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Questionário - Proficiência ClínicaÁrea: FAN HEp2

Rodada: Jul/2009

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Tema A IMUNOFLUORESCÊNCIA INDIRETA EM CÉLULAS HEp2

Elaboradora Erika Delvizio, Bióloga-Imunologia, DASA RJ.

Texto Introdutório As doenças auto-imunes são caracterizadas por um processo inflamatório de agressão contra os tecidospróprios. Pessoas que tenham uma predisposição genética, podem comprometer vários órgãos. A descobertade auto-anticorpos no soro destes pacientes, é de grande importância, uma vez que os mesmos podemauxiliar no diagnóstico e no acompanhamento destas doenças. Lesões cutâneas localizadas, lúpuseritematoso, esclerose sistêmica, artrite reumatóide, entre outras, são exemplos de doenças auto-imunes.

A etapa inicial na detecção dos auto-anticorpos consiste na utilização de uma técnica de triagem, que permiterastrear um maior número possível de auto-anticorpos, que estão relacionados à doenças humanas. A técnicamais usada é a imunofluorescência indireta em células HEp2, que permite triagem de um grande número deauto-anticorpos. Em caso de positividade, passamos para a segunda etapa, que dará a possibilidade deavaliação da especificidade do anticorpo, pois diferentes anticorpos podem apresentar um mesmo padrão defluorescência. A reação de imunofluorescência indireta é baseada na ligação dos auto-anticorpos existentesno soro do paciente, aos auto-antígenos presentes nas células de carcinoma de laringe humana, que sãousados como substrato para detecção dos possíveis auto-anticorpos.

Questão 1 Assinale a alternativa incorreta em relação à auto-imunidade:

1. Produção de auto-anticorpos;

2. Perda de reconhecimento do que é próprio “Self”;

3. Origem conhecida;

4. Prevalência étnica: negros > brancos.

Questão 2 Assinale a alternativa incorreta em relação aos anticorpos IgM:

1. Representam aproximadamente 10% das imunoglobulinas;

2. Segunda imunoglobulina a aparecer após a entrada do antígeno no organismo;

3. Sua presença indica geralmente infecção recente;

4. Menor quantidade no soro.

Questão 3 Em relação a estabilidade e armazenamento das amostras de FAN HEp2, podemos afirmar que o correto éque elas fiquem em geladeira entre 2 e 8°C e testad as dentro de uma semana. Se a armazenagem for feitapor mais tempo, qual a temperatura ideal?

1. Menos 25°C em alíquotas, para evitar congelament os e descongelamentos repetidos;



4. Menos 20°C em alíquotas, para evitar congelament os e descongelamentos repetidos.

Questão 4 Em relação ao armazenamento e estabilidade do kit de FAN HEp2, podemos afirmar que a temperatura idealé:

1. De 2 a 10°C, conforme a data de validade indicad a na etiqueta;

2. De 2 a 8°C, conforme a data de validade indicada na etiqueta;

3. De 2 a 5°C, conforme a data de validade indicada na etiqueta;

4. De 2 a 7°C, conforme a data de validade indicada na etiqueta.

Questão 5 No controle de qualidade em imunofluorecência indireta, é importante ressaltar que existem fatoresprimordiais, que são:

1. Sistema óptico (microscópico), potência da lâmpada (20, 50 ou 100w) e concentração do conjugado;

2. Sistema óptico (microscópico), potência da lâmpada (20, 50 ou 100w) e soros controles de reatividademínima (1/80);

3. Sistema óptico (microscópico), potência da lâmpada (20, 50 ou 100w), concentração do conjugado,soros controles de reatividade mínima (1/80) e observador;

4. Sistema óptico (microscópico), potência da lâmpada (20, 50 ou 100w), observador e concentração doconjugado.


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Questão 6 Assinale a alternativa correta em relação ao resultado positivo Ana Hep:

1. Resultados Ana positivos podem aparecer em uma grande porcentagem dos pacientes com doençasinfecciosas e/ou neoplasias, e também em doenças com etiologia de drogas;

2. Resultados positivos são válidos em pessoas que receberam transfusão de sangue;

3. Resultados positivos em amostras de pacientes imunossuprimidos e mulheres grávidas, podem ser defácil interpretação;

4. Resultados positivos em cordão umbilical ou neonatos devem ser interpretados com cautela.

Questão 7 O Terceiro Consenso Brasileiro de FAN HEp2 reitera a classificação atual dos padrões de fluorescência nosquatro compartimentos celulares: citoplasma, núcleo, nucléolo e aparelho mitótico. Podemos classificar umpadrão que apresenta nucleoplasma com granulação fina, nucléolo, célula em divisão e citoplasma nãofluorescente, como:

1. Nuclear pontilhado fino denso;

2. Nuclear pontilhado grosso;

3. Nuclear pontilhado grosso reticulado;

4. Nuclear pontilhado fino.

Questão 8 O padrão nuclear homogêneo é característico por apresentar:

1. Nucléolo homogêneo, célula em divisão e citoplasma não fluorescente;

2. Nucleoplasma com granulação fina, nucléolo e células em divisão não fluorescentes;

3. Nucleoplasma fluorescente, nucléolo não reagente, placa metafísica cromossômica intensamentecorada, citoplasma normalmente não fluorescente e aparelho mitótico não reagente;

4. Nucleoplasma com pontos fluorescentes isolados, nucléolo, célula em divisão e citoplasma nãofluorescente.

Questão 9 Observando a árvore de classificação dos padrões nucleares, é possível afirmar que os de laudo obrigatóriosão:

1. Nuclear homogêneo e nuclear pontilhado;

2. Nuclear homogêneo, nuclear pontilhado e nuclear pontilhado centromérico;

3. Nuclear pontilhado e nuclear pontilhado centromérico;

4. Nuclear homogêneo e nuclear pontilhado centromérico.

Questão 10 Observando a árvore de classificação dos padrões citoplasmáticos, é possível afirmar que os de laudoobrigatório são:

1. Citoplasmático fibrilar linear e citoplasmático fibrilar segmentar;

2. Citoplasmático fibrilar segmentar e citoplasmático pontilhado polar;

3. Citoplasmático fibrilar e citoplasmático pontilhado polar;

4. Citoplasmático pontilhado polar e citoplasmático pontilhado fino denso.

Questão 11 De acordo com a relevância clínica associada à esclerose sistêmica, especialmente com comprometimentovisceral grave, entre elas a hipertensão pulmonar, é possível afirmar que isto é clássico de um padrão:

1. Nucleolar aglomerado;

2. Nucleolar homogêneo;

3. Nucleolar pontilhado;

4. Nuclear pontilhado pleomórfico.

Questão 12 De acordo com o padrão nuclear pontilhado grosso, é possível afirmar que os auto-anticorpos relacionadossão:

1. Anticorpo anti-SS-A/Ro e anticorpo SS-B/La;

2. Anticorpo anti-DNA nativo, anticorpo anti-histona e anticorpo anticromatina (DNA/histona, nucleossomo);

3. Anticorpo anti-centrômero (Proteínas A, B e C);

4. Anticorpo anti-Sm e anticorpo anti-RNP.


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Questão 13 Qual o padrão que está associado à Síndrome Sjögren, podendo ocorrer também em outras condições auto-imunes ou inflamatórias crônicas?

1. Misto do tipo citoplasmático pontilhado fino denso a homogêneo, e nucleolar homogêneo;

2. Misto do tipo nuclear pontilhado fino com fluorescência do aparelho mitótico;

3. Misto do tipo nuclear e nucleolar pontilhado com placa metafásica positiva;

4. Citoplasmático pontilhado fino.

Questão 14 O exame de FAN HEp2 tem títulos que podem variar de 1/80, até maior ou igual a 1/640. Portanto, podemosconsiderar pacientes com títulos moderados, os que apresentam:

1. Títulos de 1/80 e 1/160;

2. Títulos de 1/320 e 1/640;

3. Títulos de 1/160 e 1/320;

4. Títulos de 1/320, maior ou igual 640.

Questão 15 Um paciente que apresenta relevância clínica para diagnóstico da doença mista do tecido conjuntivo, tambémpresente no lúpus eritematoso sistêmico, esclerose sistêmica e artrite reumatóide, está relacionado com qualpadrão?

1. Nuclear pontilhado grosso reticulado;

2. Nuclear pontilhado fino;

3. Nuclear pontilhado fino denso;

4. Nuclear pontilhado grosso.

ReferênciasBibliográficas:

• Dellavance A, Andrade LEC. Como interpretar e valorizar adequadamente o teste de anticorposantinúcleo. J Bras Patol Med Lab 2007;

• Dellavance A, Gabriel Jr A, Nuccitelli B, Taliberti BH, von Mühlen CA, Bichara CDA, et al. Pesquisa deauto-anticorpos em células HEp-2. Editora UCG, Goiânia, 2008;

• Carballo OG, von Mühlen CA, Nakamura R, de la Torre IG, Francescatonio PLC. Atlas Anti-Nucleocitoplasmaticos (HEp-2);

• Talleres Gráficos TBS, Buenos Aires, 2006.

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