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REPORT Prova di Campo ProMet – Rumaster (Bioscreen)

A cura di:

Prof. Alfonso Zecconi ( DVM )

Dipartimento di patologia animale, igiene e sanità pubblica veterinaria ( DPAV) – Università degli studi di

Milano

Dott. Alessandro Fantini ( DVM)

Dairy Production Medicine

Fantini Professional Advice srl ( Anguillara Sabazia-Roma)

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Sommario

Disegno sperimentale ........................................................................................................................................ 3

Rilievi analitici .................................................................................................................................................... 3

Dosaggio aminoacidi .......................................................................................................................................... 3

Dosaggio di metionina e lisina nel siero bovino. .......................................................................................... 3

Dosaggio di colina nel siero bovino. .............................................................................................................. 3

Analisi statistiche ............................................................................................................................................... 3

Risultati .............................................................................................................................................................. 3

Analisi statistica ............................................................................................................................................. 8

Andamento dei singoli parametri ai diversi tempi di prelievo ...................................................................... 9

Colina ......................................................................................................................................................... 9

Metionina ................................................................................................................................................ 10

Lisina ........................................................................................................................................................ 11

Grasso ...................................................................................................................................................... 12

Proteine del latte ..................................................................................................................................... 13

Caseina ..................................................................................................................................................... 14

Urea ......................................................................................................................................................... 15

Cellule somatiche .................................................................................................................................... 16

3

Disegno sperimentale

Otto bovine pluripare e 8 bovine primipare appartenenti all’Az.Agr.Menozzi (Landriano PV) sono state

rispettivamente trattate per 7 giorni con i prodotti ProMet e Rumaster (Bioscreen), al fine di valutare

l’influenza su alcuni parametri qualitativi del latte e sul contenuto ematico di tre additivi (colina, metionina

e lisina).

A tale scopo sono stati effettuati 3 prelievi di latte e sangue rispettivamente al T0 (assenza di trattamento),

T+7 (dopo 7 giorni di trattamento) e T+14 (7 giorni dopo l’interruzione del trattamento.

Rilievi analitici I campioni di latte sono stati analizzati mediante apparecchiatura automatica Foss presso i laboratori ARAL

di Crema con prove accreditate per contenuto in grasso, proteine, caseina, urea e cellule somatiche.

I campioni di sangue sono stati analizzati come descritto successivamente presso i laboratori di biochimica

del DIVET (Università degli Studi di Milano).

Dosaggio additivi

Dosaggio di metionina e lisina nel siero bovino.

In ogni campione di sangue intero è stata separata la componente sierica. Tale componente deproteinata è

stata sottoposta a derivatizzazione con o-ftalaldeide prima della separazione su colonna cromatografica

(HPLC). La valutazione quantitativa è stata effettuata costruendo due differenti rette di taratura usando

quantità note di metionina e lisina.

Dosaggio di colina nel siero bovino.

Si è dosata la quantità di colina presente nei campioni di sangue intero mediante metodo enzimatico

colorimetrico.

Analisi statistiche I dati ottenuti dalla prove di laboratorio sono stati caricati su un apposito database e elaborati con software

statistico SAS 9.2 (SAS Institute, USA). I dati sono stati analizzati con un modello lineare generalizzato

(Procedura GLM) considerando i seguenti fattori: giorni di lattazione (2 livelli <100 giorni e ≥100 giorni)

interazione tra tempo di prelievo e trattamento.

Risultati Di seguito vengono riportate 2 tabelle in cui sono indicati i risultati di quantificazione di metionina. lisina e

colina e i parametri qualitativi del latte, nonché le informazioni principali sugli animali oggetto della

sperimentazione.

4

Tabella 1a: database relativo agli animali considerati ed ai risultati analitici – gruppo Promet

