study methodology

11
Study methodology Using genetic epidemiology to study Rett syndrome: the design of a case±control study Helen Leonard a,b , Susan Fyfe a,c , Danielle Dye c and Seonaid Leonard a a TVW Telethon Institute for Child Health Research and b Disability Services Commission, West Perth, c Curtin University of Technology, Perth, Western Australia Introduction Classical Rett syndrome, which has been found almost exclusively in girls, is a puzzling disorder in which apparently normal development in the first year of life is followed by loss of acquired speech, deceleration of head growth, loss of hand skills and the development of stereotypic hand movements. 1 It becomes apparent over time that the girls have both severe intellectual and motor disability. The aetiology of the disorder is unknown and there are currently no conclusive diagnostic laboratory tests or biological markers. Rett syndrome has been generally considered to have a genetic basis for a number of reasons. These include the gender specificity, the small number of reported familial cases and the concordance in all but one of the reported monozygotic twins. Zoghbi 2 used data provided by the International Rett Syndrome Association (IRSA) on known familial cases to support the evidence for a genetic aetiology. Since then, vertical transmission has also been described in a mother±daughter pair. 3 Despite many attempts to identify the genetic basis of Rett syndrome, it remains a mystery. 4 It is thought that familial recurrences constitute only about 1% of cases, and it has therefore been assumed that the vast majority of cases are sporadic. 5 One popular genetic mechanism is that of an X-linked dominant disorder, which is lethal in males. If, as it appears, the vast majority of cases are sporadic new mutations, one would not expect an increase in fetal wastage in mothers of girls with Rett # Blackwell Science Ltd. Paediatric and Perinatal Epidemiology 2000, 14, 85±95 Ahed Bhed Ched Dhed Ref marker Fig marker Table mar- ker Ref end Ref start Correspondence: Dr Helen Leonard, TVW Telethon Institute for Child Health Research, PO Box 855, West Perth, WA 6872, Australia. E-mail: [email protected] Summary Rett syndrome is a neurological disorder that is seen almost exclusively in females. Although generally considered to have a genetic basis, the underlying mechanism remains obscure. One favoured hypothesis is that the syndrome is an X-linked dominant disorder, lethal or non-expressed in males. Genealogical research has also suggested that the mode of transmission in Rett syndrome may involve a pre- mutation which over several generations is converted to a full mutation. Geographical clustering has been reported, and it has also been proposed that Rett syndrome is a clinically variable condition and that other neurological disorders may be occurring more commonly in families with Rett syndrome. Other studies have found an apparent increase in intellectual disability and seizures in the extended families of girls with Rett syndrome. The science of genetic epidemiology can be used to identify familial aggregation, which is the clustering of a disorder within a family. We have used a case±control study design to investigate both fetal wastage and familial aggregation of other disorders in families of girls with Rett syndrome. The Australian Rett Syndrome Database provided the source of cases, and control probands were girls of a similar age with normal development. This paper describes the methodology for a case±control study of this rare condition using pedigree data and discusses issues in the collection and evaluation of such data. The use of a control population is an important feature. Both the strengths and the shortcomings of our design are identified, and recommendations are made for future research. 85 Paper 218Disc

Upload: helen-leonard

Post on 06-Jul-2016

212 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Study methodology

����� �������

� ��� ������� ��������� � ���� ���� ������� ��� �� ���� � �� ������ ����

���� ���������� �� �� �������� ������ ���� ��� ������ �������

���� ������ ��� ���� �� �� �� ������ �������� �� �� ��� � �� ���� ��� ��� �� � ���� ������ ����� � ���� �� � �������� ������

������ ������ �

�����������

��������� �� ��� ���� ����� ��� ���� ����� �����

���������� �� �� ��� �� � �������� ���� �� �� �����

���� ��� �� ��� ���������� �� �� �� � �� �� ����

�� �������� � ���� �� ����� �� ������� ������ ���� ��

���� � ���� ���� �� ���� ������ ��� �� ����������

�� �� ����� ���� ���������� � ������� ���� ��

��� ��� �� �� �� �� ���� ��� ���� � ����������

��� ��� ��������� �� ������� �� �� ���� �� ��

������� ��� �� � � � �� ��� �� ����������

��������� ���� �� ��� � ���������� �� �� ��

�� ��� ��� ��� ���� ���� ��� ������� �� �

���� � ������ ����� �� � ����� �� ������� ����

������� �� ����� ���������� �� ����� ����� ��

��� �� �������� ����� ��� �� ����� ����� �� ��� ��

��� �� �� ��� �� ��������� ����� !�����" ����

��� � ������ � �� ��� ������� �� #�� ���

$��������� %��#$& �� ����� �������� ����� � �����

�� �������� �� � ������ �������� #���� ����

�� ���� ���������� ��� ���� ���� ���� ���� �� �

���� '������ ��� �( )����� ��� ����� �

������ �� ������ ����� �� �� ��� ���� � ������

� ��� �* � �� ����� �� �������� ��� �����

������� ��� ���� �+ �� ������ ��� � ��� �� ��� �

���� ������� �� �� ��� ��,� � �� ����� � �

��� �����- .�� ������ ������ ��������� �� �� ��

�� /0������ ������� ���� �� � ����� �� ����� ��

������ ��� �� � ����� �� �� ��� ��,� � �� ����� � �

��� ���� ��� �������� ��� ����� �� ����� ��

��� ���� �� ���� ������ �� ���� � �� �� �� ��� ��

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

$���

1���

����

)���

��� �� ��

5�� �� ��

���� �� 0

��

��� ������ ��

�����"����%

) 6���� 2���� ��

78 ������ ������ ��

����� 6���� ����� ���

9. 1�� 3--� 8�� 9� ��

8$ :3;"� $�� �����

<0����=

������ �>�����������������

�����

�� ��� ��� �� � ��� �������� ���� �� �� �� ���� ����� ���������� �� ��������

$������ ���� ��� ������� �� � ���� � ������ ������ �� ���� ���� ���������

������ ����� �� .�� ����� �� �������� �� �� �� ��� ��� �� �� /0������

������� ���� �� � ����� � ���0��� ����� �� ������ ?����������� ���� �� ��� ����

�������� �� �� ���� �� ���������� �� �� ��� ��� �� ������� � � �0

������ ����� ��� ���� �� ���� ����� �� ����� �� � � ���� ������� ?��� �������

����� ��� ��� ���� ��� ��� ��� � ��� ���� ���� � ������ �� �� ��� ��� �� �

��������� �� ����� �������� ��� �� ��� ��� �������� ���� �� � �� �� ���� ���

�� � ������� �� �������� ��� �� ��� ���� .�� ������ ���� ����� ��

���� �� ��� ���� �� ���������� �������� ��� ����� �� �� �� ������� �������� ��

�� �� ��� �� ��� ���� �� ������� �� ������ ����������� ��� �� ���� � ������

�������� ��� ������� ����� �� �� ����� ��� �� � ���� �� ����� � ������ 8� ����

���� � ����'��� �� ��� ������ � ��������� ��� ���� ������ ��� ��������

��� ������ �� ��� ���� �� � �� �������� �� �� �� ��� �� ��� ���� �� $�� �����

�� #�� ��� )������ � ������ �� ��� �� �� ������ ��� ��� �� � ������ �� �

�� �� �� � ������ ��� ��� �� ��� ����������� ��� ���� ���� ���� �� ���������

�� � ����'��� �� ��� �� ��� � � �������� ����� ����� �� ��� ��� ��������� ������

�� �� ��������� ��� ��������� �� ���� ���� �� ��� �� � ��� �� ��������� �� ��

���� �� ���� �� 1�� �� � ����� ��� �� ��� ������� �� �� ������ � �

���������� ��� ������������� � � ���� �� ��� � ���� ���

3-

����� �����

Page 2: Study methodology

��� ��� � � ���� ��� �� �� ��� ��� �� ���

���������: ��� �� �������� ��� �� �������� �� �� �

������� �� ������� ��� ��� �� � �������� ��

����� ���� ��� ������ �� �� � �� ��� �� ��������

��������� � �� � ��� �� ��� ��� ���� ��� ����

��������� ����� � @�������; 6� ����� � �������

����'������ ��� �� ����=� ����� �� ��� � �� ���

��� �� ��A:=�� ���� ����� � � ����� �� ������ ���

�� ""A ����� � �� ��� ���� ��� ����� � ������ ��

���� ������ ������� �� �� ����� ��� ���� ���

�� �������� ���� ����� �� � �� �� ���� ����

��������� �� ������ ��� ����� �� �������� ��

����� ����� �� ��� � ����� �� ������ �� ���� ��

���� �� � ����� ���� � ��� �� ��� ����

�������: �������� �� �� ��� ���� �� ����

������ ����� ���� ��� �� �������� ��� �� �����

���������� 6� ��� � ��� �� ������� �� �� ��� � ��

������� ���� � �� " �� �� :AA �������� ����� � ���� �

������ ��� �� ��� ��� �� �43: �� � ��� ��

�=�-A �� �� ����� ��������� � ��� �� ����� ������

B� � ������ ��� ��� ��� ����� � #������ ��

��&�- ��� ��������� �� �������� �� ��� ����

���������� ����� ��� �� ������� �� �������� ���

���� � ��� � � �� �0���� ������� � ��� ������

�� �� �� ��� ��� ���� ��� ����� ��� ������ /

����������� ���� ���� �C �������� �� ���� �������

�� �� ������� �� �� �� � ����� ��� �� ������� ���'

