unidad de estudios biofarmacÉuticos junio 2007. unidad de estudios biofarmacÉuticos piedad...

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOS

Junio 2007


PIEDAD RESTREPO V.

QUÍMICA FARMACÉUTICA, FARMACÓLOGA.

Junio de 2007

ESTUDIO PILOTO

DESARROLLO DE UN SISTEMA, EN MODELO ANIMAL, PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES

FK/FD Y APLICACIÓN EN LA VALORACIÓN DE PRODUCTOS COMERCIALES.


ESTUDIO PILOTO

DESARROLLO DE UN SISTEMA EN MODELO ANIMAL PARA EL ESTUDIO BIOFARMACEÚTICO DE CEFEPIME CON BASE EN LA CORRELACIÓN DE PROPIEDADES


GLORIA SHIRLEY RAMÍREZ, Q.F.

LUIS FELIPE MURIEL Bacteriólogo

INÉS MALES Tecnóloga Química

ALEJANDRA ARANGO Médica Veterinaria

MILENA PÉREZ G. Q.F.

PAOLA FERNÁNDEZ Auxiliar De Enfermería

OSIBAR JAMAUCA Auxiliar de Laboratorio


ESTUDIO PILOTO



El autor agradece a Vitalis S.A.C.I, el apoyo económico y material para la realización de este estudio piloto con lo

cual contribuyó al mejoramiento de la capacidad técnica y científica de la Unidad de Estudios Biofarmacéuticos de

CIDEIM y a la consolidación de hipótesis de investigación para la proyección de estudios complementarios y

novedosos en este campo

DESARROLLO DE TÉCNICAS

MICROBIOLÓGICAS

INICIO: PROCEDIMIENTOS ADMINISTRATIVOS : Mes de

Julio de 2006ENSAYOS PRELIMINARES: Agosto- Septiembre de 2006

ESTUDIO PILOTO:Septiembre 2006 a Abril 2007

Diseño experimental con base en el análisis de la inhibición del crecimiento

microbiano en suero sanguíneo Ex Vivo.

FUNDAMENTO: . En este estudio piloto se analizará

la capacidad de usar suero de conejo,como

matriz de crecimiento para cepas del laboratorio, en presencia de cefepime.

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOSEstudio Piloto



Experimentos1. Selección de cepa de ensayo y de control2. Extracción de Sangre y obtención de suero de conejo3. Valoraciones visuales de CIM y CBM, en cepas exploradas en suero de conejo4. Determinación de CIM y CBM para E. coli ATCC 25922, K. pneumoniae ATCC 700603

ENSAYOS EXPLORATORIOS:1. Tipos de matrices y proporcione de cefepime, pH, 3. Pruebas de crecimiento diferentes cepas4. Ensayos de inactivación del suero, con y sin cefepime5. Experimentos para ajustar el tamaño del inóculo estándar6. Elección y determinación de la categoría de las cepas a emplear: Ensayo o Control

AJUSTE DE LAS CONDICIONES

EXPERIMENTALES

PRUEBAS DE CIM y CBM

En Cepas: K. pneumoniae ATCC 700603, E. coli ATCC 25922 y P.

aeruginosa ATCC 27853

ESTANDARIZACIÓN, PROCEDIMIENTOS E

INSTRUCTIVOS PARA LA VALORACIÓN MICROBIOLÓGICA DE LAS MUESTRAS EN SUERO

DE CONEJO

CEPASTAMAÑO DE INÓCULOMEDIOMÉTODO DE INACTIVACIÓNSELECCIÓN DE DILUCIONES PARA CBMREPETICIONES

DATOS PRELIMINARES

PARA ESTANDARIZAC

IÓN DE LAS DETERMINACIONES DE CBM Y

CIM

DATOS DIRECTOS EN SUERO DE CONEJO

CIM y CBMCepas: K. pneumoniae ATCC 700603, E. coli

ATCC 25922 y P. aeruginosa ATCC

27853

UNIDAD DE ESTUDIOS BIOFARMACÉUTICOSEstudio Piloto



Confirmación por análisis y suministro de evidencia

objetiva de que se cumplen los requisitos particulares

para el uso específico de una metodología

Métodos no estandarizados

Métodos desarrollados

Métodos estandarizados usados fuera del alcance propuesto

Métodos estandarizados ampliados o modificados

INICIO: PROCEDIMIENTOS ADMINISTRATIVOS : Mes de Julio de 2006

ENSAYOS PRELIMINARES: Agosto- Septiembre de 2006ESTUDIO PILOTO:

Septiembre 2006 a Abril 2007

DESARROLLO y ESTANDARIZACIÓN DE

TÉCNICA FISICOQUÍMICA

AJUSTE DE LAS CONDICIONES

EXPERIMENTALES

INFORMACIÓN DE ENTRADA:

