profil esterase non spesifik nyamuk aedes aegypti … · semua teman, sahabat tercinta, atas...
TRANSCRIPT
PROFIL ESTERASE NON SPESIFIK NYAMUK Aedes aegypti
DARI DAERAH ENDEMIS DAN NON ENDEMIS DBD KOTA
JAMBI DENGAN METODE ELEKTROFORESIS
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh : Victoria Hapsari NIM : 028114117
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA
2007
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Skripsi B*judul :
PROFIL ESTERAStr NON SPESIFIK I\tYAMUK,ades ,eg,p'J
DAR] DAERAH ENDEMIS DAN NON trNDEMIS DBD KOTA
JAMBI DENGAN METODE ELEKTROFORDSIS
NIM:028114117
i N4ult&ingsih, M S,, Apr
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PROFIL ESTDRASE NON SPESIFIK ltYAMUK,rades az&"rtDARI DAf,RAII ENDEMIS DAN NON EIIDEMIS DBD KOTA
JAMBI Df, NGAN MDTODE ELf, KTROFORXSIS
OLh Ivicloda fbpsdi
N lM:028114117
Dipertrn!.b! dihr.Lpd D4.! P@elii SkriFlif.k .s r.|1di
Univdit$ S..rh D[IdP.d. tt4gtl
18 Agush. 2007
l. Dr, B[di MdlEil8lin M-S., ApL
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
i asked for strength… and GOD gave me difficulties to make me strong i asked for wisdom… and GOD gave me problem to solve i asked for courage… and GOD gave me obstacle to overcome i asked GOD for favors and GOD gave me opportunities i received nothing i wanted… but i received everything i needed
Lord knows Dreams are hard to follow
But don't let anyone Tear them away
Hold on There will be tomorrow
In time You'll find the way
(Mariah Carey _Hero)
karya ini kupersembahkan untuk: Bunda Maria-Yesus Kristus
Bapak-Ibu ”who called me Queen”
dan Almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PERNYATAAN (IASLIAN KARYA
Say. ndyataks dengd ses@eguhny. balva skiFi iarg sava !uli5 i
lidrl ddult karye alau baei& kltF o@g lai4 k@udi )dg telah diselutkd
daldlotipd d@ dgftd pBtaLa, ebasaimM l6tdoy. k rya ilniat!
"-*":.'
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
KATA PENGANTAR
Syukur dan terima kasih kepada Tuhan Maha Pengasih atas terselesaikannya
skripsi “Profil Isoenzim Esterase Non Spesifik Nyamuk Aedes aegypti Dari Daerah
Endemis Dan Non Endemis DBD Kota Jambi Dengan Metode Elektroforesis” ini, guna
memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) program
studi Ilmu Farmasi.
Semua keberhasilan ini tidak lepas pula dari bantuan berbagai pihak, yang telah
berjasa membantu hingga terselesaikannya skripsi ini. Untuk itu, penulis ingin
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Rita Suhadi, M.Si, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma.
2. Ibu Dr. Budi Mulyaningsih, M.S., Apt., selaku dosen pembimbing dan dosen penguji
skripsi yang telah meluangkan waktu dan perhatian dengan penuh kesabaran
membimbing sampai selesainya skripsi ini.
3. Bapak Drs. Mulyono, Apt., dan Bapak Dr. Sabikis, Apt., selaku dosen penguji skripsi
yang telah banyak memberi masukan kepada penulis.
4. Kepala BAPEDA Propinsi Daerah Istimewa Yogyakarta, Kepala Badan Kesbang dan
Linmas Kota Jambi, dan Kepala Dinas Kesehatan Kota Jambi yang telah mengijinkan
penulis melakukan penelitian di Kota Jambi dan memberikan data yang dibutuhkan
penulis.
5. Bapak Purwono selaku laboran Bagian Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas
Gajah Mada yang membantu pelaksanaan penelitian skripsi.
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6. Bapak Fx. Abu Wuryanto, Ibu M.G. Rita Iriyanti, Gregorius H. Eko Wuryanto,
Nicholas Aryo Bimo Wuryanto dan Moses Amor Deo Wuryanto yang selalu
mendoakan, memberi dorongan serta kasih selama pengerjaan skripsi ini.
7. Yusuf Firmanta dan keluarga, atas kasih, kesetiaan serta bantuan yang telah diberikan
hingga terselesaikannya skripsi ini.
8. Semua teman, sahabat tercinta, atas persahabatan, pengertian dan dukungannya
selama ini serta bantuan infomasi yang sangat membantu.
9. Semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini dan tidak dapat disebutkan
satu per satu.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan. Oleh karena itu, segala saran dan kritik yang bersifat membangun sangat
penulis harapkan.
Yogyakarta, Juli 2007
Penulis
vii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
DAFTAR ISI
Hal.
HALAMAN JUDUL……………..………………………………………... i
HALAMAN PERSETUJUAN...…………………………………………... ii
HALAMAN PENGESAHAN………..……………………………............. iii
HALAMAN PERSEMBAHAN..………………………………….............. iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA…………………………………… v
KATA PENGANTAR................................................................................... vi
DAFTAR ISI………………………………………………………............. viii
DAFTAR TABEL…………………………………………………............. xi
DAFTAR GAMBAR…………………………………………………......... xii
DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………............. xiii
INTISARI………………………………………………………………….. xiv
ABSTRACT……………………………………………………………….. xv
BAB I PENGANTAR……………………………………………………. 1
A. Latar Belakang……………………………………………………......... 1
B. Permasalahan……………………….......………………….………........ 4
C. Keaslian Karya…...……………….......…………………………........... 5
D. Manfaat Penelitian…………………….......…….…………………........ 5
E. Tujuan Penelitian………………………………………….……….......... 6
BAB II PENELAAHAN PUSTAKA.......................................................... 7
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
A. Demam Berdarah Dengue ..............…………………………….............. 7
B. Nyamuk Ae. aegypti....................................……………………………... 8
1. Kedudukan Taksonomi Nyamuk Ae. aegypti.................................... 8
2. Morfologi Nyamuk Ae. aegypti......................................................... 9
3. Siklus hidup Nyamuk Ae. aegypti..................................................... 12
C. Pengendalian Vektor……………………………………….................… 14
D. Insektisida................................................................................................. 15
E. Mekanisme Resistensi Serangga Terhadap Insektisida............................ 19
F. Enzim Esterase Non-Spesifik…………………………………………… 21
G. Elektroforesis............................................................................................ 24
H. Landasan Teori......................................................................................... 27
I. Keterangan Empiris.................................................................................. 27
BAB III METODOLOGI PENELITIAN..................................................... 28
A. Jenis dan Rancangan Penelitian………………………………………... 28
B. Subjek Penelitian………………………………………………………. 28
B. Definisi Operasional……………………………………........................ 29
C. Bahan dan Alat Penelitian……...........................……………….............. 30
1. Bahan Penelitian………………………………………………….. 30
2. Alat Penelitian…………………………………………………….. 30
E. Jalannya Penelitian……………………………………........................... 30
F. Analisis Hasil……………….…………………………...….................... 35
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................... 36
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN....................................................... 46
A. Kesimpulan................................................................................................ 46
B. Saran.......................................................................................................... 46
DAFTAR PUSTAKA.................................................................................... 48
LAMPIRAN................................................................................................... 53
BIOGRAFI PENULIS.................................................................................... 64
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel I. Jumlah bahan yang digunakan dalam pembuatan gel bawah..................................................................................
32
Tabel II. Jumlah bahan yang digunakan dalam pembuatan gel atas.......................................................................................
33
Tabel III. Enzim esterase non-spesifik dan jumlah pita yang dihasilkan dari kelompok nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemik DBD), Kelurahan Sijenjang (daerah non-endemik DBD), dan Salatiga sebagai kontrol................................................................................
42
Tabel IV. Kecepatan gerak (jarak) isoenzim esterase non-spesifik dalam medan listrik (Rf) setiap pita yang terdapat pada zymogram hasil elektroforesis untuk setiap kelompok nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemik DBD), Kelurahan Sijenjang (daerah non-endemik DBD), dan Salatiga sebagai kontrol................................................................................
43
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Telur nyamuk Ae. aegypti.................................................. 9
Gambar 2. Perbedaan gigi sisir pada larva Ae. aegypti dengan Ae. albopictus dan Ae. Scutellaris............................................
10
Gambar 3. Larva nyamuk Ae. aegypti.................................................. 10
Gambar 4. Pupa nyamuk Ae. aegypti................................................... 11
Gambar 5. Perbedaan toraks nyamuk Ae. aegypti (A) dan Ae. albopictus (B)....................................................................
12
Gambar 6. Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti....................................... 13
Gambar 7. Reaksi metabolisme atau detoksifikasi cypermetrin dalam tubuh serangga atau mamalia oleh enzim esterase..
22
Gambar 8. Zymogram isoenzim esterase non-spesifik dari kelompok nyamuk Ae. aegypti daerah endemis (3), daerah non endemis (2), dan kontrol (1) yang ditandai dengan E1 (pita pertama), E2 (pita kedua), dan E3 (pita ketiga).......... 36
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Ijin Penelitian dari BAPEDA Yogyakarta............. 53
Lampiran 2. Surat Ijin Penelitian dari KESBANGLIMAS Kota Jambi...............................................................................
54
Lampiran 3. Surat pernyataan pemberantasan nyamuk di Kota Jambi tahun 2005-2006..............................................................
55
Lampiran 4. Data kasus penyakit DBD di Kota Jambi tahun 2003-2005.................................................................................
56
Lampiran 5. Perhitungan kecepatan gerak isoenzim esterase non-spesifik dalam medan listrik (Rf)....................................
58
Lampiran 6. Perhitugan analisis data frekunsi elektromorf dengan menggunakan analisis Chi-square (perhitungan tabel kontingensi 2x2 (rxc) untuk pola zymogram elektroforetik isoenzim esterase).....................................
60
Lampiran 7. Foto alat-alat penelitian................................................... 61
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
INTISARI
Empat puluh tahun terakhir, insektisida digunakan dalam pengendalian
vektor Demam Berdarah Dengue (DBD) di Indonesia. Sebagai akibatnya, Ae. aegypti di beberapa daerah Indonesia, menjadi resisten terhadap insektisida. Enzim esterase memegang peran pendetoksifikasian insektisida sehingga semua insektisida yang masuk akan dihidrolisis menjadi senyawa yang kurang beracun .
Tujuan penelitian ini adalah mengetahui profil esterase non-spesifik nyamuk Ae. aegypti (subjek penelitian) dari Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Sijenjang (daerah non-endemis DBD), dengan metode elektroforesis. Penelitian ini termasuk penelitian non-eksperimental dengan rancangan deskriptif dan analitik.
Zymogram dianalisis secara kualitatif, yaitu dengan membandingkan intensitas warna pola pita zymogram nyamuk subjek penelitian dengan kontrol, menghitung kecepatan gerak (jarak) esterase non-spesifik dalam medan listrik (Rf) dan analisis menggunakan Chi-square (p < 0,05).
Dari analisis menggunakan Chi-square (p < 0,05), menunjukkan adanya perbedaan aktivitas esterase non spesifik nyamuk dari Sijenjang dengan Simpang III Sipin. Untuk hasil perhitungan Rf pita 1, 2 dan 3, antara nyamuk dari Sijenjang dengan Simpang III Sipin dan kontrol hanya pita 3 yang terdapat perbedaan, namun ketiganya tidak menunjukkan perubahan yang berarti pada komposisi protein penyusun esterase non-spesifik pada nyamuk perlakuan maupun kontrol. Hasil analisis kualitatif diperoleh intensitas warna pola pita nyamuk Ae. aegypti dari Simpang III Sipin lebih pekat dan Sijenjang intensitas warnanya lebih terang dibandingkan kontrol. Kata kunci : Demam Berdarah Dengue, Aedes aegypti, resistensi insektisida,
profil isoenzim esterase non-spesifik, elektroforesis.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
ABSTRACT
The use of insecticide to control Dengue Haemorrhagic Fever (DHF)
vector in Indonesia during the last 40 years resulted in the resistency of the insect toward insecticides, including Ae. aegypti in some areas in Indonesia. Esterase enzyme has its main part in this insecticide detoxification became untoxic substance.
This study was aimed to the profile description of non-specific esterase of Ae. aegypti (research subject) from Simpang III Sipin (DHF endemic area) and Sijenjang (DHF non-endemic area) by using electrophoresis method. This study was non experimental research with descriptive and analytical design.
Zymogram was analyzed qualitative. The former was carried out by comparing the stained intensity the banding pattern of zymogram between the research subject mosquito and the controlled ones, by calculating the moving speed (distance) of esterase in electric current (Rf), and analyzed by Chi-square (p < 0.05).