����� ��� ����� � �� �������� �� �� ��� ���

����� �� /0������ ���� �� �

����������� �� ������������� ���� �

$������ ��� ����������3'�" ���� ���� � ����� �� ���

� � ��������� �� � ������ ������ ����� �� ��

��� ���� $ �� ��� �� �"3 %4: ��������� ��� (" ������&

#������ ����� �� � ������������� ���� ����

� ���� ;'�A ���� �������� �� "3 �� �� 4: ���������

��� �� �� �� (" ������ ������ �� �� ������� ���

��������� ��� ��� ����� �� �� ���� ���������

B� � ��� ��� ���� ��� ��������� ��� 3 �� �� �"4

����� ��� ��������� � �� ����� ��� �������� � ��

����� ��� ���� �������� �� ������ ��� ������� ���

��� � ��� � �� ���� � �� �������� �� � ������

����� �� �-+ �� ����� ��� ��������� �� � ���� ��

���������� �� �� �� �� � � ������� ��� ���

����� �� � � ���� ������ ��� ���� �� ���� ������

6����� � �� ��������� �� �� ��� ��� �����

������ � � �� �� ���� ���� ��������� ��� ���

���� ����������( �� $������C� ����� ���� �����0

� ��� � ���� ����� ��� ������� � ������ ��

����������� �� � ����� ��� �� �� ��� ��� �� ���

�� ���� ��� ���� �������������*��-

?��� ������� ����� ��� �� �� ��� ��� �� ���0

����� � ��� � � �� �����*��: D� ���; ���

$��������3 9��� ��� �����������* ���� � ������ ��

������ �� �� �� �� ��� ��� �� �� ���� ���

�� � � ������ �� �� �� �������� ������� �� ��

����� ���� �� ��� ������ �� �� ���� �� � �� ��������

�� �� ��� ��� �� �� � ��������� �� �����

�������� ��� �� ��� ��� �������� ���� �� � ��

�� ���� ��� �� �������� ��� �� ��� ���� �������

�� � ���� ���� � ����� �� ��� � ��� �� ��

��� �� � ��� ��������� ��� ���� �� ����� ��� ��

��� ��������� ���� �� ���������� �������� ���

������ �� ���� �� � �� ���� ��������� 1���� �� ��&�4

�������� �� �� � ����� �� � �� �� ��� ���� ��

���� ������� ��������� �� �� ��� ��� �� ��

� ��� � �� ������� �� ��� �� ���������� �� ����

�� ���� ����� �� ���� � E���0��� ������C ��

��� ���� $ ��� �� :( �����"A ����� �� *(+ ��

������� �������� �� ����� �� ��� �� ��� ��� ���

� ����� ��� ����� ���������� ��������� ����

)���C� ��� ���� .�� ������ �� ���� �� ��� ����

����� � ������� ��� 2�� � '#��� ������� ��� �

�� ��� �� � �� � ��������"� � �� ������ ���������0

��� ������� � ���� �� �� ����0� ��� �� � �� � ���

�� ��� ����"" � ���� ������ ��� �����"( ��� ��

������� ����� �� ����� �� � ��� � ������ ��� ��

��� ��� �� ���� �� �� �� �� ��� ������ ��� ��� �

���� ��� ��� ��� � � ������ ���������� ���������"*

������� �� ���"A ���� ��� �� �� �� ("+ %"AF:(& ��

�������� �� � ��� �� ���������� ��� � ����� �

���� �� �� �� ������� ������ 6����� �� ��� ���

�� � ��� �� �������� �� ��� ������ �� ����

���������� �������� � ����� �� �� � ��� �� ((

��������"- ������� �� � ��� ��� ���� ������� ��� �

���� � ���������� ��� ������� ��������� �� ���

� ������� �� ���"A ���� ����� �� "-+ %�:F:(& ��

�������� ��� �� �� �� � ��� �� ���������� �����

��� ������� �������� ��� ��� ���� ������ � �

������ �� �������� �� ��� �� �� "( ����� ���� ����

� @� ��� #���������": ��� �� ���� ���

� ������� ��� ���� ��������� �� �������� �����

B�� �� �� ��� ��� ���� �������� ����� ��� ��

��� ��������� ����� �� �������� � � ����������

��� ���� ���� ������� ��� � �� ������ ���� ������

� � �� ���� �� ���� �� ��� ���� �������� �� ����

������������ ��� � ���������� �0����� ��� �

�� ��� ��� �� � ����� � �� �� ��#$�"A 6����� �

�� ���� �� ���� ����� �� ��� �� �������� �� �����

3: �& '���� � ���

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 3: Study methodology

�� � �� �� ��� ��������� �� �� �� ��� �� ��� ����

$������ �� � ��� � ��������� �� ����� ��� �� �� ���

��������� �� ������� ��������� ����� ������ �����

���� ��������� ���� �� � �� ���������� $������

���� ��� � � ����� ����� � � �������� ����� ��� ��

��� ��������� �� �� �������� �� ������� ��� ��

��� ���� �� ��������� �� ����� ����� ���� �����

� �� � ���� ��������� ��� ����� ���� ��� � ��� ��

� ��� � � ���� �� �� � ���� �������� ����������

�� ��� ������ $ ������ ��������� �� ���� �� �� ��

����������� �� ���� ������ ��� ������� ��� ����

����� ��� �� � ������� �� � ����� �� ����� ��

�������� ��� ������ ��� ��� ���� ������� �� E��

���� ���� �� � ���� �� � � ����� � ������ �� ��

������� �� ������� �� ���� ��� �� �� ���� ��

���������C�"; ��� ����� ��� �� �� ��� � ���� ��0

������ ���� �� � ������ ���� � ��� ��� ��

��������� ����� ������ ��������������� ����������

�� �� ���� �� �� � � ��� �� ��������� � ��������

�� �� ���� �� �� ������ � �� �� �������� �

����� � �� � ������ �� �� ���� �� �� ���� �������

��� �� � ������ �� �� ����������"3 6����� � ��

������ ��� ������ �� � ����� � �� � ������ ��

���� ������� ��� �� � ������ �� ��� �� ��������

�� �� E ����� ���� ���� C �������"; ����� ���

��� ��� � � ������� ��� ��� ������� � � ���������

�� ���� �� �� �� ������� ���� ����� �� �� ��������

�� �� ���� ��� ��� �� � ����� ��� ��� �� ����� ���

��� ������ ��� ������� �� ���� ���� � �� � ���

��������� � �� � ����� ���� ����� $ �� �������

������ �� � ��� ��� �� ������� ������� �� ����

���� ���� �� ���� ��� ��� �� �������� ��� �� ������

��� ����� ��� �� �� � �� � ����� ���� ������ ��

� ��� ����� ��� �� ��������� �� ����� ���� 6����� �

��� ������� �� �� ���� �� �� ����� ��� ���� ��

����������� �������� ��������� � ��� ��� ������

�� ���� �� ������������ ������ ������� ��������"4

�� �43-� � ��� �������� � 6�����(A �� � �����

��������� �� ������� ��� �� ����� ��� ��� ���

������ ����� �� ��� �� ��� ����� ����� �� ��

��� ��� �� ����������� � �� �� � ��� � ������

��� $����(� � ������ �� ����'��� �� �������0

�� ������ �� ���� � ������ �� � ��� ��� ��

����� ����� �� ���� � �� ����� ��� � ���������

��� ���� � ����� � �� /0������ ������� ����0

����� 6����� � ���� ������ ��������������� �0

��� �� ��� �� ���� � � �� �� �� ���������0�����

���� �� #�� ��� ������ (" ��� ������ �

� ������� � �������� ����� ��� 6����� �� $�� �����

�� #�� ��� )������ �� �� ��� ��0����� �����0

��������� ����� ��������� �������� ���� ����� �

���� ���� �����������(( ������� �� � ��� ���� �

���� �������� ����� �� �������� ��� � �� #������(*

$������ ��� ����� �� �� ��� ��� ���� ����

��� �� � �� ��#$� � ���� �� ���� � ���������0

����� ����� ��� � �� ����� �� ���� ������ ��

�������� ����� �� ��� ��� �� ��� ���� ������ � ��

��������� �� �������� ��� ���� �� ����� �� ���

���� �� ��� � � �� ������� ��� ��� ����� ����� �

�������� ���� �������"; ��� �� �� ����� � ���

�� ���� ������ �� �� ���������� �� ��� ���� ��

�� ��� ��� ����� � ����� �� �� ����� �� ���

�� ������� � �� �� ��,� ��� �� �� ���� ���� ��0

���= �������� ����� ����� � �� ��#$� � �� ��

�� � ������ �� ��� �� �� �� ������� ��������� ��

����� �� ���� ��� �� �� ������������� ���� �

6����� �" �� � � ��������(A ��� ���� ����� �� ��,�

������������� �� �� ����� ���� �� �� ������

����� �� �� ��� ��� ���� �� G��� �44;�

�� � ���� ��� ���������� �������� ����� ��

��� � �� � ���� ��� ��� �� ���������� ��� ���

���� ���� ���� �� ������ ���� ��� ��������� ������

��������� ��� ��������� ����'��� �� ����� ��0

����� ���� ��� ��� �� �� �� � ��� �� ����

��������� ��� ���� ������� � �� ��� ���= ��

���� ���� � � ��������� ���� ������ ��� �������

��� ���� ��� �� ����� ��� �� ��� ���� �� � �� ��

��������� � �� �� ����� �� �� � � ���� �� �� �����

������������ �������� �� ���� ������ �� ������

����������

�������� ��� �������

���� �������

%�& �����

#�� ��= �� $�� ����� �� #�� ��� )������� ��

�� �� ��� �44('4* ��� �� ��� �� �������� �������

���� ������ �� �� ��� ��� �� $�� ���� ��

����� �� �3 �� � ��� ���� �(( ��� �� ��� �� ��

������ .�� ������ ���������� � ��������� �� �� �

���� ������� � �� ��� �� � ��������� ����� �0

������� � ���������� �� �������� � ���������� ���

��������� �� � ����� � �� ���� ������� �� ��������

��� ����� ������ �� �� ��������� ����� ���� � �� ��

�� ���� ���� �� � � ������ ���� �((

)��������= <������� ����� �� � ���� �� ����� ����� ��

�� ��� ��� �� ����� �� �� ������� � $� �� �44-

��� � � ���� ��� �� �� ��� �� �� ��� ��� ���

�� ��� ���= ����0��� �� ��� ������ 3;

