seria leucocitara final

5/6/2018 Seria Leucocitara Final - slidepdf.com

http://slidepdf.com/reader/full/seria-leucocitara-final 1/7

Lucrări practice Fiziologie I

EXPLORAREA SERIEI LEUCOCITARE

1. NUMĂRĂTOAREA LEUCOCITELOR

Măduva hematogenă este considerată actualmente ca fiind unul dintre cele mai mari„organe” ale corpului uman adult, dimensiunile sale fiind comparate cu cele ale ficatului.

În mod normal, 75% dintre celulele hematopoietice aparţin seriei mieloide, iar 25%apar in seriei eritrocitare.ț

Măduva hematogenă conţine:• celule stem pluripotente

- sunt celule de origine ale tuturor liniilor sanguine ;- au capacitate de autoregenerare şi diferenţiere.

• celule progenitoare hematopoietice, “angajate”, care vor da naştere diferitelor tipuride celule sangvine :

- celule progenitoare mieloide, din care derivă eritrocitele, o parte din

leucocite (granulocitele neutrofile, eozinofile, bazofile şi monocitele) şi trombocitele .- celule progenitoare limfoide, din care rezultă limfocitele B şi T.Celulele adulte aparţinând seriei leucocitare vor acţiona împreună în vederea apărării

organismului împotriva agresiunii infecţioase (virale, bacteriene sau parazitare).

SERIA LEUCOCITARĂ este formată din 3 linii celulare:

1. SERIA GRANULOCITARĂ cuprinde elemente polinucleare cu granulaţii neutrofile,acidofile iș bazofile sub formă de:

• granulocit nesegmentat (granulocitul tânăr) are nucleul în formă de potcoavă;• granulocit segmentat (granulocitul adult) are nucleul segmentat. Cu câtcelula este mai matură, cu atât are mai multe segmente.

În funcţie de tipul granulaţiilor prezente în citoplasmă sunt diferenţiate mai multe tipuri degranulocite:

a). Granulocitul segmentat neutrofil – are citoplasma slab acidofilă (roz-palid), cu granulaţiineutrofile specifice, mici, punctiforme şi numeroase; nucleul este segmentat în 2-5 lobi legaţiîntre ei prin punţi fine de cromatină. Are următoarele roluri:

• în microfagocitoză - reprezintă funcţia principală în apărarea organismului

contra infecţiilor (reprezintă prima linie de apărare prin înglobarea şi distrugerea de particule din mediul extracelular).• rol secretor pentru: transcobalamina-I (α1-globulina care transportăvitamina B12), interleukine (IL1 cu rol în inducerea febrei), prostaglandine.

b). Granulocitul segmentat eozinofil - are în citoplasmă granule mari, egale, eozinofile(portocalii) iar nucleul său prezintă 2 segmente. Are următoarele roluri:

• în fagocitoză: factorii care determină chemotaxia eozinofilului sunt: complexeleimune antigen-anticorp (deţin rolul major în reacţiile imune), fibrina, enzime proteolitice,histamina. Eozinofilele pot fagocita şi bacterii sau fungi, dar sunt mai puţin atrase deacestea decât neutrofilele.• în apărarea antiparazitară: chiar dacă nu poate fagocita paraziţii, eozinofilul seataşează de aceştia şi eliberează la exterior granulaţii care conţin o substanţă cu o

puternică acţiune citotoxică (PBM -proteina bazică majoră).• în bolile alergice.




c). Granulocitul segmentat bazofil - conţine granulaţii caracteristice bazofile care ocupă toatăcitoplasma, uneori suprapunându-se peste nucleu; nucleul este incomplet segmentat. Areurmătoarele roluri:

• în fagocitoză , dar la o scară mai redusă.• în degranulare, cu eliberarea la exteriorul celulei a numeroşi mediatori, fenomen cu

importanţă în patogenia şi diagnosticul unor afecţiuni alergice dar având şi rolchemotactic pentru neutrofile şi eozinofile.

2. SERIA LIMFOCITARĂ. După mărime limfocitele pot fi: mici, medii şi mari in funcţiede gradul de maturare şi reprezintă componenta celulară majoră din ţesuturile limfatice.Forma limfocitelor este rotundă sau uşor ovalară, cu diametrul de 6–12 µm. Nucleul este mareşi ocupă cea mai mare parte a celulei fiind intens colorat. Citoplasma este slab bazofilă(albastru-deschis). Limfocitele au următoarele roluri:

• în răspunsul imun, declanşat de pătrunderea în organism a unor celule străine sau aunor macromolecule proteice. Acest răspuns este caracterizat prin producţia de anticorpide către limfocitele B (imunitate umorală) şi de produşi celulari citotoxici eliberaţi decătre limfocitele T (imunitate celulară) .

