pseudomonas aeruginosa la bactérie, sa sensibilité aux antibiotiques, son antibiogramme
TRANSCRIPT
Pseudomonas Pseudomonas aeruginosaaeruginosa
La bactérie ,
sa sensibilité aux antibiotiques ,
son antibiogramme.
INTRODUCTION
• Bactérie de l’environnement
• Pathogène opportuniste
• Infections graves
• Résistance aux antibiotiques
La bactérieLa bactérie
1882 Charles GESSARD
En latin : puons =pus cyaneus = bleu foncé
Espèce – type du genre PSEUDOMONAS
Bactérie ubiquitaire
Saprophyte environnement humide : eau et sol
Pathogène opportuniste chez les malades immunodéficients
Facteurs de pathogénicité+++ Résistance +++ (ATB et ATS)
Infections nosocomiales (8 à 10% selon ACAR) et communautaires
Habitat Réservoirs
EAUX : Rivière , eaux usées , boues activées , eau de piscine,
eaux minérales , eaux thermales, eaux de boisson .
VEGETAUX : Légumes , Salades , fruits , fleurs et aliments
ENVIRONNEMENT HOSPITALIER :
Matériel chirurgical ( humidificateur , barbotteur , KT , endoscopes…) ,
Solutions antiseptiques (Eosine aqueuse)
Solutions de nettoyage des lentilles de contact
Médicaments et produits cosmétiques
Lieux humides , lavabos , baignoires , cuvettes , éponges , porte-savon…
HOMME :
Expectorations, urines , pus ORL , pus articulaires , PV , liquide pleural , selles ,
zones humides (périné , creux axillaire ) : Colonisation
Pouvoir pathogène : Infections :• Infections oculaires: kératites, abcès de cornée, endophtalmies
• Infections cutanées bénignes ou graves : Ectyma Gangrenosum, infections de plaies chirurgicales, infections chez les brûlés
• Infections respiratoires (mucoviscidose)
• Otites– externes aiguës ou malignes– moyennes chroniques
Colonisation• Origine endogène ++– muqueuses pharyngées et intestinales colonisées• adhésion et multiplication• Transmission– croisée manuportée– solution aqueuse ou équipement contaminé
Mortalité des IN : Très élevée
– jusqu’à 50-70 % au cours des pneumopathies
– jusqu’à 30-50 % au cours des septicémies
P. aeruginosa : CARACTERES BACTERIOLOGIQUES
MORPHOLOGIE :
petit bacille fin
1.5-3µ x 0.5-0.8 µ
Gram – très mobile (vol de moucheron) en AEROBIOSE
asporulé ,
SLIME : Couche mucoïde donnant un aspect muqueux à la
culture et une plus grande virulence ( s’oppose à la phagocytose)
Caractères morphologiques
Caractères culturaux
Colonies ‘la ’
Colonies ‘M’
Colonies ‘sm’
Culture facile sur milieu nutritif simple
Bactérie aérobie stricte
Culture entre 8°C et 41°C
Production de pyocyanine et de Pyoverdine
Dégage une odeur arome de Jasmin par
production
d’orthoamino-acétophénone
Caractères biochimiques
Oxydase + , Catalase + , réduction des nitrates jusqu’au stade N2
Métabolisme respiratoire (MEVAG :Oxydatif)
TSI : Lactose - , Saccharose - , H2S –, Gaz- (pente gris métallisée)
Citrate +, ADH + , Acetamide +
Sa sensibilité aux Sa sensibilité aux antibiotiquesantibiotiques
Résistances Naturelles :
• Pénicillines G, A et M• C1G, C2G et certaines C3G• Cotrimoxazole• Macrolides, Cyclines• Chloramphénicol• Quinolones de première génération• Kanamycine• Rifampicine, glycopeptides, ac. fusidique
Molécules actives :• Carboxypenicillines : ticarcilline• Ureidopenicillines : Piperacilline• Ticarcilline+Acide clavulanique• piperacilline +Tazobactam• Monobactames : Aztreonam• Carbapénèmes : Imipénème , Méropénème• ceftazidime, cefsulodine, céfépime, cefpirome
• Aminosides : gentamicine, tobramycine, amikacine, nétilmicine,isépamicine
• Fluoroquinolones : Ciprofloxacine
• colimycine • fosfomycine
Résistance naturelle
1. imperméabilité2. Systèmes d’efflux actifs3. Hydrolyse enzymatique( ex:céphalosporinase chromosomique bas niveau)
Mécanismes de résistance de P. aeruginosa
Résistance acquise
1. Modification de la perméabilité2. Hyper expression efflux actif3. modification de la cible4. Hydrolyse enzymatique
ATB
++++
Inactivation enzymatique (naturelle ou acquise)
Efflux actifs (naturels)
hyper expression (acquise)
Imperméabilité
(naturelle ou acquise)
Modification de la cible (acquise)
Cellule bactérienne
Mécanismes de R. acquise Mécanismes de R. acquise aux aux β-Lactaminesβ-Lactamines