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 4: Study methodology

����� ��� �� ����� ��� ��� �� ��� � � �����

����� �� ���� ����� �� � ����� ���� �� ����������

������ ��� ������� %���������� ��� � ����� ��

���� - �� �&�((

<���������= ���� ����� ����� �������� ����������

���� �� � � ������ ����� �� ���� ����� �� ���

��������� � ����� � ����� �� � ���������

%�& ��� ���

#�� ���= �� ��� ��� �� � ���� ��� �� ��� ���

������� �� � ���� ���� �� E��������C � E�����0

��C ��� ��� ���� ���� � �� ��� ��� �� � ���

��� � ��� �� ��� �� ����� � ������ �� E��������C

��� ��� ��� ��������� � � ���� ������ E�����0

��C ��� ��� �� � ������� �������� %��������� ����

�� ���� �� ����������& �� 8��� � $�� ���� ��� �� �

���� �� �� ��� ����� �� ����� ��� � � E��������C

��� �� ��� �� ����������

)��������= � �� �������� �� ��������� �� �� ��� ��

��� �� ����� ��� � ������ � ������ ���� ���� "�

�� � ��� ��� ����� �� ��� ���������� � ���

��� ��� ��� � ��� ���� %�� �� ����� �� ������ ���&

��������� �� � ����� ��� ������ ����� ����

B������ � �� �� ��� �������� �� ��� ���= B������

��� ��� ���������� � �� �������� ��� ��� ��� �

�� ��� �� � ����� ��� � �� ���� �� ������� ��

������� ���� ������ ��� �������� ���� �� �� ����0

���� �� ��� �� � ����� ��� ������ �� ��� %�

�� � ������ �������&�

���� ���� ����

�� 5���� 6���� #�� ������� ��� ��������� ��

���,������ ��� �� ��� ��� �� � ����� � �� ��

�� #�� ��� $��������� �� 8��� � $�� ����� ��

�� ���� �� �� ��� ���� ��� � � ����� ����� ��

��� �� �� ���� ��� ����0�������� �� �� � ����� ���

��� ����� ���� ���� ��� ����0�������� �� �� � �����C�

�� ��� ��� ��� ����� ��� ��� �� �� � ����� ��� ��

�� � ������ �� ���� ����� ��� ������ � ������

� �� � �����C� �� ���� 9� ������� �� � ����� �

� ����� � ������ H��FD� ������� ����� ���� ��

� ������ �� �� � ������� ��� ���� ��������� �������0

��� ��������� ������ �� ��� �� ������� ���� �� �

����� ������� ��� �� ��� ���� ��� ���� �� �� ��

����� ����� �� �� 5���� 6���� #�� �������

��� ������ �� �������� �� �� �� ��� �� ��� ��� ��

8��� � $�� ����� #��� ������������ �� � ����

���� � �� ��� ��� �������� �� �� ��������� ����

�� 5���� 6���� #�� ������� �������� %�& ��

���� ����� ������ ���������� ��� � � �� �

����� �� � ����� �� ��� ��������� �� ����� ���

��� � ��� �������I %"& � ������ �� ����� � ��� �

�� � ������ � ������� �� �������� ���� �� � �� ��

� ������ �� ����� � ����� ���� ���� ���� ��� ��

����� ��� �� �� � ����� ���� ����I %(& � ���� �� $"

���� �� ����� � ���� �� �� ����� ����� ��I ���

%*& � � �0���� �������� �� �� � �� �� ��� �����

���� ��������

%�& �����

���� �������� �� � �� � �� ��� ����� � ������� �

����� ���������� � ����� �������� � �� ��������

����� ��� �� ���� �����= %�& ����� ����� ���� ��0

���� %"& ���� ����� ������ � �� �� ���������

� �� �� ��� %(& ���� ����� ������ � �� ��� ��

���� �� �� ��������� 8��� �� ���������� � ���

�� ���� �� 5���� 6���� �� ������� ��� ���

�� �� ��� � �� ����� ����� ��� � ��� �������

��� �� ��������� �� ����� ���������� �� 5�������

�� � ����� � ����� ���� ��� �������� ����� ��

�� ����� ���� �� �� ������ �� ���� �� ���������

�� ����� �� � ������� �� �� ������ $ ����� ����� ��

�������� ��� ��� ����� �������� ���� � ������� ���

���� ����� �� � ��� �� � �� � ���� � � ����� ��

���� ����� � ���������

%�& ��� ���

��� �� �������� �� � �������� �� ��� ������� �

����� ������ �� � � ��� �� ���� ������ .� �� � ��

��� �� � � �� 5���� 6���� ���� �� �� �

������� ��� ���� ����� ���� �� ��� ��� ��

5���� 6���� #�� �������� 5�����0�� �������� �����

�� ����� �� �� ������� ��� �� ���� �� �������� *

����� �� �������� ������� ��� ���� ��� ��� ����

��� ������ � �� ���� ��� � ��� ��� �� ���� �� ���

� �� ������� �� � ��� � ������� �������� � �� ���

� �� �������� ��� ���� �� � ����� � ���� �

���� ��� ��� �� �������� ��� �� � ����� �������� �

�������� �� � �� �� 5���� 6���� �� �������� ���

�� ���� �� ����� �� �� � ����� ��� %5��� �&�

������ ����� ������

$� �� ���� ��� ��� �� �� � �� �� ��� �� �

�������� � ����� �� ���� ��� �� ����� �� �����0

33 �& '���� � ���

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 5: Study methodology

����� ����� ��� ����� �� � ������� �� ���� �� ��

�� ��� ���� ���� $�� ���� �� �� $�� ����� ��

��� ��� ���� ����� �������� �� ���� ���� ���

� ������� � ���� �� )������ �44" � �� J���� ��

�� 8��� � $�� ���� ��� �� �� ��� �� ��� �

�� �� J���� �� �� �������� �� �44:� D���0

��������� ���� ����� ��� ������ ��� �� ������

����� � ������� �������� � �����(- ��� ���� �� ���

�������� D������� ��� �� �������� �� � ��������

�� ���� ������ ����� �� ��� ���� ����� ��� ���

� ��� �� �������� � ����� ��� ��� ���� �� ���

�������� ������� ��� �� �������� �� � ����

�������� � ������ ����� � ������� ��� ����0

���� ��� ��� �� � ��������� ����� ��� � �����

�� ��� ���= ����0��� �� ��� ������ 34

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� � 9 ����� � ��� � ����� �� �� 5���� 6���� �� ��������

����� �����

Page 6: Study methodology

��� � �� ����� ������� $�� ��� �� � �� �� ����

���� ��� �� ��� ����� ��� ������ ����� � �� ��

���� ���� $�� ���� ��� ��� �� �������� �� � ���� ��

�� ������������ �� ����� ��� ����� �� � �����

��� �� ����� ����� �� ����������

���� ����������

�� ������ � ����� �� ��������� ��� �� �����

���������� � ��� �� ����� �� ��� ��� �� 5����

6���� �� ������� ��� ����� �� ������ �44( ���

�44- ����� � 5������� 9 � �������� #����� ���0

����� �� � �� �� � ����� �� � ����� �� ������0

��� ��� ��������� �� ��� � �� �� ��� ��� �� ���

�44:� .�� ������� �������� ���� ����� ���� ��

���� ����� ��� ��� �������� ��� �� ������ $

������ ������� ��� ��� �� ������� ��� ����

����� ��� ��� � ���0 ��� ����� ��� �� ��� ��� ��

���� �������� )������ ���� ����� �������� ��� ��

� ������ ���� �� ������ ����������� �� ����� ��

� ������ �� ���� �� ������ �� ���� �� �� � ��

������ �� �� ������0�� ����� ����� ��� ������� ��

����0�� ��� ��

#��(: ��� ���� �� ��� �������� $�� ����� ���

� �� �� ����� ����� ��� �� � ��� �� ��� ���

��� � �� ���� ������ 7� ������ �������� �� �����

�� ���� �� �� ��� � ��������� �� ���� ���� ����� ��

����� �� ����� ������ � �������� ��� �� �����

����� ��� ��������� ����� ��� �� ����� ��

����������� ��� �� � ������� ��� ���� � �������

���������� ��������� ������ �� ��� �� ����� ��������

������� ��� ����� �� �� ���� ���� �����

��������

��� ��� ����� �� �� ���� ��� ��� �� �������� �� �

��� ����� ��� ����� ��� ��������� � ����� ����

������� ����� ��� ��� ����� ����� �� � ��� ���� ��

����� ������ �� ����� ����� %������ �� ��� �������

�����& ��� ��������� ����� �� � ��������� �� ��

� ����� ��� �� ���� ���� ����� #����� �� �� � �0

�� ���� �� ����������� ��� ��� �� �� � �������

��� ���� ��� ���������� ��������� ����� ��������

����� ��� ������ �� ��� � ��� ������� ���� ��

��� ����� � ������ �� � ������� �� ���� ��� ��� ��

��������� ���� � ��� ���� �� � ��������� ���� ���

�� ����� �� ������� �� �������� �� ��� ����� �� ����

�������� �� �� �� ���� �� ���� ����������� ���

�� ���� � ������ �� �������� �� ����� ����� �� ���

��� ���� �� ��0����� 5���� C� ���� �� ��� ���� �

������ �� �������� ������������ �� �� ����� ����

������ ���� ��� ��� �� � ��� �����

�������

�� ������� �� ���� �� ��� ���

���� �� �������� ��� �������� �� �(* �� �� �*" �����

���� ����� � �� $�� ����� �� ��� ��� ���

������ B� �44( ��� G���� �44-� �� 4(+� ���� ��0

��� ��� � ������ � ��� �� ����� � ��� ����������� .�

�� �� ����� ������ :(+ �� � ������� �� � �� ����������

����� ��� ���� ��� �� ��� �� �������� �� �"3 ��

�� �� ����� ������ $�� �� ���� �������� �� � ������ �

�� ������ �� �� ����� ����� �� �������� �� ��

���� ��� �A- �������� ��� �� ��� �� ��������

5�� �������� � ������ �� ���� ����� � �������� ��

�� ����� �� ��� ��� ���� �������� � �� 3-�"+ ��

�������� �������� �� �� ������� � G���� �44-�

�� � ������ ������ ��� �� ����� � �� ���������

�� � �� �� � �� �������� ����� ������ � �� �

�� ����� �� �� ��� �� � �� �44- ��� �� ����

����� �� ��� �� � � ������� ��� � ������ � ����

������ �� ��" ��������� #���� �� ���� �������� �� �

���������� �������� ������� �� ���� ����� � �0

����� ��� ��������� � ���������� ��� ��� �����

��� �� ���� � �� �������� �� �� �� ���� ��� ��

����� ���� ������ �������� �� �A* �������� % ���� �&�

�� ���� ���� ��� �� �� �������� �� �� ����� ������ �

��� �� �� ����� �� �� ��� ��� 4�( �� � ����� ��

��� 4�4 �� � �� �� ����� �� �������� �� �� ���

%�K A�:;� �K A�-&� �� ��� ����� ��� ���� �� ��� ��

�� ���� ����� �� � ���� %���� ��� ���- �� �&� ��

�� � �� �4 ���0 ������� � %���� ��� �A�4 �� �&� ��

�������� ����� �� � ����� %���� ��� :�* �� �&�

��0�� �� %::�*+& �� �� ����� ������ �� � �� ����� ��

���������� � ������ ����� � ��� ��� ��� �� �� ���0

�� ������� %�K A��(&�

$ �������� � ������� ��� �� ��� ���� �����

�� ��� ���� ������ .� �� ����� ���� ������� :-

%:"�-+& �������� ��� �� ��������� �� ���� -( %3��-+&

�������� ��� �� ��� �� �������� �� �������� -�

��� �� �������� �� � ������� � �� �� ��������

��������

�����

$�� ���� �� ��� �� �� ��� �������� �� �� �� ��

��� � �� � ����� � ���������0����� ���� � ��

4A �& '���� � ���

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 7: Study methodology

����� � ����� �� ��� �� ��� ��� � ����� ��

���������� #�� ��� �� ���� ������ �������� �� ��

#�� ��� $��������� �� $�� ���� ��� �� $�� �����

9����� �� #� ��������� J���(; ���� �' ����� �

������ ������ �� �� ���� ������ �� 4(+� �����

����� �� ����� ��� ��� �� ���� �� #�� ���

������ �(" �� $�� ����� �� #�� ��� )������ ��

������ � ,������� ������ �� ��� ��� �� �� ��,�

��� ��� �� ���� ������� �� $�� ����� 9����� ��

#� ��������� J��� 8� �� �� ������� �� � �����

���� ���� �������� � ����� ���� � ���� ����� �� ����

���� ������ �� ����� ��� ���� ���� ��������� .����

� �� ������� ���� ��������� �� �� ��� ���

��� �� �������� ��� ��������� ������� �� ��

�������� ��������(3 � �� ����� �� ���� ������

����� �� ���� ��� � �� ������ B� ���� � �� �����

�� ���� �� �� ������ � ��� ��� �� ������� ���

�� ��� ���� �� �� �� ���� ��������� �� �� �

������ ������ �� �� � ������ ���������� #����� ��

�������� ��� ������ �� �� � ������� ������� �� ���0

����� ���� ������ �� � ������� �� �� �������� ��

����� ����� � � �� � ���� �� � �� ����� ��� �����

����� � � � �������� � � �� � ����� � �� ���� 0

������ �� ���� �� #�� ��� ������ (4 �� �� ���

���� ����� �� �� J# ����� �� ������� �� � �� ��

��������� ����� ��� �� ���,�� � �� �����0

�������� � ����� ����� ���� �� ��� �� � ���

��� �� �� �� J# �� �� ���������� � �� ��� �� ��

�� ��� �� ���� �� ��� ����� � ������� �� ���

����� �� �� ���� �� ������ �� ��������� ����� � ����

� �� ��� �� 1 ����� � ���������0����� ��� ���� ��

�� ��� ������� �� ���� ������� �� � ����� ��

�������� �����

$������ �� ����� �� ���� ������ ��� ��������

����� � � �� �� �� ��������� �� �� ����� ������� ��

����������� ���� ����� ��� � ��������� �� � �����

����� �� ������ $������ �� ��������� �� �������0

��� ��� ������ ���������� �� ���� �� �� � �� ���

���� ����� ������ � �������� � �� �� ��� ��������0

��� �������� �� �� ���������� �������� ��� � ��

����� 5� �������� ��� ������� ��� �������� �� ��

���� �� ����� ���� ��� ������� �� �� ��� � �� ��

���� �� �� ������� �� �� �������0� ���� ����� �0

���� ��������� �� ���� �� �������� �� � ������

���� ��������� �� ��� �� ����� ��� �� ������0

�����C� ���������� � ��� ��������� �� ���� �� ��

4(+ �� ������

$� ���� �� �� � ����� �� ������� E ��C ������ �� �

�� �� ��������� �� ���������������� � ��������� ��

���� ����� �� � � �� �� ��� �� ��� ����

����� �� ��� � ���� �� ���� �� )���C� ��� ����

����� �� ��������� � � �� ������� ��� �� � �� �

���� � ��� ��� �� ���������������� �� �� ��0

� ���� ����� ������ � �������� ��������� ������ �

�� � ���� ���� �� ���� �� �� � ����������

�� �� � ������� �� ���� ����� � ����� ���� ���� �

�� ��� ���= ����0��� �� ��� ������ 4�

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

�� � � ��� ��� ����� �� ��������� ��� ���0 ���������

9 ��� ��� �� 9 ��� ��� D����������� �� ��� B��� ��� %�� ������& ���������� ����� %�� �& ����� �� �����

D���� %K �(�& %K �(;& L4-+ ��M �� ���������

D� ����� ��� ����� : A *�*+ ���- (L;�*� �-�:M %-A&

D��0 ��������� �4 �*�-+ �(�4+ �A�4 ��L4�A� �"�3M %-;�4&

���������� ��" 3-�-+ 3��3+ 4�� ;"L3�"� �A�AM %:*�(&

<��������� 3 :��+ -�3+ :�* (L(�-� 4�(M %(;�-&

5���� ������ �A* ;4�*+ ;-�4+ 4�( :4L3�*� �A�"M %::�*&

��� �������� ������� �(� �AA+ 4-�:+ 4�* 3(L3�:� �A��M %:(�*&

��� �������� ����� �(; �AA+ 4�- 3:L3�;� �A�"M %:"�;&

��� ����� �� �� �������� (( "*��+ 4�4 �;L3�*� ���*M %-��-&

����� �����

Page 8: Study methodology

���� ��� ����� �������� � ��� �� �� ���

��������� �� �� ��� ����� ���� ���� ����������

���������� ��� �� ����������� ������ ����� ��

���� ��� �� $�� ����� J������ �� ����� �� ����

���������������� �� � ��� ���� �� ������ � ������

����� ��� ��� ��� ��� ����� ����� � � ����������

�� ���� ������

���� ���

��� ��� ��� � ������� �������� �� � ������

���� J���� � ����� �� ��� ��� �� � ���������

��������� �� ��,����� �� �������� � ����� �

�����0�������� ��� ���� ������� ��������� � ��� ��

��������� � � ��� �� �� �� � ��������� ������� ��

��� ��� �� �� �� �����*A 5������� ��� ����� �� ��

�� ���� ��� �� � ������� �� �� �� ��� ��� ���0

���� �� ���� ��� ��� �� � ������ ����� �� ������ �

��� ����� �� ���� �� �� ���� �� �� ���� �� �

��� �� �� ���� ���� ��� ������ B������ ��

�� � � �� �� ���� �� ��� ����� ���� ���� �� ���

�������� ����� �� ���������� �� ���� ������

J��� ������ ������� � ������� ��� �� �����

� ���� � �� �� � �������� ��� ���������� B��

���� �������� ����� �� ���� �� � ����� ��� �

������ �� ������ ���� #��� ��� ���� �������� ���

���� #��� �� ���� ��� ���� ����� � ��� ����

��� � ��� ��� ������ $� � ��� ���������� �� ����

���� �������� � ������� � ��� �� ����� ��� �� �

��� � ������ ��� � ��� �� ��� ��������� �� ��� ��

�� �� ���� �� ��� � ������ ���� �� � ������ ��

�� ��� ����� ��� �� �� ��� ��� ��� �� ���

� ������� �������� ����������� ��� ���� ���� ��

�� ��� ��� �� � �������� � �� ���� � ��� ���

����� �� ��� � �� ������� �� �� �������

6�� ���� ��� ���� ��������� � �� �� ����� ����

���� ������ � ����� ��� ��� ��� ������ ���

����� �� ��� ������� ������� ��� �� ���������

�� ����� �� ��� � �� �� ������ 6����� � ���� ��

������� � �� ��� ���� ��� ����������� ������� ��

��������� �� ����� �� ��� � �� �� ��������

��� ��� ���� �� �� ��� ��� ��- �� � ��� ��� � ��

��� ������ �����

�� 5���� 6���� #�� ������� � ������ � ��

��� �� �������� ��� �� ������ �� �������� � ��

�������� � �� ���� ��������� $� �����0����� �����

��� ���� �� ��� ��� ��������� ��� ���������� �����

�� �� ���� �������� ��� �� ��� ���� �������� �� ��

����� ���������� �� ���� ��� �� � �� ��������

� �� ��� �� ��������� 6�� �� �������� ���� ��� ��

����� ���� ���� ���� � ������� ����������� ���

���������� ����� �� ���� ���� �� �� ��������

���� �������� �� ����������

�� ��������� ���� � ������ ����� ��� ���

�������� �� � � ������ ��� ����� ���������� ��

������ ����������� �� �� �� �� �����*� 6����� �

������ �� ���� �� ��,� � �� ����� �� �������

�� � ������ �� 9� �� �� ��� ��� �� $�� ����0

���� ��� ��� �������� ���� �� �� �� �� *AAA

������ �� � �� �� ��� ��� �� �������� ��� ��� ��

$�� ���� � � ����� ����� ��������� ��� �� ��� ��

�� ��� �� ��� ��� ����� ��� � �������� ��� 0

���� ����� ���� ���� � ��������� �� ��� �� ���

�� � �������� � �� �� ��,� � �� �������� ����� �

���������� � �� ��� 5������� ��� � ����� ��� ��

��� ��� �� � �������� �� �� ���������� �� ��

��� ����� ��� � ��� �������� � ���� �� ��� �����

�� � ����� 8��� � $�� ����� ��������� ���� � ��

��� ��� ������� ���������

� �� �� ����� �� ��� �������� �� ��� �� � �

���� �� � ��� �������� � ����0�0���� ��� ���� ���

� ��������� 6����� � �� ���� ����� �������� �� ��

��� ������� �� ������ �� ���� ���� �������� ���

�� � ������ � � ���������� � �������� �� ��

����� �� ���C� ��� ���� ��� �� � ������ � �����

��� �� ��� ��� �� � � ���� � ������� ��

��������*" D��� ������� �� � � �������� �� ��

�� ������C� ��������� �� ��� �� ������� � ������

�� ��� ����� ����� � ��� �� ��� ��� � ����� ��

�� ������� � ������ �� ����� �� ��� ���� ���� �� �

����0�0���� ��� ����� �� ��� �� �� � ������� � ��

�������� � �� ����� �� � �� ����� � �� �� ����0

��� ���� �� ���� �� � �� � � �� ���� �������

��� ��� ��� �� � ���������� �� �� ����� �� ���� ��

�� � ����� � �� ���� ���� ��� ���� ������� �����0

���� ��� � ���� �� ��� �� �� �� �������� �� �����

���� � ��� ��� ������ 6����� � � �� ���� ��������

�� �� �������� �� �� ����� �� ��� �� ��� ���

�� ���� �� ��� ���� ���� ��� ����� �� ���

�� � ��������� �� �� � ����� �� ��� � ���� ����

�� ��� ���� �� �� ���� ������� ��� ������

$� ���� �� �� � � �� �� ���� �� ���� �����

� ������ � �� ���� �� � �� �� ��� �� � � �� ��

� ����� �� ���� ����� � �� �� ����� �� � �� ���

����� 8� ����� �� �� ��,� � �� ����� ��� �� �

�� ����� ��� ���������� ��������� 6����� � ��

��� ����� ��� �� �� � ��������� � �� �����

��� � ����� �� �� ��� ��� �������� �� � ���������

4" �& '���� � ���

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 9: Study methodology

��������

�� �������� ������� �� ����'��� �� ����� ���

�������� � ��������� ��� �������������� ���

����������� ��� ��� ��� ����� �� ����� �� �������

������� � �� � ������ �� �� ��� �� ��*(�** ���

��� ��� � ������� �������� �� � ������ ���� ��

�� ����������� �� ������� �� �� �������� ��� ���

� ������ � ����� ��� �� ������ �� ����� ��� ����

���� �� � ������� B� ���� � ������� �� ��� ����

��� �� � ������� ���� � �� ����� � ��� ���

������ �� ��� �� �� ���� � ������ �� � ��- �� �

����� � �� ��� ��� ����� �� ��� �� � ���������

�� ������� ��������� ������� � ������ �� ���

�� �������� �� �������� �� �� ��� ��� �� ���

����� �� ��������

�� ���� �� �� ��� ��� �� ��� ������ � ��

��� �� ������� �� �� � ����� ���� ���� ��

���������� ��������� � � � � �� �� ���� �� ������0

���� ��� � � �������� �� ���������� �������� �� :�;