3. SERIA MONOCITARĂ. Monocitele sunt cele mai mari celule din seria leucocitară, cu undiametru cuprins între 10 - 25 μm şi sunt specializate în apărarea organismului. Nucleul estenesegmentat, reniform şi nu prezintă nucleoli. Citoplasma este abundentă şi intens bazofilă(albastru închis). Seria monocitară include:

- precursorii din măduva hematogenă- monocitele din sânge- macrofagele din ţesuturi

Monocitele îndeplinesc următoarele roluri:•

în macrofagocitoza particulelor coloidale, a celulelor degenerate;• în răspunsul imun ca şi celule accesorii (prezentatoare de antigen).

Fig.2. Sânge periferic normal. Frotiu colorat MGG.1. granulocit neutrofil segmentat; 2. granulocit eozinofil; 3. granulocit bazofil;




4. limfocit; 5. monocot

PRINCIPIU• Metoda manuală: numărătoarea directă la microscop a leucocitelor dintr-un volumcunoscut de sânge, diluat într-o proporţie cunoscută. Celulele se numără în dispozitivespeciale numite hemacitometre (camere de numărat).• Metoda automată ( metodă de impedanţă electrică): o suspensie de leucocite dintr-unvolum cunoscut de sânge, trec printr-un orificiu. Un curent electric constant este aplicatîntre electrozii de platină aflaţi de-o parte şi de alta a orificiului. Deoarece fiecare celulăeste nonconductoare ea va produce la trecerea prin orificiu o modificare bruscă detensiune = un puls. Aceste pulsuri vor fi numărate electronic.

VALOAREA NORMALĂ

• valoare medie a numărului de leucocite: 4000-10000/ mm3

• la adult: 5000 – 9000 leucocite/mm3

• la copil (până la 18 ani): 4500 – 13000 leucocite/mm3

VARIAŢII FIZIOLOGICE • numărul de leucocite cre te (leucocitoză)ș la sugari, în sarcină, după un efort fizic, în

perioadele postprandiale, la altitudine, stres emoţional etc.;• numărul de leucocite scade (leucopenie) la vârstnici, în somn, la surmenaţii fizic;

VARIAŢII PATOLOGICE • numărul de leucocite cre te (leucocitoză)ș în boli infecţioase, leucemii, alergii,etc.• numărul de leucocite scade (leucopenie) în distrugeri ale măduveihematoformatoare după tratament cu radiaţii ionizante, medicamente citostatice, etc.

2. FORMULA LEUCOCITARĂ

DEFINIŢIEFormula leucocitară reprezintă distribuţia procentuală a diferitelor tipuri de leucocite pe

un frotiu de sânge periferic. Formula leucocitară se determină prin metode clasice sau metodeautomate.

PRINCIPIU• Metoda manuală: se numără la microscopul optic, folosind obiectivul cu imersie, 200

de leucocite de pe un frotiu din sângele periferic colorat May-Grünwald-Giemsa (MGG) pe care se pune o picătură de ulei de cedru. Se identifică tipurile de leucocite pe bazacriteriilor morfologice (aspectul nucleului, granulaţii citoplasmatice) şi se determinăraportul procentual între acestea.• Metoda automată: se izolează şi se efectuează automat raportul procentual dintretipurile de leucocite din sângele periferic, în funcţie de volum, prezenţa granulaţiilor citoplasmatice şi complexitatea segmentării nucleului, cu obţinerea histogramelor .

FORMULA LEUCOCITARĂ NORMALĂLeucocite Adult Copil

Neutrofile 56-68% 25-40%

Eozinofile 1-3% 1-4%Bazofile 0-1% 0-1%Limfocite 20-40% 50-70%Monocite 4-10% 4-8%




OBSERVAŢII• valorile normale pot prezenta variaţii de la un laborator la altul în funcţie demetodele şi reactivii folosiţi;• la copiii mici , în formula leucocitară predomină limfocitele faţă de neutrofilele

segmentate. Procentele se egalează în jurul vârstei de 5-6 ani, apoi se inversează, ajungândtreptat la valorile adultului.