USP BIBLIOGRAFIA

COLUMNAFASE MOVIL

MÉTODO DE EXTRACCIÓN

FLUJO

PRECISIÓNEXACTITUDLINEALIDAD

MUESTRAS DE CEFEPIME EN SUERO DE CONEJO

DESARROLLOSAPLICACIÓN DE METODOLOGÍAS

TECNICA MICROBIOLÓGICA PARA VALORACIÓN DE CIM y

CBM EN SUERO DE CONEJO

TÉCNICA FISICOQUÍMICA PARA VALORACIÓN DE

CEFEPIME EN SUERO DE CONEJO

VALORACIÓN DE MUESTRAS DE SUERO IN VITRO EX VIVO

CIMCBM

K. pneumoniae ATCC 700603 y Cepa control E. coli ATCC 25922 por

concentraciones fijas de cefepima

PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS

CEFEPIME ESTÁNDAR USP

Muestra Conejos-Cefepime,

en Cmáx. Pool de suero

ENSAYO FARMACOCINÉTICO EN

CONEJOSDiez Conejos tratados

con 30 mg/kg de cefepime, vía intramuscular

DATOS DE CONCENTRACIÓN DE CEFEPIME EN CADA TIEMPO: Cmáx

DENSIDAD ÓPTICA, DE POZOS EN PLACAS

PARA CIM

ABC DE MUERTE BACTERIANA

DATOS DE CONCENTRACIÓN DE CEFEPIME EN

TIEMPO: AUC

RESULTADOS

Y ANÁLISIS

ES

QU

EM

A E

ST

UD

IO I

V I

V

AUC vs ABC DE MUERTE

BACTERIANA

DENSIDAD ÓPTICA, POZOS EN PLACAS

PARA CIM

AUCDATOS DE

CONCENTRACIÓN DE CEFEPIME EN TIEMPO

AUC vs ABCDATOS

DIRECTOS DE LOGARÍTMO UFC

AUC vs ABCDATOS SEGÚN

EL MODELO FARMACODINÁ

MICO PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS




DOMEDIDA

DIRECTA DE LAS PLACAS

DODATOS SEGÚN

MODELO FARMACODINÁ

MICO

RESULTADOS

Y ANÁLISISANÁLISIS DE

DATOS

AUCDATOS DE

CONCENTRACIÓN DE

CEFEPIME EN TIEMPO

AUC vs ABCDATOS

DIRECTOS DE LOGARÍTMO UFC

AUC vs ABCDATOS SEGÚN EL

MODELO FARMACODINÁMICO

PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS




DOMEDIDA

DIRECTA DE LAS PLACAS

DODATOS SEGÚN

MODELO FARMACODINÁ

MICO

PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS




PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS




PRODUCTO CEFEPIME

VITALIS




CO

RR

EL

AC

ION

ES

DENSIDAD ÓPTICA, POZOS

EN PLACAS PARA CIM

ABC DE MUERTE BACTERIANAVersus AUC

RESULTADOS

Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las

muestras en Suero de Conejo

Resultados por inspección visual

SUSCEPTIBILIDAD DE

K. pneumoniae ATCC 700603 y E. coli ATCC 25922

A MUESTRAS CON CEFEPIME

Parámetro K. pneumoniae ATCC 700603 E. coli ATCC 25922

Cefepime

estándar USP

Producto Cefepime

Vitalis

Conejos-Cefepime

Vitalis

Cefepime estándar USP

Producto Cefepime

Vitalis

Conejos-Cefepime

Vitalis CIM 1.00 1.0 1.00 0.04 0.04 0.04

CBM 3.00 3.0 3.00 0.06 0.04 0.24

Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las muestras en Suero de Conejo

RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA

K. pneumoniae

Resultados de Densidad Óptica en Muestras de suero de Conejo con diferentes Concentraciones de Cefepime. K.

pneumoniae ATCC 700603.

MUESTRA

Concentración de Cefepime Conejos-

Cefepime Vitalis

Cefepime estándar

USP

Producto Cefepime-

Vitalis

(ug/mL) Promedio DO

Promedio DO

Promedio DO

0.05 0.442

0.20 0.586

0.50 0.477 0.353 0.352

1.00 0.070 0.061 0.056

1.50 0.068 0.061 0.058

2.00 0.072 0.069 0.066

2.5 0.061 0.067

3.00 0.069 0.062 0.055

4.0 0.061 0.057

6.00 0.068 0.063 0.058

9.00 0.065 0.061 0.055

12.00 0.068 0.062 0.056

CN 0.068 0.073 0.059

CTO 0.524 0.593 0.333

Densidad óptica vs Concentración de Producto- Cefepime Vitalis

K. pneumoniae ATCC 700603

y = -0.1681Ln(x) + 0.1644R2 = 0.6771

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0

Concentración cefepime (ug/mL)

Den

sid

ad ó

pti

caDensidad óptica vs Concentración de

Cefepime estándar USP K. pneumoniae ATCC 700603

y = -0.1445Ln(x) + 0.2028

R2 = 0.7957

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0


De

ns

ida

d ó

pti

ca

Densidad óptica vs Concentración de Conejos-Cefepime-Vitalis


y = -0.1732Ln(x) + 0.2432

R2 = 0.7457

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0


De

ns

ida

d ó

pti

ca

Resultados de Densidad Optica en Muestras de suero de Conejo con Concentraciones Similares

de Cefepime. K. pneumoniae ATCC 700603.

MUESTRA Concentración de Cefepime

Conejos-Cefepime

Vitalis

Cefepime estándar

USP

Producto Cefepime-

Vitalis

(ug/mL) Promedio

DO Promedio

DO Promedio

DO

0.00 0.524 0.593 0.333 0.50 0.477 0.353 0.352 1.00 0.070 0.061 0.056 1.50 0.068 0.061 0.058 2.00 0.072 0.069 0.066 3.00 0.069 0.062 0.055 6.00 0.068 0.063 0.058 9.00 0.065 0.061 0.055 12.00 0.068 0.062 0.056

Comparación entre las CIM-DO de las Muestras de Cefepime en Suero de Conejo: Estándar USP, Conejos-Cefepime Vitalis y Producto-Cefepime. K. pneumoniae ATCC 700603

0.000

0.100

0.200

0.300

0.400

0.500

0.600

0.700

0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 3.00 6.00 9.00 12.00

Concentración (ug/mL). Cefepime en Suero de Conejos

De

ns

ida

d Ó

pti

ca

(D

O)

USP Promedio DO

CONEJOS VITALIS Promedio DO

Producto Cefepime VITALIS Promedio DO

Comparación de los Resultados de Densidad Óptica en Muestras de Cefepime

sample

resp

onse

DO CONEJOS DO PRODUCTO DO USP0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

Análisis de Regresión Múltiple para Densidad Optica. K. pneumoniae

0 0.1 0.2 0.3 0.4

DO PRODUCTO

-0.08

0.02

0.12

0.22

0.32

com

pone

nt e

ffec

t

Según estos resultados la función matemática que explica los valores de densidad óptica en la muestra Conejos-Cefepime Vitalis, cumple una correlación entre las variables de 99.95% con un valor P < 0.01 en el nivel de confianza de 99%, de acuerdo a la siguiente ecuación:

DO CONEJOS = -0.0130607 + 1.10517*DO PRODUCTO + 0.28521*DO USP

Densidad óptica vs Concentración de Cefepime estándar USP

E. coli ATCC 25922

y = -0.1403Ln(x) - 0.2953

R2 = 0.8165

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0.45

0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14


De

ns

ida

d ó

pti

ca

Densidad óptica vs Concentración de Conejos-Cefepime Vitalis

E. coli ATCC 25922

y = -0.2425Ln(x) - 0.5445R2 = 0.7985

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.80

0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12


Den

sid

ad ó

pti

ca

Densidad óptica vs Concentración de Producto-Cefepime-Vitalis

E. coli ATCC 25922

y = -0.1902Ln(x) - 0.4152R2 = 0.8366

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.0 0.0 0.0 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1


Den

sid

ad ó

pti

ca

Pruebas Farmacodinámicas para inhibición del crecimiento (CIM) y concentración bactericida mínima (CBM) de Cefepime en las muestras en Suero de Conejo

RESULTADOS POR ESPECTROFOTOMETRÍA: E. coli

ConcentraciónCefepime

estándar USPProducto

Cefepime-VitalisConejos-Cefepime-

Vitalis

(ug/mL) Promedio DO Promedio DO Promedio DO

0.00 0.571 0.530 0.5630.01 0.404 0.477 0.6370.02 0.085 0.411 0.6180.04 0.058 0.063 0.0740.06 0.058 0.059 0.0670.10 0.058 0.056 0.0720.24 0.061 0.059 0.0720.36 0.056 0.055 0.0690.48 0.057 0.058 0.067

Resultados de Densidad Optica en Muestras de suero de Conejo con diferentes Concentraciones de Cefepime. E. coli ATCC 25922

Comparación entre las CIM-DO de las Muestras de Cefepime en Suero de Conejo: Estándar USP, Conejos-Cefepime Vitalis y Producto-Cefepime, E. coli ATCCC 25922

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.00 0.01 0.02 0.04 0.06 0.10 0.24 0.36 0.48

Concentración (ug/mL). Cefepime en Suero de Conejos

De

ns

ida

d Ó

pti

ca

(D

O)