�� �AAA*- ��� �� �� ����� �� ��� �� �44- �� ;�*F

�AAA�*: �� ��� �� �� ��� �� ������� �� � ����� ��

�� ����� � �� �� � ���� �� ������� �� ����

����� ����� �� �� � ���� � ���� ������������ �� ���

����� ����� �� ������ ���� � ���� ��� �� ��

������ �� ���� � ������ �� �� ������� �������

�� ������ � �� �� ������� �� �� � �� �

��������� ��� �� ����� ��� ������� ���� ��

�� ����� �� � ������� �� ���������� ������ ���

�� �� �� ���� ������ �� �� ���

�� ��� ��� �� ������ ��� ���� ��� ���� �

����� � �� � �������� �� �� ���� �� �� ������� ��

�� ���� ������� ���� ��� �� ��� �� �������

���� �"; 1 ������� ���� ������� ��� ��� ��

������� ��� ����� ��� � ��� ���� �� �������

������������ �� ������� � ������ ���� ���� 6��0

��� � �� ����� ���� �� ���� �� �� �������� �����0

����� ������ �������� �� ������������ ������

���������� ������� �� ��� �� ���� �� ����

�������� �� �� � �� �� �������� ��� �������

�� ��� �� �� �� ������� ��� � �� ���� ��������

�� �,����� � �� ������� � ��� ��� ������ ���

���������� ���� �������� �� ����� � � � ���

���������� ��� ���� � ���� �� ���� ����� ?��� ��0

���� �������� �������� �� ��� ��� ������ ��

�� ������ ������ ����� ����� � ��� ��� �� ����

�� ��� �� �����"4

.� ���� ����� �� ������ ���� ����� ��� ���� �

�� � ���� � ������ ��� �� �� �� ����� ����*;

��� �������� ��� ������*3 �� �������� �� �� �� ��� ��

��� ���� � ���������� �������� ��� � �� �

����� ,������� ��������� ��� ����� �� ����� ���

� ��� �� � ���� ��� ��� ���� �������� �� � �0

������ ��������� ���� �� ��� ��� ������ ��� �����

����� ���� ��� ���� $������ �� ��� ������

������ � �������� �������� ���� ��� �������������0

��� �� ����� � ��� ��� �� ��������� �� � �� � ����

� ������ �� ����� �� �� ��� ���� �� �� �� ���0

������ ���� ����� �� ��� ��� ���� ����� ��

��,� ���������� �� �� ������ �� ��� ��� ����

� �� �� ��������� �� �� ��� � ���� � ��

� ��� �� ��� ������ ������� �� �� ���� �� ���� ����

6�� ���� ��� ���� ���������� �� ����� ���� �� ����

�� ��� ���� ���� � �������� � � ��� � ������

��� �� �� ���� ���� � ����� � � �������� � �� ��

������ �� �������� ��� ��� ��� ���� ����� ��

�����0�������� ��� ��� �������� ��������� � ��

����� ���� ���� �������� �� �� ��������

J��� ���� ���� ��� ���� ���� �� ���� �����

��� �� �� �������� ������ ����������� �� ��

��� ���� )����� ���� �� �������� ����������

������ �� �������� ��� ������ ������ ���������*

8� ����� ���� 6�����C� ���� �� �� ���������� ��

����� �(A �� ��� �� ���� � ��������� �����

��� �� ����������� 8� ����� ���� � ������ ��

�� ������� �� ����������� �� ���� � ��� ������

� ���� �� �� ���������� �� �� ������ ����� �� ��

��� ����

����������������

��� �� � ��� ����� �� �� �� � � 9����� 6����

����� �� ��� )��������� ������� ������ ����

� �� �� D������ 6���� ��� B������ ����� ��

������� ��� � ������� � �� �� $��� 5��������

�� ����� �� ��� ���������� )������� ��� �� ��

#�� ��� $��������� �� D�� #��� 8����� ��

���� � ���� � ����������� �� ��� ������� �� 1���

��������� � �� �� �� #�� ��� $��������� ��

$�� ����� #�� ? ���� � �� �� �� #�� ���

$��������� �� 8��� � $�� ����� ) $��� 6����

� �� ����� � ������ ����� ��� ���� �� ��������� ���

�� ���� ��� ��� �� �������� ��� �� ����� �� ���0

����� 8� ����� ���� � ���� $������� 9 ������ �

�� �� 1��� ��� 9��� 1� ��� ) )����� <�������

9� ��� 5���� ���� B�� 1���� � ��� )������� #� �����

���������� %�� �� ����� ) G��� 6����& �� ���

��������� ��� ������� ��� ��� ����� �� ���� ����

�������� ����� �� ����� �� �� $�� �����

9����� �� #� ��������� J�� ����� �� �� ��� ������

�� ��� ���= ����0��� �� ��� ������ 4(

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 10: Study methodology

� �� 5�������� B� ��� 5�������� �� ����� �� ���

�� D������ ��� � �� )������ ��� �� %������0

����� )��� ��� �� 6���� ��� 5���� #� �����&�

����������

� ������ <� B��� 68� )�������� � �� �� �� ��

��� ���� ��� � (������ �433I ��=*"-'*"3�

" !����� 6� ?����� ������ �� �� ��� ��� %������&� )����

� �� �� (������ �433I �%#�����&= #;:'#;3�

( 8� <��� � �� �� 5� ����� B� B��� ��� ������ ���

�� ��� ���� �����"����� *�� � � �� �� �� (������

�44"I ��=�A""'�A"(�

* $�� � B� ��� �� $� ?������ ��� �� ��� ���� !��"��

�� �� �� ������� ����� ���� �44;I �%#����� �&= 34'4A�

- #������ D�� )���� <G�� ��������� 5� 6��� 7$� !����� 6H�

5 ����� J� $ ��� �� ��� ��� ����� �������� ��� /0

������ ���� ����� ������� �� / �� ������� ���������

���� ��� �� )���� � ���� +��� �� �44;I ��=:(*':*��

: ������� )<� �� ������� �� �� ��� ���= ��

������������ �� � ���� �� ��� � ��� ���� �� � ���

������� ��� �� )���� � *�� ��� +��� �� ��""����� �43:I

�=(3('(33�

; @������ 8� .� �� ������� �� �� ��� ���= ������� ��

����� ��� ����� �� ���� ��� �� )���� � *�� ��� +��� ��

��""����� �43:I ��=(:4'(;:�

3 $������ 6.� 6���� � 1� 8���� �� G� <��� � �� �8� ��

��� ���= � ��� �� �� ���� ��� ���� ��� �� )���� �

*�� ��� +��� �� �44"I ��= �A*'�A3�

4 $������ 6.� 8���� �� G� <��� � �� �8� 6���� � 1� ��

��� ���= ������� ���� ��� ���'���������� �� �������

�� ��� +��� �� �44-I ��=�:4'�;"�

�A $������ 6.� 6���� � 1� 8���� �� G� �� ��� ����

��������� ��� ������'������������ ����� �� ������

� ����� )���� � *�� ��� +��� �� �44:I ��=;:*';::�

�� $������ 6.� �� ��� ���'�� #������ ����������

���� �� � �,��'��� ��� ��� � ���� �������� !��"��

�� �� �� ������� ����� ���� �44;I �%#����� �&= 4:'43�

�" $������ 6.� 6���� � 1� 8���� �� G� �� ��� ���'

