sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” binary pump and quaternary gradient...

17
00 00’s 2000 2000 ZQ 1959 1959 GPC 60 60’s 70 70’s 1972 1972 M6000 80 80’s 1980 1980-84 84 Data advances 90 90’s 1996 1996 Alliance 2004 2004

Upload: phamngoc

Post on 03-Jul-2019

213 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �

����������������

��� ���

��������������������

������ � ��� ������� � ��� �

������������ � ��� ������

0000’’ss

20002000ZQ

19591959GPC

6060’’ss 7070’’ss

19721972M6000

8080’’ss

19801980--8484Data

advances

9090’’ss

19961996Alliance

20042004

Page 2: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������

��������������������������������

� � ����������������������� ������ ��������!���

�"�#������������

������$� ����%�# �$������ �

�& ������#%#'������� ��%�(���)��*�(���) ���� ����������

�+ �����,������ ��� ������������ ��������$ ���#� ��% ���#%������������%���

�+��������� ��%

��� �%*�����)$�� �����$�

������������ � ��� �����-

������������������������������������������

.������+ � �� �����"����/.+"0

Page 3: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����1

��������������� ������������������ ���

��������������������� �������� ��������������������� �������� �� ��������������������

������������������

������������ � ��� �����2

��������������!���"��������������!���"

��������������� ������������������ ���

PrimaryPrimary

AccumulatorAccumulator

AB C D

To Sample To Sample ManagerManager

EluentsEluents

InIn--Line Line FilterFilter

DegasserDegasser GPVGPV

Inlet Inlet C/VC/V

Inlet Inlet C/VC/V

Pressure Pressure TransducerTransducer

PrimaryPrimary

Pressure Pressure TransducerTransducer

SystemSystem

Page 4: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������

��������������!�����������������!���

��#���!$��#���!$

� � ������������� � +���

������������ � ��� �����3

���������!$����������������!$�������

Page 5: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����4

����%��%����%��!��������%��%����%��!����

Traditional Binary System

Traditional Quaternary System

Alliance System5 ng of the five peptide test mixture on column can be

easily distinguished from the baseline in the

chromatograms generated on a Waters Alliance HPLC.

At 5 ng, the peak is lost in the baseline ripple present in the chromatograms generated on

a competitive “traditional design” Binary pump and

Quaternary gradient system.

������������ � ��� �����5�

� ���!$���������!���� ���!$���������!���

5���!���6����������1�!��-������#� ����

Page 6: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����55

���&���'$�������&���'$����

� �241������7������� ������/�0�������������

��������� ���241

� +$ ���#+68������9�#'�:� ,������� �

�+���9��,������5�-�

A A BB CC

������������ � ��� �����5�

(�)�����(�)�����

Page 7: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����5�

��������'$�������������'$�����

*���++,-�

*���--..

*���++,-,

�����

��!/��

0�#�

0#�

�#0

����!�!�

&���������

1��!��

�#�

#�

�#

�� �!�!�

����������

1��!��

�#.

�+

�+�

���$��

$���1�

0�#��1�

0#��1�

�#0�1�

����!�!�

��!$�����2��

31�4

��������

31�4

� ��

� �

������������ � ��� �����5-

����!�������!�������!�������!���

� ;��� $�8��) <�� ���� ��,�$���

�,��������������������������� ��������� ���������% ���

��%��%��<�����#��������– $����������,����,����

Page 8: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �

5��&����������5��&����������

=������ ��6��/����=������ ��6��/����#%� � ���%�#%� � ���%�0� '����0� '����

�� ��

������������ � ��� �����52

�����������$������������������$�������

� � ,����%�����$$�#����������������� ��## ����$ �

��>� �� � $�������?����#% ��� ���%�#�� ,���

� 8�� ����#���*�@+6������� �����

� <���,�$$���% ����,�����*��@���A��������

# �����*��%���%�� �������% ����,�$�������������

��-1���# ��$���

� 8�� ��� ����$ ����%��%�?������� ������$�#��� ��

�����*� �@+6������ ��

� B �� ��C� �� $$D , ����*����#�, ����� %������

� +�� ��������� �� �,�#���� %�#%� ����#� ���%�

����������$ ����%������

�E$��%�������������*����#���� ��� ��%� ����%���

%���5�>� ����#�� ����������� ���%�,���,�#������ �%

Page 9: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����5�

������������������

� F������� $��%����� $�� �������#%���*�, �����������

# ������� ������#������������������ ���������

� � ���� ���������$�#����������%��� ������ ��%���� ���

A������ �� �, ������

� <�$�%��� ����, ���� $�� �������� $�������������� ��%�

��� ��

�(�%��� ����� ������!���,��������,$ ���

� "�#����$������ �� $������ �������% ��%����-1���# ��$���� ����

� ������#�����*�����������%�� ����

������������ � ��� �����53

A12,000

BB7,0007,000

Same Column

Instrument A --less Band spreading --

(70µµµµL)MORE PLATES (12,000)

Instrument B --more Band spreading --

(130µµµµL)LESS PLATES (7,000)

���%��!����6���������$�����������%��!����6���������$��������

Page 10: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �����54

*����������/��������������%��7*����������/��������������%��7

� � ����

�" ��

�+�������

� ;!��)� �����/9 ��G � ����0�������������

�E�A#�� ��" ���

�E�A#� �/����� ,��0

�B�#� �" ���

�� ��#�����&�,�����

�E�A#� �� �� ����

�� ������ �B�#�

�;��)$������������(���

������������ � ��� �������

&�,���� ���#���� ����������������%��%����� �%�����$���%��+ �������$ �������,���������������� ���!����#%��,�$$#�

) 8����,����#���

8 ��������!��8 ��������!��/��&�$���&���/��&�$���&���

Page 11: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������5

9���!����/�������������&�$��$�����::�������������&�3���;���%�������$���������������*�����<�#0,�= 8�&:%������4

���$���9����������>��/����?����?���������8�&:%��������&�5��&�����

(PEEK Slip Connectors Easier to Use)

Void

������������ � ��� �������

0.090" Parker Style

0.130" WatersStyle

Other Waters® Columns

Waters Spherisorb®, ACQUITY UPLC™and many other brands

9���!��(��������������&�9����������9���!��(��������������&�9����������

������������� �������������������������������� ������������������ ����� � � �� ��

Page 12: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �������

8%%�����%�9������������/����@���!��3(����&�������4���������!�A��&��$���&���

.020"<.005" .040"

Sample band dispersion inside tubing (ID)

��� ������� ��� ������������� ��������������

��������������� �������� ��������

������� ����������� ����������

������������ � ��� ������-

��/����9����&����������/����9����&��������

� ������������

�@��%�������/ :����$�������0

�@�� �% ,�#�# �� ����

o ����C��������D��#��� ��%

� +;;=�&�,���

�����;���88B

� �#��@9H�� �#��@��H-

��������88B

B��H

&@(

�@����

� ������� �<� ��� ��%�+;;=�&�,���

Page 13: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������1

C�&������9����!��������5�����C�&������9����!��������5�����

���;��9�����������;��9��������

� &����@�������������?� �������%������ �

� �@�� ,�#���# ����������%�, ���� $�� ,����%��

� �%����� ������ ��%�$���

� ;��#�����������$��%����� ��%�%��������

� F��,�� ��)� ����

� ;����� ������ ��%����# �����,�:� ��$ �� �������

� ;�������������� �� ��*����,��#��

� +����� ��%��������� ��������

� F��,��%������� $��%�������� ��%��,���%�������

� ������ ����%�# ��������

� <#��)#���:���������%�@+6�������

� @�+H-*�9���#

� 8��#��$��:�)#����������

������������ � ��� ������2

@����@����

� 8��#���.�����

�&���E�, ����#��

o 6�����#���

�8�+

� � �������������� ��

�B �I��#��%�����

� ����:����

�� ������

�� �I�����#%

�F������#���

o +)����

�6 �� ����������

o +&(;

o �������

Page 14: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �������

C��������C��������

� H�����6�,��

�&#%��#���� ��

���% ������������#��� �)��#�$�#�� ���� ��

� ����:����������@ ��H$$�#

�9���� $������ �

�E���������9

���% ��������

o (� ���*�� �����:� ,����%���*���#� � ������%*�

���� $�# ����

�H�������+���

����������*�����!

� ���#�;����:+���

�+����# ������31>�# ��� $�����

� ����# �:�#%������5�3����1��@+6�

������������ � ��� ������3

6��������76��������7

Page 15: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������4

*���������9�!$��������9���;7*���������9�!$��������9���;7

� <�� ����� ������ �#%#'�$ ���'����

�������� �

������

�9�������+�#'

�"����

� <�� ���#���,�,,�������%������� ��%�� ������%

���,,��� ����#����� ,���� ��%��������##��#������

�#��� �

������������ � ��� �������

*�������$$����&��������9�!$��������*�������$$����&��������9�!$��������

9���;79���;7

� ������6 ������� �����$ ���%�� ,����%���$�

� ������6 ����������� ���� ��%

� <�#� ������������#�����%�����#������%�������6 �*�

"����*������*�����9�������+�#'

� &%�#� �����������������7��� �����������,���%�

�����

�&%�� ���� $�� �����?����� ������7��%�#� ���������

���# ��

� <���'�� ������������$ �����#�$������*������%�� ��� $�

��������# ��

Page 16: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� ������5

9�!$��������9���;�C�����������9�!$��������9���;�C�����������

������������ � ��� �������

D���&��(�(����$��������C������7D���&��(�(����$��������C������7

� 9�!$�����/���@���!�) �%�� ���� $�� �����?����� �

�����7��%�������� ��� �������������

�&���#����������%���1������������������� ����

�E$��%������!#���1���*�� ���,��#������

o � ,����%���� ��������

o ��,,������%������

o 6�'�����%������*�������� �*������*� ���������

��#'

�F��������%�# ����� ��#%#'� $�����#���%�

# �����,��� ���

Page 17: sites.chem.colostate.edu pressure liquid... · design” Binary pump and Quaternary gradient system. 5 !$ ˜ ! 5!˝6ˇ ˘ 1!-ˇ ˘# ˜ ˘ 55 & ’$ 241˜ ˘ 7 ˘ / 0 ˛ ˘

������������ � ��� �������

D���&��(�(����$��������C������7D���&��(�(����$��������C������7

� ��������������������:#%�������������� �������

�$��# ���������%���'�� �����

�&���#����������%�����>� $��%�# ����� ��#%#'�����

�E$��%���������%��%*��%�� ,���������������� �������

�E$��%���������� �����*��%���%��������'���� �� $��%�������

�����%�����������#'��%��������� ����%��%������� ,��

�%���� ���'���� ��%�������� �

� ?�������������)������� ��������$��# ���������%�

# ����� ��#%#'

������������ � ��� ������-

C���!!��&�&�C���!!��&�&�

�����!�������$�9���;���������!�������$�9���;����

5�����%���� ��������� ��$ ��%�<�����#�������#� �

���&��� �������*�# ��������������������

����%#'�� ����%�����$$�#����� ������$ �����

-��F����� ������$ ��#%�� ������ �� ��������+����%���� ��%��������� ��%�

1��&��� ��$� � ��%��%�����# �� ���� ���

����������&�����$���������/���2�#

2��+����%���A#� �

���+ ����;�� �$ ���% �*����������������

J�<�� ���� !��������������$ �?����,��� ��