ENZYMATIQUES:
-Penicillinases transférables (PSE , OXA ,TEM)
-Cephalosporinases déreprimées
-BLSE (PER-1 , OXA , TEM, SHV)
-Imipénèmase (IMP-1)
NON ENZYMATIQUES :
- perte de la porine D2 (modification de la perméabilité)
- Hyper expression d’efflux actif
- modification structurale du LPS (modification de perméabilité)
- modification d’affinité des PLP (modification de cible)
Résistance aux AminosidesRésistance aux Aminosides
RESISTANCE
NATURELLE ACQUISE
Kanamycine - Non enzymatique
- Enzymatique
Résistance non enzymatique :
• Inhibition du transport actif (perméabilité) +
+
• Efflux (Mex XY-OprM) +++
• Mutation ribosomale (cible) +
Résistance enzymatique +++ (AAT , ANT , autres enzymes )
Associations fréquentes
Mécanismes de résistance acquise
• Diminution d’affinité de la cible
– DNA gyrase- topoisomérase II, sous-unités A (gyrA)
– topo-isomérase IV (parC)
• Imperméabilité
– porines (oprF) , LPS
• Hyper expression de divers systèmes d’efflux
• Associations fréquentes
Résistance aux FluoroquinolonesRésistance aux Fluoroquinolones
Son antibiogrammeSon antibiogramme
Technique : Méthode de diffusion en géloseFiche technique n°1 : Bactéries non exigeantes (fascicule: Standardisation
de l’antibiogramme en Médecine humaine à l’échelle nationale selon les recommandations de l’OMS 4ème édition 2005)
Inoculum : 0,5 MF
Ensemencement de 2 boîtes rondes (90mm ø) de milieu Mueller-Hinton
CIP
GM
AN
FOS
TOBCAZ
IMP
PIPTIC
ATM
TCC
24mm
Liste des antibiotiques à tester
Ticarcilline (TIC)
Ticarcilline + Acide Clavulanique (TCC)
Pipéracilline (PIP)
Ceftazidime (CAZ)
Aztreonam (AZM)
Imipeneme (IMP)
Gentamicine (GM)
Tobramycine (TOB)
Amikacine (AN)
Ciprofloxacine (CIP)
Fosfomycine (FOS)
Contrôle de qualité :
souche Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Lecture :
Mesurer avec précision à l’aide d’un pied à coulisse , les diamètres des zones d’inhibition , à l’extérieur de la boîte fermée.
Comparer ces diamètres aux valeurs critiques de la table de lecture n°10 page 100 du fascicule de Standardisation .
Classer la bactérie dans l’une des catégories S , I , R
Lecture interprétative : nécessite de connaître les mécanismes de résistances de Pseudomonas aeruginosa .
Lecture et interprétation
Molécules à tester
BêtalactaminesBêtalactamines
Phénotype
Sauvage
TIC S
PIP S
TCC S
CAZ S
ATM S
IPM S
Phénotype sauvage
Présence d’une céphalosporinase chromosomique inductible Amp C
(Antagonisme entre TIC : substrat
et l’inducteur IPM)antagonis
me
Phénotype sauvage :
Céphalosporinase chromosomique inductible :
Substrats : TIC , CAZ
Inducteur : IMP
Expression d’une pénicillinase
Haut niveau
Résistance à la TIC et à la PIP
Restauration par l’Acide Clavulanique de l’activité de la TIC
Pseudomonas aeruginosa PSE-1
Pseudomonas aeruginosa PSE-3
Expression d’une Pénicillinase bas niveau:
•Résistance à la TIC et sensibilité à la PIP
•Restauration de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique
Pseudomonas aeruginosa OXA-4
Expression d’une autre Pénicillinase bas niveau:
•Résistance à la TIC et à la PIP
•Restauration faible de l’activité de la TIC par l’acide clavulanique
Phénotype : Céphalosporinase déréprimée
Phénotype Céphalosporinase déréprimée :
Hyperproduction de la Céphalosporinase chromosomique (mutation)
Phénotype BLSE
BLSE : Image de Synergie entre TCC (Ticarcilline+Acide Clavulanique) et Aztreonam (ou Ceftazidime)
Phénotype BLSE
Altération Porine D2
Altération Porine D2
Phénotype :
Carbapénèmase VIM-2
Phénotype hyper expression d’efflux actif
Autres moléculesAutres molécules
Phénotype
Sauvage
GM S
TOB S
AMK S
Antibiotiques 2005 (n=2228)
Ticarcilline 17%
Pipéracilline 17,2%
Ceftazidime 13,2%
Imipenem 10,7%
Gentamicine 20,3%
Tobramycine 17%
Amikacine 9,2%
Pefloxacine 31,7%
Ofloxacine 21,6%
Ciprofloxacine 15%
Données de résistance (R+I) aux antibiotiques de P.aeruginosa pour l’année 2005 -Réseau AARN
CONCLUSION
Bactérie saprophyte donc naturellement multi résistante
Nombreux mécanismes de résistance acquise avec fréquente
intrication de plusieurs mécanismes
Difficultés thérapeutiques car
Multi résistance+terrain