Animale Trattamento Tempo Latta

zione

GG

lat

Grasso

%

Proteine

%

Caseina

%

Cellule

somatiche

x 1000/ml

Log10

Cellule

somatiche

Urea

Mg/dl

Colina

µmoli/ml

Metionina

µmoli/ml

Lisina

µmoli/ml

95 promet t0 3 158 3,25 3,44 2,67 463 5,665581 23,9 44,11 25,33 64,6

95 promet t1 3 158 3,54 3,42 2,66 883 5,945961 14,1 17,85 21,56 112,81

95 promet t2 3 158 3,32 3,35 2,63 525 5,720159 15,8 62,42 20,56 87,41

135 promet t0 3 78 2,96 3,07 2,4 15 4,176091 14,2 47,95 23,87 77,96

135 promet t1 3 78 3,7 3,17 2,45 25 4,39794 16,3 3,89 26,03 124,59

135 promet t2 3 78 3,09 3,16 2,49 17 4,230449 15,2 30,98 34,88 151,68

141 promet t0 3 69 5,23 3,73 2,95 53 4,724276 28,7 1,13 33,68 159,65

141 promet t1 3 69 4,88 3,66 2,89 39 4,591065 19,1 39,34 23,82 139,46

141 promet t2 3 69 4,46 3,62 2,86 42 4,623249 26 51,38 21,59 102,53

164 promet t0 2 62 3,3 3,24 2,51 46 4,662758 13,9 91,68 23,54 77,64

164 promet t1 2 62 4,32 3,29 2,55 97 4,986772 12,6 11,25 25,66 117,27

164 promet t2 2 62 3,94 3,34 2,62 68 4,832509 19,1 3,22 24,76 113,88

166 promet t0 2 159 4,36 3,86 3,03 46 4,662758 17 18,02 30,09 107,15

166 promet t1 2 159 5,27 3,85 3,02 92 4,963788 18,2 20,78 42,74 200,22

5

166 promet t2 2 159 5,14 3,93 3,11 59 4,770852 21 8,44 20,34 110,52

169 promet t0 2 154 3,45 3,26 2,57 24 4,380211 17,1 39,76 19,55 88,52

169 promet t1 2 154 3,51 3,16 2,51 32 4,50515 16,9 103,14 20,44 113,69

169 promet t2 2 154 3,81 3,31 2,64 26 4,414973 15,8 70,48 17,54 81,1

177 promet t0 2 41 3,56 3,03 2,36 103 5,012837 18,1 12,96 24,98 73,56

177 promet t1 2 41 3 2,97 2,31 272 5,434569 15,3 33,49 29,08 137,17

177 promet t2 2 41 2,97 3,08 2,44 467 5,669317 18 65,55 20,6 119,08

181 promet t0 2 68 4,14 3,24 2,56 30 4,477121 19,9 26,51 32,46 85,69

181 promet t1 2 68 4,41 3,28 2,58 23 4,361728 18,7 92,35 36,19 151,97

181 promet t2 2 68 3,29 3,31 2,64 16 4,20412 16,5 25,59 16,54 77,82

6

Tabella 1b: database relativo agli animali considerati ed ai risultati analitici – gruppo Rumaster

Animale Trattamento Tempo Latta

zione

GG

lat

Grasso

%

Proteine

%

Caseina

%

Cellule

somatiche

x 1000/ml

Log10

Cellule

somatiche

Urea

Mg/dl

Colina

µmoli/ml

Metionina

µmoli/ml

Lisina

µmoli/ml

208 Rumaster t0 1 223 4,62 3,64 2,87 15 4,176091 15,7 239,59 22,87 134,65

208 Rumaster t1 1 223 4,57 3,75 2,97 22 4,342423 16,8 13,84 20,36 95,26

208 Rumaster t2 1 223 4,65 3,72 2,98 21 4,322219 19,1 24,16 18,1 85,9

209 Rumaster t0 1 221 3,24 4,27 3,38 71 4,851258 17,7 12,04 28,62 73,77

209 Rumaster t1 1 221 3,86 4,23 3,34 53 4,724276 23,2 49,04 39,97 178,66

209 Rumaster t2 1 221 4,14 4,16 3,32 83 4,919078 17,9 9,99 12,07 64,76

212 Rumaster t0 1 208 3,54 3,39 2,66 151 5,178977 16,5 14,63 17,66 59,04

212 Rumaster t1 1 208 3,83 3,34 2,66 182 5,260071 12,4 40,68 27,42 165,39

212 Rumaster t2 1 208 3,9 3,45 2,77 152 5,181844 16,3 39,67 15,4 80,55

214 Rumaster t0 1 177 4,69 3,78 2,99 389 5,58995 22,5 47,12 22,44 82,53

214 Rumaster t1 1 177 4,96 3,84 3,04 252 5,401401 20 55,39 16,08 77,8

214 Rumaster t2 1 177 4,81 3,92 3,12 227 5,356026 19 7,57 28,34 147,88

216 Rumaster t0 1 165 5,03 3,86 3,07 43 4,633468 25,5 0,08 23,04 75,69

216 Rumaster t1 1 165 5,36 3,91 3,12 27 4,431364 22,3 18,81 26,87 119,79

7

216 Rumaster t2 1 165 5,23 3,92 3,15 40 4,60206 24,9 79,6 12,79 72,19

218 Rumaster t0 1 157 3,48 3,47 2,76 247 5,392697 19 4,14 15,36 49,9

218 Rumaster t1 1 157 3,95 3,46 2,75 379 5,578639 18,5 12,33 43,51 190,52

218 Rumaster t2 1 157 3,32 3,46 2,77 285 5,454845 20 16,68 17,2 95,9

221 Rumaster t0 1 77 3,18 3,17 2,49 40 4,60206 20,5 170,44 34,71 71,86

221 Rumaster t1 1 77 4,48 3,53 2,81 63 4,799341 18,3 40,97 25,41 120,97

221 Rumaster t2 1 77 3,65 3,04 2,44 70 4,845098 15,3 30,52 15,88 67,67

222 Rumaster t0 1 73 4,66 3,48 2,73 73 4,863323 18,4 55,94 21,74 74,62

222 Rumaster t1 1 73 5,37 3,71 2,93 102 5,0086 15,7 31,15 17,2 89,76

222 Rumaster t2 1 73 5,08 3,74 2,97 62 4,792392 18,2 4,77 11,32 66,76

8

Analisi statistica

Nella successiva tabella sono riportati i dati relativi all’analisi statistica secondo il modello lineare

