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Cromatografía
Técnica de separación muy potente
Los compuestos químicos se separan en función de su diferente afinidad por una fase móvil y una fase estacionaria
Existen muchas variantes en función de la naturaleza de dichas fases móvil y estacionaria
Técnicas manuales de laboratorio
-Cromatografía de columna-Cromatografía de capa fina TLC
Ténicas instrumentales
-Cromatografía de gases GC-Cromatografía de líquidos LC-Cromatografía de líquidos de alta eficacia: HPLC
La fase estacionaria
Sólidos muy porosos con capacidad adsorbente: Gel de sílice (SiO2); Alúmina (Al2O3)
La superficie del gel de sílice interacciona con los compuestos orgánicos mediante interacciones de carácter polar:-Puentes de hidrógeno-Interacciones electrostáticas
Los compuestos más polares interaccionan más fuertemente con la sílica.
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La fase móvil
En cromatografía de líquidos (columna, capa fina, HPLC) la fase móvil es una mezcla de disolventes: ELUYENTE
En cromatografía de gases la fase móvil es el GAS PORTADOR
En el proceso de cromatografía la fase móvil fluye arrastrando los compuestos que están retenidos en la fase estacionaria.
En cromatografía de líquidos la naturaleza del eluyente tiene una gran importancia
Eluyentes polares: Rompen más eficazmente las uniones de los compuestos con la fase estacionaria.
Arrastran más rápidamente a los compuestos.
Eluyentes no polares: No rompen las uniones de los compuestos con la fase estacionaria.
Arrastran muy lentamente a los compuestos.
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La serie eluotrópica:
hexano < tolueno < cloroformo < diclorometano < acetona < acetato de etilo < etanol < metanol < H2O
Para conseguir el poder de elución deseado se utilizan mezclas de disolventes
Hexano: Acetato de etilo, 100: 1
Hexano: Acetato de etilo, 20: 1
Hexano: Acetato de etilo, 10: 1
Hexano: Acetato de etilo, 1: 1
Mayor poder de elución
Cromatografía de columna
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Cromatografía de capa fina (TLC) thin layer chromatography
Cromatografía de capa fina (TLC) thin layer chromatography
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El índice de retención Rf
El Rf de una sustancia en el mismo soporte y con el mismo eluyente siempre es constante: Rf A (SiO2, Hex: AcOEt, 5: 1) = 0.47Una propiedad que permite identificar sustancias en una mezcla.
Compuestos muy polares:
Interaccionan fuertemente con la fase estacionaria:
“corren poco”
Rf pequeño
Compuestos poco polares:
Interaccionan débilmentemente con la fase estacionaria:
“corren mucho”
Rf grande
Influencia de la estructura de los compuestos en el Rf
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Mezclas con mayor poder de elución (más polares)
Arrastran mucho a los compuestos
Rf menor
Mezclas con menor poder de elución
Arrastran poco a los compuestos
Rf menor
Influencia del eluyente en el Rf