VARIAŢIILE FORMULEI LEUCOCITARE

• Neutrofilia reprezintă creşterea numărului de neutrofile peste valoarea normală.Prezenţa elementelor neutrofile tinere în sângele periferic este dovada unei activităţimedulare intense sau a citolizei accentuate. Neutrofilia poate fi:

- fiziologică: în cursul unor eforturi fizice mari, graviditate, stres;- patologică: în infecţii acute, intoxicaţii endogene (uremie) şi exogene,leucemia mieloidă cronică, acţiunea agenţilor fizici (traumatisme, arsuri).

• Neutropenia reprezintă scăderea numărului neutrofilelor sub limita normală. Aparedupă acţiunea unor medicamente (citostatice, tranchilizante, antiinflamatoare, antibiotice),• Eozinofilia reprezintă creşterea numărului de eozinofile; se întâlneşte înalergii, parazitoze, afecţiuni dermatologice.• Eozinopenia reprezintă scăderea numărului de eozinofile; se întâlneşte înstări de hiperactivitate adrenocorticoidă.• Bazofilia reprezintă creşterea numărului de granulocite bazofile. Apare în

bolile contagioase, leucemia mieloidă cronică .• Limfocitoza reprezintă creşterea numărului de limfocite. Limfocitoza

poate fi:

- fiziologică : la copii;- patologică : în afecţiuni virale acute, mononucleoza infecţioasă, TBC,leucemia limfatică cronică.

• Limfopenie reprezintă scăderea numărului de limfocite. Apare înlimfopoieza insuficientă, infecţii virale, SIDA etc.• Monocitoza reprezintă cre terea numărului de monocite. Apare înș mononucleoza infecţioasă, infecţii bacteriene (endocardită, TBC), afecţiuni virale(hepatită, gripă, rujeolă), convalescenţa infecţiilor bacteriene şi virale.

3. INVESTIGAREA FUNCŢIONALĂ A GRANULOCITELOR

Principala funcţie a granulocitelor este fagocitoza, precedată de diapedeză (trecereagranulocitelor din sînge în ţesuturi prin peretele vascular), care este declanşată de numeroşifactori chemotactici pozitivi (atrag leucocitele spre focarul inflamator, leziuni tisulare). În

practica medicală se poate testa, in vitro, funcţia fagocitară a granulocitelor prin: indicelefagocitar al particulelor de latex, testul NBT.

1. INDICELE FAGOCITAR AL PARTICOLELOR DE LATEX reprezintă proporţia la % din granulocitele neutrofile care au înglobat particule de latex. Valorinormale: 50% - 55%.

2. TESTUL NBT (NITROBLUETETRAZOLIUM). Nitrobluetetrazolium (NBT) este un colorant galben, care este înglobat şi redus deneutrofilele normale la nitroformazan. NBT este un acceptor de electroni şi se reduce, iar




donorul de electroni este NADPH2 format prin activarea metabolismului leucocitar, întimpul fagocitozei.

Testul NBT este un test "in vitro" de utilitate clinică, prin care se evalueazămetabolismul oxidativ al granulocitelor, producerea de radicali liberi ai oxigenului, careasigură funcţia bactericidă a fagocitelor. Se determină proporţia la % a celulelor NBT

pozitive, adică a granulocitelor care au înglobat şi redus NBT la nitroformazan, precipitat

albastru închis, vizibil în granulocite, colorate cu Giemsa.Valori normale: 1 - 14%. Importanţa testului NBT în patologia umanăTestul NBT este folosit pentru diagnosticul disfuncţiilor neutrofilului, mai ales ale

metabolismului oxidativ, situaţii în care reducerea colorantului NBT este insuficientă.Creşterea testului NBT: în infecţii bacteriene (inclusiv tuberculoza miliară, meningita

tuberculoasă), infecţii parazitare, gravide, la pacienţii cu arsuri (semnifică apariţia uneistări septice), etc.

Test NBT scăzut sau normal, în prezenţa unei infecţii bacteriene: în terapia cuantibiotice (eficacitatea tratamentului este indicată de scăderea testului NBT faţă de

valorile anterioare, uneori în mai puţin de 6 ore), infecţii localizate, administrarea decorticosteroizi şi medicamente imunosupresive, boala granulomatoasă cronică, deficienţade mieloperoxidază sau glucozo 6-fosfat dehidrogenaza a neutrofilului, lupus eritematossistemic, agamaglobulinemie congenitală sau câştigată.

Observa ie:ț metabolismul oxidativ leucocitar se poate investiga si princhemiluminiscenţă.

BULETINE DE INTERPRETARE

Să se interpreteze următoarele leucograme:1. M.G. ; sex femin, 30 ani

sarcina luna a IV-a 2. P.B. ; sex masculin, 3 aniNr. Leucocite = 11.000/mm3 Nr. Leucocite = 21.000/mm3

Neutrofile = 77% Neutrofile = 83%Eozinofile = 1% Eozinofile = 4%Bazofile = 0% Bazofile = 1%Limfocite = 28% Limfocite = 55%Monocite = 5% Monocite = 9%

3. S.C. ; sex masculin, 22 ani 4. A.M. ; sex masculin, 27 ani

Nr. Leucocite = 10.000/mm3

Nr. Leucocite = 12.000/mm3

Neutrofile = 58% Neutrofile = 76%Eozinofile = 12% Eozinofile = 4%Bazofile = 0% Bazofile = 0%Limfocite = 25% Limfocite = 27%Monocite = 5% Monocite = 12%

5. R.P.; sex feminin, 22 ani 6. B.C.; sex feminin, 2 aniNr. Leucocite = 11.000/mm3 Nr. Leucocite = 12.000/mm3

Neutrofile = 52% Neutrofile = 25%Eozinofile = 1% Eozinofile = 14%

Bazofile = 6% Bazofile = 1%Limfocite = 35% Limfocite = 52%Monocite = 6% Monocite = 8%




TESTE (CU UN SINGUR RĂSPUNS CORECT)

1. Valoarea normală a leucocitelor în sângele periferic al adultului este:A. <10.000/mm3

B. 150.000 – 300.000/mm3

C. 5000 – 9000/mm3

D. 25%

2. Care dintre următoarele afirmaţii sunt adevărate:A. Creşterea numărului de leucocite se numeşte leucocitozăB. Leucopenia poate fi fiziologică la surmenaţii fizic şi în somnC. Leucocitoza semnifică scăderea numărului de leucocite în sângele

perifericD. Leucocitoza apare la vârstnici în mod fiziologic

3. Leucocitoza fiziologică este întâlnită:A. La sugariB. În somnC. La vârstniciD. După efort fizic

4. Formula leucocitară normală la copil (5 – 6 ani) prezintă:A. NeutrofilieB. LimfocitozăC. MonocitozăD. Limfopenie

5. Granulocitul neutrofil segmentat:A. Are nucleu segmentat datorita condensării cromatinei nucleareB. Reprezintă granulocitul adultC. Aparţine seriei linfocitareD. Aparţine seriei granulocitare

6. Caracteristic monocitului este :A. Are nucleu reniformB. Nucleul e segmentat în 2-5 lobi cu citoplasmă abundentă, intens

bazofilăC. Are rol în microfagocitoza particulelor coloidaleD. Are rol în răspunsul imun ca şi celulă accesorie (prezentatoare deantigen)

7. Care din afirmaţiile de mai jos sunt adevărate:A. Eozinofilele intervin în fagocitoza fungilor, bacteriilor, complexelor antigen-anticorp

B. Monocitele intervin în procesele inflamatorii (capacitate de apărare mairedusă)C. Limfocitele secretă IL-1 (substanţa pirogenă) şi enzime lizozomale




D. Neutrofilele segmentate intervin în apararea antimicrobiana prinmicrofagocitoză

8. Alegeţi răspunsul corect:A. Eritrocitele derivă din celule progenitoare mieloideB. Eritrocitele derivă din celule progenitoare limfoide

C. O parte din leucocite derivă din celule progenitoare mieloide, la fel ca şitrombociteleD. Eozinofilele, bazofilele si monocitele provin din celule progenitoaremieloide

9.Despre formula leucocitară este corectă următoarea afirmaţie :A. Se poate citi de pe curbe de distribuţie a leucocitelor B. Se interpretează cu ajutorul histogramelor C. Valoarea neutrofilelor în formula leucocitară la adult este 25-40 %D. Valoarea eozinofilelor în formula leucocitară la adult este mai mare decât la

copil

10. Alegeţi răspunsul corect:A. Lecopenia indică o stare de adaptare a organismului la rarefiereaaerului întâlnită la marile altitudiniB. Monocitoza apare tipic în parazitozele intestinale ale copiluluiC. Leucocitoza se întâlneşte în distrugeri ale măduvei hematoformatoaredupă tratament cu radiaţii ionizante, medicamente citostatice etc.D. Bazofilia se întâlneşte în bolile contagioase,leucemia mieloidă cronică

Răspunsuri : 1-C, 2-B, 3-A, 4-B, 5-D, 6-D, 7-D, 8-C, 9-B, 10-D

seria leucocitara final

Documents