Ae. aegypti from Simpang III Sipin and Sijenjang had different activities of esterase based on the used of Chi-square (p<0.05). The result of Rf calculation on the first, second and third band between Sijenjang with Simpang III Sipin mosquito and the controlled mosquito, only on the third band showed difference, but it was proof that there was no change on the composition of the protein in non-specific esterase both to the treated mosquito and the controlled ones. The banding pattern of Ae. aegypti from Simpang III Sipin showed high intensity and from Sijenjang showed low intensity, if its compared to the control. Keywords : Dengue Haemorrhagic Fever, Aedes aegypti, insecticide resistance,
non-specific esterase isoenzyme profile, electrophoresis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Demam Berdarah Dengue (DBD), adalah penyakit yang kemungkinan
besar menyebabkan kematian, pertama kali dilaporkan pada tahun 1950-an saat
epidemik dengue di Filipina dan Thailand. Penyakit ini sekarang endemik pada
lebih dari 100 negara di Afrika, Amerika, Timur Tengah, Asia Tenggara dan
Pasifik Barat. Asia Tenggara dan Pasifik Barat merupakan wilayah yang paling
serius terpengaruh. Sebelum tahun 1970, hanya 9 negara yang terjangkit epidemik
DBD, angka menjadi bertambah lebih dari 4 kali lipat pada tahun 1985. World
Health Organization (WHO) menaksir sekitar 50 juta kasus infeksi dengue dari
seluruh dunia setiap tahunnya (Anonim, 2002a).
Di Indonesia, penyakit dengue merupakan masalah kesehatan masyarakat
utama setiap tahunnya dan penyebab siklus epidemik di daerah perkotaan.
Penyakit ini merupakan penyebab utama anak-anak dirawat inapkan dan
meninggal. Secara terus-menerus epidemik telah dicatat terjadi diantara bulan
Januari dan Juni. Selama epidemik di tahun sebelumnya, kasus terbesar dicatat
lebih dari 40.000 pada tahun 1988, 1996, 1998, 2001, 2003 dan 2004, pada tahun
1998 mencapai 72.133 kasus dan tahun 2004 mencapai 69.017 kasus. Pada tahun
2004, ditegaskan bahwa kasus dengue dilaporkan dari Propinsi Aceh, Jambi,
Banten, Jawa Barat, Jawa Tengah, Yogyakarta, Jawa Timur, Kalimantan Selatan,
Bali, NTB dan NTT (Anonim, 2005a).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Penyakit DBD ditularkan oleh nyamuk Aedes aegypti. Virus dengue
dipindahkan dari satu orang ke orang lain bersama air liur nyamuk pada waktu
nyamuk menghisap darah (Sungkar, 2005). Mengingat sampai saat sekarang
belum diketemukan vaksin untuk membunuh virus dengue, penanggulangan
penyakit ini berupa perawatan penderita dan pengendalian vektornya (Munif,
1997a). Pengendalian Ae. aegypti sebagai vektor utama DBD dapat dilakukan
dengan berbagai metode di antaranya dengan sanitasi lingkungan, yang bertujuan
untuk mengurangi habitat larva (source reduction), pemberantasan dengan
menggunakan insektisida baik ditujukan pada nyamuk dewasa maupun larvanya
(Munif, 1997b).
Selama 40 tahun terakhir, bahan kimia telah digunakan secara luas untuk
mengontrol nyamuk dan serangga lainnya sebagai kepentingan kesehatan
masyarakat. Sebagai akibatnya, Ae. aegypti dan vektor dengue lainnya di beberapa
negara telah menjadi resisten terhadap insektisida yang umum digunakan termasuk
temephos, malathion, fenthion, permethin, propoxur dan fenitrothion (Anonim,
1999). Seperti yang dilaporkan oleh Georghiou dan Mellon (1983) cit.
Mardihusodo (1995), resistensi vektor terhadap insektisida telah terus menerus
menyebar dan mempengaruhi program pengendalian penyakit di banyak negara.
Data mengenai pemberantasan penyakit DBD dari Dinas Kesehatan Kota
Jambi (2006a), menunjukan bahwa telah dilakukan pengendalian vektor DBD,
yaitu nyamuk Ae. aegypti, dengan pengasapan menggunakan insektisida Cynoff.
Cynoff mengandung Cypermethrin, merupakan insektisida golongan piretroid
sintetik yang biasa digunakan secara luas sebagai pengendali hama profesional
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
untuk sebagian hama rumah tangga (Anonim, 1993). Pada semua piretroid
mempunyai beberapa ciri umum, yaitu molekul asam, ikatan utama ester dan
molekul alkohol (Shafer, Meyer and Crofton, 2005).
Esterase adalah enzim yang memecah ikatan ester dengan cara hidrolisis
(Poedjiadi, 1994). Isoenzim esterase non-spesifik telah banyak dipelajari secara
luas, sebab dapat digunakan sebagai indikator perbedaan geografis dan pada
beberapa spesies berkaitan dengan mekanisme terjadinya resistensi terhadap
insektisida (Tabachnick & Powell, 1979 cit Marvdashti, 1985).
Aplikasi insektisida pada nyamuk akan menyeleksi gen-gen resistensi yang
mengatur derajat resistensi yang terkait dengan enzim esterase yang
mendetoksifikasi bahan insektisida tersebut. Peningkatan aktivitas enzim esterase
akan menaikkan dosis letal menjadi subletal yang tidak lagi mematikan serangga
yang menjadi sasaran (Mardihusodo, 1996).
Elektroforesis gel poliakrilamida telah digunakan untuk penelitian variasi
esterase pada populasi Aedes albopictus Skuse dari beberapa daerah endemis dan
non endemis DBD di Indonesia. Hasil dari elektroforesis setiap populasi Ae.
albopictus menunjukkan pola pita isoenzim esterase yang berbeda (Mulyaningsih,
2002). Dari penelitian sebelumnya dengan menggunakan elektroforesis lapis tipis,
Yasutomi (1983) cit Mardihusodo (1996) melaporkan aktivitas esterase pada 4
spesies nyamuk Culex pipiens, Cx. pipiens fatigan, Cx. tritaeniorrhynchus, dan Ae.
aegypti menghasilkan zymogram yang berbeda. Ditemukan adanya aktivitas
eseterase menghidrolisis β-naftil asetat pada koloni nyamuk yang resistensi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
terhadap insektisida dibandingkan dengan koloni nyamuk yang masih rentan pada
spesies yang sama.
Berdasarkan data Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006b), dari tahun 2003-
2005 terdapat 7 Kelurahan yang termasuk daerah non-endemis DBD yaitu
Kelurahan Teluk Kenali, Sijenjang, Tanjung Raden, Pasir Panjang, Jelmu,
Kampung Tengah, dan 1 daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin.
Dari 7 Kelurahan yang termasuk daerah non-endemis, diambil secara acak 1
Kelurahan sebagai daerah non-endemis, yaitu Kelurahan Sijenjang. Selama 3
tahun berturut-turut, Kelurahan Simpang III Sipin yang merupakan daerah
endemis DBD, telah terjadi 37 kasus, sedangkan Kelurahan Sijenjang, tidak
terdapat kasus DBD.
Dengan adanya kenyataan tersebut di atas maka perlu dilakukan penelitian
profil esterase non-spesifik dengan menggunakan metode elektroforesis untuk
nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis dan non-endemis DBD Kota
Jambi. Dari gambaran profil isoenzim esterase non-spesifik ini diharapkan dapat
memprediksi mekanisme dan tingkat resistensi nyamuk tersebut terhadap
insektisida yang biasa digunakan dalam pengendalian vektor penyakit DBD.
B. Permasalahan
Bagaimanakah gambaran profil esterase non-spesifik dari masing-masing
populasi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis dan non-endemis
DBD Kota Jambi?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
C. Keaslian Penelitian
Berdasarkan sumber-sumber informasi yang diperoleh, penelitian ilmiah
tentang profil esterase non-spesifik dengan menggunakan metode elektroforesis
pada nyamuk Aedes sudah pernah dilakukan di beberapa daerah, namun penelitian
tentang penentuan profil esterase non spesifik pada nyamuk Ae. aegypti yang
berasal dari daerah endemis dan non-endemis DBD Kota Jambi dengan metode
elektroforesis belum pernah dilakukan.
D. Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah:
1. Manfaat teoritis, menambah khasanah ilmu pengetahuan dan kesehatan
terutama mengenai gambaran profil esterase non-spesifik pada nyamuk Ae.
aegypti dalam kaitannya dengan pemilihan insektisida yang efektif untuk
usaha pengendalian vektor penyakit DBD.
2. Manfaat praktis, memberikan data dasar gambaran profil esterase non-spesifik
dari masing-masing populasi nyamuk Ae.aegypti yang berasal dari daerah
endemis dan non endemis DBD Kota Jambi, dalam hal ini dapat memberikan
gambaran secara tidak langsung mengenai status resistensinya terhadap
insektisida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
E. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk memperoleh data dasar gambaran profil
esterase non-spesifik, masing-masing populasi nyamuk yang berasal dari daerah
endemis dan non-endemis DBD Kota Jambi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Demam Berdarah Dengue
Penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD) atau Dengue Haemorrhadic
Fever (DHF) merupakan penyakit akibat infeksi virus dengue yang masih menjadi
masalah kesehatan masyarakat. Penyakit ini ditemukan hampir di seluruh dunia
terutama negara-negara tropik dan subtropik baik sebagai penyakit endemik
maupun epidemik. Kejadian Luar Biasa pertama penyakit ini terjadi di Jakarta dan
Surabaya pada tahun 1968 dengan ditemukannya 54 kasus dan 24 (44%) kasus
diantaranya meninggal dunia. Setelah itu, jumlah kasus akibat terinfeksi virus
dengue yang dilaporkan meningkat secara tajam. Pada tahun 1994, penyakit akibat
infeksi virus dengue ini telah menyebar ke seluruh propinsi di Indonesia dan
bahkan sejak tahun 2001 telah menjadi suatu penyakit endemik di beberapa kota
besar dan kecil, bahkan di daerah pedesaan (Djunaedi, 2006).
Nyamuk Ae. aegypti adalah salah satu nyamuk vektor yang paling efisien
untuk arbovirus, karena nyamuk ini sangat antropofilik dan hidup dekat manusia
dan sering hidup di dalam rumah. Wabah dengue juga dapat terjadi dengan adanya
nyamuk Ae. albopictus, Ae. polynesiensis, dan banyak spesies kompleks Ae.
scutellaris. Setiap spesies ini mempunyai distribusi geografisnya masing-masing,
namun mereka adalah vektor epidemia yang kurang efisien dibanding Ae. aegypti
(Anonim, 1999).
Upaya pemberantasan dan pencegahan terhadap peluang terinfeksi virus
dengue masih bertumpu pada pemberantasan vektor pembawa dengue. Upaya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
yang dikenal dengan nama PSN (Pemberantasan Sarang Nyamuk) atau 3M
(Menguras, Menutup dan Mengubur/Menyingkirkan tempat penampungan air).
Pencegahan terhadap serangan infeksi virus dengue dengan memanfaatkan vaksin
dengue nampaknya belum menunjukkan yang diharapkan (Djunaedi, 2006).
B. Nyamuk Ae. aegypti
Nyamuk Ae. aegypti telah dikenal sejak lama oleh orang sebagai penyebar
virus dengue penyebab penyakit DBD. Nyamuk ini ditemukan pertama kali di
Mesir (Egypt) pada tahun 1762 oleh Linnaeus. Nyamuk Ae. aegypti sekarang
ditemukan di negara-negara yang terletak di antara garis 45 Lintang Utara dan
garis 35 Lintang Selatan (Wulandari, 2001).
1. Kedudukan taksonomi nyamuk Ae. aegypti
Menurut Gandahusada, Ilahude dan Pribadi (1998), Ae. aegypti termasuk
dalam:
Filum : Arthropoda
Kelas : Hexapoda/Insekta
Anak kelas : Pterygota
Bangsa : Diptera
Anak bangsa : Nematocera
Suku : Culicidae
Anak suku : Culicinae
Marga : Aedes
Jenis : Aedes aegypti
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
2. Morfologi nyamuk Ae. aegypti
a. Telur
Telur Aedes berbentuk lonjong dengan kedua ujung sedikit lancip dan
berdinding yang menggambarkan anyaman kain kasa (Gandahusada, et al.,
1998). Pada waktu diletakkan telur bewarna putih, 15 menit kemudian telur
menjadi abu-abu dan setelah 40 menit menjadi hitam.
Di bawah mikroskop susunan permukaan telur tampak seperti sarang
tawon. Telur diletakkan satu persatu di dinding tempat penampungan air
(TPA) 1-2 cm di atas permukaan air. Air di dalam tempat tersebut adalah air
jernih dan terlindung dari cahaya matahari langsung. Tempat air di dalam
rumah lebih disukai dari pada di luar rumah, dan tempat air yang lebih dekat
rumah lebih disukai dari pada yang lebih jauh dari rumah. Telur dapat bertahan
sampai 6 bulan (Sungkar, 2005).