� �������� �� �� � �� �� ���� �����'��� ��� ����� ���

��������� !��"�� �� �� �� ������� ����� ���� �44;I

�%#����� �&= �A�'�A"�

�( 6���� �� #� #������ D�� 1����� ##� 5 ����� J� �� ��

��� ��� ������ � � ���� ���� ���������N

(���"�� ��� �� �44;I ��= �;4'�3(�

�* 9��� ?� B���� B� !������� B� �� ��� ��� �� D� �� �

����� %���&'����� �� ������� �� ��� +��� �� �44:I

��=*3:'*4A�

�- 6����� @� 1� ������ @� @�������� ?� 9���� �� ������� ��

6���� ��� �� ��� ��� �� ��� !��"�� �� �� �� �������

����� ���� �44;I �%#����� �&= 44'�AA�

�: !������� B� �� ���� B� 6��� � �������� �� �� ��� ��� ��

� ����� � ��� ,�� �� �����"��� �43;I �=*;4'*3A�

�; #�,����� .6� 7�������� #� $������� 5� 6� �� ?$�

2��� �� 1� �� ��� ���'���� ����� �� ����� �� � ��������

�� D� ��� ,�� �� �����"��� �44;I ��= "-3'":��

�3 9 ��� 1� �� ����������� ��� ���� ������� ��� ������ ��

�� ��� ��� �� $������� !��"�� �� �� �� �������

����� ���� �44;I �%#����� �&= ��'�(�

�4 1���� <B� B���� DG� $���� B� $���� ����� �� ��

���� ����� �� �� ��� ���� ��� �� )���� � *�� ���

+��� �� �44AI ��=�":'�(��

"A ������� B� 1 ����� G� 6��� @� #��� ?� �� ��� ���= �

�� �� �� D� � $�� ���� ������� )���� � *����

��� � ��� �������� �433I ��=��;'�"*�

"� $�0B���� B� 9������� B� #������ )� �� ��� ���= �

������� ��� ������ � �� ������ ������������ �� �� ���

��� �� )���� � � ������ �� ���� �43:I ���=;:�';:-�

"" ���� $� @� ������ 8� 7������ B<� B������� ���

��� ����� �� �� ��� ���� ��� ��� � (������ �434I �= ("A'

("(�

"( D��� � H� #����� B� 6������� B� �� ��� ���0��������

������ ��� ���������������� ������� ����� ,�� ��

�����"��� �43*I �=*;-'*3:�

"* ?����� � �� <��� � #� 8���� �� G� �� ��� ���� ���� ����

� @���� ��� ��06���� �= ��� ��� �� �� ������� ������

�����"����� *�� � � �� �� �� (������ �44AI ��="-3'"::�

"- B� �� B� D���� #� B��� 6� �� #�� ���0���� �������

��� �� (( ��������� ��� �� )���� � *�� ��� +��� �� �43:I

��%#����� �&= ;(';:�

": @� $� #�������� G19� $ ��� �� �� ��� �� ���� �� ��

��� ��� �� "( �� ��� ��� �� )���� � *�� ��� +��� ��

�43:I ��%#����� �&= ;;'3(�

"; #���� <� #���� B� 5������� ��� ������ ������� $ ��� ��

��� ������������� � ��� ��� %������&� ��� �� )���� �

!" ��� ��� �434I ���= "('(A�

"3 @��� B� 1�� � ����� 1� 1���� ���� ��� 5�����������

��= -��������� � +��� � !" ��� ���� <��� �= @��� B�

1�� � ����� 1� .��� �= .��� � J���� �� 9 ���� �44(�

"4 2���� @H� 9���� $<� $������ �� ����0��� ��F�����

�������� ������� +��� � !" ��� ��� �44:I ��="-('";A�

(A 6����� J� .� �� ������� �� �� �� ��� ���� ,�� ��

�����"��� �43-I �= (:3'(;��

(� ������ <� $���� B� �� ����������� ��� ������ �����

������������ �� �� ��� ���� )���� � �� �� (������ �433I

�%#�����&= #�;'#�4�

(" @������ �$� #����� B2� B��D������ D� $���� BG�

#����� �G� 9� � $@� �� ��& <���������� �� �� ��� ���= �

���������0����� ���� � ��� ��� �� �44(I ��= **-'*-A�

(( 2���� � 6� 1��� �� <������ )� �� � �������� ���

��������� �� �� ��� ��� �� $�� ����� !��"�� �� �� ��

������� ����� ���� �44;I �%#����� �&= 3'�A�

(* 8� <��� � �� �� �� ��� ��� �� #������

D�� �����������0��������0������������� ���

���� ��� �� ���� �� �� �44AI ����=�':A�

(- 2���� � 6� �� ��� ��� �� $�� ����� ����� �� B��� ��

9����� 6����� J���� �� �� 8��� � $�� ����� 8��� �

$�� ����� �44:�

(: #�� �� �� ����� ���� �� ��� ���.���� ������� #����� /= #��

�� �� ����� �44;�

(; ?��� ��� B� 8������� @� <���� <� ���� @� 2������� 6�

B����� �� �� ��& <�������� �� � ������� �� ��������� ����

��� ��� � � ����� �� ���� �444I ��= "�'";�

(3 ?���� )?� �� ��������� �� �� ��� ���'������� �

(���"�� ��� �� �44-I ��= ;3'3A�

(4 @������ �$� �� ���� �� ��� ��� ���� � �� ���

�������� �434I ��=**$�

*A 6�������� �6� 1� ��� G<� !" ��� ��� *�� � �� �� ����

1����= 2��� O 1 ���� �43;�

4* �& '���� � ���

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����

Page 11: Study methodology

*� 9�� ��� 1� D����� @1� 8���� 2� #���� 5� ����� ������

��� �� �� �� ���� �� �� �� �� 8��� � $�� ���� �� �� �43A��

,� � �� *�� ��� )���� �44(I ���� �"(4'�"*(�

*" ���� G� �������� B� 6���� B<� B� � <)� ?����� �����

���� ���������� �� )���� � *�� ��� +��� �� �4;3I ��=�A'�3�

*( 2���� @H� 1�� 6� B���� ��� �������� ��� ������ � �����

����0 ��� �� ������ ������� +��� � !" ��� ��� �44�I

�=(:�'(;A�

** ��������� )� 2������ 2� ����� ���� �� �� � ��� ����

�� ������� ������� �� ����� ��� ��� ���= ������� ���

������� ������ ���� �� ����� ���� �� �� *�� � � �44"I

��=�;:;'�;;:�

*- 8������� )� 6���� @� B������ 9� #���� 5� 9 ��������

�� ���������� �������� �� 8��� � $�� ����= � �������

���� *�� ��� )���� � ������ � �44"I ���=4*'�A"�

*: ?�� 7� )���� 7� ��� ��� ����� � ��� ������ ������ �

* �. ���/ (� � ��� ������ 011#� 9� �= 6���� )��� ���

�� 8��� � $�� ����� �44*�

*; 5�� #� 2���� � 6� )� )� 2���� � #� 9�� �� �� � ������

����� �� ����� �� ��� ��� ���0������� ��������� �����

�� �������� �� �� �� ��� �� ��� ���� )���� � �� ��

(������ �444I ���**A'**-

*3 2���� � 6� 5�� #� )� )� 2���� � #� 5������� ��� ������ ��

�� ��� ���= ��� �� �� �������� �� ����� ��� �� ���

���� �� � �� �� �������� �� ������� �� ��N ��� �� )���� �

*�� ��� +��� �� �444I ��=""3'"(*�

�� ��� ���= ����0��� �� ��� ������ 4-

� 1�������� #������ 2�� ���� ��� � �� ��� ���� !" ��� ��� #$$$� ��� 3-'4-

����� �����