Cefepime estándar USP. DO

Producto Cefepime-Vitalis. DO

Conejos-Cefepime-Vitalis. DO

DO CONEJOS DO PRODUCTO DO USP

Comparación de DO en las Muestras de suero. E coli

sample

0

0.1

0.2

0.3

0.4

resp

onse

El resultado obtenido mostró una alta significancia estadística en la interacción de las variables y su ajuste al modelo con un coeficiente de correlación de 99.3571% y

un valor P < 0.01 en un nivel de confianza de 99%. El modelo propuesto por este análisis de regresión es:

DO CONEJOS- Cefepime Vitalis = 0.0029933 + 1.63103*DO PRODUCTO - 0.476984*DO USP

Análisis de Regresión Múltiple, para Conejos-Cefepime Vitalis

0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

DO PRODUCTO

-0.23

-0.03

0.17

0.37

0.57

com

pone

nt e

ffec

t

Densidad Óptica

Parameter Estimate StdError CV% UnivarCI_LowerUnivarCI_Upp

erPlanarCI_Lowe

rPlanarCI_Uppe

r

Emax 0.533086 0.066129 12.41 0.371273 0.694898 0.275315 0.790856EC50 0.732839 0.12628 17.23 0.423843 1.041835 0.240604 1.225074

Gamma 4.978962 2.229977 44.79 -0.4776 10.435524 -3.713428 13.671352

Emax 0.348524 0.056833 16.31 0.209459 0.487589 0.126992 0.570056EC50 0.804983 0.246501 30.62 0.201816 1.408151 -0.155872 1.765839Gamma 6.637602 8.031024 120.99 -13.013621 26.288824 -24.667108 37.942311Emax 0.597001 0.056525 9.47 0.458689 0.735312 0.376668 0.817333EC50 0.552879 0.090253 16.32 0.332038 0.77372 0.201075 0.904683Gamma 2.421507 0.774296 31.98 0.526871 4.316143 -0.596678 5.439693

Producto-Cefepime

Vitalis

Cefepime estándar

USP

Parámetros Farmacodinámicos para las Muestras de Cefepime en Suero de Conejo, en las concentraciones iguales, Según Densidad Óptica. K. pneumoniae ATCC 700603

Conejos-Cefepime

Vitalis

Simulación de Eficacia Farmadocinámica

Los parámetros definidos para el efecto inhibitorio sobre el crecimiento del cefepime son calculados según modelación proyectada, con base en los

parámetros de concentración y densidad óptica para cada una, de acuerdo con la función matemática siguiente:

E=Emax*(1-(C**Gamma/(C**Gamma+EC50**Gamma)))

0.00

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.30

0.35

0.40

0 2 4 6 8 10 12

Conc_Producto_Cefepime_Vitalis (ug/mL)

Observed

Predicted

Densidad Óptica. Muestra Producto-Cefepime Vitalis. K. pneumoniae

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0 2 4 6 8 10 12

Conc_Conejos (ug/mL)

Observed

Predicted

Densidad Óptica Muestra Conejos-Cefepime Vitalis. K. pneumoniae

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0 2 4 6 8 10 12

Conc_Cefepime_USP (ug/mL)

Observed

Predicted

Densidad Óptica. Muestra Cefepime estándar USP. K. pneumoniae

Del análisis farmacodinámico descrito, el menor valor necesario para obtener efecto máximo proyectado, de la muestra Producto-Cefepime Vitalis (0.3485), que permite presumir mayor eficacia para inhibir el crecimiento de K. pneumoniae ATCC 700603, en comparación con los resultados proyectados para las muestras de Conejos-Cefepime Vitalis y Cefepime estándar USP, cuyo valor estuvo por encima de 0.50 en ambos casos.

Resumen de Resultados Farmacodinámicos de inhibición del crecimiento de K. pneumoniae ATCC 700603 en las Muestras de Suero de Conejo

(Densidad Óptica)

Emáx (DO) EC50 (ug/mL)


Conejos-Cefepime Vitalis

Producto Cefepime Vitalis


Conejos-Cefepime

Vitalis

Producto-Cefepime

Vitalis

0.5970 0.5330 0.3485 0.5528 0.7328 0.8049

Sin embargo, la modelación aplicada requiere una estandarización precisa y exacta para la cantidad de inóculo estándar a sembrar, puesto que la proyección del efecto en concentración cero afecta el modelo simulado y, por lo tanto, los resultados a obtener. Este asunto debe ser corregido en un diseño experimental posterior de mayor complejidad estadística, con el fin de comprobar los resultados del estudio piloto

Pruebas Farmacodinámicas

representadas o simuladas para la

Cinética de Muerte de K. pneumoniae

ATCC 700603

0 2 4 6 8 10 12 24Control 5.50E+05 2.30E+05 6.92E+06 9.00E+07 6.79E+08 4.57E+08 1.02E+08 1.40E+08

0.05 5.50E+05 5.00E+04 4.00E+04 1.33E+06 3.67E+06 2.27E+07 1.28E+07 8.97E+070.20 5.50E+05 4.33E+04 6.67E+03 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00 5.87E+030.50 5.50E+05 2.33E+04 5.33E+02 3.33E+02 1.73E+04 2.07E+03 0.00E+00 3.30E+031.00 5.50E+05 6.00E+03 5.33E+02 1.67E+02 0.00E+00 3.00E+02 1.50E+03 0.00E+001.50 5.50E+05 1.00E+04 5.67E+02 2.00E+02 3.33E+01 0.00E+00 0.00E+00 5.67E+022.00 5.50E+05 6.33E+03 6.33E+02 1.00E+02 0.00E+00 0.00E+00 1.00E+02 6.33E+023.00 5.50E+05 9.67E+03 5.33E+02 2.33E+02 2.08E+04 0.00E+00 3.37E+03 7.67E+026.00 5.50E+05 1.03E+04 1.67E+02 6.67E+01 0.00E+00 0.00E+00 1.02E+04 1.33E+029.00 5.50E+05 3.50E+03 7.67E+02 1.00E+02 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00 1.03E+0412.0 5.50E+05 6.33E+03 4.00E+02 1.00E+02 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00 3.33E+01

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. promedio de UFC/mL vs Tiempo. Producto Cefepime Vitalis

Conc (ug/mL)

Hora

0 2 4 6 8 10 12 24

Control 2.50E+05 2.58E+06 5.95E+07 7.97E+08 2.44E+09 4.92E+09 5.43E+09 3.97E+090.5 2.50E+05 8.20E+04 2.66E+04 1.72E+05 2.86E+07 9.03E+04 7.78E+05 5.60E+081 2.50E+05 3.81E+04 4.88E+03 2.35E+06 2.89E+02 1.63E+04 2.76E+04 3.41E+04

1.5 2.50E+05 2.77E+04 2.50E+04 6.41E+03 8.90E+02 1.71E+03 3.30E+04 1.90E+042 2.50E+05 1.38E+04 1.50E+03 1.21E+03 7.50E+02 9.84E+03 3.64E+04 2.60E+04

2.5 2.50E+05 5.37E+03 1.26E+03 3.97E+03 2.22E+02 7.10E+03 3.37E+04 1.57E+043 2.50E+05 4.30E+03 1.36E+03 2.69E+03 2.20E+03 8.04E+03 1.33E+04 7.35E+034 2.50E+05 4.37E+03 1.90E+03 4.20E+03 0.00E+00 2.00E+01 2.05E+04 2.27E+036 2.50E+05 4.91E+03 6.40E+02 2.70E+04 1.24E+03 3.03E+03 5.22E+02 7.70E+029 2.50E+05 1.26E+03 1.60E+02 1.29E+02 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00 2.94E+03