Gambar 1. Telur Ae. aegypti (Mortimer, 1998)
b. Larva
Larva Ae. aegypti terdiri atas kepala, toraks, dan abdomen. Pada ujung
abdomen terdapat segmen anal dan sifon. Larva instar IV mempunyai tanda
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
khas yaitu pelana yang terbuka pada segmen anal, sepasang bulu pada sifon,
dan gigi sisir yang berduri lateral pada segmen abdomen ke-7 (Sungkar, 2005).
Larva Ae. aegypti bergerak sangat lincah dan sangat sensitif terhadap
rangsang getaran dan cahaya. Bila ada rangsangan, larva segera menyelam
selama beberapa detik kemudian muncul kembali ke permukaan air. Larva
mengambil makanannya di dasar TPA sehingga disebut pemakan makanan di
dasar (bottom feeder). Pada saat larva mengambil oksigen dari udara, larva
menempatkan sifonnya di atas permukaan air sehingga abdomennya terlihat
menggantung pada permukaan air (Sungkar, 2005).
Gambar 2. Perbedaan gigi sisir pada larva Ae. aegypti dengan Ae. albopictus dan Ae. Scutellaris (Mardihusodo, 1990)
Gambar 3. Larva Ae. aegypti (Anonim, 2002c)
c. Pupa
Pupa terdiri atas sefalotoraks, abdomen dan kaki pengayuh.
Sefalotoraks mempunyai sepasang corong pernapasan berbentuk segitiga. Pada
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
bagian distal abdomen ditemukan sepasang kaki pengayuh yang lurus dan
runcing. Jika terganggu, pupa akan bergerak cepat untuk menyelam selama
beberapa detik kemudian muncul kembali ke permukaan air (Sungkar, 2005).
Gambar 4. Pupa Ae. aegypti (Anonim, 2002c)
d. Nyamuk dewasa
Bagian tubuh nyamuk dewasa terdiri atas kepala, toraks dan abdomen
(Sungkar, 2005). Ae. aegypti dewasa berukuran lebih kecil jika dibandingkan
dengan ukuran nyamuk rumah (Culex quinquefasciatus), mempunyai warna
dasar yang hitam dengan bintik-bintik putih pada bagian-bagian badannya
terutama pada kakinya (Gandahusada, et al., 1998).
Tanda khas Ae. aegypti berupa gambaran lyre pada bagian dorsal toraks
(mesonotum) yaitu sepasang garis putih yang sejajar di tengah dan garis
lengkung putih yang lebih tebal pada tiap sisinya. Probosis berwarna hitam,
skutelum bersisik lebar berwarna putih dan abdomen berpita putih pada bagian
basal. Ruas tarsus kaki belakang berpita putih (Sungkar, 2005). Perbedaan
morfologi nyamuk Ae. aegypti dan Ae. albopictus dapat terlihat pada stadium
dewasanya. Pada nyamuk Ae. aegypti, pada toraks (mesonatum) mempunyai
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
gambaran lyre, sedangkan nyamuk Ae. albopictus terdapat satu garis
longitudinal..
Gambar 5. Perbedaan toraks nyamuk Ae. aegypti (A) dan Ae. albopictus (B)(Grantham, 1999)
3. Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti
Nyamuk Ae. aegypti dalam siklus hidupnya mengalami metamorfosa
lengkap (holometabola), sebagaimana serangga lain dalam Ordo Diptera. Stadium
yang dialami meliputi stadium telur, larva, pupa dan dewasa (Wulandari, 2001).
Nyamuk betina meletakkan telurnya pada dinding tempat perindukannya.
Seekor nyamuk betina dapat meletakkan rata-rata sebanyak 100 butir telur tiap kali
bertelur (Gandahusada, et.al, 1998). Telur dapat bertahan sampai berbulan-bulan
pada suhu -2°C sampai 42°C. namum bila kelembaban terlampau rendah, maka
telur akan menetas dalam waktu 4 hari (Soedarmono, 1988).
Telur akan menetas menjadi larva dalam 1-2 hari, selanjutnya larva akan
berubah menjadi pupa dalam waktu 5-15 hari. Stadium pupa biasanya berlangsung
2 hari. Dalam suasana optimum, perkembangan dari telur sampai dewasa
memerlukan waktu sekurang-kurangnya 9 hari. Setelah keluar dari pupa, nyamuk
istirahat di kulit pupa untuk sementara waktu. Pada saat itu sayap merenggang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
menjadi kaku dan kuat sehingga nyamuk mampu terbang untuk menghisap darah
manusia dan kawin sehari atau 2 hari sesudah keluar dari pupa. Umumnya nyamuk
betina akan mati dalam 10 hari, tetapi masa tersebut cukup bagi nyamuk untuk
inkubasi virus (3-10 hari) dan menyebarkan virus (Sungkar, 2005).
1
4 2
3
Gambar 6. Siklus hidup nyamuk Aedes. aegypti (Mortimer, 1998; Anonim,
2002c; Grantham, 1999) Keterangan : 1. telur 2. larva 3. pupa 4. dewasa
Kota Jambi terdiri dari 62 Kelurahan yang terbagi menjadi 8 Kecamatan.
Berdasarkan data yang diperoleh dari Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006b), dari
62 Kelurahan tersebut terdapat 1 Kelurahan yang merupakan daerah endemis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
DBD, yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan 7 Kelurahan yang merupakan daerah
non endemis, yaitu Kelurahan Teluk Kenali, Sijenjang, Tanjung Raden, Pasir
Panjang, Ulu Gedong, Jelmu dan Kampung Tengah. Pada penelitian kali ini,
Kelurahan Sijenjang ditetapkan sebagai daerah non endemis. Dari kedua daerah
yang telah ditetapkan sebagai daerah endemis dan non endemis tersebut, telur dan
larva Ae. aegypti kemudian dikoleksi.
C. Pengendalian Vektor
Obat dan vaksin untuk memberantas DBD hingga saat ini belum tersedia.
Dengan demikian pengendalian DBD tergantung pada pengendalian nyamuk
sebagai vektornya. Pengendalian vektor DBD dapat dilakukan dengan 4 cara, yaitu
pengelolaan lingkungan, perlindungan diri, pengendalian biologis, dan
pengendalian dengan bahan kimiawi (Anonim, 2004).
1. Pengendalian lingkungan
Pengelolaan lingkungan meliputi berbagai perubahan yang menyangkut
upaya pencegahan atau mengurangi perkembangbiakan vektor sehingga dapat
mengurangi kontak antara vektor dengan manusia. Metode ini dilakukan antara
lain dengan cara mengeringkan genangan air, menimbun wadah-wadah yang dapat
menampung air dan perbaikan desain rumah untuk mengurangi kesempatan
masuknya nyamuk, misalnya dengan memasang kawat nyamuk di jalan angin atau
jendela rumah (Anonim,2004).
2. Perlindungan diri
Tindakan perlindungan diri telah dilakukan secara luas dalam upaya untuk
perlindungan terhadap penyakit. Tindakan dapat dilakukan dengan pengendalian
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
diri, seperti menggunakan obat nyamuk baik semprot, bakar maupun memakai
obat oles anti nyamuk, penggunaan kelambu saat tidur dan pemasangan kawat
kasa atau kawat nyamuk (Anonim, 1999).
3. Pengendalian biologis
Pengendalian ini dilakukan dengan tujuan untuk menurunkan populasi
serangga secara alami tanpa menggangu ekologi. Termasuk dalam pengendalian
serangga secara biologik adalah menggunakan predator (binatang pemangsa
serangga), misalnya dengan memelihara ikan untuk memberantas larva nyamuk,
menyebarkan parasit penyebab penyakit pada serangga (Soedarto, 1989).
4. Pengendalian dengan bahan kimia
Pengendalian ini menggunakan bahan kimia yang berkhasiat membunuh
serangga (insektisida) atau hanya menghalau serangga saja (Repellant). Contoh
cara ini adalah menaburkan bubuk AbateR pada tempat-tempat penampungan air
untuk membunuh larva nyamuk, penggunaan insektisida bentuk spray untuk
membunuh nyamuk dewasa (Gandahusada, et al., 1998).
Semua usaha untuk mengontrol harus tertuju melawan nyamuk. Ini penting
untuk mengambil tindakan mengontrol untuk mengurangi nyamuk dan tempat
mereka berkembangbiak. Bagaimanapun, usaha harus intensif sebelum musim
penjangkitan (selama dan setelah musim penghujan) dan pada saat epidemia
(Anonim, 2002b ).
D. Insektisida
Insektisida merupakan suatu bahan yang mempunyai efek menolak atau
mematikan serangga dengan maksud membasmi serangga pengganggu atau vektor
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
penyakit yang merugikan bagi kehidupan tanaman dan manusia (Sastroutomo,
1991). Menurut Sudarmono (1991), ada bermacam-macam golongan insektisida,
baik yang berasal dari bahan alami maupun yang berasal dari bahan sintetik. Ada
beberapa cara insektisida membunuh jasad sasaran atau serangga hama :
1. fisis
2. merusak enzim
3. merusak syaraf
4. menghambat metabolisme
Menurut Untung (2001), insektisida dapat dikelompokkan dalam beberapa
cara menurut cara masuknya dalam tubuh serangga dan menurut sifat kimianya.
Untuk pengelompokan menurut cara masuknya ke tubuh serangga, dapat dibagi
menjadi 3 kelompok, yaitu:
1. Racun perut
Insektisida memasuki tubuh serangga melalui saluran pencernaan makanan
(perut). Insektisida lama umumnya merupakan racun perut. Namun ada juga
insektisida modern yang beraksi pada serangga melalui perut yaitu kelompok
insektisida sistemik, yang dapat diserap oleh tanaman dan ditranslokasikan dalam
jaringan tanaman. Serangga yang mencucuk tanaman dan kemudian menghisap
cairan tanaman yang sudah mengandung insektisida akan mati.
2. Racun kontak
Insektisida memasuki tubuh serangga bila serangga mengadakan kontak
dengan insektisida atau serangga berjalan di atas permukaan tanaman yang telah
mengandung insektisida. Di sini insektisida masuk ke dalam tubuh serangga
melalui dinding tubuh.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
3. Fumigan
Fumigan merupakan insektisida yang mudah menguap menjadi gas dan
masuk ke dalam tubuh serangga melalui sistem pernapasan serangga atau sistem
trachea yang kemudian diedarkan ke seluruh jaringan tubuh.
Berdasarkan data yang didapat dari Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006a),
insektisida yang digunakan untuk tahun 2005 dan 2006 adalah Cynoff. Cynoff
mengandung Cypermethrin, merupakan insektisida golongan piretroid sintetik
yang biasa digunakan secara luas sebagai pengendali hama profesional untuk
sebagian hama rumah tangga. Cypermethrin tersedia dalam bentuk Emulsifiable
Concentrate (EC), Ultra Low Volume (ULV) dan Wettable Powder (WP).
Pyrethroids menyebabkan efek yang merugikan pada sistem saraf pusat (Anonim,
1993).
Piretroid (juga dikenal sebagai piretroid sintetik) adalah kandungan kimia
insektisida yang sama dengan piretrin, ditemukan dalam ekstrak alam piretrum
dari bunga Chrysanthemum, dikenal dengan aktivitas insektisidanya. Pertama kali
dikembangkan pada tahun 1973, piretroid lebih stabil terhadap cahaya daripada
piretrum alam dan mempunyai aktivitas insektisida yang sangat baik. Piretroid
pertama (fenvalerate) dipasarkan pada tahun 1978. Pada saat itu, kelompok
piretroid terdiri dari 42 bahan aktif, dibedakan berdasarkan struktur kimia atau
komposisi stereoisomer yang berhubungan. Piretrin alam adalah ester dari asam
siklopropanekarboksilik dan alkohol siklopentolon. Modifikasi struktur pada 1
atau banyak molekul menghasilkan bermacam-macam piretroid yang tersedia
dipasaran sebagai insektisida (Anonim, 2005d). Piretroid telah berkembang pesat,
yang sekarang dibagi menjadi 4 generasi. Generasi I hanya terdiri dari 1 piretroid,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
yaitu allerthrin yang dimunculkan pada tahun 1949. Generasi II, yaitu diantaranya
tetramethrin (1965), kemudian diikuti oleh resmethrin (1967) yang memiliki 20
kali lebih efektif dari piretrum. Generasi III menjadi piretroid agrikultural pertama
karena aktivitas insektisida yang luar biasa dan sifat fotostabilnya. Generasi IV,
diantaranya yaitu Cypermethrin (Ware, 1999).
