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UNIVERSIDAD AUTONOMA DEBAJA CALIFORNIA SUR
AREA INTERDISCIPlINARIA DE CIENCIAS DEL MAR
DEPARTAMENTO DE BIOlOGIA MARINA
TASA METABOLlCA y TASA DE ACLARAMIENTO ENTRE
GRUPOS GENETICOS CON GRADO DE HETEROCIGOSIDAD
VARIABLE POBLACIONES CRUZA RECIPROCA y LlNEAS
ENDOGAMICAS DE ALMEJA CATARINA
Argopecten ventricosus Sowerby 11 1842
TESIS PROFESIONAL QUE PARA OBTENEREL TITULO DE BIOLOGO MARINO PRESENTA
LlLIANA CARVALHO SAUCEDO
La Paz Baja California Sur MØxico Noviembre de 1999
D90 oftCA
TEJ3o
EJÞ Z
2097
DEDICATORIA
A mi mÆs grande amigo Daniel y a mi mÆs preciado tesoro Lilianita
A mis Padres y hermanos
A mi familia política Ma OIga el aguelo Dany Tere Chava Gabriel Cecilia ChavitaGogo Olguita la abuelita Magda perfumes y la tía Chata
A mis sobrinas Camila e Ivana
A mis abuelitas donde quiera que esten y a mis abuelos Pancho y Manuel
A mi tía Mayola mi tío Enrique y mis tíos Rosa y Chava
A mis buenos cumpaæeros de la carrera Lupita Maricela Carmiæa Karina Adriana
Gaby Adoración Fernando Mauricio Julio Octiavio y Alfredo
2
Agradecimientos
Al Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste CIBNOR por las facilidades
prestadas para la realización del Øste trabajo y por el apoyo económico proporcionado en formade beca alimenticia Así mismo quiere agradecer a CONACYT por el apoyo bridado a manera
de beca y de proyecto proyecto 1720 N9209 este œltimo dirigido por la Dra Ana María barraH
Doy mi agradecimiento a la Dr Ana María Ibarra H Por la dedicación y apoyo en todosentido proporcionado para la realización del presente trabajo
Agradezco a todas las personas del CIBNOR que participaron de alguna manera en eldesarrollo de esta tesis y que contribuyeron en que dicho trabajo se pudiera realizar como es el
caso de JosØ Luis R Pedro Cruz Pablo M Susana A lrma Alejandra G Jorge Guadalupe M
Maricela G Dra barra Cesar R Daniel B L y Tere S
Al laboratorio de InformÆtica por todas las atenciones y ayuda dadas de manera grata yeficiente
De manera especial quiero agradecer a Tere Sicard por su ayuda incondicional en todomomento para poder llevar a cabo el presente trabajo apesar de tener que pasar por algunosdesvelos para la realización del mismo
Por œltimo agradezco a mi país MØxico por las facilidades que me dio y que sigue dando
para poder superarme acadØmicamente día con día
3
Resumen
En el presente trabajo se determinó la tasa metabólica activa y estÆndar así como la tasa
de aclaramiento en grupos genØticos con grado de heterocigosidad variable bajo dos temperaturas
220 y 280C En le caso de las poblaciones y su cruza se observó una tendencia de incremento
de 220 a 280C en todos los grupos sin embargo dichas diferencias no alcanzaron significancia
estadística La tasa estÆndar por su parte si fue estadísticamente mayor a 280C que a 220C No
se observaron diferencias entre las dos poblaciones evaluadas Magnalena y Concepción así como
tampoco con la cruza F 1 en cuanto a tasas de respiración así como tampoco para la tasa de
aclaramiento
En el caso de las lineas endogÆmicas evaluadas solamente a 220C no se observaron
diferencias significativas en tasa activa entre las líneas endogÆmicas y sus controles pero si se
observaron diferencias significativas en tasa estÆndar entre las lineas y sus controles las líneas
endogÆmicas presentaron la mayor tasa estÆndar
Las conclusiones que derivan del presente trabajo son las siguientes La ausencia de
diferencias significativas en las tasas metabólicas evaluadas en las poblaciones y su cruza pueden
ser explicadas por una posible similaridad genØtica en las poblaciones que repercute en el grado
de heterocigosidad de la cruza el uso de organismos entrados en su primera maduraz y o por
una posible selección por mortalidad durante el periodo de aclimatación en laboratorio Por otro
lado las diferencias observadas en la tasa estÆndar de las líneas endogÆmcias y sus controles no
endogÆmicos indican que en la almeja catarina sí existe una correlación entre heterocigosidad y
tasa metabólica
4
Indice General
Agradecimientos 2
Resumen 3
Indice General 4
Indice de Figuras 6
INTRODUCCIÓN 7
JUSTIFICACIÓN 14
OBJETIVOS 15
METODOLOG˝A 16
1 Producción de grupos experimentales 17
Obtención de las Poblaciones y la Cruza 17
Obtención de las ineas endogÆmicas y sus respectivos grupos control 18
2 Aclimatación 21
3 Respiración 22
Determinación del tamaæo de muestra y tiempo de incubación 22
Determinación de la tasa respiratoria 22
Obtención de la tasa metabólica activa y estÆndar 24
AnÆlisis estadístico de las tasas metabólicas 24
4 Aclaramiento 25
Determinación del tamaæo de muestra 25
Determinación de la tasa de aclaramiento 26
RESULTADOS 30
l Respiración 31
5
1 1 Poblaciones y Cruza 31
1 2 Lineas EndogÆmicas y Controles 32
2 Marco de Actividad 35
2 1 Poblaciones y Cruza a 220C y 280C 35
2 2 Lineas EndogÆmicas y Controles 36
3 Tasa de Aclaramiento 37
3 1 Poblaciones y Cruza a 220C y 280C 37
32 Lineas EndogÆmicas y Controles 38
DISCUSIÓN 39
CONCLUSIONES 51
RECOMENDACIONES 52
BIDLIOGRAF˝A 53
Figura 1
Figura 2
Figura 3
Figura 4
Figura 5
6
IndiØe de Figuras
Ubicación geogrÆfica de las dos poblaciones evaluadas en la Península de
Baja California Sur 18
Obtención de grupos experimentales con cada una de las dos poblacionesMagdalena y Concepción así como la cruza FI CM entre ellas 20
Conformación de líneas endogÆmicas ERB 18 y ERB M 21
Versión miniaturizada del titulador de Bryan et al 1976 para la
determinación de oxígeno disuelto en agua marina Maeda Martinez1985 Sacado de Sicard 1999 24
Versión computarizada del sistema empleado para la determinación de tasa
de ingestión y aclaramiento Winter 1973 Gallager y Mann 1980
28
7
INTRODUCCIÓN
8
La captura de moluscos en MØxico empezó como una actividad económica de autoconsumo
de los habitantes de las zonas ribereæas Sin embargo con el paso de los aæos la demanda del
interior del país se fue incrementando por lo que el destino de la captura se dirigió a diferentes
estados en donde no se contaba con el recurso en forma natural En 1979 se presentó una captura
de 9930 toneladas de moluscos y para 1983 se obtuvieron un total de 2008 toneladas Uno de los
recursos mas explotados durante estos aæos en el país fue la almeja catarina Argopecten
ventricosus secundada por ostión caracol y de forma variable molusco s como el calamar
mejillón y pulpo Los intentos de incremento en la captura llegaron muy lejos ya que alcanzaron
niveles en los cuales los bancos naturales no pudieron sostener la explotación lo que en algunos
casos trajo el agotamiento total del recurso Baqueiro et al 1984
Como una alternativa para satisfacer la demanda de esta especie se recurrió a la acuicultura
la cual se basa en el cultivo de organismos acuÆticos bajo condiciones controladas y con la
característica fundamental de ser redituable económicamente Por otro lado es muy importante
considerar que las especie que se someterÆn a cultivo deben satisfacer ciertos requerimientos
como son aceptabilidad en el mercado precio competitivo y domesticación para el cultivo
García 1961 La almeja catarina nativa de Baja California es un recurso que presenta una alta
tasa de crecimiento y gran aceptabilidad en el mercado tanto nacional como internacional con un
alto valor comercial Esto ha contribuido en la necesidad de generar conocimientos sobre las
características biológicas de la especie así como en el desarrollo de sistemas de cultivo artificial
de la especie
El desarrollo de la metodología para el cultivo intensivo de Argopecten ventricosus almeja
catarina fue sustentado en esa información aunque futuros y continuos mejoramientos de esa
tecnología se apoyarÆn del nuevo conocimiento que se derive de estudios específicos Por otra
parte a pesar de que existen numerosas investigaciones acuaculturales sobre este molusco hasta
la fecha no se cuenta con trabajos de caracterización genØtica de la especie Dicha información
representa un aspecto de suma importancia en la acuicultura en el cultivo intensivo de almeja
9
catarina ya que provee las bases para establecer programas de mejoramiento genØtico de la
población
En forma paralela los estudios ecofisiológicos son una herramienta importante para las
investigaciones de tipo genØtico Esto se debe a que en el caso específico de molusco s ha sido
demostrado que las caracteristicas genØticas específicamente la heterocigosidad en los individuos
estÆ estrechamente correlacionada con crecimiento Koehn Shumway 1982 fueron los
primeros en demostrar que esa correlación de heterocigosidad crecimiento estÆ asociada y es
paralela a una relación entre metabolismo y heterocigosidad Ellos postularon que el mecanismo
fisiológico por medio del cual organismos heterocigotos logran mayores tasas de crecimiento se
basa en un decremento energØtico en el costo del metabolismo estÆndar lo cual a su vez debe
resultar en un incremento de la energía neta disponible para crecimiento y reproducción Diehl
et al 1986
Basandose en estudios hechos en peces la tasa estÆndar la tasa activa la tasa rutinaria y
el marco de actividad fueron descritas para moluscos por Thompson Bayne 1974 y Widdows
1973 Dicha descripción se basó en cambios en la ración alimenticia Definiendo la tasa estÆndar
o basal como la energía mínima requerida para mantener todas las funciones vitales en un
organismo inactivo que se encuentra bajo condiciones de ayuno la tasa activa como el nivel de
consumo de oxígeno bajo condiciones de mÆxima actividad y condiciones de estrØs la tasa
rutinaria la cual se encuentra relacionada con la estacionalidad tipo y cantidad de alimento
representa el consumo de oxígeno en actividad espontÆnea bajo condiciones normales El marco
de actividad se define como la diferencia entre el metabolismo activo y el metabolismo estÆndar
y representa la cantidad de energía potencialmente disponible para trabajo externo como
crecimiento reproducción y movimiento
Los trabajos de tipo genØtico en general se basaron inicialmente en definir la existencia de
una correlación entre crecimiento y heterocigosidad es decir si existe una relación directa entre
el grado de variabilidad genØtica y una mejor respuesta a las condiciones del medio viendo se
reflejada en un mayor crecimiento Estudios realizados por Gentili Beaumont 1988 enMytilus
10
edulis encontraron que existe una correlación positiva entre heterocigosidad y marco de actividad
Por otro lado en los estudios realizados por Garton et aL 1984 encontraron una relación
directamente proporcional entre crecimiento y heterocigosidad en Mulinia lateralis conclusión
derivada del hecho de que existe una correlación negativa entre heterocigosidad y el gasto
energØtico de metabolismo de rutina lo que hace pensar en una mayor eficiencia biológica Esta
misma correlación heterocigosidad gasto energØtico ha sido encontrada por otros autores en
diferentes especies Koehn Gaffuey 1984 en Crassostrea virginica Gaffuey 1986 en
Mytilus edulis Garton 1984 en lhais haemastoma Gaffuey 1986 en Myti lus edulis y Dillon
Manzi 1988 en Mercenaria mercenaria En general las investigaciones en las que se ha
encontrado una correlación heterocigosidad crecimiento ha sido cuando se trabaja con
poblaciones silvestres sujetas aun medio ambiente natural Zouros et al 1980 Foltz et al 1983
Foltz Zouros 1984 Zouros et al 1988 Sin embargo en el caso de pectínidos esta correlación
no ha podido ser demostrada Una posible razón es quizÆ la sugerida por V olckaert Zouros
1989 para Placopecten magellaniclls en donde proponen que la energía resultante de una
mayor heterocigosidad en organismos móviles es utilizada para movimiento y escape de
depredadores Otra explicación aœn mÆs concordante con los resultados publicados
recientemente en otros moluscos es que este tipo de correlación se presenta preferentemente en
poblaciones sujetas a medios ambientes estresantes Por ejemplo Scott Koehn 1990
encontraron en Mulinia lateralis que la correlación entre heterocigosidad y crecimiento se
presenta en forma significante sólo cuando los organismos crecen bajo condiciones de
temperaturas o salinidades estresantes y no cuando el ambiente era el óptimo para esa especieAsí mismo Gentili Beaumont 1988 reportan que para Mytillls edlllis se presenta una
correlación significante entre crecimiento y heterocigosidad cuando este organismo era crecido
bajo condiciones estresantes de alta densidad de manera contraria esta correlación no era
evidente cuando se crecía a bajas densidades Lo que nos dice tambiØn que la correlación
heterocigosidad crecimiento es mÆs grande cuando se experimenta bajo condiciones estresantes
Otro aspecto que ha sido de sumo interØs para los investigadores es la eficiencia con la cual
los bivalvos obtienen sus fuentes energØticas del medio En los estudios realizados se han
11
encontrado varios mecanismos que intervienen en la alimentación como es el caso de la tasa de
aclaramiento tasa de ventilación tasa de ingestión y tasa de filtración Bayne et al 1985 definen
la tasa de aclaramiento como el volumen de agua limpiado aclarado de partículas por unidad de
tiempo la tasa de ventilación como el volumen de agua que pasa a travØs de las branquias con
relación al tiempo y es igual a la tasa de aclaramiento cuando se da un 100 de eficiencia de
retención de partículas lo que depende en gran medida del tamaæo de partículas La tasa de
filtración por otro lado es definida como la cantidad de material particulado filtrado extraído del
volumen de agua por hora y que puede tambiØn ser definida como la tasa de aclaramiento entre
la concentración de partículas La tasa de ingestión por su parte fue definida por Bayne 1976
como la cantidad de alimento ingerido por unidad de tiempo
Es conocido que tanto la tasa de filtración ventilación ingestión y aclaramiento son
afectadas por distintos factores tanto internos edad estado fisiológico talla etc como externas
particularmente temperatura salinidad tipo y cantidad de alimento entre otras Las referencias
de moluscos marinos y los estudios sobre alimentación indican que la extracción de oxígeno del
agua ocurre principalmente en la superficie branquial por lo que estos órganos cumplen una doble
función alimenticia y respiratoria Wilson 1989 Dicha característica bifuncional abrió nuevos
campos de investigación enfocados a la presencia de una correlación entre la alimentación y la
tasa metabólica Así Bayne et al 1973 encuentran que la tasa de filtración en mejillones es
directamente proporcional al marco de actividad y Widdows 1973 y Bayne 1976 trabajando
con Mytilus edulis encontraron que la tasa de filtración es directamente proporcional a la tasa
metabólica Por otro lado Garton et al 1984 trabajando con Mulinia lateralis encuentran una
correlación entre tasa de aclaramiento y el costo metabólico de rutina Otros investigadores como
Ulrik 1991 reportan que un medio saturado de alimento provoca en Mytilus edulis una
reducción en la tasa de filtración y consecuentemente una reducción en el metabolismo Beiras
et al 1994 trabajando con Ostrea edulis reportan que la tasa de ingestión y consumo de
oxígeno son directamente proporcionales Bayne 1976 Thompson 1984 Koehn Bayne
1989 encuentran que en moluscos en general se presenta una correlación entre tasa de
alimentación y consumo de oxígeno
12
De manera significativa diversos autores han insistido en seæalar a la temperatura como un
factor directamente responsable de cambios fisiológicos importantes como son la tasa respiratoria
y la tasa de filtración de los organismos En los trabajos como los de Read 1962 Widdows
1972 Bayne 1973 y Bruce 1996 conMytilus edulis y Read 1962 con Modio us demissus
se reporta que la tasa activa y de rutina dependen de los cambios de temperatura a mayor
temperatura mayor metabolismo y seæalan ademÆs que esta relación presenta un límite de
tolerancia que varia en cada especie Sin embargo aunque en general en moluscos el patrón que
sigue es incrementar la tasa metabólica con el aumento de la temperatura Bayne 1976 encuentra
que Mytilus edulis mantiene relativamente independiente su tasa estÆndar de la temperatura en
condiciones de estrØs siendo Øste un comportamiento característico de moluscos que como
Mytilus edulis habitan la zona inter mareaPor otro lado trabajos realizados en Mytilus edu is
por Thompson 1984 indican que la tasa de aclaramiento se encuentra estrechamente
correlacionada con el consumo de oxígeno y la temperatura
En el presente trabajo se experimentó con dos poblaciones geogrÆficamente aisladas las
cuales fueron reproducidas en el laboratorio conformando a la par una cruza entre ellas F 1 que
teóricamente debido a una diferenciación genØtica entre poblaciones se esperaría se caracterice
por una mayor heterocigosidad que cualquiera de las poblaciones de las cuales fue obtenida Estos
tres grupos genØticos la población de Bahía Magdalena M la de Bahía Concepción C así
como su cruza F1 fueron evaluados para determinar su respuesta fisiológica a largo plazo en
laboratorio Adicionalmente y con el fin de obtener grupos que se caractericen por un alto grado
de homocigosidad líneas endogÆmicas fueron producidas con controles no endogÆmicos y
comparadas sobre la base de sus características fisiológicas al igual que los grupos M C y Fl
De esta forma se obtuvieron teóricamente un grupo con un alto grado de heterocigosidad F 1
Y 2 grupos con heterocigosidad normal poblaciones así como dos grupos con reducido grado
de heterocigosidad lineas endogÆmicas y sus respectivos controles con heterocigosidad normal
En cada uno de Østos se evaluaron dos niveles de respiración la tasa activa y la tasa estÆndar Así
mismo se determinó la tasa de aclaramiento de la cruza y poblaciones así como de las líneas
endogÆmicas con sus respectivos grupos control con el fin de estudiar las posibles diferencias en
13
esta tasa dependiendo del grado de heterocigosidad así como para encontrar sí existía o no una
relación con la tasa metabólica y la tasa de aclaramiento en las diferentes temperaturas
experimentales
14
JUSTIFICACIÓN
Aunque se han realizado numerosas investigaciones referentes aArgopecten ventricosus
se cuenta con muy poca información sobre características de tipo genØtico y fisiológico las cuales
resultan en un conocimiento fundamental durante la implementación de programas de
mejoramiento genØtico Dichos programas pretenden obtener un mejor rendimiento en el cultivo
es decir obtener la talla comercial en un menor tiempo
En este contexto es importante conocer si un mayor grado de heterocigosidad ofrece alguna
ventaja lo cual se haría aparente al observar diferencias entre la cruza y los progenitores debido
a la mayor heterocigosidad esperada en las cruzas así como al observar diferencias entre las líneas
endogÆmicas y sus controles
Una forma de conocer esto es a travØs de la evaluación de las características fisiológicas
tales como tasa activa tasa estÆndar tendencia del marco de actividad y tasa de aclaramiento en
grupos genØticos diferentes ya que estas nos pueden seæalar indirectamente la capacidad
energØtica de los organismos Bayne 1973 lo cual pudiera interpretarse como una consecuencia
del grado de heterocigosidad en esos grupos genØticos
15
OBJETIVOS
Evaluando la tasa activa tasa estÆndar y tasa de aclaramiento en juveniles de almeja catarina
Argopecten ventricosus Sowerby 1835 provenientes de distintos grupos genØticos poblaciones
y cruza lineas endogÆmicas y sus grupos control se pretende conocer
1 Si poblaciones con un origen geogrÆfico distinto presentan diferencias en su tasa
activa tasa estÆndar y en la tendencia del marco de actividad
2 Si la cruza producida con las dos poblaciones anteriores que se espera tenga un
grado de heterocigosidad mayor que las poblaciones presenta diferencias con
las poblaciones en su tasa activa tasa estÆndar y en la tendencia del marco de
actividad
3 Si existen diferencias en tasas metabólicas entre las temperaturas de 220C y 280C
4 Si las líneas endogÆmicas presentan diferencias con sus grupos control en su tasa
activa y tasa estÆndar
5 Si la homocigosidad inducida por la autofecundación resulta en una menor
tendencia del marco de actividad
17
METODOLOG˝A
18
1 Producción de grupos experimentales
Obtención de las Poblaciones y la Cruza
Para la realización del presente trabajo se procedió a obtener como primera instancia grupos
genØticos distintos partiendo de dos poblaciones las cuales se encuentran geogrÆficamente
aisladas la población de Bahía Magdalena ubicada en el OcØano Pacífico y la población de
Bahía Concepción localizada en el Golfo de California Cada una de estas localidades cuenta con
un rØgimen climÆtico muy distinto por lo que se sabe que existe una diferenciación y son
poblaciones genØticamente diferentes Cruz et al 1998 Fig 1
32N
Oceano
Pacffico
iN
2201170 1 Q90W
Figura 1 Ubicación geogrÆfica de las dos poblaciones evaluadas en la Península de Baja
California Sur
19
La obtención del grupo M población de Bahía Magdalena se llevó a cabo mediante la
colecta de reproductores de dicha zona por medio de buceo autónomo los cuales fueron
trasladados en medio hœmedo y con aireación continua al laboratorio en donde se mantuvieron
en agua marina filtrada a 1um a una temperatura de 21o
C a una salinidad de 38 ppm Se
alimentaron con Isochrysis galbana a una ración diaria de 300 000 celorg racionando esta
cantidad en dos porciones de 150 000 celorg por la maæana y 150 000 al atardecer De estos
organismos se seleccionaron 32 individuos por su madurez gonadal y se indujeron al desove 0 5
rol de serotonina al 0 5 rnM Dicho desove se realizó colocando todos los reproductores en una
misma tina con capacidad de 1500 litros conteniendo agua marina filtrada en serie de 10 5 Y 1um
y tratada con luz ultravioleta Fue aquí donde se efectuó la expulsión de óvulos y esperma y
posteriormente la fecundación Los organismos obtenidos en dicho desove se mantuvieron en
laboratorio hasta su etapa de semilla 1 1 rnm y posteriormente se trasladaron al medio natural
Fig 2 Izquierda El grupo C por su parte se obtuvo con la colecta de reproductores en Bahía
Concepción utilizando la misma metodología tanto para la captura traslado y reproducción que
para el grupo M Fig 2 Derecha Por otro lado la cruza F1 se produjo utilizando esperma de
reproductores de Bahía Concepción y óvulos de almeja catarina de Bahía Magdalena bajo las
mismas condiciones que las mencionadas anteriormente para las poblaciones Fig 2 Centro
Obtención de las líneas endogÆmicas y sus respectivos grupos control
Las líneas endogÆmicas se produjeron mediante la inducción al desove 0 5 mI serotonina
1M de individuos silvestres proveniente de Rancho Bueno En el caso de la línea ERBM esta
se produjo mezclando larvas producidas individualmente por autofecundación en 3 organismos
silvestres La línea ERB18 fue producto de 1 solo organismo silvestre autofecundado Para ambos
casos se colocó a cada organismo individualmente en un tambo con capacidad de 200 litros de
fondo plano con agua marina filtrada en serie de 10 5 Y 1um y tratada con luz ultravioleta a fin
de que se liberaran tanto los gametos masculinos como femeninos y de esta manera se pudiera
llevar a cabo la autofecundación Fig 3 Los individuos endogÆmicos resultantes permanecieron
20
Reproductores de Babia Magdalena Reproductores de Bahia Concepción
lilf fI Þ ł 11t v
l Jl ˛tm1Øß 0J JCI0
1Acondicionamientomadw ación Acondicionamientomaduraciónyselección de24 reproductoreayselección de24reproductorea porsumadurez gonadaJ por sumadw ez
gonadaJ II16almejas deBahía Magdalena 16 almejas deBahía
ConcepciónTll Ide lSOØ L JTll I de lSOO L1Esperma de8almejas deBCyovu osde8almejas de
BM Producción de Grupo Producción deGrupo
MJ
c n de lS0O
LProducción deCruza FI
CM Figura 2Obtención degrupos experimentales con cada una de lasdos
poblaciones Magdalenay Concepción así como la cruza F lCM
entreellas
1l
en laboratorio hasta alcanzar la talla de semilla y posteriormente se trasladaron al campm pma
continuar con la fase de crecimiento durante un periodo de 2 meses
IX lf I
J
n if
J
OVULOS y
ESPERMA
OVULOS y
ESPERMA
IXl i I
X Ì x JJI JI
OVULOS y
ESPERMA
OVULOS y
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AUTOFECUNDACIÓN AUTOFECUNDACIÓN CADA ALMEJA
ProgenieEndogÆmica
F 6 5
PmgmueEndngœmJl1l
F U 5
LINEA ENDOG`MICAERB 18
Figura 3
I
II
iii 1c1ilîIi t f
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Progtlll˝lEndDgmD1ÌIJl
F O5
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F U 5
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LlN˘ASElQIIGM̀TCA S
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Conformacirirn aæ fineasenalIDgÆmi cas EItBl y ElltSM
2 9
22
Para cada línea endogÆmica se obtuvo paralelamente un grupo control llamado control M
para la línea proveniente de la mezcla de organismos endogÆmicos y un segundo grupo control
18 para la línea ERB 18 Cada uno de los grupos controles se obtuvieron como resultado de la
fecundación cruzada entre al menos 20 reproductores silvestres provenientes de Rancho Bueno
los cuales fueron colocados para un desove en masa en una tina de 1500 litros con agua marina
filtrada en serie de 10 5 Y lumy tratada con luz ultravioleta Una vez alcanzada la talla de semilla
se procedió al traslado de Østas al medio natural bajo las mismas condiciones empleadas para los
grupos con las líneas endogÆmicas ERBM y ERB 18
2 Aclimatación
Para el desempeæo del trabajo experimental los orgamsmos fueron trasladados al
laboratorio en medio hœmedo y aireación continua hasta su llegada Para cada grupo genØtico se
instalaron cubetas plÆsticas con 19 litros de capacidad con aireación agua marina con una
salinidad de 37 ppm a una temperatura de 19 oC alimentÆndolos con raciones diarias de 300 00
ceVm1 dividida en dos porciones de 150 000 ceVrnl de Isochrysis galbana y la limpieza de heces
y recambios parciales del 50 de agua bajo la misma condiciones se realizó de manera cotidiana
La aclimatación a temperatura de 220 y 28 oC se llevó a cabo paulatinamente manteniendo
constantes los parÆmetros restantes Posteriormente se da la oportunidad a los organismos de
restablecer su tasa de alimentación y actividad normal Sin embargo este esquema no se pudo
llevar a cabo satisfactoriamente debido a una falla en el sistema de regulación tØrmico el cual no
sólo provocó la interrupción del proceso de aclimatación sino que ademÆs indujo el desove de
los organismos Debido a esto se procedió a colocar a los organismos nuevamente bajo
condiciones de aclimatación buscando que primero se recuperaran del gasto energØtico asociado
con el desove Esta aclimatación se prolongó durante 4 meses
23
3 Respiración
Determinación del tamaæo de muestra y tiempo de incubación
El tiempo de incubación empleado se determinó incubando organismos a 30 minutos 1
y 2 horas alas temperaturas experimentales de 22 y 28oC Por otro lado se realizaron pruebas con
3 y 5 organismos dentro de las botellas a fin de comprobar que no hubiera variaciones en las
determinaciones por el nœmero de organismos empleados De acuerdo a los resultados se
seleccionó el tiempo y nœmero de organismos en el que la tasa respiratoria permanece constante
Detenninación de la tasa respiratoria
La obtención de la tasa respiratoria en los diferentes grupos genØticos generados se llevó
a cabo de manera indirecta mediante la medición de la diferencia en la concentración de
oxígeno disuelto antes y despuØs de un período de incubación en una botella de tipo DBO
Demanda Bioquímica de Oxígeno Para la experimentación con los organismos se filtró
agua marina a 37 ppm de salinidad empleando filtros de 0 7 um El agua fue aireada en
recipientes de 19 litros hasta obtener un nivel de saturación del 100 Y con dicha agua se
llenaron las botellas DBO en las cuales se encontraban contenidos los organismos para
experimentación Las cÆmaras de incubación son llenadas mediante una manguera a manera
de sifón evitando el burbujeo y la turbulencia dejando derramar dos veces el volumen de
la botella y permitiendo una homogeneización del oxígeno disuelto dentro de la misma Una
vez conseguido esto la botella se cierra y se coloca en un baæo termorregulado a la
temperatura experimental iniciando así la incubación Para cada condición experimental se
trabajaron 3 rØplicas y un blanco sin organismos que es tomado como referencia
Terminado el tiempo de incubación cada botella es abierta de manera inmediata y se
sifonØa agua de la botella en tubos de prueba de 7 mI los cuales son sellados con un tapón
esmerilado La fijación de las muestras se realizó de acuerdo a la modificación del mØtodo
24
hecha por Maeda 1985 Y a una modificación a la titulación fotomØtrica implementada por Bryan
et al 1976 donde los cambios de color son observados a travØs de una pantalla hasta conseguir
el punto de extinción Fig 4
0CaweItidcr ttgbI 8dOr
OeIllCtor dekIZ
Figura 4 Versión miniaturizada del titulador de Bryan et al 1976 para la
detenninación de oxígeno disuelto en agua marina Maeda Martinez1985 Tomado de Sicard 1999
25
Obtención de la tasa metabólica activa y estÆndar
La tasa activa TA se estimó en organismos de 10 meses de edad aclimatados a 22 y
280C previamente alimentados con Isochrysis galbana 150 000 celml durante 30 mino
Como característica previa a la metodología descrita antes para estos fines los organismos
deben ser aclimatados para las determinaciones bajo las mismas condiciones a que fueron
expuestas con anterioridad Ya aclimatados los orgaIÚsmos y asumiendo que son
alimentados diariamente se puede proceder a determinar el consumo de oxígeno para cada
grupo obteniendo de esta manera la tasa activa TA Posteriormente los organismos se
sometieron a condiciones de ayuno durante 10 días y llegado el dØcimo día se determinó el
consumo de oxígeno con el fin de obtener la tasa estÆndar a este tiempo
AnÆlisis estadístico de las tasas metabólicas
Los datos obteIÚdos para ambas tasas metabólicas de las poblaciones y su cruza así
como de las líneas endogÆmicas y sus controles fueron calculadas por organismo Los datos
se procesaron por medio de un anÆlisis de variancia y las medias se compararon con una
prueba de Tukey HSD En el caso de las poblaciones y su cruza el modelo fue bifactorial para
determinar si existían diferencias significativas o no entre los grupos a las dos temperaturas
experimentales El modelo lineal utilizado fue
Yijk u Gi Tj Gi Tj eïjk
Donde
Yijk Tasa activa del grupo genØtico G a la temperatura T
u Media constante
26
Gi Efecto del grupo genØtico sobre la tasa activa i 1 2 3
Tj Efecto de la temperatura sobre Tasa activa Û 1 2
Gi Tj Interacción entre grupo genØtico y temperatura
eijk Error observacional k 1 23
En el caso de las líneas endogÆmicas y sus controles el modelo utilizado fue unifactorial ya
que solo se llevaron a cabo determinaciones a una temperatura
Yik u Gi eik
Determinación de la tendencia del marco de actividad
El marco de actividad se obtuvo segœn el mØtodo descrito por Thompson Bayne1974 el cual define al marco de actividad como la diferencia en tasa activa y tasa estÆndar
MA TA TE
Donde
MA Marco de Actividad
TA Tasa activa
TE Tasa estÆndar
4 Aclaramiento
Determinación del tamaæo de muestra
Con el fin de encontrar el tiempo óptimo de incubación así como el tamaæo de muestra
se realizaron diferentes pruebas con 5 y 3 organismos al 2 y 3 horas a 22oe y 28 oe que son
las temperaturas con las cuales se estaba experimentando Cada condición fue analizada para
27
determinar el nœmero de organismos y el tiempo de incubación en el cual se mantiene estable el
sistema y que representa el tamaæo de muestra y el tiempo de incubación adecuado para
realizar los experimentos subsecuentes
Determinación de la tasa de aclaramiento
La determinación de la tasa de aclaramiento se obtuvo mediante la implementación de un
sistema similar al empleado por Gallager Mann 1980 Este sistema se basa en el mØtodo
Winter 1960 el cual consiste en el mantenimiento de un medio con partículas bajo
concentración constante Esto se logra por medio de una bomba peristÆltica la cual inyecta
alimento de reposición a medida que los organismos filtran El monitorØo de las microalgas se
realizó por medio de un fluorímetro el cual se encuentra conectado a un convertidor analógico
digital que transforma las unidades de fluorescencia en unidades de voltaje y las transmite a un
sistema de control IBM Dicho equipo cuenta con un paquete computacional que permite llevar
a cabo el monitoreo de microalgas manteniendo cierto nivel de concentración indicado al iniciar
el programa Si la concentración de cØlulas baja el equipo manda la seæal hacia el sistema de
control el cual enciende la bomba peristÆltica que repone el alimento en la cÆmara en la que se
encuentran los organismos Conociendo los tiempos de encendido de la bomba que son
almacenados en un archivo el flujo y la concentración del alimento en la cÆmara así como la
concentración de alimento de reposición es posible determinar la tasa de aclaramiento Gallager
et al 1980 Fig 5
Para cada uno de los experimentos se empleó agua marina filtrada hasta 0 7 11m y una
concentración de microalgas de 150 000 celrnl a la temperatura experimental La temperatura
es mantenida por medio de un baæo termorregulado el cual contiene la cÆmara de incubación
Los datos almacenados en el sistema control son capturados y procesados por medio de un
programa macro que proporciona la tasa de aclaramiento CR por organismo a partir del
siguiente supuesto
28
Re levador de
estado sólido
on off lMleo mputadora
Convertidor
analógico digital
tIII
Aire11IIIIII
FluorómetroAire1
Bomba
peristÆltica 1
Malla plÆstica
Celda de flujocontínuo
Alimento de
reposiciónBaæo
termoregulado
Figura 5 Versión computarizada del sistema empleado para la determinación de tasa
de ingestión y aclaramiento Winter 1973 Gallager y Mann 1980
29
CRTasa de Ingestión Medio de Incubación
Donde la tasa de ingestión TI por organismo se define como
TI VAl Alimento de Reposición N
en donde
TI Tasa de Ingestión
VAl Volumen de alimento inyectado
Alimento de Reposición Concentración de alimento de reposición
N nœmero de organismos
El volumen de alimento inyectado VAl se obtiene de la siguiente ecuación
VAl te Q 200
en donde
te tiempo de encendido
Q flujo
AnÆlisis estadístico de la tasa de aclaramiento
Los datos de las tasas de aclaramiento tambiØn se sometieron a un anÆlisis de variancia y una
prueba de Tukey HSD para de esta manera determinar si existían diferencias significativas o no
entre los grupos y entre las temperaturas Se utilizó el mismo modelo lineal que fue descrito para
las tasas metabólicas para cada grupo experimental Para las poblaciones y la cruza este modelo
fue
YijkU Gi Tj Gi Tj eijk
Donde
Yijk Tasa de aclaramiento del grupo genØtico G i a la temperatura T
u Media constante
Gi Efecto del grupo genØtico sobre la tasa de aclaramiento i 1 23
Tj Efecto de la temperatura sobre Tasa de aclaramiento Ú 1 2
Gi Tj Interacción entre grupo genØtico y temperatura
eijk Error observacional k 1 2 3
Para las líneas endogÆmicas y sus controles el modelo unifactorial fue
y ik U Gi eik
Donde
Yik Tasa de aclaramiento del grupo genØtico G i
Gi Efecto del grupo genØtico sobre la tasa de aclaramiento i 1 2
30
RESULTADOS
31
I
32
1 Respiración
11 Poblaciones y Cruza1
Se obtuvo un tamaæo de muestra de 3 organismos por botella con un tiempo de incubación de 30
minutos para todos los grupos bajo las dos temperaturas experimentales 22 y 280C
11 1 Tasa activa TA a 2rC y 280C
En los datos obtenidos para la TA estimada posteriormente a un largo periodo de aclimatación
a cada temperatura no hubo diferencias estadísticamente significativas entre grupos P 0 66
ni entre temperaturas P 0 35 a pesar de observarse una TA a 280C un poco mas alta que a
220C para todos los grupos En cuanto a tendencias se observó que la población de M a220C
presenta una TA mÆs alta que la de la población C y F 1 a 220C siendo la cruza la que presentó
la tasa activa mÆs baja Porotro lado en el caso de la TA a280C se observó que la población de
C presentó una TA mayor y la cruza Fl nuevamente presentó el valor mÆs bajo Tabla 1
Tabla 1 Medias obtenidas por organismo de la tasa activa a 22 y 280Cde la cruza FI y las poblaciones M y C
GRUPO Tasa activa a 220C
mi 02lorghrTasa activa a 280C
mi 02lorghr
M 0 2386 a 0 2531 a
Fl 0 2094 a 0 2358 a
e 0 2312 a 02570 a
Medías con la misma letra no son estadísticamente diferentes pO 05
112 Tasa estÆndar Te a 220C ya 28 oC
Para la tasa estÆndar se observaron diferencias significativas en consumo de oxígeno entre las dos
33
temperaturas P 0 003 observando se un mayor consumo a la mayor temperatura No se
observaron diferencias significativas entre los grupos genØticos evaluados P 0 93 Los
resultados se muestran en la Tabla 2
Tabla 2 Medias obtenidas por organismo de la tasa estÆndara 22 y 280C de la cruza y las poblaciones
GRUPO Tasa estÆndar a 220C
mi 02lorglbrTasa estÆn dar a 280C
mi 02lorglhr
M 0 1451 a 0 2069 b
Fl 0 1409 a 0 2100 b
C 0 1433 a 0 2188 b
Medias con la misma letra noson estadísticamente diferentes pO 05
12 Lineas EndogÆmicas y Controles
Se obtuvo un tamaæo de muestra de 3 organismos por botella con un tiempo de incubación de
30 minutos para todos los grupos bajo una sola temperatura experimental 220C
12 1a Tasa activa TA de la linea endogÆmica ERB18 y su grupo control
Control 18
No se observaron diferencias significativas entre la tasa activa de la linea endogÆmica y su grupo
control P 0 051En cuanto a la tendencia observada la tasa activa de la linea endogÆmica fue
un poco mayor que la tasa activa de su grupo control no endogÆmico Tabla 3
34
Tabla 3 Medias por organismo de la tasa activa para el grupoendogÆmicos ERB18 y su control 18
GRUPO Tasa activa a 22 oCmi 02 orghr
ERBl8
Control 18
0 1765 a
0 1573 a
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes pO 05
12 1b Tasa activa TA del grupo endogÆmico ERBM y su grupo control M
No se observaron diferencias estadisticamente significativas en la TA del grupo endogÆmico y su
control no endogÆmico P 0 08 En este caso se observó una tendencia inversa en donde el
grupo control M presentó una TA mayor que el grupo endogÆmico ERBM Tabla 4
Tabla 4 Medias por organismo de la tasa activa para el grupoendogÆmico ERBM y su grupo control M
GRUPO Tasa activa a 22 oC
mI 02 orghr
ERBM
Control M
0 1833 a
02116 a
Medias con la misma letrano son estadísticamente diferentes pO 05
12 2 a Tasa estÆndar TE por organismo de la linea endogÆmica ERBI8 y su
grupo Control 18
35
La tasa estÆndar entre el grupo endogÆmico y su control no endogÆmico fueron significativamente
diferentes P 0 000 siendo la tasa estÆndar del grupo endogÆmico ERB18 mayor que la tasa
estÆndar estimada para su grupo control no endogÆmico Tabla 5
Tabla 5 Medias por organismo de la tasa estÆndar para el grupo
endogÆmico ERB 18 Y su grupo control 18
GRUPO Tasa estÆndar
mi 02 orghr
ERB18
CONTROL 18
0 1514 a
0 0699 b
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes pO 05
12 2 b Tasa estÆndar TE del grupo ERBM y el grupo control M
Al igual que en el caso anterior se observaron diferencias estadísticamente significativas entre el
grupo endogÆmico y su control no endogÆmico P 0 000 La tasa estÆndar del grupo
endogÆmico fue mayor que la de su control no endogÆmico Tabla 6
Tabla 6 Medias por organismo de la tasa estÆndar para el grupoendogÆmico ERBM y su grupo control M
GRUPO Tasa estÆn dar
mi 02 orgbr
ERBM
CONTROL M
0 1482 a
0 1007 b
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes pO 05
36
2 Marco de Actividad
2 1 Poblaciones y Cruza a 220C y 280C
El marco de actividad resultante de las dos tasas activa y estÆndar para cada grupo genØtico se
puede ver en la tabla 7
Tabla 7 Marco de actividad de las poblaciones y cruza a 220C
GRUPO
Tendencia del marco
de actividad
220C
M
Fl
C
0 935
0 685
0 879
En el caso de la evaluación a 280C el marco de actividad resultante de las dos tasas se puede
observar en la tabla 8 En forma general el marco de actividad a 280C fue menor que el
observado a 220C Tabla 8
Tabla 8 Marco de actividad de las poblaciones y cruza a 280C
M
Fl
C
Tendencia del marco
de actividad
280C
0463
0 259
0 382
GRUPO
37
2 2 Lineas EndogÆmicas y Controles
2 2 a Linea endogÆmica ERB18 y su grupo Control 18
Con respecto a los grupos endogÆmicos y sus controles la tendencia del marco de actividad
indica que el grupo endogÆmico ERB 18 presenta un menor marco de actividad que su grupo
control como se puede ver en la tabla 9
Tabla 9 Marco de actividad de 1 grupo ERB18 y su control 18 a 220C
GRUPO
Tendencia del marco
de actividad220C
0 258
0 874
ERB18
Control 18
2 2 b Grupo endogÆmico ERBM y su grupo Control M
En lo concerniente a la tendencia del marco de actividad en este segundo experimento con
grupos endogÆmicos el grupo endogÆmico ERBM presentó un menor marco de actividad que el
obtenido por su grupo control M como se puede apreciar en la tabla 10t
Tabla 10 Marco de actividad del grupo ERBM y su control M a 220C
GRUPO
Tendencia del marco
de actividad220C
ERBM
Control M
0 350
0 1108
38
3 Tasa de Aclaramiento
3 1 Poblaciones y Cruza a 220C y 280C
El tamaæo de muestra obtenido mediante la experimentación fue de 3 organismos por cÆmara en
cada experimento durante 2 horas de experimentación
En esta tasa no se observaron diferencias significativas entre grupos P 0 09 debido a la gran
variación en consumo durante la hora de evaluación Tampoco se obtuvieron diferencias
significativas entre tasa de aclaramiento a las dos temperaturas evaluadas P 0 60 Por otro lado
en cuanto a tendencias se observó que el grupo M presentó el valor mÆs alto a 220C seguido
cercanamente por la cruza F1 mientras que el grupo C presentó la menor tasa de aclaramiento a
esta temperatura En el caso de las evaluaciones a 280C el mayor valor obtenido fue el grupo F1
con una tasa de aclaramiento 1 5 mayor que la observada a 220C pero en el caso de la población
C la tasa de aclaramiento fue 15 menor que a 220C En el caso de la población M no se registró
ningœn consumo durante la hora de evaluación a280C Tabla 11
Tabla I 1 Medias obtenidas por organismo de la tasa de aclaramiento
a 22 y 280 C de la cruza Fl y las poblaciones M y C
GRUPO Tasa de aclaramiento a
220C acUorg hr
Tasa de aclaramiento a
280C acUorWhr
M
Fl
e
3 6687 a
3 0041 a
13677 a
0 00000 a
5 28813 a
0 88386 a
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes p 0 05
39
3 2 Lineas EndogÆmicas y Controles
3 2 a Linea endogÆmica ERBI8 y su grupo control 18 a 220C
En este caso la tasa de aclaramiento fue significativamente mayor para el grupo control 18 que
para el grupo endogÆmico ERB18 Tabla 12
Tabla 12 Medias por organismo de la tasa de aclaramiento para el grupo
endogÆmico ERB18 y su grupo control 18
GRUPO Tasa de aclaramientoacl or hr
ERBl8
Control 18
1 8272 a
2 7403 b
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes p O 05
3 2 b Grupo endogÆmico ERBM y su grupo Control M a 220C
La tasa de aclaraIlÚento para estos grupos se observó muy homogØnea entre el grupo endogÆmico
ERBM y su grupo control no habiendose observado diferencias estadísticamente significativas
Tabla 13
Tabla 13 Medias por organismo de la tasa de aclaramiento para el grupo
endogÆmico ERBM y su grupo control M
GRUPO Tasa de aclaramiento
acl or hr
ERBM
Control M
4 3578 a
44685 a
Medias con la misma letra no son estadísticamente diferentes p 0 05
40
DISCUSIÓN
41
En el presente trabajo se buscó tanto el lograr un incremento en la heterocigosidad en la
almeja catarina Argopecten ventricosus mediante la cruza de organismos provenientes de
poblaciones aisladas como el lograr un decremento en heterocigosidad con la producción de
líneas endogÆmicas Nos avocaremos primero a discutir los resultados obtenidos con las
poblaciones y su cruza y posteriormente los obtenidos con las líneas endogÆmicas
POBLACIONES Y SU CRUZA
Es importante seæalar que las dos poblaciones utilizadas para la producción de la cruza Fl
son poblaciones adaptadas a diferentes condiciones ambientales Por ejemplo la población de
Bahía Magdalena BM estÆ sometida a una temperatura anual promedio 22 OC menor que la
que afecta a la población de Bahía Concepción BC 24 9 oc Cruz HernÆndez 1997 Así
mismo BM es un cuerpo de agua que presenta menos variaciones extremas ya que se encuentra
conectada en su parte central con el OcØano Pacífico abierto a travØs de una boca ancha de 38
m de profundidad AlvarØz Borrego et al 1975 En cambio Bahía Concepción es un cuerpo de
agua influenciado por las condiciones que se presentan en el Golfo de California donde existen
pronunciadas diferencias estacionales en las temperaturas de aguas superficiales Dawson 1994
Pacheco Ru˝z et al 1992 Sólo para el aæo de 1990 Mateo Cid et al 1993 reportan que la
temperatura media superficial del agua en BC osciló entre 17 50C en invierno y 34 80C en el
verano coincidiendo esta œltima con la temperatura superficial mÆxima registrada por varios
autores durante el periodo de 1988 a 1994 Bojórquez VerÆstica 1997 Lechuga DevØze etal
en revisión
Dadas esas condiciones ambientales tan diferentes así como el aislamiento geogrÆfico que
existe entre estas dos poblaciones resultado de la misma península actuando como una barrera
42
al intercambio gamØtico en el presente trabajo se partió con el supuesto de que la población de
Magdalena y la población de Concepción eran poblaciones genØticamente distintas por lo que
se esperaría que la progenie producida por cruzamiento entre esas poblaciones se caracterizara
por una mayor variabilidad genØtica que los progenitores De hecho ha sido demostrado que
estas dos poblaciones son diferentes en las adaptaciones que presentan para crecer y sobrevivir
en esos dos medios ambientes pero la cruza no manifestó ninguna superioridad a las poblaciones
Cruz et al 1998
La interpretación de una falta de diferencias en las tasas respiratorias evaluadas para las
poblaciones y su cruza no es simple debido a que parece contradecir observaciones previas al
presente estudio Evidencias logradas en los œltimos 20 aæos han mostrado que la tasa de
crecimiento de diversas especies se encuentra positivamente correlacionada con su grado de
heterocigosidad y que la tasa metabólica se encuentra negativamente correlacionada con la
heterocigosidad Particularmente en moluscos bivalvos la correlación crecimiento
heterocigosidad se ha encontrado en distintas especies como Crassostrea virginica Singh
Zourus 1978 Zourus et al 1980 Koehn Shumway 1982 Crassostrea gigas Fujio 1982
Mulinia laterais Garton et al 1984 Macoma baItica Green et al 1983 Mytilus eduis
Koehn Gaffuey 1984 Diehl Koehn 1985 Hawkins et al 1989 y Dreissenapolymorpha
Garton Haag 1991 Se han postulado los mecanismos fisiológicos involucrados por los cuales
se cree que los organismos heterocigóticos obtienen mayores tasas de crecimiento Koehn
Shumway 1982 Diehl et al 1986 Koehn Bayne 1989 se piensa que las diferencias
individuales en el crecimiento derivan de las diferencias en el balance de energía Koehn Bayne
1989 De acuerdo con la ecuación de balance energØtico propuesta por Winberg 1956 P C
R F U 1 bajo condiciones de ayuno la tasa metabólica estÆndar representa la mínima energía
disponible para mantener las funciones vitales del organismo por lo que un decremento en el
costo respiratorio basal R indica mayor eficiencia metabólica e implica segœn Warren Davis
1967 un incremento de la energía neta disponible para crecimiento y reproducción de tal manera
I Donde P representa la energía neta asinølada o energía libre e la cantidad de alimento consunødo y F U
Y R representan las pØrdidas de energía a travØs de heces desechos nitrogenados y respiración respectivamente
43
que P R U A esta ecuación reducida se le conoce como marco de crecimiento Diehl et
al 1986 Esta hipótesis es apoyada por observaciones en las cuales la tasa metabólica estÆndar
se correlacionó negativamente con el grado de heterocigosidad de los organismos como en el
ostión Crassostrea virginica Koehn Shumway 1982 el caracol Thais haemastoma Garton
1984 el mejillónMytilusedulis Diehl et al 1985 y la salamandra Ambystoma tigrinum datos
nopublicados citados en Mitton Grant 1984 Al mismo tiempo en estos organismos el grado
de heterocigosidad secorrelacionó positivamente con el crecimiento a excepción de T
haemastoma
Así como existen estudios que apoyan la hipótesis de una correlación entre el grado de
heterocigosidad y la eficiencia fisiológica y el crecimiento tambiØn existen otros estudios que no
parecen apoyar esa hipótesis completamente aœn en ensayos realizados en una misma especie
como el de Diehl et al 1986 en Mytilus edulis Volckert Zouros 1989 en Placopecten
magellanicus Foltz Shumway Crisp 1993 en Littorina littorea Mientras que estos autores
encontraron una correlación negativa entre heterocigosidad y tasas metabólicas no encontraron
relación alguna entre heterocigosidad y crecimiento
Los resultados contradictorios observados a la fecha han llevado a considerar y discutir
ampliamente por varios autores una serie de factores o circunstancias que pueden operar contra
la relación heterocigosidad y crecimiento Gaffuey Scott 1984 Diehl et al 1986 Koehn et al
1988 En tØrminos g nerales la demostración de que existe una correlación entre la
heterocigosidad crecimiento y metabolismo estÆndar parece depender de varios factores como
son los etøistados a continuación a Laestructura genØtica de la población Gaffuey Scott
1984 b La edad a la cual se lleva a cabo la determinación de tasas metabólicas Dado que
el presupuesto energØtico de los organismos se modifica a lo largo de su desarrollo durante el
periodo reproductivo las diferencias genØticas y metabólicas se verían modificadas al destinarse
una buena parte de la energía libre marco de actividad al desarrollo gonadal Esto sugiere que
este tipo de estudios se lleven a cabo en organismos reproductivamente inmaduros Diehl et al
1986 c La ocurrencia de una mortalidad selectiva por tallas ya que es posible que bajo
44
ciertas condiciones la selección este operando sobre individuos de ciertas características
Dependiendo del periodo experimental no es raro pensar que ocurra una mortalidad diferencial
por tallas lo cual puede traer como consecuencia falsas apreciaciones Diehl Koehn 1985
Dieh1 et al 1986 Hawkins y Bayne 1991 d La variedad de variables metabólicas que
influencian la tasa de consumo de oxígeno Aquí se pueden considerar aquellos factores que
influyen en el metabolismo de los organismos así como las respuestas compensatorias a estos
Kohen Gaffuey 1984 Diehl et al 1986 e Condiciones de estrØs presentes cuando se
lleven a cabo las evaluaciones Se ha observado que el efecto de heterocigosidad en crecimiento
Diehl et al 1986 Green etal 1983 Ledig Garies Bonefeld 1983 y en la tasa respiratoria
Kohen Shumway 1982 es mas evidente en poblaciones sujetas a estrØs fisiológico Las
respuestas a dicho estrØs son dinÆmicas y pueden desarrollarse ajustes tales como respuestas
compensatorias homeostÆticas que pueden ser metabólicamente costosas
Considerando los factores anteriores en el presente estudio es posible que el incremento de
heterocigosidad inducido en la cruza no tuviera una contribución adicional al metabolismo
individual de los organismos por varias razones 1 la etapa de desarrollo reproductivo en la cual
el trabajo fue realizado lo cual pudo tener un costo energØtico adicional metabólico que evitara
mostrar las diferencias entre los grupos manejados 2 la ocurrencia de una respuesta
compensatoria irreversibles ante un prolongado proceso de aclimatación tØrmica enmascarando
las diferencias genØticas y 3 la ocurrencia de una mortalidad selectiva durante el periodo de
aclimatación tØrmica de los grupos
Contrario a lo realizado en el presente trabajo en muchos trabajos la respuesta de los
organismos es evaluada bajo condiciones controladas de laboratorio posterior a un periodo corto
de adaptación previa la cual puede ser de unas cuantas horas hasta varios días y la respuesta es
conocido como respuesta aguda Cuando las respuestas son evaluadas despuØs de un periodo
relativamente largo de acondicionamiento que puede durar de días a semanas o inclusive meses
se tiene un proceso de aclimatación o respuesta a largo plazo Hombach 1992 En el presente
trabajo se pretendía lograr un esquema de aclimatación incrementando paulatinamente la
45
temperatura hasta alcanzar el nivel deseado 22 y 280C Posteriormente se daría la oportunidad
a los organismos para reponer la tasa de alimentación y actividad normal todo esto en un tiempo
relativamente corto de entre 2 4 semanas Sin embargo este esquema no fue logrado con Øxito
debido a que una falla en el sistema de regulación tØrmica provocó no sólo la interrupción del
proceso de aclimatación sino tambiØn la liberación de gametos Se sabe que la presencia de
gametos puede imponer una gran dependencia de la tasa metabólica por los cambios de
temperatura Bayne et al 1973 Estas observaciones han sido confirmadas por Barber Blake
1985 y Bricelj et aL 1987 quienes observaron en Argopecten irradians un decremento en el
consumo de oxígeno posterior a un periodo de desove Aunado al cambio en consumo de
oxígeno Iglesias Navarro 1991 encontró que Cerastoderma edule requiere de un periodo de
por lo menos tres meses posterior al desove para restablecer su tasa respiratoria El descenso
observado en la tasa respiratoria ha sido interpretado por Bayne et al 1983 como una forma de
ahorro energØtico necesario para otros procesos metabólicos En el presente estudio despuØs de
ocurrido el desove y en base a estos antecedentes una vez que los organismos comenzaron a
restablecer su actividad se reinició el proceso de aclimatación incrementando la temperatura con
cambios mÆs discretos Posteriormente se pennitió que los organismos restablecieran sus reservas
energØticas por un periodo prolongado para posteriormente llevar a cabo las evaluaciones de tasas
metabólicas La evaluación de la tasa activa se realizó al cabo de un periodo total de 10 meses
y una vez obtenida los organismos se sometieron a periodo de ayuno de 10 días al final del cual
se estimó la tasa estÆndar para cada grupo y temperatura experimental
En cuanto a la falta de diferencias en tasa activa entre las dos temperaturas evaluadas este
resultado tambiØn pareciera contradecir lo establecido por varios autores a la fecha Esto se debe
a que la temperatura es considerada como el factor mÆs importante que determina el nivel de
actividad en poiquilotermos Bayne 1976Los efectos de la temperatura sobre la tasa respiratoria
han sido ampliamente estudiados por diversos autores Bayne et al 1973 Widdows 1973
Shafee 1982 Barber Blake 1985 Koehn Bayne 1989 En pectínidos los efectos de la
temperatura sobre la tasa respiratoria se observaron inicialmente cuando en organismos de una
misma especie el consumo de oxígeno variaba segœn la latitud Spärck 1936 Shumway et al
46
1988 Por otro lado organismos de la misma especie de zonas distintas han mostrado tasas
respiratorias similares coincidentemente con temperaturas parecidas Spärck 1936 Bricelj y
Shumway 1991 Así mismo se ha observado que para Patinopecten yessoensis Argopecten
irradians y Placopecten magellanicus existen variaciones de la tasa respiratoria en relación a
la Øpoca del aæo y que estas variaciones en tasa respiratoria se pueden explicar casi en un 100
por los cambios de temperatura Fuji Hashizume 1974 Barber Blake 1985 Shumwayet al
1988 Particularmente en la misma especie con la cual se trabajó en esta tesis Argopecten
ventricosus Silva Loera 1986 encontró una variación directa respecto al efecto de la temperatura
10 30oC sobre el consumo de oxígeno al trabajar con organismos de diferentes tallas sin
aclimatación previa Así mismo Sicard 1999 estudió los efectos de la temperatura sobre el
metabolismo activo y estÆndar de organismos juveniles de esta misma especie encontrando una
relación directa en un intervalo de temperaturas de 12 a 280C
Sin embargo en el presente trabajo las observaciones hechas sobre tasa respiratoria fueron
realizadas bajo distintos esquemas de adaptación tØrmica que en estudios anteriores Se ha
observado que algunos pectínidos así como otros invertebrados litorales son capaces de
modificar sus tasas respiratorias en relación directa a los cambios de temperatura del medio
fenómeno conocido como compensación La compensación ha sido interpretada como una
estrategia de los organismos para permanecer relativamente independientes de las variaciones
ambientales provocadas por lo ciclos de mareas tales como la temperatura exposición al aire
periodos de ayuno etc Hombach 1991 Demers Guderley 1994 Los esquemas de
compensación para la tasa activa rutinaria y estÆndar fueron descritos claramente por Widdows
Bayne 1971 en Mytilus edulis En ellos se muestra como un aumento en temperatura se ve
acompaæado de un incremento en la tasa respiratoria a cualquier nivel activo rutinario y
estÆndar Posterior a un periodo de aclimatación el incremento observado en la tasa activa se ve
un poco diminuido fenómeno conocido como aclimatación parcial la disminución es mÆs
dramÆtica en la tasa rutinaria llegando a restablecerse la tasa original por lo que se llega a una
aclimatación total mientras que la tasa estÆndar una vez que se ha incrementado se observa una
clara tendencia a mantenerse constante esto es presentandose lo que se denomina como no
47
aclimatación para esta tasa Esto asemeja los resultados observados en el presente trabajo ya que
solo en el caso de la tasa estÆndar se observó un incremento a mayor temperatura
Los resultados observados en cuanto a la tasa de aclaramiento a pesar de no mostrar
diferencias significativas son interesantes en el siguiente contexto Los organismos derivados de
la población de Bahía Magdalena al parecer fueron afectados en mayor grado cuando se
mantuvieron en altas temperaturas resultando esto en el cierre de valvas y la falta de filtración
incluso durante la presencia de alimento Debido a la doble función que presenta la branquia de
los moluscos bivalvos se sabe que existe una relación directa entre la tasa metabólica y la tasa de
filtración o aclaramiento o ingestión Bayne et al 1985 Esto no fue observado en el presente
trabajo aunque es dificil establecer conclusiones en cuanto a tasa de aclaramiento debido a
problemas con el equipo de computo y al hecho de que solamente sobrevivió una replica de la
población de Magdalena mantenida a 280C
Por œltimo para los tres grupos genØticos se estimó una tendencia del marco de actividad
diferencia entre la tasa metabólica activa y tasa metabólica estÆndar En tØrminos generales los
resultados muestran una tendencia del marco de actividad a 280C a ser menor que a 220C y va
acorde con el hecho de haber observado un incremento en la tasa estÆndar a 280C Esta respuesta
del marco de actividad respecto a la temperatura es similar a la reportada para Crassostrea gigas
Le Gall Raillard 1988 Venerupis pullastra Albentosa et al 1994 y Ostrea edulis Beiras
et al 1994 donde se presentó un marco de actividad menor a temperaturas altas Particularmente
en juveniles de Argopecten ventricosus provenientes de una población de Bahía Magdalena
Sicard 1999 buscando el punto óptimo de temperatura determinó el marco de actividad a
diferentes temperaturas de 12 a 280C encontrando que este se reducía al incrementar la
temperatura Todos estos resultados sugieren que a temperaturas altas la almeja catarina cuanta
con menor energía libre disponible para realizar trabajo como movimiento crecimiento y
reproducción Estas observaciones se ven sustentadas ademÆs por el hecho de que en el presente
trabajo se encontró una mortalidad total mayor a los 280C como ya se mencionó específicamente
para los orgarusmos provenientes de Bahía Magdalena pero tambiØn para la cruza
48
Es interesante notar que mientras que el marco de actividad de la cruza F1 fue menor que el
de las poblaciones que la produjeron M y C y esto se observó tanto a 220C como a 280C la
reducción observada en el marco de actividad de 22 a 280C fue menor para la cruza que para las
dos poblaciones Esto es la reducción en marco de actividad a280C para la cruza fue de 25
mientras que la de las poblaciones fue de 55 Este hecho podría ser indicativo de una
superioridad en la cruza debida a mayor heterocigosidad en la misma resultando en un mejor
balance energØtico ante cambios ambientes no favorables Esto es bajo las condiciones de cambio
ambiental en el cual fueron sometidos dichos grupos la cruza parece haber presentado una mejor
capacidad de respuesta que las poblaciones Esto va acorde con la hipótesis que plantea que la
superioridad de los organismos heterocigotos se ve manifestada en mayor grado bajo condiciones
de estrØs Gentili Beaumont 1988
L˝NEAS ENDOG`MICAS
Una línea endogÆmica se caracteriza por presentar una baja heterocigosidad o puesto en otras
palabras por presentar una alta homocigosidad Las líneas endogÆmicas son generalmente
producidas por el apareamiento entre organismos estrechamente relacionados entre sí como por
ejemplo hermanos En el caso de la almeja catarina una especie que se caracteriza por ser
hennafrodita funcional esto es con gametos femeninos y masculinos presentes simultÆneamente
en un mismo organismo las líneas endogÆmicas pueden ser producidas por autofecundación La
autofecundación es la forma mas drÆstica de inducir endogamia esto es de reducir la
heterocigosidad Por ejemplo en promedio 50 de reducción en heterocigosidad es inducida
en una generación por autofecundación mientras que en el caso de apareamientos entre
hermanos solamente 25 de reducción en heterocigosidad es alcanzada por generación Los
efectos de la autofecundación o endogamia inducida en almeja catarina han sido estudiados por
Ibarra et al 1995 quienes reportaron que en larvas de Argopecten circularis la endogarnia
inducida por autofecundación resulta en un menor crecimiento y supervivencia En general se
piensa que este decremento en crecimiento y supervivencia esta asociado con un decremento en
49
la capacidad fisiológica de los organismos endogÆmicos por su elevada homocigosidad Falconer
1989 Por otro lado a la fecha no existen estudios que evalœen directamente el metabolismo de
organismos marinos endogÆmicos Esto es sorprendente dada la gran cantidad de estudios que
han tratado de establecer la existencia de una correlación entre tasa metabólica y heterocigosidad
Mientras que es cierto que diferentes grados de heterocigosidad pueden observarse en los
individuos que componen a las poblaciones naturales y esto ha sido el mØtodo preferencial para
evaluar la correlación entre tasa metabólica y heterocigosidad diferentes grados de
heterocigosidad pueden ser inducidos por apareamiento s controlados en organismos
En este trabajo basados en la misma hipótesis de la existencia de una correlación entre el
grado de heterocigosidad y las tasas respiratorias se buscó producir líneas endogÆmicas para
evaluar en ellas el efecto de la reducción en heterocigosidad sobre su metabolismo o tasas
respiratorias En este caso las evaluaciones se llevaron a cabo œnicamente a 220C debido a que
durante la aclimatación de estos grupos a 280C se presentaron mortalidades masivas
A diferencia de los resultados observados con las poblaciones y su cruza el efecto de una
reducción en la heterocigosidad sobre el metabolismo de las líneas endogÆmicas fue claro para
la tasa estÆndar la cual fue significantemente mayor para las líneas endogÆmicas que para sus
grupos controles no endogÆmicos Este incremento de la tasa estÆndar en las líneas endogÆmicas
sin un incremento en la tasa activa se tradujo en un decremento sustancial en el marco de
actividad de aproximadamente 30 para ambas líneas endogÆmicas El hecho de encontrar las
diferencias en estas líneas endogÆmicas de almeja catarina y no en las poblaciones de almeja
catarina y su cruza nos hace pensar en la posibilidad de que el grado de heterocigosidad alcanzado
en la cruza fue insuficiente para manifestar la correlación Mientras que el grado de reducción en
heterocigosidad puede ser estimado en las líneas endogÆmicas el grado de heterocigosidad
alcanzado en la cruza depende de la diferenciación genØtica entre las dos poblaciones evaluadas
Para obtener un incremento en heterocigosidad de por ejemplo el 50 en la cruza las poblaciones
deberían ser diferentes en las formas alØlicas que presenta cada una en 50 de los genes
Estudios electroforØticos que comparan estas dos poblaciones han indicado que de 12 loci
50
evaluados solo uno PGI manifestó diferencias absolutas entre las poblaciones Ibarra Cruz
datos no publicados
En cuanto a la tasa activa es posible que las respuestas de las líneas endogÆmicas con
respecto a sus grupos control se hayan visto emnascaradas por procesos de compensación
fisiológica y aclimatación como ya se discutió para las poblaciones y su cruza En conclusión la
respuesta de los organismos endogÆmicos a la necesidad de una mayor cantidad de energía
metabólica para realizar sus funciones vitales de metabolismo basal sugieren una desventaja de
estos organismos con respecto a sus controles los cuales representan organismos no
endogÆmicos
Es importante seæalar que independientemente del hecho de que en un caso estamos
hablando de una sola línea endogÆmica ERB 18 mientras que en el otro caso estamos hablando
de la mezcla de varias líneas endogÆmicas ERBM se observó la misma respuesta en cuanto a
tasa estÆndar Esto es de esperarse ya que en el caso de la mezcla de líneas endogÆmicas cada una
de esas líneas fue producida tambiØn por autofecundación por lo que la reducción en
heterocigosidad del 50 es tambiØn esperada en el conjunto o mezcla de líneas
La reducción genØtica en heterocigosidad implica menor capacidad de respuesta ante
variaciones en el medio Rodhouse Gafihey 1984 Slattery et al 1991 La respuesta fisiológica
de esto reflejada en un decremento del marco de actividad trae como consecuencia menor
energía libre disponible para realizar funciones tales como movimiento crecimiento y
reproducción Widdows 1973 DieW et al 1986 Diferentes autores han encontrado una
asociación entre la tasa metabólica estÆndar y el grado de homocigosidad en moluscos Por
ejemplo DieW et al 1985 en Mytilus edulis así como Garton et al 1991 en Dreissenia
polimorpha encuentran que la tasa metabólica estÆndar en organismos homocigotos aunque no
endogÆmicos es mÆs grande que en organismos heterocigotos por lo que concluyen que existe
una mayor eficiencia metabólica en organismos heterocigóticos que en homocigóticos
Por otro lado los resultados de la tasa de aclaramiento en las lineas endogÆmicas no mostraron
51
diferencias significativas Anteriormente se mencionó la capacidad de compensación metabólica
de los organismos Navarro et al 1991 han reportado que en Mytilus galloprovincialis cuenta
ademÆs con la capacidad de compensación de su tasa de aclaramiento bajo ciertas concentraciones
de alimentos y ciertas cualidades del mismo Por lo que es muy posible que los organismos bajo
esas condiciones no presente diferencias en su tasa de aclaramiento
52
CONCLUSIONES
La falta de diferencias significativas en tasas metabólicas entre las poblaciones y su cruza puede
haber sido una consecuencia de 1 similaridad genØtica entre estas poblaciones lo cual resultaría
en que la cruza no presentase un mayor grado de heterocigosidad como se esperaba 2 efectos
de selección mortalidad selectiva durante la aclimatación resultando en que los organismos mas
aptos sobrevivieran y por lo tanto no mostraran diferencias y o 3 la edad a la que se llevó a
cabo las evaluaciones posteriormente a la primera madurez sexual de al menos una de las
poblaciones y la cruza
Las diferencias en tasa metabólica estÆndar observadas entre las líneas endogÆmicas y sus
controles no endogÆmicos indican que en efecto la correlación entre heterocigosidad y tasa
metabólica existe en almeja catarina incluso cuando se evalœa solamente bajo condiciones
ambientales no estresantes esto es a22o
C Así mismo estos resultados indican que es la tasa
estÆndar la tasa mayormente afectada por el grado de heterocigosidad de un organismo y no la
tasa activa o de aclaramiento
RECOMENDACIONES
aralareali ri6n de trabajos en base a factores metabolicos como son la cietemninacirim de tmm
BCtJiMa Y emírrdar se sugiere utilizar organismos juveniles esto es antes de alcmtmlT la em ale
pmimera madurez sexual
Para una nueva experimentación de este tipo es importante tomar en cuenta otras temperlltlma1l
que se consideren como letales las cuales pudiesen resultar en diferencias metabólicas entme
poblaciones y cruzas
En cuanto a la tØcnica de determinación de aclaramiento por medio del mØtodo Winter se sugiene
leprolongue la duración del experimento ya que esto puede ser la diferenCia entre reportar
un grupo se alimente o no se alimente durante un periodo definido
54
BIBLIOGRAF˝A
55
Albentosa M Beiras R y AP Camacho 1994 Determination of optimal thermal conditions for
growth ofclam Venerupis pullastra seed Aquaculture 126 314 315 328
Alvarez Borrego S Galindo Bect LA y A Chee Barragan 1975 Características hidroquímicasde Bahía Magdalena BC S Ciencias Marinas UABC 2 2 94 110
Baqueiro C E Peæa RI y lA Masson 1981 AnÆlisis de una población sobre explotada de
Argopecten circularis Sowerby 1835 en la Ensenada de la Paz BC S MØxico Ciencia
pesquera 1 2 1 85
Barber B ly NJ Blake 1985 Substrate catabolism related to reproduction in the scallopArgopecten irradians concentricus as determinated by ON and RQ physiological indexesMar BioI 87 13 18
Bayne B L 1973 Physiological changes in Mytilus edulis L induced by temperature andnutritive stress lMar BioI Ass UK 53 9 58
Bayne B L 1976 Marine mussels their ecology and physiology Cambridge University Press
505 pp
Bayne B L Brown D A Burns K Dixon D R Ivanovici A Livigstone D R Lowe D M
Moore D M Stebbling ARD y lWiddows 1985 The effects ofstress and pollutionon marine animals PRAEGER Edit New York U S A 10 16 pp
Bayne B L Salkeld P N y CM Worrall 1983 Reproductive effort and valve in different
popu1ations ofthe marine mussel Mytilus edulis L Oecologia Berlin 59 18 26
Bayne B L Thompson RJ y Widdows l 1973 Some effects oftemperature and food on therate oxygen consumption by Mytilus edulis L In Effects of temperature on ectothermic
organisms ed W Wieser pp 181 93 Springerverlag Berlín
Beiras R Perez Camacho A y M Albentosa 1994 Comparison ofthe scope for growth withthe growth performance ofOstrea edulis seed reared at different food concentrations in an
open tlow system Mar BioI 119 227 233
Bojorquez VerÆsquica G l 1997 Reclutamiento crecimiento y supervivencia de Argopectencircularis Sowerby 1835 Argopecten ventricosus Sowerby n 1842 en Bahía
Concepción BC S Tesis de Licenciatura UABCS Mex 72 pp
Bricelj VM y S Shumway 1991 Physiology energy acquisition and utilization In Sandra E
Shumway Editor Scallops Biology Ecology and Aquaculture EIservier pp 1095
Bricelj VM Epp lMalouf RE 1987 Comparative physiology ofyoung and old cohorts of
bay scallop Argopecten irradians Lamarck mortality growth and oxygen consumptionlExp Mar BioI Eco1112 73 91
Bricelj VM y S Shumway 1991 Physiology energy acquisition and utilization In Sandra E
Shumway Editor Scallops Biology Ecology and Aquaculture EIservier pp 1095
56
Bruce J R 1926 The respiratory exchange ofthe mussel Mytilus edulis L Biochemical Joumal20 8 29 46
Bryan JR Riley 1P y PJ Willams 1976 A Winkler procedure for making precisemeasurements ofoxygen concentration for productivity and related studies 1 Exp Mar
