paso para detección de Anticuerpos de E.canis

y Anaplasma. Obtenido de Annardx:

http://www.annardx.com/productos/images/productos/veterinaria/pruebas

%20rapidas/e.canis_anaplasma_annar_inserto2003823489.pdf

Brooks, G., Butel, J., & Ornston, L. (1996). Microbiología médica de Jawetz,

Melnick y Adelberg (Quinceava ed.). (J. Ávila, Ed.) México: El Manual

Moderno, S.A. de C.V.

Caballero. (2010). Caracterización clínica y hematológica de la ehrlichiosis

canina en Arica. Tesis de grado, Universidad Católica de Temuco, Arica.

Recuperado el 10 de Octubre de 2018, de

https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=6680395&pid=S

0716-1018201200060000800026&lng=es

Castillo, S. (2017). Evaluación de la prevalencia de Ehrlichia canis y

alteraciones hematológicas asociadas, en caninos atendidos en Clínica

Veterinaria Doctor Roger Alfaro en San José, Costa Rica, periodo 2015

– 2016 . Trabajo de graduación, Universidad Nacional Agraria Sede

Regional Camoapa, Camoapa. Recuperado el 10 de Febrero de 2019,

de

http://repositorio.una.edu.ni/3638/1/tnl73c352e.pdf?fbclid=IwAR2CQBxJk

13z68Wc1AzeYpIO5MMAHE8Wr7UVEr-dE-63m7SrSSmjzEdv_l8

67

CDC. (2017). DPDx - Laboratory Identification of Parasites of Public Health

Concern. Retrieved November 28, 2018, from Centers for Disease

Control and Prevention: https://www.cdc.gov/dpdx/ticks/index.html

Clark, K., & Hippel, T. (2004). Pruebas de rutina en hematología. En B. Rodak,

Hematología Fundamentos y Aplicaciones Clínicas (Segunda ed.).

Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica Panamericana.

Cuello, F., Salinas, J., Caro, R., & Gallego, C. (2002). Rickettsias. En S. Vadillo,

S. Píriz, & E. Mateos, Manual de Microbiología Veterinaria (Primera ed.,

pág. 401). España: McGRAW-HILL/INTERAMERICANA DE ESPAÑA, S.

A. U.

Das, M., & Konar, S. (2013). Clinical and hematological study of canine

Ehrlichiosis with other hemoprotozoan parasites in Kolkata, West Bengal,

India. Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine, 3(11).

doi:10.1016/S2221-1691(13)60178-1

Day, M., Mackin, A., & Littlewood, J. (Edits.). (2012). Manual de Hematología y

Transfusión en Pequeños Animales. España: Lexus.

Domínguez, G. (2011). Prevalencia e identificación de hemoparásitos (Ehrlichia

canis, Babesia canis y Anaplasma phagocytophilum) en perros de la

ciudad de Cuenca. Universidad de Cuenca, Cuenca. Recuperado el 10

de Febrero de 2019, de

http://dspace.ucuenca.edu.ec/bitstream/123456789/3024/1/tv199.pdf

Durán, F. (Ed.). (2012). Consultor clínico veterinario (Primera ed., Vol. 1).

Colombia: Grupo Latino Editores S.A.S.

Elsayid, M., Al-Qahtani, A., Alanazi, A., & Qureshi, S. (2015). Determination of

the most common morphological patterns of anemia among Saudi

anemic patients attending King Abdul-aziz Medical City-Riyadh.

International Journal of Medicine and Public Health, 301. Retrieved from

http://www.ijmedph.org/sites/default/files/IntJMedPublicHealth_2015_5_4

_301_165957.pdf

Fraser, C. (Ed.). (1993). El Manual de Merck de Veterinaria (Cuarta ed.).

Barcelona, España: OCEANO/CENTRUM.