Terdapat 2 tipe piretroid, yaitu: tipe I, mempunyai koefisien suhu negatif
(semakin rendah suhu lingkungan, maka semakin beracun untuk serangga
sasaran), sedangkan tipe II memiliki koefisien suhu positif. Piretroid mempunyai
mekanisme aksi yang hampir sama dengan DDT. Piretroid bekerja dengan
menjaga saluran natrium pada membran saraf tetap terbuka. Piretroid
mempengaruhi sistem saraf pusat dan tepi pada serangga. Awalnya menstimulasi
sel saraf untuk memproduksi impuls berulang-ulang dan akhirnya menyebabkan
kelumpuhan. Efek tersebut menyebabkan aksi mereka pada saluran natrium,
sebuah lubang kecil yang dilalui oleh ion natrium untuk masuk ke axon dan
menyebabkan rangsangan (Ware, 1999).
Selain insektisida golongan piretroid sintetik, insektisida golongan
organofosfat dan karbamat juga mempunyai gugus ester pada struktur senyawa
kimianya. Kebanyakan insektisida organofosfat merupakan ester asam fosfat atau
asam tiofat, sedangkan untuk insektisida merupakan ester asam karbamat (Foye,
1981).
Cl
Cl
H3C CH3
HCOCN
CCH
CH
HCo
O
Cypermethrin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
E. Mekanisme Resistensi Serangga Terhadap Insektisida
Menurut Small (1998) cit Widiarti (2005), mekanisme resistensi yang
berperan pada serangga terhadap sebagian besar insektisida secara umum
dikategorikan menjadi 2 yaitu tidak sensitifnya tempat sasaran (target site) dan
resistensi metabolik. Proses terjadinya resistensi terhadap insektisida pada tubuh
serangga termasuk nyamuk secara garis besar dipengaruhi oleh 3 faktor
(Georghiou & Taylor, 1976 cit Faisya, 1998) yaitu:
1. faktor genetik
Ada sejumlah gen khusus yang diketahui sebagai pengendali resisten (R-gen),
baik yang sifatnya dominan atau resesif dimana gen tersebut terdapat pada
nyamuk dan serangga lainnya.
2. faktor biologis
Faktor biologis meliputi faktor biotik (adanya pergantian generasi, perkawinan
monogami dan poligami) dan perilaku serangga (terjadinya migrasi, isolasi,
monofagi dan polifagi, adanya perilaku serangga di luar kebiasaannya dalam
melakukan perlindungan terhadap bahaya).
3. faktor operasional
Faktor operasional meliputi hal-hal yang terkait dengan bahan kimia yang
dipergunakan dalam pengendalian vektor (jenis dan rumus kimia, kesamaan
sifat dan rumus kima dengan insektisida yang pernah digunakan, persistensi
residu insektisida dan formulasi yang digunakan) dan aplikasi insektisida
tersebut di lapangan (cara aplikasi, frekuensi, lama pemakaian sampai nilai
ambang tertentu yang tidak lagi mematikan serangga sasaran).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Resistensi serangga dibagi dalam resistensi bawaan dan resistensi didapat
(Gandahusada, et al., 1998).
1. Resistensi bawaan
Dari suatu populasi serangga ada anggota-anggota yang pada dasarnya
sudah resisten terhadap suatu insektisida. Sifat ini turun temurun sehingga
selanjutnya terjadi populasi yang resistensi seluruhnya. Resistensi bawaan juga
terjadi karena perubahan gen (yang menyebabkan mutasi). Mutan ini dan
keturunannya resistensi semuanya. Menurut mekanismenya resistensi bawaan
dibagi dalam resistensi fisiologis bawaan dan resistensi kelakuan bawaan.
Resistensi fisiologis bawaan disebabkan oleh 1) daya absorbsi insektisida
yang sangat lambat, sehingga serangga tidak mati; 2) daya penyimpanan
insektisida dalam jaringan yang tidak vital, seperti jaringan lemak, sehingga alat-
alat vital terhindar dan serangga tidak mati; 3) daya ekskresi insektisida yang
cepat, sehingga tidak sampai membunuh serangga; 4) detoksikasi insektisida oleh
enzim menyebabkan serangga tidak mati. Resistensi kelakuan bawaan disebabkan
oleh 1) perubahan habitat serangga, sehingga terhindar dari pengaruh insektisida,
keturunannya mempertahankan habitat yang baru ini; 2) avoidance, sifat
menghindarkan diri dari pengaruh insektisida sehingga tidak terbunuh, tanpa
mengubah habitat.
2. Resistensi yang didapat
Dari suatu populasi serangga, anggota-anggota rentan menyesuaikan diri
terhadap pengaruh insektisida, sehingga tidak mati dan membentuk populasi baru
yang resisten. Resistensi fisiologik yang didapat disebabkan timbulnya toleransi
terhadap insektisida, karena sebelumnya telah mendapat dosis yang subletal.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
Resistensi kelakuan yang didapat disebakan serangga dapat menghindarkan diri
sebagai akibat dosis subletal insektisida.
Liu, Xu, Zhu dan Zhang (2006), melaporkan pada referensi mereka
bahwa yang memicu resistensi piretroid pada nyamuk adalah pengaturan
mekanisme molekular detoksifikasi metabolik dan peningkatan kekurangpekaan
tempat target.
Meskipun belum ada laporan yang lengkap mengenai metabolisme
cypermetrin oleh serangga, data-data yang ada menunjukkan bahwa jalur
metabolisme cypermetrin memiliki kesamaan jalur pada mamalia. Dari
metabolisme cypermetrin dalam tubuh serangga akan dihasilkan senyawa-senyawa
yang tidak mempunyai efek membunuh, diantaranya yaitu: asam 3-fenoksibenzoat,
asam (4’-hidroksi)-3-fenoksibenzoat dan asam 3-(2,2-diklorovinil)-2,2-dimetil-
siklopentana karboksilat, sehingga dapat menurunkan toksisitas dari cypermetrin
dalam tubuh nyamuk. Perkiraan reaksi metabolisme atau detoksifikasi cypermetrin
pada tubuh serangga dapat dilihat pada Gambar 7.
F. Enzim Esterase Non Spesifik
Beberapa enzim dirujuk sebagai protein sederhana karena hanya
memerlukan struktur protein untuk aktivitas katalitik. Enzim lain merupakan
protein terkonjugasi karena masing-masing mmerlukan suatu komponen
nonprotein, disebut suatu kofaktor, untuk aktivitasnya. Kompleks yang terdiri dari
suatu apoenzim (bagian protein dari suatu enzim) dan kofaktornya disebut suatu
holoenzim (Amstrong, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
H3C CH3 O
oCNH
COCN
CCH
CH
HCCl
Cl
oCOOH
asam 3-fenoksibenzoat
oCOOH
HO
H3C CH3
Cl
ClCHC
HHC COOH
asam (4'-hidroksi)-3-fenoksibenzoat
asam 3-(2,2-diklorovinil)-2,2-dimetil-siklopropana karboksilat
Cypermetrin
pemecahan oleh isoenzim esterase non-spesifik
(Todd, Wohlers, and Citra, 2003)
Gambar 7. Reaksi metabolisme atau detoksifikasi cypermetrin dalam tubuh serangga atau mamalia oleh enzim esterase.
Oleh Commision On Enzymes Of The International Union Of Biochemistry,
enzim dibedakan atas 6 golongan besar. Penggolongan ini didasarkan atas reaksi
biokimia dimana enzim memegang peranan (Poedjiadi, 1994). Ikhtisar dari
klasifikasi internasional dari enzim akan disajikan berikut ini (Montgomery,
Conway dan Spector, 1992):
1. Oksidoreduktase, enzim-enzim yang mengkatalisis berbagai macam reaksi
oksidasi-reduksi.
2. Transferase, yang mengkatalisis reaksi pemindahan berbagai gugus seperti
amino, karboksil, karbonil, metil ,asil, glikosil atau fosforil.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
3. Hidrolase, yang mengkatalisis pemutusan ikatan antara karbon dengan
berbagai atom lain sambil mengikat molekul air.
4. Liase, yang mengkatalisis pemecahan ikatan antara karbon dengan karbon,
karbon dengan belerang serta beberapa jenis ikatan antara karbon dengan
nitrogen (tidak termasuk ikatan peptida).
5. Isomerase, kelompok enzim yang mengkatalisis reaksi rasemisasi isomer optik
atau geometrik dan reaksi-reaksi oksidasi-reduksi intramolekul tertentu.
6. Ligase, yang mengkatalisis pembentukan ikatan antara karbon dengan oksigen,
belerang, nitrogen dan atom-atom lain.
Enzim pada hakekatnya merupakan katalis efektif, yang bertanggung
jawab bagi terjadinya reaksi kimia terkoordinasi yang terlibat dalam proses biologi
dari sistem kehidupan. Sebagai suatu katalis, suatu enzim tidak dirusak dalam
suatu reaksi dan karena itu tetap tidak berubah dan dapat digunakan kembali.
Suatu ciri yang menonjol dari enzim sebagai katalis adalah spesifitas substrat,
yang menentukan fungsi biologinya (Amstrong, 1995).
Pada banyak spesies, termasuk manusia, suatu enzim dengan beberapa
bentuk molekul yang berbeda dapat diasingkan dari suatu jaringan yang sama atau
dua atau lebih jaringan yang berbeda. Berbagai bentuk molekul yang berbeda dari
suatu enzim dinamakan isoenzim atau isozim (Montgomery, Conway dan Spector,
1992). Isoenzim merupakan enzim yang terdapat dalam bentuk majemuk dalam
organisme pada berbagai stadium kehidupan dan/atau berbagai organ dan jaringan
(mempunyai struktur kuartener homogen maupun heterogen) (Amstrong, 1995).
Esterase adalah enzim yang memecah ikatan ester dengan cara hidrolisis. Esterase
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
yang terdapat dalam hati dapat memecah ester sederhana, misalnya etil butirat
menjadi etanol dan asam butirat (Poedjiadi, 1994).
Pada semua piretroid mempunyai beberapa ciri umum, yaitu molekul asam,
ikatan utama ester dan molekul alkohol (Shafer, Meyer dan Crofton, 2005).
Beberapa insektisida diantaranya organofosfat dan karbamat mengandung ikatan
ester, oleh karena itu insektisida organofosfat dapat dihidrolisis oleh esterase
(Scott, 1995 cit Dewi, 2006). Aktivitas enzim esterase non-spesifik dapat
bertambah oleh adanya perubahan gen esterase. Perubahan genetik pada gen
esterase ini menyebabkan peningkatan aktivitas enzim esterase. Hal ini
menyebabkan kemampuan menghidrolisis insektisida tinggi sehingga semua
insektisida yang masuk akan dihidrolisis menjadi senyawa yang kurang beracun.
Oleh karena itu akan menaikkan dosis letal insektisida tersebut dan tidak lagi
mematikan serangga yang menjadi sasaran (Walsh, 2001 cit Dewi, 2006).
G. Elektroforesis
Elektroforesis adalah pergerakan zat bermuatan listrik akibat adanya
pengaruh medan listrik (Anonim, 2006c), sedangkan elektroforesis gel merupakan
suatu teknik analisis penting dan sangat sering dipakai dalam bidang biokimia dan
biologi molekular. Dalam elektroforesis gel, pemisahan dilakukan terhadap
campuran bahan dengan muatan listrik yang berbeda-beda (Anonim, 2006d).
Prinsip dasar teknik ini adalah bahwa DNA, RNA, atau protein dapat dipisahkan
oleh medan listrik. Dalam hal ini, molekul-molekul tersebut dipisahkan
berdasarkan laju perpindahannya oleh gaya gerak listrik di dalam matriks gel. Laju
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
perpindahan tersebut bergantung pada muatan listrik bersangkutan (Anonim,
2007a).
Gel yang digunakan biasanya merupakan polimer bertautan silang
(crosslinked) yang porositasnya dapat diatur sesuai dengan kebutuhan. Untuk
memisahkan protein atau asam nukleat berukuran kecil (DNA, RNA, atau
oligonukleotida), gel yang digunakan biasanya merupakan gel poliakrilamida,
dibuat dengan konsentrasi berbeda-beda antara akrilamida dan zat yang
memungkinkan pertautan silang (cross-linker), menghasilkan jaringan
poliakrilamida dengan ukuran rongga berbeda-beda (Anonim, 2007a).
Syarat dasar dari larutan penyangga yang digunakan adalah komposisi dan
pHnya tidak mengubah sifat kimia dan biologi bahan yang dipisahkan, dan
interaksi antara molekul protein harus minimal. Tidak diperkenankan untuk
campuran yang dipisahkan mengubah cukup besar pH gel selama jalannya
pemisahan. Oleh karena itu, direkomendasikan pH larutan sampel harus
ditambahkan ±0,5 pH dari pH larutan penyangga, sebelum sampel diaplikasikan ke
gel. Dalam penyangga alkali protein bermigrasi ke arah anoda; pada gel vertikal,
untuk itu katode berada di atas. Elektroforesis harus dihentikan saat indikator
pewarna mencapai 0,5-1 cm sebelum ujung gel (Gaspar, Kalasz, Kerese, Takacs,
and Tyihak, 1984).
