Microsoft PowerPoint - TP-talasemias2010Explicación TP
Esquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la MolEsquema de la Moléééééééécula de cula de cula de cula de cula de cula de cula de cula de
HemoglobinaHemoglobinaHemoglobinaHemoglobinaHemoglobinaHemoglobinaHemoglobinaHemoglobina
Hemoglobinas normales: variantes
A A2FGower
I II
HEMOGLOBINOPATHEMOGLOBINOPATÍÍASAS
Beta - talasemia: herencia
• Beta-talasemia mayor (major).
• Beta-talasemia menor (minor).
• B-Talasemia mayor: Los dos cromosomas 11 tienen el
gen de la beta globina con mutación. Homocigóticos o
heterocigóticos compuestos.
gen de la beta globina con mutación.
BETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIASBETA TALASEMIAS
• Tipos de cromosomas 11 con mutaciones que producen beta-talasemia:
• Beta +: La mutación no impide que el gen sintetice algo de globinas beta.
• Beta 0: La mutación impide totalmente la síntesis de globinas beta, bien porque no se produce RNAm o bien porque se produzca pero no sea traducible.
Índices Hematimétricos
RBC (M/ul) Recuento de glóbulos rojos HGB (g/dl) Hb HCT (%) Ht VCM (fl) Volumen corpuscular media
MCH (pg) Hb corpuscular media
MCHC (g/dl) Concentración de Hb corpuscular media
RDW (%) Ancho de Distribución de Eritrocitos
Hemograma Ferropénico
Hemograma β-Talasémico
Sindromes talasémicos
buffer Tris Glicina, pH 8.6
coloración: Amidoschwarz.
4) Perfil de hierro (para descartar anemia ferropénica).
5) Estudio molecular de los genes de globina
para identificación de la mutación.
Electroforesis de Hb: Lisis:
1- Cuantificar Hb
2- Hacer una dilución 5% para sembrar en las tiras de celulosa
HEMOLIZADO
1. Pasar la capa rojo brillante a otro tubo eppendorf
2. Cuantificar Hb
3. Hacer una dilución 5% para sembrar en las tiras de celulosa
CAPA ROJA BRILLANTE
Preparar dilución al 5%
ββββ-Talasemia Heterocigota Laboratorio
- Hipocromía - Células target - Punteado basófilo
- Ferremia normal -Ferritina normal -- Hemoglobina A2 aumentada - Hemoglobina Fetal normal o lig. aumentada
Microfotografías de Sangre Perisferica
Pacientes de PRSL- Complejo Sanitario San Luis


Extendido de paciente con beta-talasemia menor
Se oberva hipocromemia (), células en blanco de tiro (), punteado basófilo (), anisocitosis.
Observación de punteado basófilo en pacientes con beta talasemia.
Punteado basófilo en una célula target o célula en blanco de tiro
β- Talasemias
Diagnóstico molecular
β+ β+ βο βο
Beta + alelo hipomorfo
Bibliografía: Alvarez SM, Varas SM, Meloni AM, Giménez AI y Giménez MS. 2000. Incidencia de la beta -talasemia en San Luis, Argentina. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana: 35 (1) 75-82
Alvarez, Silvina M. (1999). Trabajo Final de Tesina en Biología Molecular ‘’ Rastreo de pacientes β- talasémicos: estudio bioquímico y molecular. UNSL. Biblioteca Central.
Weatherall DJ y col. Chapter 93: The hemoglobinopathies. Book II. The metabolic and molecular basis of inherited disease. Scriver CR, Beaudet AL, Sly WS & Valle D. 7º Edition. 1995. New York Mc Graw-Hill.
Fundación Argentina de Talasemia "FUNDATAL" http://www.fundatal.org.ar