generalizzato prima descritto. Si può osservare che lo stadio di lattazione influenza la concentrazione di

proteine e caseina, come per altro atteso. Il trattamento risulta avere un effetto significativo invece sulla

concentrazione ematica di metionina e di lisina. Per una descrizione dettagliata dell’andamento di tali

additivi si vedano le schede sotto riportate.

Tabella 2: sintesi dell’analisi statistica (modello lineare generalizzato)

Parametro Fattore

Modello (R2) Significatività Giorni di

lattazione

Trattamento per

tempo

Colina 0.7798 0.5233 9% 0.6428

Metionina 0.8058 0.0191 28% 0.0272

Lisina 0.5681 0.0011 38% 0.0022

Proteine 0.0045 0.2944 37% 0.0028

Grasso 0.9014 0.2957 15% 0.3285

Caseina 0.0035 0.1397 41% 0.0008

Urea 0.6590 0.6572 8% 0.6955

Cellule somatiche 0.1215 0.9865 8% 0.6990

9

Andamento dei singoli parametri ai diversi tempi di prelievo

Colina

Media del latte individuale (µmoli/ml)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 68.00 ± 88.79 32.78 ± 16.39 26.62 ± 24.54

Promet 35.27 ± 27.98 40.26 ± 37.34 39.76 ± 26.33

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

10

Metionina

Media del latte individuale (µmoli/ml)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 23.31 ± 6.06a 27.10 ± 10.02a 16.39 ± 5.41b

Promet 26.69 ± 4.89 28.19 ± 7.66 22.10 ± 5.73

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

11

Lisina

Media del latte individuale (µmoli/ml)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 77.76 ± 25.22a 129.77 ± 43.13b 85.20 ± 27.52a

Promet 91.85 ± 30.12a 137.15 ± 29.03b 105.5 ± 24.23a

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

12

Grasso

Media del latte individuale (%)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 4.06 ± 0.76 4.55 ± 0.64 4.35 ± 0.70

Promet 3.78 ± 0.75 4.08 ± 0.77 3.75 ± 0.75

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

13

Proteine del latte

Media del latte individuale (%)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 3.63 ± 0.34 3.72 ± 0.28 3.68 ± 0.35

Promet 3.36 ± 0.30 3.35 ± 0.29 3.39 ± 0.27

4. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi

(colonne).

5. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti

(righe).

6. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

14

Caseina

Media del latte individuale (%)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 2.87 ± 0.28 2.95 ± 0.28 2.94 ± 0.28

Promet 2.63 ± 0.24 2.62 ± 0.23 2.68 ± 0.21

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

15

Urea

Media del latte individuale (%)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 2.87 ± 0.28 2.95 ± 0.28 2.94 ± 0.28

Promet 2.63 ± 0.24 2.62 ± 0.23 2.68 ± 0.21

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

16

Cellule somatiche

Media latte individuale (%)

Trattamento T0 T+7 T+14

Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std Media ± Dev.Std

Rumaster 4.91 ± 0.46 4.94 ± 0.45 4.93 ± 0.38

Promet 4.72 ± 0.46 4.90 ± 0.56 4.81 ± 0.59

1. La presenza di una lettera diversa indica una differenza statisticamente significativa tra tempi (colonne).

2. La presenza di un simbolo diverso indica una differenza statisticamente significativa tra trattamenti (righe).

3. L’assenza di lettere e simboli indica l’assenza di differenze statisticamente significative.

17

CONCLUSIONI

La somministrazione di Promet ( metionina MLC ) non influenza la concentrazione ematica di colina.

Non si rilevata un aumento della metionina ematica al seguito della somministrazione di Promet. Questo può essere spiegato da una utilizzazione da parte delle bovine non rilevabile da modifiche nella produzione di latte e delle sue caratteristiche.

Il trattamento con Rumaster ( lisina MLC) ha innalzato significativamente la sua concentrazione ematica durante il periodo di somministrazione.

Il fatto che il medesimo metodo di protezione su due amminoacidi che hanno lo stesso meccanismo d’assorbimento intestinale abbia dato risultati discordanti depone per il fatto che tale tecnologia sia efficace nel garantire oltre alla rumino-indegradabilità anche la digeribilità intestinale. Il fatto che per la sola metionina non si sia osservato un innalzamento ematico può essere spiegato con il fatto che questo aminoacido sia stato deviato verso altre funzioni metaboliche non dimostrabili con un innalzamento di colina ne di caseina nel latte.

Anguillara Sabazia ( Roma )

23 Febbraio 2013