Media gel terdiri dari gel penimbun (stacking gel) dan gel pemisah
(resolving gel). Pada gel penimbun (pH 6,8), perbedaan muatan terbentuk antara
ion Cl dan glisin dalam larutan penyangga yang bertujuan menimbun protein
menjadi jalur-jalur sempit diantara ion-ion. Migrasi ke dalam gel pemisah yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
mempunyai pH berlainan (pH 8,9) mengganggu perbedaan muatan ini lalu
menyebabkan pemisahan protein menjadi jalur yang berbeda (Anonim, 2007b).
Pemisahan protein memakai elektroforesis telah dipergunakan secara luas
dalam mencoba membedakan strain dan spesies serangga. Ion bermuatan akan
bermigrasi tergantung atas densitas muatan proteinnya. Satu sel atau bermacam-
macam jaringan individu pada spesies yang sama mengandung enzim-enzim yang
mempunyai protein yang berbeda tetapi mempunyai aktifitas enzimatik yang sama.
Diketahui dengan baik bahwa enzim tertentu yang berbeda aktifitasnya cenderung
mempunyai perbedaan tingkat variasi genetik (Ansori, 2000).
Metode elektroforesis telah banyak dikembangkan menurut medium dan
larutan penyangga yang digunakan serta posisi pelaksanaannya. Medium yang
paling banyak digunakan adalah strach gel, akrilamida, agar dan gel sellulose
asetat. Larutan penyangga yang digunakan ada 2 macam yaitu sistem larutan
penyangga berlanjut (continuous buffer system) dan sistem larutan penyangga
terputus (discontinuous buffer system). Larutan penyangga disebut berlanjut
apabila larutan penyangga yang digunakan untuk proses elektroforesis sama
dengan larutan panyangga yang dipakai untuk membuat medium. Larutan
penyangga disebut terputus apabila larutan panyangga yang digunakan untuk
proses elektroforesis berbeda dengan larutan penyangga yang dipakai untuk
membuat medium. Keuntungan sistem larutan penyangga berlanjut adalah larutan
penyangga ini dapat digunakan lebih dari satu kali proses elektroforesis,
sedangkan keuntungan sistem larutan panyangga terputus adalah elektroforegram
yang dihasilkan tampak lebih jelas (Dharmawan, 1993 cit Ernaningsih, 1999).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
H. Landasan Teori
Berdasarkan rumusan masalah, tujuan penelitian, dan penelaahan pustaka
dapat diajukan landasan berpikir sebagai berikut:
1. Faktor penyebab terjadinya resistensi pada serangga atau nyamuk secara garis
besar terdiri atas faktor genetik, biologis (faktor biotik dan perilaku serangga),
dan operasional insektisida (hal-hal yang terkait dengan bahan kimia yang
dipergunakan dalam pengendalian vektor dan aplikasi insektisida tersebut di
lapangan).
2. Peningkatan aktivitas enzim esterase dalam tubuh nyamuk akan menaikkan
dosis letal menjadi subletal yang tidak lagi mematikan serangga yang menjadi
sasaran.
3. Perbedaan profil esterase non spesifik nyamuk Ae. Aegypti yang berasal dari
daerah endemis dan non-endemis DBD menggambarkan adanya perbedaan
respon nyamuk tersebut terhadap insektisida.
I. Keterangan Empiris
Berdasarkan landasan teori di atas dapat diajukan hipotesis bahwa terdapat
perbedaan profil (pola pita) esterase non-spesifik masing-masing nyamuk Ae.
aegypti yang berasal dari daerah endemis dan non-endemis DBD Kota Jambi
sebagai gambaran tidak langsung mengenai status resistensi terhadap insektisida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian tentang profil esterase non-spesifik pada nyamuk Ae. aegyti
yang berasal dari daerah endemis dan non endemis DBD di Kota Jambi dengan
metode elektroforesis ini termasuk penelitian non eksperimental dengan rancangan
deskriptik dan analitik.
B. Subjek Penelititan
Pada penelitian ini digunakan nyamuk Ae. aegypti yang dikoleksi dari
beberapa daerah endemis dan non endemis DBD di Kota Jambi, yang ditetapkan
berdasarkan data endemisitas DBD terbaru dari Dinas Kesehatan Kota Jambi.
Untuk koleksi nyamuk Ae. aegypti dilakukan dengan mengumpulkan telurnya
menggunakan ovitrap, diletakkan di dalam rumah atau pekarangan pemukiman
penduduk dan mengumpulkan larvanya dari tempat-tempat penampungan air yang
berada dan atau sengaja diletakkan di dalam rumah atau di sekitar pekarangan
pemukiman penduduk. Telur dan larva yang didapatkan kemudian
dikembangbiakan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Umum
Universitas Gadjah Mada. Setelah dewasa, nyamuk tersebut akan
diidentifikasikan untuk memisahkan nyamuk Ae. aegypti dengan jenis nyamuk
lainnya. Nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kota Jambi adalah nyamuk dari
kelompok perlakuan. Untuk nyamuk kelompok pembanding digunakan nyamuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
Ae. aegypti dari Salatiga yang dikembangbiakan di Laboratorium Parasitologi
Fakultas Kedokteran Umum, Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
C. Definisi Operasional
1. Resistensi adalah hasil dari mekanisme tubuh yang dapat menghalang-halangi
atau mencegah invasi, multipliksi dari bibit penyakit kedalam tubuh atau
mencegah terjadinya kerusakan jaringan yang diakibatkan oleh racun yang
dikelurkan oleh bibit penyakit.
2. Resistensi nyamuk terhadap insektisida adalah kemampuan suatu populasi
nyamuk untuk bertahan terhadap pengaruh insektisida yang biasanya
mematikan.
3. Daerah endemis DBD adalah daerah yang setiap tahunnya selama 3 tahun
berturut-turut terdapat kasus DBD.
4. Daerah non endemis DBD adalah daerah yang selama 3 tahun berturut-turut
tidak terjadi kasus DBD.
5. Elektroforesis adalah pergerakan zat bermuatan listrik akibat adanya pengaruh
medan listrik.
6. Zymogram adalah hasil elektroforesis pada gel yang menggambarkan
aktivitas isoenzim esterase non-spesifik yang terkandung dalam tubuh nyamuk
subjek penelitian.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
D. Bahan dan Alat Penelitian
1. Bahan penelitian
Digunakan bahan: Tris, glisin, akrilamida, HCl, N,N’-metilen
bis(akrilamida) (BIS), ammonium peroksidisulfat, ribloflavin, α-naftil asetat,
aseton, akuades, Fast Blue B, buffer fosfat, N,N,N’,N’-Tetrametiletilendiamin
(TEMED), homogenat nyamuk, sukrosa, triton-X, dan bromphenol blue.
2. Alat penelitian
Digunakan alat Mini-Protean II Dual Slab Cell (Bio-Rad), sentrifugasi,
freezer, plat(lempeng) kaca sebagai cetakan, erlenmeyer, pompa vakum, gelas
ukur, tempat inkubasi, pisau pemisah gel, sisir, syringe, gelas ukur, tabung
ependrof, pellet pastle, pipet tetes, aspirator, sarang nyamuk, dan mikropipet.
E. Jalannya Penelitian
Pada penelitian penentuan profil isoezim esterase non-spesifik kali ini
dilakukan dengan metode elektroforesis (O’Farrell, 1975 cit.Dharmawan, 1993),
tahap-tahap penelitiannya meliputi:
1. Penyiapan larutan
a. Larutan penyangga elektroda disiapkan dengan cara :
Dibuat larutan stok, yaitu 0,005 M Tris-0,0384 M Glisin pH 8,3 (terdiri
atas 0,05 M Tris (hidroksimetil) nitro metana sebanyak 6 gram dengan 0,384
M Glisin sebanyak 28,8 gram) dilarutkan dengan akuades sampai volume 1
liter. Bila akan digunakan larutan ini diencerkan 10 kali dengan akuades.
b. Larutan gel bawah yang terdiri atas larutan a, c dan g
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
Larutan a adalah 1,5 M Tris-HCl (pH 8,9) yang dibuat dengan cara
sebanyak 18,3 gram Tris dilarutkan dalam akuades dengan volume tertentu dan
ditambah HCl hingga pH 8,9 dan volumenya 100 ml.
Larutan c adalah 30% akrilamida, yang dibuat dengan cara sebanyak
29,2 gram akrilamida 97,3% ditambah 0,8 gram N,N’-metilen bis(akrilamida)
(BIS) 2,7% dilarutkan dengan akuades sampai volume 100 ml.
Larutan g adalah ammonium peroksidisulfat 10%, yang dibuat dengan
cara sebanyak 1 gram ammonium peroksidisulfat, dilarutkan dalam akuades
sampai volume 10 ml (selalu dibuat baru).
c. Larutan gel atas yang terdiri atas larutan b, d dan e
Larutan b adalah 0,5 M Tris-HCl pH 6,8 yang dibuat dengan cara
sebanyak 6,055 gram Tris, dilarutkan dengan sejumlah akuades dan ditambah
HCl hingga pH 6,8 dan volumenya 100 ml.
Larutan d adalah akrilamida 12,5% yang dibuat dengan cara sebanyak
10 gram akrilamida 80% ditambah 2,5 gram bis-akrilamida 20% dan
dilarutkan dengan akuades sampai volumenya 100 ml.
Larutan e adalah riboflavin, yang dibuat dengan cara sebanyak 4 mg
riboflavin dilarutkan ke dalam akuades sampai volumenya 100 ml.
2. Pemasangan cetakan gel
Dua buah lempeng kaca diletakkan di atas meja dan permukaannya
dibersihkan dengan tissue yang telah dibasahi dengan etanol. Sekat plastik
dipasang pada sisi kanan dan kiri salah satu lempeng kaca. Sekat silikon dipasang
sepanjang sisi kanan dan kiri di luar sekat plastik dan sisi bawah lempeng kaca.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Lempeng kaca yang lain ditutupkan ke atasnya sehingga sekat plastik terletak
diantaranya. Pasangan ini ditegakkan di atas meja secara horizontal.
3. Penyiapan gel bawah
Pada penelitian ini gel bawah yang digunakan terdiri atas 10% akrilamida
0,375 M Tris-HCl pH 8,9 yang dibuat dengan cara :
Tabel I. Jumlah bahan yang digunakan dalam pembuatan gel bawah
Banyaknya yang dibutuhkan untuk volume Bahan 15 ml 30 ml
Larutan a Larutan c Akuades Larutan g Diaerasi TEMED
3,75 ml 5,00 ml 6,10 ml 0,15 ml
10 μl
7,50 ml 10,00 ml 12,50 ml 0,30 ml
20 μl
Larutan a, c, akuades dan larutan g dicampur dalam Erlenmeyer atau gelas
ukur atau botol vakum bila akan dilakukan diaerasi. Larutan digojog dengan hati-
hati, kemudian dilakukan dierasi dengan pompa vakum. Diaerasi dihentikan bila
gelembung-gelembung yang terbentuk jumlahnya telah menjadi sedikit. Larutan
ditambah TEMED dan digojog lagi dengan hati-hati, kemudian segera dituang
dalam celah diantara lempeng kaca yang sudah disiapkan sampai kira-kira 2,5 cm
sebelum batas atas lempeng kaca. Akuades ditambahkan ke atas gel untuk
menutup permukaannya agar terbentuk permukaan yang datar air.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
4. Penyiapan gel atas
Gel atas dibuat pada hari berikutnya setelah gel bawah selesai
dipersiapkan. Komposisi gel atas dengan menggunakan 5% akrilamida 0,617 M
Tris-HCl pH 6,7 adalah seperti yang tercantum pada Tabel II.
Larutan b, d, e dan akuades dicampur dalam botol vakum atau beker glass
atau Erlenmeyer dan dilakukan diaerasi menggunakan pompa vakum. Larutan
ditambah TEMED, dan dengan hati-hati digojog, selanjutnya dituang ke atas gel
bawah setelah akuades di atasnya diambil. Sisir plastik dimasukkan dalam gel atas
untuk membuat sumuran tempat sampel. Bila polimerasi sudah terjadi dengan
sempurna (gel atas tampak putih), selanjutnya sisir plastik diambil dan kelebihan
akuades yang ada dalam masing-masing sumuran dibersihkan menggunakan
syringe.