Biol Ecol 21 191 197
Cruz P Ramirez JL Guy A Garcia Ibarra A M 1998 Genetic differences between two
populations of catarina scallop Argopecten ventricosus for adaptations for growth and
survival in a stressful environment Aquaculture166 3 21 335
Cruz Hemandez P 1997 AnÆlisis comparativo del crecimiento y supervivencia de dos
poblaciones de almeja catarina Argopecten ventricosus Sowerby II 1842 Y sus cruzas
recíprocas en Baja California Sur Tesis de Maestría CICIMAR IPN Mex 85pp
Dawson E Y 1994 Marine algae ofGulf of California Allan Hancock Pacific Expeditions 3
189 454
Demers A Y H Guderley 1994 Acclimatization to intertidal conditions modifies the
physiological response to prolonged air exposure in Mytilus edulis Marine Biology118 115 122
DieW W 1 Gaffuey P M y K Koehn 1986 Physiological and genetic aspects ofgrowth in the
mussel Mytilus edulis 1 Oxygen consumption growth and weight loss Physiol Zool59 2 201 21l
Diehl WJ y Koehn RK 1985 Multiple locus heterozygosity and growth in a cohort ofMylitusedulis Mar BioI 88 265 271
DieW WJ Gaffuey P M McDonald 1 H Y Koehn R K 1985 Relationship between weightstandardized oxygen consumption and multiple locus heterozygosity in the marine mussel
Mytilus edulis L Mollusca In P Gibbs Editor Proc 19th European Marine BiologySymposium Cambridge University Press Cambridge pp 531 536
Dillon T y 11 Manzi 1988 Enzyme heterozygosity and growth rate in nursery populations of
Mercenaria mercenaria L 1 Exp Mar biol Ecol 116 79 86
Falconer D S 1989 Introduction to Quantitative Genetics Longman Sicientific and Technical
England Fourth edition 464 pp
Foltz DW Newkirk G F y E Zouros 1983 Genetics ofgrowth rate in the American oysterabsence ofinteractions among enzyme loci Aquaculture 33 157 165
Foltz D W S E Shumway y D Crips 1993 Genetic structure and heterozygosity relatedfitness effects in thç marine snail Littorina littorea American Malacological bulletin10 1 55 60
Foltz D W y E Zouros 1984 Enzyme heterozygosity in the scallop Placopectenmagellanicus Gmelin in relation to age and size Mar Biol Lett 5 255 263
57
Fujio Y 1982 A correlation ofheterozygosity with growth rate in the Pacific oyster Crassostrea
gigas Tohoku 1 Agric Res 33 66 75
Fuji A y M Hashizume 1974 Energy budget for a Japanese common scallop Patinopectenyessoensis Jay In Motsubay Bull Fac Fish Hokkaido Univ 25 7 19
Gaffney P M 1986 Physiological genetics ofgrowth in marine bivalves Ph D Dissertation
Stony Brook State University ofNew York
Gaffney P M y Scott TM 1984 Genetic heterozygosity and production traits in natural and
Hatchery populations ofbivalves Aquaculture 42 289 302
Gallager S M y R Mann 1980 An apparatus for the measurement of grazing activity of filterfeeders at constant food concentrations Mar BioLett 341 349
García C A 1961 Contribución al estudio de los moluscos de valor económico de las costas deMazatlÆn sin Tesis profesional Facultad de Ciencias de DN AM MØxico
Garton D W 1984 Relationship between multiple locus hetero gosity and physiologicalenergetics ofgrowth in the estuarine gastropod Thais haemastoma Physiol Zool 57 530
543
Garton D W AW Stoeckmann y W R Haag 1991 PGI Genotype Dependent metabolism inthe zabra mussel Dreissena polymorpha Ohio State Univ Columbus AM
ZooI 31 5 134
Garton DW y W R Haag 1991 Heterozigosity shelllength and metabolism in the Europeanmussel Dreissena polymorpha from a recentIy established population in Lake Erie
Comp Biochem Physio99 2 45 48
Garton DW Koehn RK y T M Scott 1984 Multiple locus heterozygosity and physiologicalenergetics ofgrowth in the coot claro Mulina lateralis from a natural population Genetics108 445 455
Gentili M R Y AR Beaumont 1988 Environmental stress heterozygosity and growth rate in
Mytilus edulis 1 J Exp Mar bio Eco120 145 153
Green RH Singh S M Hicks B y JM McCuaig 1983 An Arctic intertidal population ofMacoma balthica Mollusca Pelecypoda Genotypic and phenotypic components of
population structure Can J Fish Aquat Sci 40 9 1360 1371
Hawkins AJ S y BL Bayne 1991 Nutrition ofmarine mussels factors influencing the relativeutilization ofprotein and energy Aquaculture 94 177 196
Hawkins AJ S Widdows 1 y Bayne B L 1989 The relevance of whole body proteinmetabolism to measured costs of manintenance and growth in mytilus edulis PhysiolZool 62 745 763
Hemandez RM Gomez GJ Sanchez O C A SaIdierna M RJ y G R Vera 1993 Atlas de
58
temperatura superficial en el complejo lagunar de Bahía Magdalena Bahía Almejas BajaCalifornia Sur MØxico 1980 1989 Ed Secretaría de Marina Atlas OceanogrÆficoNacional Sección Fisico Químicos vol n
Hombach DJ 1991 The influence of oxygen availability on oxygen consumption in the
freshwater clam Musculium partumeium Bivalvia Shaecriidae Am MalacoBull 3
187 200
Hombach DJ 1992 The influence of acclimatization temperature and size on the oxygenconsumption of the freshwater clam Musculium partumeium Say Comp Biochem
Physiol 101 2 345 349
Iglesias JI P y E Navarro 1991 Energetics of growth and reproduction in cocklesCerastoderma edule seasonal and age dependent variations Mar Bio111 359 368
Koehn RK y B L Bayne 1989 Towards a physiological and genetical understanding ofthe
energetics ofthe stress response biol J Linn Soc 37 157 171
Koehn RK DieW WJ y Scott TM 1988 The differential contribution by individual enzymesof glycolysis and protein catabolism to the relationship between heterozygosity and
growth rate in the coot clam Mulinia lateralis Genetics 118 121 130
Koehn RK y P M Gaffuey 1984 Genetic heterozygosity and growth rate in Mytilus edulisMar Bio82 1 7
Koehn RK y S E Shumway 1982 A genetic physiological for differential growth rate amongindividuals ofthe American oyster Crassostrea virginica Gmelin Mar BioLett 3 35
42
Lechuga DevØze eH Reyes Salinas A y M L Morquecho Escamilla Extensive bottom
hypoxia and anoxia in the Bahía Concepción Gulf de California Scientia Marina Enrevisión
Ledig Ft RP Guries and BA Bonefeld 1983 The relation og grwoth to heterozygosityin pitchpine Evolution 37 1227 1238
Le Gall JL y O Raillard 1988 Influence of temperature on the physiology of the oysterCrassostrea gigas Oceanis Doc Oceanogr 14 5 7
Maeda AN 1985 Studies on the physiology of shell formation in mollusc larvae with specialreference to Crepidula fornicata Ph Thesis University of Southampton
Mateo Cid LE Sanchez Rodriguez l Rodriguez Montesinos E y MA M Casas Valdez1993 Estudios florísticos de las algas marinas bentónicas de Bahía Concepción Be SMØxico Ciencias Marinas 19 1 41 60
Mitton lB y M e Grant 1984 Associations among protein heterozygosity growth rate and
developmental homeostasis Annu Rev Ecology Syst 15479 499
59
Navarro E Iglesias JI Perez Camacho A Labarta U y Beiras R 1991 The physiologicalenergeticas ofmussels Mytilus galloprovincialis Lmk from different cultivation rafts inthe Ría de Arosa Galicia N W Spain Aquaculture 94 197 212
Pacheco Ruiz l Zertuche GonzÆlez 1A Cabellos Pasini A y BH Brinkhuis 1992 Growth
responses and seasonal biomass variation ofGigartina pectinata Dawson Rhodophytain GulfofCalifornia 1 Exp Mar BioI EcoI 157 263 274
Read KRH 1962 Respiration of the bivalve molluscs Mytilus edulis L and Brichiodontesdemissus plicatulus Lamarck as function ofsize and temperature Comp Biochem and
PhysioI 89 101
Scott T M Y Koehn RK 1990 The effect of environmental stress on the relationship of
heterozygosity togrowth rate in the coot clam Mulinia lateralis Say 1 Exp Mar BioIEcoI 135 109 116
Shafee M S 1982 Seasonal variations in oxygen consumption rates ofthe black scallop Chlamysvaria L fromLanveoc BayofBrest OceanoI Acta 5 2 189 197
Shumway S E Barber 1 y 1 Stahlnecker 1988 Seasonal changes in oxygen consumption ofthe giant sca1lop Placopecten magellanicus Gmelin 1791 a qualitative study 1 ShellfishRes A 89 95
Sicard M T 1999 Temperatura letal superior y temperatura óptima en una población de almejacatarina Argopecten ventricosus sowerby 11 1842 Tesis M C Centro interdisciplinariodel Ciencias Marinas IPN MØxico 95pp
Silva Loera HA 1986 Efecto del tamaæo corporal tensión de oxígeno y temperatura sobre la
tasa de consumo de oxígeno en la escalopa Argopecten circularis Sowerby MolluscaLamellibranchia Tesis de Maestría ITESM MØx 93 pp
Singh S M y E Zouros 1978 Genetic variation associated with growth rate in the American
oyster Crassostrea virginica Evolution 32 342 353
Spärck R 1936 On the relation between metabolism and temperature in some marinelamellibranchs and its zoogeographical significance K Danske Vidensh Selsh Skr BioIMed 13 1 27
Thompson R1 Y B L Bayne 1974 Some relationships between growth metabolism and foodin the mussel Mytilus edulis Mar BioI 27 317 326
Ulrik H 1991 Filtration rate and growth in the Blue mussel Mytilus edulis Linaeus 1758
Dependence on algal concentration Joumal of Shellfish Research 10 1 29 35
Volckaert F Y E Zouros 1989 Allozyme and physiological variation in the scallop Placopectenmagellanicus and general model for the effects of heterozygosity on fitness in marine
molluscs Mar BioI 103 51 61
60
Warren C E y G E Davis 1967 Laboratory studies on the feeding bioenergetics and growth offish In S D Gerking Ed The biological basis offreshwater fish production BlackwellScientific Oxford 175 214
Widdows 1 1972 Termical acclimation by Mytilus edulis L Ph D Thesis University of
Leicester England
Widdows 1 1973 The effect oftemperature and food on the heart beat ventilation rate and
oxygen uptake of Mytilus edulis Mar Biol 20 269 276
Wilson lA 1989 Fundamentos de fisiología animal Ed LIMUSA S A de cv MØxico D F
984 pp
Winberg GG 1956 Rate of metabolism and food requirements of fishes Belorussian State
University Minsk In Russ Transltransl Ser Fish Res Bd Can 194 1 202 1960
Winter lE 1960 Filter feeding and food utilization in Arctica islandica L and Modiolusmodiolus at different food concentration In lH Steele ed Marine Food Chains Oliverand Boyd Edinburgh pp 126 206
Zouros E Romero Dorey M y AL Mallet 1988 Heterozygosity and growth in marinebivalves further data and possible explanations Evolution 42 1332 1341
Zouros E Singh S M y H E Miles 1980 Growth rate in oysters an overdominant phenotypeand its possible explanation Evolution 34 856 867