12 2.50E+05 1.72E+03 4.40E+02 0.00E+00 5.00E+01 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00

Cefepime estándar USP. 0 a 24 horas

Conc. (ug/mL)

Hora

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Promedio de UFC/mL+1 vs Tiempo.


representadas o simuladas para la

Cinética de Muerte de K. pneumoniae

ATCC 700603

0 2 4 6 8 10 12 24Control 5.00E+05 3.43E+06 1.85E+07 1.08E+09 9.83E+08 3.44E+09 2.52E+09 1.58E+09

0.05 5.00E+05 8.07E+05 6.06E+06 7.87E+07 5.93E+08 5.05E+08 4.93E+07 5.50E+080.20 5.00E+05 3.46E+05 5.51E+06 5.71E+07 4.61E+08 4.32E+08 4.76E+07 8.90E+080.50 5.00E+05 6.83E+04 6.97E+05 6.13E+05 2.23E+06 2.09E+07 4.95E+08 1.23E+091.00 5.00E+05 2.77E+04 5.07E+04 2.97E+03 1.72E+04 5.87E+03 1.50E+03 1.19E+051.50 5.00E+05 7.30E+04 3.43E+03 9.00E+02 0.00E+00 1.73E+03 2.53E+03 3.63E+042.00 5.00E+05 1.09E+05 1.03E+03 5.67E+02 0.00E+00 1.33E+02 4.47E+03 2.34E+043.00 5.00E+05 1.30E+04 4.07E+03 3.67E+02 0.00E+00 0.00E+00 9.67E+02 7.33E+026.00 5.00E+05 1.50E+04 7.00E+02 6.67E+01 0.00E+00 1.00E+02 6.67E+019.00 5.00E+05 9.83E+03 8.00E+02 6.67E+01 0.00E+00 1.20E+03 0.00E+00 3.33E+0112.0 5.00E+05 7.90E+03 0.00E+00 3.33E+01 0.00E+00 0.00E+00 0.00E+00

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. promedio de UFC/mL vs Tiempo. Conejos-Cefepime Vitalis. 0 a 24 horas

Conc (ug/mL)Hora

0 2 4 6 8 10 12 24Control 5.7 5.4 6.8 8.0 8.8 8.7 8.0 8.1

0.50 5.7 4.7 4.6 6.1 6.6 7.4 7.1 8.01.00 5.7 4.6 3.8 0.0 0.0 0.0 0.0 3.81.50 5.7 4.4 2.7 2.5 4.2 3.3 0.0 3.52.00 5.7 3.8 2.7 2.2 0.0 2.5 3.2 0.02.50 5.7 4.0 2.8 2.3 1.5 0.0 0.0 2.83.00 5.7 3.8 2.8 2.0 0.0 0.0 2.0 2.84.00 5.7 4.0 2.7 2.4 4.3 0.0 3.5 2.96.00 5.7 4.0 2.2 1.8 0.0 0.0 4.0 2.19.00 5.7 3.5 2.9 2.0 0.0 0.0 0.0 4.0

12.00 5.7 3.8 2.6 2.0 0.0 0.0 0.0 1.5

Conc (ug/mL)

Hora

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Log10 +1 del promedio de UFC/mL vs Tiempo. Producto Cefepime Vitalis. 0 a 240 horas

0 2 4 6 8 10 12 24

Control 5.4 6.4 7.8 8.9 9.4 9.7 9.7 9.6

0.5 5.4 4.9 4.4 5.2 5.2* 5 5.9 8.7

1 5.4 4.6 3.7 3.7* 2.5 4.2 4.4 4.5

1.5 5.4 4.4 4.4 3.8 2.9 3.2 4.5 4.3

2 5.4 4.1 3.2 3.1 2.9 4 4.6 4.4

2.5 5.4 3.7 3.1 3.6 2.3 3.9 4.5 4.2

3 5.4 3.6 3.1 3.4 3.3 3.9 4.1 3.9

4 5.4 3.6 3.6* 3.6 0 1.3 4.3 3.4

6 5.4 3.7 2.8 4.4 3.1 3.5 2.7 2.9

9 5.4 3.1 2.2 2.1 0 0 0 3.5

12 5.4 3.2 2.6 0 1.7 0 0 0

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. (Log10 +1) del promedio de UFC/mL+1 vs Tiempo. Cefepime estándar USP. 0 a 24 horas

Conc (ug/mL)

Hora

0 2 4 6 8 10 12 24

Control 5.7 6.5 7.3 9 9 9.5 9.4 9.2

0.05 5.7 5.9 6.8 7.9 8.8 8.7 7.7 8.7

0.2 5.7 5.5 6.7 7.8 8.7 8.6 7.7 8.9

0.5 5.7 4.8 5.8 5.8 6.3 7.3 8.7 9.1

1 5.7 4.4 4.7 3.5 4.2 3.8 3.2 5.1

1.5 5.7 4.9 3.5 3 0 3.2 3.4 4.6

2 5.7 5 3 2.8 0 2.1 3.7 4.4

3 5.7 4.1 3.6 2.6 0 0 3 2.9

6 5.7 4.2 2.8 1.8 0 2 0 1.8

9 5.7 4 2.9 1.8 0 3.1 0 1.5

12 5.7 3.9 0 1.5 0 0 0 0

Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Log10 +1 del promedio de UFC/mL+1 vs Tiempo. Conejos-Cefepime Vitalis. O a 24 horas

Conc (ug/mL)

Hora

Transformación logarítmica (UFC/mL)


representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae

ATCC 700603

CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS

Cinética de muerte bacteriana.Producto Cefepime-Vitalis en suero de conejo


0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

0 5 10 15 20 25 30

Tiempo (horas)

Lo

g10

UF

C/m

L +

1

Control

0.50

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

4.0

6.0

9.0

12.0

Cinética de muerte bacterianaK. pneumoniae ATCC 700603


0

2

4

6

8

10

12

0 5 10 15 20 25 30Tiempo (horas)

Lo

g10

UF

C/m

L +

1

Control

0.50

1.0

1.5

2.0

2.5

3.0

4.0

6.0

9.0

12.0 Cinética de muerte bacteriana. K. pneumoniae ATCC 700603Conejos-Cefepime Vitalis®

0

2

4

6

8

10

12

0 5 10 15 20 25 30Tiempo (horas)

Lo

g1

0 U

FC

/mL

+ 1

Control

0.05

0.20

0.50

1.0

1.5

2.0

3.0

6.0

9.0

12.0

Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para

la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603

CINÉTICA DE MUERTE EN HORAS

Concentración (ug/mL)

R2

Tasa de Muerte o

Crecimien

to (min-1).

Control 0.7356 0.03950.50 0.82 y = 5.5713e-0.0553x 0.05531.00 0.9991 y = 5.7205e-0.1016x 0.1011.50 0.977 y = 5.9325e-0.186x 0.1862.00 0.9949 y = 5.6525e-0.186x 0.1862.50 0.9999 y = 5.7525e-0.1836x 0.18363.00 0.9926 y = 5.6388e-0.1793x 0.17934.00 0.9999 y = 5.754e-0.186x 0.1866.00 0.9803 y = 5.9674e-0.237x 0.2379.00 0.9489 y = 5.4818e-0.172x 0.172

12.00 0.9994 y = 5.7085e-0.1977x 0.1977

Modelo Matemático de Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Log10 +1 del promedio de UFC/mL vs Tiempo. Producto-Cefepime VITALIS. 0 a 4

horas

Modelo Matemático

y = 5.6981e0.0395x

Concentración (ug/mL) R2

Tasa de Muerte o

Crecimiento

(min-1).0 0.9989 y = 5.3795e0.0912x 0.0912

0.5 0.999 y = 5.4078e-0.0497x 0.04971.0 0.9936 y = 5.4457e-0.0952x 0.09521.5 0.7867 0.05122.0 1.000 y = 5.3976e-0.1326x 0.13262.5 0.9643 y = 5.2342e-0.1386x 0.13863.0 0.9352 y = 5.1795e-0.1359x 0.13594.0 0.75 y = 5.0549e-0.0985x 0.09856.0 0.9913 y = 5.3033e-0.1635x 0.16359.0 0.9811 y = 5.2077e-0.2236x 0.223612.0 0.941 0.1784

Modelo Matemático de Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603.Log10 +1 del promedio de UFC/mL vs Tiempo. Cefepime estándar USP. 0 a 4 horas

Modelo Matemático

y = 5.2343e-0.0512x

y = 5.1265e-0.1784x


R2

Tasa de Muerte o

Crecimiento (min-

1).Control 0.9946 y = 5.7284e0.0608x 0.0608

0.05 0.8964 y = 5.6025e0.0435x 0.04350.20 0.6256 y = 5.4892e0.042x 0.0420.50 N/A N/A1.00 0.5397 y = 5.415e-0.0479x 0.04791.50 0.9638 y = 5.8532e-0.1193x 0.11932.00 0.8891 y = 6.0812e-0.1592x 0.15923.00 0.943 y = 5.5172e-0.1142x 0.11426.00 0.9964 y = 5.7684e-0.1736x 0.17369.00 0.999 y = 5.6637e-0.1686x 0.168612.00 N/A N/A

Modelo Matemático de Cinética de muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. ABC de Log10 +1 del promedio de UFC/mL vs Tiempo. Conejos-Cefepime VITALIS. 0 a 4 horas

No determinado

No determinado

Modelo Matemático

Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas

para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603

SELECCIÓN DEL MODELO MATEMÁTICO, POR

CONCENTRACIÓN Y POR MUESTRA

0 5.70 5.5713 5.7205 5.9325 5.6525 5.7525 5.6388 5.7540 5.9674 5.4818 5.708510 8.46 3.2047 2.0711 0.9235 0.8799 0.9173 0.9386 0.8957 0.5578 0.9816 0.790520 12.56 1.8434 0.7498 0.1438 0.1370 0.1463 0.1562 0.1394 0.0521 0.1758 0.109530 18.64 1.0604 0.2715 0.0224 0.0213 0.0233 0.0260 0.0217 0.0049 0.0315 0.015240 27.66 0.6100 0.0983 0.0035 0.0033 0.0037 0.0043 0.0034 0.0005 0.0056 0.002160 60.95 0.2018 0.0129 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0001 0.0000 0.0002 0.000090 199.36 0.0384 0.0006 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

120 652.06 0.0073 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000180 6,975.32 0.0003 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000240 74,617.68 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

Muerte bacteriana 240 (Log UFC/mL) xmin 12-0

ug/mL

Muerte bacteriana (Log

UFC/mL) 240 xmin 0.0 ug/mL

Datos de Log(UFC/mL)+1, Calculados del modelo matemático para cada concentración. Periodos de AUC Cefepime en el tiempo. Producto Cefepime VITALIS. 0 a 240 min.

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240 xmin 3.0 ug/mL

Muerte bacteriana


Muerte bacteriana 240 (Log UFC/mL) xmin 6.0 ug/mL


TIEMPO (min)



Muerte bacteriana




Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 2.0 ug/mL

Muerte bacteriana 240 (Log UFC/mL) xmin 2.5

ug/mL

0 5.38 5.4078 5.4457 5.2343 5.3976 5.2342 5.1795 5.0549 5.3033 5.2077 5.1265

10 13.39 3.2899 2.1019 3.1369 1.4333 1.3089 1.3307 1.8877 1.0339 0.5566 0.8611

20 33.33 2.0014 0.8113 1.8799 0.3806 0.3273 0.3419 0.7049 0.2016 0.0595 0.144630 82.98 1.2176 0.3131 1.1266 0.1011 0.0819 0.0878 0.2633 0.0393 0.0064 0.0243

40 206.56 0.7407 0.1209 0.6752 0.0268 0.0205 0.0226 0.0983 0.0077 0.0007 0.0041

60 1,279.97 0.2741 0.0180 0.2425 0.0019 0.0013 0.0015 0.0137 0.0003 0.0000 0.0001

90 19,743.81 0.0617 0.0010 0.0522 0.0000 0.0000 0.0000 0.0007 0.0000 0.0000 0.0000

120 304,551.49 0.0139 0.0001 0.0112 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

180 72,463,636.83 0.0007 0.0000 0.0005 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

240 17,241,678,065.86 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240 xmin 1.0

ug/mL

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 1.5 ug/mL



Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 3.0 ug/mL

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 4.0 ug/mL

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 6.0 ug/mL

TIEMPO (min)

Datos de Log(UFC/mL)+1, Calculados por aplicación del modelo matemático para cada concentración. Periodos AUC Cefepime en el tiempo. 0 a 240 min. Cefepime estándar USP

Muerte bacteriana (Log UFC/mL) 240

xmin 0.0 ug/mL

Muerte bacteriana


ug/mL



ug/mL

Pruebas Farmacodinámicas representadas o simuladas para la Cinética de Muerte de K. pneumoniae ATCC 700603. Log UFC/mL

Por minuto, según modelo matemático

0 5.7 5.6 5.5 5.4150 5.8532 6.0812 5.5172 5.7684 5.663710 10.5 8.7 8.4 3.3541 1.7753 1.2376 1.7610 1.0165 1.049320 19.3 13.4 12.7 2.0775 0.5385 0.2519 0.5621 0.1791 0.194430 35.5 20.7 19.4 1.2868 0.1633 0.0513 0.1794 0.0316 0.036040 65.2 31.9 29.5 0.7971 0.0495 0.0104 0.0573 0.0056 0.006760 220.0 76.2 68.2 0.3058 0.0046 0.0004 0.0058 0.0002 0.000290 1363.0 281.0 240.5 0.0727 0.0001 0.0000 0.0002 0.0000 0.0000120 8445.9 1,036.1 847.9 0.0173 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000180 324303.9 14,089.9 10,538.4 0.0010 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000240 12452553.5 191,609.2 130,977.7 0.0001 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000 0.0000

Muerte bacteriana 240 (Log UFC/mL)

xmin 12.0 ug/mL

TIEMPO (min)

Muerte bacteriana


ug/mL

Crecimiento bacteriano

(Log UFC/mL) 240 xmin. 0.0

ug/mL

Datos de Log(UFC/mL)+1, Calculados del modelo matemático para cada concentración.Periodos de AUC Cefepime en el tiempo. Conejos-Cefepime VITALIS. 0 a 240 min.


Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 1.5 ug/mL


ug/mL

Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 0.05 ug/mL

Muerte bacteriana


Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 1.0 ug/mL

Muerte bacteriana


0 70.78 43.880 38.958 34.280 32.662 33.349 32.887 33.249 32.626 32.317 32.49510 105.07 25.241 14.104 5.336 5.085 5.318 5.474 5.176 3.050 5.787 4.50020 155.96 14.519 5.106 0.831 0.792 0.848 0.911 0.806 0.285 1.036 0.62330 231.50 8.352 1.849 0.129 0.123 0.135 0.152 0.125 0.027 0.186 0.08640 886.19 8.118 1.112 0.036 0.034 0.038 0.044 0.035 0.005 0.058 0.02160 3,904.78 3.604 0.202 0.001 0.001 0.001 0.002 0.001 0.000 0.003 0.00190 12,771.32 0.686 0.010 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

120 228,821.18 0.227 0.001 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000180 2,447,789.92 0.008 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000240



Muerte bacteriana 240 (Log UFC/mL) xmin 12-0

ug/mL

(ABC) de Muerte Bacteriana, por concentración en cada pozo. Log(UFC/mL)+1, Calculados del modelo matemático para cada concentración. Periodos de AUC Cefepime en el tiempo. Producto Cefepime VITALIS. 0 a 240 min.

TIEMPO (min)





Muerte bacteriana




Muerte bacteriana

(Log UFC/mL) 240

xmin 2.0 ug/mL


ug/mL

Muerte bacteriana


Muerte bacteriana


PROYECCIÓN DE ABC, DE ACUERDO CON: UFC/mL por minuto

0 0.000 93.85 43.488 37.738 41.856 34.154 32.716 32.551 34.713 31.686 28.822 29.93810 241.40 233.63 26.456 14.566 25.084 9.069 8.181 8.363 12.963 6.177 3.081 5.02920 621.73 581.57 16.095 5.622 15.033 2.408 2.046 2.149 4.841 1.204 0.329 0.84530 756.52 1447.70 9.791 2.170 9.009 0.639 0.512 0.552 1.808 0.235 0.035 0.14240 749.55 14865.35 10.148 1.389 9.177 0.287 0.218 0.241 1.120 0.080 0.007 0.04260 1,430.42 315356.81 5.038 0.286 4.420 0.029 0.020 0.023 0.216 0.004 0.000 0.00290 1,785.04 4864429.47 1.134 0.016 0.951 0.001 0.000 0.000 0.011 0.000 0.000 0.000

120 1,363.06 2183045649.49 0.438 0.002 0.353 0.000 0.000 0.000 0.001 0.000 0.000 0.000

180 1,885.16 519424251080.71 0.022 0.000 0.016 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000240 963.64 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

ABC 2.5 ug/mL

ABC 3.0 ug/mL

ABC 6.0 ug/mL

ABC de Muerte Bacteriana (Log UFC/mL)+1, por Concentración en cada pozo. Log(UFC/mL)+1, del modelo matemático. AUC de concentración de Cefepime en el tiempo. 0 a 240 min. Cefepime estándar USP

TIEMPO (min)

AUC (ug/mL)xmin

ABC FD (LogUFC/mL+1) x

min 0.0 ug/mL

ABC 0.5 ug/mL

ABC 1.0ug/mL

ABC 1.5 ug/mL

ABC 2.0 ug/mL

ABC 9.0 ug/mL

ABC 12.0 ug/mL

ABC 4.0 ug/mL

0 0.000 81.3 71.3 69.2 43.8 38.1 36.6 36.4 33.9 33.610 241.40 149.2 110.1 105.3 27.2 11.6 7.4 11.6 6.0 6.220 621.73 274.1 170.2 160.3 16.8 3.5 1.5 3.7 1.1 1.230 756.52 503.5 262.9 244.0 10.4 1.1 0.3 1.2 0.2 0.240 749.55 2851.6 1081.1 976.8 11.0 0.5 0.1 0.6 0.1 0.160 1,430.42 23744.2 5357.2 4631.1 5.7 0.1 0.0 0.1 0.0 0.090 1,785.04 147133.3 19755.8 16326.5 1.3 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0120 1,363.06 9982493.4 453779.6 341590.0 0.5 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0180 1,885.16 383305721.2 6170971.4 4245484.1 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0240 963.64 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0

ABC FD (LogUFC/mL+1) x min. 2.0 ug/mL

ABC de Muerte Bacteriana (Log UFC/mL)+1, por Concentración en cada pozo. Log(UFC/mL)+1, del modelo matemático. AUC de concentración de Cefepime en el tiempo. 0 a 240 min. Conejos-Cefepime Vitalis

ABC FD (LogUFC/mL+1) x min. 3.0

ug/mL

TIEMPO (min)AUC

(ug/mL)xmin

ABC FD (LogUFC/mL

+1) x min. 6.0 ug/mL


ug/mL


ug/mL

ABC FD (LogUFC/mL+1) x min. 0.2ug/mL

ABC FD (LogUFC/mL


ABC FD (LogUFC/mL



ug/mL

ABC FD (LogUFC/m

L+1) x min.0.05

PROYECCIÓN DE ABC, DE ACUERDO CON: UFC/mL por minuto


Cefepime estándar USPConejos Cefepime

VitalisProducto

Cefepime Vitalis

1.00 61.79 116.88 61.341.50 105.90 54.90 40.612.00 46.59 45.98 38.703.00 43.88 53.62 39.476.00 39.39 41.20 35.999.00 32.27 41.22 39.39

Presentación de datos de Correlación, entre ABC Total (LogUFC/mL.min), Cefepime estándar USP, Conejos-Cefepime Vitalis y Producto Cefepime Vitalis,

en cada concentración. 240 minutos

El análisis de varianza aplicado (ver recuadrosiguiente) no encontró diferencias significativas entre las muestras en comparación, con referencia al ABC de cinética de muerte para K. pneumoniae 700603. Los datos transcritos a continuación, muestran el valor P de 0.4682 para F test, que por ser > 0.05, no se encuentran diferencias estadísticamente significativas entre las medias

de las tres muestras. La comparación de las medianas mediante el test de Kruskal Wallis, proyecta un valor P de 0.1498, que como en el anterior análisis determina la igualdad entre las muestras, con un nivel de confianza de 95%.

Correlación entre: AUC (ug/mL).min Cefepime Vitalis- Suero de Conejos versus ABC Producto Cefepime Vitalis

0.000

5.000

10.000

15.000

20.000

25.000

30.000

35.000

40.000

45.000

50.000

0.00

0

241.

40

621.

73

756.

52

749.

55

1,43

0.42

1,78

5.04

1,36

3.06

AUC (ug/mL).min Cefepime Vitalis en Suero de Conejos

AB

C (

log

UF

C+

1).

min

. Pro

du

cto

Ce

fep

ime

Vit

alis

ABC 0.5 ug/mL

ABC 1.0 ug/mL

ABC 2.0 ug/mL

ABC 2.5 ug/mL

ABC 3.0 ug/mL

ABC 4.0 ug/mL

ABC 6.0 ug/mL

ABC 9.0 ug/mL

ABC 12-0 ug/mL

0.5 0.8567

1 0.8753

1.5 0.881

2 0.881

2.5 0.8809

3 0.8808

4 0.881

6 0.8824

9 0.8805

12 0.8814


R2

Correlación entre: AUC (ug/mL).min Cefepime Vitalis- Suero de Conejos versus ABC Cefepime estándar USP

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50


AB

C (

log

UF

C+

1).m

in.

Cef

epim

e es

tán

dar

US

P

0

5

10

15

20

25

30

35

40

ABC 0.5 ug/mL

ABC 1.0ug/mL

ABC 1.5 ug/mL

ABC 2.0 ug/mL

ABC 2.5 ug/mL

ABC 3.0 ug/mL

ABC 4.0 ug/mL

ABC 6.0 ug/mL

ABC 9.0 ug/mL

ABC 12.0 ug/mL

0.5 0.9761

1.0 0.83731.5 0.97312.0 0.74562.5 0.73383.0 0.73904.0 0.82786.0 0.69219.0 0.6267

12.0 0.6719

Concentración de Cefepime en

cada pozo (ug/mL)

R2

Correlación entre: Farmacocinética medida como AUC (ug/mL).min, del producto Cefepime Vitalis- Suero de Conejos versus Farmacodinamia medida como ABC Conejos-

Cefepime Vitalis

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

40.0

45.0

50.0

0.000 241.40 621.73 756.52 749.55 1,430.42 1,785.04 1,363.06 1,885.16


AB

C (

log

UF

C+1

).m

in. C

on

ejo

s-C

efep

ime

Vit

alis







(

1.00 0.97911.50 0.77442.00 0.69863.00 0.78656.00 0.65029.00 0.657

Concentración (ug/mL) R2


ESTUDIO PILOTO



CORRELACIÓN ENTRE. ÁREA BAJO LA CURVA DE CONCENTRACIÓN (ug/mL) vs TIEMPO (min.) Y ABC DE

MUERTE MICROBIANA(LogUFC/mL+1)(min.)

Comparación del comportamiento farmacodinámico de las muestras de suero, sobre la cepa microbiana K. pneumoniae ATCC 700603, se procesa con base en el modelo PK/PD/NCA, 107 de WinNonLin®.

Producto-Cefepime Vitalis

AUC vs ABC: Concentración

(ug/mL)

Parameter Estimate StdError CV% UnivarCI_Lower UnivarCI_Upper PlanarCI_Lower PlanarCI_Upper

Emax 38.93 1.06 2.73 36.42 41.44 34.99 42.87EC50 185.99 14.48 7.79 151.75 220.23 132.20 239.78Gamma 2.08 0.25 12.09 1.49 2.68 1.15 3.02Emax 34.28 0.19 0.56 33.81 34.75 33.53 35.02EC50 128.71 9.12 7.09 106.39 151.02 93.16 164.26Gamma 2.69 0.29 10.64 1.99 3.39 1.57 3.80Emax 32.66 0.18 0.54 32.25 33.08 32.01 33.32EC50 130.49 8.70 6.67 109.91 151.07 98.15 162.82Gamma 2.75 0.28 10.25 2.08 3.41 1.70 3.79Emax 32.89 0.20 0.61 32.41 33.37 32.14 33.64EC50 132.77 8.86 6.67 111.83 153.71 99.87 165.67Gamma 2.69 0.28 10.42 2.03 3.35 1.65 3.73Emax 32.63 0.06 0.19 32.48 32.77 32.39 32.86EC50 117.97 7.61 6.45 99.97 135.96 89.69 146.24Gamma 3.17 0.28 8.89 2.50 3.84 2.12 4.22Emax 32.32 0.23 0.71 31.77 32.86 31.46 33.17EC50 135.49 9.03 6.66 114.14 156.84 101.95 169.03Gamma 2.63 0.28 10.59 1.97 3.29 1.60 3.67

1

1.5

2

3

6

9



PRODUCTO-CEFEPIME




Cefepime estándar USP AUC vs ABC:


Parameter Estimate StdError CV%UnivarCI_Lo

werUnivarCI_U

pperPlanarCI_L

owerPlanarCI_U

pper

Emax 37.7 1.2 3.2 34.8 40.7 33.0 42.4EC50 194.7 16.9 8.7 153.4 236.0 128.9 260.5Gamma 2.0 0.3 12.9 1.4 2.7 1.0 3.0

Emax 41.3 2.7 6.5 34.8 47.8 30.9 51.6

EC50 347.1 48.9 14.1 227.4 466.9 156.4 537.9Gamma 1.8 0.3 15.9 1.1 2.5 0.7 2.9

Emax 34.2 0.6 1.6 32.8 35.5 32.0 36.3EC50 155.9 11.4 7.3 128.1 183.7 111.6 200.1Gamma 2.3 0.3 12.3 1.6 3.0 1.2 3.4

Emax 32.5 0.5 1.5 31.3 33.8 30.6 34.5EC50 153.7 11.1 7.3 126.4 180.9 110.2 197.1Gamma 2.3 0.3 12.2 1.6 3.0 1.2 3.4

Emax 31.7 0.3 0.9 31.0 32.4 30.6 32.8EC50 138.9 10.0 7.2 114.4 163.3 99.9 177.8Gamma 2.6 0.3 11.6 1.8 3.3 1.4 3.7

Emax 28.8 0.1 0.3 28.6 29.0 28.5 29.1EC50 120.5 8.5 7.1 99.7 141.4 87.3 153.7Gamma 3.1 0.3 10.0 2.3 3.8 1.9 4.2

6

3

9

1

1.5

2



MUESTRA: CONEJOS-CEFEPIME

Conejo-Cefepime Vitalis AUC vs

ABC: Concentración

(ug/mL)

Parameter Estimate StdError CV%UnivarCI_L

owerUnivarCI_U

pperPlanarCI_L

owerPlanarCI_U

pper

Emax 42.9 2.8 6.6 36.2 49.6 32.4 53.4EC50 380.5 52.8 13.9 255.8 505.3 184.5 576.5Gamma 1.8 0.3 15.8 1.2 2.5 0.8 2.9

Emax 38.1 0.7 1.9 36.4 39.9 35.4 40.9EC50 166.6 11.6 7.0 139.2 194.0 123.5 209.7

Gamma 2.2 0.3 11.6 1.6 2.8 1.3 3.2

Emax 36.6 0.3 0.9 35.8 37.4 35.4 37.8EC50 140.9 9.4 6.7 118.8 163.1 106.1 175.7Gamma 2.5 0.3 10.9 1.9 3.2 1.5 3.6

Emax 36.4 0.8 2.1 34.6 38.2 33.5 39.3EC50 171.5 12.2 7.1 142.7 200.3 126.3 216.7Gamma 2.2 0.3 11.6 1.6 2.8 1.2 3.1

Emax 33.9 0.2 0.7 33.4 34.5 33.1 34.8EC50 134.9 9.0 6.7 113.6 156.1 101.5 168.3Gamma 2.6 0.3 10.6 2.0 3.3 1.6 3.7

Emax 33.6 0.3 0.8 33.0 34.2 32.6 34.5EC50 136.8 9.1 6.7 115.3 158.4 103.0 170.7Gamma 2.6 0.3 10.7 1.9 3.3 1.6 3.6

2.0

3.0

1.0

1.5

6.0

9.0

0 0.00

10 48.28 241.40

20 76.06 621.73

30 75.24 756.52

40 74.67 749.55

60 68.37 1,430.42

90 50.63 1,785.04

120 40.24 1,363.06

180 22.60 1,885.16

240 9.52 963.64

TIEMPO (min)PROMEDIO

(ug/mL)AUC

(ug/mL)xmin



Producto Cefepime Vitalis



Producto-Cefepime Vitalis

1.0 37.71 42.89 38.931 194.69 380.52 185.9881.5 41.28 38.14 34.279 347.13 166.60 128.7062.0 34.15 36.59 32.662 155.87 140.94 130.4893.0 32.55 36.38 32.887 153.66 171.51 132.7696.0 31.69 33.92 32.626 138.86 134.89 117.9659.0 28.82 33.56 32.317 120.52 136.85 135.487


Comparación de Resultados Farmacodinámicos entre las muestras en suero de conejo: Cefepime estándar USP, Conejos-Cefepime Vitalis y Producto Cefepime Vitalis

Emáx EC50

ANOVA Table: Comparación de Emax en las muestras de suero de conejos

Analysis of Variance-----------------------------------------------------------------------------Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value-----------------------------------------------------------------------------Between groups 30.8764 2 15.4382 1.22 0.3236Within groups 190.196 15 12.6797-----------------------------------------------------------------------------Total (Corr.) 221.072 17

Emax Conejos Emax Producto Emax USP

Comparación de Emax en las Muestras de Suero de Conejos. K. pneumoniae

sample

31

33

35

37

39

41

resp

onse

Emáx Conejos = -5.71856 + 1.04519*Emax Producto + 0.207973*Emáx USP

Análisis de Regresión Múltiple para E máx en las muestras de suero de conejo

32 34 36 38 40

Emax Producto

-2.5

-0.5

1.5

3.5

5.5

com

pone

nt e

ffec

t

EC50 Conejos = -365.177 + 3.82576*EC50 Producto + 0.127502*EC50 USP

Análisis de Regresión Múltiple de las Muestras de Suero de Conejo: EC50

110 130 150 170 190

EC50 Producto

-50

0

50

100

150

200

com

pone

nt e

ffec

t

1 2 3 4 5 6 7 8 11 120 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.0010 44.55 16.83 0.00 40.15 33.15 28.63 50.80 113.49 73.51 81.6820 95.86 28.15 13.65 144.08 60.27 41.08 78.08 134.33 75.28 89.8530 64.83 46.81 18.85 81.33 61.79 50.98 82.06 144.38 96.63 104.7540 71.96 60.64 19.64 75.40 65.27 57.11 80.91 124.00 98.17 93.6160 62.16 58.83 30.53 60.48 59.88 63.68 68.58 101.21 99.59 78.7790 51.27 52.13 34.49 41.06 43.34 43.82 38.79 49.97 86.30 65.14

120 38.39 45.77 35.11 31.50 37.40 37.57 24.78 50.70 60.50 40.67180 18.90 27.82 22.02 11.78 17.11 27.62 17.09 23.15 35.76 24.75240 7.07 14.11 14.95 4.09 4.13 18.48 2.76 4.67 15.75 9.22

CONEJO

CONCENTRACION DE CEFEPIME EN SUERO DE CONEJO. PRODUCTO: CEFEPIME-VITALIS, 1gTIEMPO

(MINUTOS)

ENSAYO DE FARMACOCINÉTICA EN CONEJOS, DEL PRODUCTO-CEFEPIME

AUC Trapecios (ug/mL.min) AUMC (ug-min*min/mL)

T (min) Conc (µg/ml) Partial Cumulative T min Time x Conc Partial Cumulative

0.0 0.0 0.00 0.00 0.0 0.0 0.00 0.0010.0 48.3 241.40 241.40 10.0 482.8 2414.00 2414.0020.0 76.1 621.70 863.10 20.0 1521.2 10020.00 12434.0030.0 75.2 756.50 1619.60 30.0 2257.2 18892.00 31326.0040.0 74.7 749.55 2369.15 40.0 2986.8 26220.00 57546.0060.0 68.4 1430.40 3799.55 60.0 4102.2 70890.00 128436.0090.0 50.6 1785.00 5584.55 90.0 4556.7 129883.50 258319.50

120.0 40.2 1363.05 6947.60 120.0 4828.8 140782.50 399102.00180.0 22.6 1885.20 8832.80 180.0 4068.0 266904.00 666006.00240.0 9.5 963.60 9796.40 240.0 2284.8 190584.00 856590.00

AUC Summary AUMC Summary

Last conc. value 9.5 µg/ml Last conc.-time value 2284.8 (ug-min/mL)Cumulative observed AUC(0-t) 0 (ug-min/mL) Cumulative observed AUMC(0-t) 856590 (ug-min*min/mL)

Remaining AUC(t-) 289 (ug-min/mL) Remaining AUMC(t-) 78242 (ug-min*min/mL)AUC(0-) 289 (ug-min/mL) AUMC(0-) 934832 (ug-min*min/mL)

Curve Parameters: Observed

Cmax 76.1 µg/mlTmax 20.0 min


Concentración de Cefepime (ug/mL) versus Tiempo (min). Producto: Cefepime Vitalis

0.00

10.00

20.00

30.00

40.00

50.00

60.00

70.00

80.00

0 50 100 150 200 250 300

Tiempo (min)

Co

nc

en

tra

ció

n (

ug

/mL

)


ÁREA BAJ O LA CURVA ACUMULADA. Producto Cefepime Vitalis. Suero de Conejo

0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

0.0 50.0 100.0 150.0 200.0 250.0 300.0

Tiempo (min)

Áre

a B

ajo

la C

urv

a

(ug/m

L).m

in



Los datos de logaritmo de la concentración en los cinco últimos periodos de muestreo, para el cálculo de los parámetros: Lambda: 0.010712 (MIN.-1)Tiempo de vida media (t½): 64.69 min.Valor interpolado para el intercepto en el eje de concentración, en el tiempo cero: 137.16 ug/mL

CONCLUSIONPor lo anterior, se propone como producto de este

estudio piloto, un diseño experimental con un tamaño muestral adecuado para comprobar la significancia de

la interacción de las variables farmacodinámicas y farmacocinéticas enunciadas, y la no diferencia

significativa de los resultados que correlacionan el comportamiento farmacocinético del producto cefepime

inyectable, con las áreas bajo las curvas de muerte bacteriana, obtenidas por valoración In Vitro - Ex Vivo

en muestras de suero de conejo, preparadas a partir de cefepime estándar USP y

del Producto Comercial de Cefepime.

unidad de estudios biofarmacÉuticos junio 2007. unidad de estudios biofarmacÉuticos piedad...

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