Tabel II. Jumlah bahan yang digunakan dalam pembuatan gel atas
Banyaknya yang dibutuhkan untuk volume Bahan
6,5 ml 13 ml
Larutan b Larutan d Akuades Larutan e Diaerasi TEMED
0,78 ml 2,60 ml 2,09 ml 1,03 ml
4,70 μl
1,56 ml 5,20 ml 4,18 ml 2,06 ml
9,40 μl
5. Penyiapan homogenat nyamuk
Tabung ependrof diletakkan di atas hancuran es batu, kemudian ditetesi 75
μl sukrosa 20%. Nyamuk secara individual dimatikan lebih dahulu dengan cara
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
memasukkan nyamuk ke dalam lemari es, dan dimasukkan dalam tabung ependrof
tersebut, dihancurkan sampai halus dengan alat pellet pestle. Selanjutnya ke dalam
tabung ependrof tersebut dimasukkan 75μl Triton-X 5% dan didiamkan selama 30
menit pada suhu 4°C. Homogenat disentrifugasi dengan kecepatan 6000 rpm
selama 4 menit. Tabung efendrof yang berisi homogenat diletakkan kembali di
atas hancuran es, kemudian supernatan diambil dan dimasukkan ke dalam tabung
efendrof baru. Supernatan ditambahkan 1 tetes indikator bromophenol blue dan
dimasukkan dalam sumuran. Sebelumnya cetakan gel dipasang terlebih dahulu
pada tempat elektroda.
6. Elektroforesis
Larutan penyangga dituang pada ruang bagian atas dan bawah tempat
elektroda. Larutan penyangga di bagian atas harus menutupi seluruh permukaan
sumuran gel atas yang telah berisi homogenat. Elektroforesis dilakukan kira-kira
selama 2,5 jam pada tegangan 120 volt, kuat arus 30 mA, pada ruang dengan
temperatur 4°C. Elektroforesis dianggap sudah cukup, bila mobilitas buffer
penanda telah melewati 70-90% panjang gel. Setelah selesai, gel diambil dengan
memisahkannya dari lempeng kaca dan dilanjutkan dengan proses pengecatan.
7. Pengecatan
Larutan substrat terdiri atas 20 mg α-naftil asetat dan 2 ml aseton. Untuk
pencucian digunakan larutan penyangga 0,1 M buffer fosfat, pH 6,8 sebanyak 50
ml. Pada akhir elektroforesis gel dicuci dengan buffer fosfat selama 5 menit untuk
menurunkan nilai pH. Selanjutnya buffer pencuci diganti dengan buffer fosfat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
yang baru (25 ml) untuk inkubasi. Larutan substrat dimasukkan dan ditutup rapat-
rapat. Inkubasi dilakukan dengan kondisi temperatur ruang antara 20-30°C selama
10 menit, sambil kadang-kadang digoyang.
Untuk pengecatan digunakan larutan yang terdiri atas akuades 10 ml,
garam Fast Blue B sebanyak 45 mg dan 0,2 M buffer fosfat pH 6,8 sebanyak 10
ml. Pada akhir inkubasi, larutan substrat dibuang dan larutan untuk pengecatan
dimasukkan dan inkubasi dilanjutkan kembali. Setelah gambaran pola esterase
non-spesifik terbentuk dengan jelas dan baik, larutan untuk pengecatan dibuang
dan gel dicuci dengan air beberapa kali sampai bersih untuk menghentikan reaksi.
Gel segera difoto untuk mendapatkan gambar yang baik.
F. Analisis Hasil
Zymogram yang terbentuk dianalisis secara kualitatif. Analisis secara
kualitatif dilakukan dengan membandingkan intensitas warna pola pita antara
nyamuk subjek penelitian atau nyamuk uji dengan kontrol dan dilakukan juga
analisis dengan menghitung kecepatan gerak (jarak) esterase dalam medan listrik,
dihitung harga Rf-nya dengan rumus:
=RfawaltitikdaripenandapewarnamigrasiJarak
awaltitikdariproteinpitaJarak
serta dianalisis juga dengan menggunakan tes Chi-square untuk mengetahui
frekuensi elektromorf.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pertama-tama zymogram yang dihasilkan dari elektroforesis dianalisis
dengan membandingkan intensitas warna dari pola pita hasil reaksi aktivitas enzim
esterase non-spesifik dari nyamuk Ae. aegypti yang diamati secara visual (melihat
warna). Pada Gambar 8 dapat dilihat zymogram dan intensitas warna pola pita
hasil elektroforesis yang ditandai dengan E1 sebagai pita pertama, E2 sebagai pita
kedua dan E3 sebagai pita ketiga.
Gambar 8. Zymogram isoenzim esterase non-spesifik dari kelompok nyamuk Ae. aegypti kontrol (1), daerah non endemis (2), dan daerah endemis (3) yang ditandai dengan E1 (pita pertama), E2 (pita kedua), dan E3 (pita ketiga).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
Gambar 8 menunjukkan bahwa esterase non-spesifik dari nyamuk Ae.
aegypti Salatiga yang digunakan sebagai kontrol, menghasilkan intensitas warna
yang berbeda dengan kelompok nyamuk uji. Pada pita kelompok nyamuk kontrol
menunjukan intensitas warna yang pekat. Semakin pekat warna yang dihasilkan
menunjukkan bahwa nyamuk tersebut mempunyai aktivitas enzim esterase non-
spesifik yang tinggi. Intensitas warna pada kelompok nyamuk kontrol ini
digunakan sebagai pembanding untuk kelompok nyamuk yang berasal dari
Kelurahan Simpang III Sipin berada di Kecematan Kota Baru sebagai daerah
endemis DBD dan Kelurahan Sijenjang berada di Kecamatan Jambi Timur sebagai
daerah non endemis DBD.
Dari Gambar 8, dapat dilihat perbedaan intensitas warna antara daerah
endemis dan non endemis yang kemudian dibandingkan dengan kelompok
nyamuk kontrol yang berasal dari Salatiga. Pada daerah endemis intensitas warna
yang dihasilkan lebih pekat dibandingkan dengan daerah non endemis. Jika
dibandingkan dengan kontrol, intensitas warna pola pita dari daerah endemis lebih
pekat, sedangkan daerah non endemis jika dibandingkan dengan kontrol, intensitas
warna pola pita lebih terang.
Dari analisis diatas dapat diketahui bahwa populasi nyamuk dari daerah
endemis telah mengalami resistensi terhadap insektisida, sedangkan populasi
nyamuk dari daerah non endemis kecenderungan masih rentan terhadap
insektisida. Populasi nyamuk kontrol cenderung lebih rentan terhadap insektisida
jika dibandingkan dengan populasi nyamuk dari daerah endemis. Hal ini dapat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
dilihat dari intensitas warna pola pita yang dihasilkan dari populasi nyamuk dari
daerah endemis lebih pekat dibandingkan nyamuk kontrol.
Sama halnya dengan hasil penelitian dari Rosario, Miranda-Miranda,
Vasquez dan Estrada (1997), bahwa saat peningkatan enzim esterase non-spesifik
uji esterase menunjukkan kesamaan dengan profil protein. Sejak semua produksi
protein berlebih ditunjukkan dengan menghidrolisis ester pada naftil asetat. Selain
itu, dari penelitian Scharf, Hemingway, Reid, Small dan Bennett (1996) untuk
mengetahui resistensi Blattella germanica terhadap 4 golongan insektisida, yaitu
piretroid, organofosfat, karbamat, dan siklodien dengan menggunakan metode
biokimia dan elektroforesis. Telah diindikasikan bahwa adanya intensitas warna
pita yang lebih pekat pada Blattella germanica yang dikoleksi dari lapangan
daripada kelompok pembandingan yang masih rentan, terdapat juga peningkatan
esterase atau esterase mempunyai spesifikasi tinggi terhadap hidrolisis naftil
asetat.
Pada penelitian dengan metode elektroforesis ini, setelah gel dilepas dari
cetakan dan dicuci dengan larutan buffer fosfat, gel diinkubasi dengan larutan
substrat yang mengandung α-naftil asetat. Penginkubasian ini bertujuan untuk
mengikat enzim oleh larutan substrat. Selanjutnya ditambahkan larutan yang
digunakan untuk membentuk warna akhir. Larutan tersebut mengandung garam
fast blue B (O-dianisidine tetrazotized), akuades dan larutan buffer fosfat. Setelah
warna timbul pada gel, dibilas dengan aquades untuk menghentikan reaksi. Warna
akhir yang didapat menunjukkan aktivitas enzim esterase non-spesifik. Berikut ini
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
adalah reaksi pembentukan warna yang terjadi pada analisis secara kualitatif
(pengamatan visual):
O C CH3
O
OHEsterase
Hidrolisis (H2O)+ CH3COOH
α-naftil asetat α-naftol asam asetat
OH
CH3
N
N
O O
N
CH3
Cl
N
2 + Cl
α-naftol O-dianisidine tetrazonium klorida
OH
CH3 O
N OHNNN
O CH3
+ 2HCl
di-α-naftol tetrazo-О-dianisidine
Berdasarkan data dari Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006a),
pemberantasan vektor DBD dilakukan dengan melakukan fogging atau pengasapan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
dengan menggunakan Cynoff. Data dari Dinas Kesehatan menyebutkan, untuk
Kecamatan Kotabaru pada tahun 2005 dan tahun 2006 dilakukan fogging 15 kali
dan 13 kali, sedangkan untuk Kecamatan Jambi Timur dilakukan fogging 11 kali
dan 2 kali. Cynoff mengandung bahan aktif Cypermethrin, merupakan insektisida
golongan piretroid sintetik yang mempunyai gugus utama ester. Sasaran target
untuk DDT dan piretroid pada saluran membran saraf dan resistensi spesies
tergantung pada perubahan ikatan insektisida terhadap saluran natrium pada
membran (Mourya, et.al, 1993). Menurut Mardihusodo (1996), esterase non-
spesifik telah lama dikenali sebagai enzim yang penting dalam pendetoksifikasian
kimia insektisida yang berhubungan dan salah satu mekanisme resistensi
insektisida yang diketahui tejadi pada nyamuk. Oleh sebab itu, resistensi yang
didapat dari kelompok nyamuk yang berasal dari daerah endemis DBD di Kota
Jambi, kemungkinan disebabkan pendetoksifikasian berlebih dari kimia insektisida
yang dipaparkan secara berlebih juga.
Enzim pendetoksifikasi, yang merupakan dasar terjadinya resistensi saat
peningkatan level dan perubahan aktivitas dari esetrase atau oksidase, mencegah
insektisida untuk mencapai tempat aksinya. Enzim-enzim tersebut diketahui untuk
mendetoksifikasi semua gugus utama pada insektisida. Genetik dan dasar
molekular dari resistensi insektisida pada nyamuk melalui mekanisme
detoksifikasi enzim telah dipelajari secara luas. Peningkatan aktivitas detoksifikasi
enzim esterase dihubungkan dengan penjelasan tentang struktur gen yang sesuai (
Overgaard, 2006).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Seperti yang telah disebutkan pada Bab II, mekanisme resistensi serangga
terhadap insektisida dapat disebabkan oleh resistensi metabolik. Cypermetrin yang
masuk ke dalam tubuh nyamuk akan segera dimetabolisme atau didetoksifikasi
oleh enzim yang bersangkutan sebelum berikatan dengan reseptor pada sistem
saraf sehingga tidak lagi mempunyai daya membunuh. Semakin tinggi aktivitas
enzim pendetoksi semakin nyamuk resisten terhadap insektisida. Perkiraan reaksi
metabolisme atau detoksifikasi dari cypermetrin dalam tubuh nyamuk telah
dijelaskan pada Bab II.
Zymogram yang didapatkan dari elektroforesis juga dihitung kecepatan
gerak (jarak) esterase dalam medan listrik (Rf) dan juga dianalisis dengan
menggunakan Chi-square untuk mengetahui adanya perbedaan frekuensi
elektromorf yang menunjukkan adanya perbedaan aktivitas esterase non-spesifik.
Pada Tabel III, ditemukan perbedaan jumlah pita zymogram kelompok
nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah non-endemis (Kelurahan Sijenjang)
dibandingkan dengan kelompok nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah
endemis (Kelurahan Simpang III Sipin), dan kontrol. Pada daerah non-endemis
hanya terdapat 2 pita, sedangkan pada daerah endemis dan kontrol terdapat 3 pita.
Esterase non-spesifik dan hasil zymogram dari elektroforesis dapat dilihat pada
Tabel III.