García, E. (2015). Anemias en Pediatría. Recuperado el 12 de Diciembre de

2018, de Ministerio de Salud de Argentina:

http://www.ms.gba.gov.ar/sitios/pediatria/files/2015/01/ANEMIAS-red-

hematooncologia-region-sanitaria-7.pdf

González, Vallejo, Gómez, Ortega, & Panadero. (2018). Pancitopenia.

(Panorama Actual Med) Recuperado el 8 de Febrero de 2019, de

Botplusweb:

https://botplusweb.portalfarma.com/documentos/2018/5/9/122619.pdf?fb

clid=IwAR3i5NMYeDNqYhnWzJCIsUXTyh9WRMT9pspww8M793ixMukv

GVVRUVH6g84

68

Gutiérrez, C., Pérez, L., & Agrela, I. (2016). Ehrlichiosis canina. Scielo, 28(4).

Recuperado el 28 de Noviembre de 2018, de ReasearchGate:

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-

01622016000400002

Gutiérrez, V. (2017). Práctica empresarial en la Clínica Veterinaria Zoomanía

durante el primer semestre del año 2017. Recuperado el 21 de

Noviembre de 2018, de Corporación Universitaria Lasallista:

http://repository.lasallista.edu.co/dspace/bitstream/10567/1826/1/Practic

a_Empresarial_clinica_veterinaria_ZOOMANIA.pdf?fbclid=IwAR2MVZoI

FCTvSKN0RI3nDb9_Cihz_Y904llUm2hrDT2BIYdcp_oXOdUEZEs

Hoyos, L., Li, O., Alvarado, A., Suáres, F., & Díaz, D. (2007). Evaluación del

exámen hematológico en el diagnóstico de ehrlichiosis canina. Revista

de Investigaciones Veterinarias del Perú, 18(2), 129-135. Recuperado el

10 de Febrero de 2019, de

http://www.scielo.org.pe/pdf/rivep/v18n2/a07v18n2.pdf

Kraft, H., & Schillinger, D. (1998). Métodos de laboratorio clínico en medicina

veterinaria de mamíferos domésticos. España: ACRIBIA S.A.

Lanzkowsky, P., Lipton, J., & Fish, J. (Eds.). (2016). Lanzkowsky's Manual of

Pediatric Hematology and Oncology (Sixth ed.). United Kingdom:

Academic Press. Retrieved November 27, 2018, from

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B978012801368700003

X

Lipton, J. (2019). Assessment of pancytopenia. Retrieved February 8, 2019,

from BMJ Best Practice: https://bestpractice.bmj.com/topics/en-gb/1024

Maedel, L. (2004). Examen de extendidos de sangre periférica. En B. Rodak,

HematologÍa Fundamentos y Aplicaciones Clínicas (Segunda ed.).

Buenos Aires, Argentina: Editorial Médica Panamericana.

Marks, S. (2018). Overview of Anemia. Retrieved Diciembre 10, 2018, from

MSD Manual Veterinary Manual:

https://www.msdvetmanual.com/circulatory-system/anemia/overview-of-

anemia#resourcesInArticle

Merck. (2007). Manual Merck de Veterinaria (Sexta ed., Vol. 1). España:

OCÉANO/CENTRUM.

Morales, G. (2014). Determinación de Erhlichia spp. mediante el método de

frotis periférico directo usando tinción de Giemsa en perros. Tesis de

grado, Universidad Católica de Santiago de Guayaquil, Guayaquil.

Recuperado el 2019, de

http://repositorio.ucsg.edu.ec/bitstream/3317/3174/1/T-UCSG-PRE-TEC-

CMV-1.pdf

NCBI. (2017). Ehrlichia canis. Retrieved November 23, 2018, from NCBI

Taxonomy Browser:

69

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?lvl=0&id=9

44#note1

Oteo, J. (2009). Infecciones causadas por Bartonella y Ehrlichia. Donovanosis.

En Farreras, & Rozman, Medicina Interna (Vol. 2, pág. 2381). España:

Elsevier España, S.L.

Pauta, F. (2016). Determinación del índice de prevalencia de hemoparásitos

(Ehrlichia canis) en la clínica veterinaria Animals Happy de la ciudad de

Machala. Trabajo de Titulación, Universidad Técnica de Machala,

Machala. Recuperado el 10 de Febrero de 2019, de

http://repositorio.utmachala.edu.ec/bitstream/48000/7702/2/DE00055_T

RABAJODETITULACION.pdf

Ramsey, I., & Tennant, B. (Edits.). (2012). Manual de Enfermedades

Infecciosas en pequeños animales. España: Lexus.

Rar, V., & Golovljova, I. (2011). Anaplasma, Ehrlichia, and “Candidatus

Neoehrlichia” bacteria: Pathogenicity, biodiversity, and molecular genetic

characteristics, a review. Infection, Genetics and Evolution Journal of

Molecular Epidemiology and Evolutionary Genetics in Infectious

Diseases, 11(8), 1844. Retrieved Diciembre 18, 2018, from

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1567134811003480

Rayto Life and Analytical Sciences Co., L. (2017). RT-7600 for Vet Auto

Hematology Analyzer User's Manual. China.

René-Martellet, M., Lebert, I., Chêne, J., Massot, R., Leon, M., Leal, A., . . .

Halos, L. (2015). Diagnosis and incidence risk of clinical canine

monocytic ehrlichiosis under field conditions in Southern Europe.

National Center for Biotechnology Information [NCBI], 8.

doi:10.1186/s13071-014-0613-4

Sainz, A., Roura, X., Miró, G., Estrada-Peña, A., Kohn, B., Harrus, S., &

Solano-Gallego, L. (2015). Guideline for veterinary practitioners on

canine ehrlichiosis and anaplasmosis in Europe. PubMed, 8(1).

doi:10.1186/s13071-015-0649-0

Salazar, H., Buriticá, E., Echeverry, D., & Barbosa, I. (2014). Seroprevalencia

de Ehrlichia canis y su relación con algunos parámetros clínicos y

hematológicos en caninos admitidos en clínicas veterinarias de la ciudad

de Ibagué (Colombia). Revista Colombiana de Ciencia Animal, 17(1).

Recuperado el 10 de Febrero de 2018, de

http://revistas.ut.edu.co/index.php/ciencianimal/article/viewFile/542/441

Sanz, N. (2017). Interpretación del hemograma. Ateuves(60). Recuperado el 29

de Enero de 2019, de https://ateuves.es/interpretacion-del-hemograma/

Speroni, N. (2014). Ehrlichiosis/Anaplasmosis canina. Revista Veterinaria

argentina, 35(367). Recuperado el 28 de Noviembre de 2018, de

70

https://www.veterinariargentina.com/revista/2014/10/ehrlichiosisanaplas

mosis-canina/

Thompson, E., Husney, A., & Gabica, M. (2017). Obtenido de NorthShore

University Health System:

https://www.northshore.org/healthresources/encyclopedia/encyclopedia.a

spx?DocumentHwid=hw4260&Lang=es-us

Thrall, M. (2012). Nonregenerative Anemia. In M. Thrall, G. Weiser, R. Allison,

& T. Campbell, Veterinary Hematologyand Clinical Chemistry (Second

ed.). USA: Wiley-Blackwell.

Tintel, M., Amarilla, S., & Nara, E. (2016). Ehrlichiosis, enfermedad transmitida

por garrapatas y potencial zoonosis en Paraguay. Revista electrónica de

Veterinaria, 27(9). Recuperado el 10 de Febrero de 2019, de

http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n090916/091607.pdf

Torrance, A. (2012). Revisión de las técnicas de diagnóstico en hematología.

En M. Day, A. Mackin, & J. Littlewood (Edits.), Manual de hematología y

transfusión en pequeños animales. España: LEXUS.

Torrens, M. (2015). Interpretación Clínica del Hemograma. Revista Médica

Clínica Las Condes, 26(6), 713-724. doi:10.1016/j.rmclc.2015.11.001

VetAll Laboratories. (2015). SensPERT Anaplasma Ab/E. canis Ab Test Kit.

Retrieved February 7, 2019, from VETALL:

http://vetall.onkr.com/gnuboard4/Brochure/Canine/AI24_Anaplasma%20

E%20canis%20combo_Brochure_Rev_May_2015.pdf

Villiers, E. (2012). Introduccipon a la Hematología. En E. Villiers, & L.

Blackwood (Edits.), Manual de Diagnóstico de Laboratorio en Pequeños

Animales. España: Lexus.

Zapata, M. (2016). Ehrlichiosis monocítica canina. Patogenia y caso clínico .

Recuperado el 26 de Noviembre de 2018, de Asociación de Veterinarios

Especializados en Animales de Compañía de Argentina [AVEACA] :

http://www.aveaca.org.ar/ehrlichiosis-monocitica-canina-patogenia-y-

caso-clinico-zapatam-b/

71

ANEXOS

Anexo 1. Ficha de registro

Ficha nº:

FECHA DE ADMISIÓN Día: Mes: Año:

RESEÑA DEL PACIENTE

NOMBRE: ESPECIE: RAZA:

EDAD SEXO: COLOR:

DATOS DEL PROPIETARIO

NOMBRE: CI:

DIRECCIÓN: TELEFONO:

MOTIVO DE LA CONSULTA / ANAMNESIS

HISTORIA DEL PACINETE

SI NO

PRESENCIA DE GARRAPATAS

HÁBITAT Casa: Lote: Finca: Taller:

CONSTANTES FISIOLOGICAS

TEMPERATURA: °C PESO: kg

EXAMÉN CLINICO

CONDICIÓN

CORPORAL Caquéctico : Delgado: Normal: Obeso: Sobrepeso:

ESTADO

HIDRATACIÓN Normal: 0-5%: 6-7%: 8-9%: + 10%:

KITS RESULTADOS

DISTEMPER Sí ( ) No ( )

PARVOVIRUS Sí ( ) No ( )

EHRLICHIA Sí ( ) No ( )

EXAMEN DE SANGRE Sí ( ) No ( )

FROTIS CON TINCIÓN WRIGHT (EHRLICHIA) Sí ( ) No ( )

72

Anexo 2. Paciente #1(Panda) positivo a Ehrlichia

Anexo 3. Mucosas pálidas en paciente #31(Pototo)

73

Anexo 4. Presencia de equimosis en el paciente #31 (Pototo)

Anexo 5. Extracción de sangre de vena safena

74

Anexo 6. Tubos con EDTA

Anexo 7. Introducción de sangre en tubo

Anexo 8. Mezclado de la sangre en el tubo

75

Anexo 9. Frotis sanguíneo

Anexo 10. Tinción de Wright Colorante Quimical® en vaso de Coplin

Anexo 11. Porta placas

76

Anexo 12. Aceite de inmersión

Anexo 13. Revisión de placas en microscopio

77

Anexo 14. Mórulas intraleucocitarias compatibles con Ehrlichia; 100x, Wright Colorante Quimical®

78

Anexo 15. SensPERT® Anaplasma/Ehrlichia canis Ab combo Test Kit

Anexo 16. Instructivo de SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

79

Anexo 17. Folleto de SensPERT® Anaplasma Ab/Ehrlichia Ab Test Kit

80

Anexo 18. Resultados positivos al kit

81

Anexo 19. Analizador hematológico RT-7600 VET

82

Anexo 20. Limpieza de aguja de aspiración previo a la realización de la prueba

Anexo 21. Introducción de aguja de aspiración en el tubo

83

Anexo 22. Resultados de hemogramas

84

Anexo 23. Registro de base de datos

universidad de guayaquil facultad de medicina …repositorio.ug.edu.ec/bitstream/redug/39273/1/2019...

Documents