Untuk mengetahui adanya perbedaan aktivitas esterase, hasil pengamatan
jumlah pita yang dihasilkan pada elektroforesis ini dianalisis dengan menggunakan
tes Chi-square (p < 0,05). Dari perhitungan data, diketahui bahwa adanya
perbedaan frekuensi elektromorf antara daerah endemik dan daerah non endemik
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
dan dapat dikatakan adanya perbedaan aktivitas esterase non-spesifik antara
kelompok nyamuk Ae. aegypti dari daerah endemis dan daerah non-endemis. Hasil
serupa juga dijumpai pada penelitian yang dilakukan oleh Ernaningsih (1999)
dengan menggunakan analisis Chi-square, yaitu ditemukannya perbedaan
frekuensi elektromorf yang menandai adanya perbedaan aktivitas esterase non-
spesifik pada nyamuk Culex quinquefasciatus yang berasal dari daerah endemik
dan daerah non-endemik (p < 0,05). Pita-pita zymogram dari nyamuk yang berasal
daerah endemik, non-endemik dan kontrol yang didapat kemudian dihitung harga
Rf-nya.
Tabel III. Esterase non-spesifik dan jumlah pita yang dihasilkan dari kelompok nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemik DBD), Kelurahan Sijenjang (daerah non-endemik DBD), dan Salatiga sebagai kontrol
Daerah endemik Daerah non-endemik Kontrol
Enzim Jumlah sampel Pita Jumlah
sampel Pita Jumlah sampel Pita
Esterase non-
spesifik 10 3 10 2 10 3
Dari Tabel IV, dapat dilihat tidak ada perbedaan yang signifikan antara
harga Rf pada pita 1 (E1) dan 2 (E2) yang dihasilkan pada kelompok nyamuk Ae.
aegypti yang berasal dari daerah endemis dan daerah non-endemis DBD, maupun
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
kontrol. Untuk pita 3 (E3) pada daerah non-endemis tidak ditemukan, sehingga
harga Rf tidak dapat dihitung, tetapi juga tidak ada perbedaan yang signifikan
antara harga Rf antara daerah endemis dan kontrol.
Tabel IV. Kecepatan gerak (jarak) esterase non-spesifik dalam medan listrik (Rf) setiap pita yang terdapat pada zymogram hasil elektroforesis untuk setiap kelompok nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemik DBD), Kelurahan Sijenjang (daerah non-endemik DBD), dan Salatiga sebagai kontrol
Kecepatan gerak (jarak) (cm) Pita Daerah
endemik Daerah non-
endemik Kontrol
1 (E1) 0,18 0,18 0,2
2 (E2) 0,36 0,36 0,36
3 (E3) 0,94 - 0,96
Elektroforesis biasanya digunakan untuk menentukan komposisi protein
suatu produk makanan. Sebagai contohnya, perbedaan yang terdapat didalam
komposisi protein dari protein jenuh kacang kedelai dan weiyang dihasilkan
melalui teknik pemisahan yang berlainan. Elektroforesis dapat juga digunakan
untuk menentukan kemurniaan suatu ekstrak protein (Anonim, 2007c). Dari data
diatas (Tabel IV), diketahui tidak adanya perubahan komposisi dari protein
penyusun esterase non-spesifik pada kelompok nyamuk Ae. aegypti baik yang
berasal dari daerah endemis, daerah non-endemis maupun kontrol.
Metode elektroforesis yang digunakan untuk mengetahui gambaran profil
esterase non-spesifik pada nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
dan no-endemis DBD dari Kota Jambi, tidak hanya dapat digunakan untuk
mengetahui gambaran profil esterase non-spesifik pada serangga yang telah
terpapar insektisida golongan organofosfat atau karbamat, tetapi juga dapat
digunakan untuk insektisida golongan piretroid. Seperti pada penelitian yang
dilakukan oleh Ganesh, Vijayan, Urmila, Gopalan, and Prakash (2002) untuk
mengetahui adanya peranan esterase dan monooksigenase pada resistensi
Anopheles stephensi Giles (1908) terhadap deltametrin dari Mysore, digunakan
elektroforesis gel poliakrilamida dan menunjukkan adanya perbedaan profil
isoenzim pada analisis A-esterase dan B-esterase. Elektroforesis gel akrilamida
juga digunakan untuk mengetahui adanya toleransi piretroid pada Culex pipiens
pipiens var molestus dari Marin, California (McAbee, et.al, 2003).
Mutasi apa saja pada gen yang bertanggung jawab dalam penurunan
sensitifitas tempat target, menyebabkan adanya resistesi silang untuk semua jenis
aksi insektisida pada tempat targetnya. Resistenasi silang antara DDT dan piretroid
telah dikatahui pada banyak nyamuk vektor. Resistensi silang juga ditemukan
antara organofosfat dan piretroid, misalnya Rodrigues et.al (2002) menemukan
bahwa Ae. aegypti yang resistensi terhadap temefos juga memberikan resistensi
pada deltametrin, kemungkinan dikaitkan dengan peningkatan aktivitas GST. Juga
telah dilaporkan resistensi multipel (beberapa mekanisme resistensi terdapat dalam
1 populasi), karena pemaparan yang berulang-ulang atau terus menerus oleh
insektisida dari gugus kimia yang berbeda (Overgaard, 2006). Berdasarkan data
yang diterima dari Dinas Kesehatan Kota Jambi, hanya disebutkan pemakaian
insektisida Cynoff (golongan piretoid) untuk periode 2005-2006, sedangkan untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
tahun-tahun sebelumnya tidak tercantum insektisida yang digunakan. Pada
penelitian kali ini dimungkinkan telah terjadi resistensi silang antara insektisda
yang digunakan dalam program pemberantasan vektor penyakit DBD di Kota
Jambi sebelum digunakannya insektisida golongan piretroid.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian profil esterase non-spesifik dengan menggunakan
metode elektroforesis ini dapat disimpulkan:
1. Adanya perbedaan profil esterase non-spesifik pada populasi nyamuk Ae.
aegypti yang berasal dari daerah endemis DBD, Kelurahan Simpang III Sipin,
dengan daerah non-endemis DBD, Kelurahan Sijenjang.
2. Adanya variasi aktivitas esterase antara populasi nyamuk Ae. aegytpi yang
berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin dengan Kelurahan Sijenjang (p <
0,05) yang ditandai dengan perbedaan frekuensi elektromorf.
3. Tidak adanya perbedaan kecepatan gerak (jarak) esterase antara populasi
nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Sijenjang dengan Kelurahan Simpang III
Sipin, kecuali pada pita 3.
B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian sejenis di daerah endemis maupun non-endemis lain
di Kota Jambi untuk mendapatkan gambaran secara umum profil esterase non-
spesifik nyamuk Ae. aegypti sehubungan dengan efektifitas pengendalian
vektor penyakit DBD secara kimiawi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
2. Pada penelitian selanjutnya yang sejenis, sebaiknya menggunakan standar
enzim esterase sebagai pembanding kemurnian enzim pada pita yang terbentuk
pada zymogram populasi nyamuk perlakuan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
DAFTAR PUSTAKA
Amstrong, F.B., 1995, Buku Ajar Biokimia, ed. III, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 100
Anonim, 1993, Extoxnet: Extension Toxicology Network,
http://pmep.cce.cornell.edu/profiles/extoxnet/carbaryl_dicrotophos/cypermet-ext.html, diakses pada tanggal 18 April 2007
Anonim, 1999, Dengue Haemorragic Fever: Diagnosis, Treatment, Prevention,
and Control, Edisi II, diterjemahkan oleh Monica Ester, , Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 10-11, 15, 17-18, 20-21, 88
Anonim, 2002a, Dengue and Dengue Haemorrhagic Fever,
http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs117/en, diakses pada tanggal 9 April 2007
Anonim, 2002b, Fact Sheet on Dengue Fever and Dengue Haemorrhagic Fever,
http://www.who.int/mediacentre/factsheets, diakses pada tanggal 18 April 2007
Anonim, 2002c, A Color Photo Atlas Of Mosquitoes Of Southaestern, Departemen
Of Medical Entomology, Australia, http://www.arbovirus.health.nsw.gov.au/areas/arbovirus/mosquit/photos, diakses pada tanggal 28 Mei 2007
Anonim, 2004, Prevention and Control of Dengue and Dengue Haemorrhagic
Fever, No.29, WHO Genewa, 3-22, 59-72 Anonim, 2005a, CD Risk Assessment: DF, DHF and DSS in Indonesia, February
2005, http://www.who.int/diseasecontrol-emergencies/guidelines/Dengue-ind-risk%20assess.pdf, diakses pada tanggal 18 April 2007
Anonim, 2005b, DHF/DBD, http:/www.infeksi.com/artikel, diakses pada tanggal
18 April 2007 Anonim, 2005c, Demam Berdarah, http://www.pemkot-
malang.go.id/britaku/data/upimages/siklus-tular.gif, diakses pada tanggal 21 Januari 2007
Anonim, 2005d, Safety of Pyrethroids for Public Health Use,
http://whqlibdoc.who.int/hq/2005/WHO_CDS_WHOPES_GCDPP_2005.10.pdf, diakses pada tanggal 29 Mei 2007
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
Anonim, 2006a, Data Penyemprotan Insektisida Cynoff di Kota Jambi, Dinas Kesehatan Kota Jambi
Anonim, 2006b, Data Kasus Demam Berdarah Dengue Periode 2003-2005 di
Kota Jambi, Dinas Kesehatan Kota Jambi Anonim, 2006c, Elektroforesis, http://id.wikipedia.org/wiki/Elektroforesis, diakses
pada tanggal 9 Maret 2007 Anonim, 2006d, Elektroforesis Gel,
http://id.wikipedia.org/wiki/Elektroforesis_gel, diakses pada tanggal 9 Maret 2007
Anonim, 2007a, Biologi Molekuler, http://id.wikipedia.org/wiki/Biologi_molekular, diakses pada tanggal 9 Maret 2007
Anonim, 2007b, Elektroforesis gel poliakrilamid (PAGE), http://pkukmweb.ukm.my/~mamot/STKM2022/PAGE.htm, diakses pada tanggal 9 Maret 2007
Ansori, I., 2000, Elektroforesis Beberapa Enzim Anopheles maculatus di Sumatera Selatan, Majalah Kesehatan Sumatera Selatan, Th. 32, No. 3, 38
Dewi, A.A.I.A.G., 2006, Penentuan Status Resistensi Nyamuk Aedes aegypti yang
Berasal dari Wilayah Denpasar Timur (Bali) Terhadap Insektisida Organofosfat Secara Biokemis, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Dharmawan, R., 1993, Metoda Identifikasi Spesies Kembar Nyamuk Anopheles,
Sebelas Maret University Press, Surakarta Djunaedi, D., 2006, Demam Berdarah:Epidemiologi, Imunopatologi, Patogenesis,
Diagnosis, dan Penatalaksanaannya, UMM Press, Malang, 11-14, 18, 64, 82, 105-108
Ernaningsih, 1999, Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae) dari Daerah
Endemik Filariasis Bancrofti: Perbedaan Rasio Dorsal-Ventral Genital Jantan dan Analisis Isoenzim. Thesis. Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
Faisya, A.F., 1998, Deteksi Status Kerentanan Insektisida Organofosfat (Temefos)
Secara Biokemis pada Larva Nyamuk Aedes aegeypti di Kabupaten
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Kulon Progo, Thesis, Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta
Foye, W.O., 1981, Prinsip-Prinsip Kimia Medisinal, Jilid II ed. 2, Gadjah Mada
University Press, Yogyakarta, 1664, 1672 Gandahusada, S., Ilahude, H.D. dan Pribadi, 1998, Parasitologi Kedokteran, ed. 3,
Balai Penerbit FKUI, Jakarta, 236-255
Ganesh, K.N., vijayan, V.A., Urmila, J., Gopalan, N., and Prakash, S., 2002, Role of Ersterase and Monooxygenase in the Deltamethrin Resistance in Anopheles stephensi Giles (1908), at Mysore, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?Db=pubmed&Cmd=ShowDetailView&TermToSearch=12622206&ordinalpos=1&itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVAbstractPlus, diakses pada tanggal 7 Juni 2007
Gaspar, L., Kalasz, H., Kerese, I., Takacs, O., and Tyihak, E., 1984, Methods of Protein Analysis, Halsted Press, Hungaria, 100, 111
Grantham, R., 1999, Florida Medical Entomology Laboratory, University of Florida, [email protected], diakses pada tanggal 29 Juli 2007
Lee, H.L., Abimbola, O., and Singh, K.I., 1992, Determination of Insecticide Susceptibility in Culex Quinquefasciatus Say Adults by Rapid Enzyme Microassays, South East Asean Journal Trop. Med. Public Health, Vol. 23, No. 3, 458-463
Liu, N., Xu, Q., Zhu, F., and Zhang L., 2006, Pyrethroid Resistance in
Mosquitoes, http://www.blackwell-synergy.com/doi/abs/10.1111/j.1744-7917.2006.00078.x, diakses pada tanggal 8 Juni 2007
Mardihusodo, S.J., 1990, Panduan dan Buku Kerja Praktikum Parasitologi
Kedokteran II, Helmintologi Kedokteran dan Entomologi Kedokteran, Bagian Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, 77
Mardihusodo, S.J., 1995, Microplate Assays Analysis of Potensial for
Organophosphate Insecticide Resistance in Ae. aegypti in Yogyakarta Municipality, Indonesia, Berkala Ilmu Kedokteran, Vol. 27, No. 2:70-79
Mardihusodo, S.J., 1996, Application of Non Spesifik Esterase Enzyme
Microassays to Detect Potensial Insecticide Resistance of Ae. aegypti Adult in Yogyakarta, Indonesia, Berkala Ilmu Kedokteran, Vol. 28, No. 4:167-171
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Marvdashti, R., 1985, Location of Esterase loci in Aedes aegypti, J. Am. Mosq. Control Assoc. I (4): 423-424
McAbee, R.D., Kang, K.D., Stanich, M.A., Christiansen, J.A., Wheelock, C.E.,
Inman, A.D., et.al, 2003, Pyretroid Tolerance in Culex pipiens pipiens var molestus from Marin County, California, Pest Management Science, Vol. 60: 359-368
Mortimer, R., 1998, Aedes aegypti and Dengue fever, http://www.microscopy-uk.org.uk/mag/art98/aedrol.html, diakses pada tanggal 8 April 2007
Mourya, D. T., Hemingway, J., and Leake, C. J., 1993, Changes in Enzyme titres with age in four geographical strains of Aedes aegypti and their association with insecticides resistance, Med. and Vet. Entomol., 7: 11-16
Montgomery, R., Conway, T.W., Spector, A.A., 1992, Biokimia: Berorientasi
pada Kasus Klinik, ed. 5, jilid 1, Binarupa Aksara, Jakarta, 141 Mulyaningsih, B., 2002, Esterase Variation in Aedes albopictus Skuse (Diptera:
Culicidae) Population from Several DHF Endemic and Non Endemic Areas in Indonesia, Indonesia Journal Biotech, 584-589
Mulyaningsih, B., 2003, Deteksi Aktivitas Esterase pada Nyamuk Aedes aegypti di
Daerah Endemis Demam Berdarah Dengue di Yogyakarta, Gama Sains, Vol. V, No. 1, 36
Munif, A., 1997a, Pengaruh B.thuringiensis H-14 Formula Tepung Pada Berbagai
Instar Larva Aedes aegypti di Laboratorium, Cermin Dunia Kedokteran, No. 119, 27
Munif, A., 1997b, Pengaruh Residu Pyripropoxyfen 0,5% terhadap Pertumbuhan
Larva Aedes aegypti pada Berbagai Simulasi Wadah Air, Cermin Dunia Kedokteran, No. 119, 42
Overgaard, H.J., 2006, Malaria Mosquito Resistance to Agricultural Insecticides:
Risk Area Mapping in Thailand, http://www.iwmi.cgiar.org/pubs/pub103/rr103.pdf, diakses pada tanggal 9 Juni 2007
Poedjiadi, A., 1994, Dasar-dasar Biokimia, Penerbit Universitas Indonesia,
Jakarta, 142,152,155 Sastroutomo, 1992, Pestisida: Dasar-Dasar dan Dampak Penggunaannya,
Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, 95 Scharf, M.E., Hemingway, J., Reid, B.L, Small, G.J., and Bennet, G.,W.,
Toxicology and Biochemical Characterization of Insektiside Resistance
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
in a Field-Collected Strain of Blattella germanica (Dictyoptera: Balttellidae), Journal of Economic Entomology, Vol. 89, No. 2, 3
Shafer, T.J., Meyer, D.A., and Crofton, K.M., 2005, Developmental Neurotoxicity
of Pyrethroid Insecticides: Critical Review And Future Research Needs, Environmental Health Perspectives, Vol. 113, No. 2, 123
Soedarmono, S.S.P., 1988, Demam Berdarah (Dengue) pada Anak, Cetakan ke-2,
Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, 20-22, 26 Soedarto, 1989, Entomologi Kedokteran, , Penerbit Buku Kedokteran EGC,
Jakarta, 99-101 Sudarmono, S., 1991, Pestisida, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, 34, 92-94 Sungkar, S., 2005, Bionomik Aedes Aegypti, Vektor Demam Berdarah Dengue,
Majalah Kedokteran Indonesia, Vol. 55, No. 4, 384-389 Todd, G.D., Wohlers, D., and Citra, M., 2003, Toxicological Profile for Pyrethrins
and Pyrethroids, http://www.atsdr.cdc.gov/toxprofiles/tp155.pdf, diakses pada tanggal 7 Januari 2007
Untung, K., Pengantar Pengelolaan Hama Terpadu, cetakan ke 4, Fakultas
Pertanian UGM, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, 198-199
Ware, G.W., 1999, An Introduction to Insecticides 3rd Edition, http://ipmworld.umn.edu/chapters/ware.htm, diakses pada tanggal 20 Mei 2007
Widiarti, 2005, Uji Mikroplat Aktivitas Enzim Esterase Untuk Mendeteksi Resistensi Anopheles aconitus Terhadap Insektisida Organofosfat, Jurnal Kedokteran Yarsi, Vol. 13, No.1, 1-2
Wulandari, T., 2001, Vektor Demam Berdarah Dengue dan Penanggulangannya,
Mutiara Medika, Vol. I, No.I, 27-29
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Lampiran 4. Data Kasus Demam Berdarah Dengue di Kota Jambi Tahun 2003-2005
2003 2004 2005
No KECAMATAN/KELURAHAN P M P M P M TELANAIPURA 17 1 38 2 38 2
1 Telanaipura 2 1 7 - - - 2 Sp.IV Sipin 5 - 8 - 8 - 3 Pematang Sulur 2 - 1 - 6 - 4 Selamat 2 - 7 1 5 - 5 Legok 2 - 4 - 5 - 6 Solok Timur 1 - 5 1 5 2 7 Murni - - 3 - 1 - 8 Sungai Putri 2 - 2 - 1 - 9 Teluk Kenali - - - - - -
10 Buluran Kenali - - 1 - 2 - 11 Peny. Rendah 1 - - - 5 -
JAMBI TIMUR 13 2 21 0 45 2 1 Tanjung Pinang 2 1 4 - 5 - 2 Rajawali 1 - 4 - 3 - 3 Kasang - - - - 5 - 4 Kasang Jaya - - - - 1 - 5 Sijenjang - - - - - - 6 Budiman 3 - 2 - - - 7 Talang Banjar 2 1 6 - 11 1 8 Sulanjana - - - - 2 - 9 Payo Silincah 5 - 3 - 12 1
10 Tanjungsari - - 2 - 6 - JAMBI SELATAN 16 1 33 2 52 2
1 Tambaksari 1 - 2 - 11 - 2 Pakuan Baru 1 - 6 - 7 - 3 Wijayapura 1 - 2 - 5 - 4 talang Bakung 3 - 11 2 7 - 5 Ekajaya - - - - 2 - 6 Thehok 5 1 4 - 7 1 7 Pasir Putih 3 - 2 - 9 1 8 Pal Merah 2 - 5 - 1 - 9 Lingkar Selatan - - 1 - 3 -
DANAU TELUK 1 0 4 0 0 0 1 Olak Kemang 1 - 3 - - - 2 Tanjung Raden - - - - - - 3 Tanjung Pasir - - 1 - - - 4 Pasir Panjang - - - - - - 5 Ulu gedong - - - - - -
PELAYANGAN 0 0 0 0 5 1 1 Mudung Laut - - - - 2 - 2 Arab Melayu - - - - 1 -
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
3 Jelmu - - - - - - 4 Kp. Tengah - - - - - - 5 Tahtul Yaman - - - - 1 1 6 Tanjung Johor - - - - 1 -
PASAR JAMBI 3 0 5 0 10 0 1 Sungai Asam 2 - 1 - 4 - 2 OKH - - 1 - - - 3 Beringin 1 - 2 - 2 - 4 Pasar Jambi - - 1 - 4 -
JELUTUNG 21 0 20 0 17 1 1 Payo Lebar 4 - 5 - 3 - 2 Lebak Bandung 3 - 5 - 4 - 3 Cempaka Putih 1 - 2 - 3 1 4 Talang Jauh 2 - - - 1 - 5 Jelutung 3 - 4 - 3 - 6 Kebun Handil 8 - 3 - 1 - 7 Handil Jaya - - 1 - 2 -
KOTA BARU 30 2 42 0 73 2 1 Paal V - - 3 - 4 - 2 Sukakarya 1 - 1 - 4 - 3 Rawasari 2 - 5 - 4 - 4 Beliung 1 - 3 - 8 - 5 Sp. III Sipin 11 1 5 - 21 1 6 Mayang Mengurai 4 - 12 - 5 1 7 K. Asam Atas 1 - 5 - 4 - 8 K. Asam Bawah 5 - 1 - 8 - 9 Kenali Besar 5 1 6 - 12 -
10 Bagan Pete - - 1 - 3 - KOTA JAMBI 101 6 163 4 240 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Lampiran 5. Perhitungan Kecepatan Gerak (Jarak) Isoenzim Esterase Non-Spesifik Dalam Medan Listrik (Rf)
=RfesiselektroforrambatJarak
awaltitikdarietikelektroforpitaJarak
Jarak rambat elektroforesis = 5 cm Daerah endemik Pita 1. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 0,9 cm
=Rf cmcmcm 18,0
59,0
=
Pita 2. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 1,8 cm
=Rf cmcmcm 36,0
58,1
=
Pita. 3. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 4,7 cm
=Rf cmcmcm 94,0
57,4
=
Daerah non-endemik Pita 1. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 0,9 cm
=Rf cmcmcm 18,0
59,0
=
Pita 2. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 1,8 cm
=Rf cmcmcm 36,0
58,1
=
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
ontrolK Pita 1. Jarak pita elektroforetik dari titik awal = 1 cm
=Rf cm2,01=
ik dari titik awal = 1,8 cm
cmcm5
Pita 2. Jarak pita elektroforet
=Rf cm36,08,1=
ik dari titik awal = 4,8 cm
cmcm5
Pita 3. Jarak pita elektroforet
=Rf cmcm
96,05
=
cm8,4
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Lampiran 6. Perhitungan Analisis Data Frekuensi Elektromorf dengan Menggunakan Analisis Chi-Square (Perhitungan Tabel Kontingensi 2x2 (rxc) Untuk Pola Zymogram Elektroforetik Isoenzim Esterase)
2 Pita 3 pita Daerah non
endemis 10 (a) 0 (c)
Daerah endemis 0 (b) 10 (d) N = jumlah total sampel = 20 r = baris = 2 ; c = kolom = 2 Derajat bebas = (r-1)(c-1) = (2-1)(2-1) = 1 Taraf kepercayaan = α = 0,05
))()()(()( 2
2
dbcadcbacbadNhitungX
++++−
=
)100)(010)(100)(010()0.010.10(20 2
2
++++−
=hitungX
)10)(10)(10)(10()0100(20 2
2 −=hitungX
20)10000(
)10000(202 ==hitungX
X2 tabel = 3,841
X2 hitung > X2 tabel ( ) 05,0α
H0 = tidak terdapat hubungan perbedaan jumlah pita dengan perbedaan
elektromorf H1 = terdapat hubungan perbedaan jumlah pita dengan perbedaan elektromorf H0 diterima jika X2 hitung < X2 tabel Kesimpulan = H0 ditolak, terdapat perbedaan frekuensi elektromorf antara daerah
endemis dan daerah non endemis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
Lampiran 7. Foto alat-alat penelitian
Foto 1. sangkar nyamuk
Foto 2. alat elektroforesis
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
Foto 3. cetakan elektroforesis gel akrilamida
Foto 4. (a) gelas ukur, (b) syringe, (c) sisir plastik
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Foto 5. (d) tabung ependof, (e) pellet pestle
Foto 6. (f) tempat inkubasi, (g) pisau pemisah gel
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
BIOGRAFI PENULIS
Victoria Hapsari, lahir di Jambi pada tanggal 28 Juli 1984.
Penulis merupakan anak kedua dari empat bersaudara
pasangan Fx. Abu Wuryanto dan Mg. Rita Iriyanti. Penulis
telah menempuh pendidikan di TK Xaverius II Jambi, SD
Xaverius II Jambi, SMP Xaverius II Jambi, SMUK Sang
Timur Yogyakarta, dan melanjutkan di Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Semasa kuliah
penulis pernah menjadi Kobid. Penelitian dan
Pengembangan BPMF tahun 2003-2004, sie. Penelitian
dan Pengembangan BEMF tahun 2004-2005, Pendamping
Kelompok Insadha 2004, dan panitia pelaksana acara
PIMFI 2005 sebagai sekretaris. Penulis juga pernah terlibat
menjadi Manajer UKF Olahraga Sepak Bola tahun 2003-
2005.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI